2016 年 7 月 目录 一 品种概述... 4 ( 一 ) 基本情况... 4 ( 二 ) 流行病学及病原学... 4 二 审评经过... 8 三 新报资料的技术审评情况 ( 一 ) 临床专业审评意见 ( 二 ) 生物统计专业审评意见 ( 三 ) 药学专业审

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1 药品审评中心技术审评报告 受理号 :CXSS 药品名称 : 肠道病毒 71 型灭活疫苗 (Vero 细胞 ) 申请人 : 北京科兴生物制品有限公司 第 1 页 / 共 280 页

2 2016 年 7 月 目录 一 品种概述... 4 ( 一 ) 基本情况... 4 ( 二 ) 流行病学及病原学... 4 二 审评经过... 8 三 新报资料的技术审评情况 ( 一 ) 临床专业审评意见 ( 二 ) 生物统计专业审评意见 ( 三 ) 药学专业审评意见 ( 四 ) 药理毒理专业审评意见 ( 五 ) 综合审评意见 ( 六 ) 处理意见 四 专家咨询会后技术审评情况 ( 一 ) 专家咨询会咨询的问题 ( 二 ) 专家咨询会意见 ( 三 ) 中心工作会议 ( 四 ) 处理意见 五 补充资料后综合审评情况 ( 一 ) 补充资料经过与内容 第 2 页 / 共 280 页

3 ( 二 ) 现场检查 动态抽样检验情况 ( 三 ) 临床专业对补充资料的审评意见 ( 四 ) 药学专业对补充资料的审评意见 ( 五 ) 综合审评意见 ( 六 ) 处理意见 六 审评结论 第 3 页 / 共 280 页

4 一 品种概述 ( 一 ) 基本情况本品系用肠道病毒 71 型 (H07 株 ) 接种非洲绿猴肾细胞 ( 以下简称 Vero 细胞 ), 经培养 收获病毒液 灭活病毒 浓缩 纯化和氢氧化铝吸附制成 拟申请用于预防 6 个月以上易感者 EV71 引起的手足口病及相关疾病 用法用量 : 基础免疫程序为 2 剂, 第 1 剂接种后 28 天接种第二剂 每次每剂量为 0.5ml 规格: 含 EV71 病毒抗原 400U 与本品同时申报生产 ( 包括新药证书 ) 的同类品种还包括中国医学科学院申报的肠道病毒 71 型灭活疫苗 ( 人二倍体细胞 )( 受理号 :CXSS ) 武汉生物制品研究所有限责任公司和北京微谷生物医药有限公司联合申报的肠道病毒 71 型灭活疫苗 (Vero 细胞 )( 受理号 :CXSS ) 均已完成临床试验申请生产及新药证书, 正在审评中 国外尚无同类产品上市, 按 药物注册管理办法 中预防用生物制品注册分类第 1 类申报 本品按照预防用生物制品 1 类申报, 按特殊审评程序加快审评 提供了北京局对药品注册研制现场 临床试验现场的核查报告, 通过 ( 二 ) 流行病学及病原学手足口病 (hand-foot-and-mouth disease, HFMD) 是由多 第 4 页 / 共 280 页

5 种肠道病毒引起的全球性常见传染病, 以婴幼儿发病为主, 是我国法定的丙类传染病, 无明显地区性, 全年均可发生, 一般以 5-7 月为发病高峰, 通常以发病后一周传染性最强, 潜伏期 2-10 天, 病程一般 7-10 天 大多数症状轻微, 以发热和手 足 口腔部位的皮疹或疱疹为主要特征 患儿可出现重症, 包括脑炎 无菌性脑膜炎 神经源性肺水肿和心肌炎等, 个别重症患儿进展快, 导致死亡 目前无特性治疗, 以支持疗法为主 其主要病原体包括 EV71 柯萨奇病毒 A 组 4/5/7/9/10/16 型 B 组 2/5/131 型 埃可病毒等 其中以 EV71 和柯萨奇病毒 A 组 16 型 (CA16) 最为常见 中心于 2014 年 8 月 19 日召开肠道病毒 71 型灭活疫苗研讨会, 国家 CDC 专家介绍了 年和 2014 年 1-8 月手足口病年发病率 重症率和死亡率分布的全国监测数据 年手足口病重症比例为 1.1%, 总病死率为 0.03%, 重症死亡比例 :3.0% 手足口病年发病数连续四年位居法定报告传染病首位, 死亡数位居第五位 ; 全国发病率 重症率 死亡率呈现隔年升高的趋势 2014 年手足口病前 8 个月病例数 重症数均显著超过近五年同期水平, 死亡病例数基本与近五年平均水平相当 同时认为, 该流行病学研究数据受实验室监测条件 样本收集情况等限制, 提供的研究数据可反映近年来手足口病的发病趋势, 但绝对数量上可能对疾病负担有所低估 对 2008 年 年 8 月手足口病不同 第 5 页 / 共 280 页

6 临床严重程度病例中肠道病毒血清型构成进行了分析, 结果显示 :6 年监测过程中, 轻症病例中,40-60% 为 EV71 感染 ; 重症和死亡病例分别为 76% 和 93%EV71 感染 2013 年存在优势株的替换现象, 该年份中其他肠道病毒成为优势循环毒株 ( 占轻症病例 49%) 手足口病病原分布存在较大的地域性特点, 如 2014 年, 全国 10 个省市优势流行株毒株为非 EV71 的其他肠道病毒 肠道病毒 71 型 (enterovirus71,ev71) 属小 RNA 病毒科 ( Picornavi ri dae) 肠道病毒属, 主要引起手足口病和中枢神经系统疾病 1974 年 Schmidt 等首次报道, 从美国加利福尼亚州 20 例具有中枢神经系统症状患者 (1969~1973 年 ) 分离到 EV71, 并确认为一种新的肠道病毒 自发现以来,EV71 在世界范围内呈周期性暴发或流行, 在亚太地区的流行也呈上升趋势, 近来我国大陆与台湾均有 EV71 感染的报道 EV71 感染可引起手足口病 疱疹性咽峡炎 无菌性脑炎 无菌性脑膜炎和脊髓灰质炎 ( 脊灰 ) 样麻痹, 但更多情况下是发生隐性感染 同脊灰病毒相似,EV71 对脊髓前角细胞具有一定的组织嗜性, 是最常见的引起急性弛缓性麻痹 (AcuteFlaccid Paralysis,AFP) 的非脊灰肠道病毒 EV71 只有一个血清型, 有 A B C 三种基因型, 其中 B C 又分为 B1-B5,C1-C5 各 5 个亚型 目前的分子流行病学研究发现,EV71 感染引起的临床症状与病毒的基因型别并无 第 6 页 / 共 280 页

7 联系, 即不同基因型别的毒株均可引起严重的神经系统感染或轻微的临床症状 用 3 种基因型别的 EV71 分别感染短尾猴, 均出现中枢神经系统症状, 也表明各种型别毒株均具有神经系统毒性 有文献报道各基因型间存在一定的交叉中和反应 EV71 病毒复制过程中没有 DNA 阶段, 病毒复制依靠 RNA 依赖的 RNA 聚合酶, 缺乏校读功能, 平均每个新基因组即可产生一个突变 此外, 在同一流行中有不同基因型病毒感染的情况, 为病毒的基因重组提供了可能, 基因重组可以导致不同病毒株间直接的基因信息转移, 在肠道病毒中是普遍存在的现象, 具有进化适应性, 重组病毒可能发展为某一阶段的流行株 1998 年至今, 中国 EV71 的基因型主要是 xxx, 与其他国家和地区相比, 基因型变化小 流行病学研究显示, 5 岁以下人群为 EV71 感染的易感人群 第 7 页 / 共 280 页

8 二 审评经过本品于 2010 年 12 月 23 日获得临床批件, 批件内容为 请按照国家食品药品监督管理局发布的 药品注册管理办法 和 疫苗临床试验技术指导原则, 进一步完善临床研究方案, 制定终止临床试验的标准, 并严格遵守 GCP 及相关规定实施 : 所有试验用疫苗及对照均需经中国食品药品检定研究院检定合格 此外, 还需按照以下要求进行临床试验 :(1) 应按照相关要求开展每期的临床试验, 每期临床研究结果报药品审评中心 (2) 临床试验中需开监测抗核抗体的产生及可能带来的不良反应 (3) 在 Ⅲ 期临床试验中进行流行病学保护效力研究及免疫持久性研究 (4) 进行血清学抗体水平与流行病学保护效力关系的研究 (5) 进行含佐剂疫苗与无佐剂疫苗血清学抗体水平的比较研究 (6) 鉴于 3 家企业的生产毒株 生产工艺 抗原含量等方面的不同, 建议在临床试验中设计相关的试验组, 比较 3 家企业疫苗的血清学抗体水平 临床试验期间需继续进行 2~8 保存疫苗的稳定性研究, 稳定性研究需重点关注疫苗的抗原含量及免疫原性 继续开展检测方法标准化的研究 申请人完成临床试验, 申请生产和新药证书, 申报资料于 2013 年 7 月 30 日转入药品审评中心 本品按照预防用生物制品 1 类申报, 按特殊审评程序加快审评 主要审评经过如下 : 第 8 页 / 共 280 页

9 1 中心于 2013 年 8 月 29 日召开特殊疫苗 ( 包括 EV71 灭活疫苗和 sipv) 审评策略讨论会 ( 内部 ) 会议认为, 在召开专家咨询 ( 审评 ) 会之前需先召开研讨会, 请 WHO 专家参会, 得到国际专家的认可对于本品上市决策有着重要意义, 结合 EV71 疫苗研发现状和现有审评中发现的问题, 会议总结了 EV71 研讨会关注的重点问题包括 :(1) 手足口病发病机制和临床前出现的免疫病理问题仍是影响疫苗安全性的潜在问题 ;(2) 对于非严重疾病疫苗的定位问题 ;(3) 我国目前手足口病的流行病学研究现状,EV71 病毒在手足口病中所占的比例, 本品上市的意义和价值 ;(4) 根据临床研究结果, 该疫苗在国家计划免疫中的定位问题等 2 中心于 2014 年 8 月 19 日召开肠道病毒 71 型灭活疫苗专家研讨会 ( 会议纪要已关联 ) 3 中心于 2014 年 9 月 3 日召开肠道病毒 71 型灭活疫苗下一步工作安排讨论会 ( 内部, 会议纪要已关联 ) 4 中心于 2014 年 10 月 16 日召开 3 家肠道病毒 71 型灭活疫苗临床结果分析讨论会 5 本品经中心初步审评后, 于 2014 年 11 月 21 召开专家咨询会 6 中心于 2014 年 12 月 23 日召开专家参与的肠道病毒 71 型灭活疫苗工作会议 讨论认为, 仍有必要探讨以动物免疫原性试验统一 3 家标示量的研究 第 9 页 / 共 280 页

10 7 中心于 2015 年 1 月 13 日召开肠病毒 71 型灭活疫苗 ( 昆明所 科兴 微谷 ) 成品标示量等问题讨论会 ( 专家及企业参与, 会议纪要已关联 ) 8 中心于 2015 年 2 月 10 日召开肠道病毒 71 型灭活疫苗若干重大决策问题专家研讨会 ( 会议纪要已关联 ) 9 中心于 2015 年 4 月 2 日召开外部专家参与的扩大专业审评会, 讨论本品质量标准和规程问题 第 10 页 / 共 280 页

11 三 新报资料的技术审评情况 ( 一 ) 临床专业审评意见本品血清学标本检测由中检院完成 ;Ⅲ 期临床试验现场 PCR 诊断及病毒分离鉴定由中国疾病预防控制中心病毒预防控制所完成 提供了临床试验原始电子数据库资料 (1) 临床试验概述 Ⅰ Ⅱ 期均在广西进行 试验设计均采用随机 双盲 安慰剂对照设计 Ⅰ 期的试验目的是评价本品在成人 儿童及婴幼儿人群的安全性和耐受性,Ⅱ 期试验目的是评价不同 EV71 抗原含量疫苗的免疫效果, 为 Ⅲ 期临床试验的疫苗剂量与接种程序的选择提供依据 Ⅰ 期临床试验于 2010 年 12 月 年 10 月在广西蒙山县进行, 先完成了成人免疫安全性观察后, 再开始儿童和婴幼儿组, 每个年龄组从低剂量到高剂量分阶段进行 共有 168 名受试者参加该期临床试验, 其中成人组 儿童组各 36 人按照 ( 天 ) 三针程序接种疫苗为 200U 400U 及安慰剂 ; 婴幼儿组 96 人, 按照三针程序接种疫苗为 100U 200U 400U 及安慰剂 Ⅱ 期临床试验于 2011 年 7-11 月在广西蒙山县和平乐县进行 共有 540 名 6-35 月龄受试者分别按照 0 28 天程序接种了 100U 200U 400U 200U( 无佐剂 ) 及安慰剂 Ⅲ 期临床试验为随机 双盲 安慰剂对照研究, 目的是 第 11 页 / 共 280 页

12 评价本品在中国 6-35 月龄健康婴幼儿按照 0 28 天免疫程序接种后的保护效力 免疫原性 免疫持久性和安全性 于 2012 年 1 月至 2013 年 3 月在江苏省赣榆县 泰兴市和射阳县开展, 研究先后对 名婴幼儿进行了两针免疫接种, 完成了长达一年的流行病学保护效果观察 连续三批临床试验为随机 双盲 安慰剂对照研究, 目的是评价连续三批本品在 6 月龄 -5 岁儿童中的免疫原性及批间一致性 于 2012 年 7 月在江苏省句容市进行, 选择 1400 名受试者按照 0 28 天免疫程序接种连续三个批次试验疫苗及安慰剂, 在完成全程免疫后 28 天采血的血清样本用于免疫原性评价 同期还完成了后续系列相关试验支持本品的注册, 如 Ⅱ 期免疫原性持久性研究 Ⅲ 期免疫原性亚组试验和免疫原性持久性研究 Ⅲ 期免疫替代指标的探索性研究 后续临床保护力观察研究 (2)Ⅰ 期临床试验本期临床由广西 CDC 负责, 现场起止时间为 2010 年 12 月 年 10 月 研究现场为广西蒙山县 提供了中检院对 Ⅰ 期共 418 份标本血清学检测报告及原始结果 ( 中检生函 [2011]1256 号 ) 等 1. 试验目的 : 评价本品不同剂量在不同年龄人群中的安全性及初步免疫原性 第 12 页 / 共 280 页

13 2. 试验设计 : 本试验采取随机双盲 对照设计, 试验疫苗为 EV71 灭活疫苗, 以无疫苗成分的氢氧化铝稀释液作为安慰剂对照 本试验共入组 168 名健康受试者, 其中 岁成人 36 人 ( 随机分成 3 组, 每组 12 人 ),3-11 岁儿童 36 人 ( 随机分成 3 组, 每组 12 人 ),6-35 月龄婴幼儿 96 人 ( 随机分为 4 组, 每组 24 人 ) 成人于第 0 14 和 28 天接种 3 剂 EV71 灭活疫苗或安慰剂, 儿童和婴幼儿于第 0 28 和 56 天接种 3 剂试验疫苗或安慰剂 受试者完成每剂疫苗接种后, 观察 30 分钟即时反应和 0-72 小时即时局部和全身反应 成人组在第 天, 儿童组在第 天, 婴幼儿组在第 天分别采集血样, 进行血常规 血生化的检测 成人组第 0 28 天, 儿童组在 0 56 天, 婴幼儿组在 天进行抗核抗体和中和抗体检测 3. 研究假设及研究终点 : 3.1 研究假设 : 所有研究对象未出现与疫苗相关的严重不良反应 3.2 研究终点 : 通过观察受试者接种不同剂量疫苗后的局部和全身不良反应以及血常规 血生化 尿常规异常反应发生率, 评价疫苗安全性 各组不良反应发生率和实验室指标异常反应发生率作为安全性终点 如试验中出现 1 例可能与疫 第 13 页 / 共 280 页

14 苗接种有关的 4 级反应 / 严重不良事件 或各年龄组中任一剂量组 15% 以上受试者出现与疫苗接种有关的 3 级反应, 研究者 申办者与数据安全监查委员会将共同讨论, 决定是否中止试验 4. 随机与设盲 : 按照受试者年龄和试验疫苗剂量分为 7 个组 疫苗设盲由申办方完成, 应用 SAS 统计软件按照事先设定的区组长度产生随机编码, 对疫苗进行区组随机化编码, 成人组和儿童组按照试验疫苗 : 安慰剂 =2:1, 婴幼儿组按照试验疫苗 : 安慰剂 =3:1 进行随机和设盲, 所有试验疫苗和安慰剂将由申办方依据随机表重新粘贴设盲标签 盲底一式两份在试验开始前封存 5. 受试者入选排除标准 : 5.1 主要入选标准 :6 月龄至 11 岁或 岁健康男性和女性, 儿童体重达到同龄正常范围 ; 对于 6-35 月龄婴幼儿, 须足月 (37-42 周 ), 出生体重 2500 克 5.2 首针接种疫苗的排除标准 : 手足口病史者 ; 有疫苗或疫苗成份过敏史等 5.3 接种第 2/3 针疫苗的排除标准 : 接种前生命体征 体格检查 心电图检测异常, 尿妊娠试验阳性 ; 近 3 天出现各种急性感染性疾病, 体温 38.5 或慢性疾病急性发作 ; 入选后接受过血液制品或其他研究药物 ; 出现与上次试验疫苗接种相关的 3 级以上不良事件等 第 14 页 / 共 280 页

15 6. 试验疫苗本研究疫苗 : 规格为 100U/0.5ml/ 支, 中检所检定报告效力试验结果为 1:156;200U/0.5ml/ 支, 中检所检定报告效力试验结果为 1:325; 规格为 400U/0.5ml/ 支, 中检所检定报告效力试验结果为 1:578 未提供本品的抗原含量检测结果, 应提供效力试验结果与抗原量的相关性研究资料 安慰剂 : 规格为 0.5ml/ 支, 主要成分为氢氧化铝 7. 接种途径 剂量和接种程序 : 试验疫苗于上臂三角肌肌肉注射, 每次 1 剂 0.5ml, 共接种 3 剂 18 岁以上成人免疫程序为 天,3-11 岁儿童和 6-35 月龄婴幼儿免疫程序为 天 表 Ⅰ-3 各受试者年龄组接种剂量及免疫程序 年龄组 剂量组 免疫程序 成人组 (18-49 岁 ) 200U 400U d 儿童组 (3-11 岁 ) 200U 400U d 婴幼儿组 (6-35 月龄 ) 100U 200U 400U d 8. 评价指标安全性观察指标包括局部反应 全身反应 实验室检查指标包括 : 血常规 血生化 尿常规 成人女性妊娠试验, 及心电图等 免疫原性评价指标包括血清中和抗体阳性率 血清中和抗体几何平均滴度 (GMT) 及增长倍数 采用改良的细胞病变法 (CPE 法 ) 方法进行中和抗体检测 以抑制 50% 病变的最高稀释度的倒数作为样本中和效价 第 15 页 / 共 280 页

