關鍵字 : 降血糖機能性胜肽 GHTD 第二型糖尿病 前言糖尿病 (Diabetes mellitus;dm) 目前位居國人十大死亡因素第四位, 它是一種生理代謝上對於糖類無法控制恆定的一種代謝疾病, 其主要原理是由於血液中的糖分無法經由正常的蛋白質產生穩定的訊號傳遞將之轉化為肝醣儲存於肝臟中 世界
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1 Development and Bioproduction of Protein Containing the GHTD Peptide to Stimulate the Formation of Active Monomeric Insulin 促進形成有活性單體胰島素的胜肽蛋白 GHTD 之開發與生產 專題生 : 洪永聰 Youg-Tsung Hong 指導教授 : 簡宏堅 Hung-Chien Roger Chien 大葉大學分子生物科技學系 ( 彰化縣大村鄉學府路 168 號 -J514 實驗室 ) F @gmail.com 摘要降血糖機能性胜肽 Gly-His-Thr-Asp(GHTD-amide) 是從人尿液中萃取出來的四胜肽, 其萃取物經動物實驗證實具有降血糖之功效, 作為預防和治療第二型糖尿病之用, 將萃取液由 LC-MS-MS 分析而得到的一段胺基酸序列 我們選用人類酪胺酸羥基酵素 ( Homo.sapiens tyrosine hydroxylase; HTH ) 做為攜帶機能性胜肽的蛋白擔體, 再尋找此酵素構造的外圍胺基酸鏈時, 發現有五大區段可做為置換機能性胜肽的位置, 並且置換的區段是不影響活性中心, 並在其機能性胜肽之 N 端與 C 端設計 Phe 以利 pepsin 切割使胜肽釋出, 確定其可行性後才進行降血糖胜肽之引子設計與構築 因為我們在完成酵素外圍含有降糖胜肽區段置換之後會將其轉殖於 Yarrowia lipolytica 中進行生產, 故選用 Yarrowia lipolytica 使用率最高之胺基酸編碼之密碼子設計引子 本實驗總共運用十九支引子及九次的基因選殖, 開發出含有二十二套降血糖機能性胜肽 GHTD 之蛋白質 首先將攜帶機能性胜肽蛋白 HTH 的第一區段 第二區段 第三四區段及第五區段, 各置換入降血糖機能性胜肽 GHTD 完成單區段置換後, 接著進行兩兩區段之連接 ; 將置換好的第一區段及第二區段之降血糖胜肽做連接 ; 再將已置換好的第三四區段及第五區段之降血糖胜肽做連接 ; 最後再將置換好第一二區段與第三四五區段之降血糖胜肽做完整的連接 ; 當連接完成後接著選殖進入 Y. lipolytica 酵母菌胞外分泌的表現載體 pylsc1-5s; 最後將已置換好第一二三四五區段之降血糖胜肽於 pylsc1-5s 內, 再轉形插入至 Y. lipolytica 酵母菌染色體, 完成降血糖機能性胜肽之基因選殖 得到含有 82 組目標基因之酵母菌選殖株 ( Y-GHTD-SC ) 並用分光光度計測定其生長曲線, 得到最適生長時間為 16 小時 ; 將 Y-GHTD-SC 基因表現後得到粗酵素 (crude GHTD-HTH ), 藉由人類酪胺酸羥基酵素自身之活性, 運用高效能液相層析儀 ( HPLC ) 分析產物量反推酵素最大分泌量, 測得誘導基因表現之酵素最大分泌量的時間為 36 小時, 再用 starch 回收純化隨後進行分子量預測分析可知 HTH 是為 54.6 kda, 而在基因選殖階段是置換機能性胜肽進入酵素中, 故 GHTD-HTH 分子量是約 54.6 kda, 而 Y. lipolytica 酵母菌的轉譯後修飾導致目標蛋白醣基化, 會使其分子量增加約 10 kda, 故將純化後 GHTD-HTH 進行 SDS-PAGE 分析分子量, 結果約為 65 kda 經由多次的純化回收, 發現 1 公升的培養液可以純化回收 50 公克以上的胜肽蛋白 未來回收 GHTD HTH 胜肽蛋白, 經由 pepsin 水解切割並釋出降血糖胜肽, 將其水解液利用 LC-MS-MS 分析, 確認 GHTD-HTH 的蛋白酶水解液中含有 GHTD 胺基酸序列, 而後將用 500L 發酵槽生產 GHTD-HTH 降血糖胜肽蛋白, 再將此降血糖胜肽蛋白進行動物試驗及人體試驗, 希望可以幫助人類治療糖尿病, 而後也將積極通過政府標章認證之健康食品
2 關鍵字 : 降血糖機能性胜肽 GHTD 第二型糖尿病 前言糖尿病 (Diabetes mellitus;dm) 目前位居國人十大死亡因素第四位, 它是一種生理代謝上對於糖類無法控制恆定的一種代謝疾病, 其主要原理是由於血液中的糖分無法經由正常的蛋白質產生穩定的訊號傳遞將之轉化為肝醣儲存於肝臟中 世界衛生組織 ( World Health Organization; WHO) 將糖尿病分成四種類型 : 胰島素依賴型糖尿病 ( Insulin-dependent diabetes mellitus; IDDM) 非胰島素依賴型糖尿病(Non-insulin dependent diabetes mellitus;niddm) 續發性糖尿病 (Continues diabetes mellitus;cdm) 以及妊娠型糖尿病 (Gestational diabetes mellitus;gdm) 我們實驗室所研究的胰島素依賴型糖尿病, 其作用機制則是有百家爭鳴的情況 其一, 血糖的升高並非由於血液中胰島素的濃度改變, 而是胰臟外胰島素的作用改變而產生的 (Bailey et al., 1985); 其二, 由於胰臟中的 beta-cell 所分泌的的胰島素過少或是突變進而導致經由血液運輸到肝臟前, 胰島素無法與肝臟細胞膜表面的胰島素受體 (Insulin receptor) 正確的結合 ( Lauge Schaffer et al., 1994 ) 所以進而導致無法產生有效的訊號傳遞將葡萄糖轉化為肝醣, 最後造成血糖濃度過高的一種病症 ; 其三, 在醣質新生的生化代謝路徑中, 研究表示必須藉由抑制血糖合成, 除了透過抑制路徑中關鍵的葡萄糖 -6- 去磷酸酵素 ( Glucose-6-phosphatase;G6P ), 或是加強啟動葡萄糖 -6- 磷酸去氫酵素 (Glucose-6-phosphate dehydrogenase;g6pdh) 來活化葡萄糖氧化路徑 ( Shibib et al., 1993 ) 降血糖胜肽 (Hypoglycemic peptide) 研究大多偏向動物試驗, 很少有其作用機制以及其成份功能性的研究 對於各種動物試驗研究表示, 其降血糖胜肽的來源廣泛, 包括有苦瓜及尿液 早在 1970 年由人類尿液中就已經萃取出降血糖胜肽, 在最近經由動物試驗中測試其同一時間的肝糖生成量與血糖下降量分析其血糖轉肝糖之降血糖能力證實具有降血糖活性, 其胺基酸序列為 GHTD (S.G. Paule et al., 2009 ) 由於這段胜肽尚未被應用於保健食品, 若能利用分子生物科技將多套數的 GHTD 置換到人類酪胺酸羫基酵素上, 並將基因送入耶氏解脂酵母菌進行表現後執行胞外分泌, 這將會有助於國內保健食品工業的發展 運用分子生物科技 生物資訊學以及生物化學原理, 藉由人類酪胺酸羫基酵素的立體模擬構形找出不影響其活性中心之外側胺基酸的區段, 並設計好降血糖胜肽兩端含有可被 pepsin 水解的胺基酸 Phe 得到 FGHTDF, 在一個區段內置換進入四套到七套的降血糖胜肽來改造人類酪胺酸羫基酵素 由於目的是提高胜肽作用活性的置換胺基酸工程會在產生內毒素的 Escherchia coli 內進行, 所以我們將已置換完成的基因經選殖後再送入無內毒素無害且基因表現後執行胞外分泌的 Y. lipolytica 站在酵素處於不適合的酸鹼值的考量之下, 因為我們目的是水解出具有降血糖活性的胜肽來降低體內血糖濃度, 所以不需額外加工處理, 食用後抵達胃的胜肽蛋白會被 pepsin 水解而釋放出降血糖胜肽, 再進入十二指腸被吸收或小腸中被吸收, 進而減低血糖高濃度的情形, 且促進身體健康, 期望這將有助於提升國人健康指數
