2015 年 第 1 期 ( 总 第 25 期 ) 2015 年 1 月 目 录 CONTENTS 01 国 际 信 息 动 态 1 3 国 际 研 究 动 态 24 科 技 项 目 研 究 进 展 27 主 要 研 究 成 果 主 办 单 位 : 北 京 三 元 种 业 科 技 股 份 有 限 公

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2 2015 年 第 1 期 ( 总 第 25 期 ) 2015 年 1 月 目 录 CONTENTS 01 国 际 信 息 动 态 1 3 国 际 研 究 动 态 24 科 技 项 目 研 究 进 展 27 主 要 研 究 成 果 主 办 单 位 : 北 京 三 元 种 业 科 技 股 份 有 限 公 司 畜 牧 研 究 院 主 编 : 张 广 安 副 主 编 : 钟 景 田 责 任 编 辑 : 马 慧 阚 远 征 罗 维 真 王 桂 英 潘 学 峰 编 委 会 : 张 广 安 陈 华 林 李 锡 智 刘 林 周 海 深 马 翀 朱 玉 林 卢 纪 和 韩 广 文 黄 毅 贾 泽 颖 邓 露 芳 郭 亮 syzyyjy@163.com

3 国 际 信 息 动 态 仔 猪 达 到 最 佳 生 长 速 度 所 需 的 锌 元 素 研 究 发 现, 服 用 锌 元 素 产 品 的 猪 只 发 育 状 况 并 无 显 著 变 化 对 于 用 于 多 数 商 业 用 途 的 仔 猪, 无 机 源 中 含 25mg/kg 锌 的 标 准 是 最 低 的 安 全 目 标 氧 化 锌 有 防 治 腹 泻 的 特 点, 锌 的 价 值 因 此 被 人 广 泛 关 注 但 是, 这 种 营 养 元 素 在 许 多 生 物 功 能 中 都 发 挥 作 用, 其 通 过 蛋 白 质 合 成 和 抗 氧 化 防 护 影 响 动 物 发 育 情 况 这 让 锌 这 种 营 养 素 成 为 了 实 现 动 物 最 佳 生 长 速 度 和 保 证 健 康 的 关 键 在 最 新 的 一 项 研 究 中,500 头 仔 猪 在 18 日 龄 时 断 奶, 之 后 分 别 饲 喂 含 有 和 100 毫 克 / 千 克 无 机 锌 的 容 量, 其 中 锌 元 素 分 别 以 无 机 锌 有 机 锌 或 源 自 有 机 和 无 机 饲 料 的 各 50% 的 50 毫 克 锌 / 千 克 组 合 饲 喂 猪 只 猪 只 分 别 于 饲 喂 第 0 天 10 天 和 35 天 后 屠 宰, 确 定 猪 肝 脏 组 织 矿 物 浓 度 和 抗 氧 化 活 性 以 及 肝 脏 十 二 指 肠 和 空 肠 中 金 属 硫 蛋 白 的 含 量 研 究 结 果 显 示, 喂 养 补 充 锌 元 素 (25 毫 克 / 千 克 及 以 上 ) 饲 料 的 猪 只 发 育 情 况 并 无 显 著 变 化, 而 那 些 喂 养 不 加 锌 (P 0.05) 的 基 础 饲 料 的 猪 只 的 发 育 反 而 更 好 因 此, 就 发 育 情 况 而 言, 源 自 有 机 或 无 机 饲 料 的 25 毫 克 锌 / 千 克 似 乎 已 经 足 量 之 前 的 研 究 也 证 实, 猪 只 对 锌 的 实 际 需 要 量 为 15 毫 克 / 千 克, 另 外 的 10 毫 克 / 千 克 很 可 能 与 肌 醇 六 磷 酸 抗 营 养 作 用 形 成 了 化 学 键 然 而,25 毫 克 / 千 克 远 远 低 于 行 业 的 添 加 水 平 ( 一 般 为 50~100 毫 克 / 千 克 ) 从 健 康 测 定 数 据 来 看, 饲 喂 含 有 75 毫 克 / 千 克 的 有 机 锌 和 100 毫 克 / 千 克 的 无 机 锌 日 粮 的 猪 只 肝 脏 中 锌 的 浓 度 已 达 到 最 大 化 基 于 以 上 数 据, 研 究 人 员 认 为, 自 从 用 于 2012 年 猪 只 营 养 标 准 (NRC, 2012) 数 据 公 布 以 来, 猪 只 的 健 康 和 收 益 要 求 已 经 发 生 了 变 化 然 而 这 些 健 康 福 利 却 没 有 产 生 任 何 实 际 效 果, 因 此 对 于 多 数 商 业 化 应 用 而 言, 无 机 饲 料 中 含 25 毫 克 / 千 克 锌 的 标 准 是 最 低 的 安 全 目 标 3

4 国 际 信 息 动 态 专 家 称 复 原 乳 奶 制 品 营 养 指 标 基 本 不 受 影 响 一 段 时 间 以 来, 市 场 上 悄 然 出 现 了 一 种 复 原 乳 奶 制 品, 包 括 常 温 液 态 奶 ( 饮 料 ) 酸 奶 和 乳 酸 菌 饮 料 这 些 产 品 按 照 国 家 规 定, 在 外 包 装 上 大 都 印 有 复 原 乳 三 个 字 所 谓 复 原 乳, 就 是 把 奶 粉 稀 释 后 加 工 生 产 出 来 的 奶 制 品 近 期, 一 些 顾 客 特 别 关 注 复 原 乳 的 营 养, 还 有 少 数 顾 客 怀 疑 复 原 乳 是 不 是 垃 圾 奶 记 者 了 解, 由 于 购 买 奶 粉 比 购 买 生 鲜 乳 价 格 便 宜, 所 以 在 终 端 消 费 市 场 上, 复 原 乳 价 格 也 比 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品 价 格 要 低, 一 般 低 10%-20% 左 右 ; 一 些 小 品 牌 的 复 原 乳, 一 般 要 低 30% 到 40% 左 右 记 者 随 机 询 问 一 些 顾 客 对 复 原 乳 了 解 多 少, 一 大 半 的 顾 客 对 之 了 解 甚 少, 有 的 竟 然 对 此 完 全 不 了 解 ; 只 有 一 小 半 的 年 轻 顾 客 知 道 在 这 其 中, 又 有 一 半 的 顾 客 表 示, 不 在 乎 所 买 的 奶 制 品 是 不 是 用 奶 粉 还 原 生 产 的 复 原 乳, 只 要 价 格 实 惠 就 可 以 ; 而 另 一 半 的 顾 客 则 明 确 表 示, 会 谨 慎 购 买 复 原 乳, 因 为 担 心 其 营 养 成 分 不 如 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品 丰 富 本 市 一 家 乳 品 生 产 企 业 负 责 人 告 诉 记 者, 用 奶 粉 生 产 的 复 原 乳 跟 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品 最 大 的 不 同 在 于 口 感 为 此, 一 些 乳 品 生 产 企 业 就 在 复 原 乳 中 加 入 红 枣 汁 水 果 块 食 用 香 精 等 增 香 增 甜, 改 善 复 原 乳 的 口 感, 吸 引 顾 客 购 买 ; 而 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品 中 一 般 不 会 添 加 食 用 香 精 等 改 善 口 感 的 东 西 复 原 乳 可 以 喝 吗, 其 营 养 成 分 到 底 如 何 呢? 日 前, 记 者 咨 询 了 市 乳 品 食 品 检 测 中 心 专 家 有 关 专 家 介 绍, 用 奶 粉 生 产 的 复 原 乳 跟 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品 相 比, 在 能 量 含 量 蛋 白 质 含 量 脂 肪 含 量 碳 水 化 合 物 含 量 钠 含 量 等 营 养 指 标 上 基 本 相 当, 没 有 明 显 差 别 从 这 个 意 义 上 说, 复 原 乳 可 以 喝, 更 不 是 少 数 人 担 心 的 所 谓 垃 圾 奶 但 是 专 家 也 指 出, 由 于 复 原 乳 是 用 奶 粉 生 产 的, 所 以 在 反 复 多 次 的 加 工 生 产 过 程 中, 其 活 性 物 质 可 能 会 有 所 损 耗, 但 具 体 损 耗 多 少, 目 前 还 没 有 权 威 的 检 测 数 据 顾 客 如 果 不 喜 欢 购 买 复 原 乳, 可 以 购 买 用 生 鲜 乳 生 产 的 奶 制 品, 在 其 配 料 表 中 一 般 都 会 清 楚 地 标 明 用 的 是 生 鲜 乳 ( 生 牛 乳 ), 在 酸 奶 中, 生 鲜 乳 含 量 一 般 不 应 低 于 85% 4

5 国 际 信 息 动 态 新 西 兰 畜 牧 业 最 新 研 究 成 果 : 用 两 用 作 物 饲 养 小 母 牛 效 果 好 新 西 兰 林 肯 大 学 农 业 和 生 命 科 学 系 专 家 的 一 项 研 究 发 现, 用 两 用 谷 类 作 物 和 芸 苔 属 作 物 ( 如 小 麦 和 油 菜 ) 饲 养 小 母 牛, 与 在 草 场 饲 养 相 比, 其 体 重 增 加 更 快 且 排 出 的 尿 液 中 含 氮 物 更 少, 因 此 给 环 境 带 来 的 污 染 更 小 通 常 情 况 下, 各 农 场 每 年 都 需 要 饲 养 小 母 牛 去 补 充 泌 乳 期 存 栏 母 牛 的 数 量 高 质 量 的 饲 料 有 利 于 小 母 牛 如 期 达 到 目 标 体 重, 而 这 直 接 影 响 到 其 成 年 后 的 交 配 和 泌 乳 性 能 但 小 母 牛 尿 液 中 氮 化 物 的 排 泄 也 给 环 境 带 来 压 力 两 用 作 物 是 指 那 些 即 可 在 夏 / 秋 季 当 作 饲 料, 还 能 当 作 谷 物 收 获 的 作 物 这 些 作 物 在 澳 大 利 亚 的 混 合 农 场 里 已 经 种 植 了 20 多 年, 但 在 新 西 兰 被 用 作 奶 牛 替 代 饲 料 还 是 首 次 该 研 究 将 惠 及 全 新 西 兰 的 奶 牛 农 场 主, 目 前 已 有 农 场 对 此 表 示 出 兴 趣 该 项 成 果 已 在 2014 年 澳 大 利 亚 乳 制 品 科 学 博 览 会 上 展 出 亚 洲 猪 只 基 因 有 助 于 现 代 种 猪 育 种 荷 兰 瓦 赫 宁 根 大 学 的 研 究 员 表 示, 当 前 高 产 母 猪 品 种 正 得 益 于 许 多 来 自 亚 洲 的 猪 只 基 因, 如 窝 产 仔 猪 数 研 究 人 员 潜 心 专 研 历 史 解 释 了 当 前 商 品 猪 种 的 历 史 背 景, 这 些 猪 种 是 在 大 约 1000 年 前 由 当 地 野 猪 群 驯 化 而 来 在 19 世 纪 工 业 革 命 期 间, 许 多 中 国 的 猪 种 被 引 进 到 欧 洲 以 改 善 欧 洲 猪 种 的 商 品 性 状, 就 是 这 个 原 因, 欧 洲 培 育 的 种 猪 表 现 出 含 有 大 量 的 欧 洲 和 亚 洲 基 因 品 种 研 究 人 员 称 亚 洲 猪 只 基 因 主 要 是 关 注 窝 产 仔 猪 数, 来 自 亚 洲 逐 渐 融 入 的 基 因 单 倍 体 与 含 有 涉 及 肉 质 发 育 和 繁 殖 力 基 因 的 区 域 有 关, 研 究 发 现 了 来 自 亚 洲 的 芳 香 烃 受 体 (AHR) 基 因 的 非 同 义 突 变, 与 多 种 欧 洲 商 品 猪 品 系 窝 产 仔 猪 数 的 增 加 有 关 这 些 发 现 表 明, 在 19 世 纪 早 期, 提 高 繁 殖 力 是 养 猪 场 的 一 个 重 要 育 种 目 标, 而 且 与 该 性 状 有 关 的 亚 洲 猪 种 基 因 变 异 在 现 在 欧 洲 猪 种 发 展 中 得 到 了 优 先 选 育 该 研 究 主 要 负 责 人 瓦 赫 宁 根 大 学 5