16 每块细胞培养板均设细胞对照 血清对照和病毒对照 ; 每次试验均设病毒回滴, 回滴结果在 32~320TCID50/ 孔时, 试验方可成立 中和抗体效价采用几何平均滴度 (GMT) 来表示 中和抗体效价 8 判断为 EV71 中和抗体阳性 血清抗体阳性定义 : 以 1:8 为临界值, 中和抗体滴度 < 1:8 者为阴性, 抗体滴度按 1:4 计算 抗体滴度 1:8 为阳性 9. 试验结果及分析 : 9.1 受试者分配 脱落及剔除情况 受试者分配 : 共 168 名受试者随机入组, 第 1 针安全性分析人数为 168 人 ; 第 2 针和第 3 针均有 162 名受试者完成疫苗接种及安全性观察 有 2 名受试者接种前采集的血样丢失, 免疫原性分析人数为 166 人 受试者脱落及依从性分析 : 共有 6 人发生脱落, 总脱落率为 3.6% 受试者依从性良好 脱落受试者包括儿童组 1 人, 婴幼儿组 5 人 无 1 人因试验疫苗相关性不良事件而退出 共 162 人 (96.4%) 按照方案要求完成全程接种和采血 9.2 受试者人口统计分析入组 168 名受试者年龄为 7 月龄 -48 岁, 其中男性 73 人, 女性 95 人 其中 126 名受试者为汉族,42 名受试者为少数民族 提供了不同剂量组受试者基本信息 10. 安全性结果分析 : 经研究者判定, 接种疫苗后不良反应 56 例, 其中成人 第 16 页 / 共 280 页

17 组 10 例, 儿童组 7 例, 婴幼儿组 39 例 未见严重不良反应 本次研究中,1 级 ( 轻度 ) 不良反应 29 例 ;2 级 ( 中度 ) 不良反应 23 例 ;3 级 ( 重度 ) 不良反应 4 例 所观察到的不良反应以 1 2 级反应为主 3 级不良反应发生率低, 在各年龄组中发生率均不足 3% 本次试验局部和全身不良反应发生率分别为 3.6% 和 31.5% 在所有受试人群中, 常见局部不良反应包括注射部位疼痛 (2.4%) 硬结(1.2%) 和搔痒 (1.2%); 全身不良反应以发热症状最为多见, 发生率为 25.6%, 其它症状包括头痛 (0.6%) 烦躁(2.4%) 腹泻(3.0%) 全身瘙痒/ 风团 (3.0%) 恶心呕吐(1.2%) 嗜睡/ 乏力 (1.2%) 食欲下降 (1.8%) 散在小疹(0.6%) 和咳嗽 (1.2%), 10.1 各年龄组不良反应成人组不良反应总体发生率为 27.8%, 全部为 1 级反应, 200U 400U 和安慰剂组不良反应发生率分别为 41.7% 16.7% 和 25.0% 儿童组不良反应总体发生率为 19.4%, 其中 1 级反应发生率为 8.3%,2 级反应发生率为 8.3%,3 级反应发生率为 2.8% 200U 400U 和安慰剂组中 1 级反应和 2 级反应的发生率基本相当 ; 唯一 1 例 3 级反应发生在 400U 组 婴幼儿组不良反应总体发生率为 39.6%, 高于成人组和儿童组 其中 1 级反应发生率为 16.7%,2 级反应发生率为 第 17 页 / 共 280 页

18 20.1%( 高于成人组和儿童组 ),3 级反应发生率为 3.1% 10.2 不同年龄组不良反应症状分析成人组局部和全身不良反应发生率分别为 8.3% 和 25.0% 常见局部不良反应为搔痒 硬结和接种部位疼痛 全身不良反应仍以发热症状最为多见, 发生率达到 22.2%; 其它全身症状包括全身搔痒 风团 儿童组局部和全身不良反应发生率分别为 5.6% 和 16.7% 常见的局部不良反应为接种部位疼痛和硬结 全身不良反应仍以发热症状最为多见, 发生率为 11.1%, 其它全身症状包括全身瘙痒 / 风团和嗜睡 / 乏力 婴幼儿组局部和全身不良反应发生率分别为 1.0% 和 39.6% 婴幼儿组仅发生 1 例局部不良反应, 即接种部位疼痛 全身不良反应仍以发热症状最为多见, 发生率可达 32.3%, 其它全身症状包括烦躁 腹泻 全身瘙痒 / 风团 恶心和呕吐 嗜睡 / 乏力 食欲下降 散在小疹以及咳嗽 不同剂量局部和全身不良反应发生率均基本相当, 且与安慰剂相比无明显差异 10.3 不同针次疫苗接种后不良反应分析成人组 儿童组和婴幼儿组第 1 针疫苗接种后的不良反应发生率分别为 22.2% 8.3% 和 18.8%; 第 2 针疫苗接种后的不良反应发生率分别为 8.3% 2.9% 和 9.9%; 第 3 针疫苗接种后的不良反应发生率分别为 5.6% 11.4%, 低于婴幼儿组的 22.0% 各年龄组内不同剂量的不良反应发生率基本相 第 18 页 / 共 280 页

19 当, 且与安慰剂相比无明显差异 10.4 实验室检测指标异常情况 : 各年龄组接种疫苗后未见血常规异常, 仅少数受试者出现一过性血生化或尿常规异常 级 ( 重度 ) 不良反应分析 : 整个临床试验期间, 共发生 4 例 3 级 ( 重度 ) 不良反应, 其中儿童组 1 例, 婴幼儿组 3 例 儿童 400U 组 1 名受试者在第 1 针接种后发生 3 级反应为皮疹 其余 3 例均为 3 级发热反应, 同期未观察到其它异常 10.6 严重不良事件 : 本试验期间共发生 2 例因呼吸道感染住院事件, 经研究者判断与疫苗接种无关, 病例已经痊愈 10.7 抗核抗体分析 :168 名受试者中, 有 12 例抗核抗体检测阳性, 各年龄组均有阳性者, 且分布在试验疫苗组和安慰剂组 受试者免前及免后抗核抗体滴度无明显差异, 抗核抗体阳性受试者在接种疫苗后, 未见不良反应加重 实验室检测指标异常, 及与免后中和抗体滴度的相关性 11. 免疫原性初步分析 168 名受试者接种前各年龄组中成人组抗体阳性率最高, 达到 91.6%, 其次是儿童组为 79.4%, 最低的婴幼儿组为 10.4% 儿童免前血清中和抗体水平组最高为 123.8, 其次是成人组为 37.7, 最低的婴幼儿组为 6.7 相同年龄受试者人群, 尤其是婴幼儿, 各剂量组与安慰剂组间免前中和抗体水平及阳性率基本相当 第 19 页 / 共 280 页

20 提供了中检院的 Ⅰ 期血清样本检测结果 中检生函 [2011]1256 号 (2011 年 8 月 10 日 ), 送检血清样本 418 份, 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 审评认为, 尽管 168 名受试者包括有 2 剂和 3 剂 不同剂量及不同年龄组的探索, 未明确送检血清样本 418 份与 PPS 集受试者的一致性, 考虑到为早期研究, 剂量也属于不确定阶段, 故不再补充 11.1 两针后免疫原性结果分析 成人组免疫原性 : 接种 2 针 200U 疫苗后, 抗体 GMT 由免前 49.9 升高至 , 增长倍数达到 倍 ; 接种 2 针 400U 疫苗后,GMT 由免前 24.9 升高至 , 增长倍数达到 倍 ; 两个剂量组的中和抗体阳性率均达到 100%, 且 1:32-1:128 阳性率达到 100% 安慰剂组免疫前后中和抗体无明显变化, 抗体水平 1:8 阳性率为 91.2%, 1:128 阳性率为 25.0%, 即成人中仅 1/4 具有高滴度中和抗体 儿童组免疫原性 : 接种 2 针 200U 疫苗后, 抗体 GMT 由免前 升高至 , 增长倍数达到 48.9 倍 ; 接种 2 针 400U 疫苗后, 抗体 GMT 由免前 51.7 升高至 , 增长倍数达到 倍 ; 两个剂量组的中和抗体阳性率均达到 100%, 且 1:32-1:128 阳性率达到 100% 安慰剂组免疫前后中和抗体无明显变化, 抗体水平 1:8 第 20 页 / 共 280 页

21 阳性率为 91.2%, 1:128 阳性率为 75.0%, 即儿童中有 3/4 具有高滴度中和抗体 这与成人组明显不同, 可能与儿童易感染 EV71 病毒有关 婴幼儿组免疫原性 : 婴幼儿组接种 2 针 100U 疫苗后, 抗体 GMT 由免前 5.0 升高至 158.0, 增长倍数为 31.6 倍 ; 中和抗体阳性率达到 100%, 且 1:32 1:64 和 1:128 阳性率分别为 81.8% 72.7% 和 54.5% 接种 2 针 200U 疫苗后,GMT 由免前 9.6 升高至 246.4, 增长倍数为 25.7 倍 ; 中和抗体阳性率达到 100%, 且 1:32 1:64 和 1:128 阳性率分别为 100% 83.3% 和 58.3% 接种 2 针 400U 疫苗后, 抗体 GMT 由免前 8.9 升高至 , 增长倍数为 倍 ; 中和抗体阳性率达到 100%, 且 1:32 1:64 和 1:128 阳性率分别为 100% 100.0% 和 90.9% 婴幼儿接种 2 针疫苗呈现较明显的剂量效应关系,100U 组 1:32 阳性率为 81.8%,200U 组 1:64 阳性率为 83.3%,400U 组 1:128 阳性率为 90.9% 这表明免疫剂量越大, 高滴度中和抗体阳性率越高 相比之下, 安慰剂组免疫前后中和抗体无明显变化 11.2 连续 3 针婴幼儿受试者免疫原性结果分析 婴幼儿组免前中和抗体阴性受试者的免疫原性 : 婴幼儿组免前中和抗体阴性者 86 人, 在免后 28 天 ( 接种 1 针 ),100U 200U 和 400U 组抗体阳性率分别为 90% 第 21 页 / 共 280 页

22 80% 和 100%,GMT 分别为 和 27.4,GMT 增长倍数分别为 和 6.8 倍 ; 在 2 针免后 28 天,3 个剂量组抗体阳性率均达到 100%,GMT 分别为 和 509.0, GMT 增长倍数分别为 和 倍 ; 在 3 针免后 28 天,3 个剂量组中和抗体阳性率维持在 100%, 且 GMT 值分别达到 和 ,GMT 增长倍数分别为 和 倍 上述结果显示, 本品所诱导的免疫原性, 不仅在 2 针和 3 针免后具有一定的剂量效应相关性, 且表现出针次依赖性 安慰剂组 2 针免疫前后中和抗体无改变, 在 2 针免后有 2 例受试者达到中和抗体阳性 这 2 例受试者, 经研究者判断为 EV71 病毒自然隐性感染所致 婴幼儿组免前中和抗体阳性受试者的免疫原性 : 婴幼儿组免前中和抗体阳性 10 人, 接种 1 针疫苗后, 中和抗体 GMT 增长 4-48 倍 ; 接种 2 针疫苗后,GMT 增长 倍, 呈现显著的免疫回忆反应 综上,Ⅰ 期临床试验结果显示本品在成人组 儿童组及婴幼儿组的耐受性和安全性尚可接受, 常见的接种部位不良反应主要包括注射部位疼痛 硬结及瘙痒 ; 全身不良反应以发热最为多见 (25.6%) 接种疫苗各年龄组基本相似, 未见增加针次不良反应增加的趋势 血 尿常规 血生化及抗核抗体检测结果异常未见与安全性结果明显的相关性 第 22 页 / 共 280 页

23 初步免疫结果显示, 免前中和抗体为阴性的婴幼儿受试者, 在完成 2 针免疫后其抗体 GMT 水平出现明显升高, 并呈现出一定的量效关系 2 针免疫后婴幼儿 儿童和成人中均表现出良好的免疫原性, 故考虑在 Ⅱ 期临床试验中采用两针免疫接种程序 审评认可 (3)Ⅱ 期临床试验 Ⅱ 期临床负责单位为广西自治区 CDC, 起止时间为 2011 年 6 月至 2011 年 11 月 研究现场协作单位为广西蒙山县和平乐县 CDC 申请人按要求提供了试验用疫苗中检院检定报告 ( 100U/0.5ml 200U/0.5ml 400U/0.5ml 无佐剂 200U/0.5ml 及对照疫苗 ) 及中检院对 Ⅱ 期临床 1446 份血清学检定报告及原始结果 ( 中检生检函 [2011]1679 号 ) 1. 试验目的 : 评价不同剂量含铝佐剂或无佐剂本品在目标人群 (6-35 婴幼儿 ) 中的免疫原性和安全性, 以确定最佳疫苗免疫程序和免疫剂量, 为 Ⅲ 期临床试验设计提供依据 2. 试验设计 : 本试验为分层随机双盲安慰剂对照设计 选择 540 名入选及排除标准筛选合格的健康受试者, 其中 6-11 月龄 300 人 月龄 120 人 月龄 120 人 在 6-11 月龄层, 随机将受试者分为 5 组, 每组 60 人, 分别为 100U 组 200U 组 400U 组,200U( 无佐剂 ) 组及安慰剂组 ; 在 月龄和 月龄层, 随机将受试者分为 4 组, 每组 30 人, 分别为 100U 组 200U 组 400U 组及安慰剂组 第 23 页 / 共 280 页

24 所有受试者按照 0, 28 天免疫程序接种 2 针试验疫苗或安慰剂 对于 6-11 月龄婴幼儿受试者, 免疫接种前及接种后第 8 天, 全程免疫后第 28 天, 采集尿液样本进行尿常规检查 观察每针接种后 30 分钟即时反应和 0-7 天局部反应和全身反应 中和抗体效价检测时间点为免前及免后第 28 天 第 56 天 3. 研究假设及研究终点 3.1 研究假设 : 所有受试者未出现与疫苗相关的严重不良反应 3.2 研究终点 : 通过观察接种不同剂量疫苗后的局部和全身不良反应以及尿常规异常反应发生率, 评价疫苗安全性 各组不良反应发生率和实验室指标异常反应发生率作为安全性终点 如试验中出现 1 例可能与疫苗接种有关的 4 级反应 / 严重不良事件 或各年龄组中任一剂量组 15% 以上受试者出现与疫苗接种有关的 3 级反应, 研究者 申办者与数据安全监查委员会共同讨论决定是否中止试验 4. 样本量估算 : 根据 Ⅰ 期临床试验结果推算样本量 依据指标为第 56 天 GMT 采用 PASS 软件计算, 检验水准 α=0.05 条件下, 计算每年龄层每组受试者样本量不少于 30 例 5. 试验剂量和免疫程序的选择 : 依据 Ⅰ 期临床试验在 100U-400U/0.5ml 剂量范围内本品 2 针免疫程序 (0 28 天 ) 第 24 页 / 共 280 页

25 在婴幼儿人群中的结果确定 6. 观察指标的选择 : 参照国内外相关指南, 并根据 Ⅰ 期临床试验所获得的不良反应数据确定临床安全性评价指标 7. 随机与设盲 : 同 Ⅰ 期临床试验 8. 受试者入选 / 排除标准 8.1 入选标准 :6-35 月龄健康婴幼儿 8.2 首针和接种第 2 针疫苗的排除标准 受试者提前中止试验标准 : 均同 Ⅰ 期 9. 研究用疫苗本次提供效力试验结果及抗原含量的百分比, 应结合 Ⅱ 期临床试验试验说明本品规格 效力试验结果和抗原含量的关系 (Ⅰ 期效力试验结果为比值, 本次效力试验结果单位为 U/ml) 安慰剂 : 规格为 0.5ml/ 支, 主要成分为氢氧化铝 10. 疫苗接种部位 剂量及接种程序 : 肌内注射 共设四个剂量组 :100U/0.5ml 200U/0.5ml 400U/0.5ml 和 200U/0.5ml ( 无佐剂 ) 免疫程序为 0 28 天 11. 评价指标 11.1 安全性观察指标 : 主要包括局部反应和全身反应 同 Ⅰ 期临床试验 11.2 实验室检查指标 : 尿常规包括尿蛋白 尿糖及血细胞 免疫原性评价指标和抗体阳性定义同 Ⅰ 期临床试验 第 25 页 / 共 280 页

26 12. 试验结果 12.1 受试者分配 脱落及剔除情况共 540 名受试者随机入组, 完成第 1 针疫苗接种及免后 7 天安全性观察 ;489 人接受第 2 针疫苗接种,482 人完成免后 7 天安全性观察 共 540 位受试者接受免前 ( 第 0 天 ) 血样采集,489 人接受第 1 针免后 28 天 ( 第 28 天 ) 血清样本采集 ; 有 481 人完成第 2 针免后 28 天 ( 第 56 天 ) 血清样本采集 受试者脱落情况 :540 名受试者接种疫苗后有 59 人发生脱落, 总脱落率为 10.93% 第 1 针免后脱落 51 人, 脱落率为 9.44%; 第 2 针免后脱落 8 人, 脱落率为 1.48% 脱落受试者包括安慰剂组 8 例 (6.7%) 100U 组 11 例 (9.2%) 200U 组 15 例 (12.5%) 200U( 无佐剂 ) 组 6 例 (10.0%) 400U 组 19 例 (15.8%) 在所有脱落受试者中, 有 15 例因 ( 安慰剂组 1 例,100U 组 5 例,200U 组 3 例,200U 无佐剂组 2 例,400U 组 4 例 ) 不良事件退出本研究, 占总脱落受试者的 25.4% 其余脱落受试者由于外出或其它原因而选择自愿退出 依从性分析 : 本研究期间, 共 455 人 (84.26%) 按方案要求完成全程接种及安全性观察和采血, 其中安慰剂组 107 例 (89.17%),100U 组 104 例 (86.67%),200U 组 98 例 (81.67%),200U 无佐剂组 51 例 (85.00%),400U 组 第 26 页 / 共 280 页

27 95 例 (79.17%) 主要方案违背的原因是入组筛选失败 12.2 受试者人口统计学分析 受试者基本信息 : 入组的 540 名受试者年龄范围在 6-35 月龄, 其中男性 281 人, 女性 259 人 按照不同剂量组分别进行统计, 各剂量组受试者年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 12.3 安全性结果 总体不良反应 :540 例受试者共观察到 295 例发生不良反应, 其中 1 级 ( 轻度 ) 不良反应 152 例 ( 占不良反应的 51.5%);2 级 ( 中度 ) 不良反应 132 例 ( 占 44.7%);3 级 ( 重度 ) 不良反应 11 例 ( 占 3.7%) 所观察到的不良反应以 1 2 级反应为主 ;3 级不良反应发生率低, 在各年龄组中发生率均不足 3% 100U 组 68 例 (56.7%),200U 组 61 例 (50.8%),400U 组 62 例 (51.7%),200U 无佐剂组 34 例 (56.67%), 安慰剂组 70 例 (58.3%), 各组不良反应发生率无明显差异, 未见严重不良反应 局部不良反应 17 例, 总发生率为 3.2%,1 2 级分别为 15 例和 2 例, 未观察到 3 级局部不良反应 100U 组 3 例 (2.5%),200U 组 7 例 (5.8%),400U 组 3 例 (2.5%), 200U 无佐剂组 2 例 (3.3%), 安慰剂组 2 例 (1.7%) 全身不良反应 287 例, 发生率为 53.2%,1 2 3 级分别为 例 ( 发生在各佐剂疫苗组 ),100U 组 65 第 27 页 / 共 280 页

28 例 ( 54.17%),200U 组 60 例 ( 50.0%),400U 组 60 例 ( 50.0%), 200U 无佐剂组 34 例 (56.67%), 安慰剂组 68 例 (56.67%) 各年龄组不良反应 : 6-11 月龄层不良反应总体发生率为 57.7%, 其中 1 级反应发生率为 30.0%,2 级反应发生率为 26.0%,3 级不良反应发生率为 1.7% 铝佐剂 100U 200U 400U 剂量组, 无佐剂 200U 组和安慰剂组不良反应发生率分别为 53.3% 61.7% 51.7% 56.7% 和 65.0% 月龄层不良反应总体发生率为 47.5%, 其中 1 级反应发生率为 24.2%,2 级反应发生率为 20.8%,3 级反应发生率为 2.5% 铝佐剂 100U 200U 400U 剂量组和安慰剂组不良反应发生率分别为 46.7% 40.0% 53.3% 和 50.0% 月龄层不良反应总体发生率为 54.2%, 其中 1 级反应发生率为 27.5%,2 级反应发生率为 24.2%,3 级反应发生率为 2.5% 铝佐剂 100U 200U 400U 剂量组和安慰剂组不良反应发生率分别为 73.3% 40.0% 50.0% 和 53.3% 各年龄层试验组疫苗不同剂量组间 试验组与安慰剂组间不良反应发生率基本一致 此期设置有无佐剂 200U 组的比较, 安全性显示无明显差异 不良反应症状发生情况分析 : 局部不良反应症状主要为局部疼痛 发红和瘙痒 各试验组间局部反应症状发生率无明显差别 全身不良反应以发热症状最为多见, 各试验组 第 28 页 / 共 280 页

