140 应用化学第 34 卷公司 ); 氯化钠 ( 广东光华化学厂有限公司 ); 无水氯化钙 ( 广东光华化学厂有限公司 ), 以上试剂均为分析纯 ; 活化部分凝血活酶时间 (APTT) 凝血酶原时间 (PT) 凝血酶时间 (TT) 及纤维蛋白原 (FIB) 含量测定试剂盒 ( 青岛赛奥生物科技有

Size: px

Start display at page:

Download "140 应用化学第 34 卷公司 ); 氯化钠 ( 广东光华化学厂有限公司 ); 无水氯化钙 ( 广东光华化学厂有限公司 ), 以上试剂均为分析纯 ; 活化部分凝血活酶时间 (APTT) 凝血酶原时间 (PT) 凝血酶时间 (TT) 及纤维蛋白原 (FIB) 含量测定试剂盒 ( 青岛赛奥生物科技有"

亦孔
5 years ago
Views:

1 第 34 卷第 2 期应用化学 Vol.34Is 年 2 月 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY Feb.2017 殝檵殝殝研究论文檵檵檵檵檵檵檵檵檵殝 L 苯丙氨酸衍生物的一锅法合成及其抗 / 促凝活性 a 刘建建程 a 辉 b 林发全罗 a,c 轩 a,c 王立升 a,c 林翠梧 ( a 广西大学化学化工学院南宁 ; b 广西医科大学第一附属医院血液科南宁 ; c 广西高校应用化学技术与资源开发重点实验室南宁 ) 摘要氨基酸及其衍生物在止血 / 抗凝活性方面有一定的应用以 L 苯丙氨酸为起始原料, 经磺化引入磺酸基, 再与甲醇乙醇丙醇异丙醇和正丁醇脱水酯化, 一锅法合成了 6 种未见报道的 L 苯丙氨酸的磺酸酯类衍生物 (L1~L6), 以期获得具有的较强血液生理活性的潜在药物实验中采用了质谱核磁共振进行结构表征该合成方法产率高 (78% ~95%), 后处理简单, 不失为合成该类衍生物的好方法衍生物的凝血四项实验表明 : 抗促凝效果是内源性和外源性凝血途径共同作用的结果血浆复钙实验表明 : 衍生物均具有一定的抗凝活性, 其抗凝效果随浓度变化而变化, 但是随 R 链的长度增加, 抗凝效果并未见规律性衍生物的抗凝活性主要受磺酸基及酯基的影响, 因此在设计合成抗血栓化合物时可以考虑引入磺酸基及酯类基团关键词 L 苯丙氨酸 ; 酯类衍生物 ; 抗 / 促凝活性中图分类号 :O621.3 文献标识码 :A 文章编号 : (2017) DOI: /j.isn 氨基酸及其衍生物在止血 / 抗凝方面有一定的应用, 对氨甲基苯甲酸环酸和 6 氨基己酸作为止血药物, 已经应用于临床治疗中,L 苯丙氨酸 (L Phenylalanine) 是人体必需氨基酸之一, 属具有生理活性的芳香族氨基酸, 其在多肽合成药物化学手性源等方面具有重要用途 [1 4] 本实验室已从壮药滇桂艾纳香中提取的氨基酸组分中发现该化合物, 并测得氨基酸组分有一定的血液生理活性 [5 6] 以其为原料可合成具有血液生理活性药物 [6 10], 也可用于多发性骨髓瘤及抗肿瘤药物硼替佐米的合成 [11] 本实验通过引入磺酸基和酯基合成了 L 苯丙氨酸系列衍生物, 通过凝血四项实验, 对其血液生理活性进行评价, 以期获得具有的较强血液生理活性的潜在药物 1 实验部分 1.1 仪器和试剂 AVANCE IHD600 型 600MHz 核磁共振仪 ( 瑞士 Bruker 公司 );LG PABER I 型半自动凝血分析仪 ( 北京世帝科学仪器有限公司 );AL204 型分析天平 ( 梅特勒托利多仪器上海有限公司 );SW CJ 2F 型净化操作台 ( 江苏净化设备有限公司 );XT 4 型数字显示显微熔点测定仪 ( 北京泰克仪器有限公司 ); DF 101S 型集热式加热磁力搅拌器 ( 河南省予华仪器有限公司 );SP 756P 型高压灭菌锅 ( 上海光谱仪器设备有限公司 ) L 苯丙氨酸 ( 阿拉丁试剂公司 ); 氨甲环酸 ( 珠海嘉信康医药科技有限公司 ); 布洛芬 ( 阿拉丁试剂 ); 浓硫酸 ( 广东光华化学厂有限公司 ); 甲醇 ( 汕头市西陇化工厂有限公司 ); 乙醇 ( 汕头市西陇化工厂有限公司 ); 正丙醇 ( 天津市大茂化学试剂厂 ); 异丙醇 ( 天津市光复精细化工试剂 ); 正丁醇 ( 上海申博化工收稿, 修回, 接受国家自然科学基金 ( ); 广西自然科学基金重点项目 (2013GXNSFDA019005); 广西高等学校高水平创新团队和卓越学者项目 ( 号 ) 通讯联系人 : 林翠梧, 教授 ;Tel/Fax: ;E mail:cuiwulin@163.com; 研究方向 : 天然有机合成

