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- 坤 饶
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1 1624 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): 研究简报 中华大蟾蜍 mcl-1 基因克隆及其重组蛋白在原核体系中的诱导表达 胡巧玲 1, 张姝芳 2, 杨仙玉 1*, 余美华 1, 诸葛慧 2 ( 浙江农林大学 1. 动物科技学院, 2. 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地, 浙江临安 ) 关键词 : 髓细胞白血病基因 -1; 中华大蟾蜍 ; 原核表达 ; 重组蛋白 中图分类号 : R915 文献标识码 : A 文章编号 : (2013) Bufo gargarizans mcl-1 cloning and its prokaryotic recombinant protein expression HU Qiao-ling 1, ZHANG Shu-fang 2, YANG Xian-yu 1*, YU Mei-hua 1, ZHU-GE Hui 2 (1. College of Animal Science and Technology, 2. The Nurturing Station for the State Key Laboratory of Subtropical Silviculture, Zhejiang A & F University, Lin an , China) Abstract: MCL-1 is encoded by myeloid cell leukemia-1 gene (mcl-1), which is one of the anti-apoptotic members of bcl-2 cell apoptotic gene superfamily. ChanSu is made of dorsal secretions of several Bufo species, commonly used in the prescriptions of traditional Chinese medicine for treating many diseases including cancer. To clarify if mcl-1 is expressed in the dorsal skin of B. gargarizans, the PCR (polymerase chain reaction) was performed with its dorsal skin first strand cdna as the template and a pair of specific primers of mcl-1, and PCR products were cloned into the pgm-t vector. DNA sequencing indicated that the ORF length was 639 bp encoding 212 amino acid residues, and the homology of 44% 95% with the MCL-1 of several other animals. For the further studies on MCL-1 biological functions during the oncogenesis and preparation of its antibody, the prokaryotic expression construct of pet-28b-mcl-1 was prepared which was confirmed by DNA sequencing, and its recombinant protein expression (0.02% wet weight) in E. coli BL21 (DE3) strain was confirmed by SDS- PAGE and Western blotting. Key words: mcl-1; Bufo gargarizans; prokaryotic expression; recombinant protein 以蟾蜍 (Bufo) 为基原的常用中药材有蟾酥 蟾 衣 蟾皮 干蟾等, 具有强心 麻醉 解毒 止痛 抗菌 增强免疫力及抗肿瘤等药理作用, 按溶解性可 将其成分划分为脂溶性甾族类和水溶性吲哚生物碱 类 [1 3] 体内外实验已证明由蟾皮制成的水溶性注射 液 华蟾素具有良好的抗肿瘤效果 [4 6] 最新研究 表明, 从华蟾素分离的多肽成分具有与其注射液相 收稿日期 : ; 修回日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 ( ). 同为第一作者. * 通讯作者 Tel: , Fax: , xianyu_yang@hotmail.com 当的体外抗肿瘤作用 [7], 揭示其抗肿瘤的有效成分是多肽类物质 该研究一方面对以往华蟾素中微量脂溶性蟾毒内酯类是主要抗肿瘤成分的结论提出质疑, 另一方面大大提升中药材多肽类有效成分研究的重要性 截至目前, 中药材有效成分的分析多用原材料进行分离, 以分离甾类和吲哚类化合物为主 [8 10], 缺乏对多肽类有效成分的研究 [7], 更缺乏使用现代分子生物学技术方法的研究 为分析蟾蜍皮肤中多肽类有效成分, 作者等通过反向遗传学的方法, 制备日本蟾蜍 (B. japonicus formosus Boulenger) 皮肤 cdna 质粒文库并进行筛选, 已克隆多个与细胞凋亡 肿瘤发生相关的全长
2 胡巧玲等 : 中华大蟾蜍 mcl-1 基因克隆及其重组蛋白在原核体系中的诱导表达 1625 cdna [11 13], 如 mcl-1 髓细胞白血病基因 -1 (myeloid cell leukemia-1, mcl-1) 是细胞凋亡基因家族 bcl-2 的重要成员, 在多种癌组织中呈高表达, 因此作为肿 瘤临床治疗的药物干预靶点越来越受到关注 [14, 15] 为更好地拓展后续研究工作, 作者开展中华大蟾蜍 (B. gargarizans Cantor) 相关基因的克隆工作, 获得 mcl-1 开放阅读框 (open reading frame, ORF) 序列, 并构建其原核表达重组质粒 pet-28b-mcl-1 以及确认 其重组蛋白在大肠杆菌 Escherichia coli BL21 (DE3) 中的诱导表达 材料与方法 实验动物 中华大蟾蜍 (B. gargarizans) 采自 浙江农林大学东湖校区, 经浙江农林大学高欣高级 实验师鉴定 将蟾蜍进行冰水处理并体表清洗后处 死, 取其背部皮肤并尽可能剪成小块投入液氮中快 速冷冻, 再转入 70 超低温冰箱保存备用 主要材料与试剂大肠杆菌感受态细胞 Top10 cdna 第一链合成试剂盒 Quantscript RT Kit TA 克 隆载体 pgm-t ( 天根生化科技有限公司 ); PCR 反应试 剂盒, 限制性核酸内切酶 Nco I Xho I EcoR I, 重组 蛋白纯化试剂盒 TALON Purification Kit (TAKARA); BSA DNA Ladder DNA 凝胶回收试剂盒 PCR 纯 化试剂盒和质粒小量抽提试剂盒 T4 ligase PVDF 膜 小鼠抗 His-tag 抗体 辣根过氧化物酶标记山羊 抗小鼠抗体以及超敏 ECL 化学发光试剂盒 ( 碧云天生 物技术研究所 ); 原核表达载体 pet-28b (+) (Novagen); RNA 提取试剂盒 ( 上海博彩生物技术公司 ); 引物合 成和 DNA 碱基测序委托上海桑尼生物科技有限公司 引物设计参照日本蟾蜍 mcl-1 全长 cdna [13] 设 计一组特异性引物 P1 (mcl-1-start, 含起始密码子 ) 和 P2 (mcl-1-stop, 含终止密码子 ), 以克隆中华大蟾 蜍 mcl-1 ORF ( 表 1) 为构建其原核表达体系, 选择 表达载体 pet-28b ( 上游引物为 T7), 并选择 Nco I 和 Xho I 作为克隆位点, 同时设计引物 P3 和 P4 (P3 含 有 Nco I 酶切位点, P4 含有 Xho I 酶切位点 ) 中华大蟾蜍皮肤总 RNA 