297 专家述评 抗肿瘤血管生成, 肿瘤免疫治疗与 肿瘤微环境的研究进展 罗锋, 王力 ( 四川大学华西医院肺癌中心, 肿瘤中心, 生物治疗国家重点实验室, 成都 610041) [ 摘要 ] 抗肿瘤血管生成已是临床上肿瘤治疗的常用方法 但是, 在此治疗过程中, 肿瘤也会逐渐对抗血管生成药物产生耐药, 这可能与肿瘤微环境的改变有关 怎样进一步改善抗肿瘤血管生成治疗疗效是目前的热点问题 最近有研究认为将其与肿瘤免疫治疗相联合可能是一种相互增益的治疗策略 本文就抗肿瘤血管生成治疗及其耐药 肿瘤微环境与肿瘤免疫治疗的关系, 抗肿瘤血管治疗联合肿瘤免疫治疗的最新进展, 进行综述 以期为今后探索肿瘤治疗新靶点 寻找肿瘤治疗新模式提供思路及参考依据, 从而最终造福于广大癌症患者 [ 关键词 ] 抗肿瘤血管生成 ; 肿瘤免疫治疗 ; 肿瘤微环境 [ 中图分类号 ]R730 5 [ 文献标志码 ]A doi:10 3969/j isn 1674 0904 2016 06 001 TheResearchProgresofAntiangiogenicTherapy, ImmuneTherapyandTumorMicroenvironment LuoFeng,WangLi (LungCancerCenter,CancerCenter,StateKeyLaboratoryofBiotherapy,WestChinaHospital, SichuanUniversity,Chengdu610041,Sichuan,China) [Abstract] Antiangiogenictherapyforcancerisacommonclinicalstrategy.Howeverintheproces,tumorcels wilgeneratedrug resistancegradualyforthetreatmentofantiangiogenictherapy,andthismaybeinvolvedwiththechan gesoftumormicroenvironment.howtoimprovetheanti tumoreficiencyofantiangiogenictherapyhasbecomeahotspotfor research.atpresent,ithasbeenreportedthatantiangiogenicdrugscombinedwithimmunetherapyareconsideredtohave asynergisticefectonanti tumorstrategy.inthispaper,theantiangiogenictherapyandthecorespondingdrug resistance, therelationshipbetweentumormicroenvironmentandimmunetherapy,thelatestprogresofantiangiogenictherapycom binedwithimmunetherapywilbereviewedinordertoprovideideasandbasisforexploringnewtargetsofcancertherapy andlookingfornewmethodsofcancertherapy,soastobringbenefitstothevastnumberofcancerpatientseventualy. [Keywords] AntiangiogenicTherapy;ImmuneTherapy;TumorMicroenvironment 1 抗肿瘤血管生成治疗现状 自 1971 年 Folkman 首次提出 新生血管对肿瘤生长至关重要 的概念以来, 抗肿瘤血管生成治疗就成为除手术 放化疗以外的有效治疗肿瘤的方法 [ 收稿日期 ] 2016 11 14 [ 基金项目 ] 国家自然科学基金面上项目 ( 编号 : 81372506); 国家自然科学基金青年基金 ( 编号 :81201786) [ 作者简介 ] 罗锋, 男, 教授, 博士生导师 四川省政府学术技术带头人, 四川省卫生厅肿瘤学学术技术带头人 四川省肿瘤免疫专委会副主任委员, 四川省肿瘤微创治疗专委会副主任委员, 中国肺癌专委会委员, 四川省化疗专委会常委 之一, 给肿瘤患者带来了希望 从 2004 年开始, 陆续已有 10 类抗血管生成抑制剂被批准应用于各种恶性肿瘤治疗 在一项对 Ⅱ /Ⅲ 期临床随机试验的荟萃分析中 [1], 结果显示对于未经治疗的晚期非小细胞肺癌患者, 较之单用化疗, 贝伐单抗联合铂类为基础的化疗显著延长了患者的生存期 ( 风险比 HR= 0 90,95% 可信区间 :0 81~0 99,P=20) 在一项 Ⅲ 期临床试验 (LUME Lung1) 中 [2], 多西他赛联合 Nintedanib 可以使一线化疗后进展的患者获益 在其依次纳入的队列中, 第一个队列, 入组患者是一线治疗后,9 个月内出现进展的肺腺癌患者, 多西他赛联合 Nintedanib 使中位 OS 明显改善 (10 9 个月 vs