6 国 际 信 息 动 态 MartienGroenen 教 授 表 示, 商 品 猪 基 因 组 的 各 种 元 素, 与 欧 洲 野 猪 相 比, 更 像 中 国 猪 种 他 指 出 : 这 可 能 相 当 令 人 吃 惊, 因 为 已 有 研 究 表 明 大 约 在 1 万 年 前, 亚 欧 两 洲 都 是 相 互 独 立 地 驯 化 的, 人 们 并 不 会 指 望 在 欧 洲 猪 种 中 发 现 亚 洲 猪 种 的 DNA 在 另 一 项 较 早 的 研 究 中, 科 学 家 表 示 商 品 猪 中 的 遗 传 多 样 性 通 常 要 比 当 前 野 猪 群 的 遗 传 多 样 性 要 广 新 西 兰 研 发 新 疫 苗 减 少 牧 场 沼 气 排 放 没 有 沼 气 排 放 的 牛 羊 鹿 养 殖 模 式 将 会 在 未 来 的 几 年 中 出 现 在 新 西 兰 农 场 这 是 由 于 环 境 要 求 的 推 动 经 过 十 年 的 研 究, 科 学 家 们 已 找 到 了 解 决 方 案, 可 以 减 少 农 场 畜 牧 的 废 气 排 放 这 个 解 决 方 案 预 计 2016 年 在 农 场 广 泛 应 用 新 西 兰 的 温 室 气 体 50% 来 自 于 农 业, 来 源 于 牛 羊 和 鹿 的 胃 液 自 2002 年 以 来, 新 西 兰 政 府 和 行 业 资 助 的 研 究 人 员 一 直 在 试 图 解 决 这 个 问 题 Pastora 温 室 气 体 研 究 联 盟 经 理 Mark Aspin 说 : 在 理 论 上, 牛 和 羊 可 以 不 吐 出 任 何 温 室 气 体 但 在 现 实 中, 他 同 意 最 近 他 们 研 究 小 组 发 表 的 结 论, 可 以 达 到 减 少 一 半 的 水 平 这 对 农 场 环 境 是 一 个 好 消 息 他 说 : 我 们 可 以 使 用 排 出 的 温 室 气 体, 利 用 它 为 能 源 使 用 在 畜 牧 动 物 生 产 方 面 沼 气 是 由 反 刍 动 物 的 胃 中 细 菌 产 生 的, 是 一 种 最 有 可 能 引 起 气 候 变 化 的 气 体 之 一 这 些 微 生 物 不 会 在 食 物 分 解 过 程 中 分 解 掉 Aspin 先 生 介 绍 : 他 们 研 制 出 一 种 疫 苗, 可 以 在 动 物 体 内 培 养, 至 少 动 物 可 以 有 能 力 辨 认 这 些 微 生 物 的 威 胁 及 自 身 防 御 和 免 疫 从 另 一 个 方 面, 农 民 们 也 可 以 使 用 这 种 方 法 降 低 沼 气 产 生, 确 保 动 物 尽 可 能 多 的 吃 芸 苔 属 作 物, 如 甘 蓝 萝 卜 油 菜 和 瑞 典 菜 这 样 可 以 降 低 沼 气 从 动 物 体 内 排 出 农 民 提 供 特 殊 饲 料 给 公 牛, 约 在 2016 年, 出 生 的 公 牛 会 减 少 沼 气 排 出 到 2020 年, 可 以 提 供 饲 料 内 加 入 特 殊 的 辅 料 喂 养 动 物, 由 此 降 低 沼 气 排 放 Mark Aspin 称, 新 研 发 的 这 种 疫 苗 可 以 减 低 20% 沼 气 产 生 预 计 用 四 或 五 年 的 时 间 可 以 让 沼 气 产 生 为 0 自 2010 年 以 来, 新 西 兰 政 府 已 投 入 了 1700 万 来 降 低 当 地 农 场 沼 气 一 氧 化 二 氮 和 碳 气 体 的 排 放 6

7 国 际 信 息 动 态 猪 玩 具 风 靡 欧 洲 猪 场 猪 玩 具 在 欧 洲 的 猪 场 越 来 越 流 行, 这 是 解 决 动 物 福 利 问 题 的 一 个 有 效 手 段 在 养 猪 生 产 中, 咬 尾 是 一 个 主 要 的 行 为 问 题, 这 种 行 为 会 导 致 动 物 福 利 下 降, 而 且 会 造 成 巨 大 的 经 济 损 失 有 研 究 表 明, 如 果 一 头 猪 被 咬 掉 尾 巴, 会 导 致 大 约 8 欧 元 (10 美 元 ) 的 损 失 关 于 这 个 问 题, 多 年 来 经 过 大 量 的 科 学 和 实 践 研 究, 仍 未 得 到 有 效 解 决 产 生 咬 尾 行 为 的 原 因 有 很 多, 比 如 维 生 素 缺 乏 动 物 之 间 争 抢 饲 料 圈 舍 内 小 环 境 的 改 变 或 者 在 一 个 小 区 域 内 饲 养 太 多 的 猪 只 等 但 最 可 能 引 起 猪 发 生 咬 尾 的 原 因 是 因 为 猪 只 无 聊 猪 与 这 些 简 单 的 玩 具 玩 耍, 减 少 了 相 互 之 间 的 咬 耳 和 咬 尾 伤 害 的 可 能 性 猪 咬 尾 行 为 的 发 生 是 综 合 因 素 导 致 的 结 果, 一 旦 发 生 可 能 会 导 致 整 个 农 场 都 会 出 现 这 种 问 题 ; 如 果 其 中 一 种 因 素 减 少 或 者 消 除, 这 种 爆 发 就 会 延 迟 甚 至 停 止 其 中 阻 止 猪 咬 尾 行 为 最 简 单 的 一 个 方 法 就 是 使 它 们 不 感 到 无 聊 猪 是 天 生 的 探 险 者, 这 意 味 着 如 果 外 界 没 有 足 够 吸 引 它 们 的 东 西, 它 们 将 会 把 注 意 力 放 在 同 栏 舍 的 同 类 身 上 这 样 就 会 导 致 咬 耳 和 咬 尾 的 发 生, 这 时 候 猪 的 玩 具 就 可 以 派 上 用 场 从 出 生 后 不 久, 猪 就 有 咀 嚼 的 本 能 而 且, 猪 会 在 3~4 周 龄 时 经 历 一 次 换 牙, 并 在 7~8 月 龄 时 再 换 一 次 人 类 婴 儿 在 出 牙 时 期 具 有 咀 嚼 的 欲 望 是 众 所 周 知 的, 那 么 小 猪 也 应 该 是 同 样 的 另 外, 7

8 国 际 信 息 动 态 血 液 对 于 猪 来 讲 更 有 吸 引 力 一 旦 出 现 咬 尾, 有 血 液 渗 出, 会 立 即 引 来 其 它 猪 的 注 意 秸 秆 是 一 种 天 然 的 材 料, 常 被 用 来 使 猪 感 到 舒 适 并 吸 引 猪 的 注 意 力 在 一 个 简 单 的 环 境 中, 长 长 的 尾 巴 会 成 为 一 个 令 猪 只 不 快 的 玩 具 过 去, 去 尾 是 一 个 很 有 效 的 能 阻 止 猪 咬 尾 行 为 发 生 的 手 段 但 是, 越 来 越 多 的 欧 洲 国 家 决 定 禁 止 给 猪 去 尾, 他 们 为 了 给 猪 营 造 一 个 更 好 的 环 境 北 欧 国 家, 比 如 芬 兰 瑞 典 和 挪 威, 甚 至 颁 布 法 律, 认 为 给 猪 去 尾 是 违 法 行 为 随 着 2003 年 1 月 份 欧 盟 理 事 会 第 91/630/EEG 指 令 的 颁 布, 关 于 猪 保 护 的 最 低 标 准 规 定 正 式 实 施 该 指 令 设 立 了 指 导 意 见, 每 个 国 家 可 以 根 据 此 意 见 再 制 定 各 自 的 法 律 这 样, 欧 洲 每 个 国 家 都 有 各 自 关 于 猪 玩 具 的 特 殊 法 律 文 件 例 如 在 丹 麦, 明 确 规 定 猪 玩 具 的 材 料 是 部 分 有 机 体 不 能 变 形 不 可 食 用, 比 如 软 的 PVC 材 料 或 者 木 头 英 国 规 定 猪 玩 具 的 可 变 形 材 料 如 果 不 是 秸 面 每 个 国 家 的 法 律 各 不 相 同, 这 就 使 国 际 上 专 门 生 产 猪 玩 具 的 企 业 所 生 产 的 产 品 很 难 满 足 欧 洲 所 有 的 国 家 但 是, 随 着 去 尾 在 大 多 数 国 家 已 经 变 成 违 法 行 为, 农 场 也 在 不 断 寻 求 其 他 的 方 法 来 阻 止 咬 尾 的 发 生 机 率, 这 也 就 是 猪 玩 具 越 来 越 受 到 关 注 的 一 个 重 要 原 因 为 了 使 猪 在 无 聊 时 不 会 将 注 意 力 放 在 同 伴 身 上, 很 多 农 场 会 在 圈 舍 里 面 挂 上 玩 具, 或 者 秸 秆 做 成 的 包 猪 发 现 后 会 去 撕 咬, 去 玩 这 些 挂 在 绳 子 上 的 东 西 一 些 农 场 甚 至 直 接 将 干 草 直 接 丢 在 圈 舍 里 如 果 农 场 能 认 真 观 察 猪 的 行 为, 在 发 现 其 有 撕 咬 行 为 的 初 级 阶 段 就 采 用 这 些 方 法, 通 常 都 是 奏 效 的 在 猪 舍 里 放 置 一 些 简 单 的 新 玩 具 就 能 吸 引 猪 的 注 意 力, 使 得 秆 干 草 锯 末 或 者 草 皮 这 些 材 料, 就 不 能 接 触 地 如 果 猪 太 过 无 聊, 即 使 去 尾 后 仍 会 导 致 咬 尾 行 为 它 们 不 会 太 过 关 注 同 伴, 从 而 可 以 减 少 撕 咬 行 为 8

9 国 际 信 息 动 态 使 用 猪 玩 具 的 一 个 弊 端 是, 玩 具 有 可 能 成 为 感 染 源 通 常 猪 在 一 个 圈 舍 里 会 呆 数 周 时 间, 随 着 它 们 不 断 长 大 会 被 换 到 一 个 更 大 的 栏 舍 中 去 在 猪 被 转 移 到 另 外 一 个 圈 舍 时, 新 的 圈 舍 要 进 行 消 毒 以 免 疾 病 传 播 所 以, 猪 玩 具 也 应 该 能 较 容 易 消 毒, 或 者 猪 玩 具 采 用 抑 菌 材 料, 这 是 很 重 要 的 猪 的 嗅 觉 非 常 灵 敏 一 个 玩 具 能 散 发 出 气 味 是 吸 引 猪 只 关 注 的 好 方 法, 而 仅 仅 把 玩 具 放 在 圈 舍 中 是 不 够 的 一 个 猪 玩 具 商 品, 应 该 可 以 散 发 气 味, 而 且 在 猪 玩 耍 的 时 候 气 味 还 应 该 增 强, 这 样 可 以 激 发 猪 的 好 奇 心, 去 探 究 这 种 味 道 从 哪 里 发 出 来, 从 而 刺 激 猪 与 玩 具 能 玩 耍 更 长 的 时 间 有 趣 的 是, 玩 具 的 气 味 也 可 以 有 很 多 种, 如 香 草 味 巧 克 力 味 苹 果 味 等 由 于 去 尾 被 逐 渐 禁 止, 农 场 对 于 阻 止 猪 咬 尾 行 为 的 关 注 上 升, 猪 场 玩 具 已 经 成 为 现 代 养 猪 业 的 一 个 新 的 流 行 趋 势 生 产 者 在 持 续 不 断 地 进 行 改 革 创 新, 这 对 动 物 福 利 和 收 益 都 是 很 有 必 要 的 欧 盟 开 展 将 粮 食 残 渣 转 换 成 饲 料 的 研 究 据 欧 盟 官 网 最 新 消 息, 欧 盟 资 助 的 NOSHAN 研 究 项 目 试 图 将 粮 食 残 渣 ( 尤 其 是 水 果 蔬 菜 和 奶 制 品 ) 以 低 成 本 低 耗 能 的 形 式 转 换 成 动 物 饲 料 项 目 有 关 负 责 人 称, 全 球 粮 食 有 三 分 之 一 被 浪 费, 总 计 达 每 年 13 亿 吨 研 究 成 果 将 为 欧 洲 农 民 创 造 新 的 机 会, 并 削 减 欧 洲 对 粮 食 进 口 的 依 赖, 同 时 还 将 在 农 业 废 弃 物 收 集 加 工 处 理 和 饲 料 生 产 等 领 域 创 造 新 的 就 业 机 会 该 项 目 团 队 由 来 自 六 个 欧 盟 国 家 及 土 耳 其 的 研 究 中 心 高 校 和 企 业 组 成, 研 究 工 作 于 2012 年 启 动, 预 计 2016 年 完 成 目 前, 欧 盟 向 欧 洲 生 物 经 济 的 研 究 和 创 新 领 域 投 资 超 过 40 亿 欧 元 生 物 经 济 生 产 了 人 类 大 部 分 可 再 生 生 物 资 源, 其 中 农 业 是 关 键 的 组 成 部 分, 涉 及 粮 食 生 产 安 全 确 保 自 然 资 源 的 可 持 续 利 用 以 及 农 村 地 区 开 发 的 支 持 目 前, 欧 洲 的 生 物 经 济 规 模 达 2 万 亿 欧 元, 提 供 的 工 作 机 会 达 2200 万 个 9

