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- 杭侠 温
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1 第 40 卷 2012 年 8 月 分 析 化 学 (FENXI HUAXUE) 研 究 报 告 Chinese Journal of Analytical Chemistry 第 8 期 19~1146 췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍 研 究 报 告 췍 DOI: /SP.J 췍 췍 人 体 血 清 中 的 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 连 续 在 线 分 离 及 气 相 色 谱 - 质 谱 测 定 邵 敏 陈 永 亨 * 李 晓 宇 ( 广 州 大 学 环 境 科 学 与 工 程 系, 广 州 ) 摘 要 建 立 了 人 体 血 清 中 多 种 环 境 雌 激 素 : 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 快 速 可 靠 的 连 续 在 线 分 离 及 在 气 相 色 谱 - 质 谱 上 的 分 析 方 法 血 清 样 品 经 过 浓 盐 酸 使 蛋 白 质 变 性, 用 乙 醚 萃 取, 经 硅 胶 柱 分 离 出 多 个 族 组 分 : 多 溴 联 苯 醚 (Polybrominated diphenyl ethers, PBDEs) 邻 苯 二 甲 酸 酯 (Phthalate esters, PAEs) 和 双 酚 A (Bisphenol A, BPA), 最 后 由 气 相 色 谱 - 质 谱 的 选 择 离 子 检 测 测 定 PBDEs,PAEs 和 BPA 标 准 曲 线 回 归 方 程 拟 合 度 R 2 均 大 于 0.99, 表 明 在 测 试 的 浓 度 范 围 内 线 性 关 系 良 好 PBDEs 目 标 化 合 物 的 检 出 限 为 ~ mg/l, PAEs 目 标 化 合 物 的 检 出 限 为 0.103~0.833 mg/l, BPA 的 检 出 限 是 mg/l 标 准 样 品 重 复 样 中, PBDEs 的 RSD(relative standard deviation) 值 分 别 为 2.8% ~10.9% ;PAEs 的 RSD 值 为 5.6% ~9.9% ;BPA 的 RSD 值 为 3.0% 实 际 血 清 样 品 中,PBDEs 的 加 标 回 收 物 PCB209(Polychloride diphenyl ether 209) 的 回 收 率 范 围 是 74.8% ~88.5% ;PAEs 中 的 加 标 回 收 物 DBP-D4(Dibutyl phthalate-deutorium 4) 的 回 收 率 范 围 为 78.7% ~97.0% ; BPA 中 的 加 标 回 收 物 BPA-D16(Bisphenol A-Deutorium 16) 的 回 收 率 范 围 是 76.3% ~ 93.1% 本 方 法 检 测 血 液 中 多 种 环 境 雌 激 素 灵 敏 度 高 重 现 性 和 回 收 率 均 良 好 关 键 词 人 体 血 清 ; 多 溴 联 苯 醚 ; 邻 苯 二 甲 酸 酯 ; 双 酚 A; 气 相 色 谱 - 质 谱 1 引 言 近 年 来, 随 着 对 环 境 污 染 问 题 的 日 益 关 注, 环 境 内 分 泌 干 扰 物 [1], 作 为 一 类 污 染 源 引 起 了 环 境 科 研 人 员 关 注, 尤 其 是 环 境 雌 激 素 [2] 环 境 雌 激 素 对 人 类 的 生 殖 系 统 和 神 经 系 统 有 着 直 接 的 危 害 作 用 [2~ 4] 它 们 主 要 通 过 模 拟 内 分 泌 激 素 的 作 用, 与 下 丘 脑 垂 体 子 宫 等 器 官 的 雌 激 素 受 体 结 合, 从 而 干 扰 人 体 和 其 它 动 物 的 内 分 泌 系 统 的 正 常 运 作, 导 致 生 殖 系 统 的 发 育 不 良, 肿 瘤 及 畸 形, 生 育 能 力 下 降 环 境 雌 激 素 多 溴 联 苯 醚 (Polybrominated diphenyl ethers, PBDEs) 邻 苯 二 甲 酸 酯 (Phthalate esters, PAEs) 和 双 酚 A(Bisphenol A, BPA) 作 为 重 要 的 化 工 原 料 [5~ 10], 广 泛 应 用 于 人 们 日 常 生 活 中 的 消 费 用 品 生 产 中, 对 人 们 的 生 活 环 境 与 健 康 有 直 接 影 响 多 溴 联 苯 醚 的 重 要 用 途 是 阻 燃 