3 研究動機根據行政院衛生署調查結果表示, 繼癌症 肺炎以及心血管疾病, 糖尿病是為國人第四大死亡因素, 占全台灣死亡人口總數的 5.6 % ( 行政院衛生署統計室,2010) 如果血糖長時間維持在高濃度之下, 容易造成血管糖化進而脆裂, 嚴重時必須截肢, 因此, 關於此類保健食品的生產與應用, 將會有助於國人提升健康指數, 減低慢性疾病之發生率 食品工業發展研究所報告指出, 目前全球與胜肽相關協會之研究領域在食品與醫療相關產業方面投入甚多, 可見具有生物活性胜肽的生產與製造在未來將會成為趨勢 從提煉與萃取技術尋找具有生物活性胜肽之功能性固然必要, 但是存在著產量少 純度低以及成本高的隱憂, 如果能適當的運用分子生物科技, 期望可以有效的提高胜肽的純度以及其功能性之作用效率 截至目前為止, 從期刊中發現 GHTD-amide 具有降血糖之功能性, 並且經由動物實驗證實其功能性 ( S.G. Paule et al., 2009 ) 由於這段胜肽尚未被應用於保健食品, 若能利用分子生物科技將多套的 GHTD 置換到人類酪胺酸羫基酵素上, 並將 82 組基因送入耶氏解脂酵母菌進行表現後執行胞外分泌, 這將會有助於國內保健食品工業的發展 運用分子生物科技 生物資訊學以及生物化學原理, 藉由人類酪胺酸羫基酵素的立體模擬構形找出不影響其活性中心之外側胺基酸的區段, 並設計好降血糖胜肽兩端含有可被 pepsin 水解的胺基酸 Phe 得到 FGHTDF, 在一個區段內置換進入四套到七套的降血糖胜肽來改造人類酪胺酸羫基酵素 由於目的是提高胜肽作用活性的置換胺基酸工程會在產生內毒素的 Escherchia coli 內進行, 所以我們將已置換完成的基因經選殖後再送入無內毒素無害且基因表現後執行胞外分泌的 Y. lipolytica 站在酵素處於不適合的酸鹼值的考量之下, 因為我們目的是水解出具有降血糖活性的胜肽來降低體內血糖濃度, 所以不需額外加工處理, 食用後抵達胃的胜肽蛋白會被 pepsin 水解而釋放出降血糖胜肽, 再進入十二指腸被吸收或小腸中被吸收, 進而減低血糖高濃度的情形, 且促進身體健康, 期望這將有助於提升國人健康指數 Figure 1 : HTH 可供降血糖胜肽 (GHTD) 置換之五大區段構型示意圖
4 Figure 2 : GHTD 作用機制 實驗流程 Figure 3 : 實驗流程
5 結果找尋 HTH 中可置換降血糖胜肽之五大區段根據 Goodwill 等人利用 X-ray 晶體繞射解析 Rattus norvogicus tyrosine hydroxylase (R. norvogicus tyrosine hydroxylase) 其 Phe300 His331 His336 及 Glu376 這四個胺基酸皆與二價鐵離子鍵結形成活性中心 (Goodwill et al., 1998) 以避開活性中心為準則, 在 Homo sapiens tyrosine hydroxylase(hth) 內設計五大區域置換機能性胜肽, 以運用酵素本身固有的催化機制, 對降血糖胜肽機能性蛋白 ( GHTD-HTH) 進行分析, 以利做為未來工業生產時之基礎依據 五大區段之序列置換位置分析因 R. norvogicus tyrosine hydroxylase 與 HTH 之胺基酸經比對後, 相似度極高, 故本研究利用已發表 R. norvogicus tyrosine hydroxylase 之蛋白質構形來尋找不影響酵素活性中心之五大區段位置進行置換, 並且將之套用在 HTH 上執行富含機能性胜肽之蛋白質開發 HTH 可置換機能性胜肽區段有五個, 其胺基酸部分參考 R. norvogicus tyrosine hydroxylase 之蛋白質構形, 其橘色第一區段為 165~199aa, 黃色第二區段為 200~229aa, 綠色第三區段為 230~245aa, 藍色第四區段為 250~265aa, 由於第三 四區段相鄰所以將之合併執行胜肽置換之工作, 第三 四區段合併後為 230~265aa, 紅色第五區段為 395~415aa 而本研究於此五大區段所置換的降血糖機能性胜肽之核苷酸位置為紅色第一區段為 508 ~ 567 bp, 綠色第二區段為 601~660bp, 藍色第三 四區段合併後為 700~789bp, 粉紅色第五區段為 1,186~1,245bp(Figure 1) 不同種別之酪胺酸羫基酵素胺基酸序列比對本研究所使用的人類酪胺酸羫基酵素, 其分子量為 54.7 kda 共有 497 個胺基酸殘基以及 1,494 個核苷酸 目前已發表有關酪胺酸羫基酵素的蛋白質構形研究只有同屬哺乳類之 R. norvogicus tyrosine hydroxylase 之基因, 故將同是哺乳類 HTH 與其胺基酸做比對分析後, 發現其相似度高達約 93.98% 基因選殖在基因選殖的部份, 我們目標是選殖出富含降血糖胜肽之 HTH 基因在 pylsc1-5s 中 ; 在程序設計上, 我們在 pqe30 中各別完成單區段降血糖胜肽置換於 HTH 之基因選殖 (Figure 4), 隨後將單區段各個連接在一起, 並且於連接完成後選殖進 pylsc1-5s 中 最後, 利用 YLEX expression kit 之 YLOS transformation procedure 將目標基因轉形成無毒無害之 Y. lipolytica 酵母菌以便於工業生產 將降血糖胜肽序列置換至 HTH 之第一區段 (GHTD1) 抽取質體後, 由設計之引子夾出頭部 (HTHF+GHTD1R ) 與尾部 (GHTD1F+HTHR) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1494bp 接著藉由增幅全長並且純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位利於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 4 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 送 8 號菌去定序, 經定序比對