29 和安慰剂组发热率在 % 之间, 以无佐剂组最低, 其次为烦躁和厌食, 均无组间差异 6-11 月龄层局部和全身不良反应发生率分别为 3.0% 和 56.7% 常见的局部不良反应为发红 瘙痒 肿胀和接种部位疼痛 全身不良反应以发热症状最为多见, 发生率达到 46.0%; 其他全身症状包括烦躁 腹泻 厌食 呕吐 腹泻 变态反应 扁桃体炎 / 咽炎 感冒 / 上感症状 胃肠型感冒 疱疹性咽峡炎 月龄局部和全身不良反应发生率分别为 1.7% 和 47.5% 常见的局部不良反应为接种部位疼痛和瘙痒 全身不良反应以发热症状最为多见, 发生率为 35.8%, 其它全身症状包括烦躁 腹泻 呕吐 嗜睡 厌食 变态反应 感冒 / 上感症状 月龄层局部和全身不良反应发生率分别为 5.0% 和 50.0% 常见不良反应为发红 疼痛 硬结和瘙痒 全身不良反应仍以发热症状最为多见, 发生率可达 40.8%, 其它全身症状包括烦躁 腹泻 呕吐 嗜睡 厌食 变态反应和感冒 / 上感症状 不同剂量组间局部和全身不良反应发生率均基本相当, 且与安慰剂相比无明显差异 不同针次疫苗接种后不良反应分析 : 本试验期间, 和 月龄婴幼儿第 1 针疫苗接种后不良反应发生率分别为 43.3% 32.5% 和 40.8%; 第 22 针疫苗接种后不良反应发生率分别为 32.1% 29.8% 和 35.2% 各年龄组内不同剂量组间的不良反应发生率 试验疫苗与安慰剂相比均 第 29 页 / 共 280 页

30 无明显差异 实验室检测指标异常情况 : 各年龄组接种疫苗后,34 例受试者出现一过性尿红细胞指标异常, 异常程度均为 1 级 ; 12 例受试者出现一过性尿蛋白 1 级异常 建议申请人提供一过性尿红细胞和尿蛋白异常 (1 级 ) 在各剂量组的分布情况, 并分析与接种疫苗是否具有关联性及临床意义 三级 ( 重度 ) 不良反应分析 : 此期试验间共有 11 名受试者发生 12 例 3 级 ( 重度 ) 不良反应, 其中 6-11 月龄层 5 例,12-23 月龄层 3 例,24-35 月龄层 3 例 按试验组划分, 安慰剂组 4 例 100U 组 3 例 200U 组和 400U 组各 2 例 75% 3 级反应发生在第 1 针接种后,25% 发生在第 2 针接种后 除咽喉疱疹和流涕各 1 例外, 其余 10 例均为 3 级发热反应 严重不良事件 : 发生 3 例均与本品无关的 SAE 12.4 免疫原性分析 受试者基线免疫原性分析 : 对符合方案集的 455 名 6-35 月龄婴幼儿受试者进行了免疫原性基线水平分析, 中和抗体的总阳性率为 12.1% 6-11 月龄 月龄以及 月龄婴幼儿组中和抗体的阳性分别为 3.1% 11.3% 35.6%, 中和抗体 GMT 分别为 1:4.28,1:6.08 和 1:19.21, 抗体阳性率和平均抗体水表现出随年龄增长而逐渐升高趋势, 各试验组间抗体基线均衡可比 第 30 页 / 共 280 页

31 提供了中检院的 Ⅱ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2011]1679 号 ( 2011 年 11 月 9 日 ), 送检血清样本 1446 份, 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 审评认为,Ⅱ 期临床试验包括 PPS 集的 455 名 6-35 月龄婴幼儿基线 2 剂不同剂量 (3 个剂量组和佐剂组 ) 免后 56 天及不同婴幼儿组的探索研究, 还有 PPS 集 275 例 8 个月和 14 个月免疫持久性研究, 应有 1460 份样本, 基本一致 免后抗体阳性率和抗体水平 抗体阳性率 : 接种 1 剂疫苗后 6-35 月龄体阳性率以 400U 剂量组明显高于其他剂量组, 尤其在 6-11 月龄组差异有显著意义 ; 铝佐剂 200U 与无佐剂 200U 组比较差异不明显 接种 2 剂疫苗后试验疫苗各剂量组 铝佐剂和无佐剂组均检测到较高抗体阳性率, 且无组间差异, 但均显著高于安慰剂组 提供了免前抗体滴度 <1:8 的受试者免疫后抗体阳性率 表 Ⅱ-3 受试者不同针次免疫后抗体阳性率 1 针免后 2 针免后 年龄层试验组检测阳性阳性 % 95%CI 人数人数人数 % 95%CI 6-11 月龄 100U ( ) ( ) 200U ( ) ( ) 400U ( ) ( ) 无佐 200U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 月龄 100U ( ) ( ) 200U ( ) ( ) 400U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 月龄 100U ( ) ( ) 200U ( ) ( ) 第 31 页 / 共 280 页

32 400U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 6-35 月龄 100U ( ) ( ) 200U ( ) ( ) 400U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 免后抗体水平 6-35 月龄婴幼儿无论接种 1 剂或 2 剂, 其抗体 GMT 均以 400U 组高于其他试验组, 差异有显著性 ; 不同年龄层中, 6-11 月龄组和 月龄组亦均以 400U 剂量组抗体水平显著高于其他试验组, 仅 月龄组各剂量组间 GMT 无显著差异 试验疫苗各组抗体水平显著高于安慰剂组 有佐剂 200U 和无佐剂 200UGMT 水平相当 免前抗体滴度 <1:8 的受试者不同针次免疫后抗体水平结果一致 表 Ⅱ-4 受试者不同针次免疫后抗体水平 1 针免后 2 针免后 年龄层试验组分析增长增长 GMT 95%CI GMT 95%CI 人数倍数倍数 6-11 月龄 100U ( ) ( ) U ( ) ( ) U ( ) ( ) 无佐剂 200U ( ) ( ) 9.71 安慰剂 ( ) ( ) 月龄 100U ( ) ( ) U ( ) ( ) U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 月龄 100U ( ) ( ) U ( ) ( ) U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 月龄 100U ( ) ( ) U ( ) ( ) U ( ) ( ) 安慰剂 ( ) ( ) 1.16 第 32 页 / 共 280 页

33 免前中和抗体阳性 ( 1:8) 受试者在 455 名免疫原性分析人群中, 有 55 人免前中和抗体呈阳性, 且基本均匀分布在各剂量组中,GMT 均值范围在 之间 (200U 无佐剂组为 27.7) 在不同年龄层方面,6-11 月龄层阳性率最低,24-35 月龄最高 试验疫苗 2 针接种免疫程序在免前中和抗体阳性受试者中所诱导的免疫效应, 与免前中和抗体阴性受试者相似 1 针接种后阳性受试者的 GMT 值出现轻度升高 ;2 针接种 GMT 值较基线水平相比显著性升高 100U 铝佐剂 200U 铝佐剂 200U 无佐剂组以及 400U 铝佐剂组 GMT 值分别达到 和 , 增长倍数分别为 4.3 倍 9.2 倍 11.3 倍和 18.5 倍 而安慰剂组两针接种后中和抗体水平无明显改变, GMT 值仅升高 1.5 倍 综上, 根据本品 Ⅱ 期临床结果选择高剂量组 (400U) 进入 Ⅲ 期临床试验 (4)Ⅱ 期临床的免疫持久性研究 1. 试验目的 : 在 Ⅱ 期临床试验的基础上对接种本品的受试婴幼儿进行一年免疫持久性研究和安全性评价 2. 试验设计及方案 : 本研究采取开放性设计 对 Ⅱ 期临床试验中接种至少 1 剂次研究疫苗的 420 位受试者进行免后一年安全性评价, 以及对符合方案且接种 2 剂次试验疫苗的 347 受试者进行免疫持久性评价 第 33 页 / 共 280 页

34 3. 试验设计的相关考虑 : 目前, 国内外尚无 EV71 灭活疫苗免疫持久性研究报道 考虑到 EV71 所致手足口病发病人群以 3 岁以下婴幼儿为主, 出于伦理考虑, 安慰剂接种组的婴幼儿受试者不纳入本研究 入选至少接种 1 剂次试验疫苗的受试者 除安慰剂外, 对所有接种疫苗的受试者进行为期 1 年的安全性观察和免疫持久性观察 表 Ⅱ-5 免疫持久性研究受试者分组 分组 剂量安全性观察中和抗体测定 100U 200U 400U 200U 无佐剂合计 ( 初免后月 ) ( 初免后月 ) 6-11 月龄 , 14 8, 月龄 , 14 8, 月龄 , 14 8, 14 合计 流行病学调查 : 首次访视时, 对受试者进行回顾性流行病学调查 收集自 Ⅱ 期研究末次访视以来的流行病学信息 每次访视对受试者进行流行病学调查 ( 发生手 足 口腔皮疹或疱疹等手足口病症状者的内容 ), 并详细记录 4. 血清标本的采集 : 在疫苗初次免疫 8 个月和 14 个月后分别采集 l 血液样本 5. 评价标准与观察时间 : 血清中和抗体阳性率 血清中和抗体几何平均滴度 (GMT) SAE 发生率 观察期为一年 6. Ⅱ 期免疫持久性试验结果 6.1 数据分析集 : 纳入 FAS 数据集 347 例, 完成两剂次接种并进行了 8 个月和 14 个月采血纳入 PPS 的受试者 275 例 第 34 页 / 共 280 页

35 6.2 受试者分配 脱落及剔除描述 : 按方案要求入组 420 例受试者中 347 例完成了至少一次持久性采血, 其中符合 Ⅱ 期方案接种 2 剂次疫苗且无持久性方案违背的受试者 304 例, 有 24 例只进行了 8 个月采血和检测 ;5 例受试者只进行了 14 个月采血和检测 ; 同时完成了 8 个月采血和 14 个月采血并有效检测结果的受试者 275 例 表 Ⅱ-6 受试者完成试验情况 100U 200U 400U 200U 无佐剂 合计 N % N % N % N % N % 计划入组数 知情同意数 个月采血数 个月采血数 受试者基本信息 : 纳入 FAS 数据集共 347 例受试者,PPS 数据集 275 例受试者, 按照不同剂量组分别统计, 各剂量组免疫接种前的年龄 身高 体重及性别等基线资料均衡可比 6.4 免疫持久性分析 PPS 集受试者接种不同剂量疫苗后免疫持久性分析 : 275 名受试者接种不同剂量本疫苗 8 个月和 14 个月后,400U 剂量组 EV71 中和抗体阳性率和 GMT 均最高, 其中 8 个月后 EV71 中和阳性率为 100%,GMT 为 93.06;14 个月后为 95.83%,GMT 为 各剂量组间的中和抗体阳性率和 GMT 差异均有统计学意义 表 Ⅱ-7 免疫后不同时期抗体水平 100U(80 人 ) 200U(80 人 ) 400U(72 人 ) 200U 无佐剂 (43 人 ) P 四组比较阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 第 35 页 / 共 280 页

36 (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (8.32,25.18) (5.12,10.21) (7.39,23.74) (4.90,10.02) (6.22,22.96) (4.71,8.69) (0.12,13.84) (3.71,5.00) (83.8,97.34) (38.68,87.72) (87.01,98.9) (46.40,104.78) (91.46,100.00) (157.76,331.65) (86.2,100.00) (29.82,58.51) (62.52,82.88) (15.60,34.46) (87.01,98.9) (38.26,99.40) (93.69,100.00) (65.43,132.36) (63.52,90.01) (13.94,38.10) (69.26,88.05) (37.75,94.95) (77.76,93.85) (43.28,105.71) (87.5,99.55) (65.98,135.98) (63.52,90.01) (15.01,39.37) < 免前易感人群接种不同剂量接种后免疫持久性分析 : 242 名免前易感者 (<1:8), 接种不同剂量本品 8 个月后, 400U 剂量组 EV71 中和抗体阳性率和 GMT 均为最高, 中和抗体阳性率为 100%, 其余依次为 200U(94.20%) 200U 无佐剂 (78.57%) 和 100U(69.12%); 400U 剂量组 GMT 为 67.59, 其余依次为 200U(40.40) 200U 无佐剂 (21.91) 和 100U(14.58); 中和抗体阳性率和 GMT 差异均有统计学意义 接种 14 个月后,400U 剂量组 EV71 中和抗体阳性率和 GMT 仍为最高, 其中中和抗体阳性率为 95.24%, 其余依次为 200U(85.51%) 200U 无佐剂 (78.57%) 和 100U(76.47%); 400U 剂量组 GMT 为 73.81, 其余依次为 200U(47.84) 100U (43.99) 和 200U 无佐剂 (23.75) 中和抗体阳性率和 GMT 差异均有统计学意义 表 Ⅱ-8 免前易感人群免疫后不同时期抗体水平 100U(68 人 ) 200U(69 人 ) 400U(63 人 ) 200U 无佐剂 (42 人 ) P 四组比较 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性 (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (81.14,96.86) (26.1,49.31) (85.07,98.71) (30.2,53.33) (90.32,100.00) (113.79,217.73) (85.9,100.00) (28.47,53.36) 第 36 页 / 共 280 页 率 G <0

37 (56.60,79.70) (10.62,20.02) (85.07,98.71) (25.68,63.57) (92.84,100.00) (49.52,92.26) (62.76,89.76) (13.23,36.29) (64.35,85.85) (27.27,70.95) (74.5,92.84) (30.43,75.22) (85.83,99.48) (51.73,105.33) (62.76,89.76) (14.52,38.85) <0.001 < 免前易感人群排除免后可疑感染者后免疫持久性分析 6 例免前易感者 免后 56 天抗体阴性, 但在 1 年的持久性观察期内抗体发生 4 倍或以上的增长, 被视为疑为隐性感染, 其中 100U 和 200U 各 2 例 1 例为 400U 组 1 例为 200U 无佐剂组 ( 发生手足口病, 但未进行病原学检测 ) 99 例免前易感者, 免后 56 天抗体阳性, 但在 1 年的持久性观察期内出现抗体 4 倍或以上增长, 被视为有可疑的隐性感染, 其中 100U 组 32 例 (1 例发生手足口病, 但未进行病原学检测 ),200U 组 30 例,200U 无佐剂组 15 例,400U 组 22 例 242 例免前易感者, 排除上述 105 例手足口病及可疑隐性感染者, 共有 137 例受试者纳入最终免疫持久性分析 各剂量组抗体的阳性率和 GMT 均随观察时间的延长而降低, 其中 400U 组在接种 14 个月后抗体阳性率为 92.5%,GMT 为 均明显高于同期其他剂量组, 差异有统计学意义 从受试者抗体滴度反向累积分布图也可以看出,400U 组明显优于其他剂量组 建议结合后续临床试验结果分析本品目标剂量在完成基础免疫程序后是否需要加强免疫 表 Ⅱ-9 免前易感人群排除免后可疑感染者后不同时期抗体水平 100U(34 人 ) 200U(37 人 ) 400U(40 人 ) 200U 无佐剂 (26 人 ) P 四组比较 第 37 页 / 共 280 页

38 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT 阳性率 GMT (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) (95%CI) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 阳性率 < 安全性分析 :420 例受试者中, 免后 57 天 -8 个月内, 共发生 6 例不良事件,3 例为手足口病, 其余 3 例 SAE 研究者判断均与疫苗接种无关, 发生率为 1.43% 免后 8 月 -14 月内, 无 SAE 发生 表 Ⅱ-10 持久性观察不良事件发生情况 月龄层 分组 性别 第一针不良事件不良事件不良事件接种时间发生时间结束时间名称 症状描述 转归 200U 无 男 手足口病 手掌少量水泡, 体温正常 痊愈 200U 手 足 口腔出现丘疹, 疱男 手足口病无疹 痊愈 6-11 月 200U 无 男 小儿肺炎 发热, 咳嗽 痊愈 100U 女 手足口病 手足出现有斑疹 疱疹 痊愈 月 200U 男 支气管肺炎 咳嗽, 喉鸣 痊愈 200U 男 犬咬伤 面部被犬咬伤 痊愈 在此期间发生 3 例 200U( 无佐剂 ) 和有佐剂 100U 的手足口病, 未提供病原学诊断和抗体检测结果, 若有可补充 综上, 本品 400U( 含铝佐剂 ) 在初次免疫后 14 个月后抗体阳性率为 92.5%,GMT 为 37.48( 免后 56 天 GMT 是 ), 申请人认为本品此剂量和免疫程序可作为候选接 第 38 页 / 共 280 页

39 种目标方案, 有待 Ⅲ 期临床保护力试验加以验证 但审评认为, 须关注本品的免疫持久性和保护的问题 (5)Ⅲ 期临床保护效力试验 Ⅲ 期临床试验现场由江苏省疾病预防控制中心负责 (PI: 汪华 ), 该临床试验包括 3 个研究分中心, 分别为连云港市赣榆县 盐城市射阳县及泰州市泰兴市 试验现场起止时间为 2012 年 1 月至 2013 年 3 月 检测单位为中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所和中国食品药品检定研究院 在 Ⅲ 期临床试验 2012 年 10 月 ~2013 年 4 月中, 中检院共提供了 8 份血清样本检测报告, 汇总 : 中和抗体共检测免前 1292 份, 免后 1237 份, 急性期恢复期 190 份,EV71 阳性病例 99 份, 不明类别 2396 份 ;IgM 急性期恢复期 190 份 应逐一确认 Ⅲ 期临床试验下述检测报告的样本所对应的临床报告中的结果, 并核对检测样本数和临床报告中样本数 ( 阐明不一致的原因 ): 免疫原性每个随访时间点的中和抗体所有结果 ; 中检院复核病例的每个报告 ( 抗原和抗体 ) 对应的临床结果 临床报告称病例诊断流程中的病例实验室初检在 3 个县 CDC 实验室, 病例实验室确认由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ( 北京 ) 进行, 未提供复核检测报告 建议阐明病例诊断过程中实验室检测初检和复检的流程和方法, 提供方法学相关资料 ; 并提供病例实验室确认 ( 中国疾病预防控 第 39 页 / 共 280 页

40 制中心病毒病预防控制所 ) 的检测报告 1. 试验目的 1.1 主要目的 : 评价本品在 6-35 月龄健康人群中预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的有效性 1.2 次要目的 : 评价本品在 6-35 月龄健康人群的安全性 免疫原性和免疫持久性 1.3 探索性目的 : 探索针对 EV71 感染所致疾病的抗 EV71 中和抗体的免疫学替代指标 2. 试验设计 : 本研究采用随机 双盲 安慰剂对照的优效性临床试验设计 选择江苏省赣榆县 射阳县和泰兴市疾病预防控制中心为分中心 2.1 随机与双盲 : 对试验用疫苗的随机化分组和设盲, 采用了相同剂型 相同外观 相同内外包装 相同标签而仅疫苗编号不同 本研究分为二次设盲 受试者编号即为疫苗编号, 同一受试者每针次接种的疫苗编号相同 2.2 有效性评价 : 本研究中对所有接种过第 1 针疫苗的受试者在接种后第 57 天至第 14 个月期间, 通过建立肠道病毒病监测系统, 及时发现病例 肠道病毒病病例监测范围包括 EV71 阳性病例 CA16 型阳性病例以及其他肠道病毒 ( 非 EV71 型和非 CA16 型 ) 阳性病例 其中 EV71 阳性病例包括 EV71 感染所致疾病 (EV71 感染所致手足口病 疱疹性咽峡炎 ) 和 EV71 阳性其他病例 ( 与临床方案不符 ) 同时在观 第 40 页 / 共 280 页