剂, 应 用 于 电 子 电 器 化 工 建 材 纺 织 等 领 域, 是 家 用 电 器 计 算 机 泡 沫 塑 料 地 毯 和 布 料 汽 车 内 饰 等 不 可 缺 失 的 成 分 常 用 的 为 五 溴 八 溴 和 十 溴 联 苯 醚, 其 中 十 溴 联 苯 醚 用 途 最 广, 因 其 价 格 低 廉 性 能 优 越 急 性 毒 性 在 所 有 溴 代 联 苯 醚 中 最 低 邻 苯 二 甲 酸 酯 是 一 种 增 塑 剂, 通 过 改 变 高 聚 物 分 子 间 的 结 构 来 增 加 其 成 型 时 的 可 逆 性 与 流 动 性, 改 变 其 成 品 的 柔 韧 性, 被 普 遍 应 用 于 玩 具 食 品 包 装 材 料 医 用 血 袋 和 胶 管 清 洁 剂 润 滑 剂 指 甲 油 头 发 喷 雾 剂 香 皂 农 药 载 体 驱 虫 剂 塑 料 与 橡 胶 产 品 中 双 酚 A 是 生 产 聚 碳 酸 酯 (Polycarbonate, 即 PC) 树 脂 及 环 氧 树 脂 的 主 要 原 料, 广 泛 应 用 于 婴 儿 奶 瓶 塑 料 容 器 罐 头 内 壁 及 黏 合 剂 等 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 检 测 痕 量 双 酚 A 已 有 报 道 [11,12] 目 前, 雌 激 素 对 环 境 人 体 的 污 染 研 究 都 是 对 某 单 一 的 雌 激 素 进 行 检 测 和 分 析 [5~ 10,~ 15], 所 以 有 必 要 开 展 多 种 雌 激 素 在 血 清 中 的 污 染 研 究 由 于 临 床 血 清 样 品 待 测 组 分 含 量 低, 组 分 复 杂 且 干 扰 严 重, 增 收 稿 ; 接 受 本 文 系 国 家 环 保 部 公 益 性 行 业 科 研 专 项 (No ) 资 助 * chenyong_heng@ 163.com
2 1140 分 析 化 学 第 40 卷 加 了 定 量 分 析 的 难 度 本 研 究 用 浓 HCl 有 效 地 除 去 血 清 中 的 大 分 子 蛋 白 质, 利 用 硅 胶 柱 分 离 与 纯 化 血 清 中 的 3 种 组 分 PBDEs,PAEs 和 BPA, 降 低 了 背 景 干 扰 ; 利 用 GC-MS 选 择 性 离 子 检 测 方 法 结 合 内 标 法, 建 立 了 可 靠 与 快 速 同 时 检 测 血 清 样 品 中 多 种 环 境 雌 激 素 PBDEs,PAEs 和 BPA 的 分 析 方 法 2 实 验 部 分 2.1 仪 器 与 试 剂 Trace DSQ 气 相 色 谱 - 质 谱 仪 ( 美 国 Thermo Fisher 公 司 );EFAA-DC 12 型 氮 吹 仪 ( 上 海 安 谱 实 验 仪 器 有 限 公 司 );Laborota 4000 efficient 型 旋 转 蒸 发 仪 ( 德 国 Heidolph 公 司 );SB 3200DT 型 超 声 清 洗 机 ( 宁 波 新 芝 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 ) 正 已 烷, 二 氯 甲 烷, 甲 醇 (HPLC 级 ), 丙 酮 乙 醚 ( 分 析 纯 ), 经 二 次 重 蒸 后 使 用 硅 胶 (60~200 mm), 实 验 前 与 脱 脂 棉 均 系 二 氯 甲 烷 索 氏 抽 提 72 h 后 置 于 干 燥 器 中 备 用 ; 镊 子, 药 勺 和 氮 吹 针 头 都 用 甲 醇 超 声 清 洗 后 待 用 ; 无 水 Na 2 SO 4 与 NaCl 于 450 焙 烧 4 h 后, 密 封 于 干 燥 器 中 待 用 标 样 ( 美 国 Accustaṉ dards 公 司 ): 多 溴 联 苯 醚 9 种 混 合 标 样 (10 mg/l, 其 中 包 含 2,4,4 - 三 溴 联 苯 醚 (BDE-28) 2,2,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 (BDE-47) 2,3,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 (BDE-66) 2,2,3,4,4 - 五 溴 联 苯 醚 (BDE-85) 2,2,4,4,5- 五 溴 联 苯 醚 (BDE-99) 2,2,4,4,6- 五 溴 联 苯 醚 (BDE-100) 2,2,3,4,4,5 - 六 溴 联 苯 醚 (BDE-8) 2,2,4,4,5,5 - 六 溴 联 苯 醚 (BDE-153) 2,2,4,4,5,6 - 六 溴 联 苯 醚 (BDE-154));6 种 邻 苯 二 甲 酸 酯 混 标 (2000 mg/l, 其 中 包 含 邻 苯 二 甲 