6 後, 結果無誤 Figure 4 : 生物活性胜肽構築示意圖 將降血糖胜肽序列置換至 HTH 之第二區段 (GHTD2) 抽取質體後, 由設計之引子夾出頭部 (HTHF+GHTD2R) 與尾部 (GHTD2F+HTHR) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並且純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 4 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 送 51 號菌進行定序, 經定序比對後, 結果無誤 將降血糖胜肽序列置換至 HTH 之第三四區段 (GHTD34) 抽取質體後, 由設計之引子夾出頭部 (HTHF+GHTD34R) 與尾部 (GHTD34F+HTHR) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並且純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 4 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 送 5 號菌進行, 定序經定序比對後, 結果無誤 將降血糖胜肽序列置換至 HTH 之第五區段 (GHTD5) 抽取質體後, 由設計之引子夾出頭部 (HTHF+GHTD 5R) 與尾部 (GHTD 5F+HTHR) 並且將目標
7 純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並且純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 4 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 送 2 號菌去做定序, 經定序比對後, 結果無誤 接合降血糖胜肽序列第一區段及第二區段 (GHTD 1-2) 抽取 GHTD1 GHTD2 體後, 由設計之引子夾出 GHTD1 是為頭部 (HTHF+over12R), 夾出 GHTD2 是為尾部 (over12f+hthr) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 3 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 經定序比對後, 結果無誤 接合降血糖胜肽序列第三四區段及第五區段 (GHTD 34-5) 抽取 GHTD34 GHTD5 質體後, 由設計之引子夾出 GHTD34 是為頭部 (HTHF+over45R), 夾出 GHTD5 是為尾部 (over45f+hthr) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 2 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 經定序比對後, 結果無誤 接合降血糖胜肽第一 二區段及第三四 五區段 (GHTD ) 抽取 GHTD12 GHTD345 質體後, 由設計之引子夾出 GHTD12 是為頭部 (HTHF+over12345R), 夾出 GHTD345 是為尾部 (over12345f+hthr) 並且將目標純化, 隨後進行重疊式聚合酶鏈鎖反應, 將頭尾重疊後成為全長 1,494bp 接著藉由增幅全長並且純化, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 3 支陽性菌株是為轉殖株最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 (HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 經定序比對後, 結果無誤 (Figure 5) 選殖降血糖胜肽 GHTD1-5 於 pylsc1-5s 表現載體 (GHTD-SC) 抽取 GHTD1-5 質體後, 由設計之引子 (YHTHF+YHTH-6HKR) 做全長增幅, 以將 6x His 及 kpn1 切位補足, 並純化回收 經限制酵素切 (HindIII kpn1) 割後使目標基因與表現載體具有相同切位便於黏合作用, 然後經轉形藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 2 支陽性菌株是為轉殖株 最後將轉殖株抽質體, 經限制酵素 ( HindIII BamHI) 切割後再次確認含有目標基因, 經定序比對後, 結果無誤 (Figure 6)
8 Figure 5 : 構築 GHTD 醫治五區段定序結果示意圖
9 Figure 6 : 構築於 pylc1-5s 示意圖 轉型降血糖胜肽 GHTD-SC 於 Y. lipolytica 酵母菌中 (Y-GHTD-SC) 抽取 GHTD-SC 質體後, 經限制酵素 (Hpa I) 切割後使用 YLEX expression kit 將之轉形, 最後 藉由篩選式聚合酶鏈鎖反應得到 5 支陽性菌株是為轉殖株 基因表現將富含連結降血糖胜肽之 Y. lipolytica 酵母菌轉殖株 (Y-GHTD-SC) 基因表現, 藉由營養缺乏的方式使 Y. lipolytica 酵母菌自身啟動子啟動執行轉錄 轉譯並且摺疊透過訊號胜肽分泌至胞外, 經由離心回收上清液 接著將得到的粗酵素經過透析與純化後得到純酵素, 並且由聚丙烯醯胺凝膠電泳 (eletrophoresis of SDS-PAGE) 確認目標分子量大小 而後將送至生技公司使用液相層析串聯質譜儀 (LC MS-MS) 分析降血糖胜肽之序列 Y. lipolytica 之生長曲線 Y. lipolytica 酵母菌之生長曲線是在菌體生長後於 72 小時內不同時間取樣, 並使用分光光度計偵測後得到之數據作成曲線, 數據表示第 16 小時開始趨近於飽和, 在 16 小時之後菌體生長速率減緩 Y. lipolytica 之誘導曲線使用高效液相層析儀分析 24mM tyrosine 20μl 標準品之滯留時間為 5.45mins, 使用高效液相層析儀分析 24mM L-DOPA 20μl 標準品之滯留時間為 4.09mins, 並在開始誘導菌體分泌蛋白之 84 小時內不同時間點取樣, 運用 HPLC 分析粗酵素催化受質生合成產物後得到之數據得知, 避開活性中心置換機能性胜肽於 HTH 中, 再將其產物積分值作成 Y. lipolytica 酵母菌之誘導曲線
10 可知道第 36 小時是酵素最大分泌量之時間 SDS-PAGE 之蛋白質分子量預測將透析結束之蛋白質液由 Ni-NTA column 純化, 最後進行聚丙烯醯胺凝膠電泳確認目標分子量大小 理論值分子量應為 54.7kDa, 然而,Y. lipolytica 酵母菌胞外分泌系統在執行胜肽鏈摺疊前會先將目標蛋白醣基化 (Madzak et al., 2004), 所以其分子量在 SDS-PAGE 上表示出 65kDa 表現 分泌 純化回收之蛋白量經由 SDS-PAGE 分析片段分子量後將之定量, 將其分光值 代入 BSA 標準曲線所得到之檢量線公式 y=0.0317x+0.052, 純化後的蛋白 GHTD-HTH 其濃度為 μg/ml, 其單位活性 (unit activity) 為 μmol/min, 接著將單位活性 (U) 除以蛋白質濃度 (mg) 即可得其比活性 (specific activity) 為 U/mg 而在 200ml 之酵母菌培養液, 共回收了 10 ml 之純蛋白, 故共純化了濃度 μg /ml 之蛋白量 ; 由此推算,1 公升酵母菌培養液中, 可獲得 μg/ml 之蛋白量 64.5kda 圖 7. 目標基因表現經純化於聚丙烯酰胺凝膠 (SDS-PAGE) 電泳後之結果 Figure 8 : 由聯合國所創, 代表糖尿病的藍色圓圈