的提取及第一链 cdna [16] 的合成 根据试剂盒说明, 纯化中华大蟾蜍背部 皮肤总 RNA, 通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计 检测其纯度 浓度和完整性 再根据 cdna 第一链合 成试剂盒说明书合成中华大蟾蜍皮肤第一链 cdna 中华大蟾蜍皮肤 mcl-1 ORF 的克隆 为扩增中 华大蟾蜍 mcl-1 ORF 片段, 以中华大蟾蜍皮肤第一链 cdna 为模板, 以 P1 和 P2 作为引物实施 PCR PCR Table 1 Name P1 P2 P3 P4 Primers used in current study Sequence 5'-ATGGGCGGCTCTCTGC-3' 5'-TCACCGGATCATGTACGC-3' 5'-GAGATATACCATGGGCGGCTCTCTGC-3' 5'-GTGGTGGTGGTGCTCGAGCCGGATCATGTACGCCA-3' 反应体系 反应条件及其产物的 TA 克隆以及阳性重 [16] 组质粒的筛选参考徐跃等的方法 重组质粒命名 为 pgm-t-mcl-1, 委托公司进行 DNA 测序 序列分析 利用 DNA star/editseq 软件寻找序列 中的 ORF, 推导编码蛋白的氨基酸序列并分析理化 性质 ; 用 NCBI Blast 功能在 GenBank 中查找并下载 其他物种同源蛋白的氨基酸序列进行同源性分析 ; 利用 MEGA 5.1 软件构建氨基酸序列系统进化树 原核表达载体的构建 以在 中华大蟾蜍皮肤 mcl-1 ORF 的克隆 中克隆的中华大蟾蜍 pgm-t-mcl-1 为模板, 使用引物 P3 和 P4 进行 PCR 将 PCR 产物 和 pet-28b 均用 Nco I 和 Xho I 进行双酶切, 然后进 行连接 转化和阳性重组质粒的筛选 [16] 阳性克隆 命名为 pet-28b-mcl-1 并委托公司进行 DNA 测序 重组蛋白的诱导表达和 Western blotting 检测 参照 pet-28b 使用说明, 将 pet-28b-mcl-1 转化至大肠 杆菌感受态细胞 BL21 (DE3) 在诱导重组蛋白前一天, 准备前培养 诱导当天, 将前培养按 1% 的体积接种, OD 600 达到 0.7~1.0 时, 加入 IPTG ( 终浓度 1 mmol L 1 ) 诱导重组蛋白表达 1~4 h 每隔 1 h 取菌液 1 ml (1 2 3 和 4 h), 最后将菌体溶于 100 μl 的蛋白质上样 缓冲液中, 然后取 5 μl 进行 SDS-PAGE 和免疫印迹 (Western blotting) 以检测重组蛋白的诱导表达 重组 蛋白的可溶性检测参照 TALON Purification Kit 使用 说明, 表达量则参照 BSA 标准曲线进行计算 结果 1 中华大蟾蜍 mcl-1 ORF 克隆及其亚克隆 以中华大蟾蜍皮肤第一链 cdna 为模板进行 PCR, 发现在 600~700 bp 出现 1 个特异性条带, 与预 期目的 mcl-1 ORF 639 bp 接近 ( 图 1) 将 PCR 产物进 行连接 转化, 阳性菌落筛选 重组质粒回收及酶切 ( 图 1), 并将此质粒命名为 pgm-t-mcl-1 以该质粒为 模板构建其原核表达重组质粒 pet-28b-mcl-1 ( 图 2) 2 测序结果分析 测序结果表明克隆的中华大蟾蜍皮肤 mcl-1 ORF 长为 639 bp, 编码由 212 个氨基酸残基组成的蛋白 ( 图 3) 亚克隆测序结果表明, 其序列与模板 cdna
3 1626 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): Figure 1 The cloning of Bufo gargarizans mcl-1 ORF. M: DNA ladder; 1: PCR products; 2: EcoR I digestion of pgm-t- mcl-1 Figure 2 The subcloning of Bufo gargarizans mcl-1. M: DNA ladder; 1: PCR products; 2: Nco I and Xho I digestion of pet- 28b-mcl-1 Figure 3 The full length cdna and deduced amino acid sequence of Bufo gargarizans mcl-1 序列吻合, 推导的氨基酸序列羧基末端有 6 个组氨酸残基, 表明 pet-28b-mcl-1 原核表达载体构建成功, 预测其重组蛋白的分子质量为 kda 3 中华大蟾蜍氨基酸序列同源性分析和系统进化树构建根据中华大蟾蜍 mcl-1 ORF 序列推导的氨基酸序列, 在 NCBI 中进行同源性比较, 与日本蟾蜍 (B. japonicus formosus, AFP ) 同源性高达 95%, 与非洲爪蟾 (Xenopus (Silurana) tropicalis, XP_ ) 人 (Homo sapiens, AAF ) 罗非鱼 (Oreochromis niloticus, XP_ ) 牛 (Bos taurus, DAA ) 衲脊响尾蛇 (Crotalus adamanteus, AFJ ) 原鸡 (Gallus gallus, NP_ ) 黑猩猩 (Pan troglodytes, JAA ) 家鼠 (Rattus norvegicus, EDL ) 等 8 种动物的同源性介于 44%~60% 之间 ( 图 4) 利用 MEGA 5.1 邻接法构建氨基酸序列系统进化树 ( 图 5), 结果显示 4 种哺乳类聚在 1 个大分支上, 鸟类处于 1 个分支, 爬行类处于 1 个分支, 中华大蟾蜍与同属两栖类的日本蟾蜍和非洲爪蟾处于 1 个大分支内, 鱼类处于 1 个分支 4 中华大蟾蜍 MCL-1 重组蛋白的诱导表达如前所述, 预测中华蟾蜍 MCL-1 重组蛋白的分子质量为 kda IPTG 诱导该重组蛋白的实验显示, 诱导前样品在分子质量 25.0 kda 处无特异性条带出现, 而诱导 和 4 h 的样品在 25 kda 附近均有特异性蛋白表达 ( 图 6A) 可溶性分析显示, 重组蛋白在包涵体中, 表达量为菌体湿重的 0.02% 免疫印迹检测显示, 只有 25.0 kda 处的条带能够被抗 His-tag 抗体识别 ( 图 6B), 表明该蛋白确实是目的重组蛋白 讨论本研究首次克隆了中华大蟾蜍 mcl-1 ORF ( 长为 639 bp, 编码由 212 个氨基酸残基组成 ) 的蛋白质 ( 图 1 和图 3) 同源性分析显示, 中华大蟾蜍 MCL-1 与日本蟾蜍的同源性高达 95% 虽然与人的同源性为 53%, 但是两者之间有相似的功能结构域, 包括 BCL-2 同源区域 BH1 BH2 BH3 以及 C 末端跨膜结构域, 还有部分相同的磷酸化位点 ( 图 4) 有研究表明, BH 结构域是介导 BCL-2 家族不同蛋白质之间相互作用的重要基序, 羧基端跨膜结构域能使 MCL-1 定位并稳定线粒体外膜, 抑制细胞色素 c 的释放, 调
4 胡巧玲等 : 中华大蟾蜍 mcl-1 基因克隆及其重组蛋白在原核体系中的诱导表达 1627 Figure 4 Alignment of MCL-1 amino acid sequences of B. gargarizans with other species. : Absence of corresponding amino acid. : Phosphorelation sites. : Important motifs for MCL-1 functions Figure 5 Phylogenetic tree of MCL-1 between Bufo gargarizans and 8 other species