10 国 际 信 息 动 态 猪 只 饮 水 系 统 对 比 提 供 安 全 干 净 便 宜 的 水 源 对 于 猪 只 生 存 至 关 重 要 但 是 饮 水 器 对 于 生 产 能 力 和 效 率 的 影 响 却 常 常 被 忽 视 水 对 于 所 有 生 物 都 是 不 可 缺 少 的 营 养 物 质, 其 重 要 性 却 常 常 被 人 所 忽 视 猪 只 饮 用 水 的 质 量 是 关 键 疾 病 通 过 污 染 物 传 播, 而 杂 质 会 影 响 猪 只 的 饲 料 摄 取 另 外 在 水 质 有 所 保 障 的 前 提 下, 猪 只 也 必 须 能 够 摄 入 足 量 的 水, 以 便 发 挥 最 佳 生 产 性 能 每 头 猪 分 到 的 饮 水 器 数 量 饮 水 器 位 置 以 及 水 流 速 都 需 要 重 点 关 注 市 面 上 主 要 有 三 种 饮 水 器 : 乳 头 式 杯 式 和 槽 式 饮 水 器, 每 种 都 有 不 同 的 造 型 可 供 选 择 本 文 将 讨 论 针 对 不 同 生 产 系 统 和 不 同 生 长 阶 段 的 猪 只 的 各 式 饮 水 器 的 适 用 性 饮 水 器 系 统 设 计 的 卖 点 通 常 在 于 其 减 少 水 浪 费 的 能 力 水 浪 费 会 导 致 污 水 量 水 费 和 排 污 用 电 量 一 齐 升 高, 任 何 一 项 都 触 及 了 生 产 者 的 成 V 形 饮 水 器 本 底 线 饮 水 器 必 备 要 素 必 须 保 证 猪 群 都 能 获 得 源 源 不 断 的 新 鲜 干 净 水 源 供 应, 否 则 猪 只 健 康 和 生 产 表 现 会 受 影 响 水 源 如 有 污 染, 或 水 质 中 矿 物 质 含 量 较 高, 都 会 影 响 猪 只 饮 水 如 果 猪 只 饮 水 量 不 足, 会 降 低 饲 料 摄 取, 影 响 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 水 源 应 处 在 猪 只 活 动 范 围 内 饮 水 器 应 正 确 放 置, 且 数 量 应 与 舍 内 猪 只 数 量 相 匹 配 如 果 饮 水 器 数 量 过 少, 群 体 中 处 于 竞 争 劣 势 的 猪 只 可 能 无 法 摄 入 足 量 的 水 设 备 厂 家 和 质 量 保 证 人 员 通 常 推 荐 每 10 头 猪 须 配 备 1 个 乳 头 式 或 迷 你 碗 / 杯 式 饮 水 器 如 果 采 用 自 由 采 食 或 湿 料 饲 喂 模 式, 猪 只 数 目 可 增 至 15 或 30 头 每 件 饮 水 器 之 间 应 该 隔 开 适 当 的 距 离, 以 便 猪 只 同 时 使 用 如 果 是 单 独 栏 位, 每 个 栏 位 都 必 须 安 装 1 个 饮 水 器 在 大 栏 中, 有 些 款 式 的 饮 水 器 可 以 在 单 个 饮 水 管 道 上 安 装 2 个 或 更 多 饮 水 乳 头, 以 节 省 安 装 成 本 如 果 使 用 料 槽, 应 当 根 据 猪 只 体 重, 计 算 每 头 能 够 分 配 到 的 空 间 面 积 杯 式 和 乳 头 式 饮 水 器 10

11 国 际 信 息 动 态 由 于 哺 乳 前 期 母 猪 乳 汁 中 含 有 充 足 的 水 分, 设 备 厂 家 均 针 对 2 周 龄 以 上 的 仔 猪 提 供 使 用 指 南 但 事 实 上, 引 进 饮 水 器 非 常 重 要, 为 仔 猪 专 门 安 装 乳 头 式 饮 水 嘴 或 碗 / 杯 式 饮 水 器 是 值 得 的 相 应 的, 对 于 新 近 断 奶 仔 猪 刚 进 入 大 栏 中 面 对 陌 生 的 饮 水 器, 可 以 在 其 断 奶 后 头 几 天 提 供 备 选 水 源 要 避 免 饮 水 器 对 猪 只 造 成 危 险 ; 乳 头 式 饮 水 器 尤 其 容 易 伤 到 猪 只, 应 在 周 围 安 装 防 护 设 施 域 另 外, 我 们 还 可 以 选 择 将 饮 水 嘴 设 定 在 中 间 高 度, 这 样 体 型 最 小 的 猪 只 可 以 够 到, 而 体 型 较 大 的 猪 只 也 不 会 浪 费 太 多 水 水 供 给 要 求 和 流 速 由 于 猪 只 不 会 花 费 过 多 时 间 饮 水, 管 理 者 需 要 确 保 饮 水 器 保 持 适 当 流 速, 满 足 猪 只 需 求 饮 水 器 流 速 过 慢 会 影 响 水 的 摄 取, 因 为 猪 可 能 会 变 得 没 耐 心 或 者 没 喝 足 之 前 就 被 挤 出 饮 水 区 母 猪 对 于 水 需 求 量 很 大, 哺 乳 期 尤 甚 针 对 这 一 时 期 饲 养 者 可 以 安 装 相 对 水 压 较 高 的 系 统 同 时 要 避 免 水 流 速 过 快 导 致 水 浪 费 乳 头 式 饮 水 器 适 用 于 所 有 猪 只, 大 栏 环 境 下 乳 头 式 饮 水 器 位 置 应 该 比 在 栏 内 最 小 猪 只 高 出 5 厘 米 这 样 猪 只 基 本 保 持 仰 头 45% 的 饮 水 姿 势, 可 顺 利 喝 到 水 如 果 整 个 育 成 阶 段 都 采 用 同 样 的 圈 舍 模 式, 有 3 种 方 法 确 保 饮 水 器 放 置 在 正 确 的 高 度 可 以 将 饮 水 器 装 在 可 调 节 的 支 架 上, 这 样 可 随 着 猪 只 生 长 调 整 高 度 有 的 饮 水 器 提 供 2 个 不 同 高 度 的 乳 头 式 饮 水 嘴, 但 还 是 只 能 算 作 单 个 饮 水 区 杯 式 饮 水 器 双 乳 头 式 保 护 饮 水 器 很 多 乳 头 式 饮 水 器 上 会 装 有 咬 合 阀 猪 只 饮 水 时 会 咬 下 一 个 金 属 球, 借 助 杠 杆 作 用 释 放 水 源 这 样 避 免 猪 只 饮 水 时 过 多 水 溢 出, 在 生 长 猪 群 中 可 以 将 水 的 使 用 和 浪 费 减 少 三 分 之 一 这 种 饮 水 器 比 常 规 产 品 价 格 高 出 一 倍, 但 是 耐 用 省 水 另 一 种 饮 水 器 配 有 装 置 可 以 在 猪 吞 咽 时 截 住 水 流, 在 生 长 猪 育 成 猪 和 母 猪 群 中 可 以 节 约 50% 的 耗 水 量 在 乳 头 式 饮 水 嘴 周 围 安 装 碗 / 杯 饮 水 器, 可 以 盛 接 从 饮 水 嘴 溢 洒 出 的 水, 减 少 浪 费 有 不 同 的 设 计 尺 寸 可 供 仔 猪 断 奶 猪 育 肥 猪 和 母 猪 使 用 看 到 碗 里 有 水 可 以 诱 碗 式 饮 水 器 11

12 国 际 信 息 动 态 使 哺 乳 期 仔 猪 前 去 饮 水 如 果 饮 水 器 位 置 合 适, 母 猪 仔 猪 都 能 使 用 尺 寸 较 大 的 碗 式 饮 水 器 可 以 容 纳 多 个 仔 猪 同 时 饮 水, 可 算 作 2 个 饮 水 器 饮 水 碗 的 高 度 要 与 仔 猪 体 型 相 匹 配 过 高 仔 猪 会 饮 水 困 难, 过 低 仔 猪 容 易 踏 入 碗 内 污 染 水 源 有 些 碗 式 饮 水 器 有 封 闭 式 设 计 避 免 水 源 被 粪 便 或 木 屑 污 染 圆 形 边 角 的 饮 水 器 可 以 有 效 防 止 仔 猪 受 伤 和 饮 水 嘴 被 损 坏 料 槽 式 饮 水 器 料 槽 式 饮 水 器 在 户 外 饲 养 模 式 中 最 为 常 见, 在 仔 猪 和 断 奶 猪 圈 舍 内 也 有 一 定 需 求 可 视 水 源 可 以 诱 使 猪 只 前 去 饮 水 槽 内 水 源 易 被 饲 料 木 屑 尿 液 或 粪 便 等 物 质 污 染, 须 进 行 定 期 检 查 清 理 料 槽 式 饮 水 器 可 以 手 动 加 水, 也 可 以 调 节 为 在 猪 只 饮 水 时 自 动 加 水 安 装 时 可 以 考 虑 添 加 内 置 咬 嘴, 有 利 于 保 持 饮 水 器 清 洁 户 外 饲 养 模 式 下 可 以 启 用 备 用 蓄 水 池, 以 应 对 寒 冷 天 气 水 资 源 浪 费 水 是 一 种 珍 贵 资 源, 减 少 水 浪 费 能 带 来 经 济 和 环 境 的 双 重 效 益 浪 费 的 水 越 多, 产 生 的 污 水 量 也 就 越 大, 需 要 花 费 更 多 的 人 力 物 力 进 行 储 存 和 排 放 在 生 长 猪 / 育 成 猪 圈 舍, 将 乳 头 式 饮 水 器 高 度 和 水 流 速 调 节 合 适 能 够 减 少 20% 的 水 浪 费 生 产 者 可 以 通 过 水 量 计 监 控 场 内 耗 水 量, 从 而 对 水 流 速, 饮 水 器 高 度 或 类 型 评 估 和 相 应 更 改, 是 非 常 实 用 的 管 理 工 具 商 业 考 虑 生 产 者 都 希 望 拥 有 耐 用 省 水 与 其 饲 养 模 式 相 匹 配 的 饮 水 系 统 由 于 人 们 倾 向 于 关 注 猪 只 生 产 性 能, 评 估 往 往 会 忽 略 不 同 系 统 设 计 层 面 上 的 持 续 差 异 但 是 我 们 必 须 确 保 饮 水 器 安 装 位 置 正 确, 流 速 适 中, 能 够 满 足 每 头 猪 饮 水 需 求 饮 水 器 必 须 进 行 清 洁 维 护, 以 确 保 供 给 不 论 采 取 何 种 饮 水 系 统, 都 是 旨 在 为 猪 只 提 供 充 足 清 洁 的 饮 用 水 12