11 結論 1. 選定 HTH 中不影響酵素活性區段之可供置換區域進行置換 2. 成功置換 HTH5 區域中 22 套 GHTD 胜肽 3. 完成 GHTD-HTH 送入酵母菌 5S-RNA 基因中 4. 利用 Starch binding 回收蛋白,HTH 蛋白大小為 54.5kda, 因酵母菌分泌時的糖化作用會提升 10kda, 故最後蛋白大小為 64.5kda 參考文獻 1. S.G. Paule, B. Nikolovski, R.E. Gray, J.P. Ludeman, A. Freemantle, R.A. Spark, J.B. Kerr, F.M. Ng, P.Z. Zimmet, M.A. Myers GHTD-amide: A naturally occurring beta cell-derived peptide with hypoglycemic activitypeptides, Volume 30, Issue 5, May 2009, Pages Sarah G. Paule, Biljana Nikolovski, Justin Ludeman, Robyn E. Gray, Leone Spiccia, Paul Z. Zimmet, Mark A. MyersAbility of GHTD-amide and analogs to enhance insulin activity through zinc chelation and dispersal of insulin oligomerspeptides, Volume 30, Issue 6, June 2009, Pages 申一中 ; 苦瓜萃取物調整血糖之活性成分的探討 ;2007 中國醫藥大學中國醫學研究所 4. 邱智賢 李英惠 ; 糖尿病特定標的之藥物開發 ; 中研院分生所 5. Catherine Madzak, Claude Gaillardin, Jean-Marie Beckerich. Heterologous protein expression and secretion in the non-conventional yeast Yarrowia lipolytica: a review. Journal of Biotechnology 109 (2004)
K-3-運用耶氏酵母菌胞外分泌系統執行降血糖機能性胜肽GHP之蛋白質(李志軒).doc
運用耶氏酵母菌胞外分泌系統執行降血糖機能性胜肽 GHP 之蛋白質 開發與生產 專題生 : 李至軒 指導教授 : 簡宏堅 E-mail:[email protected] 摘要所謂的 胜肽 就是小分子胺基酸鏈, 蛋白質經水解後, 轉變成由數個胺基酸組成之極小分子量物質, 一般身體分解食物中的蛋白質必須經過多種酵素的輔助才可分解吸收 胜肽是蛋白質的裂解物, 因其分子極小 ( 分子量約為
篇名:
篇 名 : 不 可 小 看 的 慢 性 疾 病 - 糖 尿 病 作 者 : 許 瑋 玲 國 立 嘉 義 高 級 家 事 職 業 學 校 幼 保 科 三 年 乙 班 壹 前 言 世 界 衛 生 組 織 估 計, 由 於 人 口 增 長 老 齡 化 不 健 康 的 飲 食 肥 胖 和 久 坐 不 動 等 生 活 方 式 的 影 響, 發 展 中 國 家 將 出 現 糖 尿 病 比 例 將 所 有 上 升
retrieve Molecular Biology of THE CELL 5 Thomas Südhof 從突變的酵母菌看出控制基因 DNA DNA Roger David Kornberg 謝克曼利用酵母菌突變株篩選出可調控細胞不同情況傳輸系統的多種基因, 這一發現為
34 2014 6 498 2013 年諾貝爾生理醫學獎 揭開細胞傳輸系統的奧祕 2013 3 囊泡傳輸系統的重要性 60 vesicle traffic endocytosisexocytosis 細胞傳輸分子的關鍵 3 Randy Schekman James Rothman 細胞會依據執行不同的生物功能而製造出不同的分子, 這些分子都必須在正確的時間製造, 運輸到正確的位置或釋放到細胞外, 產生特定的生理效應
本月專題 聽 DNA 和 RNA 的對話 葡萄糖代謝 : mg/dl mg/ dl glucose sensor glucose transporter
/ 藍色圓圈的約定 / 藍色圓圈的約定 文 / 陳思達 WHO 1991 Frederick Banting 11 14 葡萄糖的代謝 ATP 1 32 科學研習 DEC 2016 No.55-12 本月專題 聽 DNA 和 RNA 的對話 葡萄糖代謝 : 1. http://www.wikiwand.com/zhtw/%e8%91%a1%e8%90%84%e7%b3%96 60 100 mg/dl
WHO ---- ---- , 200 5% 8.6% 18.8% 200, 140 , MS MS 60 80 X 1999 WHO MS (2004.12) 1. BMI>25 >24 >28 BMI kg / m 2 2. 6.1mmol/L, 2h 7.8mmol/L 3. BP 140/90mmHg ( ) 4. TG 1.7 mmol/l /L HDL-C C
若能利用生物科技來改變外觀體色, 使熱帶魚有了特殊色澤, 便能大大地提高這魚種的觀賞價值及國際競爭力 GM pet fish DNA DNA DNA 觀賞水族界的新寵兒 Time Qrio 水產轉殖科技的活教材
美麗的意外 A B C D DNA medaka fish 鱂 A 鱂 1997 B CD 1999 DNA 24 2015 7 511 若能利用生物科技來改變外觀體色, 使熱帶魚有了特殊色澤, 便能大大地提高這魚種的觀賞價值及國際競爭力 GM pet fish DNA DNA DNA 觀賞水族界的新寵兒 Time 2003 40 Qrio 水產轉殖科技的活教材 2015 7 511 25 2003
X 傳統育種技術 分子育種技術 基因改良育種
06 2015 7 511 72 92? 2010? X 傳統育種技術 1960 1980 30 60 20 分子育種技術 5 10 3 5 基因改良育種 2015 7 511 07 改良後的基因及其生產的蛋白質都需經過嚴格的動物及田間生物安全試驗才會上市, 程序就跟新藥一樣 20 基改產品禁得起考驗 12 2013 1.75 50 1 5 1996 80 2013 156 35 21 6 90 08
第 二 章 : 中 醫 對 糖 尿 病 的 治 療 中 藥 內 治 法... 36... 36... 38 中 藥 外 治 法... 41... 41... 45 針 灸 療 法... 47... 48... 49... 50... 51 推 拿 療 法... 52... 54... 54... 5
目 錄 前言... 3 序一...劉良 6 序二... 方宏勳 7 序三... 余寶珠 8 第一章 認識糖尿病 什麼是糖尿病... 16 糖尿病的由來... 16 世界各國糖尿病的發病情況... 18 本港糖尿病的發病情況... 19 現代醫學對糖尿病的認識... 20 糖尿病的症狀... 20 糖尿病常見的分型及病因... 20 糖尿病的診斷標準... 22 糖尿病的併發症... 22 引起糖尿病的高危因素...
