临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2015, 35(10) http://www.lcbl.net 1821 doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.10.023 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.10.023 徐医附院 2014 年血培养病原菌分布和耐药性 张微 1, 姜飞 2, 康海全 2, 徐银海 2, 方先勇 2, 马萍 1,2 1,2, 顾兵 (1. 徐州医学院医学技术学院, 江苏徐州 2210042;2. 徐州医学院附属医院检验科, 江苏徐州 221002) [ 摘要 ] 目的 : 监测徐州医学院附属医院 2014 年血培养阳性病原菌的耐药性, 指导临床合理用药 方法 : 收集徐州医学院附属医院 2014 年 348 份血培养阳性病原菌 ; 细菌鉴定采用 Application Programming Interface (API) 系统, 细菌药物敏感性测定采用纸片扩散法,WHONET5.6 软件进行数据分析 结果 : 血培养阳性标本中, 革兰阳性球菌占 48.9%, 主要为金黄色葡萄球菌 (50.0%), 革兰阴性杆菌占 40.0%, 主要为大肠埃希菌 (51.8%) 血培养送检科室多来自于重症监护病房(25.6%) Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) 的检出率为 54.8% 未发现耐万古霉素的菌株 对大肠埃希菌敏感率较高的有亚胺培南和美洛培南, 都为 100.0% 结论: 我院血流感染病原菌种类复杂, 建立健全细菌耐药性监测体制对了解细菌耐药性变迁, 指导临床合理用药有重要意义 [ 关键词 ] 血培养 ; 病原菌 ; 耐药性 Blood culture pathogens distribution and drug resistance from affiliated hospital of Xuzhou medical college in 2014 ZHANG Wei 1, JIANG Fei 2, KANG Haiquan 2, XU Yinhai 2, FANG Xianyong 2, MA Ping 1,2, GU Bing 1,2 (1. Department of Medical Technology, Xuzhou Medical College, Xuzhou Jiangsu 221004; 2. Department of Clinical Laboratory, Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou Jiangsu 221002, China) Abstract Objective: To monitor the drug resistance of blood culture positive pathogenic bacteria from Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College in 2014 and to guide clinical medication more reasonable. Methods: A total of 348 samples of blood culture positive pathogenic bacteria were collected from Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College in 2014. Bacterial identification was performed by Application Programming Interface (API) system. Drug sensitivity was detected by disc diffusion method. WHONET5.6 software was used for data analysis. Results: The blood culture positive specimens, Gram-positive cocci was 48.9%, mainly for Staphylococcus aureus (50.0%), and Gram negative bacilli was 40.0%, mainly for Escherichia coli (51.8%). Blood culture inspection department mainly from the intensive care unit was 25.6%. The detection rate of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) was 54.8%. No vancomycin resistant strain was found. With high sensitivity to Escherichia coli are 收稿日期 (Date of reception):2015 08 11 通信作者 (Corresponding author): 顾兵,Email: gb20031129@163.com; 马萍,Email: pingm62@aliyun.com 基金项目 (Foundation item): 国家自然科学基金 (81471994); 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划重点项目 (201510313009Z) This work was supported by National Natural Science Foundation of China (81471994) and Colleges and Universities in Jiangsu Province College Students' Innovative Entrepreneurial Training Plan Key Project (201510313009Z), P. R. China.