13 国 际 研 究 动 态 传 统 牛 奶 与 有 机 牛 奶 和 富 含 共 轭 亚 油 酸 牛 奶 中 的 磷 脂 含 量 比 较 西 班 牙 圣 地 亚 哥 德 孔 波 大 学 科 研 人 员 比 较 了 传 统 牛 奶 和 有 机 牛 奶 及 富 含 共 轭 亚 油 酸 (CLA) 牛 奶 中 的 磷 脂 含 量 脂 肪 以 液 滴 或 球 状 形 态 稳 定 分 散 于 乳 中 这 些 脂 肪 球 被 一 层 薄 膜 包 裹, 称 为 乳 脂 肪 球 膜 乳 脂 肪 球 膜 部 分 由 磷 脂 组 成, 具 有 所 谓 的 功 能 性 食 品 和 技 术 创 新 成 分 的 性 质 磷 脂 包 括 磷 脂 酰 乙 醇 胺 (PE) 磷 脂 酰 肌 醇 (PI) 磷 脂 酰 胆 碱 (PC) 磷 脂 酰 丝 氨 酸 (PS) 和 鞘 磷 脂 (SM) 与 常 规 生 产 的 牛 奶 相 比, 有 机 管 理 的 奶 牛 生 产 的 牛 奶 中 含 有 较 高 水 平 的 维 生 素 抗 氧 化 剂 和 不 饱 和 脂 肪 酸, 但 尚 无 学 者 对 其 主 要 磷 脂 含 量 进 行 过 比 较 此 外, 已 有 报 道 称 奶 牛 日 粮 补 充 富 含 多 不 饱 和 脂 肪 的 饲 料 添 加 剂 ( 亚 麻 粕 ) 可 增 加 乳 中 的 磷 脂 含 量 因 为 补 充 亚 麻 粕 和 增 加 不 饱 和 脂 肪 酸 含 量 主 要 是 通 过 调 整 日 粮 使 奶 牛 生 产 出 富 含 共 轭 亚 油 酸 的 牛 奶, 圣 地 亚 哥 德 孔 波 大 学 的 研 究 人 员 还 进 一 步 探 讨 了 这 些 调 整 是 否 会 使 乳 中 含 有 较 高 的 磷 脂 含 量 科 研 人 员 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 - 蒸 发 光 散 射 检 测 技 术, 以 测 定 16 个 有 机 牛 奶 样 品 和 8 个 富 含 共 轭 亚 油 酸 的 牛 奶 样 品 中 PE PI PC PS 和 SM 的 含 量, 同 时, 相 对 应 的 对 照 样 品 即 常 规 生 产 的 牛 奶 在 同 一 天 同 一 区 域 进 行 采 集, 与 有 机 和 富 含 共 轭 亚 油 酸 的 奶 样 进 行 同 步 检 测 研 究 发 现, 与 传 统 牛 奶 和 乳 脂 肪 含 量 相 比, 有 机 牛 奶 和 乳 脂 肪 中 所 有 检 测 的 磷 脂 水 平 显 著 提 高 这 主 要 是 由 于 两 个 系 统 中 牛 奶 生 产 之 间 的 差 异, 其 中 最 具 影 响 的 可 能 是 日 粮 和 运 动 的 差 异 与 传 统 的 牛 奶 乳 脂 肪 相 比, 富 含 CLA 的 牛 奶 乳 脂 中 PI PS 和 PC 水 平 显 著 升 高, 这 也 归 因 于 日 粮 的 差 异, 因 为 富 含 CLA 牛 奶 的 生 产 配 给 包 括 补 充 亚 麻 粕 并 饲 喂 含 有 较 少 的 玉 米 面 及 较 大 比 例 的 不 饱 和 脂 13

14 国 际 研 究 动 态 肪 酸 在 3 种 类 型 的 牛 奶 中 磷 脂 的 组 成 比 例 相 似, 按 由 高 到 低 顺 序 为 PE>(PC, SM)> PS > PI, 有 机 奶 中 PC 略 多 于 SM, 而 在 富 含 共 轭 亚 油 酸 的 牛 奶 中 则 相 反 T. Ferreiro, L. Gayoso, J.L. Rodríguez-Otero. Milk phospholipids: Organic milk and milk rich in conjugated linoleic acid compared with conventional milk. Journal of dairy science 应 用 测 力 板 运 动 学 监 测 和 加 速 计 方 法 对 母 猪 跛 行 进 行 测 定 加 拿 大 圭 尔 夫 大 学 科 研 人 员 使 用 由 四 个 独 立 平 台 组 成 且 每 个 平 台 装 有 称 重 传 感 器 的 测 力 板 来 测 量 猪 只 四 肢 重 量 分 布 用 以 评 估 母 猪 跛 行 重 力 读 数 的 平 均 速 率 在 15min 内 每 秒 读 取 14 次 研 究 人 员 选 取 10 头 母 猪 作 为 试 验 动 物, 其 中 5 头 为 跛 行 母 猪,5 头 为 体 况 良 好 的 母 猪, 连 续 两 天 搜 集 所 有 测 试 母 猪 的 四 肢 重 量 分 布, 每 天 测 定 两 次, 用 以 评 估 测 量 的 可 重 复 性 同 时, 试 验 选 取 两 个 不 同 地 点 的 61 头 母 猪, 根 据 是 否 跛 行 进 行 视 觉 评 分, 采 用 3 分 评 分 制 (0= 正 常 步 态 ;1= 步 态 异 常, 和 / 或 僵 硬 ;2 = 缩 短 步 幅, 和 / 或 母 猪 把 重 量 减 轻 或 避 免 把 重 量 放 在 1 条 腿 上 ) 使 用 测 力 板 ( 重 量 百 分 比 对 侧 腿 承 重 的 比 值 重 量 转 移 和 幅 度 的 负 重 和 去 重 ) 运 动 学 监 测 ( 速 度 步 长 摆 动 时 间 站 立 时 间 脚 的 高 度 及 腕 和 跗 关 节 角 度 平 均 振 幅 ) 和 加 速 计 (24 小 时 内 的 站 立 时 间 饲 喂 过 程 中 步 进 频 率 和 给 料 后 俯 卧 延 迟 ) 对 每 头 母 猪 的 跛 行 情 况 进 行 测 定 研 究 发 现, 母 猪 间 用 测 力 板 记 录 各 项 指 标 的 变 异 系 数 均 低 于 15%, 反 映 出 良 好 的 试 验 重 复 性 使 用 测 力 板 进 行 测 定 时, 只 有 跛 行 评 分 间 重 量 转 移 频 率 和 对 侧 腿 的 重 量 比 值 不 同 与 得 分 0 和 1 的 母 猪 相 比, 得 分 为 2 的 母 猪 前 腿 (P = ) 和 后 腿 (P = ) 的 重 量 转 移 频 率 较 高 随 着 后 肢 跛 行 分 数 增 加, 对 侧 腿 承 重 比 值 显 著 下 降 (P = 0.014) 此 外, 不 同 地 点 的 猪 只 运 用 以 上 方 法 测 定 的 结 果 也 呈 现 出 显 著 差 异 (P <0.01), 这 些 差 异 可 能 是 包 含 很 多 原 因, 不 仅 限 于 遗 传 力 和 舍 饲 管 理 方 式 的 不 同 研 究 结 果 表 明 : 当 猪 只 腿 部 重 量 转 移 时 所 施 加 的 重 量 如 果 不 对 称, 则 测 力 板 方 法 应 为 鉴 定 跛 行 的 良 好 指 标 对 前 后 肢 的 多 因 素 分 析 显 示, 与 动 物 运 动 ( 来 自 运 动 学 的 检 测 ) 和 静 止 ( 来 自 测 力 板 和 加 速 度 计 的 测 定 ) 相 关 的 变 量 之 间 具 有 相 对 独 立 性 因 此, 在 评 定 母 14

15 国 际 研 究 动 态 猪 的 各 种 跛 行 情 况 时, 需 将 静 态 和 动 态 方 法 结 合 应 用 图 2 猪 只 15 个 反 射 标 记 的 位 置 ( 每 条 腿 3 个 标 记 和 后 背 3 个 标 记 ) 图 1 测 力 板 包 含 板 条 箱, 安 装 在 前 方 地 板 上 的 一 个 自 动 饲 喂 装 置, 四 个 独 立 的 平 台, 每 个 平 台 上 装 有 一 个 称 重 传 感 器 S. Conte, R. Bergeron, H. Gonyou, J. Brown, F. C. Rioja-Lang, L. Connor and N. Devillers. Measure and characterization of lameness in gestating sows using force plate, kinematic, and accelerometer methods. J ANIM SCI : 干 奶 期 长 度 对 奶 牛 生 产 性 能 体 况 代 谢 和 肝 葡 萄 糖 代 谢 的 影 响 干 奶 期 (DP) 的 长 度 影 响 围 产 期 奶 牛 能 量 代 谢 及 随 后 泌 乳 期 的 产 奶 性 能 介 于 此, 德 国 莱 布 尼 兹 研 究 所 科 研 人 员 调 查 了 商 业 牧 场 中 干 奶 期 分 别 为 28 天 (n = 18) 56 天 (n = 18) 和 90 天 (n = 22) 时 荷 斯 坦 奶 牛 ( 体 重 >10,000 kg, 产 奶 时 间 305 d) 的 产 奶 量 体 况 代 谢 及 肝 脏 糖 异 生 酶 的 基 因 表 达 情 况 奶 牛 饲 喂 全 混 合 日 粮, 通 过 自 由 采 食 来 调 整 过 长 或 过 短 的 干 奶 期 ( 但 不 适 于 28 天 的 干 奶 期 ) 和 哺 乳 期 在 干 奶 时 预 产 期 前 一 周 产 犊 后 一 周 及 产 后 周, 每 日 记 录 奶 牛 产 奶 量 体 况 评 分 (BCS) 背 膘 厚 (BFT) 和 体 重 (BW) 在 第 和 56 天 采 集 血 液 样 品, 测 定 血 浆 代 谢 物 和 激 素 浓 度 在 第 - 10 和 10 天 进 行 肝 活 检 ( 每 处 理 n = 11) 以 测 定 糖 原 和 肝 总 脂 15

16 国 际 研 究 动 态 肪 含 量 (LFC) 以 及 量 化 丙 酮 酸 羧 化 酶 (PC) 胞 内 磷 酸 烯 醇 式 丙 酮 酸 羧 化 酶 和 葡 萄 糖 -6- 磷 酸 酶 的 mrna 水 平 研 究 发 现, 不 同 处 理 组 之 间 在 泌 乳 期 的 前 8 周 产 奶 量 不 同 干 奶 期 为 28 天 比 90 天 的 乳 蛋 白 含 量 高 干 奶 期 为 90 天 的 牛 奶 中 脂 肪 蛋 白 比 最 高 乳 尿 素 氮 最 低 产 前 奶 牛 体 重 体 况 评 分 和 背 膘 厚 不 同 处 理 组 之 间 存 在 显 著 差 异, 其 中 干 奶 期 为 90 天 的 奶 牛 体 重 体 况 评 分 和 背 膘 厚 最 高 所 有 奶 牛 在 围 产 期 的 非 酯 化 脂 肪 酸 和 羟 基 丁 酸 浓 度 均 有 所 升 高, 其 中 干 奶 期 为 90 天 的 奶 牛 产 后 增 幅 最 大 各 处 理 组 奶 牛 分 娩 前 血 浆 葡 萄 糖 浓 度 均 下 降, 但 干 奶 期 28 天 较 干 奶 期 为 90 天 的 奶 牛 相 比, 血 浆 葡 萄 糖 浓 度 稍 高 同 时, 研 究 还 发 现, 干 奶 期 长 度 也 影 响 血 浆 中 尿 素 胆 固 醇 天 冬 氨 酸 转 氨 酶 和 谷 氨 酸 脱 氢 酶 的 浓 度 所 有 奶 牛 分 娩 时 血 浆 胰 岛 素 浓 度 均 下 降, 但 干 奶 期 28 天 比 56 天 奶 牛 产 后 的 胰 岛 素 浓 度 更 高 奶 牛 分 娩 后 肝 糖 浓 度 降 低 而 糖 原 和 肝 总 脂 肪 含 量 升 高, 干 奶 期 90 天 比 28 天 奶 牛 的 产 后 糖 原 和 肝 总 脂 肪 含 量 高 干 奶 期 90 天 的 奶 牛 产 后 肝 丙 酮 酸 羧 化 酶 mrna 丰 度 最 大 干 奶 期 缩 短 的 奶 牛 葡 萄 糖 代 谢 的 变 化 更 趋 于 平 衡, 而 延 长 干 奶 期 的 奶 牛 则 在 围 产 期 内 由 于 脂 质 和 糖 代 谢 而 表 现 出 更 大 的 代 谢 变 化 C. Weber, B. Losand, A. Tuchscherer, F. Rehbock, E. Blum, W. Yang, R.M. Bruckmaier, P. Sanftleben, H.M. Hammon. Effects of dry period length on milk production, body condition, metabolites, and hepatic glucose metabolism in dairy cows Journal of dairy science

