标题

Size: px

Start display at page:

Download "标题"

俊穆
5 years ago
Views:

1 2013 年 5 月 Vol. 31 No. 5 May 2013 Chinese Journal of Chromatography 404 ~ 409 研究论文 DOI: / SP. J 超高效液相色谱串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸云环 ꎬ 严华 ꎬ 张朝晖 ꎬ 李建辉 ꎬ 卢晓宇 ꎬ 刘鑫 ( 北京出入境检验检疫局技术中心 ꎬ 北京 ) 摘要 : 建立了一种超高效液相色谱串联质谱法测定牛奶和奶粉中二氰二胺 ( DCD) 三聚氰胺 ( MEL) 和三聚氰酸 (CY) 的分析方法 ꎮ 样品用 5% ( 质量分数 ) 三氯乙酸水溶液提取 ꎬ 无需净化和浓缩 ꎬ 用 Acquity UPLC HSS T3 色谱柱 (50 mm 2 1 mmꎬ 1 8 μm) 分离 ꎬ 以乙腈和乙酸铵作为流动相进行梯度洗脱 ꎬ 电喷雾正负离子 ( ESI ± ) 模式同时电离 ꎬ 多反应监测模式进行检测 ꎮ 结果表明 : 在 5 0 ~ μg / L 范围内线性关系良好 (r 0 995)ꎮ 牛奶中 3 种化合物在 mg / kg 的添加回收率为 60 0% ~ 105 8%ꎬ 相对标准偏差 (RSDꎬ n = 6) 为 4 2% ~ 13 6%ꎻ 奶粉中 3 种化合物在 mg / kg 的添加回收率为 78 0% ~ 115 0%ꎬ RSD ( n = 6) 为 2 7% ~ 7 5%ꎮ 牛奶中方法的定量限 ( 信噪比为 10) 为 0 02 mg / kgꎬ 奶粉中方法的定量限为 0 05 mg / kgꎮ 该方法简单快速灵敏准确 ꎬ 适合于牛奶奶粉等乳及乳制品中 DCD MEL 和 CY 的快速高灵敏的分析检测 ꎮ 关键词 : 超高效液相色谱串联质谱 ꎻ 二氰二胺 ꎻ 三聚氰胺 ꎻ 三聚氰酸 ꎻ 牛奶 ꎻ 奶粉中图分类号 :O658 文献标识码 :A 文章编号 : (2013) Determination of dicyandiamideꎬ melamine and cyanuric acid in milk and milk powder by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry YUN Huan ꎬ YAN Huaꎬ ZHANG Zhaohuiꎬ LI Jianhuiꎬ LU Xiaoyuꎬ LIU Xin (Technology Centerꎬ Beijing Entry Exit Inspection and Quarantine Bureauꎬ Beijing ꎬ China) Abstract: A method for the determination of dicyandiamide ( DCD) ꎬ melamine ( MEL) and cyanuric acid ( CY) in milk and milk powder has been developed by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ( UPLC MS / MS). After extracted by 5% ( mass fraction) trichloroacetic acidꎬ the samples were loaded onto an Acquity UPLC HSS T3 column (50 mm 2 1 mmꎬ 1 8 μm) and separated using acetonitrile and ammonium acetate as mobile phases in a gradient elution mode. The electrospray was operated in the positive mode and neg ative modeꎬ and monitored by the multiple reaction monitoring ( MRM) mode. The calibration curves showed a good linearity in the range of μg / Lꎬ and the correlation coeffi cients (r) were not less than When the spiked levels were 0 02ꎬ 0 10 and 0 20 mg / kgꎬ the recoveries of DCDꎬ MEL and CY in milk ranged from 60 0%. to 105 8%ꎬ with the relative standard deviations (RSDs) of 4 2% %ꎻ while the spiked levels were 0 05ꎬ 0 10 and 0 20 mg / kg in milk powderꎬ the recoveries ranged from 78 0% to 115 0% with the RSDs of 2 7% - 7 5%. The limits of quantification ( LOQsꎬ S / N = 10) were 0 02 mg / kg for milk samples and 0 05 mg / kg for milk powder samples. The results indicate that the method is simpleꎬ rapidꎬ sensitive and suitable for the qualitative and quantitative analyses of DCDꎬ MEL and CY in milk and dairy product samples. Key words: ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ( UPLC MS / MS) ꎻ dicyandiamideꎻ melamineꎻ cyanuric acidꎻ milkꎻ milk powder 通讯联系人. Tel:(010) ꎬE mail:yunh@ bjciq. gov. cn. 基金项目 : 北京出入境检验检疫局科研项目 (2013BK001). 收稿日期 :