酸 二 甲 酯 (Dimethyl phthalate,dmp) 邻 苯 二 甲 酸 二 乙 酯 (Diethyl phthalate,dep) 邻 苯 二 甲 酸 二 丁 酯 (Dibutyl phthalate,dbp) 邻 苯 二 甲 酸 二 辛 酯 (Dioctyl phthalate,dnop) 邻 苯 二 甲 酸 丁 基 苄 基 酯 (Benzyl butyl phthalate,bbp) 和 邻 苯 二 甲 酸 (2- 乙 基 己 基 ) 酯 (Di (2-ethylhexyl)phthalate),DEHP));DBP-D4 (100 mg/l, 氘 代 - 邻 苯 二 甲 酸 二 丁 酯 );BPA(100 mg/l);bde209(50 mg/l, 十 溴 联 苯 醚 ) 标 样 ( 美 国 UIṮ ra Scientific 公 司 ):PCB209 (500 mg/l, 十 氯 联 苯 醚 ) 标 样 ( 德 国 Dr.Ehrenstorfer GmbH 公 司 ):BPA-D16 ( 氘 代 - 双 酚 A);BB(benzyl benzoate, 苯 酸 苄 酯 ) 标 样 ( 美 国 Cambridge Isotope Laboratories 公 司 :BDE118 (50 mg/l,2, 3, 4, 4, 5- 五 溴 联 苯 醚 );BDE183 (50 mg/l, 2, 2, 3, 4, 4, 5, 6- 七 溴 联 苯 醚 ); C 12-BPA(100 mg/l); C 12-BDE209(50 mg/l) 2.2 样 品 的 前 处 理 将 1 ml 血 清 倒 入 125 ml 锥 形 瓶 中, 加 入 回 收 率 指 示 物 PCB 209,DBP-D4 和 BPA-D16, 再 加 入 1 ml 6 mol/l HCl 溶 液, 振 荡 ; 加 入 20 ml 乙 醚, 剧 烈 振 荡, 倒 入 80 ml 分 液 漏 斗 静 置, 分 层, 分 离 出 有 机 相 ; 用 10 ml 乙 醚 再 萃 取 两 次, 合 并 有 机 相, 用 40 ml 饱 和 NaCl 溶 液 洗 涤, 弃 去 NaCl 溶 液 有 机 相 用 无 水 Na 2 SO 4 脱 水 干 燥 后 在 旋 转 蒸 发 仪 上 浓 缩 到 1 ml 左 右, 过 中 性 硅 胶 柱, 用 10 ml 正 己 烷 与 二 氯 甲 烷 的 混 合 液 (7 3,V/V) 淋 洗 PBDEs 组 分 用 10 ml 正 己 烷 - 丙 酮 混 合 液 (8 2,V/V) 淋 洗 PAEs 组 分, 用 10 ml 乙 酸 乙 酯 淋 洗 BPA 组 分 在 旋 转 蒸 发 仪 上 将 淋 洗 液 旋 干 后 转 移 入 细 胞 瓶, 用 氮 吹 仪 吹 干 溶 剂 后, 在 PB- DEs 组 分 中 加 入 内 标 物 BDE-118( 除 BDE-209 外 的 PBDEs 的 内 标,) 和 C 12-BDE209(BDE-209 的 内 标 ), 用 正 己 烷 定 容 至 300 ml, 待 测 在 PAEs 组 分 中 加 入 内 标 物 BB, 用 正 己 烷 定 容 至 300 ml, 待 测 在 BPA 组 分 中 加 入 内 标 物 C 12-BPA, 用 正 己 烷 定 容 至 300 ml, 待 测 至 此, 完 成 了 对 血 清 样 品 中 PBDEs,PAEs 和 BPA 的 连 续 在 线 分 离 2.3 仪 器 条 件 多 溴 联 苯 醚 组 分 PBDEs:DḆ 5MS(30 m 0.25 mm i.d,0.1 mm) 毛 细 管 柱 [6], 载 气 为 He, 恒 流, 柱 流 量 为 1.2 ml/min, 无 分 流 进 样, 进 样 量 为 1 ml 进 样 口 温 度 270, 程 序 升 温 : 初 始 温 度 100, 保 持 1 min; 以 20 /min 升 至 210, 以 4 /min 升 至 250, 以 2 /min 升 至 290, 并 保 持 5 min 标 准 与 血 清 样 品 色 谱 图 见 图 1 BDE-209:BDE-209 组 分 的 耐 热 性 较 差, 在 30 m 色 谱 柱 里 高 温 时 会 分 解, 所 以 换 用 15 m 的 色 谱 柱 [7] DḆ 5MS(15 m 0.25 mm i.d,0.1 mm) 毛 细 管 柱, 载 气 为 He, 恒 流, 柱 流 量 为 1.2 ml/min, 无 分 流 进 样, 进 样 量 为 1 ml 进 样 口 温 度 270, 程 序 升 温 : 初 始 温 度 100, 保 持 1 min; 以 20 /min 升 至 240, 以 10 /min 升 至 300, 并 保 持 10 min 标 准 与 血 清 样 品 色 谱 图 见 图 2