41 察期间按季度进行主动随访, 了解受试者的失访情况, 计算观察人年 根据试验组和对照组受试者的观察人年以及确诊 EV71 感染所致疾病的病例数计算发病率 / 发病密度, 并计算出 EV71 疫苗预防 EV71 感染所致疾病的保护率 肠道病毒病病例的发现 肠道病毒病监测系统建立 : 在监测地区建立肠道病毒病监测系统, 监测系统包含了 640 个村卫生室,32 个镇卫生院,9 个县 / 市级医院,3 个县 / 市疾病预防控制中心 (CDC), 新型农村合作医疗系统以及 1 个省级疾病预防控制中心等, 中国疾病预防控制中心在三个研究中心建立了肠道病毒荧光定量 PCR 筛查实验室负责病例筛查工作和病原复核等工作 本研究采取了监测对象监护人主动报告和被动就医相结合的方式, 最大限度提高监测系统的灵敏度 监测对象 : 将所有接种过第 1 针的受试者均列为监测对象 筛查对象 : 在监测期间, 凡监测对象出现除明确诊断病因的疾病 ( 如外科疾病 先天性疾病 肿瘤 精神和行为障碍等 ) 外, 其他未能明确病因的疾病 / 症状体征者, 均作为筛查对象, 及时进行登记和调查, 同时采集咽拭子和肛拭子进行肠道病毒 71 型 (EV71) 柯萨奇肠道病毒 A 组 16 型 (CA16) 和肠道病毒通用 (EV-G) 特异性核酸检测 须提供包括江苏省与临床试验现场 3 个县同期日常 传染病报告网络系统 网络报告监测手足口病数据的比较, 对本 第 41 页 / 共 280 页

42 临床试验中建立的 EV71 相关疾病 / 手足口病进行症状监测系统的敏感性及特异性进行分析 可疑肠道病毒病病例 : 如筛查对象采集咽拭子和肛拭子标本中, 至少 1 份标本 EVG CA16 或 EV71 检测 1 项或 1 项以上指标结果为阳性者, 则为可疑病例 初步诊断肠道病毒病病例 : 对于可疑肠道病毒病病例, 经再次采集咽拭子和肛拭子进行特异性核酸检测, 仍至少有 1 份标本呈与首次检测相同的结果, 则初步诊断为肠道病毒病病例, 并立即身份确认, 按要求进行随访及结案调查 肠道病毒病病例的确诊 : 对发现的肠道病毒病病例 包括 EV71 阳性病例 ( 含 EV71 感染所致疾病 EV71 型阳性其他病例 ) CA16 型阳性病例以及其他肠道病毒阳性病例, 研究者根据肠道病毒病诊断标准, 结合临床表现以及实验室检测结果进行初步判断后, 将病例的临床资料 实验室检测资料和流行病学个案调查资料送交 DSMB 审查, 并由其进行最终的肠道病毒病病例的确诊或排除 2.3 安全性评价 接种期安全性观察 : 对每个受试者在每针次疫苗接种后 30 分钟内进行现场即时反应观察 每针剂接种后 0-28 天内, 由受试者监护人密切观察受试者不良反应 / 事件发生情况, 并自行将观察结果记录在日记卡 研究人员系统地收集和记录每针次疫苗接种后 7 天内的征集性不良 / 反应事件, 收 第 42 页 / 共 280 页

43 集和记录每针次疫苗接种后 28 天内发生的所有非征集性不良事件 严重不良事件观察 : 在首针疫苗接种后第 0 天至全部观察结束 ( 第 14 个月 ) 期间, 收集和记录所有受试者发生的所有严重不良事件 (SAE) 2.4 免疫原性和免疫持久性评价 免疫原性评价 : 从 3 个研究中心整群抽取 1200 名受试者 ( 每个中心约 400 名 ) 为免疫原性的研究对象 在第 0 天和第 56 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 分析免前抗体状况 阳转率 GMT GMI 和阳性率, 并对免前阴性人群做进一步分析 免疫持久性评价 : 在完成免疫原性观察基础上, 对免疫原性亚组受试者和免前阴性人群继续于第 1 针免疫后第 8 个月和第 14 个月分别采集血样, 进行抗 EV71 中和抗体检测, 分析阳转 / 阳性率 GMT GMI, 并观察疫苗免疫持久性 由于本次试验是以保护性为主要终点, 因此选择在观察期间发病机会较多的人群做为研究对象 ; 此外由于 EV71 感染中隐性感染比例较高, 可能会在一定程度上高估试验疫苗免疫持久性, 因此对该人群中 EV71 阳性病例和隐性感染者剔除后做进一步分析较合理 EV71 隐性感染的执行定义 : 首针免后第 8 个月和第 14 个月较第 56 天 第 14 个月较第 8 个月抗 EV71 中和抗体滴 第 43 页 / 共 280 页

44 度呈 4 倍及以上增长的受试者 审评认为, 须结合后续免疫原性结果分析进行详细说明 探索疫苗有效性免疫替代终点 : 以确诊的 EV71 阳性病例为病例组, 每个病例在发病初步确诊后按 1:5 的比例进行匹配, 组成一个探索性分析亚组, 配对条件为 :1 在首针后第 0 天 - 第 14 个月期间, 未诊断为 EV71 阳性病例的受试者 ; 如果在匹配后某对照在后继监测期间诊断为 EV71 阳性病例, 则该对照转为病例, 并从对照组中剔除 ;2 与病例年龄差距在 3 个月以内, 居住在同村或者邻村 所有最终确定的 EV71 阳性病例和对照受试者, 进行第一针疫苗接种后第 56 天抗 EV71 中和抗体滴度检测 计算各个中和抗体滴度值下的敏感度 特异度和约登指数, 当约登指数取值最大时, 相应的阈值则可能为疫苗有效性免疫替代终点 提供了灵敏度和特异度的定义 ; 约登指数的计算公式 : 灵敏度 + 特异度 对试验设计及对照组选择的考虑 : 考虑到没有可供选择的合适对照疫苗, 本研究采用与试验疫苗稀释液相同成份溶液, 即含氢氧化铝佐剂 0.5mg/ml 的安慰剂作为对照, 经对其进行包装, 使得其与试验疫苗具备相同剂型 相同外观 相同标签, 仅编号不同 2.6 适应症范围及确定依据 适应症范围 : 用于 6-35 月龄的健康人群中 EV71 感染 第 44 页 / 共 280 页

45 所致疾病的免疫预防 确定依据 : 参照现有的肠道病毒 71 型所致疾病的流行病学调查资料 既往血清流行病学研究显示,6 月龄以上的婴幼儿因母传抗体的衰减而易受到 EV71 病毒的感染 在血清抗 EV71 中和抗体方面,6 月龄至 2 岁儿童的阳性率最低 ( 低于 20%); 此后中和抗体水平阳性率随年龄增长而不断升高, 到 5 岁后血清抗 EV71 抗体阳性的比例达到一个稳定状态 (50% 左右 ), 平均 EV71 病毒的年感染率在 10-15% 左右 此外, 考虑到 EV71 所致的重症和死亡病例主要集中在 3 岁以下儿童 因此, 本研究中, 试验疫苗的目标接种人群确定为 6-35 月龄婴幼儿 审评认可 2.7 受试者入选 / 排除标准 : 受试对象来自预定观察期内 ( 第 1 针接种起 14 个月内 ) 在本 1 次临床试验地区内的 6-35 月龄的常住健康人群 排除和剔除标准基本合理 2.8 样本量及确定依据 有效性评价样本量 : 本试验采用随机双盲 安慰剂对照的优效性设计 设计参数设定如下 : a. 疫苗的保护率 μ=0.8; 考虑到脊灰病毒与 EV71 同属于肠道病毒 ;II 期临床研究结果显示,EV71 灭活疫苗的免疫原性或中和抗体水平与灭活脊灰疫苗 2 型 3 型的基本相近, 本研究参考 WHO 针对脊灰疫苗的保护效果判定标准, 预定本品预防 EV71 感染 第 45 页 / 共 280 页

46 所致疾病的有效性判定标准为, 保护率 80% b. 安慰剂组 EV71 感染所致疾病发病率 λ 0 =800/10 万 ; 根据全国和江苏全省的手足口疫情监测资料, 以及 2010 年江苏六县手足口发病流行病学调查资料, 对照组人群 EV71 感染所致疾病的发病率变化范围为 800/10 万 -2000/10 万 c. 疫苗组 EV71 感染所致疾病发病率 λ1=(1-μ)λ =0.2 (0.008)= d. 总 I 类错误 α=0.05, 把握度 1-β =0.9; f. 符合入组标准的接种者按 1:1 比例随机分配至疫苗组和安慰剂组 ; 采用 PASS11 计算得样本量每组至少 2457 例 根据 EV71 感染所致疾病的发病例数与保护率的关系, 计划入组 例, 每组 5000 例, 预计至接种后 12 个月时安慰剂组发病 40 例, 试验疫苗组发病 8 例, 合计发病 48 例, 此时保护率 (95%CI) 为 80%(57.32%, 90.63%),95%CI 下限不低于 50% 以上审评认可 免疫原性观察样本量 : 免疫原性观察的主要指标为接种疫苗后 56 天受试者血清 EV71 中和抗体阳转率 预计 EV71 传播导致隐性感染最严重的情况下, 接种安慰剂人群中出现 40% 的阳转, 而接种 EV71 疫苗人群中预计最低阳转率为 80% 根据优效性检验样本量计算公式, 假设优效性界值为 0.25, 单侧检验 α=0.025, 把握度 β=80%, 按 EV71 疫苗和安 第 46 页 / 共 280 页

47 慰剂接种人数比例为 1:1 设计, 采用 PASS 11 进行计算, EV71 疫苗组和安慰剂组样本量各为 158 人, 考虑约 20% 的脱落率, 最后确定各中心免疫原性观察样本量为 400 人, 疫苗组和安慰剂组每组各需 200 人 安全性观察样本量 : 试验人群中接种试验疫苗的受试者人数总共为 5000 人, 在该样本量下, 有 95% 以上的把握度能发现发生率为千分之一的罕见不良事件 2.9 受试者分组方法 按年龄分组 : 所有受试者分为 5 个年龄亚组, 分别为 6-11 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄, 从小到大各年龄亚组构成比为 10:10:10:6:4 表 Ⅲ-1 不同月龄亚组受试者分组情况 年龄亚组 ( 月龄 ) 样本量 ( 人 ) 试验疫苗 ( 人份 ) 安慰剂对照 ( 人份 ) 6-11 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 合计 按研究中心分组 : 本试验在江苏省设置 3 个研究现场 : 赣榆 射阳和泰兴 根据各研究中心 6-35 月龄儿童的出生率, 同时要求研究用疫苗的接种率不超过 30%, 因此, 计划赣榆 4800 人 射阳 3200 人 泰兴 2000 人 各现场入组人群的年龄亚组构成比同上 第 47 页 / 共 280 页

48 2.9.3 接种入组 : 对各研究中心 各中心所属乡镇分配相应的疫苗编号号段, 以年龄亚组分层, 按受试者入组免疫的先后顺序和分区组的序号顺序随机分配疫苗编号, 依次接种第 1 针疫苗 首剂疫苗的疫苗编号是唯一能够识别疫苗接种给同一受试者的标识 2.10 试验用疫苗 试验疫苗 : 规格为 400U/0.5ml( 铝佐剂 ), 未提供抗原含量实测结果 安慰剂对照 : 主要成分是氢氧化铝稀释液, 由申请单位生产 规格为 0U/0.5ml( 铝佐剂 ) 2.11 给药方案及确定依据 给药方案 : 每剂 0.5ml 接种途径为上臂外侧三角肌肌内注射, 免疫程序为 0,28 天 同一受试者每针次均接种相同编号的试验疫苗或安慰剂对照疫苗 确定依据 : 根据本疫苗在广西壮族自治区蒙山县及平乐县完成 Ⅰ Ⅱ 期临床研究, 结果显示肠道病毒 71 型灭活疫苗 ( 剂量范围在 100U-400U) 在 6 月龄 -49 岁健康人群中 ( 特别是 6-35 月龄婴幼儿 ) 具有良好的安全性和免疫原性 ; 6-35 月龄婴幼儿接种两针不同剂量 (100U 200U 和 400U) EV71 灭活疫苗后, 不良反应发生率与安慰剂组相当, 不良反应以轻中度为主,3 级不良反应低于 3%, 未见严重不良反应发生 400U 剂量组免疫原性效应优于 100U 和 200U 剂量 第 48 页 / 共 280 页

49 组 故 Ⅲ 期临床研究拟选择 400U 作为观察疫苗接种剂量, 采用 0,28 天两针免疫程序 3. 有效性评价 3.1 有效性评价指标 有效性评价主要指标 : 本品预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的保护率 有效性评价次要指标 : 本品预防肠道病毒 71 型感染所致手足口病 重症病例和住院病例的保护率和效果指数 本品预防肠道病毒 71 型阳性病例的保护率和效果指数 本品预防科萨奇 A16 型感染所致疾病 手足口病的保护率和效果指数 ; 本品预防萨奇 A16 型阳性病例的保护率和效果指数 本品预防其他肠道病毒感染所致疾病 手足口病和阳性病例的保护率和效果指数 本品预防手足口病样病例和手足口病住院病例的保护率和效果指数 3.2 有效性评价时间 : 有效性评价指标的观察时间范围从试验用疫苗第 1 针接种后 57 天到研究第 14 个月止, 周期为 12 个月 4. 安全性评价 4.1 安全性评价指标 第 49 页 / 共 280 页

50 4.1.1 免疫后 0-56 天征集性不良反应分析主要指标包括 : 免后征集性全身和局部不良反应发生率 ; 免后征集性全身和局部不良反应不同严重程度发生率 ; 免后征集性全身和局部反应各症状发生率 次要指标包括 : 免后非征集性不良反应发生率 ; 免后与接种无关征集性不良事件发生率 ; 免后与接种无关非征集性不良事件发生率 ; 免后与接种无关非征集性不良事件 SAE MedDRA 器官系统分类分析 评价疫苗接种后第 0 天 - 第 14 个月严重不良事件主要指标包括 : 免后第 0-56 天 SAE 发生率, 免后第 57 天 - 第 14 个月 SAE 发生率和免后第 0 天 - 第 14 个月 SAE 发生率 次要指标包括 : 免后第 0-56 天 SAE MedDRA 器官系统分类发生率 ; 免后第 57 天 - 第 14 个月 SAE MedDRA 器官系统分类发生率 4.2 安全性观察时间接种期间安全性观察 : 在每针次免疫后第 0-28 天, 由受试者监护人自行密切观察并记录受试者所有不良反应 / 事件 严重不良事件等发生情况 ; 由村医生定时入户随访, 指导受试者监护人进行安全性观察 ; 同时研究中心研究者第 7 天和第 28 天集中面访, 全面了解和记录安全性观察信息 严重不良事件观察 : 在首针接种第 0 天至 14 月内, 由 第 50 页 / 共 280 页

51 受试者监护人观察和报告受试者严重不良事件发生情况 分两个阶段进行, 第一阶段每针接种后 28 天内, 由研究中心研究者每 3 个月定期随访, 调查了解严重不良事件的发生情况, 并及时进行报告 5. 免疫原性 免疫持久性指标和观察时间 5.1 免疫原性观察指标及时间 免疫原性亚组人群评价指标主要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体阳转率 ; 次要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体 GMT GMI 和阳性率 免疫原性亚组免前阴性人群评价指标 : 同前 免疫原性评价观察时间 : 免疫原性与免疫持久性亚组于第 0 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 评价血清抗 EV71 中和抗体基线水平 第 56 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 评价免疫原性 5.2 免疫持久性观察指标及观察时间 免疫原性亚组免疫持久性评价指标 : 主要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMT; 次要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMI 和阳性率 阳转率 免疫原性亚组免前阴性人群评价指标 : 同前 免疫持久性评价观察时间 : 第 51 页 / 共 280 页

52 免疫原性亚组于第 0 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 评价血清抗 EV71 中和抗体基线水平 第 8 个月和第 14 个月检测抗 EV71 中和抗体, 评价疫苗免疫持久性 5.3 探索疫苗有效性免疫替代终点评价指标和观察时间 : 探索疫苗有效性免疫替代终点评价指标 : 主要评价指标 : 预防 EV71 感染所致疾病抗 EV71 中和抗体免疫替代终点 次要评价指标 : 预防 EV71 阳性病例抗 EV71 中和抗体免疫替代终点 探索疫苗有效性免疫替代终点研究时间 : 采集所有受试者首针疫苗接种后 56 天的血样, 置 -20 以下冻存待检 ; 首针疫苗接种后 57 天到研究第 14 个月止 ( 周期为 12 个月 ) 6. 疗效评定标准 6.1 预防效果的评定 肠道病毒病的诊断依据 : 参照卫生部 手足口病诊疗指南 (2010 版 ) 和 肠道病毒 71 型 (EV71) 感染重症病例临床救治专家共识 (2011 年版 ), 以及 WHO Guidance for the clinical management of HFMD 以及相关文献, 确定本次临床试验的肠道病毒病例诊断标准 : 表 Ⅲ-3 病例分类及临床诊断依据 分类 病例判断标准 手足口病病例 1. 手 足 口 臀等部位中 1 个部位有疹, 有些伴发热等症状 ; 第 52 页 / 共 280 页

53 疱疹性咽峡炎病例呼吸道感染病例消化道感染病例其他病例 2. 同时有颊部或咽峡部疱疹或溃疡症状者, 按手足口病病例计 ; 3. 有高热 呼吸急促 烦躁不安 惊厥 四肢发凉等症状者, 则判为重症手足口病病例 ; 4. 单纯躯干 四肢 面部等其他部位有疹者不纳入 有颊部或咽峡部疱疹或溃疡症状, 伴发热等症状, 有些伴口部疹 ( 手 足 臀等部位无疹 ); 1. 主要症状为咳嗽 流涕 咽痛 肺部痰鸣音 肺部湿罗音等 2 个呼吸道症状, 或具有 1 个呼吸道症状同时伴发热 ; 2. 同时具有呼吸道症状及消化道症状的按呼吸道感染病例计 主要症状为恶心 呕吐 腹痛 腹泻等 2 个消化道症状, 或具有 1 个消化道症状同时伴发热 单纯发热或其他不属于以上 4 类病例的情况 肠道病毒病确诊主要依据 : 表 Ⅲ-4 EV71 阳性病例确诊主要依据 临床诊断 实验室检测 病例确定 手足口病病例 至少满足以下条件之一者 : EV71 感染所致手足口病病例 疱疹性咽峡炎病例 1 肠道病毒 71 型特异性核酸 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 呼吸道感染病例 检测阳性 消化道感染病例其他病例 2 分离出肠道病毒, 并鉴定为肠道病毒 71 型 EV71 阳性其他病例 表 Ⅲ-5 CA16 阳性病例确诊主要依据 临床诊断 实验室检测 病例确定 手足口病病例 CA16 感染所致手足口病病例 疱疹性咽峡炎病例呼吸道感染病例消化道感染病例其他病例 肠道病毒 CoxA16 型特异性核 酸检测阳性 CA16 感染所致疱疹性咽峡炎病例 CA16 阳性其他病例 表 Ⅲ-6 其他肠道病毒阳性病例确诊主要依据 临床诊断 实验室检测 病例确定 手足口病病例 肠道病毒 71 型特异性核酸检 其他肠道病毒感染所致手足口病病例 疱疹性咽峡炎病例 测阴性 且肠道病毒 CoxA16 其他肠道病毒感染所致疱疹性咽峡炎病例 呼吸道感染病例 型特异性核酸检测阴性 且肠 消化道感染病例 道病毒通用特异性核酸检测阳性 其他肠道病毒阳性其他病例 其他病例 第 53 页 / 共 280 页