2 第 5 期云环 ꎬ 等 : 超高效液相色谱串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸年 1 月 ꎬ 新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的二氰二胺 ( DCD)ꎬ 这是继三聚氰胺 (MEL) 三聚氰酸 ( CY) 之后的又一个乳品中非蛋白含氮物质被曝光 ꎮ 随着美国食品和药物管理局 (FDA) 将其添加到安全性待检测物质名单中 ꎬ 二氰二胺的安全性遭到质疑 ꎬ 新西兰政府下令禁售含有二氰二胺的奶类产品 [1ꎬ2] ꎮ 全球 60% 的奶制品企业和乳品供应商采用新西兰奶源的奶粉 ꎻ 目前中国市场上进口的新西兰大包奶 ( 包括脱脂奶粉全脂奶粉 ) 占到了中国总进口量的 80%ꎬ 新西兰乳制品占到了中国全进口婴幼儿食品的 40% 左右 [3] ꎮ 二氰二胺 ( 结构式见图 1)ꎬ 别名双氰胺二聚氰胺等 ꎬ 简称 DICY 或 DCDꎬ 化学式为 C 2 H 4 N 4 ꎬ CAS 号为 ꎬ 常用于复合肥料中以控制硝化菌的活动 ꎬ 使氮肥在土壤中的转化速度得到调节 ꎬ 减少铵态氮的流失 ꎬ 提高肥料的使用效率 ꎮ 新西兰农民在牧场使用二氰二胺用以改善水质和减少温室气体一氧化二氮的生成 ꎬ 同时将牧草产量提高 5% 至 10% [4ꎬ5] ꎮ 图 1 二氰二胺 (DCD) 三聚氰胺(MEL) 和三聚氰酸 (CY) 的化学结构式 Fig. 1 Chemical structures of dicyandiamide ( DCD) ꎬ melamine (MEL) and cyanuric acid (CY) 测定二氰二胺的方法有高效液相色谱法 (HPLC) [6] 气相色谱质谱法 (GC MS) [7] 和液相色谱串联质谱法 (HPLC MS / MS) [8ꎬ9] ꎻ 三聚氰胺和三聚氰酸的测定有 GC MS [10] 和 HPLC MS / MS [11-14] ꎮ 国内目前尚未见到有二氰二胺三聚氰胺和三聚氰 [8] 酸同时检测的报道 ꎬ 国外仅有 MacMahon 等采用 HPLC MS / MS 同时测定这 3 种物质 ꎮ HPLC 灵敏度较低且无法提供结构信息 ꎻGC MS 需衍生后气化 ꎬ 样品处理方法复杂 ꎻ 美国 FDA 推荐的三聚氰胺和三聚氰酸检测方法为 HPLC MS / MS [14] ꎬ 样品由阴阳离子交换固相萃取小柱净化后经亲水色谱 (HILIC) 串联质谱进行分离分析 ꎬ 但前处理繁杂耗时 ꎬ 内标经过固相萃取小柱后不能稳定回收 ꎬ 导致定量不准 ꎬ 且未包含二氰二胺的检测方法 ꎮ MacMa [8] hon 等的方法采用甲酸乙腈双重稀释提取牛奶样品 ꎬ 前处理稀释倍数高达 200( 奶粉为 2 000) 倍 ꎬ 过大的稀释倍数容易在定量过程中引入偏差 ꎮ [11] 本文在前期工作的基础上 ꎬ 应用三氯乙酸作提取液的同时充分利用其蛋白变性作用 ꎬ 实现提取净化一步完成 ꎮ 样品中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸经三氯乙酸溶液同时提取 ꎬ 离心后无需氮吹定容 ꎬ 直接过膜进样测定 ꎮ 采用 HSS T3 色谱柱取代固相萃取柱和 HILIC 色谱柱进行分离 ꎬ 应用 Xevo TQ MS 的正负电离模式同时采集 ꎬ 实现了 3 个组分的同步检出 ꎮ 该方法和现有文献方法相比 ꎬ 实现了二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的同时检测 ꎬ 并兼顾操作简便快速与准确定量 ꎬ 极大地节省了检测时间和成本 ꎬ 并在牛奶奶粉等乳及乳制品中进行了检出限线性范围样品加标回收率及精密度的验证 ꎬ 结果令人满意 ꎮ 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂 UPLC Xevo TQ MS 型超高效液相色谱串联质谱仪 ( 美国 Waters 公司 )ꎻ Milli Q 超纯水系统 ( 美国 Millipore 公司 )ꎻ 微孔滤膜 (0 20 μmꎬ 美国 Pall 公司 )ꎻ 超声波清洗器 ( 江苏昆山超声仪器有限公司 )ꎻ 小型高速离心机 ( 德国 Sigma 公司 )ꎮ 二氰二胺标准品 (50 mgꎬ 中国药品生物制品检定所 ) 三聚氰胺三聚氰酸标准品 ( 纯度不小于 98 5%ꎬ 德国 Dr. Ehrenstorfer 公司 )ꎻ 三氯乙酸乙酸铵 ( 色谱级 ꎬ 美国 TEDIA 公司 )ꎻ 乙腈 ( 色谱纯 ꎬ 美国 Fisher 公司 )ꎻ 实验用水均由 Milli Q 超纯水系统制备 ꎮ 1. 2 标准溶液的配制标准储备液 : 分别准确称取二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸 10 mg 于 10 ml 容量瓶中 ꎬ 用甲醇溶解并定容 ꎬ 得质量浓度为 mg / L 的标准储备液 ꎬ 于 - 18 下避光存储 ꎮ 混合标准中间液 : 分别取上述标准储备液各 1 mlꎬ 用乙腈水 (50 50ꎬ v / v) 溶液配制成质量浓度为 10 mg / L 的标准中间溶液 ꎬ 于 4 下避光存储 ꎮ 1. 3 UPLC Xevo TQ MS 分析条件色谱条件色谱柱 :Acquity UPLC HSS T3 (50 mm 2 1 mmꎬ 1 8 μm)ꎻ 流动相 A 为 10 mmol / L 乙酸铵水溶液 ꎬ 流动相 B 为乙腈 ꎮ 梯度洗脱程序 :0 ~ 1 0 minꎬ 90% Aꎻ 1 0 ~ 2 0 minꎬ 90% A ~ 10% Aꎻ 2 0 ~ 4 0 minꎬ 10% Aꎻ 4 0 ~ 4 1 minꎬ 10% A ~ 90% Aꎻ 4 1 ~ 6 0 minꎬ 90% Aꎮ 流速为 0 3 ml / minꎻ 柱温为 35 ꎻ 进样体积为 10 0 μlꎮ 质谱条件电喷雾离子源 ꎬ 正负离子模式 (ESI ± )ꎻ 检测方