2 140 应用化学第 34 卷公司 ); 氯化钠 ( 广东光华化学厂有限公司 ); 无水氯化钙 ( 广东光华化学厂有限公司 ), 以上试剂均为分析纯 ; 活化部分凝血活酶时间 (APTT) 凝血酶原时间 (PT) 凝血酶时间 (TT) 及纤维蛋白原 (FIB) 含量测定试剂盒 ( 青岛赛奥生物科技有限公司, 分析纯 ); 新鲜人体血浆 ( 广西医科大学附属医院提供 ) 1.2 L 苯丙氨酸衍生物的合成 L 苯丙氨酸衍生物的合成路线图如 Scheme1 所示 Scheme1 SynthesisofL phenylalaninederivatives 准确称量 5.0gL 苯丙氨酸于 100mL 圆底烧瓶中, 加入 8mL 浓硫酸, 置于 170 油浴中, 反应 4h, 反应完成后冷却至室温, 加入 40mL 相应的醇溶液, 回流反应 4h, 反应结束后, 溶液底部有固体析出, 将圆底烧瓶置于冰水浴静置一段时间, 抽滤, 得到白色粗产物, 滤液静置, 不断析出白色固体, 合并固体, 经少量冷水洗, 乙醇洗, 乙醇 / 水重结晶, 干燥得到目标产物 1.3 衍生物的表征及分析对磺酸基 L 苯丙氨酸 (L1): 白色固体, 收率 :95%,mp >300, 1 HNMR(DMSO d 6,600MHz),δ: 8 29(s,1H),7 58(d,J=6Hz,2H),7 23(d,J=6Hz,2H),4 18~4 20(t,J=6Hz,1H),3 11(d,J= 6Hz,2H); 13 CNMR(DMSO d 6,151MHz),δ:170 85,147 34,135 66,129 34,126 27,53 57,35 94; HRMS(ESI TOF) 计算值 C 9 H 11 NO 5 S[M+H] + :245 04, 实测值 : 对磺酸基 L 苯丙氨酸甲酯 (L2): 目标产物为白色固体, 收率 85%,mp260~262 ; 1 H NMR (DMSO d 6,600MHz),δ:7 71(d,J=12Hz,2H),7 32(d,J=12Hz,2H),4 38~4 40(t,J=6Hz,1H), 3 75(s,3H),3 30~3 34(dd,J 1 =J 2 =6Hz,1H),3 18~3 21(dd,J 1 =J 2 =6Hz,1H); 13 CNMR (DMSO d 6,151MHz),δ:170 07,141 94,137 36,130 10,126 20,53 89,53 60,35 07;HRMS(ESI TOF) 计算值 C 10 H 13 NO 5 S[M-H] - :259 05, 实测值 : 对磺酸基 L 苯丙氨酸乙酯 (L3): 目标产物为白色固体, 收率 80% mp264~265 ; 1 H NMR (DMSO d 6,600MHz),δ:7 81(d,J=6Hz,2H),7 44(d,J 1 =J 2 =6Hz,2H),4 43~4 45(t,J=6Hz, 1H),4 27~4 30(m,J=6Hz,2H),3 40~3 43(dd,J=6Hz,1H),3 31~3 34(dd,J 1 =J 2 =6Hz,1H), 1 23~1 25(t,J=6Hz,3H); 13 CNMR(DMSO d 6,151MHz),δ:172 44,144 85,140 45,132 86,129 07, 66 53,56 72,38 38,15 97;HRMS(ESI TOF) 计算值 C 11 H 15 NO 5 S[M-H] - :273 07, 实测值 : 对磺酸基 L 苯丙氨酸正丙酯 (L4): 目标产物为白色固体, 收率 83%,mp268~270 ; 1 H NMR (DMSO d 6,600MHz),δ:7 58(d,J=6Hz,2H),7 20(d,J=6Hz,2H),4 34(t,J=6Hz,1H),4 04~ 4 08(t,J=12Hz,2H),3 12~3 15(dd,J 1 =J 2 =6Hz,1H),3 06~3 09(dd,J 1 =J 2 =6Hz,1H),1 51~ 1 58(m,J 1 =J 2 =6Hz,2H),0 82~0 86(t,J=12Hz,3H); 13 CNMR(DMSO d 6,151MHz),δ:169 44, ,135 24,129 21,126 33,67 67,53 58,36 17,21 75,10 59;HRMS(ESI TOF) 计算值 C 12 H 17 NO 5 S [M-H] - :287 08, 实测值 : 对磺酸基 L 苯丙氨酸异丙酯 (L5): 目标产物为白色固体, 收率 78%,mp254~256 ; 1 H NMR (DMSO d 6,600MHz),δ:8 39(s,1H),7 58(d,J=6Hz,2H),7 20(d,J=6Hz,2H),4 90~4 94(m,