2013~2015 保健食品產業專業人才 供需調查 2011 5 2011529 2012 2013~2015 2012 44.67% 2011 11.96% 2013~2015 ... 1... 1... 5... 10... 12... 13... 14... 19... 20... 22... 24... 12... 19... 21... 22 III IV 1... 1 2... 3
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
第十章 基因的作用
第十章基因的作用 DNA 第一節遺傳物質的發現 一 核酸 () 1. 2. (1) 1869 (F.Miescher) (nuclein) (2) (3) (ribonucleicacid;rna) (deoxyribnucleic acid;dna) () 1. (F.Griffith) 1928 2. (O.Avery) DNA 3.(H.O.Hershey)(M.Chase) DNA () 1.
Microsoft Word - statistics04-1_doc.docx
入學新生體檢及異常統計表 (102 學年度 ) 國立成功大學 102 學年度新生體檢表概況 學院別 未檢 比例 不合格 比例 合格 比例 總 文學院 16 4.68 290 88.96 36 11.04 342 理學院 48 9.86 345 78.59 94 21.41 487 工學院 256 12.59 1432 80.54 346 19.46 2034 管理學院 42 5.10 672 85.93
1970 新技術的應用 X = 20 + B 13B δ13c X 1 X
凡發生過的必留下痕跡 同位素分析的考古應用? 如何考古 06 2013 9 489 經由人骨中碳和氮同位素的分析, 提供考古學家另一個探討古代攝食系統的途徑 另外, 可以藉由鍶同位素分析了解人群的來源與遷移過程 1970 新技術的應用 13 15 13 12 15 14 13 15 13 12 15 13 15 13 X = 20 + B 13B δ13c X 1 X 2013 9 489 07 δ
目 录 第 一 节 项 目 概 况... 3 第 二 节 投 资 方 案... 6 第 三 节 项 目 实 施 的 必 要 性 与 可 行 性... 9 第 四 节 项 目 效 益 分 析... 14 第 五 节 项 目 风 险 分 析... 16 第 六 节 报 告 结 论... 17 2
山 西 振 东 制 药 股 份 有 限 公 司 关 于 收 购 山 西 安 特 生 物 制 药 股 份 有 限 公 司 股 权 的 可 行 性 研 究 报 告 2011 年 5 月 1 目 录 第 一 节 项 目 概 况... 3 第 二 节 投 资 方 案... 6 第 三 节 项 目 实 施 的 必 要 性 与 可 行 性... 9 第 四 节 项 目 效 益 分 析... 14 第 五 节 项
第一章 緒論
8.doc 9483 175-203 中共地方政府 較大的市 建制與地位之探討 摘要 關鍵詞 : 較大的市 設區的市 行政區劃 地級市 地方政府 地方立法 175 壹 前言 1 2 貳 較大的市 設置的背景與意義 1949 10 176 1950 1954 9 20 53 1955 6 9 20 1959 9 17 9 3 1978 177 33 4 5 6 80 7 1976 1979 7 1 20
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- 38 - - 39 - - 40 - - 41 - - 42 - - 43 - - 44 - - 45 - - 46 - - 47 - - 48 - - 49 - - 50 - - 51 - - 52 - - 53 - - 54 - - 55 - - 56 - - 57 - - 58 - - 59 - - 60 - - 61 - - 62 - - 63 - 2 1 4 1 8 1 16 1-64
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i i ii 1 2 3 4 % N) 5 50.0 AMINO ACID #64 [modified by Administrator] IntAmp_1 nc 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0-10.0 1 - ala - 10.483 2 - thr - 11.107 3 - gly - 11.872 4 - val - 13.458 5 - ser - 14.903 6 - pro
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附 錄 九 餐 廳 委 外 經 營 合 約 德 育 醫 護 管 理 專 科 學 校 ( 以 下 簡 稱 甲 方 ) 委 託 公 司 ( 以 下 簡 稱 乙 方 ), 經 營 甲 方 經 國 樓 地 下 室 上 廳 供 應 社, 供 應 本 校 師 生 餐 食, 經 雙 方 協 議, 茲 訂 定 左 列 條 款 以 資 共 同 遵 守 履 行 第 一 條 本 ( 臨 時 ) 合 約 有 效 期 限 自
A A A I have a dream A 故事緣由 100 μm a
A 夢細胞工房 三度空間細胞培養 故事 5 A Dream A 38 2014 11 503 A A A I have a dream A 故事緣由 100 μm 0.000001 20 a 2014 11 503 39 尋找適合幹細胞培養的環境, 尤其是一個三度空間的環境, 對於讓細胞表現出正常的特性格外重要 1960 1980 40 2014 11 503 50 μm 3D 41 2014 11
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1~2 3 4 5~6 7~8 9~10 11 12 13 14 15 16~18 16 16 17 17 18 18 18 19 19 19 20 21 22 23~26 23 24 24 25 26 27 27 27 : 110V 1 110V 110V 15A 2 3 23 24 4 ( ) 5 6 1 2 26 20 l 1 7 3 4 5 15 17 18 12 7~13 6 ~ 8 ~
060522達文西密碼_全_.PDF
Date: May-22-2006 Page 1 Date: May-22-2006 Page 2 Date: May-22-2006 Page 3 Date: May-22-2006 Page 4 Date: May-22-2006 Page 5 Date: May-22-2006 Page 6 Date: May-22-2006 Page 7 Date: May-22-2006 Page 8 Date:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 40 94 88 82 77 72 67 62 57 53 48 44 40 37 33 29 26 23 20 17 14 11 8 39 94 88 82 77 71 66 61 57 52 48 44 40 36 32 28 25 22 18 15 12 9 7 38 94 88