3 406 色谱第 31 卷式 : 多反应监测 (MRM)ꎻ 监测离子对锥孔电压和碰撞能量等参数见表 1ꎮ 表 1 DCD MEL 和 CY 的多反应监测扫描模式的质谱参数 Table 1 MS parameters in multiple reaction monitoring (MRM) mode for DCDꎬ MEL and CY Analyte Precursor ion(m / z) Daughter ion(m / z) Cone voltage / V Collision energy / ev DCD MEL CY quantitative ion 样品提取和净化称取 5 00 g 牛奶样品于 50 ml 离心管中 ( 奶粉样品称取 2 00 gꎬ 用 3 ml 水溶解 ꎬ 混匀 )ꎻ 加入 5 ml 5% ( 质量分数 ) 三氯乙酸水溶液 ꎬ 充分旋涡混匀 ꎬ 超声提取 30 minꎬ 取上清液至 1 5 ml 尖底塑料离心管 ꎬ r / min 高速离心 15 minꎻ 取上清液过 0 2 μm 微孔滤膜 ꎬ 滤液供 UPLC Xevo TQ MS 分析 ꎮ 2 结果与讨论 2. 1 质谱电离条件的选择二聚二胺和三聚氰胺为碱性化合物 ꎬ 根据溶液化学原理 ꎬ 易解离电子形成正离子 ꎻ 三聚氰酸为酸性化合物 ꎬ 易解离质子形成负离子 ꎮ 因此本方法采用正离子和负离子电离模式同时扫描实现二聚二胺三聚氰胺和三聚氰酸的同时测定 ꎮ 常见的文献报道中 ꎬESI ± 电离同步检测多采用分段采集的方式 ꎬ 其方法要求在液相色谱分离时必须将正负电离性质不同的组分的保留时间分离较远 ꎬ 才能实现质谱分段采集 ꎬ 这样往往会造成检测时间的增加及灵敏度的下降 ꎮ 本文利用 Xevo TQ MS 正负电离模式切换时间短灵敏度高的优势 ꎬ 用 MRM 双通道分别进行电喷雾正负电离扫描 ꎬ 无需分段分离 ꎬ 在同一出峰时间即可实现二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的同时采集 ꎮ 图 2 所示为二聚二胺三聚氰胺三聚氰酸在正负离子电离模式下同时扫描的 MRM 色谱图 ꎮ 虽然电喷雾模式切换速度可达到 0 02 sꎬ 但反吹气流量雾化温度等常规调谐参数在正负模式切换之间有延时 ꎮ 为避免参数延时响应从而影响质谱采集的灵敏度 ꎬ 实验需将正负两个模式下的调谐条件设为一致 ꎮ 以雾化温度为例 ꎬ 三氯乙酸沸点为 ꎬ 本实验在正负模式下均选取 400 雾化气温度进行雾化 ꎮ 各项调谐参数设置见表 2ꎮ 图 2 DCD MEL 和 CY 在正负离子电离模式下的 MRM 色谱图 (20 μg / L) Fig. 2 MRM chromatograms of DCDꎬ MEL and CY under ESI ± mode (20 μg / L)