3 第 8 期 邵 敏 等 : 人 体 血 清 中 的 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 连 续 在 线 分 离 及 气 相 色 谱 - 质 谱 测 定 1141 图 1 多 溴 联 苯 醚 组 分 标 准 样 品 (a) 和 血 清 样 品 (b) 的 色 谱 图 Fig.1 Chromatogram of polybrominated diphenyl ethers of standard sample (a)and serum sample (b) 图 2 Fig.2 十 溴 联 苯 醚 标 准 样 品 (a) 和 血 清 样 品 (b) 的 色 谱 图 Chromatograms of brominated diphenyl ethers 209 of standard sample (a)and serum sample(b) 质 谱 条 件 :PBDEs 组 分 电 离 模 式 为 : 离 子 源 温 度 为 200 [6], 为 负 化 学 电 离 源 (NCI), 高 纯 甲 烷 ( % 电 子 轰 击 能 量 为 70 ev, 接 口 温 度 是 290, 样 品 定 量 检 测 时 用 选 择 性 离 子 扫 描 模 式 (SIM) 检 测 离 子 见 表 邻 苯 二 甲 酸 酯 组 分 DḆ 5MS(30 m 0.25 mm i.d, 0.25 mm) 毛 细 管 柱, 载 气 为 He, 恒 流, 柱 流 量 为 1 ml/min, 无 分 流 进 样, 进 样 量 为 1 ml 进 样 口 温 度 270, 程 序 升 温 : 初 始 温 度 100, 保 持 1 min; 以 20 /min 升 至 170, 以 5 /min 升 至 270, 并 保 持 10 min 标 准 与 血 清 样 品 色 谱 图 见 图 3 质 谱 条 件 : 电 离 模 式 为 电 子 轰 击 源 (EI), 能 量 为 70 ev, 接 口 温 度 是 290, 离 子 源 温 度 为 260 检 测 离 子 见 表 双 酚 A 组 分 由 于 双 酚 A 的 羟 基 气 相 色 谱 特 性 不 好, 所 以 在 进 色 谱 分 析 前, 需 对 其 进 行 硅 烷 化 衍 生 化, 以 改 善 其 分 析 的 灵 敏 度 衍 生 化 条 件 是 在 吹 干 的 分 离 物 中 加 入 100 ml 硅 烷 化 试 剂 (99% BSTFA+ 1% TMS) 与 50 ml 吡 啶 后, 加 盖 后 在 60 下 加 温 30 min, 然 后 用 正 己 烷 定 容 至 300 ml, 直 接 进 样 分 析 [16]
4 1142 分 析 化 学 第 40 卷 表 1 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 保 留 时 间 和 特 征 离 子 Table 1 Polybrominated diphenyl ethers, phthalate esters and bisphenol A retention time and characteristic ions 目 标 化 合 物 Analyte 多 溴 联 苯 醚 组 分 Brominated diphenyl ether (BDE) 保 留 时 间 Retention time (min) 定 量 离 子 Quantitative ions (m/z) 2,4,4 - 三 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,3,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,4,4,6- 五 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,4,4,5- 五 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,3,4,4 - 五 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,4,4,5,6 - 六 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,4,4,5,5 - 六 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,3,4,4,5 - 六 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,2,3,4,4,5,6- 七 溴 联 苯 醚 BDE ,81 2,3,4,4,5- 五 溴 联 苯 醚 BDE ,81 十 氯 联 苯 醚 Polychloride diphenyl