5 1628 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): Figure 6 Induction of B. gargarizans recombinant protein of MCL-1 detected by SDS-PAGE (A) and Western blotting (B). M: Protein marker; A (1 5): The samples collected at 0, 1, 2, 3 and 4 h since IPTG induction. B: 1, 2, Coomassie brilliant blue staining; 3, 4, Western blotting; 1, 3, the samples without IPTG induction; 2, 4, samples after 1 h IPTG induction 节细胞凋亡的过程[14] Ser-159 和 Thr-163 两个磷酸 化位点与 MCL-1 的半衰期 泛素化及其降解有关 [17] of peptides from cinobufacini injection [J]. 因此, MCL-1 很可能是蟾蜍皮肤中, 或者是华蟾素中 (药学学报), 2012, 47: [8] mcl-1 原核表达载体 (图 2) 及其重组蛋白诱导表达 (图 6), 为后续 MCL-1 抗血清的制备 抗肿瘤功能的 活性检测以及确定其在蟾酥 蟾衣 蟾皮中表达量奠 Liu JS, Zhang DM, Chen MF. Anti-angiogenetic effect of arenobufagin in vitro and in vivo [J]. 与抗肿瘤相关的多肽类有效成分之一, 但尚有待于 进一步的实验证实 本研究成功构建的中华大蟾蜍 Acta Pharm Sin Acta Pharm Sin (药学 学报), 2011, 46: [9] Zhang Y, Qiu YK, Chen JY, et al. Chemical constituents from the skin of Bufo bufo gargarizans Cantor [J]. J Shenyang Pharm Univ (沈阳药科大学学报), 2007, 24: [10] Ai YJ, Wang D, Dai YH, et al. Determination of the content 定基础 本工作亦为使用现代分子生物学手段进行中 of bufogenin in toad skin by HPLC [J]. 药多肽类有效成分的研究提供了新思路 Univ (沈阳药科大学学报), 2009, 26: , 315. [11] Yuan JQ, Xu Y, Yang XY, et al. References [1] Xin XL, Zhang BJ, Su DH, et al. Pharmacology advances in Prog Mod Biomed (现 代生物医学进展), 2012, 12: , 600. Tong ZY. The research progress of antitumor effects of Venenum Bufonis [J]. J Mil Surg Southwest China (西南军 医), 2011, 13: [3] Liu JS, Zhang DM, Kurihara H, et al. Antitumor effects of Venenum Bufonis and its active components [J]. J Int Pharm Res (国际药学研究杂志), 2009, 36: [4] Qi FH, Li AY, Zhao L, et al. Acta Pharm Sin (药学学报), 2010, 45: Zhou X, Yang JK, Zhu LQ, et al. Meta analysis on cinobufacini [7] analysis of TAGLN2 cdna of Bufo japonicus formosus [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2013, 48: [13] Zhang SF, Yuan JQ, Huang H, et al. Cloning and bioinformatics analysis of MCL-1 cdna of Bufo japonicus formosus [J]. Biotechnol Bull (生物技术通报), 2013, (4): [14] Nijhawan D, Fang M, Traer E, et al. Elimination of Mcl-1 is required for the initiation of apoptosis following ultraviolet Genes Dev, 2003, 17: [15] Feng N, Zhang XJ. targeting therapy [J]. Research progress of mcl-1 in tumor Chin J Clin ( 中国临床医师杂志), 2009, 3: [16] Xu Y, Song MG, Yuan JQ, et al. Cloning and sequencing of injection in hepatocellular carcinoma after transcatheter arterial Bufo gargarizans galectin-3 cdna and the construction of the chemoembolization [J]. vector for its prokaryotic expression [J]. Chin J New Drugs Clin Rem ( 中国 新药与临床杂志), 2009, 28: [6] Biotechnol Bull (生物技术通报), 2013, (1): [12] Zhuge H, Yuan JQ, Zhang SF, et al. Cloning and bioinformatic irradiation [J]. Apoptosis-inducing effect of cinobufacini on human hepatoma cell line HepG2 [J]. [5] Cloning and sequence analysis of clusterin cdna of Bufo japonicus formosus [J]. studies on Bufo bufo gargarizan [J]. [2] J Shenyang Pharm Qi F, Li A, Inagaki Y, et al. Antitumor activity of extracts and J Southwest Univ (Nat Sci Ed) (西南大学学报 自然科学版), 2012, 34: [17] Maurer U, Charvet C, Wagman AS, et al. Glycogen synthase compounds from the skin of the toad Bufo bufo gargarizans kinase-3 regulates mitochondrial outer membrane permeabilization Cantor [J]. and apoptosis by destabilization of MCL-1 [J]. Int Immunopharmacol, 2011, 11: Wu X, Gao B, Yang J, et al. In vitro anti-proliferation effect 2006, 21: Mol Cell,
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
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参 会 人 员 名 单 Last Name 姓 名 公 司 Tel Fax Bai 柏 煜 康 复 之 家 8610 8761 4189 8610 8761 4189 Bai 白 威 久 禧 道 和 股 权 投 资 管 理 ( 天 津 ) 有 限 公 司 8610 6506 7108 8610 6506 7108 Bao 包 景 明 通 用 技 术 集 团 投 资 管 理 有 限 公 司 8610
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
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212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS
404 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 加 入 的 十 二 烷 基 磺 酸 钠 活 性 剂 1.23 g, 在 球 磨 机 转 速 600 r/min 的 条 件 下 球 磨 8 h, 所 得 粉
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 403 纳 米 技 术 在 中 药 领 域 的 研 究 进 展 1, 吴 芸 2 1,, 严 国 俊 2, 蔡 宝 昌 1, 2, 3* 1. 国 家 中 医 药 管 理 局 中 药 炮 制 标 准 重 点 研 究 实 验 室, 江 苏 南 京 210046 2. 国
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2005 年 第 25 卷 有 机 化 学 Vol. 25, 2005 第 7 期, 771~779 Chinese Journal of Organic Chemistry No. 7, 771~779 综 述 与 进 展 紫 草 素 的 全 合 成 研 究 进 展 徐 德 锋 管 鹏 健 毛 志 强 李 绍 顺 * ( 上 海 交 通 大 学 药 学 院 上 海 200030) 摘 要 综 述
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照
填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照 表 等 相 关 表 格 栏 高 不 够 请 自 行 增 加 5. 表 格 中 填 写 的 相 关 量
Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT
42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
标题
摇 878 环 球 中 医 药 2015 年 7 月 第 8 卷 第 7 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, July 2015,Vol 郾 8, No 郾 7 慢 性 前 列 腺 炎 外 治 法 治 疗 进 展 综 述 莫 旭 威 摇 王 彬 摇 李 海 松 摇 赵 冰 摇 刘 洋 揖 摘 要 铱 摇 目 前 慢 性 前 列 腺 炎 的 治 疗 已 经
1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
第16卷 第2期 邯郸学院学报 2006年6月
第 18 卷 第 4 期 邯 郸 学 院 学 报 2008 年 12 月 Vol.18 No.4 Journal of Handan College Dec. 2008 赵 文 化 研 究 论 赵 都 邯 郸 与 赵 国 都 城 研 究 问 题 朱 士 光 ( 陕 西 师 范 大 学 历 史 地 理 研 究 所, 陕 西 西 安 710062) 摘 要 : 战 国 七 雄 之 一 的 赵 国 都 城
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
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* CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI /j. issn X Incipient Fault Detection in Papermaking Wa
2 *. 20037 2. 50640 CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI 0. 980 /j. issn. 0254-508X. 207. 08. 004 Incipient Fault Detection in Papermaking Wastewater Treatment Processes WANG Ling-song MA Pu-fan YE Feng-ying XIONG
中国媒体发展研究报告
中 国 媒 体 发 展 研 究 报 告 (2005 年 卷 ) 武 汉 大 学 媒 体 发 展 研 究 中 心 武 汉 大 学 新 闻 与 传 播 学 院 武 汉 大 学 新 闻 传 播 与 媒 介 化 社 会 创 新 基 地 主 办 编 委 会 成 员 主 编 罗 以 澄 张 金 海 单 波 执 行 主 编 张 金 海 强 月 新 编 委 ( 以 姓 氏 笔 画 为 序 ) 王 松 茂 石 义 彬
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Stock Transfer Service Inc. Page No. 1 CENTURY PEAK METALS HOLDINGS CORPORATION (CPM) List of Top 100 Stockholders As of 12/31/2015 Rank Sth. No. Name Citizenship Holdings Rank ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
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环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
Microsoft Word 聂雪梅.doc
4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 聂雪梅 *, 李立, 孙利, 高飞 (, 100123) 摘要 : 2011 12,, 2007~2011,,,, 关键词 : ; ; ; ; Trade and notification situation on food import and export
第二部分
中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物
程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点
1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology NatureScienceLa
SARS SARS SARS SARS NatureScience 1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology 32 8 13.066 NatureScienceLancetPNAS SCI 905
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
10 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 1 期 2012 年 1 月 生 药 打 粉 入 药 的 基 本 特 点, 借 鉴 材 料 学 粉 体 学 等 学 科 的 研 究 成 果, 在 中 药 传 统 制 药 理 念 的 启 发
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 1 期 2012 年 1 月 9 基 于 传 统 丸 散 剂 特 点 的 中 药 粒 子 设 计 技 术 研 究 1, 杨 明 2, 韩 丽 1, 杨 胜 3, 张 定 1, 苏 柘 僮 1, 郭 治 平 4, 邹 文 铨 1. 成 都 中 医 药 大 学 四 川 省 中 药 资 源 系 统 研
Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc
Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要
标题
摇 1524 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 中 医 证 型 研 究 进 展 综 述 扶 伟 摇 徐 立 然 摇 马 秀 霞 摇 孟 鹏 飞 摇 宋 夕 元 摇 李 亮 平 摇 李 正 摇 丁 雪 摇 邱 荃 摇 杨 超 华 揖 摘 要 铱 摇 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 的 治 疗 过 程 中 因 其 病 因 复 杂, 临 床 症 状 多 样, 辨 证 分 型 及 临 床 疗 效 评