3 第 2 期刘建建等 :L 苯丙氨酸衍生物的一锅法合成及其抗 / 促凝活性 141 J 1 =6Hz,J 2 =6Hz,1H),4 24~4 26(t,J=6Hz,1H),3 11~3 14(dd,J 1 =J 2 =6Hz,H),3 03~3 06 (dd,j 1 =J 2 =6Hz,1H),1 19(d,J=6Hz,3H),1 11(d,J=6Hz,3H); 13 CNMR(DMSO d 6,151MHz), δ:168 89,147 71,135 21,129 30,126 26,70 41,53 58,36 18,21 87,21 67;HRMS(ESI TOF) 计算值 C 12 H 17 NO 5 S[M-H] - :287 08, 实测值 : 对磺酸基 L 苯丙氨酸正丁酯 (L6): 目标产物为白色固体, 收率 81%,mp276~277 ; 1 H NMR (DMSO d 6,151MHz),δ:8 37(s,1H),7 57(d,J=6Hz,2H),7 19(d,J=6Hz,2H),4 33~4 35(t,J= 6Hz,1H),4 11~4 13(t,J=6Hz,1H),3 06 ~3 12(m,J=6Hz,2H),1 49~1 56(m,J 1 =J 2 =6Hz, 2H),1 25~1 31(m,J 1 =J 2 =6Hz,2H),0 87~0 89(t,J=6Hz,3H); 13 CNMR(DMSO d 6,151MHz), δ:169 51,148 10,134 93,129 14,126 36,65 94,53 52,36 17,30 36,18 88,13 94;HRMS(ESI TOF) 计算值 C 12 H 17 NO 5 S[M-H] - :301 10, 实测值 : 凝血四项实验凝血四项指标临床意义 APTT: 主要反映内源性凝血系统状况, 常用于监测肝素用量增高见于血浆因子 Ⅷ 因子 Ⅸ 和因子 XI 水平减低 : 如血友病 A 血友病 B 及因子 XI 缺乏症 ; 降低见于高凝状态 : 如促凝物质进入血液及凝血因子的活性增高等情况 ; PT: 主要反映外源性凝血系统状况, 其中 INR 常用于监测口服抗凝剂延长见于先天性凝血因子 Ⅱ Ⅴ Ⅶ 和 Ⅹ 缺乏及纤维蛋白原缺乏, 后天凝血因子缺乏主要见于维生素 K 缺乏严重的肝脏疾病纤溶亢进 DIC 口服抗凝剂等 ; 缩短见于血液高凝状态和血栓性疾病等 ; FIB: 主要反映纤维蛋白原的含量增高见于急性心肌梗死 ; 减低见于 DIC 消耗性低凝溶解期原发性纤溶症重症肝炎肝硬化 ; TT: 主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间增高见于 DIC 纤溶亢进期, 低 ( 无 ) 纤维蛋白原血症, 异常血红蛋白血症, 血中纤维蛋白 ( 原 ) 降解产物 (FDPs) 增高 ; 降低无临床意义灭菌及血浆分装将移液管及试管放入电热式蒸汽消毒器, 压力为 120mPa, 加热 30min, 消毒完毕放气拿出将消毒后的实验材料放到净化操作台上, 用医用酒精对物品进行消毒, 然后将血浆置于 37 水浴解冻, 解冻后按每 12mL 血浆一瓶进行分装, 分装后放入冰箱中冷冻保存, 温度在 -20 以下试剂配制衍生物溶液的配制 : 准确称量 10 0mg 的某衍生物, 加入到 4mL 的离心管中, 用 2mL 生理盐水溶解, 常温保存, 将 5 00g/L 的衍生物溶液母液, 依次稀释 5 倍, 即得到浓度分别为和 0 04g/L 的衍生物溶液实验方案分别在 1mL 的样品管中, 按 9 1 的比例加入新鲜的混合人血浆 900μL, 再分别加入 100μL 各浓度的化合物溶液 ( 对照组为生理盐水 ), 按 APTT TT PT FIB 试剂盒说明, 在半自动血凝分析仪上进行测试 1.5 血浆复钙实验为进一步探究化合物的抗促凝活性, 进行血浆复钙实验复钙时间即血浆再钙化时间, 是去掉钙的血浆中重新加入钙, 使内源性凝血过程重现的过程抗凝剂与血浆中的钙离子结合, 凝血过程被中断, 这种血浆加入适当的钙溶液以后, 则血液钙化, 凝固过程继续进行从加入钙离子到血浆凝固的时间即为血浆复钙时间溶液配制 CaCl 2 溶液配制 : 准确称取无水氯化钙 g, 少量生理盐水溶解后, 准确转移至 100mL 容量瓶中, 用生理盐水定容至刻度线, 即得到浓度为 0 025mol/L 的 CaCl 2 溶液 L 苯丙氨酸衍生物溶液配制 : 用分析天平准确称取 12 0mgL 苯丙氨酸衍生物, 在 10mL 比色管中用少量用生理盐水溶解 ( 溶解度不好的样品, 加入 10~20μL5%NaOH 溶液助溶 ), 准确用生理盐水定容至刻度线, 即得到浓度为 1 20g/L 的 L 苯丙氨酸衍生物溶液母液, 逐步稀释 5 倍得到浓度分别为和 g/l 的待测样品溶液血浆复钙实验取 9 支小试管按照编号 1~9 放于试管架上,37 水浴锅恒温放置 1~3 号试