etheṟ 209 (PCḆ 209) 定 性 离 子 Qualitative ions (m/z) 十 溴 联 苯 醚 Polybrominate diphenyl etheṟ 209,(BDE-209) 带 C 12 的 十 溴 联 苯 醚 C 12BDE 邻 苯 二 甲 酸 脂 组 分 Phthalate esters (PAEs) 邻 苯 二 甲 酸 二 甲 酯 Dimethyl phthalate (DMP) 邻 苯 二 甲 酸 二 乙 酯 Diethyl phthalate (DEP) 苯 酸 苄 酯 Benzyl benzoate (BB) 氘 代 - 邻 苯 二 甲 酸 二 丁 酯 D4-dibutyl phthalate (DBP-D4) 氘 代 - 邻 苯 二 甲 酸 二 丁 酯 Dibutyl phthalate,(dbp) , 167 邻 苯 二 甲 酸 丁 基 苄 基 酯 Benzyl butyl phthalate (BBP) , 238 邻 苯 二 甲 酸 (2- 乙 基 己 基 ) 酯 Di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) , 279 邻 苯 二 甲 酸 二 辛 酯 Dioctyl phthalate (DNOP) 双 酚 A 硅 烷 化 后 Bisphenol A (BPA) BPA-D16( 氘 代 双 酚 A,D16-bisphenol A) , 386 带 C 12 的 双 酚 A C 12-BPA ( C 12-bisphenol A) , 369 双 酚 A Bisphenol A (BPA) 图 3 Fig.3 邻 苯 二 甲 酸 脂 组 分 标 准 样 品 (a) 和 血 清 样 品 (b) 的 色 谱 图 Chromatogram of phthalate esters of standard sample (a)and serum sample(b) DḆ 5MS(30 m 0.25 mm i.d, 0.25 mm) 毛 细 管 柱, 载 气 为 He, 恒 流, 柱 流 量 为 1 ml/min, 无 分 流 进 样, 进 样 量 为 1 ml 进 样 口 温 度 为 270, 升 温 程 序 : 初 始 温 度 100, 保 持 1 min; 以 20 /min 升 温 至 220 ; 以
5 第 8 期 邵 敏 等 : 人 体 血 清 中 的 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 连 续 在 线 分 离 及 气 相 色 谱 - 质 谱 测 定 /min 升 温 至 260 ; 以 20 /min 升 温 至 280, 保 持 10 min 标 准 与 血 清 样 品 色 谱 图 见 图 4 质 谱 条 件 同 检 测 离 子 见 表 1 图 4 Fig.4 双 酚 A 血 清 样 品 (a) 和 血 清 样 品 (b) 的 色 谱 图 Chromatogram of bisphenol A of standard sample (a)and serum sample (b) 2.4 质 量 保 证 和 质 量 控 制 在 实 验 过 程 中, 为 确 保 数 据 的 可 靠 与 精 确, 运 用 方 法 空 白 空 白 加 标 样 品 重 复 和 内 标 法 定 量 进 行 质 量 控 制 每 10 个 实 验 样 品 都 要 做 方 法 空 白 和 加 标 实 验, 在 化 学 前 处 理 时, 所 有 样 品 中 都 要 加 3 种 组 分 回 收 率 指 示 物 PCB209,DBP-D4 和 BPA-D16 进 行 示 踪, 并 且 在 样 品 上 机 分 析 前 分 别 在 PBDEs 组 分 加 入 内 标 物 BDE118 和 C 12-BDE209,PAEs 组 分 中 加 入 BB, 在 BPA 组 分 中 加 入 C 12-BPA 用 以 定 量 分 析 3 结 果 与 讨 论 3.1 标 准 曲 线, 检 出 限, 精 密 度 与 回 收 率 本 实 验 采 用 内 标 标 准 曲 线 法 对 待 测 组 分 进 行 定 量 分 析, 即 以 不 同 浓 度 的 标 准 溶 液 中 的 待 测 物 质 和 内 标 物 的 峰 面 积 之 比 为 纵 坐 标, 以 标 准 溶 液 的 浓 度 为 横 坐 标, 建 立 标 准 曲 线, 从 而 可 从 标 准 曲 线 中 查 出 待 测 组 分 含 量 此 法 可 清 除 仪 器 原 因 对 实 验 结 果 的 影 响 PBDEs 的 标 准 溶 液 的 浓 度 分 别 为 0.2, 0.4, 0.6, 1.0, 2.0, 3.0, 5.0 和 10.0 mg/l;bde-209 的 标 准 溶 液 的 浓 度 分 别 为 1.0, 3.0, 5.0, 