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1 2 3 4 5 6 7 8 公式 2 4 2 1 能 整除 因此後玩 者贏 且關鍵數 字為3 的倍數 3 0 3 1 不能整除 所 以先拿餘數 2 關鍵數字是 4的倍 數 2 先玩者贏 4 0 4 1 能整除 因此 後玩者贏 且 關鍵數字為 5 的倍數 5 0 5 1 不能整除 所 以先拿餘數 2 關鍵 數字是 6的倍 數 2 先玩者贏 7 0 6 1 能整除 因此 後玩者贏 且 關鍵數字為7
修正簡要說明
動 作 機 能 訓 練 領 域 課 程 壹 基 本 理 念 孩 童 的 動 作 發 展 會 隨 著 年 齡 增 長 而 逐 漸 成 熟 化 多 樣 化, 而 動 作 發 展 除 了 需 要 身 體 生 長 神 經 肌 肉 骨 骼 系 統 的 成 熟 外, 還 需 要 個 體 與 環 境 充 分 的 互 動 才 能 達 成 學 生 必 頇 先 具 備 基 本 的 動 作 能 力, 才 能 進 一 步
校园之星
x x x x x x C H N O V x B x x x x S S x mm cm cm cm cm x x x x x x x x A A B X B B ml x x B
963
投 稿 類 別 : 觀 光 餐 旅 類 篇 名 : 改 變 人 們 對 苦 瓜 的 恐 懼 作 者 : 鄒 汶 芳 國 立 台 中 高 農 餐 飲 技 術 科 二 年 甲 班 徐 佩 暄 國 立 台 中 高 農 餐 飲 技 術 科 二 年 甲 班 謝 秉 浴 國 立 台 中 高 農 餐 飲 技 術 科 二 年 甲 班 指 導 老 師 : 曾 淑 華 壹 前 言 一 研 究 動 機 : 根 據 國 際
老人 社 交 活 動 McAuley et al., 2000 Glass 1999 Mendes de Leon ~2 1~ % 10.56% 9.23% 6.05% 24.72% 14.18% 12.12% 影響老人社交活動的因素一 生理功能的改變 Bar
社交活動對老人的影響 文 / 張麗芳 RN, 新樓醫院護理部督導, 導輔英科技大學護理系研究所進修中 前言 7 28 1993 7 2007 10 65 233 133 10.16 57.6 95 2.4 2005 65 29.52% 65.20% 55.16% Mendes de Leon Glass Berkman 2002 34.1% 43.2% 2005 社交活動的概念一 社交活動的定義 social
老人憂鬱症的認識與老人自殺問題
18-24 25-44 45-64 65 10 8 6 4 2 0 ( 40% 15% Affect Cognition : drive Behavior DSM-V major depressive episode 2 9 5 Electronic Convulsion Therapy; ECT Rabins65 1% Rabins, 1992 20%-30% Blazer, 1994 65 12.9
國立臺東高級中學102學年度第一學期第二次期中考高一國文科試題
國 立 臺 東 高 級 中 學 102 學 年 度 第 一 學 期 第 二 次 期 中 考 高 一 國 文 科 試 題 卷 畫 答 案 卡 : 是 否 ( 班 級 座 號 科 目 代 號 畫 錯 扣 5 分 ) 適 用 班 級 :1-1 1-9 1-11 考 試 範 圍 : 梧 桐 樹 醉 翁 亭 記 古 橋 之 戀 樂 府 詩 選 論 語 選 一 默 寫 : 依 原 文 將 正 確 文 句 填 入
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任 志 强 回 忆 录 哪 怕 一 个 再 渺 小 的 个 人, 也 可 以 为 一 段 历 史, 甚 至 一 段 很 重 要 的 历 史 背 书! 一 个 变 革 的 时 代, 一 群 过 河 的 人, 一 种 野 心 优 雅 的 实 现! 一 部 民 营 企 业 和 创 业 人 生 的 心 灵 史 生 死 书! 平 时 就 很 敢 说 的 任 志 强, 这 次 说 的 更 赤 裸! 历 时 两
Microsoft Word - Sunday20130908
權 能 的 來 源 安 童 牧 師 事 工 简 介 : -- 摘 自 安 童 牧 師 2013 年 9 月 8 日 主 日 信 息 神 呼 召 他, 最 初 在 街 上 接 納 養 育 得 痲 瘋 的 孩 子, 神 藉 着 一 个 单 纯 顺 服 的 仆 人 做 了 极 大 的 事 工, 現 在,8000 印 度 兒 童 參 與 他 的 服 事 目 前, 二 萬 三 千 多 兒 童 參 與 他 的
秘密大乘佛法(下)
印 度 佛 教 史 (25) 101 / 12 / 24 釋 清 德 秘 密 大 乘 佛 法 ( 下 ) 印 度 佛 教 思 想 史 第 十 章 第 三 節 金 剛 乘 與 天 行 一 秘 密 大 乘 稱 金 剛 乘 採 取 表 徵 主 義 1 三 四 五 方 佛 大 乘 佛 法 興 起, 傳 出 十 方 現 在 的 無 數 佛 名 現 在 有 佛 在 世, 可 以 滿 足 佛 涅 槃 後, 佛 弟
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食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 列入我国 的植物多酚黄酮抗氧剂 防治高血脂和心血管疾病
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 植物多酚黄酮抗氧化剂与人体健康 尤新 中国食品添加剂和配料生产应用工业协会 北京 主要综述了对植物多酚黄酮类物质的生物活性和安全性 其内容包括 茶多酚 甘草黄酮 竹叶黄酮 大豆异黄酮以及从各种鲜果提取物的功能成分 如葡萄提取物 杨梅提取物 橄榄提取 物 乌饭树果提取物等 介绍了植物多酚黄酮的国际市场信息及相关的研究机构和生产单位 多酚 黄酮 健康 食 品 与
0 0 = 1 0 = 0 1 = = 1 1 = 0 0 = 1
0 0 = 1 0 = 0 1 = 0 1 1 = 1 1 = 0 0 = 1 : = {0, 1} : 3 (,, ) = + (,, ) = + + (, ) = + (,,, ) = ( + )( + ) + ( + )( + ) + = + = = + + = + = ( + ) + = + ( + ) () = () ( + ) = + + = ( + )( + ) + = = + 0
H N H CH 2 要 C要 COOH NH 2 H HN CH 2 要 C要 COOH N NH 2 R 1 O R 2 H 2 N 要 C 要 C 要 OH+H 要 N 要 C 要 COOH -H 2O R 1 O R 2 H 2 N 要 C 要 C 要 N 要 C 要 COOH H H H 氨基酸 H 肽键 H H 氧分压高 Hb-Fe 2+ +O 2 Hb-Fe 2+ -O 2
600 500 400 300 200 100 0 2007 2008 2009 2010 2014 2015 503 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011(e) 2015(f) ( ) 200 260 340 400 310 450 503 900 4,000 5,000 6,000 7,000 7,000 8,000 9,000 20,000 4 PMC was