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
,,,,,,,,,,1861 12 ; (),,,,,,,, 1862,1864 8,,() () () () () () (), :,,,,,,,,,,,,,,,, 95 %,, 1.,,, 20 (1838 ) (1873 ),1 1 1953 1953 18731953 ( ) 54440 3
() FUDAN JOURNAL (Social Sciences) 2000 5 No. 5 2000 ( 200433) [] [ ],,,, [] K254 C921 [] A [ ] 0257 0289(2000) 05 0033 012 The Effect of the War of the Taiping Heavenly Kingdom On the Population of Zhejiang
Chin J Aesth Plast Surg, May 2018 Vol. 29 No [7] [8]
![Chin J Aesth Plast Surg, May 2018 Vol. 29 No [7] [8]](/thumbs/92/108078329.jpg "Chin J Aesth Plast Surg, May 2018 Vol. 29 No [7] [8]")
2018 5 29 5 Chin J Aesth Plast Surg, May 2018 Vol. 29 No. 5 5-1 2013 [6] [1] Mustoe 2002 [2] 2010,O gawa [3] Gold 2014 [4-5] 2010 2016 3 DOI:10.3969/j.issn.1673-7040.2018.05.001 81671921 201502028 Email:liuwei_md@126.com
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷
50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS 8 NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology NatureScienceLance
SARS SARS SARS SARS NatureScience 2018 1 SARS SARS SARS SARS SARS SARS S SARS SARS SARS 2 3 DNA SARS 8 NatureScienceEmerging Infectious DiseasesJournal of Virology 13.066 NatureScienceLancetPNAS SCI 940
第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解
- 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,
标题
Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇
4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
SVM OA 1 SVM MLP Tab 1 1 Drug feature data quantization table
38 2 2010 4 Journal of Fuzhou University Natural Science Vol 38 No 2 Apr 2010 1000-2243 2010 02-0213 - 06 MLP SVM 1 1 2 1 350108 2 350108 MIP SVM OA MLP - SVM TP391 72 A Research of dialectical classification
Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc
重组七鳃鳗 PHB2 蛋白的原核表达及纯化 李铁松, 王颖, 高杨, 李庆伟 (, 116081) 摘要 : 为了研究 PHB2 蛋白的生物学活性及后续抗体的制备, 作者以前期构建的 pmd18-t-lm-phb2 质粒为模板, PCR 扩增 Lm-PHB2 基因全长 CDS 区, PCR 产物经 Hind III 和 EcoR I 双酶切后连接至表达载体 pet-32a, 构建重组质粒 pet-32a-lm-phb2
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第６期 发表序列 ＡＹ８１９６５０ 同源性为 １００ 与国外 １０ 株 同源性为 ９８畅 ８ 有 １３ 个碱基发生了突 变 其中 ４ 个是有意义的突变 这 ４ 个有意义的 突变分别为第 ２５７ 位 Ｔ Ｃ 第 ５０５ 位 Ａ Ｃ 第 ９０８ 位 Ａ Ｇ 第 １０１２ 位 Ｇ Ｃ 图 ４ 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 ２畅 ５ ＨＰＳ 原核表达与鉴定
AFLP % 1. 1 DNA 5 RAPD DNA 0. 1g % ~ ph 6 10 DNA 9 40μl TE SSR STS 20ng /L
2012 13 2 201-206 Journal of Plant Genetic Resources / 071001 41 SSR 21 SSR 41 52 2 ~ 4 2. 5 Shannon 0. 21 ~ 1. 40 0. 73 5. 54 3 7 9 13. 16% ~ 186. 49% 5. 48 6 11 SSR Genetic Diversity of Peanut Arachis
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P untitled
20 1 2010 10 Vol.20 Special 1 The Chinese Journal of Nonferrous Metals Oct. 2010 1004-0609(2010)S1-s0127-05 Ti-6Al-4V 1 2 2 (1. 710016 2., 710049) 500~1 000 20 Ti-6Al-4V(TC4) TC4 800 TC4 800 TC4 TC4 800
Schumpeter Mensch Freeman Clark Schumpeter Mensch 1975 technological stalemate 2000 Van Dujin 1977 OECD 1992 Freeman 1982 Van
32 1 2011 1 Science Research Management Vol. 32 No. 1 January 2011 1000-2995 2011 01-009 - 0001 310058 GDP F204 F037. 1 A Van Dujin 1977 1 Keynes Keynes 2008 90 2009-10 2010-05. 70573092 INDIA&CHINA 2000-2050
4 51 1 Scoones 1998 20 60 70 2002 2001 20 90 World Bank DFID Sussex IDS 2012 2 2. 1 UNDP CARE DFID DFID DFID 1997 IDS 2009 1 5
38 4 2014 7 Vol. 38 No. 4 July 2014 50 Population Research * 30 4 100872 Livelihood and Development Capacity of Families Obeying the Family Planning Policy in Rural China A Sustainable Livelihood Analytical
~ ~ ~
33 4 2014 467 478 Studies in the History of Natural Sciences Vol. 33 No. 4 2014 030006 20 20 N092 O6-092 A 1000-1224 2014 04-0467-12 200 13 Roger Bacon 1214 ~ 1292 14 Berthold Schwarz 20 Luther Carrington