7.0, 10.0, 12.0, 15.0 和 20.0 mg/l;paes 的 标 准 溶 液 的 浓 度 分 别 为 10, 20, 50, 100, 200, 300 和 500 mg/l;bpa 的 标 准 溶 液 的 浓 度 分 别 为 20, 50, 100, 200, 300, 400 和 500 mg/l PBDEs 目 标 化 合 物 的 检 出 限 为 0.005~0.048 mg/l; PAEs 目 标 化 合 物 的 检 出 限 为 0.103~0.833 mg/l; BPA 的 检 出 限 是 mg/l 将 3 mg/l PBDEs,100 mg/l PAEs 和 100 mg/l BPA 衍 生 化 后 的 标 准 溶 液 连 续 上 机 测 定 5 次,PBDEs 的 RSD 值 分 别 为 2.76% ~10.9%,PAEs 的 RSD 值 分 别 为 5.63% ~9.90% ;BPA 的 RSD 值 为 3.03% PAEs 方 法 空 白 中 检 测 出 DMP, DEP, DBP, DEHP 和 DNOP, 在 实 际 样 品 中 扣 除 空 白,BPA 方 法 空 白 中 无 BPA; 方 法 空 白 加 标 实 验 是 采 用 萃 取 溶 液 乙 醚 作 为 基 质 进 行 空 白 加 标,PBDEs 目 标 化 合 物 回 收 率 为 70.5% ~ 117.4% ;PAEs 目 标 化 合 物 回 收 率 为 48.5% ~127.6%,BPA 目 标 化 合 物 回 收 率 为 128.6% ; 实 际 血 清 样 品 中, 加 标 回 收 物 PCB209,DBP-D4 和 BPA-D16 回 收 率 分 别 为 74.8% ~88.5%,78.7% ~97.0% 和 76.3% ~93.1% 3.2 实 验 样 品 的 分 析 本 实 验 分 析 了 7 个 血 清 样 品, 均 采 自 患 有 子 宫 妇 科 疾 病 的 患 者 [17,18] (a) 多 溴 联 苯 醚 的 各 组 分 含 量 见 表 2 与 其 他 国 家 人 体 血 清 中 PBDEs 的 分 布 形 式 明 显 不 同 其 他 国 家 人 体 血 清 多 以 BDE47,99,100,153,154 为 主 要 同 系 物 ; 而 在 这 次 实 验, 其 它 成 分 几 乎 没 有, 只 有 BDE209 含 量 较 高, 占 PBDEs 的 59% 以 上, 这 可 能 与 阻 燃 剂 的 使 用 有 关 如 前 所 述, 其 中 十 溴 联 苯 醚
6 1144 分 析 化 学 第 40 卷 在 工 业 中 用 途 最 广, 污 染 环 境 最 为 严 重 其 数 值 与 其 他 国 家 人 体 血 清 中 的 PBDEs 相 比 [19], 明 显 偏 低, 可 能 是 由 于 中 国 工 业 发 展 较 晚,PBDEs 在 生 物 与 人 体 内 富 集 尚 不 严 重 表 2 7 个 人 体 血 清 样 品 中 的 多 溴 联 苯 醚 含 量 Table 2 Concentration of polybrominated diphenyl ethers (mg/l)in 7 human serum samples 多 溴 联 苯 醚 7 个 病 例 Brominated diphenyl ether (7 Examples) BDE 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 纵 膈 子 宫 Uterus septus 前 庭 大 腺 脓 肿 Bartholinian abscess 子 宫 肌 瘤 Hysteromyoma 子 宫 内 膜 异 位 症 Endometriosis uterina 2,4,4 - 三 溴 联 苯 醚 BDE-28 2,2,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 BDE-47 2,3,4,4 - 四 溴 联 苯 醚 BDE-66 2,2,4,4,6- 五 溴 联 苯 醚 BDE-100 2,2,4,4,5- 五 溴 联 苯 醚 BDE-99 十 溴 联 苯 醚 BBDE-209 PBDEs BDE209/ PBDEs (% ) BDE 中 值 Median 0.87 检 出 限 Limit of detection (b) 邻 苯 二 甲 酸 脂 的 含 量 见 表 3 BBP 未 检 出,DBP,DEP,DBP,DEHP 和 DNOP 均 被 检 出, 说 明 PAEs 在 人 们 日 常 生 活 中 污 染 的 普 遍 性, 含 量 范 围 在 20.46~ mg/l, 尤 其 是 DEHP 含 量 很 高, 可 达 mg/l, 中 值 为 mg/l, 其 原 因 主 要 是 这 种 材 料 是 目 前 工 业 主 