1822 临床与病理杂志, 2015, 35(10) http://www.lcbl.net Keywords imipenem and meropenem, and it is 100.0%. Conclusion: The hospital s bloodstream infection pathogenic bacteria species is complex, and establishing and perfecting the bacterial drug resistance surveillance system has important significance to understand of bacterial resistance to change, guide clinical rational and standardized medication. blood culture; pathogens; drug susceptibility 随着抗菌药物的大量使用, 细菌的耐药性呈不断上升趋势, 多重耐药越来越严重 [1] 血培养是目前临床微生物检验领域用以诊断细菌性血流感染的 金标准, 具有重要临床意义 了解临床血培养中分离株的菌种构成院及耐药性变迁, 对于指导临床及时合理的抗菌治疗, 制定经验治疗方法等有较大的参考意义 [2] 国内已有很多类似的报道, 但是由于地域的差异, 每个地区的结果也不相同, 本研究分析了徐州医学院附属医院 2014 年血培养阳性病原菌的耐药性, 以指导徐州地区临床医生及时合理使用抗菌药物, 并且能够让其他地区的医生进行比较, 促进中国医学事业的发展 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株来源徐州医学院附属医院临床送检的血培养标本, 去除同一病例中同一部位所获重复菌株 1.1.2 仪器 Phoenix-100 全自动细菌鉴定药敏系统 ( 美国 BD 公司 ) 血培养仪 1.2 方法 1.2.1 标本的采集及培养按临床微生物血培养操作规范进行标本的采集与培养 [3] 1.2.2 细菌鉴定细菌分离培养按 全国临床检验操作规程 ( 第 3 版 ) 进行, 细菌鉴定采用 Phoenix-100 全自动细菌鉴定药敏系统 API 系统进行细菌鉴定 质控菌株为大肠埃菌 American Tissue Culture Collection (ATCC)25922 铜绿假单胞菌 ATCC27853 金黄色葡萄球菌 ATCC25923 1.2.3 药物敏感试验药物敏感试验采用 Phoenix-100 全自动细菌鉴定药敏系统测定 MIC 值 1.3 统计学处理 药敏结果统计分析采用 WHONET5.6 软件进行 2 结果 2.1 菌株分布 348 株病原菌中革兰阳性球菌 170 株占 48.9%, 以金黄色葡萄球菌 溶血葡萄球菌为主 ; 革兰阴性 杆菌 139 株, 占 40.0%, 以大肠埃希菌 肺炎克雷伯 菌 鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌为主, 见表 1 表 1 徐医附院 2014 年血培养病原菌分布 (n=348) Table 1 Blood culture pathogens distribution of Xuzhou Medical College in 2014 (n=348) 细菌 菌株数量 / 株 菌株百分比 (%) 革兰阳性球菌 170 48.9 金黄色葡萄球菌 85 50.0 溶血葡萄球菌 38 22.4 腐生葡萄球菌 7 4.1 鸟肠球菌 5 2.9 屎肠球菌 5 2.9 耳葡萄球菌 2 1.2 缓症链球菌 2 1.2 肺炎链球菌 2 1.2 其他革兰阳性球菌 24 14.1 革兰阴性杆菌 139 40.0 大肠埃希菌 72 51.8 肺炎克雷伯菌 30 21.6 鲍曼不动杆菌 13 9.4 变形菌属 5 3.6 阴沟肠杆菌 3 2.2 铜绿假单胞菌 3 2.2 温和气单胞菌 2 1.4 人苍白杆菌 2 1.4 奇异变形杆菌 2 1.4 产碱假单胞菌 2 1.4 其他革兰阴性杆菌 5 3.6 其他 39 11.2