17 国 际 研 究 动 态 影 响 以 色 列 荷 斯 坦 奶 牛 存 活 率 的 环 境 和 遗 传 因 素 该 项 研 究 旨 在 调 查 影 响 以 色 列 荷 斯 坦 奶 牛 畜 群 存 活 多 种 环 境 因 素 的 效 应, 包 括 完 整 和 部 分 记 录 中 初 次 产 犊 年 龄 和 季 节 产 犊 难 易 程 度 产 犊 数 量 及 初 次 产 犊 公 畜 信 息 ; 进 而 评 估 包 括 以 色 列 育 种 指 数 在 内, 畜 群 存 活 和 其 他 性 状 之 间 的 遗 传 相 关 和 遗 传 力 基 础 数 据 包 括 泌 乳 记 录 畜 群 中 的 头 奶 牛,1985 年 开 始 至 截 止 日 期 2013 年 9 月 15 日, 至 少 有 8 年 时 间 畜 群 存 活 从 产 犊 开 始 至 淘 汰 结 束 畜 群 存 活 的 表 型 和 遗 传 趋 势 分 别 为 5.7 和 16.8 天 / 年 遗 传 趋 势 几 乎 呈 线 性, 然 而 表 型 趋 势 显 示 出 4 座 峰 和 3 个 谷 最 短 畜 群 存 活 的 奶 牛 出 生 在 二 月 和 三 月, 畜 群 存 活 最 长 的 奶 牛 出 生 在 九 月 畜 群 存 活 最 大 者 的 产 犊 年 龄 为 23 月 龄, 比 平 均 产 犊 年 龄 少 1 月,( 畜 群 存 活 ) 最 短 者 的 产 犊 年 龄 为 19 月 龄 和 31 月 龄 初 次 产 犊 时 的 难 产 和 双 胞 胎 分 别 降 低 了 畜 群 存 活 大 约 180d 和 120d, 但 两 者 的 互 作 效 应 增 加 了 畜 群 存 活 140d, 畜 群 存 活 的 遗 传 力 为 0.14 尽 管 实 际 上 授 精 种 畜 在 模 型 拟 合 分 析 中 效 应 显 著, 授 精 种 畜 变 异 占 总 变 异 小 于 0.05% 在 例 不 完 全 记 录 的 分 析 中, 难 产 和 双 胞 胎 比 例 的 效 应 非 常 相 似, 且 少 于 完 全 记 录 中 的 效 应 的 50% 中 断 日 期 时 的 怀 孕 使 畜 群 存 活 期 望 值 增 加 了 432d 不 完 全 记 录 中 实 际 畜 群 存 活 和 预 测 畜 群 存 活 的 相 关 性 为 0.44 不 完 全 记 录 和 实 际 畜 群 存 活 之 间 的 遗 传 相 关 在 日 期 中 断 6 月 后 为 0.75, 但 在 中 断 3 年 后 接 近 1 畜 群 存 活 与 头 胎 产 奶 量 乳 脂 乳 蛋 白 产 量 体 细 胞 评 分 (SCS) 母 畜 繁 殖 力 均 呈 正 相 关, 而 体 细 胞 评 分 的 负 值 是 经 济 性 状 中 较 为 理 想 的 畜 群 存 活 与 母 畜 繁 殖 力 和 体 细 胞 评 分 的 相 关 性 绝 对 值 最 高 图 1 每 年 畜 群 存 活 的 表 型 ( 虚 线 ) 和 遗 传 ( 实 线 ) 平 均 值 17

18 国 际 研 究 动 态 图 2 畜 群 存 活 随 初 次 产 犊 年 龄 变 化 的 函 数 ( 实 线 为 模 型 的 预 测 值, 点 为 月 度 平 均 值 ) Winkelman A M, Johnson D L, Harris B L. Application of genomic evaluation to dairy cattle in New Zealand[J]. Journal of dairy science, 2015, 98(1): 日 粮 添 加 抗 氧 化 剂 对 育 肥 猪 生 长 性 能 肝 功 能 及 氧 化 状 态 的 影 响 弗 吉 尼 亚 理 工 大 学 科 研 人 员 探 讨 了 日 粮 添 加 混 合 抗 氧 化 剂 ( 乙 氧 喹 没 食 子 酸 丙 酯 ) 和 维 生 素 E 对 肥 育 猪 生 长 性 能 肝 功 能 和 氧 化 状 态 的 影 响 试 验 选 取 100 头 杂 交 阉 公 猪 ( 体 重 为 10.91±0.65kg, 日 龄 为 36±2 天, 长 白 杜 洛 克 ), 随 机 分 为 5 个 处 理 组 ( 每 个 处 理 组 5 个 重 复, 每 个 重 复 4 头 猪 ) 处 理 组 包 括 :(1)HO: 高 氧 化 剂 日 粮 含 5% 氧 化 豆 油 和 10% 的 多 不 饱 和 脂 肪 酸 源, 占 日 粮 粗 脂 肪 的 5.56% 和 二 十 二 碳 六 烯 酸 (DHA) 的 2.05%;(2)VE: 在 高 氧 化 剂 日 粮 基 础 上 添 加 11 IU/Kg 维 生 素 E;(3)AOX: 在 高 氧 化 剂 日 粮 基 础 上 添 加 抗 氧 化 剂 混 合 物 (135 mg/kg); (4)VE+AOX: 在 高 氧 化 剂 日 粮 基 础 上 添 加 维 生 素 E 和 抗 氧 化 剂 混 合 物 ;(5) SC: 标 准 玉 米 - 大 豆 日 粮 作 为 对 照 组, 日 粮 中 不 含 氧 化 油 和 多 不 饱 和 脂 肪 酸 源 试 验 期 为 118 天 在 第 83 天,HO 组 猪 只 由 于 身 体 状 况 差 而 转 换 成 SC 组 日 粮 研 究 结 果 表 明, 与 对 照 组 相 比, 高 氧 化 剂 日 粮 组 平 均 日 增 重 较 低 ( 在 26d-55d: 分 别 为 0.92 和 0.51 kg; 在 56d-82d: 分 别 为 1.29 和 0.34 kg; P <0.05), 平 均 日 采 食 量 也 较 低 ( 在 26d-55d: 分 别 为 1.84 和 0.96 kg; 在 56d-82d: 分 别 为 3.41 和 1.14 kg; P 18

19 国 际 研 究 动 态 <0.05) 将 高 氧 化 剂 日 粮 组 日 粮 转 换 为 对 照 组 日 粮 后, 在 83d-118d, 其 猪 只 平 均 日 增 重 显 著 高 于 维 生 素 E 组 ( 分 别 为 0.90 和 0.60 kg;p <0.05) 补 饲 抗 氧 化 混 合 物 可 以 恢 复 至 与 对 照 组 组 相 似 的 性 能 水 平 (P>0.05), 整 个 试 验 期 补 饲 抗 氧 化 混 合 物 组 G:F 比 值 显 著 提 高 (0.44 vs. 0.38; P<0.05), 高 氧 化 剂 日 粮 组 在 第 55 天 及 维 生 素 E 组 在 第 118 天 时, 肝 脏 占 BW 的 比 例 高 于 其 他 处 理 组 高 氧 化 剂 日 粮 组 第 55 天 时 血 浆 总 胆 红 素 浓 度 显 著 高 于 VE+ AOX 组 (P <0.05), 而 在 第 118 天 时, 维 生 素 E 组 胆 红 素 浓 度 显 著 高 于 VE+ AOX 组 和 对 照 组 (0.90 vs kg; P<0.05), 血 液 谷 草 转 氨 酶 水 平 的 变 化 趋 势 与 胆 红 素 浓 度 相 类 似 在 第 55 天, 与 对 照 组 相 比, 高 氧 化 剂 日 粮 组 血 浆 中 硫 代 巴 比 妥 酸 反 应 物 (TBARS) 和 羰 的 浓 度 显 著 升 高 (P <0.05), 而 在 118 天 时 则 差 异 不 显 著 ; 除 了 高 氧 化 剂 日 粮 组 在 第 118 天 的 羰 基 浓 度 最 大 外, 肝 脏 TBARS 和 羰 基 浓 度 也 表 现 出 相 似 的 变 化 趋 势 饲 喂 AOX 日 粮 组 的 血 浆 和 肝 脏 TBARS 水 平 及 羰 基 浓 度 与 对 照 组 相 似 该 项 研 究 通 过 使 用 氧 化 应 激 模 型, 得 出 在 高 氧 化 剂 日 粮 基 图 1 第 55 天 和 第 118 天 时, 各 处 理 组 之 间 肝 脏 占 BW 的 比 较 图 2 第 55 天 和 第 118 天 时, 各 处 理 组 之 间 肝 脏 中 硫 代 巴 比 妥 酸 反 应 物 浓 度 比 较 图 3 第 55 天 和 第 118 天 时, 各 处 理 组 之 间 肝 脏 中 羰 基 浓 度 比 较 19

20 国 际 研 究 动 态 础 上 添 加 抗 氧 化 剂 混 合 物 或 添 加 维 生 素 E 和 抗 氧 化 剂 混 合 物, 可 有 效 改 善 猪 只 生 长 性 能 肝 功 能 及 氧 化 应 激 的 血 浆 标 记 物, 但 维 生 素 E 单 独 使 用 时 并 无 此 作 用 效 果 T. Lu, A.F. Harper, J. J. Dibner, J. M. Scheffler. Supplementing antioxidants to pigs fed diets high in oxidants: I. Effects on growth performance, liver function, and oxidative status. J ANIM SCI : 利 用 寿 命 营 养 分 配 模 型 对 奶 牛 生 产 性 状 遗 传 潜 力 个 体 变 异 的 派 生 估 计 法 国 挪 威 和 丹 麦 的 研 究 人 员 探 讨 了 利 用 寿 命 营 养 分 配 模 型 模 拟 奶 牛 遗 传 潜 力 个 体 遗 传 性 的 能 力 一 般 而 言, 模 型 假 设 生 命 功 能 和 基 因 扩 展 参 数 优 先 性 的 动 态 分 布 的 普 通 轨 迹, 并 且 模 型 模 拟 了 性 能 的 个 体 差 异 试 验 搜 集 了 丹 麦 红 牛 丹 麦 荷 斯 坦 牛 和 娟 珊 牛 三 个 品 种 102 头 奶 牛 180 个 泌 乳 期 的 数 据, 这 些 数 据 独 立 于 先 前 制 定 模 型 所 用 的 数 据 通 过 模 型 校 正 获 得 每 个 动 物 的 遗 传 扩 展 参 数 以 最 佳 拟 合 每 头 奶 牛 连 续 泌 乳 期 的 个 体 奶 牛 性 能 该 模 型 能 够 拟 合 每 头 奶 牛 体 重 乳 脂 乳 蛋 白 乳 糖 浓 度 的 个 体 曲 线, 具 有 较 高 的 准 确 度 日 产 奶 量 和 干 物 质 采 食 量 在 泌 乳 早 期 和 中 期 的 预 测 结 果 较 为 满 意, 但 对 泌 乳 晚 期 的 预 测 结 果 不 理 想 品 种 的 胎 次 并 未 显 著 影 响 预 测 精 确 度, 其 中 丹 麦 红 牛 和 丹 麦 荷 斯 坦 牛 的 遗 传 扩 展 参 数 的 平 均 值 相 似, 但 与 娟 珊 牛 显 著 不 同 遗 传 扩 展 参 数 之 间 相 关 系 数 的 范 围 与 文 献 报 道 一 致 总 之, 该 模 型 是 获 得 产 奶 量 乳 成 分 体 储 利 用 和 奶 牛 不 同 生 长 遗 传 性 遗 传 潜 力 估 计 参 数 的 实 用 工 具 且 可 用 于 个 体 奶 牛 生 产 性 能 的 遗 传 变 异 从 环 境 噪 音 中 分 离 出 来 这 个 模 型 可 以 在 个 体 奶 牛 的 寿 命 效 率 上 模 拟 一 个 遗 传 选 择 策 略 的 影 响, 因 此 可 用 于 探 索 未 来 选 择 对 动 物 生 产 性 能 和 效 率 的 影 响 20