要 使 用 的 增 塑 剂 有 关, 它 普 遍 存 在 人 们 生 活 的 介 质 当 中 此 外,DBP 的 数 值 也 较 高 (12.62 mg/l), 此 结 果 与 已 报 道 的 PAEs 在 环 境 及 血 清 [9,,14] [14] 中 的 污 染 状 况 吻 合, 代 兴 碧 等 报 道 城 市 儿 童 血 清 中 DEP,DBP 和 DEHP 含 量 ( 中 位 数 ) 分 别 为 2.60,35.90 和 mg/l, 农 村 儿 童 血 清 中 DEP,DBP 和 DEHP 含 量 ( 中 位 数 ) 分 别 为 0.00,40.60 和 [9] mg/l; 黄 晓 群 等 指 出 人 体 血 清 中 DEHP>DBP>DEP>DNOP>DMP, 该 结 果 与 本 实 验 结 果 一 致, 只 是 本 次 实 验 是 采 用 GC-MS 测 定, 发 现 GC 进 样 口 带 来 DEP 污 染, 无 法 消 除, 所 以 DEP 数 据 被 删 除 DEHP 和 DBP 数 值 变 化 较 大, 可 作 为 区 分 雌 性 水 平 高 的 患 者 与 健 康 人 群 的 指 标 表 3 7 个 人 体 血 清 样 品 中 的 邻 苯 二 甲 酸 脂 含 量 Table 3 Concentration of phthalate esters (mg/l)in 7 human serum samples 7 个 病 例 7 Examples 邻 苯 二 甲 酸 二 甲 酯 Dimethyl phthalate DMP 邻 苯 二 甲 酸 二 乙 酯 Diethyl phthalate DBP 邻 苯 二 甲 酸 (2- 乙 基 己 基 ) 酯 Di(2-ethylhexyl)phthalate DEHP 邻 苯 二 甲 酸 二 辛 酯 Dioctyl phthalate DNOP 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 纵 膈 子 宫 Uterus septus 前 庭 大 腺 脓 肿 Bartholinian abscess 子 宫 肌 瘤 Hysteromyoma 子 宫 内 膜 异 位 症 Endometriosis uterina 中 值 Median PAEs 范 围 Range 20.46~ PAEs 中 值 Median 检 出 限 Limit of Detection (c) 双 酚 A 的 含 量 见 表 4 石 峻 岭 等 [10] 指 出, 普 通 人 群 中 血 清 双 酚 A 的 浓 度 正 常 基 准 值 应 低 于 6.80 mg/l, 本 研 究 的 7 个 血 清 样 品 的 BPA 含 量 均 较 高 (9.66~110. mg/l), 中 值 为 mg/l, 这 与 血 清 [15] 提 供 者 的 医 学 背 景 相 吻 合, 她 们 都 患 妇 科 不 孕 症, 雌 激 素 水 平 较 高 此 外, 肖 国 兵 等 对 环 氧 树 脂 生 产
7 第 8 期 邵 敏 等 : 人 体 血 清 中 的 多 溴 联 苯 醚 邻 苯 二 甲 酸 酯 和 双 酚 A 的 连 续 在 线 分 离 及 气 相 色 谱 - 质 谱 测 定 1145 过 程 中 接 触 双 酚 A 的 男 性 工 人 的 血 清 中 双 酚 A 水 平 及 其 对 性 激 素 水 平 的 影 响 进 行 了 研 究 接 触 组 ( 工 人 ) 的 血 清 双 酚 A 水 平 显 著 高 于 对 照 组 ( 健 康 男 性 人 群 ), 其 平 均 水 平 为 mg/l 表 4 7 个 人 体 血 清 样 品 中 的 双 酚 A 含 量 Table 4 Concentration of bisphenol A in 7 human serum samples 7 个 病 例 7 Examples 双 酚 A Bisphenol A (BPA,mg/L) 7 个 病 例 7 Examples 双 酚 A Bisphenol A (BPA,mg/L) 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 9.66 子 宫 肌 瘤 Hysteromyoma.94 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 子 宫 内 膜 异 位 症 Endometriosis uterina 继 发 性 不 孕 Secondary infertility 中 值 Median 纵 膈 子 宫 Uterus septus 检 出 限 Limit of Detection 前 庭 大 腺 脓 肿 Bartholinian abscess 110. 