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桂 林 华 通 牌 尿 液 化 学 分 析 仪 及 配 套 试 纸 标 准 操 作 程 序 一 实 验 原 理 仪 器 根 据 试 纸 条 上 不 同 试 纸 块 的 颜 色 被 光 线 照 射 进 行 测 定, 其 反 射 光 被 积 分 球 接 收, 通 过 积 分 球 内 525nm 620nm 720nm 三 个 波 长 的 光 线 作 为 测 定 光 波, 取 720nm 波 长 的 光
現在人類獲取地球內部訊息的方法, 是從可能影響我們身家性命安全的地震, 用數學模型把地震資料轉換成地震波速度, 進而獲得地底物質密度與深度的關係 地下世界知多少 km/s g/cm 3 P Gpa km S P S 3,000 3,000 ak K 透視地底 Percy Bridgma
透視地球深處 的窗戶? extreme condition extreme environment 94.5 1 270 21 3.9 12.3 6,400 300 4,000 1864 Jules Gabriel Verne 1959 2008 1990 Paul Preuss 2003 24 2013 2 482 現在人類獲取地球內部訊息的方法, 是從可能影響我們身家性命安全的地震, 用數學模型把地震資料轉換成地震波速度,
Microsoft Word - 广州市番禺区2014年新型农村合作医疗管理办法实施细则.doc
广 州 市 番 禺 区 人 力 资 源 和 社 会 保 障 局 文 件 番 人 社 2014 2 号 广 州 市 番 禺 区 人 力 资 源 和 社 会 保 障 局 关 于 印 发 2014 年 新 型 农 村 合 作 医 疗 实 施 细 则 的 通 知 各 有 关 单 位 : 现 将 广 州 市 番 禺 区 2014 年 新 型 农 村 合 作 医 疗 实 施 细 则 印 发 给 你 们, 请 认
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生 活 中 来 的 健 康 手 册 ( 中 ) 黄 宁 斌 编 著 中 国 少 年 儿 童 出 版 社 书 名 生活中来的健康手册 中 作 者 黄宁斌 出 版 社 中国少年儿童出版社 发行许可证号 2006 第025396号 出版日期 2006年2月第1版 ISBN 7 5007 3317 4 G 2509 定 价 5 00元 目 录 第 二 篇 药 膳 与 食 疗 篇 一 药 膳 与 食 疗 原
kidney GCT
糖尿病肾病轻度症状 夜尿增多 如果糖尿病病人发现自己的尿液出现异常 如尿液泡沫过多 颜 色浑浊 应立刻到医院检查肾脏是否出现了问题 正常情况下 尿液泡沫在便池一会儿就会消失 颜色在喝水少的情况下 才有 发黄 浑浊的现象 假如不是这样 很有可能是肾脏疾病的早期 症状 糖尿病首先伤害的就是血管 而肾脏内血管密集 所以从 病人患上糖尿病的那一天开始 肾脏就被损及了 糖尿病患者都 有潜在的肾病 只不过有的人患病时间长
2010/03 1. 2. 3. .. . 14 * (Certification) Certification) 1. 2. 3. ( 5~15%) 4. 5. 20% 企業看證照 具加分效果 機械專業證照至今已獲得120家機械相關企業的認同與支持 企業表達認同的具體作法包含 給予獲證考生優先面試的機會 運用此認證 作為公司招募員工時確保所錄取之新 人基本能力的方式 鼓勵員工報考 提升專業能力
46 2011 11 467 數位遊戲式學習系統 7 2011 11 467 47 3 DBGameSys 48 2011 11 467 正規化資料模組 如何配置並儲存電子化資料 以 便減少資料被重覆儲存的程序 DBGameSys的主要功能模組包 學習者 審核評分模組 含 正規化資料模組 審核評分 模組 高分列表模組3大區塊 系統資料庫 在正規化資料模組的執行 高分列表模組 過程中 先要求學習者瀏覽遊戲
工 造 价 15 邗 江 南 路 建 设 工 一 标 市 政 公 用 6000 中 机 环 建 集 团 有 限 公 胡 美 娟 16 邗 江 南 路 建 设 工 二 标 市 政 公 用 6337 17 品 尊 国 际 花 园 1# 2# 3# 4# 7# 9# 10# 11# 楼 地 库 C 区 工
2 工 造 价 1 新 纪 元 广 场 房 屋 建 筑 40689 11000 中 机 环 建 集 团 有 限 公 叶 正 君 2 3 大 上 海 御 龙 湾 二 期 A 区 A2~A4 商 业 楼 A 区 地 下 车 库 万 科 蜀 冈 地 块 商 品 房 项 目 二 期 工 ( 万 科 花 园 )1#-8# 住 宅 楼 A16-2 地 下 车 库 工 幼 儿 园 13# 15# 18# 20#
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163 56 52 55 45 56 64 62 45 61 195156200712 19751219901119974 1997420009 2000920026 20026 195552200712 19826 199261994819948 19991019991020009 2000920026 200262007122004 5 164 195255200712 2000919931220009
78 云 芝 79 五 加 皮 80 五 味 子 81 五 倍 子 82 化 橘 红 83 升 麻 84 天 山 雪 莲 85 天 仙 子 86 天 仙 藤 87 天 冬 88 天 花 粉 89 天 竺 黄 90 天 南 星 91 天 麻 92 天 然 冰 片 ( 右 旋 龙 脑 ) 93 天 葵
中 国 药 典 2015 年 版 目 录 一 部 药 材 和 饮 片 1 一 枝 黄 花 2 丁 公 藤 3 丁 香 4 九 里 香 5 九 香 虫 6 人 工 牛 黄 7 人 参 8 人 参 叶 9 儿 茶 10 八 角 茴 香 11 刀 豆 12 三 七 13 三 白 草 14 三 棱 15 三 颗 针 16 千 年 健 17 千 里 光 18 千 金 子 19 千 金 子 霜 20 土 木 香
戒菸實務個案自助手冊105年Ver.2
本計劃經費來自 品健康福利捐支應 衛生福利部國民健康署 我 名字 為了 以下理由 1. 2. 3. 4. 5. 決定從 年 月 日起 簽署人 (簽章) 見證人 (簽章) 年 月 日 a 準備戒 V 環境的準備 排除讓自己想吸 自己戒 的環境 V 心理的準備 瞭解自己的吸 的環境 建立能提醒 行為 強化戒 決心 V 身體的準備 評估身體的尼古丁依賴度 必要時找尋 藥物降低戒 戒 的難度
1 摘 要
研討論文系列 97-3 中國大陸可耗竭資源產權與 價格制度之變遷 蕭代基 孟凡強 1 1 摘 要 1949 1 2 1. 引言 1949 1978 1978 user cost marginal private cost MPC marginal user cost MUC marginal environmental cost MEC P = MPC + MUC + MEC 3 2 1949 2.