298 7 9 个月 ;HR=0 75,95% CI:0 60~0 92,P= 0 0073) 第二个队列, 所有肺腺癌患者也得到生存获益 ( 中位 OS 多西他赛联合 Nintedanib 组 vs 对照组为 12 6 个月 vs10 3 个月 ;HR=0 83,CI: 0 70~0 99,P=0 0359) 最近,REVELⅢ 期临床试验 [3], 比较了多西他赛联合 Ramucirumab 与多西他赛联合安慰剂对经含铂双药化疗后进展的晚期 NSCLC 患者的治疗效果 结果发现, 多西他赛 + Ramuciruma 组的中位生存时间是 10 5 个月, 而多西他赛 + 安慰剂组的中位生存时间 9 1 个月 (HR= 0 86,95%CI:0 75~0 98,P=0 023) 据此, 多西他赛联合 Ramucirumab 被 EMA 和 FDA 批准用于治疗转移性非小细胞肺癌 然而, 总体来说, 抗肿瘤血管生成治疗疗效有限, 生存获益几周到数月不等 而且, 也有研究显示 [4], 部分癌症患者甚至在治疗 [5] 过程中就出现了肿瘤进展 例如,Kindler 等入组 602 例晚期胰腺癌患者进行吉西他滨与吉西他滨联合 bevacizumab 研究, 结果显示联合 bevacizumab 并没有改善患者总生存期 ; 同样的, 在胶质瘤患者中, 部分患者在使用 bevacizumab 后出现了肿瘤的复发 [6] 还有基础研究发现 [7], 在黑色素瘤或乳腺癌荷瘤小鼠模型中, 经抗血管生成药物 sunitinib 处理后荷瘤小鼠体内转移灶数目增多, 小鼠生存期缩短 上述不可避免的抗肿瘤血管生成耐药现象, 一直困扰着临床医师及基础科研工作者, 有学者认为这可能与抗肿瘤血管生成治疗后促使的肿瘤微环境相应改变 肿瘤干细胞形成及肿瘤免疫抑制状态密切相关 2 肿瘤微环境 肿瘤干细胞与肿瘤免疫抑制 肿瘤微环境是指由肿瘤局部浸润的免疫细胞 间质细胞 细胞外基质及活性介质等与肿瘤细胞及肿瘤干细胞共同构成的局部内环境 肿瘤组织内大部分区域处于缺氧状态, 而长时间持续使用抗肿瘤血管生成药物会加重肿瘤组织缺氧, 这已被包括我们在内的研究者证实 [8-9], 如缺氧诱发因子 1a (HIF 1a) 的上调及乏氧荧光探针在肿瘤组织内的特异性标记 肿瘤微环境缺氧加重可引起肿瘤细胞的去分化 ( 即肿瘤细胞干性表型的增强 ) 及免疫抑制, 促使肿瘤逃逸抗肿瘤血管生成治疗的作用 肿瘤干细胞是一小部分存在于肿瘤组织或细胞株中的具有产生肿瘤并维持肿瘤生长和异质性能力的细胞群, 这类细胞群已被证实存在于大部分肿瘤 [10-12] 中, 包括我们实验室鉴定并富集的肺癌干细 胞 乳腺癌干细胞 宫颈癌干细胞及胶质瘤干细胞等 实际上, 肿瘤干细胞与肿瘤细胞是处于不断分化及去分化的平衡过程中, 肿瘤细胞可通过自身改变去分化为肿瘤干细胞, 表现为对放化疗的抵抗, 增强的迁移及侵袭能力以及自我更新能力等 ; 而肿瘤干细胞则可向肿瘤细胞分化, 从而维持肿瘤的生长 有研究报道 [13-14], 缺氧诱导的 HIF 1a 上调, 可通过激活肿瘤细胞自身干性信号通路介导肿瘤细胞的去分化从而获得干性表型 ; 这是抗肿瘤血管生成治疗耐药, 促进肿瘤生长的原因之一 众所周知, 机体的免疫监视系统在识别 杀伤并清除体内突变细胞 ( 肿瘤细胞 ) 中发挥着重要作用, 如果机体正常的免疫系统受到抑制, 免疫监视功能减弱, 肿瘤就会发生 在肿瘤微环境内, 常常呈现免疫抑制的状态, 包括 Treg TAMs 及 MDSCs 细胞等免疫抑制细胞的大量募集, 以及肿瘤微环境内肿瘤细胞等释放的大量免疫抑制因子如 IL 10 TGF β 等聚集 ;CD8 + T 细胞分泌穿孔素及颗粒酶缺乏 ;NK 细胞的细胞毒性作用降低甚至失活等 [15-17] 研究发现对抗肿瘤血管生成治疗反应不佳的患者, 常常伴随着肿瘤微环境中免疫抑制细胞的增多, 提示肿瘤微环境中免疫抑制状态不利于抗血管生成治疗的预后 [18-19] 3 免疫治疗在肿瘤干细胞及免疫抑制中的作用肿瘤的免疫治疗近年来获得了令人振奋的进展, 迎来了肿瘤治疗的新时代 免疫治疗包括免疫细胞治疗和药物治疗两类, 前者通过体外扩增免疫细胞 [ 包括诸如 αβt 细胞 σγt 细胞及肿瘤浸润淋巴细胞 (tumorinfiltrationlymphocyte,til)) 