21 国 际 研 究 动 态 图 1 GARUNS 模 型 示 意 图, 代 表 不 同 生 命 功 能 能 量 需 求 的, 基 因 扩 展 参 数 联 合 不 同 生 命 功 能 关 系 优 先 级 的 生 命 图 谱, 胎 儿 生 长 衰 老 ( 调 节 亚 模 型 中 ) 胎 儿 生 长 中 的 能 量 需 求 ( 在 操 作 亚 模 型 中 ) 的 优 先 级 并 未 表 现 出 来, 因 为 他 们 被 认 为 是 动 物 个 体 中 最 普 通 的 经 历 总 能 量 需 求 是 不 同 需 求 的 综 合, 可 通 过 适 当 的 日 粮 能 量 密 度 (ed) 计 算 的 DMI 而 得 图 2 目 标 奶 牛 的 体 重 (BW,kg) 产 奶 量 (MY,kg/d) 乳 脂 浓 度 (MCF,kg/kg) 乳 蛋 白 浓 度 (MCP,kg/kg) 和 乳 糖 浓 度 (MCL,kg/kg) 模 型 拟 合 值 ( 实 线 ) 和 实 际 观 测 值 ( 符 号 ) 为 标 示 清 晰,MY 以 MY 15 形 式 表 示 Phuong H.N, et al, Deriving estimates of individual variability in genetic potentials of performance traits for 3 dairy breeds, using a model of lifetime nutrient partitioning. Journal of dairy science[j], 2015, 98(1):

22 国 际 研 究 动 态 通 过 降 低 群 养 母 猪 环 境 温 度 节 约 猪 舍 供 暖 成 本 据 加 拿 大 大 草 原 养 猪 中 心 接 触 按 键 开 关 的 效 果, 以 防 止 按 钮 在 短 2014 年 度 的 中 心 年 度 报 告 中 称, 母 猪 群 时 间 内 被 连 续 启 动 时 造 成 系 统 过 长 时 间 养 系 统 的 操 作 机 制 允 许 群 养 母 猪 自 我 调 运 转 节 环 境 温 度, 这 样 猪 舍 温 度 就 可 以 调 得 在 一 个 环 境 控 制 室 中 安 装 了 一 个 比 较 低, 以 便 节 约 猪 舍 供 暖 成 本 原 型 模 块 在 为 期 两 周 的 试 验 当 中, 用 数 据 记 录 仪 对 环 境 室 的 环 境 温 度 进 行 连 群 养 母 猪 的 环 境 温 度 可 以 维 持 在 比 续 监 控, 并 通 过 摄 像 头 对 母 猪 进 行 24 小 较 低 的 水 平 上, 因 为 这 些 母 猪 有 机 会 展 时 连 续 观 察, 以 便 评 估 母 猪 在 整 个 试 验 现 体 热 调 节 行 为, 例 如 当 猪 舍 温 度 较 低 期 间 操 作 该 机 制 的 过 程 母 猪 选 择 的 平 的 时 候 会 扎 堆, 从 而 节 约 猪 舍 供 暖 的 能 均 温 度, 以 及 优 化 该 操 作 机 制 的 操 作 参 源 养 猪 中 心 科 研 人 员 研 发 了 一 种 让 群 数 养 母 猪 能 够 自 我 调 节 环 境 温 度 的 机 制 两 周 测 定 阶 段 当 中 采 集 的 关 于 该 操 这 种 机 制 通 过 一 种 母 猪 可 以 触 到 并 操 作 作 机 制 及 其 相 关 控 制 器 开 关 与 加 热 器 的 手 动 控 制 开 关 实 现, 这 个 开 关 反 过 来 的 数 据 显 示 了 48 小 时 当 中 室 内 温 度 进 能 够 启 动 猪 舍 辅 助 供 暖 系 统, 并 且 打 开 气 口 附 近 温 度 以 及 按 钮 被 触 动 并 加 热 室 开 关 以 后 可 以 马 上 触 发 开 关 上 方 的 局 部 温 的 情 况 ( 参 见 图 2) 这 个 阶 段 当 中, 散 热 器, 作 为 即 时 反 馈 该 机 制 可 以 让 群 养 母 猪 能 够 操 作 自 己 所 在 空 间 的 供 暖 系 统, 并 维 持 一 个 它 们 自 己 想 要 的 温 度 水 平 这 套 操 作 机 制 的 初 始 设 计 包 括 三 个 计 时 器 和 一 个 隔 离 继 电 器 计 时 器 1 用 来 提 供 电 力 激 活 隔 离 继 电 器, 计 时 器 2 和 3 分 别 用 来 在 设 定 时 间 内 激 活 采 暖 灯 和 猪 舍 加 热 器 同 时, 计 时 器 1 还 用 来 在 设 定 时 间 内 图 1. 原 型 操 作 模 块 ( 插 入 ) 在 控 制 环 境 室 中 测 试 时 的 试 验 布 置 22

23 国 际 研 究 动 态 通 过 进 气 口 进 入 环 境 室 的 空 气 平 均 温 度 为 8.1, 范 围 在 6.5 至 9.2 之 间 另 一 方 面, 室 内 温 度 平 均 大 约 13.1, 范 围 为 11.5 至 16.0 进 气 口 与 室 温 之 间 的 温 差 主 要 是 由 母 猪 的 产 热 及 辅 助 供 暖 系 统 的 产 热 产 生 经 验 证 的 数 据 显 示, 母 猪 选 择 的 温 度 范 围 在 13 至 14, 大 部 分 触 发 开 关 的 情 况 发 生 在 13.5 这 个 温 度 发 生 在 白 天, 母 猪 大 部 分 处 于 清 醒 活 跃 状 态 在 夜 间, 母 猪 睡 眠 时 似 乎 能 够 忍 受 低 达 11.5 的 温 度 此 外, 也 有 的 时 候 在 日 间 室 温 已 经 低 至 13 以 下, 而 母 猪 却 根 本 不 去 碰 供 暖 控 制 开 关 图 小 时 当 中 环 境 控 制 室 内 的 动 物 活 动 区 和 进 气 口 附 近 的 测 量 温 度 以 及 激 发 供 暖 系 统 的 次 数 研 究 结 果 显 示, 通 过 操 作 机 制 和 一 个 可 操 作 的 控 制 开 关 及 其 相 关 功 能, 可 以 成 功 开 发 出 让 母 猪 自 己 控 制 环 境 温 度 的 系 统 该 系 统 能 够 令 人 满 意 地 工 作, 让 母 猪 自 己 控 制 环 境 温 度 研 究 人 员 正 在 准 备 进 行 后 续 试 验, 以 便 确 定 让 群 养 母 猪 自 己 控 制 环 境 温 度 可 节 约 的 能 源 成 本, 同 时 评 估 较 低 温 度 下 母 猪 的 行 为 以 及 最 佳 日 粮 需 要 23

24 科 技 项 目 研 究 进 展 2014 年 种 业 自 立 科 研 课 题 精 子 细 胞 膜 表 面 蛋 白 差 异 性 分 析 一 本 研 究 的 目 的 意 义 性 别 是 影 响 家 畜 生 产 能 力 和 育 种 工 作 的 关 键 因 素 之 一, 人 们 试 图 通 过 人 为 干 预 生 产 出 所 期 望 性 别 的 后 代 哺 乳 动 物 的 性 别 取 决 于 与 卵 子 结 合 的 精 子 的 类 型, 雄 性 动 物 形 成 精 子 时 就 其 所 含 性 染 色 体 的 不 同 分 为 X 精 子 Y 精 子 两 种 类 型 卵 子 与 X 精 子 结 合 产 生 雌 性 后 代, 与 Y 精 子 结 合 则 形 成 雄 性 后 代 为 揭 示 精 子 的 生 命 奥 秘, 很 多 学 者 进 行 了 大 量 的 研 究, 从 基 因 组 水 平 到 蛋 白 水 平 都 进 行 了 很 多 工 作, 并 且 已 经 确 定 出 了 许 多 精 子 特 殊 蛋 白 质, 如 与 卵 子 相 互 作 用 有 关 的 蛋 白 细 胞 核 蛋 白 等, 但 是 许 多 功 能 蛋 白, 由 于 缺 乏 有 效 的 技 术 手 段, 仍 然 没 有 确 定 出 来, 尤 其 是 在 X Y 精 子 差 异 表 达 蛋 白 方 面 的 研 究 更 少 根 据 性 别 形 成 原 理, 许 多 学 者 一 直 在 研 究 精 子 分 离 的 技 术 方 法 自 1925 年 Lush 首 次 报 道 分 离 兔 子 的 精 子 以 来, 许 许 多 多 的 科 学 工 作 者 根 据 精 子 的 密 度 形 态 大 小 活 力 表 面 电 荷 等 特 性, 对 精 子 分 离 进 行 了 探 索, 发 明 了 很 多 方 法, 如 : 白 蛋 白 梯 度 游 动 分 离 法 自 由 电 泳 分 离 法 离 心 沉 积 分 离 法 精 子 体 积 差 异 分 离 法 遗 传 学 分 离 法 等, 但 是 这 些 方 法 都 未 能 在 生 产 上 得 到 推 广 和 应 用 目 前 流 式 细 胞 仪 法 分 离 效 果 最 好, 分 离 纯 度 可 达 90% 以 上, 但 由 于 设 备 昂 贵, 分 离 速 度 慢, 远 远 不 能 满 足 生 产 上 对 性 控 精 液 的 大 量 需 求, 同 时 昂 贵 的 仪 器 及 专 利 限 制 都 迫 使 科 研 人 员 不 得 不 再 寻 找 新 的 分 离 技 术 方 法 同 众 多 精 子 分 离 方 法 相 比 较, 根 据 抗 原 抗 体 反 应 原 理 进 行 精 液 分 离 的 方 法 简 单 易 行, 且 有 可 能 满 足 生 产 中 对 性 控 精 液 的 大 量 需 求, 若 能 找 出 可 用 的 X Y 精 子 膜 差 异 表 达 蛋 白, 就 可 通 过 免 疫 法 对 X Y 精 子 进 行 分 离, 降 低 分 离 成 本 简 化 分 离 方 法 加 快 分 离 速 度, 满 足 生 产 中 对 性 控 精 液 的 大 量 要 求, 简 便 快 速 地 实 现 对 动 物 的 性 别 控 制 二 研 究 内 容 1 试 验 一 : 高 纯 度 性 控 精 液 的 制 备 利 用 现 有 的 流 式 细 胞 精 子 分 离 仪 制 备 纯 度 为 90% 以 上 的 X- 精 子 与 Y- 精 子 各 300 支 包 括 原 精 的 采 集 精 液 的 预 处 理 精 液 的 分 离 等 工 作 2 试 验 二 :X- 精 子 和 Y- 精 子 细 胞 膜 蛋 白 的 提 取 24

25 科 技 项 目 研 究 进 展 将 高 纯 度 X- 精 子 和 Y- 精 子 的 细 胞 膜 与 精 子 细 胞 内 容 物 分 离, 提 取 制 备 性 别 特 异 精 子 细 胞 膜 碎 片 并 通 过 优 化 蛋 白 质 提 取 程 序, 提 取 精 子 细 胞 膜 表 面 蛋 白 3 试 验 三 : 精 子 细 胞 膜 蛋 白 的 差 异 分 析 通 过 建 立 生 物 学 重 复 进 行 蛋 白 双 向 电 泳, 获 得 蛋 白 差 异 表 达 图 谱, 从 而 获 得 奶 牛 X Y- 精 子 蛋 白 差 异 表 达 信 息 三 考 核 指 标 (1) 制 备 纯 度 达 90% 以 上 性 控 X 精 液 和 Y 精 液 ; (2) 建 立 牛 性 控 X 精 子 和 Y 精 子 双 向 电 泳 图 谱 ; (3) 在 核 心 期 刊 发 表 论 文 1 篇 四 材 料 与 方 法 1 性 控 精 液 的 分 离 (1) 精 液 采 集 用 假 阴 道 法 采 集 4 头 北 京 奶 牛 中 心 荷 斯 坦 种 公 牛 的 精 液, 选 择 活 率 75% 以 上 形 态 正 常 的 精 液 用 于 分 离 (2) 鲜 精 处 理 采 集 的 原 精 用 移 液 枪 吸 取 50µL 的 精 液, 用 kimwipe 纸 擦 拭 枪 头, 放 入 到 盛 有 500 微 升 柠 檬 酸 钠 稀 释 液 的 离 心 管 内, 摇 匀, 用 移 液 枪 吸 取 20µL 滴 到 准 备 好 的 载 玻 片 上, 盖 好 盖 玻 片, 移 至 显 微 镜 进 行 镜 检 (3) 精 液 染 色 采 集 的 原 精 液 经 品 质 鉴 定 ( 活 力 密 度 色 泽 ) 后 进 行 染 色, 根 据 精 液 密 度 加 入 染 色 用 的 5mg/mL 的 HO33342, 34 水 浴 锅 内 暗 室 孵 育 45min 后, 加 入 2mL 4% egg yolk 再 用 50μm 过 滤 器 过 滤 到 新 的 上 样 管 (4) 上 机 分 离 性 控 精 液 利 用 流 式 细 胞 仪 SX- MoFlo 精 子 专 用 分 离 设 备 进 行 分 离, 开 启 软 件 分 选 界 面, 点 击 分 选 图 标, 按 照 90% 以 上 的 准 确 率 对 定 向 正 确 的 X 精 子 和 Y 精 子 设 门 分 离, 本 实 验 中 收 集 X 精 子 和 Y 精 子, 死 精 子 废 弃 在 分 选 过 程 中, 随 时 观 察 液 流 图 像 死 精 率 等 变 化, 及 时 调 整, 保 证 分 选 质 量 (5) 冷 冻 保 存 将 分 离 收 集 的 精 子 经 过 4 平 衡 和 离 心, 精 确 测 定 精 液 的 体 积 和 精 子 浓 度, 再 经 过 稀 释 细 管 包 装 和 冷 冻 降 温, 最 后 将 0.25mL 细 管 ( 每 管 约 220 万 个 精 子 ) 投 入 液 氮 保 存 备 用 (6) 精 子 分 离 准 确 率 的 检 测 在 分 离 过 程 中 记 录 每 头 种 公 牛 的 分 离 效 果 参 数, 包 括 分 离 速 率 和 死 精 率 并 采 用 流 式 细 胞 仪 重 分 析 法 测 定 分 离 精 子 准 确 率 X Y 精 子 分 离 准 确 率 通 过 SX-MoFlo 带 有 的 一 个 专 用 程 序 进 行 检 测, 每 次 可 取 精 子 样 本 个, 重 复 测 定 3 次, 并 计 算 其 平 均 值 25

26 科 技 项 目 研 究 进 展 2 奶 牛 X Y 精 子 膜 蛋 白 的 提 取 (1) 性 控 精 子 膜 蛋 白 的 提 取 性 控 精 液 1mL( 约 1000 万 个 精 子 ) 用 PBS(pH8.0) 洗 涤 2 次, 于 4 条 件 下,12 000r/min 离 心 10min, 弃 去 上 清, 进 行 超 声 波 破 碎 精 子 细 胞 ( 超 声 时 间 6s, 间 隔 6s, 功 率 600W,16-20 次, 超 声 次 数 以 显 微 镜 下 观 察 精 子 破 碎 情 况 而 定 ) 精 子 细 胞 膜 蛋 白 的 提 取 按 照 ProteoExtract Native Membrane Protein Extraction Kit( Calbiochem 公 司, 德 国 ) 试 剂 盒 说 明 书 进 行 (2)BCA 法 测 定 蛋 白 含 量 根 据 样 品 数 量, 按 50 体 积 BCA 试 剂 A 加 1 体 积 BCA 试 剂 B(50: 1) 配 制 适 量 BCA 工 作 液, 充 分 混 匀 将 标 准 品 稀 释 为 终 浓 度 0.5mg/ml, 按 照 0,1,2,4,8,12,16,20μl 加 到 96 孔 板 的 标 准 品 孔 中, 加 用 于 稀 释 标 准 品 的 溶 液 补 足 到 20μl 加 适 当 体 积 样 品 到 96 孔 板 的 样 品 孔 中, 加 用 于 稀 释 标 准 品 的 溶 液 到 20μl 各 孔 加 入 200μl BCA 工 作 液, 37 放 置 30min 测 定 A562nm 处 的 吸 光 值, 并 根 据 标 准 曲 线 计 算 出 蛋 白 浓 度 结 果 见 表 1 序 号 牛 号 表 1 高 纯 度 性 控 精 液 的 制 备 品 种 雌 性 准 确 率 (%) 生 产 数 量 ( 支 ) 备 注 HS X HS Y HS X HS Y HS X HS Y HS X HS Y 2 试 验 二 :X- 精 子 和 Y- 精 子 细 胞 膜 蛋 白 的 提 取 本 试 验 中 提 取 的 精 子 膜 蛋 白 经 BCA 法 测 定 蛋 白 含 量 约 为 0.05ug/mL 精 子 在 精 液 中 本 来 就 仅 占 很 少 的 一 部 分, 大 部 分 都 是 精 浆, 而 精 子 膜 蛋 白 与 其 他 胞 内 胞 外 蛋 白 相 比, 含 量 又 相 当 低, 提 取 的 精 子 膜 蛋 白 浓 度 都 较 低, 因 此 需 要 浓 缩 本 试 验 提 取 的 精 子 膜 蛋 白 经 Millipore 浓 缩 柱 子 浓 缩 20 倍 后, 含 量 约 为 0.2 ug/ml 五 本 年 度 课 题 进 展 1 试 验 一 : 高 纯 度 性 控 精 液 的 制 备 本 试 验 利 用 现 有 的 流 式 细 胞 精 子 分 离 仪 制 备 X- 精 子 200 支,Y- 精 子 200 支 ( 北 京 首 农 畜 牧 发 展 有 限 公 司 奶 牛 中 心 吕 小 青 ) 26

27 主 要 研 究 成 果 北 京 地 区 猪 链 球 菌 病 的 流 行 病 学 调 查 刘 修 权 ( 北 京 三 元 集 团 畜 牧 兽 医 总 站 北 京 ) 摘 要 : 本 试 验 从 北 京 地 区 四 个 规 模 化 猪 场 的 74 头 疑 似 猪 链 球 菌 病 仔 猪 分 离 培 养 获 得 56 株 猪 源 链 球 菌, 并 进 行 了 API 20 Strep 生 化 鉴 定 16S rrna 基 因 序 列 比 对 和 药 敏 试 验 试 验 结 果 表 明 :56 株 猪 源 链 球 菌 分 别 属 于 粪 肠 球 菌 屎 肠 球 菌 鸟 链 球 菌 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 豕 链 球 菌 和 猪 链 球 菌, 其 中 以 兰 氏 D 群 粪 肠 球 菌 粪 肠 球 菌 为 主 (23/56, 41.07%), 其 次 为 兰 氏 C 群 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 (14/56,25.00%); 对 10 种 临 床 常 用 抗 生 素 均 产 生 了 耐 药 性, 耐 药 比 例 从 12.50% 至 92.86% 不 等, 对 红 霉 素 的 耐 药 比 例 最 高 (52/56,92.86%), 对 新 霉 素 的 耐 药 比 例 最 低 (7/56,12.50%), 且 多 重 耐 药 性 现 象 极 为 严 峻 关 键 词 : 猪 链 球 菌 病, 血 清 分 群, 药 敏 试 验 猪 链 球 菌 病 ( S w i n e Streptococosis) 是 由 链 球 菌 感 染 引 起 的 猪 的 一 类 疫 病 的 总 称, 其 病 原 主 要 包 括 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 (Streptococcus equi subsp zooepidemicus), 兰 氏 分 群 中 的 D E L 群 链 球 菌 以 及 猪 链 球 菌 (Strptococcussuis) 该 病 分 布 广 泛, 世 界 各 地 均 有 不 同 程 度 的 流 行 我 国 猪 链 球 菌 病 较 大 范 围 的 流 行 始 于 1963 年 广 西 省 部 分 地 区, 而 其 在 70 年 代 至 80 年 代 之 间 日 趋 严 重, 许 多 地 方 呈 爆 发 流 行 或 地 方 性 流 行 后 随 着 疫 苗 的 研 制 和 推 广, 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 所 致 猪 链 球 菌 病 的 蔓 延 得 到 了 一 定 程 度 的 遏 制 然 而, 90 年 代 初 广 东 首 次 报 道 了 2 型 猪 链 球 菌 致 病, 此 后 多 地 又 陆 续 报 道 了 该 型 猪 链 球 菌 病 的 发 生 目 前, 疫 苗 免 疫 和 抗 生 素 治 疗 是 防 控 该 病 主 要 措 施 但 由 于 致 病 性 链 球 菌 血 清 型 繁 多, 各 血 清 型 菌 株 之 间 缺 乏 有 效 的 交 叉 免 疫 保 护, 且 链 球 菌 易 产 生 耐 药 性, 给 疫 病 的 防 治 带 来 了 困 难 本 研 究 对 北 京 地 区 规 模 化 猪 场 疑 似 猪 链 球 菌 病 仔 猪 病 例 进 行 了 分 离 培 养, 并 在 此 基 础 上 系 统 开 展 了 链 球 菌 兰 氏 血 清 分 群 API 20 Strep 生 化 鉴 定 16S rrna 基 因 序 列 比 对 和 药 敏 试 验 等 工 作, 以 期 探 明 本 病 在 该 地 区 流 行 规 律, 为 针 对 性 地 选 用 疫 苗 和 抗 生 素 防 控 该 病 提 供 理 论 依 据 27

28 主 要 研 究 成 果 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 标 准 菌 株 引 自 中 国 兽 医 药 品 监 察 所 ;API Strep 20 生 化 鉴 定 试 剂 条 ;7% 绵 羊 血 琼 脂 培 养 基 ; 其 它 培 养 基 干 粉 购 自 OXID 按 说 明 书 自 行 配 制 ; 细 菌 基 因 组 DNA 提 取 试 剂 盒 ;TaqDNA 聚 合 酶 ; PCR MasterMix;PCR 引 物 由 华 大 基 因 合 成 ; 药 敏 纸 片 购 自 北 京 路 桥 1.2 方 法 细 菌 的 分 离 培 养 根 据 临 床 症 状 挑 选 疑 似 猪 链 球 菌 病 仔 猪 病 例, 剖 检 后 采 集 脾 脏 淋 巴 结 和 关 节 液 等 病 料, 无 菌 接 种 于 绵 羊 血 琼 脂 平 板,37 恒 温 培 养 18-24h, 观 察 菌 落 形 态 挑 取 可 疑 菌 落 纯 化 培 养 后 保 存, 以 供 后 续 试 验 用 生 化 鉴 定 将 纯 化 培 养 后 的 可 疑 菌 株 接 种 于 大 大 豆 胰 蛋 白 胨 琼 脂 平 板 (TSA),37 恒 温 培 养 箱 过 夜 培 养, 以 玻 片 法 进 行 触 酶 试 验 触 酶 试 验 阳 性 者, 取 新 鲜 纯 培 养 物 用 API 20 Strep 生 化 条 进 行 生 化 鉴 定, 操 作 和 判 定 方 法 按 说 明 书 进 行 S rrna PCR 检 测 按 细 菌 基 因 组 DNA 提 取 试 剂 盒 操 作 说 明 提 取 细 菌 基 因 组 DNA 参 照 参 考 文 献 设 计 合 成 扩 增 完 整 16S rrna 基 因 的 PCR 引 物, 上 游 引 物 序 列 为 5 - AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3, 下 游 引 物 序 列 为 5 -TACGGYTACCTT GTT ACG ACTT-3 PCR 反 应 体 系 : 2 EasyTaq PCRSuperMix25μl, Primer5 和 Primer6(10μM) 各 1μl, ddh2o22μl,dna 模 板 1μl; 反 应 条 件 为 : 反 应 条 件 为 :94 预 变 性 4min,94 变 性 30s,65 退 火 40s,72 延 伸 90s, 扩 增 35 个 循 环, 然 后 72 延 伸 10min, 4 保 存 扩 增 产 物 用 1.2% 琼 脂 糖 凝 胶 进 行 电 泳 分 析 并 送 至 深 圳 华 大 基 因 科 技 服 务 有 限 公 司 进 行 测 序 拼 接 将 测 得 序 列 通 过 NCBI 的 Blast 检 索 系 统 ( ncbi.nlm.nih.gov/blast/) 进 行 同 源 性 分 析 药 敏 试 验 根 据 美 国 临 床 检 验 标 准 委 员 会 (NCCLS) 的 操 作 和 判 定 标 准, 采 用 药 敏 纸 片 扩 散 法 (K-B 法 ) 对 分 离 到 的 各 菌 株 进 行 药 敏 试 验 药 敏 纸 片 种 类 包 括 : 青 霉 素 (P) 氨 苄 西 林 (AM) 链 霉 素 (S) 庆 大 霉 素 (GM) 氯 霉 素 (C) 红 霉 素 (E) 新 霉 素 (N) 四 环 素 (TE) 诺 氟 沙 星 (NOR) 及 环 丙 沙 星 (CIP) 2 结 果 与 分 析 2.1 发 病 情 况 从 北 京 地 区 的 四 个 规 模 化 猪 场 ( 编 号 分 别 为 A 场,B 场,C 场,D 场 ) 收 集 28