4 第 5 期云环 ꎬ 等 : 超高效液相色谱串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸 407 表 2 DCD MEL 和 CY 在 MRM 模式下的质谱调谐参数 Table 2 MS tune parameters in MRM mode for DCDꎬ MEL and CY Capillary / kv Extractor / V Source temperature / Desolvation temperature / Cone gas flow / (L / h) Desolvation gas flow / ( L / h) LM1 resolution HM1 resolution LM2 resolution HM2 resolution 液相色谱条件的选择和优化由于本实验进行 MRM 双通道正负模式电离的同时扫描 ꎬ 极大地降低了对液相色谱分离的要求 ꎬ 无需考虑二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的分段分离 ꎬ 只需要考虑样品中待测物质与杂质峰的分离 ꎮ 牛奶和奶粉基质复杂 ꎬ 蛋白质和维生素等其他成分较多 ꎬ 色谱分离时应充分考虑到此类杂质峰对检测结果的影响 ꎮ 赵善贞等 [13] [9] 王祖翔等曾分别使用 HILIC 色谱柱对三聚氰胺和三聚氰酸二氰二胺和尿素等进行分离 ꎻ 本文作者也应用 HILIC 色谱柱实现了二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的标准溶液分离测定 ꎬ 但在实测样品中发现 ꎬ 随着检测样品量的增加 ( 约 200 个样品之后 )ꎬ 三聚氰胺的峰形不够稳定 ꎬ 保留时间逐渐向前漂移 ꎮ T3 键合技术采用三键 C18 烷基键合 ꎬ 配基密度低 ꎬ 可以提高极性化合物的保留并与水相流动相兼容 ꎻ 同时 ꎬ T3 技术还包括比传统三甲基氯硅烷 (TMS) 更有效的端基封尾过程 ꎮ 独特的键合与封尾技术确保 HSS T3 色谱柱针对二氰二胺等极性有机小分子有很好的保留 ꎬ 实现在反相 UPLC 条件下保留和分离水溶性的极性有机小分子 ꎬ 其原理仍是亲水色谱作用 ꎬ 同时具备 HSS 高强度硅胶填料可与 100% 水性流动相兼容不塌陷的特性 ꎮ 本课题在前期工作中曾用 HSS T3 色谱柱实现了对三聚氰酸与乳粉中杂质的分离 [11] ꎬ 现将其应用于二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的分离检测中 ꎬ 并重点观察了检测个样品后三聚氰胺标准液的出峰时间与重现性 ꎮ 实验结果显示 :Acquity UPLC HSS T3(50 mm 2 1 mmꎬ 1 8 μm) 可以实现二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸与牛奶奶粉中杂质的分离 ꎬ 且在大量实测样品之后 ꎬ 三聚氰胺的保留时间仍很稳定 ꎮ 图 3 为实测个样品之后 ꎬ 三聚氰胺在不同色谱柱上的保留时间及峰形 ꎮ 2. 3 提取和净化条件的优化二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸均属于极性化合物 ꎬ 在甲醇乙腈等纯有机溶剂中溶解度较小 ꎬ 而在水中溶解度较大 ꎬ 因此提取溶剂一般都选用稀酸溶液有机溶剂水的混合溶液极性较强的有机溶剂或缓冲溶液 ꎮ 文献报道中二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸检测的前处理分为两种思路 : 固相萃取图 3 实测 (a) 100 (b) 200 个样品之后三聚氰胺在 HILIC 和 HSS T3 色谱柱上的色谱图 Fig. 3 Chromatograms of melamine on HILIC and HSS T3 columns after detection of ( a) 100 and (b) 200 samples [12ꎬ13] 法和乙腈水体系提取法 [8ꎬ9] ꎮ 单纯的阴阳离子固相萃取很难实现 3 种组分的同步净化 ꎬ 且操作复杂 ꎬ 耗费时间较长 ꎬ 不适用于大量样品检测 ꎻ 王祖 [9] 翔等报道的方法中未包含三聚氰胺和三聚氰酸 ꎬ 且提取后的溶液不是纯有机相 ꎬ 而是乙腈水混合溶剂 ꎬ 氮气吹干需要耗时太久 ꎬ 且容易在较长的吹干过 [8] 程中损失待测物质 ꎻMacMahon 等的方法是唯一一种同时处理二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸 3 个