后回输入肿瘤患者体内, 用这些具有抗肿瘤细胞活性的淋巴细胞去杀伤或杀灭肿瘤细胞, 以达到抗肿瘤的目的 后者为一类免疫制剂如干扰素 白介素 PD 1 等, 通过刺激人体自身免疫系统来抵抗肿瘤 相关研究显示, 免疫治疗在对抗肿瘤干细胞及免疫抑制状态过程中, 发挥重要角色, 这提示我们免疫治疗或许可为治疗抗肿瘤血管生成耐药提供新的策略 3 1 免疫治疗应对肿瘤干细胞 NK 细胞是固有免疫的主要效应细胞之一, 在清除转化细胞的过程中发挥着关键角色 在未激活状态下,NK 细胞的细胞毒性很低, 有研究表明 [20], 在 Nectin 2 激活的情况下,NK 细胞具有杀伤胶质瘤干细胞的作用 目前, 已有在体外激活 NK 细胞
299 后直接输注的过继性免疫细胞疗法 [21] 此外,T 细胞受肿瘤相关抗原的刺激而产生细胞毒性效应, 具有靶向杀伤 ABCB5 + MART 1 肿瘤干细胞的能力, 在此基础上通过体外致敏后输注, 称为抗原提呈细胞致敏的 T 细胞免疫疗法 [22] 同样的, 有研究表明 [23],zoledronicacid 的非肽磷酸化合物可以致敏结肠癌干细胞, 从而促使 σγt 细胞对其杀伤能力增强 3 2 免疫治疗应对肿瘤微环境免疫抑制有研究发现 [24-25], 在荷瘤小鼠模型中,IL 12 或 IFN α 依赖的 MDSCs 分化可由 TLR7 和 TLR8 的激动剂 R848 及 TLR9 激动剂 CpG 等完成, 从而促进肿瘤组织内 T 细胞的抗肿瘤免疫效应的产生, 抑制 MDSCs 介导的肿瘤逃逸 此外, 也有文献报道 [26], 通过促进嵌合抗原受体 T 细胞 (CAR T) 表达分泌 IL 2 及 IL 17 等细胞因子可减弱肿瘤微环境内免疫抑制的状态, 从而增强 CAR T 的抗肿瘤效应 同样的, 有研究表明 [27],RIG 1 作为 RLR 家族成员之一, 肿瘤细胞对 RIG 1 介导的细胞程序性死亡敏感, 在黑色素瘤和肺癌的小鼠动物模型中, 激活 RIG 1 及运用 sirna 技术可以抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长, 提示我们, 针对 RIG 1 选择性的 RNA 激动剂, 可能会成为治疗肿瘤的重要策略之一 PD 1 通路是一种 T 细胞抑制性通路 T 细胞膜上的 PD 1 受体与肿瘤细胞上的 PD L1 配体结合可激活 PD 1 通路 肿瘤细胞可以通过上调 PD L1 的表达, 从而阻止 T 细胞介导的抗肿瘤免疫 因此, 拮抗 PD 1/PD L1 的抗体可以通过恢复抗瘤 T 细胞的功能, 改善免疫抑制, 达到杀伤肿瘤细胞的目的 目前, 靶向 PD L1 的单克隆抗体在抗肿瘤治疗上呈现出很好的前景 Nivolumab 和 Pembrolizumab 被 EMA 和 FDA 批准用于在接受铂类为基础的化疗过程中或之后, 出现转移或进展的非小细胞肺癌患者 Nivolumab 被证明相较于多西他赛更能够降低接受过治疗的患者的死亡的风险 [28] 临床试验 Checkmate017 评估了 Nivolumab 对肺鳞癌的治疗效果 :Nivolumab 组的中位 OS 是 9 2 个月, 而多西他赛组是 6 个月 Nivolumab 组的 PFS 较之多西他赛组也更长 (3 5 个月 vs2 8 个月 ) 临床试验 Check mate057 评估了 Nivolumab 对非鳞非小细胞肺癌的治疗效果 :Nivolumab 组的中位 OS 为 12 2 个月, 多西他赛组为 9 4 个月 (HR=0 62,95%CI:0 47~ 0 81,P <0 001) 在上述两个试验中,Nivolumab 组发生 3 级及以上治疗相关不良反应的比率低于多 西他赛组 (Checkmate017,7% vs55%;checkmate 057,10% vs54%) Pembrolizumab 是被 FDA 和 EMA 批准的另一种人源化抗 PD 1 单克隆抗体, 用于治疗表达 PD L1 的转移性 或接受铂类药物化疗后疾病进展的非小细胞肺癌患者 在一项 Ⅱ /Ⅲ 期临床试验 (keynote 010) [29] 中, 既往接受过治疗的 PD L1 表达 1%( 免疫组化法 ) 的非小细胞肺癌患者被随机分为接受 Pembrolizumab2mg/kg,Pembroli zumab10mg/kg 或多西他赛 75mg/m 2 3 组 OS 在 Pembrolizumab2mg/kg 组是 10 4 个月, 在 Pembroli zumab10mg/kg 组 OS 为 12 7 个月, 明显长于多西他赛的 8 5 个月 但只有肿瘤表达 