54 卫生部 手足口病诊疗指南 (2010 版 ) 中明确手足口病是由肠道病毒 (CoxA16 EV71 多见 ) 引起的急性传染病, 多发生于学龄前儿童, 尤以 3 岁以下年龄组发病率最高 病人和隐性感染者均为传染源, 主要通过消化道 呼吸道和密切接触等途径传播 主要症状表现为手 足 口腔等部位的斑丘疹 疱疹 少数重症病例可出现脑膜炎 脑炎 脑脊髓炎 肺水肿 循环障碍等, 多由 EV71 感染引起, 致死原因主要为脑干脑炎及神经源性肺水肿 临床确诊病例 : 具有下列之一者即可确诊 :1) 肠道病毒 (CoxA16 EV71 等 ) 特异性核酸检测阳性 ;2) 分离出肠道病毒, 并鉴定为 CoxA16 EV71 或其他可引起手足口病的肠道病毒 ;3) 急性期与恢复期血清 CoxA16 EV716 或其他可引起手足口病的肠道病毒中和抗体有 4 倍以上的升高 临床分类 : 1) 普通病例 : 手 足 口 臀部皮疹, 伴或不伴发热 2) 重症病例 : 重型 : 出现神经系统受累表现 如 : 精神差 嗜睡 易惊 谵妄 ; 头痛 呕吐 ; 肢体抖动, 肌阵挛 眼球震颤 共济失调 眼球运动障碍 ; 无力或急性弛缓性麻痹 ; 惊厥 体征可见脑膜刺激征, 腱反射减弱或消失 危重型 : 出现下列情况之一者 1 频繁抽搐 昏迷 脑疝 2 呼吸困难 紫绀 血性泡沫痰 肺部罗音等 3 休克等循 第 54 页 / 共 280 页

55 环功能不全表现 如果与其他儿童发疹性疾病和其他病毒所致脑炎或脑膜炎进行鉴别, 最终可依据病原学和血清学检测 审评认为, 自我国 2008 年将手足口病纳入法定报告丙类传染病管理以来, 手足口病的报告系统, 包括临床诊断和实验室检测已逐渐完善, 按国内的病例的诊断流程和流行病学资料信息更符合国情 ; 尽管 WHO 也提出手足口病的临床指南, 临床病例的诊断标准大部分内容与我国手足口病诊疗指南 (2010 版 ) 一致, 但还包含了手足口病外其他 EV71 感染病例, 但审评认为, 本研究和临床病例监测中, 难以确定手足口病外其他 EV71 感染病例的特异性, 即临床诊断的疱疹性咽峡炎病例 呼吸道感染病例及消化道病例, 即使有实验室确认 EV71 感染阳性证据, 也难以排除其他呼吸道病毒和肠道病毒的感染所致 本试验临床研究资料未体现鉴别措施 肠道病毒病确认本试验采用研究者初步诊断, 数据安全监查委员会 (DSMB) 作出最终确认 预防效果评价方法比较试验组和对照组之间 EV71 感染所致疾病 (EV71 感染所致手足口病 EV71 阳性病例 ) 的发病密度的差异 ; 计算疫苗预防 EV71 感染所致疾病 (EV71 感染所致手足口 第 55 页 / 共 280 页

56 病 EV71 阳性病例 ) 的保护率和效果指数 审评认为, 由临床方案 诊断流程和临床保护力的评价 方法可见, 主要有效性终点 EV71 感染所致疾病包括 EV71 感染所致手足口病和其他 EV71 阳性病例 比较试验组和对照组之间 CA16 阳性病例的发病密度的 差异 ; 计算 EV71 疫苗预防 CA16 阳性病例 ( 非 EV71 和非 CA16 阳性病例 ) 的交叉保护率和效果指数 发病密度 全程接种的发病人数全程接种者有效观察人年数 100% 按下列公式计算试验疫苗的保护率和效果指数 : 对照组发病密度 试验疫苗组发病密度保护率 (%) 100 对照组发病密度对照组发病密度效果指数 试验组发病密度 预防效果评价时涉及的肠道病毒相关病原学检测方法 中国疾病预防控制病毒病预防控制所负责病例标本的 肠道病毒特异性核酸检测和肠道病毒分离与鉴定 诊断试剂 盒采用江苏默乐生物科技有限公司生产的 EV71 CA16 及通 用型肠道病毒核酸检测试剂盒 ( 荧光 PCR 法 ), 注册证号 : 国食药监械 ( 准 ) 字 2010 第 号 申请人提供了 EV71 病毒分离试验方法标准操作程序, 审评基本认可 由于实验室检测的结果直接影响最终病例的 判定, 为保证 PCR 检测 病毒分离与鉴定结果的可靠性, 申 请人应阐明 3 个研究中心 PCR 实验室初检和国家 CDC 病毒 病所复检的具体方法和流程 ; 国家 CDC 病毒病所应按 药 第 56 页 / 共 280 页

57 物临床试验生物样本分析实验室管理指南 ( 试行 ) 要求提供检测报告 6.2 免疫原性与免疫持久性的评定 抗 EV71 中和抗体阳性标准 (1) 抗体阳性 ( 1:8) 指中和抗体滴度 1:8 为阳性 ; (2) 抗体阳性 ( 1:16) 指中和抗体滴度 1:16 为阳性 ; 抗体阳性 ( 1:32) 指中和抗体滴度 1:32 为阳性 抗 EV71 中和抗体阳转标准 (1) 抗体阳转 ( 1:8) 指免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:8 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长为阳转 ; (2) 抗体阳转率 ( 1:16) 指免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:16 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长为阳转 ;(3) 抗体阳转 ( 1:32) 指免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:32 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长为阳转 计算 EV71 中和抗体阳转率 GMT GMI 阳性率, 评价试验疫苗的免疫原性与免疫持久性 7. Ⅲ 期临床试验结果 7.1 受试者分配及完成试验情况 受试者整体分配及完成试验情况按照方案要求, 招募过程中共有 名志愿者完成知情同意, 依据入选排除标准排除 2369 名, 共 名受试者随机入组, 其中试验组 5044 例 安慰剂组 5033 例 第 57 页 / 共 280 页

58 所有 名受试者均完成第 1 针疫苗接种 ;9430 例完成第 2 针接种, 其中试验组 4719 例, 安慰剂组 4711 例 ; 有 9776 例受试者完成第 14 个月访视, 其中试验组 4897 人, 安慰剂组 4879 人 免疫原性亚组受试者 1293 例, 其中试验组 648 例, 安慰剂组 645 例 ;1291 名受试者采集免前 ( 第 0 天 ) 血清样本, 其中试验组 648 例, 安慰剂组 643 例 ;1236 名受试者完成第 56 天血清样本采集, 其中试验组 622 例, 安慰剂组 614 例 表 Ⅲ-7 受试者入组分配情况 研究终点 时间点 试验组 ( 人 ) 对照组 ( 人 ) 合计 ( 人 ) 第 0 天 有效性 第 56 天 (2 剂 ) 第 14 个月 入组 免疫原性 第 0 天 第 56 天 各分中心受试者入组分配情况 : 试验共入组 6-11 月龄 2391 例, 试验组 1195 例, 安慰剂组 1196 例 ;12-23 月龄 4969 例, 试验组 2486 例, 安慰剂组 2483 例 ;24-35 月龄 2717 例, 试验组 1363 例, 安慰剂组 1354 例, 基本符合方案设计的 1:2:1 的比例 表 Ⅲ-8 三个研究中心受试者入组分配情况 研究中心 年龄亚组 试验组 安慰剂组 小计 6-11 月龄 ( 赣榆 ) 月龄 月龄 小计 ( 射阳 ) 6-11 月龄 月龄 第 58 页 / 共 280 页

59 03( 泰兴 ) 合计 月龄 小计 月龄 月龄 月龄 小计 月龄 月龄 月龄 合计 受试者完成随访情况 受试者完成接种情况及未完成原因分析入组并完成第一针疫苗接种的受试者共 例, 其中试验组 5044 例, 安慰剂组 5033 例 第二针疫苗接种 9430 例, 其中试验组 4719 例, 安慰剂组 4711 例 未接种第二针受试者 647 例, 其中试验组 325 例 (6.44%); 安慰剂组 322 例 (6.40%) 两组未接种第 2 针比例组间差异无统计学意义 受试者未进行第 2 针接种的主要原因为主动退出 外出及不良事件退出等 原因构成两组之间差异无统计学意义 表 Ⅲ-9 受试者完成全程接种情况及未完成原因分析 试验组安慰剂组合计人数率 (%) 人数率 (%) 人数率 (%) P 值 第一针接种 第二针接种 未接种第二针 未种原因 : 主动退出 征集性不良反应 非征集性不良事件 符合第二针剔除标准 外出 其他 受试者完成监测期观察情况及未完成原因分析 第 59 页 / 共 280 页

60 10077 例入组的受试者中, 有 8 例受试者在第 56 天 5 个月 8 个月 11 个月 14 个月随访时的状态均为失访 ( 外出 / 迁居 / 死亡 ), 视为从试验中脱落, 因此进入监测期的受试者人数为 例, 试验组 5041 例, 对照组 5028 例 表 Ⅲ-10 受试者完成监测期观察情况及未完成监测期观察原因分析 试验组安慰剂组合计人数率 (%) 人数率 (%) 人数率 (%) P 值 入组 进入监测期 个月随访 个月随访 个月随访 个月随访 未进入监测期原因 : 各随访状态均失访 天内死亡 个月失访原因 : 外出计划返回 外出未归 迁居 死亡 其它 合计 个月失访原因 : 外出计划返回 外出未归 迁居 死亡 其它 合计 个月失访原因 : 外出计划返回 外出未归 迁居 死亡 其它 合计 第 60 页 / 共 280 页

61 14 个月失访原因 : 外出计划返回 外出未归 迁居 死亡 其它 合计 受试者完成 0-56 天安全性观察情况及未完成原因分析在试验 0-56 天内, 共有 10 例受试者在疫苗接种后未进行完整的接种后 28 天的安全性随访, 其中第 1 针 3 例, 第 2 针 7 例 分别为试验组 5 例, 安慰剂组 5 例 列出未完成原因是拒绝随访 外出 失访和死亡 免疫原性亚组受试者 56 天采血情况及未完成原因分析进入免疫原性亚组受试者共 1293 例, 其中试验组 648 例, 安慰剂组 645 例 1291 名受试者采集免前 ( 第 0 天 ) 血清样本 (FAS 分析集 ), 其中试验组 648 例, 安慰剂组 643 例 ; 有 1236 名受试者完成第 56 天血清样本采集, 其中试验组 622 例 列出未完成原因是拒采 外出 主动退出和采血失败等 免疫原性亚组受试者完成持久性采血情况及未完成原因分析免疫原性亚组中有 1203 例受试者完成第 8 月血清样本采集, 其中试验组 597 例, 安慰剂组 606 例 ; 有 1161 例受 第 61 页 / 共 280 页

62 试者完成第 14 月血清样本采集, 其中试验组 580 例, 安慰剂组 581 例 列出未完成原因是拒采 外出 迁居 主动退出 采血失败 无法联系 住院 死亡等 7.2 试验方案的偏离 接种第一针疫苗前偏离方案的情况在首针接种疫苗前,4 例受试者体温超过 37.0, 属于方案违背 经数据安全监查委员会审议, 全部纳入安全性 预防效果和有效性抗体探索数据集 按照临床方案入选排除标准要求, 有 20 例受试者入组时有入选排除标准未列出的疾病 / 症状或正在使用药物, 试验组 10 例, 安慰剂组 10 例 经审议, 全部纳入安全性 预防效果和有效性抗体探索数据集 受试者接种疫苗异常情况在试验实施中, 5 例受试者在接种第 2 针时出现接种差错, 均发生在安慰剂组 经审议, 全部纳入安全性 有效性抗体探索数据集和预防效果 FAS 集 揭盲后有 2 例受试者两针接种不同疫苗, 不进入预防效果的 PPS 集 受试者合并用疫苗及禁用药物情况在第 0-56 天期间, 有 117 例受试者同时接种了其他疫苗, 其中试验组 52 例, 安慰剂组 65 例 主要包括乙脑疫苗 麻腮风疫苗 麻腮疫苗 麻风疫苗 狂犬疫苗 百白破疫苗 甲肝疫苗 流脑疫苗 乙肝疫苗 破伤风疫苗 水痘疫苗 第 62 页 / 共 280 页

63 流感疫苗, 不违背方案要求, 且非第二针接种的禁忌, 纳入 FAS/PPS 在第 0-56 天期间, 有 6 例受试者在第 1 针或第 2 针后, 接种狂犬免疫球蛋白或破伤风抗毒素, 两组各 3 例, 违背方案要求 经审议, 全部纳入安全性和预防效果 FAS 集, 不纳入预防效果 PPS 和有效性抗体探索数据集 临床试验过程中发生的试验方案的偏离, 已按照专家意见进行校正, 涉及方案偏离的例数占总受试人群的 0.35% (35/10077), 免疫原性亚组中无涉及方案偏离的受试者, 因此, 本次研究方案偏离对试验结果的影响较小 7.3 受试者人口学 基线情况及可比性分析 所有受试者人口学资料描述及可比性分析 各年龄亚组受试者基本信息在不同年龄亚组, 试验组与安慰剂组年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 表 Ⅲ-11 不同年龄受试者人口统计学信息 年龄亚组 指标 试验组 安慰剂组 P 值 人数 年龄 ( 月 ) 8.73± ± 月龄 身高 (cm) 73.77± ± 体重 (kg) 10.85± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人数 年龄 ( 月 ) 17.35± ± 月龄 身高 (cm) 82.20± ± 体重 (kg) 12.75± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 月龄 人数 第 63 页 / 共 280 页

64 年龄亚组 指标 试验组 安慰剂组 P 值 年龄 ( 月 ) 28.79± ± 身高 (cm) 91.48± ± 体重 (kg) 15.16± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人数 年龄 ( 月 ) 18.40± ± 合计 身高 (cm) 82.71± ± 体重 (kg) 12.95± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 各分中心受试者基本信息 : 三个分中心受试者年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 预防效果评价受试者人口学资料描述及可比性分析 预防效果评价各年龄亚组受试者基本信息 : 不同年龄亚组预防效果受试者试验组与安慰剂组年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 预防效果评价各分中心受试者基本信息 : 三个分中心预防效果受试者年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 免疫原性评价各年龄亚组受试者基线中和抗体水平分析 : 三个分中心的 1291 名受试者, 接种疫苗前 EV71 中和抗体阳性 205 人, 阳性率为 15.88% 其中试验组 648 人, 阳性 94 人, 阳性率为 14.51%,GMT 为 1:7.34; 安慰剂组 643 人, 阳性 111 人, 阳性率为 17.26%,GMT 为 1:7.94 试验组与安慰剂组免前基线水平无差异 随着年龄增长, 中和抗体阳性率和 GMT 呈增高的趋势 第 64 页 / 共 280 页

65 表 Ⅲ-12 各年龄亚组受试者 EV71 中和抗体基线水平 年龄亚组 指标 试验组 安慰剂组 合计 P 值 观察人数 阳性人数 月龄 月龄 月龄总计 阳性率 % (95% CI) ( ) ( ) ( ) GMT (95% CI) 4.92 ( ) 5.14 ( ) 5.02 ( ) 观察人数 阳性人数 阳性率 % (95% CI) ( ) ( ) ( ) GMT (95% CI) ( ) ( ) ( ) 观察人数 阳性人数 阳性率 % (95% CI) ( ) ( ) ( ) GMT (95% CI) ( ) ( ) ( ) 观察人数 阳性人数 阳性率 % (95% CI) ( ) ( ) ( ) GMT (95% CI) 7.34 ( ) 7.94 ( ) 7.64 ( ) 依从性分析及数据集定义 预防效果评价的依从性分析及数据集 例受试者进入监测期和预防效果观察 FAS 集, 其中 9799 例受试者完成 14 个月随访, 随访率为 97.24%, 依从性良好 按方案要求有 9165 例受试者进入预防效果观察的 PPS 数据集, 列表提供了具体剔除原因, 主要是未接种第二针和 14 个月定期随访脱落等 疫苗接种依从性分析及安全性分析数据集 第 65 页 / 共 280 页

66 入选并接种第 1 针的受试者 例 ( 进入 SS 分析数据集 ), 全程接种 9430 例, 全程接种率为 93.58%; 试验组接种第 1 针疫苗 5044 例, 全程疫苗接种 4719 例, 全程接种率为 93.56%; 安慰剂组接种第 1 针疫苗 5033 例, 全程疫苗接种 4711 例, 全程接种率为 93.60%, 依从性良好 免疫原性评价依从性分析及数据集免疫原性亚组的 1293 例受试者中, 有 1291 例受试者免前血样采集率为 99.85%;1236 例受试者完成首针免后 56 天血样采集率为 95.59%; 依从性良好 有免前血清及有效检测结果的 1291 例受试者进入免疫原性分析的 FAS 集 ;1150 例受试者完成全程免疫 接种前及接种后第 56 天采血并获得有效的中和抗体检测结果, 进入 PPS, 完全符合方案免疫原性评价标准的受试者比例为 89.88% 免疫持久性评价的依从性分析及数据集免疫原性亚组中有 1203 例受试者完成第 8 个月血清样本采集, 血样采集率为 93.04%; 有 1161 例受试者完成第 14 个月血清样本采集, 血样采集率为 89.79%, 依从性良好 根据本试验主要目的是预防效果的有效性评价, 受试者中有一定数量的 EV71 阳性病例发生, 为排除病例对免疫持久性的影响, 需剔除 EV71 阳性病例, 故将免前 免后 56 天 8 个月 14 个月抗体动态变化时增加了 mpps1 数据集 ( 有 4 第 66 页 / 共 280 页

67 次采血的系列血清, 去除在监测阶段 EV71 阳性病例及隐性感染病例 ) 的分析 ; 同时设不考虑病例和隐性感染的自然人群 mpps2 数据集 ( 免疫原性 PPS 且有 4 次系列血清的受试者 ) 血清抗体动态变化 表 Ⅲ-13 免疫持久性数据集 mpps1 mpps2 试验组安慰剂组合计 试验组安慰剂组合计 进入人数 剔除人数 剔除原因 : 免前采血失败 未接种第二针 无 56 天有效血清 天较免前抗体下降 4 倍及以上 无 8 或 14 个月有效血清 EV71 阳性病例 月较 56 天抗体 4 倍及以上增长 月较 56 天抗体 4 倍及以上增长 月较 8 月抗体 4 倍及以上增长 合并用药结果及分析 合并用药物情况分析 : 在 名受试者每针免后 0-28 天内, 有 6216 人合并使用药物 例次 主要是解热镇痛抗风湿和抗生素类, 试验组与安慰剂组合并用药种类和使用率差异无统计学意义 合并用疫苗情况分析 : 在 名受试者每针免后 0-28 天内, 有 121 人合并使用疫苗 173 例次 主要是常规计划免疫类疫苗, 两组合并用疫苗类和使用率差异无统计学意义 7.6 有效性分析 肠道病毒病病例发现及确定情况 第 67 页 / 共 280 页