142 应用化学第 34 卷管分别作为生理盐水空白对照组,4~9 号试管为某一浓度的 L 苯丙氨酸衍生物, 然后向 1~3 试管中加入 100μL 生理盐水溶液,4~9 加入 100μL 样品溶液, 恒温 2min

1 凝血四项结果与讨论采用 SPSS 数据处理软件进行数据处理, 结果均以 (x±s) 表示, 显著性采用单因素方差分析, 不同浓度下的各物质的凝血四项指标见下图 1~ 图 4(0 代表生理盐水空白组,L0 为原料 L

0g/L 衍生物的凝血四项指标 Fig.2 Coagulationofderivativesataconcentration of1.0g/l 图 3 浓度为 0.20g/l 衍生物的凝血四项指标 Fig.

4 Coagulationofderivativesataconcentration of0.

4 142 应用化学第 34 卷管分别作为生理盐水空白对照组,4~9 号试管为某一浓度的 L 苯丙氨酸衍生物, 然后向 1~3 试管中加入 100μL 生理盐水溶液,4~9 加入 100μL 样品溶液, 恒温 2min 之后, 再向每支小试管中加入 100μL 配制好的 CaCl 2 溶液, 立即启动计时器当发现液面不再流动时停止计时, 所用时间即为血浆复钙时间分别以氨甲环酸和布洛芬作为阳性对照组 2 结果与讨论 2.1 凝血四项结果与讨论采用 SPSS 数据处理软件进行数据处理, 结果均以 (x±s) 表示, 显著性采用单因素方差分析, 不同浓度下的各物质的凝血四项指标见下图 1~ 图 4(0 代表生理盐水空白组,L0 为原料 L 苯丙氨酸 ) 图 1 浓度为 5.0g/L 衍生物的凝血四项指标 Fig.1 Coagulationofderivativesataconcentration of5.0g/l 图 2 浓度为 1.0g/L 衍生物的凝血四项指标 Fig.2 Coagulationofderivativesataconcentration of1.0g/l 图 3 浓度为 0.20g/l 衍生物的凝血四项指标 Fig.3 Coagulationofderivativesataconcentration of0.20gml 图 4 浓度为 0.04g/L 衍生物的凝血四项指标 Fig.4 Coagulationofderivativesataconcentration of0.04g/l APTT 是反应内源性凝血系统的指标, 反应主要为血浆中的 Ⅶ Ⅸ Ⅺ 因子的量及其活性,APTT 值增高说明血浆中的 Ⅶ Ⅸ Ⅺ 因子水平降低 ; 降低则说明处于高凝状态, 由图 1 可以看出, 相对于空白对照组各个浓度的 APTT 值均存在显著性差异, 浓度为 5g/L, 化合物 L0 L1 L2 L3 L4 和 L5 差异性较为显著, 其中 L1 相对于原料有所延长, 其余化合物延长值小于原料, 且随着衍生物浓度的降低,APTT

第 2 期刘建建等 :L 苯丙氨酸衍生物的一锅法合成及其抗 / 促凝活性 143 值呈现出延长趋势, 说明磺酸基的存在降低了血浆 Ⅶ Ⅸ 和 Ⅺ 因子水平, 血浆的凝固时间变长, 衍生物具有一定的抗凝效果, 在浓度范围内, 随着浓度增大抗凝效果降低, 随着衍生物中 R 基团的增长, 抗凝效果呈现出降低趋势 PT 能够有效且准确地反应外源性凝血系统的情况,