PD L1 的比例超过 50% 的患者, 才在 Pembrolizumab 的治疗中得到 PFS 获益 3~5 级治疗相关的不良事件发生率在 Pembrolizumab 组也低于多西他赛组 ( 分别是 Pem brolizumab2mg/kg 组 13%,Pembrolizumab10mg/kg 组 16% 和多西他赛组 35%) 另外 Atezolizumab 在临床实验中对进展期非小细胞肺癌效果显著, 被 FDA 授予突破性疗法认定 ; 其 Ⅱ 期临床试验 POP LARtrial 的结果显示 [30],Atezolizumab 也能使在铂类化疗后进展的非小细胞肺癌患者获益 在试验人群中,Atezolizumab 组的 OS 是 12 6 个月, 而多西他赛组 9 7 个月 ;Atezolizumab 延长 OS 的效果与 PD L1 的表达呈正相关, 患者对 Atezolizumab 耐受性好,3~4 级副作用的发生率在 Atezolizumab 组为 11%, 而在多西他赛组为 39% 4 免疫治疗联合抗肿瘤血管生成治疗以上研究显示, 免疫治疗能应对肿瘤干细胞生成, 改善肿瘤免疫抑制, 所以抗肿瘤血管生成治疗联合免疫治疗有可能取得协同的抗瘤效果 而且有研究发现 [31], 某些靶向 VEGF 及其受体的抗肿瘤血管生成药物也能够刺激肿瘤免疫, 因为 VEGF 不仅仅能够促进血管的生成, 在肿瘤微环境中也作为一个重要的介质, 参与肿瘤微环境的免疫抑制, 促使肿瘤细胞逃避免疫监视 VEGF 信号通过多种机制减弱抗肿瘤效果, 这种信号分成两种作用方式 : 第一, VEGF 通过抑制淋巴细胞对活化的内皮细胞的粘附, 影响淋巴细胞通过内皮细胞到达肿瘤部位 通过有关内皮细胞细胞内黏附分子 1(ICAM 1) 缺陷和血管细胞黏附分子 1(VCAM 1) 聚集在血管内皮细胞表面, 因此阻止了 T 细胞浸润到肿瘤内 [32] 通过影响 Fas 配体阻止了 T 细胞动员和向肿瘤内浸润 [33] 第二,VEGF 还通过对 Tregs MDSCs 等抑制
300 性的免疫细胞亚型的诱导和增殖, 抑制 DC 细胞的成熟以及抑制从造血祖细胞来源的 T 细胞的发育等多种机制对免疫调节细胞功能产生系统作用 [34-38] 所以靶向 VEGF 及其受体, 可以起到刺激免疫反应 增加免疫治疗效果的作用 研究发现 [39-40], 多靶点抗血管生成 TKI, 在晚期荷瘤鼠中降低了肿瘤浸润的 T 淋巴细胞的 PD 1 表达, 明显增加了肿瘤中 CD8 + 和 CD4 + T 细胞浸润 ; 降低了 Tregs MDSCs 数量及其免疫抑制功能 [41] 同样地, 研究发现在肾细胞癌患者中, 苏尼替尼也降低了 Tregs MDSCs 聚集 [34,40,42] 此外, 卡巴替尼 ( 抑制其他靶点中的 VEGFR2 的 TKI), 单药或联合 MVA/rF CEA/TRICOM( 一种具有免疫刺激作用的疫苗 ) 治疗, 能够在降低 Tregs MDSCs 数量同时明显增加 CD4 + CD8 + T 细胞浸润 [42] 联合抗肿瘤血管生成药物和免疫治疗增加治疗效果也在几个肿瘤类型的临床前证据获得了支持 在两个 B16F10 和 CT26 结肠癌体内肿瘤模型中, 通过表达一种能够与 VEGF 结合并能够阻断 VEGF 功能的嵌合性抗体 ; 结果发现, 当联合肿瘤细胞分泌的 GM CSF 免疫治疗时, 动物的存活率明显增加 [43] 相似的, 在荷瘤小鼠体内, 共同给予卡巴替尼和 MVA/rF CEA/TRICOM 与单独给予 MVA/rF CEA/ TRICOM 的对照组比较, 明显降低了 MC38 CEA 肿瘤细胞的生长 [42] 还有研究发现 [44], 在 3 个不同的 NSCLC 动物模型中, 免疫治疗 ( 通过 CIK 输注的过继免疫治疗 ) 和使用重组的人内皮抑素抑制血管生成明显抑制了肿瘤的生长, 但是单药均没有明显作用 在结肠癌荷瘤小鼠模型中, 同时抑制 PD 1 和 VEGFR2 单克隆抗体较单药也明显抑制了肿瘤生长 [45] 目前, 抗肿瘤血管生成治疗联合肿瘤免疫治疗, 多个临床试验正在一系列肿瘤中展开 NCT01454102 [46] 研究是评价一线含铂化疗没有进展的 NSCLC 患者转换为 Nivolumab 单药或联合贝伐单抗维持治疗的疗效及安全性 Nivolumab 联合贝伐单抗组纳入的均为非鳞癌患者, 而 Nivolumab 单药组纳入了鳞癌和非鳞癌患者 目前两组均未达到中位 OS 但是, 联合组中位 PFS 为 37 1 周, 而 Nivolumab 单药组中鳞癌中位 PFS 为 16 周 非鳞癌中位 PFS 为 21 周 并且联合组显示了可耐受的安全性,3 