徐医附院 2014 年血培养病原菌分布和耐药性张微, 等 1823 2.2 菌株来源分布 2014 年我院血液感染多见于重症监护病房 (25.6%) 急诊 Intensive Care Unit (ICU) (17.0%) 血液内科 (10.9%) 及感染病科 (5.7%), 其中重症监护病房所占比例为 (25.6%), 为主要的血液感染科室, 见表 2 表 2 2014 年血培养分离菌的科室分布 (n=348) Table 2 Distribution department of blood culture isolated bacteria in 2014 (n=348) 科室菌株数量 / 株菌株百分比 (%) 重症监护病房 89 25.6 急诊 ICU 59 17.0 血液内科 38 10.9 感染病科 20 5.7 风湿免疫科 19 5.5 呼吸内科 13 3.7 新生儿科 13 3.7 神经内科 12 3.4 肾脏内科 11 3.2 骨髓移植科 10 2.9 其他 64 18.4 2.3 血培养病原菌的药物敏感性 2.3.1 肠杆菌科的药物敏感性肠杆菌科中最主要的为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率最高, 为 97.2%, 其次为哌拉西林 莫西沙星 头孢噻肟, 分别为 94.4% 88.9% 83.3% 对碳青霉烯类抗菌药物 ( 亚胺培南 美罗培南 ) 的敏感率仍较高, 都为 100.0% 对肺炎克雷伯菌耐药率较高的有氨苄西林 哌拉西林 替卡西林 / 克拉维酸 头孢呋辛和莫西沙星, 都为 100.0% 对肺炎克雷伯菌敏感率最高的为阿米卡星, 为 90.0%, 其次为亚胺培南, 敏感率为 60.0% 药敏结果见表 3 2.3.2 葡萄球菌属的药物敏感性葡萄球菌属中最主要的是金黄色葡萄球菌 (85 株 ), 溶血葡萄球菌次之 (11 株 ) 金黄色葡萄球菌对青霉素 红霉素 阿奇霉素 氨苄西林和阿莫西林 / 克拉维酸的耐药率较高, 分别为 92.9% 89.4% 83.3% 67.7% 65.6% 金黄色葡萄球菌 对苯唑西林的耐药率为 54.8%, 即 MRSA 的检出率 为 54.8% 对金黄色葡萄球菌敏感率较高的有呋喃 妥因 (100.0%) 万古霉素(100.0%) 未发现耐万 古霉素的菌株 溶血葡萄球菌对氨苄西林 青霉 素 苯唑西林 庆大霉素和红霉素的耐药率分别 为 90.0% 89.5% 81.1% 77.3% 76.3% 对溶血 葡萄球菌敏感率较高的有哌拉西林 / 他唑巴坦头孢 唑啉亚胺培南美洛培南阿米卡星万古霉素, 都为 100.0% 其耐药率与敏感率见表 4 表 3 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌药敏结果 Table 3 The drug susceptibility results of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 抗生素 (n=72) (n=30) R% S% R% S% 氨苄西林 97.2 2.8 100.0 0.0 哌拉西林 94.4 5.6 100.0 0.0 莫西沙星 88.9 0.0 100.0 0.0 头孢噻肟 83.3 16.7 75.0 25.0 头孢唑啉 80.6 13.9 60.0 20.0 头孢曲松 76.4 16.4 69.2 26.9 环丙沙星 75.0 25.0 70.0 30.0 复方新诺明 75.0 25.0 66.7 33.3 左旋氧氟沙星 66.7 25.0 70.0 30.0 四环素 62.5 25.0 50.0 50.0 庆大霉素 59.4 40.6 45.8 45.8 氯霉素 55.0 40.0 90.0 10.0 妥布霉素 37.3 35.3 40.0 60.0 氨苄西林 / 舒巴坦 36.4 22.7 90.0 10.0 头孢吡肟 34.7 61.1 50.0 40.0 氨曲南 31.9 40.6 50.0 37.5 呋喃妥因 19.6 66.7 65.0 0.0 头孢他啶 18.2 54.5 90.0 10.0 头孢西丁 13.0 74.1 50.0 42.3 阿莫西林 / 克拉维酸 10.3 63.2 41.7 41.7 阿米卡星 6.9 93.1 6.7 90.0 多粘菌素 5.6 94.4 0.0 100.0 哌拉西林 / 他唑巴坦 4.2 91.7 60.0 40.0 亚胺培南 0.0 100.0 20.0 60.0 美洛培南 0.0 100.0 50.0 50.0 R, 耐药率 ;S, 敏感率
1824 临床与病理杂志, 2015, 35(10) http://www.lcbl.net 表 4 金黄色葡萄球菌和溶血葡萄球菌药敏结果 Table 4 The drug susceptibility results of Staphylococcus aureus and Staphylococcus haemolyticus 抗生素 3 讨论 近年来, 由于广谱抗菌药物的广泛使用和全 自动血培养仪等先进设备的应用, 血培养阳性率 呈上升趋势 [4] 血流感染的病原菌种类和抗生素敏 感性均已发生明显变化, 条件致病菌和多重耐药 菌所占比重逐渐上升, 给临床治疗带来困难, 威 胁患者生命 [5] 本研究表明, 我院血流感染革兰阳 性球菌占 48.9%, 革兰阴性杆菌占 40.0%, 革兰阳 性球菌略高于革兰阴性杆菌 这与国内其他报道 [6] 等的研究结果存在一定的差异, 他们的研究革 兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的相差比较大, 他们 的研究革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的相差比较 大, 这可能与地域差异相关 所有阳性标本中, 革兰阴性杆菌占 40.0%, 肠杆菌科细菌中大肠埃希 菌分离率最高, 与 2010 年刘春峰等人的细菌耐药 监测结果相当 [7] 金黄色葡萄球 菌 (n=85) 溶血葡萄球菌 (n=38) R% S% R% S% 青霉素 92.9 7.1 89.5 10.5 红霉素 89.4 9.4 76.3 18.4 阿奇霉素 83.3 13.3 75.0 25.0 氨苄西林 67.7 0.0 90.0 0.0 阿莫西林 / 克拉 维酸 65.6 34.4 78.6 21.4 环丙沙星 64.3 33.9 73.1 26.9 复方新诺明 56.6 43.4 54.1 45.9 苯唑西林 54.8 45.2 81.1 18.9 妥布霉素 54.8 41.9 20.0 30.0 左旋氧氟沙星 53.7 40.7 57.1 35.7 头孢西丁 45.8 52.5 69.2 26.9 庆大霉素 43.6 43.6 77.3 18.2 莫西沙星 38.9 42.6 57.1 32.1 四环素 34.1 64.7 13.2 81.6 阿米卡星 33.3 66.7 0.0 100.0 利福平 10.6 87.1 52.6 47.4 氯霉素 3.6 96.4 8.3 91.7 替考拉宁 3.4 96.6 0.0 96.0 呋喃妥因 0.0 100.0 4.5 95.5 万古霉素 0.0 100.0 0.0 100.0 R, 耐药率 ;S, 敏感率 2014 年我院血液感染多见于重症监护病房 急诊 ICU 血液内科及感染病科, 其中重症监护病 房所占比例为 25.6%, 为主要的血液感染科室, 在 重症监护病房里的病人病情危重, 因此侵袭性操 作较多, 免疫力低下, 较容易被感染 这与国内 的一个研究有一定的差异 [6], 血液感染多见于血液 科, 占了 16.4%, 重症监护病房次之, 占 15.8% 这 可能和地域差异有关 肠杆菌科细菌主要为大肠埃希菌和肺炎克雷 伯菌 大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率最高, 为 97.2% 对大肠埃希菌敏感率较高的有亚胺培南和 美洛培南, 都为 100.0% 对肺炎克雷伯菌耐药率 较高的有氨苄西林, 为 100.0% 对肺炎克雷伯菌 敏感率最高的为阿米卡星, 为 90.0%, 其次为亚胺 培南, 敏感率为 60.0% 国外报道随着近年来的大 量使用抗生素, 耐药菌株正逐年增加, 对碳青霉 烯类抗菌药物 ( 亚胺培南 美罗培南 ) 的耐药率比往 年较高, 但肠杆菌科细菌仍对碳青霉烯类抗菌药 物最为敏感, 目前已出现耐亚胺培南和美罗培南 的大肠埃希菌, 此次研究中我们虽没有发现亚胺 培南和美罗培南的大肠埃希菌耐药株 [8], 但已出现 对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌, 国内外也有相关 报道 [8-10], 应引起重视 此外, 大肠埃希菌耐左旋 氧氟沙星较明显, 其耐药率达到 66.7%, 有报导大 肠埃希菌耐药率达到 63.0%, 与文献报道一致 [11] 在此看来, 在选用喹诺酮类药物时, 需根据药敏 结果, 以防治疗失败 非发酵菌中, 以鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞 菌为主 鲍曼不动杆菌对多粘菌素 阿米卡星 庆 大霉素的敏感率分别为 100.0% 62.5% 38.5%, 对 氨曲南 氨苄西林和头孢吡肟的敏感率均 <20.0% 铜绿假单胞菌对氨苄西林等的耐药率较高, 都为 100.0%, 对亚胺培南等的敏感率最高, 为 100.0%, 其次为阿米卡星等, 敏感率为 66.7%; 对其他抗菌 [12] 药物的敏感率均很低 而国内有一些报导表明 铜绿假单胞菌对氨曲南和头孢哌酮 / 舒巴坦的耐 药率较低, 与我们有一定的差异, 可能是由于各 个地区用的药不一样 临床医生在治疗铜绿假单 胞菌时, 应根据药敏试验采用有效抗菌药物联合 治疗, 防止耐药菌的出现 [13] 由于非发酵菌感 染呈逐年上升趋势, 增加了临床抗感染治疗的难 度, 因此临床在治疗非发酵菌感染时应根据实验 室的药敏结果合理用药, 避免滥用抗菌药物, 防 止多重耐药菌株的出现 [14] 肠球菌亦是医院感染 常见细菌之一, 对多种抗菌药物天然耐药 本次 监测发现, 肠球菌对氨苄西林的耐药率为 40.0%