和 1g/L 时 FIB 值均没有显著变化, 当浓度为 0 2g/L 及 0 04g/L 化合物 L1 L2 L3 L4 L5 和 L6 相对于空白组缩短, 低浓度时, 衍生物能够降低纤维蛋白含量, 凝血时间延长 TT 主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间, 从所测得的 TT 值可见, 各物质各浓度的 TT 值相对于生理盐水对照组均无显著性差异,

2g/l Comparedwith controlgroup: P <0.05, # P <0.01, 图 6 浓度为 2.4 10-1 g/l 化合物的复钙时间 Fig.6 Recalcificateofcompoundsataconcentra tionof2.4 10-1 g/l 图 7 浓度为 4.8 10-2 g/l 化合物的复钙时间 Fig.

5 第 2 期刘建建等 :L 苯丙氨酸衍生物的一锅法合成及其抗 / 促凝活性 143 值呈现出延长趋势, 说明磺酸基的存在降低了血浆 Ⅶ Ⅸ 和 Ⅺ 因子水平, 血浆的凝固时间变长, 衍生物具有一定的抗凝效果, 在浓度范围内, 随着浓度增大抗凝效果降低, 随着衍生物中 R 基团的增长, 抗凝效果呈现出降低趋势 PT 能够有效且准确地反应外源性凝血系统的情况, 主要反应血浆凝血酶原 Ⅴ 和 Ⅶ 因子的量和活性,PT 数据显示, 浓度为 5g/L 时, 只有化合物 L0 及 L1 的 PT 有明显的延长, 而随着浓度的降低, 其它化合物的 PT 也有所延长,PT 值延长说明衍生物可能使得血浆中凝血酶原 Ⅴ 和 Ⅶ 因子的量和活性水平降低, 凝固时间增长, 反映了衍生物具有一定的抗凝活性 FIB 主要反映纤维蛋白原的含量, 当浓度为 5 和 1g/L 时 FIB 值均没有显著变化, 当浓度为 0 2g/L 及 0 04g/L 化合物 L1 L2 L3 L4 L5 和 L6 相对于空白组缩短, 低浓度时, 衍生物能够降低纤维蛋白含量, 凝血时间延长 TT 主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间, 从所测得的 TT 值可见, 各物质各浓度的 TT 值相对于生理盐水对照组均无显著性差异, 说明衍生物影响凝血过程与纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间无关 2.2 血浆复钙结果与讨论血浆复钙给药前后样品的差异性用 SPSS 软件进行单因素方差分析与 t 检验数据处理结果以图 5 浓度为 1.2g/L 化合物复钙时间 Fig.5 Recalcificationofcompoundsataconcentration of1.2g/l Comparedwith controlgroup: P <0.05, # P <0.01, 图 6 浓度为 g/l 化合物的复钙时间 Fig.6 Recalcificateofcompoundsataconcentra tionof g/l 图 7 浓度为 g/l 化合物的复钙时间 Fig.7 Recalcificationofcompoundsataconcentration of g/l Comparedwith controlgroup: P <0.05, # P <0.01, 图 8 浓度为 g/l 化合物的复钙时间 Fig.8 Recalcificationofcompoundsataconcentration of g/l Comparedwith controlgroup: P <0.05, # P <0.01,