68 临床试验现场在首针接种后第 57 天至观察截止日 ( 首针免后 14 月 ) 进行肠道病毒病病例的主动监测, 根据筛查对象的临床表现进行分类, 初步判定为手足口样病例 疱疹性咽峡炎病例 呼吸道症状病例 消化道症状病例以及其他病例 由研究分中心肠道病毒病病原学检测实验室对采集筛查对象的咽拭子和肛拭子进行肠道病毒 71 型 (EV71) 柯萨奇肠道病毒 A 组 16 型 (CA16) 和肠道病毒通用 (EV-G) 特异性核酸检测 ; 研究者将初步诊断为肠道病毒病病例 ( 含可疑肠道病毒病例 ) 临床资料 实验室检测资料和流行病学个案调查资料送交 DSMB 审查, 最终确认 : 本次临床在观察期间共发现 EV71 阳性病例 119 例 CA16 型阳性病例 1113 例以及其他肠道病毒阳性病例 1677 例 全程接种纳入 PPS 的受试者共报告 EV71 阳性病例 114 例, 试验组 13 例, 其中 EV71 感染所致手足口病例 5 例 EV71 感染所致呼吸道感染病例 6 例 EV71 感染所致消化道感染病例 1 例和 EV71 感染所致其他病例 1 例 ; 安慰剂组报告 101 例, 其中 EV71 感染所致手足口病例 87 例 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 3 例 EV71 感染所致呼吸道感染病例 8 例 EV71 感染所致消化道感染病例 2 例和 EV71 感染所致其他病例 1 例 在试验组 EV71 阳性病例中, 肠道病毒 71 型分离阳性 7 第 68 页 / 共 280 页

69 例, 肠道病毒 71 型分离阳性数占 EV71 阳性病例总数的 53.85%; 其他肠道病毒分离阳性 2 例,EV71 阳性病例混合其他肠道病毒占 EV71 阳性病例总数的 15.38% 在安慰剂组 EV71 阳性病例中, 肠道病毒 71 型分离阳性 86 例, 肠道病毒 71 型分离阳性数占 EV71 阳性病例总数的 85.15%; 其他肠道病毒分离阳性 10 例,EV71 阳性病例混合其他肠道病毒占 EV71 阳性病例总数的 9.90% 表 Ⅲ-14 受试者肠道病毒病确认情况 (EV71 阳性病例 ) FAS 集 PPS 集 临床诊断 试验组例数 安慰剂组例数 试验组例数 安慰剂组例数 ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) 受试者例数 5041 例 5028 例 4587 例 4578 例 手足口病 (0.10) (1.79) (0.11) (1.90) 疱疹性咽峡炎 (0.00) (0.08) (0.00) (0.07) 呼吸道感染 (0.12) (0.18) (0.13) (0.17) 消化道感染 (0.02) (0.02) (0.02) (0.04) 其他 (0.02) (0.02) (0.02) (0.02) 合计 (0.26) (2.11) (0.28) (2.21) 审评经核实, 临床报告中 EV71 阳性病例汇总结果与统计报告一致 数据来源于总结报告表 和表 全程接种纳入 PPS 的受试者共报告的 CA16 阳性病例 1049 例中, 试验组报告了 518 例, 其中 CA16 感染所致手足口病例 248 例 CA16 感染所致疱疹性咽峡炎病例 39 例 CA16 感染所致呼吸道感染病例 177 例 CA16 感染所致消化道感 第 69 页 / 共 280 页

70 染病例 8 例和 CA161 感染所致其他病例 71 例 ; 安慰剂组报告了 531 例, 其中 CA16 感染所致手足口病例 258 例 CA16 感染所致疱疹性咽峡炎病例 35 例 CA16 感染所致呼吸道感染病例 168 例 CA16 感染所致消化道感染病例 7 例和 CA16 感染所致其他病例 82 例 审评经核对 CA16 阳性病例 其他肠道病毒阳性病例 肠道病毒阴性病例汇总结果中合计病例数,Ⅲ 期临床总结报告 FAS 集表 和 PPS 集表 与统计报告表 一致, 但与各系统 ( 手足口 疱疹性咽峡炎 呼吸道 消化道 其它 ) 病例数之和不符 括弧内红色数字为各系统病例数相加所得 统计报告中阳性病例各系统的例次之和与合计例次相符, 而例数却核对有差别, 统计报告中注释 不同诊断按手足口 疱疹性咽峡炎 呼吸道 消化道 其它阳性病例的优先顺序计最优先的 考虑到某一阳性病例可以同时出现多系统症状, 但未提供 CA16 阳性病例同时出现多种合并其他感染的清单, 无法核实病例数 须补充提供 ( 包括其他肠道病毒阳性病例 肠道病毒阴性病例 ) 详细列表 表 Ⅲ-15 受试者肠道病毒病确认情况 (CA16 阳性病例 ) 临床诊断 FAS 集 PPS 集试验组例数安慰剂组例数试验组例数安慰剂组例数 ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) 受试者例数 5041 例 5028 例 4587 例 4578 例 手足口病 (5.14) (5.43) (5.41) (5.64%) 第 70 页 / 共 280 页

71 疱疹性咽峡炎 42 (0.83) 35 (0.70) 39 (0.85) 35 (0.76%) 呼吸道感染 188 (3.73) 180 (3.58) 177 (3.86) 168 (3.67%) 消化道感染 11 (0.22) 8 (0.16) 8 (0.17) 7 (0.15%) 其他 78 (1.55) 84 (1.67) 71 (1.55) 82 (1.79%) 552(578) 561(580) 518(543) 531(550) 合计 (10.95)(11.47) ( ) ( ) ( 11.60% ) (11.54) (11.84) (12.01) 全程接种纳入 PPS 的受试者共报告其他肠道病毒阳性病例 1576 例, 试验组报告了 785 例, 其中其他肠道病毒感染所致手足口病例 222 例 其他肠道病毒感染所致疱疹性咽峡炎病例 36 例 其他肠道病毒感染所致呼吸道感染病例 401 例 其他肠道病毒感染所致消化道感染病例 30 例和其他肠道病毒感染所致其他病例 148 例 ; 安慰剂组报告了 791 例, 其中其他肠道病毒感染所致手足口病例 252 例 其他肠道病毒感染所致疱疹性咽峡炎病例 46 例 其他肠道病毒感染所致呼吸道感染病例 373 例 其他肠道病毒感染所致消化道感染病例 24 例和其他肠道病毒感染所致其他病例 146 例 表 Ⅲ-16 受试者肠道病毒病确认情况 ( 其他肠道病毒阳性病例 ) FAS 集 PPS 集 临床诊断 试验组例数 安慰剂组例数 试验组例数 安慰剂组例数 ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) 受试者例数 5041 例 5028 例 4587 例 4578 例 手足口病 (4.72) (5.31) (4.84) (5.50) 疱疹性咽峡炎 (0.77) (0.97) (0.78) (1.00) 呼吸道感染 (8.45) (7.92) (8.74) (8.15) 消化道感染 第 71 页 / 共 280 页

72 (0.60) (0.48) (0.65) (0.52) 其他 (3.17) (3.03) (3.23) (3.19) 合计 837(893) 840(890) 785(837) 791(841) (16.60))(17.71) (16.71)(17.70) (17.11)(18.25) (17.28)(18.37) 表 Ⅲ-17 受试者肠道病毒病确认情况 ( 肠道病毒阴性病例 ) FAS 集 PPS 集 临床诊断 试验组例数 安慰剂组例数 试验组例数 安慰剂组例数 ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) ( 发生率,%) 受试者例数 5041 例 5028 例 4587 例 4578 例 手足口病 (1.69) (1.83) (1.79) (1.92) 疱疹性咽峡炎 (3.55) (4.00) (3.42) (4.06) 呼吸道感染 (41.20) (41.77) (42.01) (42.29) 消化道感染 (7.95) (7.40) (8.33) (7.67) 其他 (29.99) (30.95) (30.32) (31.52) 合计 3071(4254) 3129(4321) 2840(3939) 2892(4004) (60.92)(84.39) (62.23)(85.94) (61.69)(85.87) (63.17)(87.46) 表 Ⅲ-18EV71 阳性病例实验室检测情况 (FAS) 试验组 (5041 例 ) 安慰剂组 (5028 例 ) 肠道病毒 71 肠道病 混合感染 肠道病毒 71 肠道病毒 混合感染 临床诊断 型特异性核 毒 71 型 非肠道病 型特异性核 71 型分 非肠道病 酸 PCR 阳性人数 分离阳性人数 毒 71 型阳性人数 酸 PCR 阳性人数 离阳性人数 毒 71 型阳性人数 手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染病 例 消化道感染病 例 其他病例 合计 表 Ⅲ-19 EV71 阳性病例实验室检测情况 (PPS) 临床诊断 试验组 (4587 例 ) 安慰剂组 (4578 例 ) 肠道病毒 71 肠道病毒 混合感染 肠道病毒 肠道病毒 型特异性核 71 型分离 非肠道病 71 型特异 71 型分离 酸 PCR 阳性 阳性人数 毒 71 型阳 性核酸 PCR 阳性人数 第 72 页 / 共 280 页 混合感染 非肠道病 毒 71 型阳

73 人数 性人数 阳性人数 性人数 手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染病 例 消化道感染病 例 其他病例 合计 表 Ⅲ-20EV71 阳性病例混合感染情况 FAS PPS 安慰剂安慰剂试验组试验组病例分类病原学检测组组 (5041 合计 (4587 (5028 (4578 例 ) 例 ) 例 ) 例 ) 合计 EV71 阳性 EV71+CA2 阳性 EV71+CA6 阳性 手足口病 EV71+CA14 阳性 EV71+CA16 阳性 EV71+ECHO19 阳 性 EV71 阳性 疱疹性咽峡炎 EV71+ECHO19 阳性 EV71 阳性 呼吸道感染病 EV71+CA6 阳性 例 EV71+CB3 阳性 肠道感染病例 EV71 阳性 其他阳性病例 EV71 阳性 EV71 阳性 EV71+CA2 阳性 EV71+CA6 阳性 EV71+CA14 阳性 病例合计 EV71+CA16 阳性 EV71+ECHO19 阳 性 EV71+CB3 阳性 合计 表 Ⅲ-21 EV71 重症病例和住院病例混合感染情况 临床诊断 病原学诊断 FAS PPS 试验组 安慰剂 合计 试验组 安慰剂 合计 第 73 页 / 共 280 页

74 (5041 例 ) 组 (5028 例 ) (4587 例 ) 组 (4578 例 ) 重症手足口病 EV71 阳性 EV71+CA16 阳性 合计 住院手足口病 EV71 阳性 EV71+CA2 阳性 EV71+CA14 阳性 EV71+CA16 阳性 EV71+ECHO19 阳 性 合计 审评认为, 实验室检测 EV71 阳性病例不完全等同于 EV71 感染所致的疾病, 尤其对于呼吸道感染病例和肠道感染病例如何判断其发病与 EV71 感染关系的特异性, 因为呼吸道和肠道感染涉及多种病原体, 如何确定主要致病的病原体是个难题, 须申请人说明确定此类病例采用的原则 以上数据显示本品在江苏省临床现场 EV71 所致手足口病占所有手足口病的 8.68%(EV71 共 92 例 / 所有 1072 例 ), 昆明所的同类疫苗 (CXSS ) 在广西临床现场 EV71 所致手足口病占所有手足口病的 26.31%(EV71 共 152 例 / 所有 578 例 ), 提示我国各省 EV71 CA16 及其他肠道病毒流行所致手足口病的构成比例相差很大, 其疫苗对 EV71 所致手足口病的保护效果相差将会更大 须申请人提供同期和近 5 年江苏省和临床试验现场进行手足口病监测的详细资料 本品预防 EV71 感染所致疾病保护效果分析 第 74 页 / 共 280 页

75 总体预防 EV71 感染所致疾病保护率和效果指数 (PPS 人群 ) 申请人将 EV71 感染所致手足口病和 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎归纳为总体预防 EV71 感染所致疾病 受试者首针接种后 57 天至 14 月内, 试验组全程接种的 4587 人中, 共出现 EV71 感染所致疾病病例 5 例 ( 发病密度为 0.110/ 百人年 ); 安慰剂组全程接种的 4578 人中, 共出现 EV71 感染所致疾病病例 90 例 ( 发病密度为 2.002/ 百人年 ); 两组间发病密度差别有统计学意义 本品预防 EV71 感染所致疾病保护率为 94.5%(95%CI 为 86.5%-97.8%), 效果指数为 (95%CI 为 ) 审评认为, 依据前述表 Ⅲ-14 受试者肠道病毒病确认情况 (EV71 阳性病例 ) 中的结果, 本试验 PPS 集 : 对于 EV71 感染所致所有疾病, 试验组发病 13 例, 安慰剂组发病 101 例, 合计发病 114 例 ; 按照本品临床方案 (PRO-EV , 终版 2011 年 12 月 19 日,1.0 版 ) 事先设计的试验主要目的 ( 评价本品在 6-35 月龄健康人群中预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的有效性 ), 及有效性评价的规定和病例诊断流程的要求 ( 监测发现 EV71 感染疾病患者, 应采集咽拭子和肛拭子, 进行 EV-G EV71 CA16 核酸监测和 / 或病毒分离, EV71 特异性核酸阳性或病毒分离呈阳性者可以确诊为 EV71 感染所致疾病 ), 因此, 审评认为, 按照临床方案中的事先 第 75 页 / 共 280 页

76 试验假设和病例确诊流程, 本品总体预防 EV71 感染所致疾病的结果应该是本报告中 本品预防 EV71 阳性病例保护效果分析的结果, 即将 EV71 感染所致手足口病病例 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 EV71 感染所致呼吸道感染病例 EV71 感染所致消化道感染病例和 EV71 感染所致其他病例归纳为 EV71 阳性病例, 故本品总体预防 EV71 感染所致疾病保护率应为 87.3%(95%CI 为 77.4%-92.9%), 保护效果指数为 7.90(95%CI 为 ) 建议咨询专家 不同年龄亚组本品预防 EV71 感染所致疾病的保护效果 在 6-11 月龄亚组 月龄亚组 月龄亚组中, 本品预防 EV71 感染所致疾病的保护效果详见下表 表 Ⅲ-22 本品预防 EV71 感染所致疾病的保护效果 发病密 研究分层 分组 观察人数 人数 年 发数 病 度 (/ 百人 保护率 (%) (95%CI) 效果指数 (95%CI) P 值 年 ) 总人群 试验组安慰剂组 ( ) ( ) < 月龄 试验组安慰剂组 ( ) ( ) 月龄 试验组安慰剂组 ( ) ( ) < 月龄 试验组安慰剂组 < 第 76 页 / 共 280 页

77 不同随访时间本品预防 EV71 感染所致疾病的保护效果本品预防 EV71 感染所致疾病在随访 3 个月 6 个月 9 个月和观察的前 12 个月内的的保护效果, 详见下表 表 Ⅲ-23 不同随访时间本品预防 EV71 感染所致疾病保护效果 随访时间 0-3 个月 0-6 个月 0-9 个月 0-12 个月 发病密观察人发病度保护率 (%) 分组人年数数数 (/ 百人 (95%CI) 年 ) 效果指数 (95%CI) 试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组 P 值 < < < < 本品预防 EV71 感染所致手足口病保护效果分析 总体本品预防 EV71 感染所致手足口病保护效果情况 (PPS 人群 ) 在 9165 名完成全程接种的受试者中, 预防效果观察期间共观察人年数为 , 发现到 EV71 感染所致手足口病 92 例, 其中试验组 5 例, 发病密度为 0.110/ 百人年 ; 安慰剂组 87 例, 发病密度为 1.936/ 百人年 ; 试验组与安慰剂组间发病密度差异有显著性意义 本品对 EV71 感染所致手足口病保护率为 94.3%(95%CI 为 86.1%-97.7%), 效果指数为 第 77 页 / 共 280 页

78 (95%CI 为 ) 审评认为, 本试验现场根据全国和江苏全省近年的手足口疫情监测资料, 范围为 800/10 万 -2000/10 万, 并非是 EV71 感染所致所有疾病的发病率 据此估算得样本量每组至少 2457 例 ; 推测 EV71 感染所致疾病的发病例数与保护率关系计划入组 例, 每组 5000 例, 预计至接种后 12 个月时安慰剂组发病 40 例, 试验疫苗组发病 8 例, 合计发病 48 例 ; 本试验 PPS 集结果 : 对于 EV71 感染所致所有疾病, 安慰剂组发病 101 例, 试验疫苗组发病 13 例, 合计发病 114 例 ; 而对于 EV71 感染所致手足口病, 安慰剂组发病 87 例, 试验疫苗组发病 5 例, 合计发病 92 例, 是否也可认为达到了试验假设的要求 ; 建议咨询专家 不同年龄亚组本品预防 EV71 感染所致手足口病保护效果分析在完成全程接种的 2130 名 6-11 月龄受试者中,12 个月内观察人年数为 , 监测到 EV71 感染所致手足口病 18 例, 其中试验组 3 例, 发病密度为 0.279/ 百人年 ; 安慰剂组 15 例, 发病密度为 1.445/ 百人年 本疫苗对 EV71 感染所致手足口病保护率为 80.7%(95%CI 为 33.3%-94.4%), 效果指数为 5.18(95%CI 为 ) 本品预防此年龄段的保护效力偏低, 建议咨询专家 在 4545 名 月龄受试者中,12 个月内本疫苗对 EV71 第 78 页 / 共 280 页

79 感染所致手足口病保护率为 96.5%(95%CI 为 85.6%-99.1%), 保护效果指数为 28.54(95%CI 为 ) 在 2490 名 月龄受试者中,12 个月内本疫苗对 EV71 感染所致手足口病保护率为 100% 两组间差异均有统计学显著性意义 表 Ⅲ-24 本品对 EV71 感染所致手足口病保护效果 研究分层总人群 6-11 月龄 月龄 月龄 发病密观察人人年发病度分组数数数 (/ 百人年 ) 保护率 (%) 效果指数 (95%CI) (95%CI) 试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 组 P 值 < < < 不同监测时间本品预防 EV71 感染所致手足口病保护效果分析本品预防 EV71 感染所致疾病在随访 3 个月 6 个月 9 个月和观察的前 12 个月内的保护结果, 基本维持在 94.3% ( ) 以上, 详见下表 表 Ⅲ-25 不同随访时间内本品对 EV71 感染所致手足口病保护效果 随访时间 0-3 个月 分组 发病密发观察人人年度保护率 (%) 效果指数病数数 (/ 百人 (95%CI) (95%CI) 数年 ) P 值 试验组 < 安慰剂组 ( ) ( ) 第 79 页 / 共 280 页

80 0-6 个月 0-9 个月 0-12 个月 试验组 < 安慰剂组 ( ) ( ) 试验组 < 安慰剂组 ( ) ( ) 试验组 < 安慰剂组 ( ) ( ) 本品预防 EV71 阳性病例保护效果分析本试验将 EV71 感染所致手足口病病例 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 EV71 感染所致呼吸道感染病例 EV71 感染所致消化道感染病例和 EV71 感染所致其他病例归纳为 EV71 阳性病例 总体本品预防 EV71 阳性病例保护效果情况在完成全程接种的 9165 名受试者中,12 个月内的观察人年数为 , 监测到 EV71 阳性所有病例 114 例, 其中试验组 13 例, 发病密度为 0.285/ 百人年 ; 安慰剂组 101 例, 发病密度为 2.247/ 百人年 试验组与安慰剂组发病密度差异有显著性意义 本品对 EV71 阳性所有病例保护率为 87.3% (95%CI 为 77.4%-92.9%), 保护效果指数为 7.90(95%CI 为 ) 审评认为, 此为按临床方案中事先规定的总体预防 EV71 感染所致疾病的结果 不同年龄亚组本品预防 EV71 阳性病例保护效果情况在 6-11 月龄亚组,2130 名受试者 12 个月内观察人年数为 , 监测到 EV71 阳性所有病例 23 例, 其中试验组 5 例, 发病密度为 0.465/ 百人年 ; 安慰剂组 18 例, 发病密度为 第 80 页 / 共 280 页

81 1.734/ 百人年 试验组与安慰剂组发病密度差异有显著性意义 本品对 EV71 阳性所有病例保护率为 73.2%(95%CI 为 27.8%-90.0%), 保护效果指数为 3.73(95%CI 为 ) 月龄亚组 月龄亚组中, 本品预防 EV71 感染所致疾病的保护效果详见下表 表 Ⅲ-26 本品对 EV71 阳性所有病例保护效果 研究分层总人群 6-11 月龄 月龄 月龄 发病密 分组 观察人度保护率 (%) 效果指数人年数发病数数 (/ 百人 (95%CI) (95%CI) 年 ) 试验组 安慰剂 组 ( ) ( ) 试验组 安慰剂 组 ( ) ( ) 试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组 P 值 < < 不同监测时间点本品预防 EV71 阳性病例保护效果情况本品预防 EV71 感染所致疾病在随访 3 个月 6 个月 9 个月和观察的前 12 个月内的保护结果, 基本维持在 87.3% ( ) 以上, 详见下表 表 Ⅲ-27 不同随访时间内本品对 EV71 阳性所有病例保护效果 随访时间 分组 观察人 数 人年 数 发 病 数 发病密度 (/ 百人年 ) 保护率 (%) (95%CI) 效果指数 (95%CI) P 值 第 81 页 / 共 280 页

82 0-3 个月 0-6 个月 0-9 个月 0-12 个月 试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组试验组 安慰剂 ( ) ( ) 组 < < < < 本品预防重症 EV71 感染所致疾病保护效果分析安慰剂组全程接种受试者共监测到重症 EV71 感染所致疾病病例 8 例, 全部为 EV71 感染所致手足口病例, 其中有 1 例为 EV71 与 CA16 混合感染, 占其 EV71 感染所致疾病例数的 8.89%(8/90, 应是 7.01%,8/114);8 例重症病例中, 6-11 月龄 月和 月龄亚组分别发生 1 例 6 例 1 例, 试验组未监测到重症 EV71 感染所致疾病病例 安慰剂组重症 EV71 感染所致疾病的发病密度为 0.178/ 百人年 ; 试验组的发病密度为 0.000/ 百人年 ; 两组间发病密度差别有统计学意义 本品预防重症 EV71 感染所致疾病保护率为 100.0%(95%CI 为 42.4%-100.0%) 建议咨询专家 表 Ⅲ-28 本品预防重症 EV71 感染所致疾病保护效果 发病密度保护率 (%) 效果指数分组观察人数人年数发病数 P 值 (/ 百人年 ) (95%CI) (95%CI) 试验组 安慰剂组 ( ) 本品预防 EV71 感染所致疾病住院病例保护效果分析全程接种受试者共监测到 EV71 感染所致疾病住院病例 第 82 页 / 共 280 页

83 23 例, 全部为 EV71 感染所致手足口病例, 均为安慰剂组, 占其 EV71 感染所致疾病病例数的 25.56%(23/90, 应为应是 20.2%,8/114); 试验组未监测到住院 EV71 感染所致疾病病例 安慰剂组住院 EV71 感染所致疾病的发病密度为 0.512/ 百人年 ; 试验组的发病密度为 0.000/ 百人年 ; 两组间发病密度差别有统计学意义 EV71 疫苗预防住院 EV71 感染所致疾病保护率为 100.0%(95%CI 为 82.9%-100.0%) 表 Ⅲ-29 本品预防住院 EV71 感染所致疾病保护效果 发病密度保护率 (%) 效果指数分组观察人数人年数发病数 P 值 (/ 百人年 ) (95%CI) (95%CI) 试验组 < 安慰剂组 ( ) EV71 阳性病例病程在 95 例 EV71 感染所致疾病病例中, 试验组病例发病后病程为 天, 平均为 9.40 天, 安慰剂组病例发病后病程为 天, 平均为 天 试验组与安慰剂组 EV71 感染所致疾病病程天数的差异无统计学意义 在 92 例 EV71 感染所致手足口病病例和 114 例 EV71 阳性病例中, 试验组与安慰剂组 EV71 感染所致手足口病发病后平均病程差异无统计学意义 阳性病例平均排毒持续时间在 95 例 EV71 感染所致疾病的病例中, 试验组病例发病后排毒时间为 天, 平均为 7.00 天, 安慰剂组病例 第 83 页 / 共 280 页

84 发病后排毒时间为 天, 平均为 天 两组 EV71 感染所致疾病发病后排毒时间的差异无统计学意义 在 92 例 EV71 感染所致手足口病病例和 114 例 EV71 阳性病例中, 试验组与安慰剂组 EV71 感染所致手足口病发病后排毒时间的差异无统计学意义 预防 EV71 感染所致疾病 /EV71 阳性病例效果多因素分析应用 COX 模型进行影响 EV71 感染所致疾病和影响 EV71 阳性病例的多因素 COX 回归分析, 纳入的因素包括试验疫苗分组 性别 年龄亚组 研究中心 影响 EV71 感染所致疾病的多因素分析结果显示,EV71 感染所致疾病的发生与试验疫苗分组 研究中心和年龄亚组等因素有相关性, 与性别无相关性 本品预防 CA16 阳性病例保护效果本研究将 CA16 感染所致手足口病和 CA16 感染所致疱疹性咽峡炎归纳为 CA16 感染所致疾病 受试者首针接种后第 57 天至 14 月内, 试验组全程接种的 4587 人中, 共监测到 CA16 感染所致疾病病例 292 例 ( 发病密度为 6.392/ 百人年 ); 安慰剂组全程接种的 4578 人中, 共监测到 CA16 感染所致疾病病例 306 例 ( 发病密度为 6.808/ 百人年 ); 两组间发病密度差别无统计学意义 EV71 疫苗预防 CA16 感染所致疾病保护率为 6.1%(95%CI 为 -10.2%-20.0%), 效果指数为 第 84 页 / 共 280 页

85 1.07(95%CI 为 ), 本疫苗对 CA16 感染所致疾病无预防保护作用 审评认为, 由于临床报告中 CA16 阳性病例 其他肠道病毒阳性病例 肠道病毒阴性病例汇总结果中合计病例数不吻合 ( 见表 Ⅲ15-17); 同时统计报告显示, 以发病率和以发病密度计算保护率时病例数不同, 建议进一步核实 考虑到此部分数据不影响试验的主要终点, 故不再书面发补 在不同年龄亚组和不同研究中心中, 试验组和安慰剂组间 EV71 疫苗预防 CA16 感染所致疾病发病密度差别均无统计学意义, 本疫苗对 CA16 感染所致疾病无预防保护作用 同样, 本疫苗对 CA16 感染所致手足口病和预防 CA16 阳性病例无预防保护作用 本品预防其他肠道病毒阳性病例保护效果本试验将其他肠道病毒感染所致手足口病病例 其他肠道病毒感染所致疱疹性咽峡炎病例归纳为其他肠道病毒感染所致疾病 受试者首针接种后 57 天至 14 月内, 试验组全程接种的 4587 人中, 共监测到其他肠道病毒感染所致疾病病例 263 例 ( 发病密度为 5.757/ 百人年 ); 安慰剂组全程接种的 4578 人中, 共监测到其他肠道病毒感染所致疾病病例 310 例 ( 发病密度为 6.897/ 百人年 ); 两组间发病密度差别有统计学意义 本品预防其他肠道病毒感染所致疾病保护率为 16.5% 第 85 页 / 共 280 页

86 (95%CI 为 1.6%-29.2%), 效果指数为 1.20(95%CI 为 ) 同样, 本疫苗对预防其他肠道病毒感染所致手足口病保护率为 15.4%(95%CI 为 -1.0%-29.2%), 效果指数为 1.18 (95%CI 为 ) 若将其他肠道病毒感染所致手足口病病例 其他肠道病毒感染所致疱疹性咽峡炎病例 其他肠道病毒感染所致呼吸道感染病例 其他肠道病毒感染所致消化道感染病例和其他肠道病毒感染所致其他病例归纳为其他肠道病毒阳性病例 本品预防其他肠道病毒阳性病例保护率为 3.3%(95%CI 为 -6.2%-11.9%), 效果指数为 1.03(95%CI 为 ), 本品对其他肠道病毒阳性病例无预防保护作用 不同年龄亚组和不同研究中心中, 试验组和安慰剂组间 EV71 疫苗预防其他肠道病毒阳性病例发病密度差别均无统计学意义 本品预防手足口样病例的保护效果受试者首针接种后第 57 天至 14 月内, 试验组全程接种的 4587 人中, 共监测到手足口样病例 578 例 ( 发病密度为 / 百人年 ); 安慰剂组全程接种的 4578 人中, 共监测到手足口样病例 720 例 ( 发病密度为 / 百人年 ); 两组间发病密度差别有统计学意义 EV71 疫苗预防手足口样病例保护率为 21.0%(95%CI 为 11.9%-29.2%), 效果指数为 第 86 页 / 共 280 页

87 1.27(95%CI 为 ) 本品预防手足口病住院病例保护效果分析受试者首针接种后第 57 天至 14 月内, 试验组全程接种的 4587 人中, 共监测到手足口病住院病例 11 例 ( 发病密度为 0.241/ 百人年 ); 安慰剂组全程接种的 4578 人中, 共监测到手足口病住院病例 39 例 ( 发病密度为 0.868/ 百人年 ); 两组间发病密度差别有统计学意义 EV71 疫苗预防手足口病住院病例保护率为 72.3%(95%CI 为 45.8%-85.8%), 效果指数为 2.68(95%CI 为 ) 审评认为, 为进一步确认本品临床保护力结果, 建议补充汇总和提供发生 EV71 感染所致手足口病和相关疾病的所有确诊病例, 除基本信息外, 还包括免疫接种时间 剂次 临床诊断确诊时间 所有实验室结果 ( 包括抗体 基因测序 不同类型标本检测结果 重复感染和再次感染等 ) 等 主要体现 EV71 阳性 / 阴性的所有手足口病 ( 包括 CA16 阳性 ) 和相关疾病的汇总信息 ( 两组 ); 具体包括所有中和抗体基线情况 接种研究疫苗 ( 免前 / 后 ) 抗体变化 发病期抗体变化 (4 倍升高 降低和维持不变 ) 伴随 IgM 水平变化等 本 Ⅲ 期临床保护效力试验中未总结接种本品 2 剂不同时间间隔及只接种 1 剂亚组的有效性结果, 建议提供 7.7 安全性分析 全部受试者接种疫苗后不良事件发生率 第 87 页 / 共 280 页

88 10077 名受试者接种疫苗后第 0-56 天内, 共观察到总体不良事件 7865 例, 发生率为 78.05%, 其中试验组不良事件 3894 例, 发生率为 77.20%; 安慰剂组不良事件 3971 例, 发生率为 78.90%; 试验组和安慰剂组间总体不良事件发生率差异有统计学意义 (P=0.041), 安慰剂组发生率略高于试验组 试验组发生与接种有关的总体不良事件 ( 总体不良反应 )2608 例, 发生率为 51.70%; 安慰剂组总体不良反应 2656 例, 发生率为 52.77%; 其中试验组与接种有关征集性不良反应发生率为 51.41%, 安慰剂组为 52.43%, 两组间差异无统计学意义 试验组非征集不良反应发生率为 0.85%, 安慰剂组为 0.83%, 两组间差异均无统计学意义 全部受试者征集性局部不良反应发生情况观察期间试验组发生的征集性局部不良反应 700 例, 发生率为 13.88%; 安慰剂组发生 684 例, 发生率为 13.59% 组间差异无统计学意义 以 1 级不良反应为主, 占 87.36% (1209/1384),3 级不良反应占 0.36%(5/1384), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 12.07% 1.80% 0.00% 和 11.92% 1.57% 0.10% 两组间各级不良反应分布差异无统计学意义 局部不良反应中以红斑 硬结 触痛多见, 其余症状 ( 肿胀和瘙痒 ) 的发生率均低于 5%, 组间局部症状发生率差别均无统计学意义 常见局部红斑, 试验组发生率为 6.70%, 第 88 页 / 共 280 页

89 安慰剂组 6.74%, 其中以 1 级为主, 占 87.74%(594/677), 3 级占 0.15%(1/677), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 5.87% 0.83% 0.00% 和 5.92% 0.79% 0.02% 局部硬结不以 1 级为主, 占 94.67%(551/582),3 级占 0.17%(1/582), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 5.35% 0.26% 0.00% 和 5.58% 0.34% 0.02% 局部触痛以 1 级为主, 占 86.03%(468/544),3 级不良反应占 0.55%(3/544), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 4.60% 0.87% 0.00% 和 4.69% 0.58% 0.06% 组间各级不良反应差异均无统计学意义 受试者接种疫苗后征集性全身不良事件发生情况 受试者征集性全身不良反应发生情况观察期间有 4640 例 (8842 例次 ) 征集性全身不良事件判定与接种有关 ( 征集性全身不良反应 ) 试验组发生应 2298 例, 发生率为 45.56%; 安慰剂组发生 342 例, 发生率为 46.53% 以 1 级和 2 级不良反应为主, 分别占总数的 53.92% (2502/4640) 和 39.55%(1835/4640),3 级不良反应占 6.53% (303/4640), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 24.21% 18.38% 2.97% 和 25.45% 18.04% 3.04% 两组间征集性全身不良 第 89 页 / 共 280 页

90 反应和组间各级不良反应分布的差异均无统计学意义 在征集性全身不良反应中, 以发热 腹泻 食欲下降 恶心呕吐 烦躁多见, 其余症状 ( 疲倦乏力 变态反应 ) 的发生率均低于 5% 组间各个全身症状发生率差异均无统计学意义 征集性全身不良反应以发热反应最为常见 试验组为 34.69%, 安慰剂组 35.09%, 发热以 1 级和 2 级反应为主 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 16.95% 15.09% 2.66% 和 17.88% 14.78% 2.42% 试验组腹泻发生率为 12.63%, 安慰剂为 12.40%, 以 1 级反应为主, 试验组和对照组分别占 74.88%(477/637) 和 77.08% (481/624) 试验组食欲下降发生率为 8.39%, 安慰剂组为 8.58%, 以 1 级反应为主, 试验组和对照组分别占 87.00% (368/423) 84.95%(367/432), 其 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 7.30% 1.01% 0.08% 和 7.29% 1.17% 0.12% 试验组恶心呕吐发生率为 8.21%, 安慰剂组为 7.63%, 以 1 级反应为主, 试验组和对照组分别为 80.43%(333/414) 81.51%(313/384), 其 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 6.60% 1.39% 0.22% 和 6.22% 1.15% 0.26% 试验组烦躁发生率为 7.39%, 安慰剂组为 6.93%, 以 1 级反应为主, 试验组和对照组分别为 73.73%(275/373) 71.91% (251/349), 其 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 5.45% 第 90 页 / 共 280 页

91 1.84% 0.10% 和 4.99% 1.79% 0.16% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者与接种无关征集性全身不良事件发生情况试验组发生与接种无关征集性全身不良事件 141 例, 发生率为 2.80%, 安慰剂组发生 172 例, 发生率为 3.42%, 以 1 级和 2 级不良反应为主, 分别占总数的 33.55%(105/313) 和 52.08%(163/313),3 级不良反应占 14.38%(45/313), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良事件发生率分别为 0.85% 1.57% 0.38% 和 1.23% 1.67% 0.52% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 在与接种无关征集性全身不良事件中, 所有的症状的发生率均低于 5% 试验组和安慰剂组各个全身症状发生率差异均无统计学意义 受试者接种疫苗后非征集性不良事件发生率 名受试者接种疫苗后第 0-56 天内, 共观察到非征集不良事件 5766 例, 发生率为 57.22%, 其中试验组发生非征集不良事件 2860 例 5679 例次, 发生率为 56.70%; 安慰剂组发生非征集不良事件 2906 例 5891 例次, 发生率为 57.74%, 试验组和对照组间非征集不良事件发生率差别无统计学学意义 (P=0.2952) 受试者与接种有关的非征集性不良反应发生率 第 91 页 / 共 280 页

92 观察期间共有 85 例 (103 例次 ) 非征集不良反应, 发生率为 0.84%, 其中试验组发生 43 例 (48 例次 ), 发生率为 0.85%; 安慰剂组 42 例 (55 例次 ), 发生率为 0.83% 以 1 级反应为主, 试验组和对照组的 1 级发生数分别占其发生总数的 74.42%(32/43) 61.90%(26/42) 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 0.63% 0.20% 0.02% 和 0.52% 0.32% 0.00% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 参照 国际医学用语词典 (MedDRA,12.0 版 ) 系统 / 器官分类体系进行分类, 以皮肤和皮下组织疾病和呼吸系统 胸及纵膈疾病及全身性障碍及接种部位症状相对多见, 其他系统的非征集不良反应发生率均低于 0.1% 受试者与接种无关的非征集性不良事件发生情况试验组发生与接种无关非征集不良事件为 2843 例 ( 5631 例次 ), 发生率为 56.36%; 安慰剂组发生 2885 例 (5836 例次 ), 发生率为 57.32% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后不良事件发生情况 名受试者接种第 1 针疫苗后第 0-28 天内, 共观察到总体不良事件 6677 例 (66.26%), 其中试验组发生 3309 例 (65.60%); 安慰剂组 3368 例 (66.92%); 两组间总体不良事件发生率差异无统计学意义 第 92 页 / 共 280 页

93 试验组接种不良反应发生 2018 例 (40.01%); 安慰剂组发生 2038 例 (40.49%); 组间差异无统计学有意义 其中试验组征集性不良反应发生率为 39.71%, 安慰剂组为 40.25%, 组间差异无统计学意义 ; 试验组和对照组非征集性不良反应发生率分别为 0.59% 和 0.54%, 组间发生率无统计学意义 试验组发生与接种无关不良事件 2254 例 (44.69%); 安慰剂组发生 2286 例 (45.42%); 两组间差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后 30 分钟不良反应情况 名受试者接种第 1 针疫苗后 30 分钟内共观察到不良反应 618 例 (6.13%), 其中试验组 333 例 (6.60%); 安慰剂组发生 285 例 (5.66%); 以 1 级为主, 试验组和安慰剂组分别占其发生总数的 86.79%(289/333) 89.82%(256/285), 未发生 3 级及以上不良反应 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 试验组局部不良反应发生率为 0.22%, 安慰剂组的发生率为 0.20%; 两组全身不良反应均表现为发热, 试验组和安慰剂组分别为 6.36% 和 5.48%, 均以 1 级反应为主, 未发现 3 级及以上不良反应 观察到试验组 1 例非征集不良反应, 系统分类划分为全身性障碍及接种部位症状, 为 2 级不良反应 受试者接种第一针疫苗后 0-7 天征集性不良反应第一针疫苗接种后 0-7 天内发生 1067 例, 共 1787 例次 第 93 页 / 共 280 页