级及以上的 TRAEs 的发生率低 [47] NCT02443324 临床实验正在评价 Ramucir umab 联合 Pembrolizumab 在既往全身治疗进展的晚 期 NSCLC 胃癌 / 胃食管结合部腺癌或尿路上皮癌患者中的效果 来自研究的剂量限制性毒性的初步结果显示没有非预期的安全问题 在 NSCLC 患者中, 没有报道剂量限制性毒性, 在胃癌 / 胃食管结合部腺癌患者中报道 1 例剂量限制性毒性 NCT01633970 研究 [48], 是评价贝伐单抗联合 PD L1 抑制剂 Atezolizumab 在转移性结直肠癌治疗抗拒的患者或联合转移性结直肠癌标准化疗方案 FOLFOX 在既往没有使用奥沙利铂的患者中的安全性和疗效 初步结果显示, 在 Atezolizumab 加贝伐单抗联合 FOLFOX 治疗既往未使用奥沙利铂的患者中,1 个及以上可评估病灶的患者治疗的客观反应率为 36%, 而在一线治疗患者中为 44% Atezolizumab 加贝伐单抗治疗患者中,7% 的 3 级及以上的不良反应考虑与 Atezolizumab 有关 两种联合均有很好的耐受性, 没有出现非预期的不良反应 此外, 贝伐单抗联合 CTLA 4 检测点抑制剂 Ip ilimumab 在晚期黑色素瘤的 Ⅰ 期试验中已经报道了有希望的结果 [49] :Ipilimumab 联合贝伐单抗在转移性黑色素瘤患者中, 获得 19 6% 的客观反应率, 中位 OS25 1 个月, 几乎是以往 Ipilimumab 单药治疗获得的生存时间的两倍 另外,Nintedanib 分别联合 Nivolumab 和 Pembrolizumab 试验正在进行中 我们迫切等待这些试验及正在进行的其他肿瘤类型的临床试验结果 我们必须清醒地认识到, 尽管抗肿瘤血管生成治疗联合肿瘤免疫治疗目前取得了重大进展, 但是这种联合仍然充满挑战 : 将来需要阐明的关键之一, 就是怎样证明哪些患者会从这种新的联合治疗获得最大益处, 怎样通过必要的生物标记物来帮助选择这部分患者 而且, 除了患者选择的挑战以外, 需要去确定每种联合治疗的合适的治疗顺序和时机, 此外, 每种药物的剂量也非常重要, 因为已经显示联合免疫治疗时 [50], 高剂量抗血管治疗药物具有更差的免疫刺激效果 5 展望近年来, 抗肿瘤血管生成治疗和肿瘤免疫治疗取得了巨大的成果, 已成为临床上常规的肿瘤治疗方法 肿瘤免疫治疗联合抗肿瘤血管生成治疗新方法亦正在显现出令人振奋的前景 然而, 抗肿瘤血管生成耐药, 抗肿瘤血管生成诱导的肿瘤微环境改变极其复杂, 涉及微环境内多种细胞的参与, 众多信号通路的交错, 机理亟待阐明 抗肿瘤血管生成联
301 合免疫治疗之研究日新月异, 但是, 如何选择最佳时间顺序 剂量疗程以及获益人群, 诸多问题都是今后面临的重要挑战 [ 参考文献 ] [1] SoriaJC,MauguenA,ReckM,etal.Systematicreviewandme ta analysisofrandomised,phaseⅡ /Ⅲ trialsaddingbevacizumab toplatinum basedchemotherapyasfirst linetreatmentinpatients withadvancednon smal cellungcancer[j].annoncol,2013, 24(1):20-30. [2] ReckM,KaiserR,MelemgaardA,etal.Docetaxelplusninte danibversusdocetaxelplusplaceboinpatientswithpreviously treatednon smal cellungcancer(lume Lung1):aphase3, double blind,randomisedcontroledtrial[j].lancentoncol, 2014,15(2):143-155. [3] GaronEB,CiuleanuTE,ArietaO,etal.Ramucirumabplusdo cetaxelversusplaceboplusdocetaxelforsecond linetreatmentof stageiv non smal cellungcancerafterdiseaseprogresionon platinum basedtherapy(revel):amulticenter,double blind, randomisedphase3trial[j].lancet,2014,384(9944):665-673. [4] Paez RibesM,AlenE,HudockJ,etal.Antiangiogenictherapy