% % % 獨立 廉正 專業 創新
101 99 102 101 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 99 102 8 4 34 11 101826 594 71.91% 160 19.37% 72 8.72% 101 100 27 18100 21 101 35 獨立 廉正 專業 創新 1. 7,290 8,677 26,180 26,011 1,272 1,346 142 157 7 7 1,757 1,795
标题
4 短 篇 小 说 : 文 学 常 态 下 的 精 益 求 精 摘 要 : 2014 年 对 短 篇 小 说 而 言 是 一 个 常 态 的 文 学 时 段, 真 正 做 到 精 益 求 精 的 短 篇 小 说 还 是 太 少 作 家 的 立 场 表 现 了 对 于 真 善 美 的 维 护, 对 于 正 义 平 等 自 由 等 人 类 共 同 精 神 价 值 的 捍 卫 的 倾 向 因 此 作 家
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250 本資料僅提供醫護人員衛教使用 ............... Zytiga... Zytiga... Zytiga... 2 3 4 5 6 7 8 9 Zytiga... 10 Zytiga... 10...... 13 18 Zytiga Zytiga 2 25% 3 PSA PSA 3~4 ng/ml PSA bone scan CT scan MRI 4 5 攝護腺癌之治療 治療方面
JJM
中 国 血 糖 监 测 临 床 应 用 指 南 (2011 年 版 ) 自 我 血 糖 监 测 指 南 解 读 恩 泽 医 疗 集 团 台 州 市 中 心 医 院 崔 英 目 录 自 我 血 糖 监 测 的 临 床 价 值 SMBG 的 频 率 和 时 间 点 糖 尿 病 患 者 的 SMBG 方 案 SMBG 的 准 确 性 和 影 响 因 素 患 者 教 育 SMBG 的 局 限 性 2 自 我
123
醣 類 營 養 與 食 物 來 源 蕭 寧 馨 應 用 營 養 研 究 室 台 灣 大 學 生 化 科 技 系 2009 大 綱 生 理 功 能 與 食 品 用 途 分 類 與 組 成 食 物 來 源 與 攝 取 量 代 謝 利 用 與 調 節 攝 取 原 則 糖 尿 病 飲 食 醣 類 代 謝 相 關 疾 病 1 今 天 的 學 習 必 須 攝 取 醣 類 的 理 由 : 腦 與 神 經 細 胞,
40 20% 没 没 1
40 20% 没 没 1 () () : () 0.25mm () () () 却 2 () () 1-15 d m σ g σ π d = mg σ = mg π d N( )m( )dyne( )cm( ) dyne( )cm( σ mg 3 () 2. 3. 4. 5. 6. 7. 50 8. 4 5 1. 6 7 1. 1 2 0 3 4 2 1 2 0 3 4 2 B ml ma () ml
10 6, 地球的熱循環
52 2013 4 484 人類活動與 地球熱循環 46 不斷追求進步的我們, 殊不知在迅猛發展的同時, 已經陸續對地球的整個環境生態引爆一顆顆不定時炸彈, 所造成的傷害正逐漸擴大並增強中 10 6,000 500 地球的熱循環 3 2013 4 484 53 54 2013 4 484 工業革命後, 人類活動產生的熱迅速增加, 使地球原本趨於最適合人類活動的熱平衡必須重新調整 環境變遷 18 280
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Pregnancy associated with diabetes pregnancy associated with diabetes Frank W.Ling, Patrick Duff, Obstetrics and Gynecology Principles for practice. 1 st ed. Mc Graw-Hill.2001 Summarize 1 2 20 gestational
Microsoft Word - 愛吐沙的蛤蜊
編 號 :A311 組 別 : 國 小 組 科 別 : 自 然 科 類 別 : 生 物 作 品 名 稱 : 愛 吐 沙 的 蛤 蠣 作 者 : 黃 柏 慎 黃 映 慈 易 秋 蓉 指 導 老 師 : 賴 敏 婉 李 愛 雯 作 者 學 校 : 桃 園 縣 平 鎮 市 忠 貞 國 民 小 學 桃 園 縣 平 鎮 市 第 46 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 自 然
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科展作品說明書--情定水果 香邀你我
中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 國 小 組 生 活 與 應 用 科 學 科 080802 臺 北 縣 三 重 市 興 穀 國 民 小 學 指 導 老 師 姓 名 黃 小 紋 黃 書 卿 作 者 姓 名 邵 雅 慈 蔡 旻 真 許 瀚 心 王 澤 雄 黃 一 崧 中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明
标题
1. 眼 底 炎 症 辨 证 论 治 规 律 的 探 讨 湖 南 中 医 学 院 附 二 院 眼 科 一 眼 底 病 变 的 三 个 显 著 特 点 深 精 杂 深 指 它 的 位 置 眼 底 病 变 往 往 外 观 端 好, 中 医 统 称 为 内 障, 从 内 而 蔽, 外 不 见 证 精 指 它 的 组 织 结 构 眼 底 构 造 最 精 细, 有 富 于 血 管 的 脉 络 膜, 有 感 光
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保 健 : 顶 尖 专 家 谈 癌 症 2014-03-22 权 健 3813 服 务 中 心 环 境 污 染 不 良 生 活 方 式 与 现 代 社 会 生 活 造 成 的 精 神 压 力 等 等 原 因, 使 得 我 国 癌 情 汹 涌, 人 们 也 日 益 变 得 谈 癌 色 变 最 新 数 据 显 示, 中 国 每 天 8550 人 成 为 癌 症 患 者 ; 中 国 癌 症 患 者 年 轻