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC
35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a
CIP /. 2005. 12 ISBN 7-5062 - 7683-6 Ⅰ.... Ⅱ.... Ⅲ. Ⅳ. G624.203 CIP 2005 082803 櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶 17 710001 029-87232980 87214941 029-87279675 87279676 880 1230 1/64 4.0 110 2006 2 1 2006 2 1 ISBN
48 東華漢學 第20期 2014年12月 後 卿 由三軍將佐取代 此後 中大夫 極可能回歸原本職司 由 於重要性已然不再 故而此後便不見 中大夫 記載於 左傳 及 國 語 關鍵詞 左傳 中大夫 里克 丕鄭 卿
東華漢學 第 20 期 47-98 頁 東華大學中國語文學系 華文文學系 2014 年 12 月 春秋晉國 中大夫 考 黃聖松** 摘要 本文討論 左傳 國語 所載 中大夫 之含義及職司內容 認為 中大夫 不可與 上大夫 下大夫 排比 視為 大夫 等 第 左傳 所載 大夫 一詞前常冠以其他名詞 如 中軍大夫 上軍大夫 下軍大夫 七輿大夫 公族大夫 及 僕大 夫 筆者認為 冠諸 大夫 前名詞即是該大夫職司範圍
220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原
![220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原](/thumbs/42/22870184.jpg "220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原")
29 赵 哲, 张 泰 铭, *, 方 宣 启 2, 向 凤 琴, 乔 君 喜, 朱 蓉 (. 中 南 大 学 化 学 化 工 学 院, 湖 南 长 沙 40083;2. 湖 南 省 食 品 质 量 监 督 检 验 所, 湖 南 长 沙 40002) 通 过 向 稳 态 体 系 溴 酸 钠 - 硫 酸 锰 - 硫 酸 - 丙 酮 中 加 入 不 同 的 茶 饮 料, 获 得 来 自 不 同 产 家
2019 Chinese Taipei National High School Athletic Game Boxing Championship Junior Men Division Top 8 As of WED 24 APR 2019 Men s Mosquito(38-41Kg) Ran
Junior Men Division Men s Mosquito(38-41Kg) 1 CHANG, CHI-EN TPE 2 HUANG, YU-CHEN TPE 3 YANG, MIN-SHUN TPE 3 CHIU, CHENG TPE 5 WU, CHIA-TING TPE 5 LIN, KUAN-YI TPE 7 TSAI, MING-FENG TPE 7 CHOU, MING-HSIEN
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
Microsoft Word - 4期中文目次.doc
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 4 期 2014 年 2 月 509 UPLC-MS/MS 法 快 速 检 测 减 肥 类 保 健 品 中 13 种 非 法 添 加 化 学 成 分 朱 健, 裘 一 婧, 沈 国 芳 杭 州 市 食 品 药 品 检 验 研 究 院, 浙 江 杭 州 310017 摘 要 : 目 的 建 立 保
ph ph ph Langmuir mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 3 CO 2-3 PO mg /L 5 p
1 2 1 2 3 1 2 1. 100054 2. 100054 3. 100036 ph ph ph Langmuir 166. 67 mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 4 5. 00 mg /L 5 ph doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2017. 03. 017 TV213. 4 + TU991. 26 + 6 A 1000-0860
畜牧 动物医学 蚕 蜂
中国农学通报 2015,31(20):181-185 Chinese Agricultural Science Bulletin 老河口市砂梨花期的物候特点分析 邓 环 1 马德栗 1 徐洪海 2 洪国平 1 2 武汉区域气候中心 武汉 430074 老河口气象局 湖北老河口 441800 1 摘 要 为掌握湖北省老河口市砂梨花期的物候规律 利用老河口市 20 年的砂梨裂蕾期 初花期 和盛花期 4
<46495420446F63756D656E7428452D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D32303133C4EA2DB5DA31C6DA2D30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A8323031332D31A3A92E6D6469>
绎 阴 元 元 渊 210046 210046 渊 210046 173 111 62-76 P 约 0.05 doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.020 喎 喎 喎 [1] 2012-07-13 2012-08-15 元 973 2011CB505300-01 元 元 105 2013 绎 Vol.15 No.1 1. [2] CNKI 1911 ~1979
20-1385-0723.doc
药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2011, 46 (11): 1385 1389 1385 复 方 红 霉 素 延 迟 起 释 型 缓 释 片 的 研 制 及 其 体 外 释 放 陈 海 霞 1, 陈 志 鹏 2, 王 启 荣 2*, 刘 泽 坤 3, 马 全 龙 4 (1. 山 东 大 学 齐 鲁 医 院 药 学 部, 山 东 济 南 250012; 2. 山
2 : 111 ( Pinctada maxima), 13, 11,,,,,, 15, 25 cm, cm, 4 5 kg 1-2],,, 3-7] 24] 25-26],,, ] min, 1, 5 m 4 m, 20 m , 9-22],,, (
![2 : 111 ( Pinctada maxima), 13, 11,,,,,, 15, 25 cm, cm, 4 5 kg 1-2],,, 3-7] 24] 25-26],,, ] min, 1, 5 m 4 m, 20 m , 9-22],,, (](/thumbs/86/94695178.jpg "2 : 111 ( Pinctada maxima), 13, 11,,,,,, 15, 25 cm, cm, 4 5 kg 1-2],,, 3-7] 24] 25-26],,, ] min, 1, 5 m 4 m, 20 m , 9-22],,, (")
12 2 2 0 1 6 4 South China Fisheries Science Vol. 12, No. 2 Apr., 2016 doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-0780. 2016. 02. 016,,,, (,,, 510300) : ( Pinctada maxima),,,, 54. 55%, 0 0. 25 m - 2, 0 70. 31 gm - 2,
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
( ) [10] [2] ( ) ( ) [11] [15] 1995 ( ) [12] 1996 ( ) [13] 2005 ( ) ( ) [14] [2] ( ) 4 [13] ( )
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33 7 2017 7 Vol.33No.7 Jul.2017 DOI:10.13652/j.issn.1003-5788.2017.07.043 ResearchprogressofChinesemultiple-flavorliquor CAO Jing YU You-gui CAO Zhi-hua ZENG Hao ( 422000) (Colegeof Food Scienceand ChemicalEngineeringShaoyang
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2013国际营销科学与信息技术大会（MSIT2013）
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2000.11 2000.11 2000 11 Abstract: Background: The development of autoantibodies in the sera of patients with cancers has been described, but the mechanism is still not clear. Objective: The aim of this
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36 4 2015 385 ~ 397 The Chinese Journal for the History of Science and Technology Vol. 36 No. 4 2015 1951 ~ 1956 100049 100190 1951 ~ 1966 1951 ~ 1956 N092 P62-092 A 1673-1441 2015 04-0385-13 1951 ~ 1966
48 5 ( Pinctada) ( P. fucata ), 3 [ 7 ] ( P. maxima ) ( P. albina), ( P. margaritifera) ( P. nigra) RAPD, ( P. chemnitzi), ( Pteria penguin) [ 1-2 ] [
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5 6 2 00 9 1 2 South China Fisheries Science Vol. 5, No. 6 Dec., 2009 doi: 10. 3969/ j. issn. 1673-2227. 2009. 06. 009 16S rrna,,, (, 510300) : PCR ( Pinctada fucata) ( P. chemnitzi) ( Pteria penguin)
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卫生政策研究进展
卫 生 政 策 研 究 进 展 Progress in Health Policy Research 慢 性 病 管 理 专 刊 2013 年 第 3 期 ( 总 第 46 期 ) 上 海 市 卫 生 发 展 研 究 中 心 2013 年 5 月 25 日 编 者 按 慢 性 病 已 经 成 为 21 世 纪 全 球 各 国 发 展 面 临 的 主 要 挑 战 之 一 在 我 国, 慢 性 病 是
中国科学技术大学 材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程 吉林大学 应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程 四川大学 制药
045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学
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104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專
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2006 2 No. 2,2006 122 JOURNAL OF HISTORIOGRAPHY Serial No. 122 (, 100875 ;, 100006) [ ],, [ ] [ ] K092 [ ]A []100225332 (2006) 0220001211, :,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, [] 2005212220 1924 ;,, ( :,,1924 ),,,,,,,,,
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56 Chinese Journal of Library and Information Science for Traditional Chinese Medicine Dec. 2015 Vol. 39 No. 6 综 述 中 医 药 学 语 言 系 统 研 究 综 述 于 彤, 贾 李 蓉, 刘 静, 杨 硕 *, 董 燕, 朱 玲 中 国 中 医 科 学 院 中 医 药 信 息 研 究 所,
38 張 元 素 歸 經 引 經 理 論 研 究 本 文 以 張 元 素 著 述 為 主 要 材 料, 采 用 上 海 涵 芬 樓 景 印 元 杜 思 敬 濟 生 拔 粹 刊 本 4 ; 醫 學 啟 源 為 任 應 秋 點 校 本, 任 本 以 明 成 化 八 年 刊 本 為 底 本, 旁 校 上
J Chin Med 24(1): 37-47, 2013 37 1 1,2, * 1,2 1,2 1 2 101 04 09 101 09 26 張 元 素, 字 潔 古, 金 代 易 州 ( 河 北 易 水 ) 人, 他 學 識 淵 博, 臨 證 經 驗 豐 富, 善 於 化 裁 古 方 他 建 立 了 以 臟 腑 辨 證 為 核 心 的 臨 床 證 治 體 系, 創 新 了 用 藥 理 論,
ment group was more effective than that of the control group OR = % CI = Conclusion The clinical efficacy of Chinese medic
33 243 HAART Meta * 1 1 1 1 1 2 3 3 3 1. 530001 2. 538000 3. 530011 highly active anti-retroviral therapy HAART Pubmed HAART randomized controlled trials RCT Jadad RevMan5. 3 Meta 5 RCT 761 Meta HAART
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项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
标题
第 39 卷第 6 期 Vol. 39 No. 6 摇 摇 摇 摇 中南医学科学杂志 Journal of Medical Science in Central South China 2011 年 11 月 Nov. 2011 沙眼衣原体 T 细胞抗原 CT143 原核表达 纯化及免疫活性鉴定 陆春雪1,吴移谋1,彭摇 波2,刘良专1,蔡恒玲1,李忠玉1 (1. 南华大学 微生物与免疫学教研室,湖南
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16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 863 曲 妥 珠 单 抗 联 合 多 西 紫 杉 醇 治 疗 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 的 临 床 研 究 * 周 永 安, 刘 训 碧 黄 石 市 中 心 医 院 ( 普 爱 院 区 ) 乳 腺 肿 瘤 外 科, 湖 北 黄 石 435000 摘 要 : 目 的 探 析 注 射 用 曲
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5 7 Vol. 5 No. 7 2014 7 Journal of Food Safety and Quality Jul., 2014 HTS-ELISA 甄玉萍, 裴世春 *, 高建伟 (, 161006) 摘要 :,,,,, HTS-ELISA, (Trailing), 关键词 : - ; ; ; Progress of monoclonal antibody secretion hybridoma
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
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~ 10 2 P Y i t = my i t W Y i t 1000 PY i t Y t i W Y i t t i m Y i t t i 15 ~ 49 1 Y Y Y 15 ~ j j t j t = j P i t i = 15 P n i t n Y
* 35 4 2011 7 Vol. 35 No. 4 July 2011 3 Population Research 1950 ~ 1981 The Estimation Method and Its Application of Cohort Age - specific Fertility Rates Wang Gongzhou Hu Yaoling Abstract Based on the
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
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第 32 卷 第 7 期 岩 土 工 程 学 报 Vol.32 No.7 2010 年 7 月 Chinese Journal of Geotechnical Engineering July 2010 沿 海 碎 石 回 填 地 基 上 高 能 级 强 夯 系 列 试 验 对 比 研 究 年 廷 凯 1,2, 水 伟 厚 3, 李 鸿 江 4, 杨 庆 1,2, 王 玉 立 (1. 大 连 理 工
Ansell Gash ~ ~ Rhodes ~ H. Haken 20 90
2012 4 162 2012 7 Comparative Economic & Social Systems No. 4 2012 Jul. 2012 C916 A 1003-3947 2012 04-0157-12 158 2012 4 1999 284 1 Ansell Gash 2007 543 ~ 571 2006 34 ~ 35 2009 2011 2011 1 2001 200 2002
食品 营养 检测 安全
中 国 农 学 通 报 05,(4):84-90 Chinese Agricultural Science Bulletin 蒲 公 英 - 夏 枯 草 - 野 菊 花 复 合 饮 料 的 研 制 蔡 建 秀, 顾 雅 青, 李 巧 红 ( 泉 州 师 范 学 院 化 学 与 生 命 科 学 学 院, 福 建 泉 州 6000) 摘 要 : 以 蒲 公 英 夏 枯 草 野 菊 花 为 原 料, 研
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β- 环 糊 精 及 其 衍 生 物 在 难 溶 性 中 药 成 分 增 溶 1 上 的 应 用 欧 水 平 1, 欧 阳 彩 霞 2, 王 森 1, 吴 品 江 1, 钟 英 1 1,2, 杨 明 1 成 都 中 医 药 大 学 研 究 生 院, 成 都 (611137) 2 江 西 中 医 学 院 现 代 中 药 制 剂 教 育 部 重 点 实 验 室, 南 昌 (330004) E-mail:oushuiping1208@126.com
10384 200326107 UDC Cloning and Expression of Genes from Venom Gland of Bungarus multicinctus 2006 7 1 2 V 1 1 2 C 4 α- P22-A31 0 11 1 11 2 11 13 α- 13 2 α- 14 3 α- 15 4 α- 15 17 α cdna 21 1 21 2 23 24
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(CIP) : /. :, 2006. 12 (/ ) ISBN 7-81064-916-7... - - - - -. T S971-49 H136. 3 CI P (2006) 116729 XIANGPIAOWANLI JIUW ENH UA YU CH ENGYU 105 100037 68418523 ( ) 68982468 ( ) www.cnup.cnu.cn E- mail cnup@
32期
中 国 农 学 通 报 2014,30(32):38-42 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 草 药 饲 料 添 加 剂 对 黄 鳝 性 激 素 含 量 的 影 响 1,2 1,2 1,2 2 赵 庆 凯, 丁 炜 东, 邴 旭 文, 王 建 新 ( 1 南 京 农 业 大 学 无 锡 渔 业 学 院, 江 苏 无 锡 214081; 2 中 国 水 产
130 36 4 260 1. 1 1926 5 1 1935 6 1940 106 13 17 20 20 635 6 3 7 400 10 80 8 1 1 1 1929 1937 1933 1928 1941 1940 1934 1938 ~ 1944 1945 ~ 1946 1929 193
36 2 2015 129 ~ 141 The Chinese Journal for the History of Science and Technology Vol. 36 No. 2 2015 530006 210095 - - N092 S-092 A 1673-1441 2015 02-0129-13 1 2 1 1932 1937 3 17 2015-02-13 2015-03-13
陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等
生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道
Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug GPS,,, : km, 2. 51, , ; ; ; ; DOI: 10.
22 4 2017 8 Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug. 2017 150080 GPS,,, : 27. 36 km, 2. 51, 110. 43, ; ; ; ; DOI: 10. 15938 /j. jhust. 2017. 04. 015 U469. 13 A 1007-2683
中 药 混 悬 型 乳 房 注 射 剂 ( 吉 林 大 学 实 验 室 自 制 ), 批 号 45; 注 射 用 生 理 盐 水 ( 长 春 豪 邦 药 业 有 限 公 司 生 产 ), 批 号 为 4;,4 二 硝 基 氯 苯 ( 石 家 庄 莫 高 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 批 号
第 8 卷 第 期 期 年 月 Journal of Heilongjiang Bayi Agricultural University 8():9~4 Feb. doi:.99/j.issn.9...5 治 疗 奶 牛 乳 房 炎 中 药 混 悬 型 注 射 剂 安 全 性 试 验 李 诗 莹, 邹 晓, 许 启 有, 刘 瑶, 付 世 新 ( 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 动 物 科 技