6 144 应用化学第 34 卷 (x±s) 形式表示, 若 P<0 05, 则差异显著具有统计学意义, 不同浓度下的各物质的血浆复钙见下图 5~ 图 8(0 代表生理盐水空白组,L0 为原料 L 苯丙氨酸 ) 由图 5~ 图 8 可以看出, 整体上, 化合物的血浆复钙时间相对于生理盐水及原料均延长, 说明化合物表现出抗凝效果, 随着浓度的降低, 抗凝效果呈减弱趋势,L5 在高浓度时抗凝效果较好,L3 在低浓度下抗凝效果较好, 化合物抗凝效果不随 R 链的变化呈现规律 3 结论合成了一系列苯丙氨酸衍生物, 以凝血四项指标及血浆复钙评价其抗 / 促凝功能凝血四项结果显示化合物的抗促凝效果是内源性凝血途径及外源性凝血途径的共同作用的结果 ; 血浆复钙实验结果表明, 化合物具有一定的抗凝作用, 抗凝作用强弱与化合物浓度有关, 但随 R 链的变化, 其抗凝水平并未呈现出明显规律性, 化合物的抗凝活性可能受磺酸基及酯基的影响, 因此在设计合成抗血栓化合物时可以考虑引入磺酸基及酯类基团目前, 心血管疾病, 血栓等疾病在老年群体中越来越普遍, 合成出结构简单, 药效突出的药物仍是化学工作者的重要任务, 在对药物抗 / 促凝效果评价时, 除凝血四项及血浆复钙实验外, 还可以结合其它手段如圆二色谱法等探究物质活性整合数据, 深入探究化合物的构效关系此外, 体内试验能够更准确反映药物的药效水平及代谢途径, 也是药物合成中药效评价的手段参考文献 [1]LiJB,ShaYW.AConvenientSynthesisofAminoAcidMethylEsters[J].Molecules,2008,13(5): [2]HeM Z,YuanDK,LinW.SynthesisandAsayofIsoquinolineDerivativesasHIV 1Tat TARInteractionInhibitors[J]. BioorgMedChemLet,2005,15(17): [3]AlagileD,PfeiferB,ScalbertE,etal.DesignandSynthesisofIndoleandTetrahydroisoquinolineHydantoinasChymase Inhibitors[J].JEnzymeInhibMedChem,2004,19(2): [4]MalakpourS,BaratiA.PreparationandCharacterizationofNovelOpticalyActivepoly(vinylalcohol co vinylester)in NonaqueousMediumUsingL PhenylalanineasaChiralMaterial[J].AminoAcids,2012,42(4): [5]LIQian,HUANGLi,LINCuiwu,etal.TechnologicalResearchontheExtractionandPurificationofAminoAcidsfrom Blumeariparia(Bl.)DC[J].LishizhenMedMaterMedRes,2010,21(3): (inChinese). 李倩, 黄丽, 林翠梧, 等. 滇桂艾纳香中氨基酸的提取工艺研究 [J]. 时珍国医国药,2010,21(3): [6]LIQian.PreliminaryStudyoftheHemostaticActivityofFreeAminoAcidsandSaponinsfrom BlumearipariaDC[D]. Nanning:GuangxiUniversity,2010(inChinese). 李倩. 滇桂艾纳香氨基酸和皂甙成分及其止血活性的初步研究 [D]. 南宁 : 广西大学,2010. [7]GaoPJ,ZhuDL,ZhanYM.L PhenylalanineandSmoothMuscleCelProliferationfromSHRandWKYRats[J].Acta PhysiolSin,1980,50(4): [8]Wang H, Peng L, Zhao M. 2 Substituted(S) 2 (3,3 dimethyl 1 oxy 10,10a dihydroimidazo[1,5 b]isoquinolin 2(1H,3H,5H) yl)aceticacids:conformationalprediction,synthesis,anti ThromboticandVasodilativeEvaluation[J]. BioorgMedChem,2011,19(2): [9]ZhangXY,WangW,ChengSL,etal.2,3 DiaminoacidModifying3S Tetrahydroisoquinoline 3 carboxylicacids:leading toaclasofnovelagentswithhighlyunfoldedconformation,selectiveinvitroanti plateletaggregationandpotentin vivoanti thromboticactivity[j].bioorgmedchem,2010,18(4): [10]ZhengM Q,ZhangX Y,ZhaoM. (3S) N (L Aminoacyl) 1,2,3,4 tetrahydroisoquinolines, aclasofnovel AntithromboticAgents:Synthesis,Bioasay,3DQSAR,andADMEAnalysis[J].BioorgMedChem,2008,16(21): [11]JIAncheng,HANHang,WANGChaoqun,etal.SynthesisofBortezomib[J].PharmClinRes,2014,22(2): (in Chinese). 纪安成, 韩航, 王超群, 等. 硼替佐米的合成工艺改进 [J]. 药学与临床研究,2014,22(2):