徐医附院 2014 年血培养病原菌分布和耐药性张微, 等 1825 肠球菌对万古霉素和替考拉宁均有中介, 但未发现耐药株, 临床应引起重视, 避免耐药株的产生 分离出的葡萄球菌对多种抗菌药物耐药率较高, 其中耐药率最高的是青霉素 ( β 内酰胺类药物 ) 对 MRSA 敏感率较高的有万古霉素 (100.0%) 呋喃妥因 (97.4%) 和替考拉宁 (94.4%) 金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为 54.8%, 即 MRSA 的检出率为 54.8% 对金黄色葡萄球菌敏感率较高的有呋喃妥因 (100.0%) 万古霉素(100.0%), 未发现耐万古霉素的菌株, 与国内外报导一致 [15] 万古霉素和替考拉宁可作为治疗 MRSA 的首选药物, 但因万古霉素具有较强的耳毒性和肾毒性, 应在其他抗菌药物治疗无效时使用, 为最后一线抗菌药物, 所以临床需谨慎使用 溶血葡萄球菌对苯唑西林的敏感率明显低于金黄色葡萄球菌, 仅为 18.9% 葡萄球菌无哌拉西林/ 他唑巴坦 头孢唑啉 亚胺培南和美洛培南的耐药株, 对万古霉素的耐药率为 0.0% 只有严格避免抗菌药物滥用, 才能延缓耐药性的发生 2014 年本院病原菌监测结果表明, 细菌耐药形势较为严峻, 应提高警惕, 注意抗菌药物的合理使用, 加强药物的监督和管理 ; 有效控制院内感染情况, 减少耐药株在院内传播 ; 要鉴别致病菌和污染菌, 必须规范血培养的送检 [7] 加强检验科微生物室与各临床科室的沟通与交流, 让临床医生了解细菌耐药性监测的重要性, 并根据最新耐药监测数据, 指导临床合理使用抗感染药物 参考文献 1. Jean SS, Hsueh PR, Lee WS, et al. Nationwide surveillance of antimicrobial resistance among non-fermentativegram-negative bacteria in Intensive Care Units in Taiwan: SMART programme data 2005[ J]. Int J AntimicrobAgents, 2009, 33(3): 266-271. 2. 陈民钧. 抗菌药耐药性监测的前景 [ J]. 中华检验医学杂志, 2008, 6: 605-609. CHEN Minjun. The prospects of antibacterial drug resistance monitoring[ J]. The Chinese Medical Journal, 2008, 6: 605-609. 3. 童明庆. 临床微生物血培养操作规范 [ J]. 中华检验医学杂志, 2004, 27(1): 124-126. TONG Mingqing. The operation regulation of clinical microbiology blood cultures[ J]. Journal of the Chinese Medical Journal, 2004, 27(1): 124-126. 4. JIANG Zhiming, XIE Jian. Surveillance of drug resistance of pathogens isolated from ICU of three A hospitals of Shandong Province 2011[ J]. Chin J Nosocomiol, 2013, 23(7): 228-231. 5. Krcmery V Jr, Sykora P, Trupl J, et al. Antibiotic use anddevelopment of resistance in blood culture isolate: 8 yearsof experience from a cancer referral center[ J]. J Chemother, 2001, 13(2): 133-142. 6. 顾兵, 潘世扬, 魏雪菲, 等. 南京地区 2004-2007 年血培养病原菌分布和耐药性变迁 [ J]. 中华检验医学杂志, 2009, 32(8): 889-894. GU Bing, PAN Shiyang, WEI Xuefei, et al. Nanjing area blood culture from 2004 to 2007 pathogenic bacteria distribution and drug resistance change[ J]. Journal of the Chinese Medical Journal, 2009, 32(8): 889-894. 