elicitsmalignantprogresionoftumorstoincreasedlocalinvasion anddistantmetastasis[j].cancercel,2009,15(3):220-231. [5] KindlerHL,NiedzwieckiD,HolisD,etal.Gemcitabineplus bevacizumabcomparedwithgemcitabineplusplaceboinpatients withadvancedpancreaticcancer.phaseⅢ trialofthecancerand LeukemiaGroupB(GALGB80303)[J].JClinOncol,2010, 28(22):3617-3622. [6] KeunenO,JohansonM,OudinA,etal.Anti VEGFtreatment reducesbloodsupplyandincreasestumorcelinvasioninglioblas toma[j].procnatlacadsci,2011,108(9):3749-3754. [7] EbosJM,LeeCR,Cruz MunozW,etal.Acceleratedmetastasis aftershort termtreatmentwithapotentinhibitoroftumorangiogen esis[j].cancercel,2009,15(3):232-239. [8] ZhangH,WangZ,PengQ,etal.Tumorrefractorinestoen dostatinanti angiogenesisisasociatedwith therecruitmentof CD11b+Gr 1+myeloidcelsandinflammatorycytokines[J]. Tumori,2013,99(6):723-733. [9] WangZ,LiZ,WangY,etal.Versicansilencingimprovesthe antitumoreficacyofendostatinbyaleviatingitsinducedinflam matoryandimmunosuppresivechangesinthetumormicroenviron ment[j].oncolrep,2015,33(6):2981-2991. [10] WangL,WangJ,LiZ,etal.Silencingstemcelfactoratenuates stemnesandinhibitsmigrationofcancerstem celsderivedfrom Lewislungcarcinomacels[J].TumourBiol,2016,37(6): 7213-7227. [11] WangL,GuoH,LinC,etal.Enrichmentandcharacterizationof cancerstem likecelsfrom acervicalcancercelline[j].mol MedRep,2014,9(6):2117-2123. [12] LinC,WangL,WangH,etal.TanshinoneⅡAinhibitsbreast cancerstemcelsgrowthinvitroandinvivothroughatenuationof IL 6/STAT3/NF kbsignalingpathways[j].jcelbiochem, 2013,114(9):2061-2070. [13] CaoL,FanX,JingW,etal.Osteopontinpromotesacancerstem cel likephenotypeinhepatocelularcarcinomacelsviaaninte grin NF kb HIF 1apathway[J].Oncotarget,2015,6(9):6627-6640. [14]Santoyo RamosP,LikhatchevaM,Garcia ZepedaEA,etal.Hy poxia induciblefactorsmodulatethestemnesandmalignancyof coloncancercelsbyplayingoppositerolesincanonicalwntsigna ling[j].plosone,2014,9(11):e112580. [15] NogueraTI,DalyC,PapadopoulosNJ,etal.BlockadeofDI4 