7 第 2 期刘建建等 :L 苯丙氨酸衍生物的一锅法合成及其抗 / 促凝活性 145 One potsynthesisofl PhenylalanineDerivatives andtheiranti/pro coagulationalproperties LIUJianjian a,chenghui a,linfaquan b,luoxuan a,c,wanglisheng a,c,lincuiwu a,c ( a SchoolofChemistryandChemicalEnginering,GuangxiUniversity,Nanning530004,China b DepartmentofHematology,theFirstAfiliatedHospitalof GuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China; c GuangxiColegesandUniversitiesKeyLaboratoryofAppliedChemistry TechnologyandResourceDevelopment,Nanning530004,China) Abstract Aminoacidsandtheirderivativeshavesomeapplicationsincoagulant/anticoagulantactivities. L phenylalaninewasusedasstartingmaterialandsulfonatedforintroducingsulfonicacidgroup,andthen dehydratedwithmethanol,ethanol,propanol,isopropanol,andn butanoltosynthesizesixderivativesl1~ L6.SixnovelsulfonicacidesterifiedderivativesofL phenylalaninel1~l6weresynthesizedinonepotin ordertoobtainstrongphysiologicalactivityforpotentialcoagulant/anticoagulantdrugs.thestructuresofthe sixderivativeswerecharacterizedbymasspectrometryandnuclearmagneticresonance.theyieldbythis syntheticmethodishigh(78% ~95%)andthepost treatmentissimpleforthesynthesisofsuchderivatives. Fouritemsofbloodcoagulationofderivativesshowthatanticoagulantandpro coagulantefectsaretheresultof theinteractionofendogenousandextrinsiccoagulationpathways.theplasmare calcificationtimeshowsthat thederivativeshavecertain anticoagulantactivity, and theiranticoagulantefectsarechanged with the concentration,buttheanticoagulantefectdoesnothavesucharegularrelationshipwiththeincreaseofr chain.theanticoagulantactivityofthederivativeismainlyafectedbysulfonicandestergroups,sothe introductionofsulfonicacidandestergroupscanbeconsideredfordesigningandsynthesizingantithrombotic compounds. Keywords L phenylalanine;synthesis;esterderivatives;anti/pro coagulantactivity Received ;Revised ;Accepted SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No ),GuangxiNaturalScienceFoundationofChina(No. 2013GXNSFDA019005),GuangxiColegesandUniversitiesHighLevelofInnovationandExcelenceinAcademicProjectTeam(No.[2014]49) Corespondingauthor:LINCuiwu,profesor;Tel/Fax: ;E mail:cuiwulin@163.com;researchinterests:naturalorganicand syntheticchemistry

7 北京大学学报医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0

7 北京大学学报医学版 # +94* 4 ' % 论著!! # $ #% %&!%'!! $ ( )& * $ +,-.)/ ) 01 * ). 2)3 )01 ( / 433% /1 0 51 -.)/$ 6',)) 4.))%) 0 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0 ".. " - 23 )"." ( ).)") 4. " ' $ 7 " #$%"$8 &' + +." 0"3 / 3 3( 0 ) %.% "(% 2). +.) ")( ) (