7. 刘春峰, 赵辉. 医院感染病原菌分布及药物敏感性监测 [ J]. 中华医院感染学杂志, 2011, 21(24): 5280-5281. LIU Chunfeng, ZHAO Hui. Hospital infection pathogenic bacteria distribution and drug sensitivity monitoring[ J]. Chinese Journal of Hospital Infection, 2011, 21(24): 5280-5281. 8. Hindiyeh M, Smollen G, Grossman Z, et al. Rapid detection of blakpc carbapenemase genes by real-time PCR[ J]. J Clin Microbiol, 2008, 46(9): 2879-2883. 9. 王文晶, 黄茂, 赵旺盛, 等. 下呼吸道感染病原体流行和耐药现状分析 [ J]. 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2006, 26(1): 29-32. WANG Wenjing, HUANG Mao, ZHAO Wangsheng, et al. The lower respiratory tract infection pathogens prevalence and resistance analysis[ J]. Journal of Nanjing Medical University (from natural science edition), 2006, 26(1): 29-32. 10. 游贤慧, 田野, 于毅, 等. 下呼吸道肺炎克雷伯杆菌感染及耐药性分析 [ J]. 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2008, 28(3): 396-399. YOU Xianhui, TIAN Ye, YU Yi, et al. In the lower respiratory tract pneumonic klebsiella bacillus are dyed and resistance analysis[ J]. Journal of Nanjing Medical University (from natural science edition), 2008, 28(3): 396-399. 11. 张锦英, 梅亚宁, 赵旺胜. 1906 份血细菌培养结果分析 [ J]. 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2000, 20(5): 404-405. ZHANG Jinying, MEI yaning, ZHAO Wangsheng. Analysis of results from 1906 blood cultures[ J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2000, 20(5): 404-405. 12. 王勇, 高华, 金炎, 等. 血培养常见病原菌分布和耐药性分析 [ J]. 医学检验与临床, 2010, 21(5): 81-83. WANG Yong, GAO Hua, JIN Yan et al. Blood culture common pathogenic bacteria distribution and drug resistance analysis[ J]. Journal of Medical Test and Clinical, 2010, 21(5): 81-83. 13. 陈旭锋, 黄培培, 张劲松. 急诊重症监护病房医院感染病原菌分布及耐药性分析 [ J]. 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2008, 28(4): 518-521. CHEN Xufeng, HUANG Peipei, ZHANG Jinsong. Emergency ICU hospital infection pathogenic bacteria distribution and drug resistance
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