29 主 要 研 究 成 果 临 床 疑 似 猪 链 球 菌 病 病 例 共 计 74 例 所 有 病 例 均 为 保 育 以 下 猪 只, 慢 性 型 病 例 占 47.30%(35/74), 急 性 败 血 型 ( 败 血 症 ) 病 例 占 18.92%(14/74) 脑 膜 炎 型 ( 神 经 症 状 ) 病 例 占 9.46%(7/74), 混 合 症 状 的 病 例 占 4.32%(18/74) 2.2 细 菌 分 离 和 生 化 鉴 定 本 试 验 共 分 离 到 链 球 菌 56 株, 检 出 率 为 75.68%(56/74) 革 兰 氏 染 色 镜 检 均 为 阳 性 球 菌, 液 体 病 料 涂 片 和 固 体 培 养 物 革 兰 氏 染 色 镜 检 菌 体 多 为 散 在 状 态, 液 体 过 夜 培 养 物 多 以 长 链 状 态 存 在 去 纤 维 绵 羊 血 琼 脂 平 板 培 养 时, 菌 落 溶 血 状 态 不 一, 表 现 为 α 溶 血 β 溶 血 或 不 溶 血 触 酶 试 验 均 为 阴 性,API 20 Strep 生 化 条 鉴 定 后, 判 定 上 述 菌 株 均 为 链 球 菌 属, 结 果 如 表 -1 所 示 : 粪 肠 球 菌 23 株, 占 41.07%; 屎 肠 球 菌 8 株, 占 14.29%; 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 14 株, 占 25.00%; 坚 忍 链 球 菌 1 株, 占 1.79%; 鸟 链 球 菌 2 株, 占 3.57%;1 型 猪 链 球 菌 2 株, 占 3.57%;2 型 猪 链 球 菌 1 株, 占 1.79%; 豕 链 球 菌 1 株, 占 1.79%; 未 能 鉴 定 出 的 菌 株 4 株, 占 7.14% 各 分 离 株 的 生 化 反 应 差 异 较 大, 且 鉴 定 为 同 一 菌 名 的 细 菌 之 间 生 化 反 应 也 存 在 一 定 程 度 的 差 异 S rrna PCR 产 物 序 列 比 对 对 56 株 细 菌 的 16S rrna 基 因 进 行 细 菌 名 称 表 1 链 球 菌 分 离 株 统 计 表 API 20 Strep 法 菌 株 数 ( 株 ) 16S rrna 测 序 法 粪 肠 球 菌 屎 肠 球 菌 8 9 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 坚 忍 链 球 菌 1 0 鸟 链 球 菌 型 猪 链 球 菌 型 猪 链 球 菌 型 猪 链 球 菌 型 猪 链 球 菌 0 3 豕 链 球 菌 1 1 未 鉴 定 出 4 0 PCR 和 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 后, 均 在 1500bp 处 出 现 特 异 性 电 泳 条 带 对 各 扩 增 子 进 行 测 序 后, 得 到 序 列 峰 图, 各 引 物 的 下 游 800bp 以 内 均 无 套 峰 或 重 逢 等 现 象 出 现, 且 信 号 强 度 良 好, 说 明 测 序 结 果 完 全 满 足 后 续 序 列 拼 接 要 求 将 各 菌 株 的 上 游 引 物 测 得 序 列 反 向 互 补 后, 用 LaserGene 软 件 包 中 的 MegAlign 子 软 件 与 对 应 下 游 引 物 测 得 序 列 进 行 比 对, 得 到 1500bp 左 右 的 拼 接 序 列 进 一 步 将 拼 接 后 的 序 列 通 过 NCBI 的 Blast 检 索 系 统 ( gov/blast/) 与 基 因 库 中 所 有 序 列 进 行 同 源 性 比 对, 同 源 性 高 于 95% 者 表 明 与 基 因 库 中 登 记 菌 株 属 于 相 同 细 菌 结 果 如 29

30 主 要 研 究 成 果 表 -1 所 示 : 粪 肠 球 菌 23 株 ; 屎 肠 球 菌 9 株 ; 马 链 球 菌 兽 疫 亚 种 14 株 ; 鸟 链 球 菌 2 株 ; 1 型 猪 链 球 菌 2 株 ;2 型 猪 链 球 菌 1 株 ;7 型 猪 链 球 菌 1 株 ;9 型 猪 链 球 菌 3 株 ; 豕 链 球 菌 1 株 2.4 药 敏 试 验 药 敏 试 验 结 果 见 表 -2 由 表 -2 可 知,56 株 分 离 株 已 对 临 床 上 常 用 的 多 种 抗 生 素 产 生 了 耐 药 性, 耐 药 比 例 从 12.50% 至 92.86% 不 等 对 红 霉 素 的 耐 药 比 例 高 达 92.86%, 其 次 为 青 霉 素 链 霉 素 氯 霉 素 环 丙 沙 星 庆 大 霉 素 氨 苄 西 林 诺 氟 沙 星 四 环 素 和 新 霉 素, 耐 药 比 例 分 别 为 87.50% 82.14% 73.21% 57.14% 42.86% 28.57% 26.79% 16.07% 及 12.50% 表 2 K-B 法 药 敏 试 验 结 果 药 名 敏 感 中 介 耐 药 株 数 比 例 株 数 比 例 株 数 比 例 P % % AM % % % S % % % CM % % % C % % % E % % % N % % % TE % % % NOR % % % CIP % % % 3. 讨 论 猪 链 球 菌 病 分 布 广 泛, 世 界 各 地 均 有 不 同 程 度 的 流 行 在 我 国, 该 病 对 饲 养 密 度 较 大 的 规 模 化 猪 场 危 害 日 益 严 重, 制 约 着 养 猪 业 的 发 展 疫 苗 免 疫 和 抗 生 素 治 疗 是 防 控 该 病 主 要 措 施 然 而, 由 于 致 病 性 链 球 菌 血 清 型 繁 多 且 缺 乏 有 效 的 交 叉 免 疫 保 护, 再 加 上 细 菌 耐 药 现 象 日 益 严 峻, 给 该 病 的 防 治 带 来 了 困 难 北 京 地 区 许 多 规 模 化 猪 场 时 有 猪 链 球 菌 病 的 发 生, 为 有 效 防 控 该 病 的 流 30

31 主 要 研 究 成 果 行, 有 必 要 对 该 病 进 行 流 行 病 学 调 查 本 研 究 从 北 京 地 区 四 个 规 模 化 猪 场 筛 选 了 74 头 疑 似 猪 链 球 菌 病 仔 猪 病 例, 通 过 分 离 培 养 获 得 56 株 猪 源 链 球 菌, 并 进 行 了 生 化 鉴 定 和 16S r RNA 基 因 序 列 比 对 所 有 74 头 病 例 均 为 保 育 以 下 猪 只, 其 中 慢 性 型 病 例 有 35 头, 占 比 最 高, 达 47.30% 慢 性 型 的 病 例 临 床 上 主 要 表 现 为 关 节 炎 心 内 膜 炎 化 脓 性 淋 巴 结 炎 皮 炎 等 症 状, 病 程 多 达 十 几 天 至 一 个 多 月, 症 状 较 缓 和 综 合 生 化 鉴 定 和 16S rrna 测 序 比 对 结 果, 确 定 北 京 地 区 猪 链 球 菌 病 的 病 原 主 要 为 兰 氏 D 群 链 球 菌 (60.71%,34/56), 其 次 为 兰 氏 C 群 (25.00%,14/56) 这 与 国 内 的 一 些 报 道 结 果 一 致 值 得 注 意 的 是, 本 研 究 中 采 用 的 API 20 Strep 和 16S rrna 测 序 比 对 结 果 符 合 率 为 91.07%, 差 异 主 要 表 现 在 5 株 细 菌 ( 如 表 -1 所 示 ) 其 中,1 株 细 菌 API 20 Strep 生 化 鉴 定 结 果 为 坚 忍 链 球 菌, 而 16S rrna 测 序 结 果 鉴 定 为 屎 肠 球 菌 ;4 株 细 菌 API 20 Strep 未 能 鉴 定 出, 而 16SrRNA 测 序 结 果 分 别 为 7 型 和 9 型 猪 种 链 球 菌 由 于 链 球 菌 血 清 型 众 多, 不 同 链 球 菌 菌 株 之 间 存 在 表 型 差 异, 表 现 为 生 化 反 应 谱 之 间 的 差 异, 而 16SrRNA 基 因 的 核 苷 酸 序 列 在 同 种 或 同 型 链 球 菌 之 间 高 度 保 守 本 试 验 结 果 表 明,16S rrna 基 因 序 列 测 定 可 以 用 于 猪 链 球 菌 病 病 原 菌 的 鉴 定 本 研 究 药 敏 试 验 结 果 表 明 分 离 到 的 链 球 菌 对 临 床 上 常 用 的 10 种 抗 生 素 均 产 生 了 不 同 程 度 的 耐 药 性, 对 红 霉 素 的 耐 药 比 例 高 达 92.86%, 对 新 霉 素 的 耐 药 比 例 最 低, 但 也 达 到 了 12.50% 值 得 注 意 的 是,56 株 细 菌 的 多 重 耐 药 现 象 极 为 严 峻 和 复 杂, 共 有 56 种 耐 药 谱 其 中, 二 重 和 三 重 耐 药 谱 各 有 2 种 耐 药 谱, 菌 株 数 各 为 2 株, 分 别 占 3.57%; 四 重 耐 药 有 14 种 耐 药 谱, 菌 株 数 为 19 株, 占 33.93%; 五 重 耐 药 有 12 种 耐 药 谱, 菌 株 数 为 15 株, 占 26.79%; 六 重 耐 药 有 5 种 耐 药 谱, 菌 株 数 为 12 株, 占 21.43%; 七 重 耐 药 有 4 种 耐 药 谱, 菌 株 数 为 4 株, 占 7.14%; 八 重 和 九 重 耐 药 各 有 1 种 耐 药 谱, 菌 株 数 各 为 1 株, 各 占 1.79% 这 提 示 我 们 应 合 理 使 用 抗 生 素, 严 控 抗 生 素 的 滥 用 因 此, 建 议 有 条 件 的 养 殖 场 在 治 疗 前 先 进 行 药 敏 试 验 选 择 使 用 敏 感 的 抗 生 素 综 上 所 述, 猪 链 球 菌 病 对 北 京 地 区 规 模 化 猪 场 威 胁 严 重, 其 病 原 以 兰 氏 D 群 链 球 菌 为 主, 且 菌 株 耐 药 性 问 题 突 出 目 前, 商 品 化 猪 链 球 菌 疫 苗 以 C 群 和 2 型 猪 种 链 球 菌 二 价 联 苗 为 主, 对 该 病 的 防 控 效 果 有 限 因 此, 如 何 有 效 防 控 猪 链 球 菌 病 的 问 题 亟 待 深 入 研 究 参 考 文 献 ( 略 ) 31

32 通 讯 地 址 : 北 京 市 朝 阳 区 德 胜 门 外 清 河 南 镇 畜 牧 研 究 院 邮 编 : 电 话 : 传 真 : 邮 箱 : syzyyjy@163.com 网 址 :