5 408 色谱第 31 卷组分的方法 ꎬ 但方法采用甲酸乙腈双重稀释提取 ꎬ 且稀释倍数过大 ꎮ 本实验在前期工作的基础上 [11] ꎬ 仍采用三氯乙酸提取样品 ꎬ 无需固相萃取净化 ꎬ 利用三氯乙酸对极性小分子的高提取率和沉淀蛋白作用 ꎬ 辅以高速离心 ꎬ 实现对牛奶奶粉样品的提取和净化 ꎮ 该方法快速简便 ꎬ 极易操作 ꎬ 稀释倍数在牛奶中为 2ꎬ 奶粉中为 5ꎬ 兼顾了定量要求 ꎮ 图 4 是奶粉中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸经提取净化后的色谱图 ꎮ 2. 4 基质效应标准曲线和定量限 (LOQ) 实验发现 ꎬ 乳及乳制品中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸测定过程中样品的基质干扰非常明显 ꎮ 取空白样品按 1 4 节进行前处理 ꎬ 以此基质提取液作稀释液配制混合标准溶液 ꎬ 与直接用 5% 三氯乙酸溶液配制的标准溶液对比 ꎬ 发现基质抑制效率约为 10 倍 ꎮ 为扣除此基质效应 ꎬ 本实验采用空白样品配制基质标准曲线 ꎮ 分别取不同基质的空白样品进行前处理 ꎬ 以此基质提取液作稀释液配制混合标准曲线 ꎬ 以定量离子的峰面积对质量浓度进行线性回归计算 ꎬ 在 5 0 ~ μg / L 范围内线性关系良好 (r 0 995)ꎮ 在空白样品中添加不同浓度的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸 ꎬ 前处理后按浓度由高至低检测 ꎬ 直到获得信噪比等于 10 ( S / N = 10) 的浓度 ꎬ 确定其为定量限 ( LOQ)ꎮ 本实验中 ꎬ 牛奶中 3 种化合物的定量限为 0 02 mg / kgꎬ 奶粉中 3 种化合物的定量限为 0 05 mg / kgꎮ 2. 5 方法的回收率和精密度用空白牛奶奶粉试样进行添加回收率和精密度试验 ꎮ 牛奶样品中添加水平为图 4 奶粉中添加 DCD MEL 和 CY 的 MRM 色谱图 Fig. 4 MRM chromatograms of blank milk powder spiked with DCDꎬ MEL and CY mg / kgꎬ 奶粉样品中添加水平为 mg / kgꎬ 混合后静置 ꎬ 使标准溶液被样品充分吸收 ꎬ 然后按照本方法测定 ꎬ 每个添加水平测定 6 次 ꎬ 计算加标回收率和相对标准偏差 (RSD)ꎬ 结果见表 3ꎮ 表 3 牛奶和奶粉中 DCD MEL 和 CY 的加标回收率和相对标准偏差 (n = 6) Table 3 Recoveries and relative standard deviations (RSDs) of DCDꎬ MEL and CY in milk and milk powder (n = 6) Analyte Milk Spiked / (mg / kg) Recovery / % RSD / % Milk powder Spiked / (mg / kg) Recovery / % RSD / % DCD MEL CY 方法的应用将建立的方法应用于 200 份实际乳制品产品 (10 份牛奶 190 份婴儿配方奶粉 ) 的检测 ꎬ 检出 11 份奶粉含有二氰二胺 0 1 ~ 0 6 mg / kgꎬ 其他样品均未检出这 3 种化合物 ꎮ 3 结论本文建立了一种快速有效的牛奶和奶粉中二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸的超高效液相色谱串联质谱检测方法 ꎬ 获得了满意的分离效果和检测灵敏