致 谢 助, 在 此 一 并 致 谢 感 谢 广 州 医 学 院 附 属 第 二 医 院 刘 颖 提 供 血 清 样 品 邓 红 梅 在 实 验 和 样 品 分 析 中 给 予 了 帮 References 1 ColbornT,VomsaalFS,SotoA M.Environ.HealthPerspect.,1993,101(5):378~384 2 ZHAO Zhe-Wen,CHANG Qin,LIANG Zhi-Qing.ChineseJournalof ClinicalRehabilitation,2004,8(9): 1724~1725 赵 泽 文, 常 青, 梁 志 清. 中 国 临 床 康 复,2004,8(9):1724~ DarnerudPO.Environ.Int.,2003,29:841~853 4 YANGZai-Fu,ZHAO Xiao-Xiang.EcologyandEnvironmentalSciences,2005,14(1):108~112 杨 再 福, 赵 晓 祥. 生 态 环 境,2005,14(1):108~112 5 LIZi-Yang,CHEN Yong-Heng.ScienceTechnologyandEngineering,2011,11(1):97~105 李 子 扬, 陈 永 亨. 科 学 技 术 与 工 程,2011,11(1):97~105 6 QU Wei-Yue,BIXiṉHui.ChineseJ.Anal.Chem.,2007,35(7):1015~1017 屈 伟 月, 毕 新 慧. 分 析 化 学,2007,35(7):1015~ LIANGChuṉYing,DENG Hong-Mei,CHEN Yong-Heng.JournalofEnvironmentand Health,2009,26(11): 996~998 梁 春 营, 邓 红 梅, 陈 永 亨. 环 境 与 健 康 杂 志,2009,26(11):996~998 8 ZENGFeng,CHENLi-Xuan,CUIKuṉYan.ChineseJ.Anal.Chem.,2005,33(8):1063~1067 曾 锋, 陈 丽 旋, 崔 昆 燕. 分 析 化 学,2005,33(8):1063~ HUANG Xiao-Qun,LIU Hong-He,WANG Hui.ChinaTropicalMedicine,2007,7(8):1443~1445 黄 晓 群, 刘 红 河, 王 晖. 中 国 热 带 医 学,2007,7(8):1443~ SHIJuṉLing,YANGShui-Lian,XIAO Guo-Bing,ZHENG Li-Xing,ZHOU Zhi-Jun.JournalofEnvironmental & OccupationalMedicing,2004,21(3):190~193 石 峻 岭, 杨 水 莲, 肖 国 兵, 郑 力 行, 周 志 俊. 环 境 与 职 业 医 学,2004,21(3):190~ LIXu,LIUJiaṉLin,WANGXiao-Li,JIAN Ying-Hong,DONGDe-Ming,LINa.Chem.J.ChineseUniversities, 2008,29(11):2142~2148 李 鱼, 刘 建 林, 王 晓 丽, 翦 英 红, 董 德 明, 黎 娜. 高 等 学 校 化 学 学 报,2008,29(11):2142~ WU Shu-Yan,XU Qian,CHEN TiaṉShu,WANG Min,YING Xue-Yan,ZHANG Ni-Ping,SHEN YaṉYan, WENZuo-Yang,GUZhong-Ze.ChineseJ.Anal.Chem.,2010,38(4):503~507 吴 淑 燕, 许 茜, 陈 天 舒, 王 敏, 殷 雪 琰, 张 妮 萍, 申 艳 艳, 温 作 扬, 顾 忠 泽. 分 析 化 学,2010,38(4):503~507 LU Yi-Bing,FU Qiang,CHEN Ying.EnvironmentalMonitoringInChina,2007,23(5):66~70 吕 怡 兵, 付 强, 陈 瑛. 中 国 环 境 监 测,2007,23(5):66~70 14 DAIXi-Bi,SHU Wei-Qun,DAN Hong,ZHAO Qing,LIU Yin,ZHAO Li-Na.Journalof Environmentand Health,2008,6:503~505 代 兴 碧, 舒 为 群, 但 洪, 赵 清, 刘 颖, 赵 丽 娜. 环 境 与 健 康 杂 志,2008,6:503~ XIAO Guo-Bing,SHIJuṉLing,HE Guo-Hua,ZHENG Li-Xing,WU Tong-Jun,ZHOU Zhi-Jun.Journalof
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