inhibitstumorgrowthbypromotingnon productiveangiogenesis [J].Nature,2006,444(7,22):1032-1037. [16]WelfordAF,BiziatoD,CofeltSB,etal.TIE2 expresingmacro phageslimitthetherapeuticeficacyofthevascular disruptinga gentcombretastatina4phosphateinmice[j].jclininvest, 2011,121(5):1969-1973. [17] HuangJ,SoferSZ,Kim ES,etal.Vascularremodelingmarks tumorsthatrecurduringchronicsuppresionofangiogenesis[j]. MolCancerRes,2004,2(1):36-42. [18]ShoJaeiF,WuX,MalikAK,etal.Tumorrefractorinestoanti VEGFtreatmentismediatedbyCD11b+Gr1+myeloidcels[J]. NatBiotechnol,2007,25(8):911-920. [19] Lu EmersonC,SnuderlM,KirkpatrickND,etal.Increasein tumor asociatedmacrophagesafterantiangiogenictherapyisaso ciatedwithpoorsurvivalamongpatientswithrecurentglioblastoma [J].NeuroOncol,2013,15(8):1079-1087. [20]PietraC,ManziniC,VitaleM,etal.Naturalkilercelskilhu manmelanomacelswithcharacteristicsofcancerstemcels[j]. IntImmunol,2009,21(7);793-801. [21] CastriconiR,DagaA,DonderoA,etal.NKcelsrecognizeand kilhumanglioblastomacelswithstemcel likeproperties[j].j Immunol,2009,182(6):3530-3539. [22]RosenbergSA,RestifoNP,YangJC,etal.Adoptiveceltrans fer:aclinicalpathtoefectivecancerimmunotherapy[j].nat RevCancer,2008,8(4):299-308. [23]TodaroM,DAsaroM,CaccamoN,etal.Eficientkilingofhu mancoloncancerstemcelsbygammadeltatlymphocytes[j].j Immunol,2009,182(11):7287-7296. [24] DeSantoC,SalioM,MasriSH,etal.InvariantNKTcelsreduce theimmunosuppresiveactivityofinfluenzaavirus inducedmye loid derivedsuppresorcelsinmiceandhumans[j].jclinin vest,2008,118(12):4036-4048. [25]ZoglmeierC,BauerH,NorenbergD,etal.CpGblocksimmuno suppresionbymyeloid derivedsuppresorcelsintumor bearing mice[j].clincancerres,2011,17(7):1765-1775. [26]HendersonMA,YongCS,DuongCP,etal.Chimericantigenre ceptor redirectedtcelsdisplaymultifunctionalcapacityanden hancedtumor specificcytokinesecretionuponsecondaryligationof chimericreceptor[j].immunotherapy,2013,5(6):577-590. [27]PoeckH,BeschR,MaihoeferC,etal.5 Triphosphate sirna:
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