6 第 5 期云环 ꎬ 等 : 超高效液相色谱串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的二氰二胺三聚氰胺和三聚氰酸 409 度 ꎬ 回收率精密度和定量限均满足残留分析的要求 ꎮ 该方法尝试了应用 Xevo TQ MS 的 ESI 正负电离模式同时扫描功能 ꎬ 实现酸性和碱性物质同时电离 ꎬ 对比传统的分段电离极大地降低了对样品色谱分离的要求 ꎬ 为今后的液相色谱串联质谱方法开发提供了新的思路 ꎮ 参考文献 : [1] Ministry for Primary Industries ( MPI). For Letter of Assur ance. ( ). http: // www. mpi. govt. nz / Portals / 0 / Documents / news resources / news / letter of assurance. pdf [2] MPI. For Chinese Translation of Letter of Assurance. ( ). http: // www. mpi. govt. nz / Portals / 0 / Documents / news resources/ news/ chinese translation letter assurance. pdf [3] ChinaNews. ( ). http: // finance. chinanews. com / cj / 2013 / / shtml [4] MPI. For Chinese Translation of Frequently Asked Ques tions. ( ). http: // www. mpi. govt. nz / Portals / 0 / Documents/ news resources/ news/ chinese translation faq. pdf [5] MPI. New Zealand Government Assures Safety of Country s Dairy Products. ( ). http: // www. mpi. govt. nz / news resources / news/ new zealand government assures safety [6] Moret Sꎬ Prevarin Aꎬ Tubaro F. Food Chemistryꎬ 2011ꎬ 126: 1232 [7] Routon B Jꎬ Kocher B Bꎬ Goodpaster J V. J Forensic Sciꎬ 2011ꎬ 56(1): 194 [8] MacMahon Sꎬ Begley T Hꎬ Diachenko G Wꎬ et al. J Chrom atogr Aꎬ 2012ꎬ 1220: 101 [9] Wang Z Xꎬ Jiang Jꎬ Sun Lꎬ et al. Journal of Instrumental Analysis ( 王祖翔 ꎬ 蒋俊 ꎬ 孙莉 ꎬ 等. 分析测试学报 )ꎬ 2012ꎬ 31 (5): 593 [10] Li F Gꎬ Yao W Qꎬ Su Mꎬ et al. Chinese Journal of Chroma tography ( 李锋格 ꎬ 姚伟琴 ꎬ 苏敏 ꎬ 等. 色谱 )ꎬ 2009ꎬ 27 (2): 233 [11] Yun Hꎬ Zhang Z Hꎬ Gao Y Yꎬ et al. Chinese Journal of Chromatography ( 云环 ꎬ 张朝晖 ꎬ 高洋洋 ꎬ 等. 色谱 )ꎬ 2010ꎬ 28(11): 1026 [12] Gui Q Wꎬ Liu Hꎬ Zhao Z Yꎬ et al. Chinese Journal of Chro matography ( 桂茜雯 ꎬ 柳菡 ꎬ 赵增运 ꎬ 等. 色谱 )ꎬ 2010ꎬ 28 (9): 859 [13] Zhao S Zꎬ Deng X Jꎬ Yi X Hꎬ et al. Chinese Journal of Chromatography ( 赵善贞 ꎬ 邓晓军 ꎬ 伊雄海 ꎬ 等. 色谱 )ꎬ 2012ꎬ 30(7): 677 [14] FDA. LIB No [ ]. http: // www. fda. gov / Food / ScienceResearch / LaboratoryMethods / DrugChemical ResiduesMethodology / ucm htm

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0. 118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI