310 检验医学 2016 年 4 月第 31 卷第 4 期 laboratory Medicine,april 2016,Vol. 31,no. 4 and ampc-producing isolates were 0.00%,25.00% and 37.50%. Conclusions Mult

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1 309 文章编号 : (2016) 中图分类号 :r446.5 文献标志码 :a DOI : /j.issn 铜绿假单胞菌产 AmpC β- 内酰胺酶及外膜孔蛋白 OprD 2 基因缺失分析徐伟红 1, 徐斌 1, 姚怡婷 1, 黄明敏 1, 张骏 2 3, 赵虎 (1. 上海同仁医院, 上海 ;2. 复旦大学附属华山医院, 上海 ; 3. 复旦大学附属华东医院, 上海 ) 摘要 : 目的了解临床分离的铜绿假单胞菌中产 ampc β- 内酰胺酶 ( 简称 ampc 酶 ) 及外膜孔蛋白 OprD 2 基因缺失的情况方法采用三维试验检测 ampc 酶, 聚合酶链反应 (PCr) 检测外膜孔蛋白 OprD 2 基因和 ampc 酶结构基因 ampc, 进行统计学分析结果 63 株铜绿假单胞菌中 ampc 酶阳性 14 株 (22.22%); OprD 2 基因阳性 22 株 (OprD 2 基因缺失率 65.08%);ampC 基因阳性 62 株 (93.94%) 铜绿假单胞菌对氨苄西林氨苄西林 - 舒巴坦头孢替坦头孢曲松和头孢唑啉的耐药率达 % 产 ampc 酶的菌株对亚胺培南庆大霉素头孢吡肟的耐药率分别为 42.85% 64.29% 和 57.14%, 不产 ampc 酶的菌株分别为 30.61% 6.12% 和 14.29%, 二者对庆大霉素和头孢吡肟的耐药率差异均有统计学意义 (P<0.01), 对亚胺培南的耐药率差异无统计学意义 (P>0.05) 6 株 OprD 2 缺失合并产 ampc 酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南头孢他啶头孢吡肟的耐药率分别为 % 66.67% 和 55.56%,8 株 OprD 2 正常表达合并产 ampc 酶的菌株分别为 0.00% 25.00% 和 37.50%, 二者差异有统计学意义 (P<0.05) 结论铜绿假单胞菌多重耐药可能是由多种机制共同控制的, 应加强铜绿假单胞菌产酶的监测及耐药基因的分子流行病学研究关键词 : 铜绿假单胞菌 ;ampc β- 内酰胺酶 ;OprD 2 基因 ;ampc 基因 Analysis of AmpC beta-lactamase and outer membrane porin OprD 2 gene deletion in Pseudomonas aeruginosa XU Weihong 1,XU Bin 1,YAO Yiting 1,HUANG Mingmin 1,ZHANG Jun 2,ZHAO Hu 3.( 1.Shanghai Tongren Hospital,Shanghai ,China;2. Huashan Hospital,Fudan University,Shanghai ,China;3. Huadong Hospital,Fudan University,Shanghai ,China ) Abstract: Objective to understand ampc beta-lactamase(ampc)and outer membrane porin OprD 2 gene deletion in Pseudomonas aeruginosa. Methods the three-dimensional test was used to determine ampc. Polymerase chain reaction(pcr)was used to determine outer membrane porin OprD 2 gene and ampc gene. the data were analyzed statistically. Results the 63 isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected,of which 14 isolates(22.22%)produced ampc,oprd 2 gene was positive in 22 isolates(oprd 2 gene deletion rate 65.08%), and ampc gene was positive in 62 isolates(93.94%). the resistance rates to ampicillin,ampicillin / sulbactam, cefotetan and ceftriaxone and cefazolin were %. the resistance rates of ampc-producing isolates to imipenem, gentamicin and cefepime were 42.85%,64.29% and 57.14%,respectively. the resistance rates of non-ampcproducing isolates were 30.61%,6.12% and 14.29%,respectively. the resistance rates of Pseudomonas aeruginosa to gentamicin and cefepime had statistical significance between ampc-producing and non-ampc-producing isolates (P<0.01),but there was no statistical significance for imipenem(p>0.05). a total of 6 isolates of Pseudomonas aeruginosa had OprD 2 gene deletion,and the resistance rates to imipenem,ceftazidime and cefepime were %, 66.67% and 55.56%. the resistance rates of 8 isolates of Pseudomonas aeruginosa with normal OprD 2 gene expression 基金项目 : 上海市长宁区科委资助项目 (CnKW2014Z04) 作者简介 : 徐伟红, 女,1974 年生, 硕士, 副主任技师, 主要从事细菌耐药机制研究通讯作者 : 赵虎, 联系电话 :

2 310 检验医学 2016 年 4 月第 31 卷第 4 期 laboratory Medicine,april 2016,Vol. 31,no. 4 and ampc-producing isolates were 0.00%,25.00% and 37.50%. Conclusions Multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa might be caused by a variety of mechanisms. Enzyme production and molecular epidemiological studies for Pseudomonas aeruginosa should be strengthened. Key words:pseudomonas aeruginosa;ampc beta-lactamase;ampc gene;oprd 2 gene 铜绿假单胞菌是临床常见的条件致病菌之一, 可引起多种感染性疾病其耐药机制非常复杂近年来有研究证实抗菌药物可通过外膜的非特异性和特异性 2 种通道进入菌体 [1] 通道由外膜孔蛋白组成, 铜绿假单胞菌外膜因缺少这种经典的非特异性孔道蛋白而固有地对 β- 内酰胺酶类抗菌药物耐药 ; 同时铜绿假单胞菌能产生水解酶或通过外排泵机制抵抗抗菌药物如果细菌高产 ampc β- 内酰胺酶 ( 简称 ampc 酶 ) 并合并外膜孔通道缺失, 也可能对碳青霉烯类青霉素类和头孢菌素类药物均耐药为了解产 ampc 酶合并外膜孔通道缺失这种耐药机制在临床菌株中的发生情况, 本研究收集了临床分离的铜绿假单胞菌共 63 株, 对其进行了 15 种抗菌药物和 ampc 酶的检测, 同时运用聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,pcr) 对菌株进行外膜孔蛋白 OprD 2 基因 ampc 基因检测材料和方法一材料 1. 菌株来源收集上海同仁医院 2013 年 6 至 12 月临床标本分离出的铜绿假单胞菌共 63 株质控菌株为铜绿假单胞菌 (atcc 27853), 购自上海市临床检验中心 2. 仪器及试剂 VItEK-2 全自动微生物分析系统及其配套的鉴定板和 ast-gn13 药物敏感性板为法国生物梅里埃公司产品 ; 血平板和水解酪蛋白胨平板购自上海伊华生物公司 ;PCr 试剂 takara taqtm Hot start Version 购自宝生物工程 ( 大连 ) 有限公司 ;Dna Marker(100 bp ladder) 购自北京 tiangen 生物技术有限公司 ; PCr 引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成 Veriti 96-Well PCr 扩增仪为 abi 公司产品 ; 凝胶成像仪为 tanon 公司产品二方法 1. 抗菌药物最低抑菌浓度 (minimal inhibitory concentration,mic) 检测用 ast-gn13 药物敏感性板检测 63 株铜绿假单胞菌对 16 种抗菌药物的 MIC 药物敏感性结果按照 2012 年美国临床实验室标准化协会 (the Clinical and laboratory standards Institute,ClsI) 标准 2. ampc 酶的检测 [3] [2] 进行判断采用三维试验检测 ampc 酶 (1) 酶粗提取物的制备 : 取单个菌落置于 4 ml 水解酪蛋白胨培养液中,35 震荡培养 24 h 取 1 ml 放入无菌管中 880 g 离心 30 min, 吸去上清液, 将沉淀于 -80 和 35 反复冻融 5~6 次加入 0.01 mol/l 磷酸盐缓冲液 (ph 值 7.0), g 离心 20 min, 吸取上清液, 即为酶粗提取物将其接种于血平板上过夜培养, 应无菌生长,-20 保存 (2) 头孢西丁三维试验 : 取 0.5 麦氏单位标准菌株大肠埃希菌 (atcc 25922) 菌液均匀涂布于水解酪蛋白胨琼脂平皿, 将头孢西丁 30 µg 纸片置于平皿中心, 用无菌刀片在离纸片边缘 5 mm 处由里向外切割一道沟槽, 长约 15 mm, 宽约 1 mm, 将 30 ml 酶粗提取物由里向外加入沟槽内, 避免酶粗提取物溢出沟槽, 置水解酪蛋白胨琼脂平皿 36 过夜沟槽与抑菌圈交界处出现蚀环现象, 提示 ampc 酶试验阳性用标准菌株铜绿假单胞菌 (atcc 27853) 的酶粗提取物作为 ampc 酶阴性对照, 阴沟肠杆菌 029M 作为持续高产 ampc 酶阳性对照 3. 基因检测 (1) 模板制备 : 煮沸法从水解酪蛋白胨平板上挑取 3 ~ 4 个菌落置于 µ l % 的生理盐水中, 制成细菌悬液, 混匀 g 离心 5 m i n, 弃上清, 加 µ l 无菌双蒸水, 混匀细菌悬液 100 水浴,15 min 后离心,7 900 g 离心 2 min, 取上清液即为 Dna 模板 (2) 外膜孔蛋白 OprD 2 基因 ampc 基因检测 : 根据参考文献 [4-5] 设计,ampC 基因引物序列为上游 5 -GCCtGaaaGGaGaaCCGCattaCtt- CaG-3, 下游 5 -GatCtGtGCCtGGtCCttCt G C a C C G a G - 3, 扩增产物预期长度为

311 2 9 9 b p OprD 2 基因引物序列为上游 5 - GCGCatCtCCaaGaCCatG-3, 下游 5 - GCCaCCCGatttGaCGGaG-3, 扩增产物预期长度为 193 bp 取菌株基因组 Dna 1 µl 作为扩增的模板, 加入 PCr 反应体系 : 引物 0.2 µl ( 引物浓度 10 µmol/l),10 PCr buffer 1 µl,2.

3 b p OprD 2 基因引物序列为上游 5 - GCGCatCtCCaaGaCCatG-3, 下游 5 - GCCaCCCGatttGaCGGaG-3, 扩增产物预期长度为 193 bp 取菌株基因组 Dna 1 µl 作为扩增的模板, 加入 PCr 反应体系 : 引物 0.2 µl ( 引物浓度 10 µmol/l),10 PCr buffer 1 µl,2.5 mmol/l dntp 0.8 µl,taq 聚合酶 0.05 µl, 灭菌去离子水 6.95 µl, 反应总体积为 10 µl PCr 反应条件 :94 预变性 1 min;94 30 s,65 30 s,72 18 s,35 个循环 ;72 延伸 4 min 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后, 在凝胶成像系统中进行成像分析三统计学方法采用 spss 17.0 软件进行统计分析, 率的比较用 χ 2 检验, 以 P<0.05 为差异有统计学意义结果一 ampc 酶的检测 63 株铜绿假单胞菌中检出产 ampc 酶菌株 14 株, 产酶率为 22.22% 二耐药相关基因扩增 63 株铜绿假单胞菌中共检出 ampc 基因阳性 62 株, 检出率为 93.94% OprD 2 基因阳性 22 株,OprD 2 基因的缺失率为 65.08% 琼脂糖凝胶电泳结果见图 1 M M (bp) (bp) (a) (b) 注 :M 为 Dna 相对分子质量标准 ;(a)11~22 为 ampc 基因阳性菌株 ;(b)39~43 45 为 OprD 2 基因阳性菌株 ;44 46 为阴性菌株 ;47 为阴性对照图 1 铜绿假单胞菌 ampc 基因和 OprD 2 基因扩增产物琼脂糖凝胶电泳三基因序列分析随机选取 ampc 基因阳性菌株 2 株 ( 菌株号 :13 27),OprD 2 基因阳性菌株 2 株 ( 菌株号 : 28 45),PCr 扩增产物委托上海生工生物技术有限公司进行序列测定, 测得的序列与 GenBank 中参比基因序列的同源性均为 100% 四对抗菌药物的耐药性分析 1. 产 ampc 酶和不产 ampc 酶菌株对 16 种抗菌药物的耐药性比较产 ampc 酶的菌株及不产 ampc 酶的菌株对氨苄西林氨苄西林 - 舒巴坦头孢替坦头孢曲松头孢唑啉的耐药率均达 % 产 ampc 酶的菌株对亚胺培南的耐药率为 42.85%, 对庆大霉素和头孢吡肟的耐药率分别为 64.29% 和 57.14%, 而不产 ampc 酶菌株对亚胺培南的耐药率为 30.61%, 对庆大霉素和头孢吡肟的耐药率分别为 6.12% 和 14.29% 产 ampc 酶的菌株对庆大霉素头孢吡肟的耐药性明显增高 (χ 2 = ,P<0.01) 二者对亚胺培南的耐药性差异无统计学意义 (χ 2 =0.48,P>0.05) 见表 1 表 1 产 AmpC 酶和不产 AmpC 酶菌株对 16 种抗菌药物的耐药性比较 [ 株 (%)] 抗菌药物产 ampc 酶菌不产 ampc 酶菌株 (14 株 ) 株 (49 株 ) 氨苄西林 14(100.00) 49(100.00) 氨苄西林 - 舒巴坦 14(100.00) 49(100.00) 阿米卡星 3(21.42) 8(16.33) 环丙沙星 3(21.42) 5(14.29) 头孢替坦 14(100.00) 49(100.00) 头孢曲松 14(100.00) 49(100.00) 头孢唑啉 14(100.00) 49(100.00) 头孢吡肟 8(57.14) 7(14.29) 呋喃妥因 13(92.86) 49(100.00) 庆大霉素 9(64.29) 3(6.12) 亚胺培南 6(42.85) 15(30.61) 左氧氟沙星 5(35.71) 12( 24.48) 复方磺胺甲噁唑 14(100.00) 49(100.00) 头孢他啶 6(42.85) 21(42.86) 妥布霉素 1(7.14) 0(0.00) 哌拉西林 - 他唑巴坦 3(21.42) 9(18.37)

4 312 检验医学 2016 年 4 月第 31 卷第 4 期 laboratory Medicine,april 2016,Vol. 31,no 产 ampc 酶及 OprD 2 缺失对 4 种 β- 内酰胺类抗菌药物的耐药性比较 6 株 OprD 2 缺失合并产 ampc 酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南头孢他啶头孢吡肟的耐药率分别为 % 66.67% 和 55.56%,8 株 OprD 2 正常表达合并产 ampc 酶的菌株分别为 0.00% 25.00% 和 37.50%, 二者比较差异有统计学意义 (P<0.05) OprD 2 缺失的菌株中, 产 ampc 酶菌和不产 ampc 酶菌对头孢吡肟亚胺培南头孢他啶和哌拉西林 - 他唑巴坦的耐药率差异有统计学意义 (P<0.05) OprD 2 正常表达的菌株中, 产 ampc 酶和不产 ampc 酶菌株对头孢吡肟和亚胺培南的耐药率差异有统计学意义 (P<0.05) 见表 2 对亚胺培南敏感的 42 株菌株中有 18 株正常表达 OprD 2, 而对其耐药的 21 株菌株中有 17 株 OprD 2 缺失耐药组 OprD 2 表达与敏感组比较, 差异有统计学意义 (χ 2 =4.40,P<0.05) 表 2 产 AmpC 酶及 OprD 2 缺失铜绿假单胞菌对 4 种 β- 内酰胺类抗菌药物的耐药性比较 [%( 株 / 株 )] 组别株数耐药性头孢他啶头孢吡肟亚胺培南哌拉西林 - 他唑巴坦 OprD 2 缺失合并产 ampc 酶菌 (4/6) 55.56(5/6) (6/6) 33.33(2/6) OprD 2 缺失合并不产 ampc 酶菌 (14/35) * 14.29(5/35) * 31.43(11/35) * 14.29(5/35) * OprD 2 正常表达合并产 ampc 酶菌 (2/8) * 37.50(3/8) * 0.00(0/8) * 12.50(1/8) * OprD 2 正常表达合并不产 ampc 酶菌 (7/14) 14.29(2/14) # 11.43(4/14) # 28.57(4/14) 注 : 与 OprD 2 缺失合并产 ampc 酶菌比较,* P<0.05; 与 OprD 2 正常表达合并产 ampc 酶菌比较,# P<0.05 讨论铜绿假单胞菌是临床上最常见的医院感染病原菌之一, 广泛存在于自然界中, 常常引起免疫力低下人群的感染目前临床分离率不断增加, 而抗菌药物的滥用也导致其耐药性日趋严重 ampc 酶又称头孢菌素酶, 可以水解青霉素类和头孢菌素类抗菌药物, 其中持续高产 ampc 酶是铜绿假单胞菌产生耐药的主要机制 ampc 酶由 ampc 基因编码, 并受 ampr ampd ampe 和 ampg 4 种基因调控 ampc 为结构基因, 是细菌表现形态和功能特征所必需的 ampr 和 ampd 编码产生的 ampr 和 ampd 蛋白可直接影响 ampc 酶的表达水平, 从而导致菌株对 β- 内酰胺类抗菌药物产生不同程度的耐药 ampe 基因可能在 ampc 酶的高表达中起间接作用 ampg 基因编码膜结合转运蛋白, 其表达缺失可导致诱导物无法进入胞浆发挥诱导产酶作用 [6] 头孢西丁筛选试验检测的是持续高产 ampc 酶, 与细菌耐药性紧密相关 63 株铜绿假单胞菌经头孢西丁筛选试验检出 14 株产 ampc 酶, 阳性率为 22.22% 这 14 株菌株就可能存在 ampr 和 ampd 基因的突变, 从而引起 ampc 基因调控去阻遏, 即而形成高产 ampc 酶的突变株本研究中铜绿假单胞菌 ampc 基因阳性率为 93.94%, 表明多数临床分离的铜绿假单胞菌携带 ampc 基因而 ampc 酶具有很强的可诱导性, 酶的表达水平和诱导剂的强弱有关, 多种 β- 内酰胺类抗菌药物, 如亚胺培南头孢他啶哌拉西林和氨曲南等都是有重要临床意义的诱导剂, 其中亚胺培南诱导产酶的能力明显强于其他药物上述抗菌药物的存在可诱导 ampc 基因及其调节基因突变, 且随着敏感株的清除, 选择出调节基因的稳定突变,ampC 基因调控去阻遏, 从而形成持续高产 ampc 酶的突变株 [7] 临床在对铜绿假单胞菌患者经验用药时需慎重, 防止筛选出多重耐药的高产 ampc 酶的菌株因此在用药前进行感染菌株的 ampc 基因及产 ampc 酶的检测有重要意义铜绿假单胞菌对大多数抗菌药物皆有耐药性, 对氨苄西林氨苄西林 - 舒巴坦头孢替坦头孢曲松和头孢唑啉耐药率达到 % 产 ampc 酶的菌株对亚胺培南庆大霉素和头孢吡肟的耐药率分别为 42.85% 64.29% 和 51.74%, 而不产 ampc 酶菌株对亚胺培南庆大霉素和头孢吡肟的耐药率分别为 30.61% 6.12% 和 14.29%, 产 ampc 酶菌株与不产 ampc 酶菌株对亚胺培南的耐药率未见明显差异, 但对庆大霉素头孢吡肟的耐药率产 ampc 酶菌株远远高于不产 ampc 酶菌株铜绿假单胞菌的耐药性应

5 313 引起临床的高度关注铜绿假单胞菌除了通过产生 β- 内酰酶对抗菌药物耐药外, 其外膜通透性的异常在抗菌药物耐药中也起着重要作用铜绿假单胞菌外膜缺乏多数革兰阴性菌的高通透性孔蛋白, 仅存在着低效率微孔蛋白 C(oprC) D 2 (oprd 2 ) 和 E 1 (opre 1 ) 形成的小孔道 oprd 2 蛋白是目前所知的铜绿假单胞菌外膜中唯一对抗菌药物通透有意义的孔道蛋白 [8-9] 一般认为 oprd 2 是亚胺培南等碳青霉烯类抗菌药物 ( 美罗培南除外 ) 进入铜绿假单胞菌的主要特异性通道, 当缺失时可导致对亚胺培南耐药而美罗培南敏感 [10-11] 本研究对亚胺培南敏感的 42 株菌株中有 18 株正常表达 OprD 2, 而对其耐药的 21 株菌株中有 17 株 OprD 2 缺失耐药组 OprD 2 表达与敏感组比较差异有统计学意义 (χ 2 =4.40,P<0.05), 说明上海同仁医院分离的铜绿假单胞菌 OprD 2 缺失导致了其对亚胺培南耐药 17 株 OprD 2 缺失菌株皆携带 ampc 基因, 但未见对碳青霉烯类青霉素类和头孢菌素类药物的耐药差异可能存在其他的耐药机制, 如产生金属 β- 内酰胺酶水解亚胺培南, 外膜存在药物主动外排系统限制亚胺培南到达其作用靶位等本研究在对产 ampc 酶及 OprD 2 缺失对头孢他啶头孢吡肟亚胺培南哌拉西林 - 他唑巴坦这 4 种 β - 内酰胺类抗菌药物的耐药性比较中发现,OprD 2 缺失合并产 ampc 酶的 6 株菌株除对亚胺培南均耐药外, 对头孢他啶头孢吡肟的耐药率明显高于 OprD 2 正常表达的菌株, 也高于 OprD 2 缺失合并不产 ampc 酶的菌株 OprD 2 缺失的 41 株铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率明显高于 OprD 2 正常表达的菌株, 说明无论 ampc 酶是否产生, 如果合并 OprD 2 缺失, 多会导致其对亚胺培南耐药而在对头孢他啶头孢吡肟的耐药率比较中, 产 ampc 酶菌株和不产 ampc 酶菌株差异有统计学意义 (P<0.05), 但是否与 OprD 2 缺失有关有待考证在 OprD 2 正常表达的 22 株铜绿假单胞菌中有 4 株对亚胺培南耐药, 其中 2 株产 ampc 酶, 可能与 ampc 酶水解亚胺培南有关,2 株不产 ampc 酶的菌株可能存在其他耐药机制, 尚需进一步研究有关铜绿假单胞菌产生高耐药性的机制研究较多, 但尚无一种机制能全面解释, 其产生耐药性的原因可能是多种耐药机制协同作用的结果 2010 年 ClsI 弱化了细菌产酶机制的检测, 但以感染控制和流行病学为目的细菌耐药机制研究, 仍对分析其耐药规律和特点具有重要意义 [1] [2] [3] 参考文献杨启文, 王辉. 抗菌药物敏感性试验最新动向 : 2010 年 ClsI M100-s20 主要更新内容 [J]. 中华检验医学杂志,2010,33(6): Clinical and laboratory standards Institute. Performance standard for antimicrobial susceptibility testing[s].m100-s20,clsi,2012. CouDron PE,MolanD Es,tHoMson Ks.occurrence and detection of ampc betalactamases among Escherichia coli,klebsiella pneumonie,and Proteus mirabilis isolates at a veterans medical center[j].j Clin Microbiol,2003,38 (5): [4] 胡波, 宋勇, 张方, 等. 铜绿假单胞菌 ampc 基因分 [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] 布和产酶状况对药物敏感性的影响 [J]. 医学研究生学报,2008,21(1): 张颖, 赵祝香, 陈惠玲, 等. 耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属 β- 内酰胺酶和 OprD 2 基因的检测 [J]. 中国病理生理杂志,2011,27(7): 赵津彩, 张跃栋.520 株铜绿假单胞菌临床分布和耐药性分析 [J]. 检验医学,2013,28(8): 赵付菊, 方毅, 张景皓, 等. 产气肠杆菌持续高产型 ampc β- 内酰胺酶的产生与抗菌药物应用关系的研究 [J]. 检验医学,2014,29(9): 杨海慧, 韩立中, 刘怡箐, 等. 亚胺培南联合多黏菌素 B 对不同表型铜绿假单胞菌体外抗菌活性的研究 [J]. 检验医学,2013,28(1):1-6. llanes C,PourCEl C,rICHarDot C,et al.diversity of β-lactam resistance mechanisms in cystic fibrosis isolates of Pseudomonas aeruginosa:a French multicentre study[j]. J antimicrob Chemother, 2013,68(8): 沈继录, 朱德妹, 吴卫红, 等. 碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外膜孔蛋白 oprd2 的研究 [J]. 中国感染与化疗杂志,2011,11(4): 胡锡浩, 许小敏, 冯伟云, 等. 烧伤科铜绿假单胞菌 20 种 β- 内酰胺酶基因与膜孔蛋白 OprD 2 基因研究 [J]. 中华医院感染学杂志,2011,21(21): ( 收稿日期 : ) ( 本文编辑 : 姜敏 )

目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 2014 年安医大一附院病原菌分布及药物敏感性分析编者 : 沈继录编审 : 王中新徐元宏 1 目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 伤口引流液标本病原菌构成及药敏分析