94 征集性局部不良反应 (10.59%), 试验组发生 541 例 905 例次 (10.73%); 安慰剂组发生 526 例 882 例次 (10.45%) 以 1 级不良反应为主, 占发生总数的 88.19%(941/1067), 3 级不良反应占发生总数的 0.19%(2/1067), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 9.30% 1.43% 0.00% 和 9.38% 1.03% 0.04% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 征集性局部不良反应中以红斑多见, 其余症状发生率均低于 5%, 试验组和安慰剂组间不同局部症状发生率差别均无统计学意义 试验组局部红斑的发生率为 5.04%, 安慰剂组 4.91%, 以 1 级不良反应为主 受试者接种第一针疫苗后 0-7 天征集性全身不良事件接种第一针疫苗后 0-7 天内发生 3466 例 (5914 例次 ) 征集性全身不良反应 其中试验组应 1733 例, 发生率为 34.36%; 安慰剂组 1733 例, 发生率为 34.43%; 以 1 级和 2 级不良反应为主, 分别占总数的 60.93%(2112/3466) 和 33.79%(1171/3466), 3 级不良反应占 5.28%(183/3466), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 20.42% 12.01% 1.92% 和 21.50% 11.23% 1.71% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 征集性全身不良反应中以发热 腹泻 食欲下降 恶心 第 94 页 / 共 280 页

95 呕吐 烦躁多见, 其余症状的发生率均低于 5% 组间不同全身症状发生率差异均无统计学意义 以发热反应最为常见,1 级和 2 级反应为主 受试者接种第一针疫苗后 0-7 天与接种无关征集性全身不良事件试验组发生与接种无关征集性全身不良事件 87 例 (1.72%), 安慰剂组发生 103 例 (2.05%), 在与接种无关征集性全身不良事件中, 所有的症状的发生率均低于 2% 两组间差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后 0-28 天非征集性不良事件在第一针疫苗接种后 0-28 天内, 共有 57 例 (71 例次 ) 非征集不良反应, 发生率为 0.57% 其中试验组为 30 例 (33 例次 ), 发生率为 0.59%; 安慰剂组 27 例 (38 例次 ), 发生率为 0.54%, 以 1 级反应为主, 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后 0-28 天与接种无关非征集性不良事件试验组发生与接种无关非征集不良事件 2233 例 (3719 例次 ), 发生率为 44.27%; 安慰剂组发生 2268 例 (3800 例次 ), 发生率为 45.06% 以 1 级 2 级为主, 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-28 天总体不良事件发生 第 95 页 / 共 280 页

96 情况 9430 名受试者接种第二针疫苗后第 0-28 天内, 共观察到总体不良事件 4040 例 (42.84%), 其中试验组 1979 例 (41.94%); 安慰剂组 2061 例 (43.75%); 两组间总体不良事件发生率差异无统计学意义 试验组发生接种不良反应 1142 例 (24.20%); 安慰剂组发生 1200 例 (25.47%); 其中试验组征集性不良反应发生率为 24.07%, 安慰剂组为 25.28%, 试验组和安慰剂组非征集性不良反应的发生率分别为 0.28% 和 0.34%, 两组间发生率差异均无统计学意义 试验组发生与接种无关的总体不良事件发生率为 26.13%; 安慰剂组发生率为 27.43%, 组间发生率差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 30 分钟不良反应情况 9430 名受试者接种第二针疫苗后 30 分钟内, 共观察到不良反应 300 例 (3.18%), 试验组发生 140 例 (2.97%); 安慰剂组 160 例 (3.40%) 不良反应均为 1 级和 2 级, 未见 3 级及以上不良反应 主要症状为发热 局部红斑和肿胀 试验组与安慰剂组各类不良反应发生率差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-7 天征集性局部不良反应第二针疫苗接种后 0-7 天内发生 467 例 697 例次征集性局部不良反应, 发生率为 4.95%, 试验组发生 228 例 332 例 第 96 页 / 共 280 页

97 次 (4.84%); 安慰剂组发生 239 例 365 例次 (5.07%); 以 1 级不良反应为主, 占发生总数的 87.79%(410/467), 3 级不良反应占发生总数的 0.64%(3/467), 未发现 4 级不良反应 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 征集性局部不良反应中以红斑 硬结多见, 试验组局部红斑的发生率为 2.25%, 安慰剂组为 2.50%; 硬结的发生率为 2.31%, 安慰剂组为 2.29%, 以 1 级不良反应为主 ; 其余发生率均低于 2%, 组间发生率差别均无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-7 天征集性全身不良反应接种第二针疫苗后 0-7 天内, 有 2928 例 (2013 例次 ) 征集性全身不良反应 (21.35%), 其中试验组发生 978 例 (20.72%); 安慰剂组 1035 例 (21.97%); 以 1 级和 2 级不良反应为主, 分别占总数的 54.00%(1087/2013) 和 39.59% (797/2013), 3 级不良反应占 6.41%(129/2013), 未发现 4 级不良反应 试验组与安慰剂组的 1 级 2 级 3 级不良反应发生率分别为 11.36% 8.16% 1.21% 和 11.70% 8.75% 1.53% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 在征集性全身不良反应中, 以发热 (15.66%) 腹泻 (4.62%) 食欲下降 (2.44%) 恶心呕吐 (2.27%) 烦躁 (2.06%) 相对多见, 其余症状的发生率均低于 2% 试验组和安慰剂组间不同全身症状发生率差异均无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-7 天与接种无关征集性全 第 97 页 / 共 280 页

98 身不良事件接种第二针疫苗后 0-7 天内, 试验组发生与接种无关的征集性全身不良事件 56 例 (1.19%); 安慰剂组发生 70 例 (1.49%); 以发热反应多见, 其余症状的发生率均低于 1% 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-28 天非征集性不良反应在第二针疫苗接种后 0-28 天内, 共有 29 例 (32 例次 ) 非征集不良反应 (0.31%), 其中试验组 13 例 (15 例次 ), 发生率为 0.28%; 安慰剂组 16 例 (17 例次 ), 发生率为 0.34%, 两组间和各级不良反应分布差异均无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0-28 天与接种无关非征集性不良事件在第二针疫苗接种后 0-28 天内, 共有 2523 例 (4007 例次 ) 非征集不良事件判定与接种无关 (26.76%), 试验组为 1232 例 (1935 例次 ), 发生率 26.09%; 安慰剂组发生 1291 例 (2072 例次 ), 发生率 27.38%; 两组间差异无统计学意义 受试者接种疫苗后严重不良事件 受试者接种疫苗后严重不良事件 (SAE) 发生情况 (0-14 月 ) 试验组受试者接种首针至 14 月期间, 发生严重不良事件 (SAE)111 例 (116 例次 ), 发生率 2.20%; 安慰剂组发生 SAE131 例 (146 例次 ), 发生率 2.60%; 两组间 SAE 发生 第 98 页 / 共 280 页

99 率差异无统计学意义 受试者每针次接种疫苗后 28 天 (0-56 天 ) 内严重不良事件发生情况本研究在每针次接种后 28 天内,10077 名受试者中共报告 92 例 (93 例次 )SAE, 发生率为 0.91% 试验组 5044 名受试者报告了 45 例 (45 例次 ), 发生率为 0.89%; 安慰剂组 5033 名受试者报告了 47 例 (48 例次 ), 发生率为 0.93%; 经研究者调查判断并经 DSMB 审查确认, 有 11 例 (11 例次 ) 严重不良事件与接种有关, 其中试验组报告了 5 例, 发生率为 0.10%; 安慰剂组报告了 6 例, 发生率为 0.12%; 组间与接种有关的严重不良事件发生率差别无统计学意义 每针次接种疫苗后 28 天内与接种有关严重不良事件系统分类情况参照 国际医学用语词典 (MedDRA,12.0 版 ) 系统 / 器官分类体系分类, 试验组和安慰剂组报告的感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ) 全身性障碍及接种部位症状 胃肠道异常类的发生率分别为 0.08% 0% 0.02% 和 0.08% 0.02% 0.02%, 在不同年龄亚组中, 试验组和对照组间与接种有关的严重不良事件及其系统 / 器官的发生率差别均无统计学意义 11 例 (11 例次 ) 与接种有关的严重不良事件包括感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ), 应说明与 EV71 阴性病例 第 99 页 / 共 280 页

100 的关系和两组发生情况 每针次接种疫苗后 28 天内与接种无关严重不良事件发生情况参照 国际医学用语词典 (MedDRA,12.0 版 ) 系统 / 器官分类体系, 对与接种无关的严重不良事件进行编码和分类, 严重不良事件以呼吸系统 胸及纵隔疾病 感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ) 以及胃肠道异常多见, 其他系统类疾病发生率均低于 0.1%, 安慰剂组发生意外死亡 1 例 ( 溺水死亡 ) 试验组和安慰剂组的呼吸系统 胸及纵隔疾病和感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ) 以及胃肠道异常的发生率分别为 0.46% 0.12% 0.10% 和 0.44% 0.18% 0.10%, 两组间发生率差别无统计学意义 试验组和安慰剂组间其他系统分类的严重不良事件发生率差别均无统计学意义 在不同年龄亚组和不同研究中心中, 试验组和安慰剂组间各个系统分类的严重不良事件发生率差别均无统计学意义 首针接种 57 天后 1 年期间严重不良事件情况本研究在首针接种后 57 天至 14 月间, 共报告 160 例 ( 169 例次 )SAE, 发生率为 1.59%, 经研究者调查判断并经 DSMB 审查确认, 此期间发生的所有 SAE 均与疫苗接种无关 参照 国际医学用语词典 (MedDRA,12.0 版 ) 系统 / 器官分类体系对严重不良事件进行编码和分类, 严重不良事件以感染和感染性疾病 呼吸系统 胸及纵隔疾病以及胃肠道异常多 第 100 页 / 共 280 页

101 见, 其他系统类疾病发生率均低于 0.1% 试验组 5044 名受试者中, 报告了 68 例 (71 例次 ) 严重不良事件, 发生率为 1.35%; 安慰剂组 5033 名受试者中, 报告了 92 例 (98 例次 ) 严重不良事件, 发生率为 1.83%; 试验组和安慰剂组间严重不良事件发生率差别无统计学意义 其中意外死亡 5 例, 试验组 2 例 ( 溺水死亡 1 例 车祸死亡 1 例 ), 发生率为 0.04%; 对照组 3 例 ( 溺水死亡 3 例 ), 发生率为 0.06%; 两组间意外死亡发生率差别无统计学意义 在感染和感染性疾病 (EV71 阳性病例 ) 系统分类中, 试验组未发生严重不良事件, 安慰剂组的发生率为 0.48%, 两组间感染和感染性疾病 (EV71 阳性病例 ) 的发生率差别有统计学意义, 安慰剂组高于试验组 试验组和安慰剂组间其他系统分类的严重不良事件发生率差别均无统计学意义 7.8 免疫原性分析 免疫原性总体分析本次研究共有 1150 名受试者 ( 试验组 579 名, 对照组 571 名 ) 完成了免疫原性评价 试验组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体阳性率 ( 1:8) 为 98.79%, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 95.51%,GMT 为 1:165.79,GMI 为 安慰剂组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体的阳性率 ( 1:8) 为 19.61%, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 3.50%,GMT 为 1:8.90,GMI 为 1.08 试验组与安慰剂组间首针免后第 56 天抗体阳性率 ( 1:8) 第 101 页 / 共 280 页

102 阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差别均具有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 同时显示了以 1:16 和 1:32 为标准的阳性率和阳转率结果, 及反向分布曲线, 1:32 时试验组阳转率为 88.08%, 见下表 表 Ⅲ-30 受试者接种疫苗后免疫原性情况 时间点指标试验组安慰剂组检验统计量 P 值 观察人数 阳性人数 免前 阳 性 率 % (95%CI) ( ) ( ) GMT(95%CI) 7.49( ) 8.23( ) 免后 56 天 观察人数 阳性数 1( 1:8) 阳性率 %( 1:8) (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) (95%CI) ( ) ( ) 阳性数 2( 1:16) 阳性率 %( 1:16) (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 2( 1:16) 阳转率 %( 1:16) (95%CI) ( ) 2.80 ( ) 阳性数 3( 1:32) 阳性率 %( 1:32) (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 3( 1:32) 阳转率 %( 1:32) (95%CI) ( ) ( ) GMT (95%CI) ( ) ( ) GMI (95%CI) ( ) ( ) < < < < < < < < 免前抗体阴性 (<1:8) 人群免疫原性分析 共有 960 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阴性受试者 ( 试 第 102 页 / 共 280 页

103 验组 492 名 安慰剂组 468 名 ) 完成了免疫原性评价 试验组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体的阳转率 ( 1:8) 为 98.58%,GMT 为 1:103.44,GMI 为 安慰剂组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体阳转率 ( 1:8) 为 2.35%,GMT 为 1:4.34,GMI 为 1.09 试验组与安慰剂组间首针免后第 56 天抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差别均具有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 同时显示了以 1:16 和 1:32 为标准的阳性率和阳转率结果, 及反向分布曲线, 1:32 时试验组阳转率为 89.84%, 见下表 表 Ⅲ-31 免前抗体阴性人群接种疫苗后免疫原性情况分析 时间点指标试验组安慰剂组检验统计量 P 值 观察人数 免前 GMT (95%CI) 观察人数 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 2( 1:16) 阳 转 < 率 %( 1:16) ( ) ( ) 免后 56 (95%CI) 天 阳转数 3( 1:32) 阳 转 < 率 %( 1:32) (95%CI) ( ) ( ) GMT < (95%CI) ( ) ( ) GMI (95%CI) ( ) 1.09 ( ) < 免前抗体阳性人群免疫原性分析 第 103 页 / 共 280 页

104 190 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阳性受试者, 接种首针疫苗后第 56 天 EV71 中和抗体阳转 ( 1:8)77 人 试验组有免前抗体阳性受试者 87 人, 接种首针疫苗后第 56 天中和抗体与接种前比较, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 78.16%,GMT 为 1: ,GMI 为 9.19 安慰剂组有免前抗体阳性受试者 103 人, 接种首针疫苗后第 56 天中和抗体与接种前比较, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 8.74%,GMT 为 1:231.04,GMI 为 1.05 试验组与安慰剂组间首针免后第 56 天抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 均有显著性差异, 试验组高于安慰剂组 7.9 免疫持久性分析 所有受试者接种疫苗后免疫持久性共 1098 人完成首针继续进行了免后第 8 个月免疫持久性观察,EV71 中和抗体阳性 ( 1:8)700 人 其中试验组 550 人, 阳性率为 99.27%;GMT 为 1:88.77; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率为 92.00%,GMI 为 安慰剂组 548 人, 抗体阳性率为 28.10%;GMT 为 1:12.50; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率为 14.50%,GMI 为 1.50 试验组与安慰剂组间首针免后第 8 个月抗体阳性率 ( 1:8) 阳转率 ( 1:8) GMT GMI 均有统计学差异, 试验组高于安慰剂组 共 1050 人完成首针免后第 14 个月免疫持久性观察, EV71 中和抗体阳性 ( 1:8)705 人 其中试验组 528 人, 阳 第 104 页 / 共 280 页

105 性率为 99.24%,GMT 为 1:92.12; 与接种前中和抗体比较, 阳转率为 90.15%,GMI 为 安慰剂组 522 人, 抗体阳性率为 34.67%,GMT 为 1:13.19; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率为 20.50%,GMI 为 1.59 两组间首针免后第 14 个月抗体阳性率 ( 1:8) 抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 均有统计学差异, 试验组高于安慰剂组 同时显示了第 8 个月和 14 个月以 1:16 和 1:32 为标准的阳性率和阳转率结果, 及反向分布曲线, 见下表 表 Ⅲ-32 受试者接种疫苗后中和抗体持久性分析 时间点 指标 试验组 安慰剂组 统计量 P 值 观察人数 阳性人数 免前免后第 8 个月免后第 14 个月 阳性率 (%) (95%CI) ( ) ( ) GMT (95%CI) 7.49 ( ) 8.23 ( ) 观察人数 阳性数 1( 1:8) 阳性率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳性数 2( 1:16) 阳性率 %( 1:16) < (95%CI) ( ) ( ) 阳性数 3( 1:32) 阳性率 %( 1:32) < (95%CI) ( ) ( ) GMT < (95%CI) ( ) ( ) GMI < (95%CI) ( ) ( ) 观察人数 阳性数 1( 1:8) 第 105 页 / 共 280 页

106 时间点 指标 试验组 安慰剂组 统计量 P 值 阳性率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳性数 2( 1:16) 阳性率 %( 1:16) < (95%CI) ( ) ( ) 阳性数 3( 1:32) 阳性率 %( 1:32) < (95%CI) ( ) ( ) GMT < (95%CI) ( ) ( ) GMI (95%CI) ( ) 1.59 ( ) < 免前抗体阴性人群接种疫苗后免疫持久性分析有 934 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阴性受试者完成了首针免后第 8 个月免疫持久性观察, 接种疫苗后第 8 个月阳转 ( 1:8)521 人 其中试验组 468 人中, 首针免后第 8 个月阳转率为 99.15%,GMT 为 1:60.01; 与接种疫苗前抗体比较,GMI 为 安慰剂组 448 人体阳转率为 12.72%,GMT 为 1:6.33; GMI 为 1.58 组间首针免后第 8 个月抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差异均有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 共 876 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阴性受试者完成了首针免后第 14 个月免疫持久性观察, 其中抗体阳性 ( 1:8) 534 人 在试验组 448 人阳转率为 99.11%,GMT 为 1:65.51; 与接种疫苗前中和抗体比较,GMI 为 安慰剂组 428 人阳转率为 21.03%,GMT 为 1:6.94; GMI 为 1.74 组间首 第 106 页 / 共 280 页

107 针免后第 14 个月抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差异均有显著性意义, 试验组高于安慰剂组 同时显示了第 8 个月和 14 个月以 1:16 和 1:32 为标准的阳性率和阳转率结果, 及反向分布曲线, 见下表 表 Ⅲ-33 免前抗体阴性接种疫苗后中和抗体持久性 时间点 指标 试验组 安慰剂组 统计量 P 值 观察人数 免前 GMT (95%CI) 观察人数 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转 2( 1:16) 免后第 8 个月免后第 14 个月 阳率 %( 1:16) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转 2( 1:32) 阳率 %( 1:32) < (95%CI) ( ) ( ) GMT < (95%CI) ( ) ( ) GMI (95%CI) ( ) 1.58 ( ) < 观察人数 阳转数 1( 1:8) 阳转率 %( 1:8) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转 2( 1:16) 阳率 %( 1:16) < (95%CI) ( ) ( ) 阳转 3( 1:32) 阳率 %( 1:32) < (95%CI) ( ) ( ) GMT < (95%CI) ( ) ( ) GMI (95%CI) ( ) 1.74 ( ) < 综上, 提供的资料显示 EV71 中和抗体阴性受试者 ( 试 第 107 页 / 共 280 页

108 验组 492 名 安慰剂组 468 名 ), 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : :65.51 和 1:4.34 1:6.33 1:6.94; 须用数据分析和解释免前 EV71 中和抗体阴性的试验组免后 14 个月中和抗体 ( 相比第 8 个月 ) 升高的原因 免前抗体阳性人群接种疫苗后免疫持久性分析共 182 名免前 EV71 中和抗体阳性的受试者完成了首针免后第 8 个月免疫持久性观察,EV71 中和抗体阳转 ( 1:8) 62 人 在试验组 82 人中,GMT 为 1:828.82; 与接种前抗体比较, 抗体阳转率为 51.22%,GMI 为 3.34 安慰剂组有免前抗体阳性者 100 人, 接种疫苗后第 8 个月中和抗体与接种前比较, 抗体阳转率为 20.00%,GMT 为 1:263.93,GMI 为 1.16 试验组与安慰剂组免后第 8 个月抗体阳转率 GMT GMI 均有显著性差异, 试验组高于安慰剂组 共 174 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阳性者完成了第 14 个月免疫持久性观察,EV71 中和抗体阳转 ( 1:8)49 人 试验组抗体阳性者 80 人阳转率为 40.00%,GMT 为 1:621.55, GMI 为 2.36 安慰剂组免前抗体阳性者 94 人, 阳转率为 18.09%,GMT 为 1:244.89,GMI 为 1.07 试验组与安慰剂组免后第 14 个月抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 均有显著性差异, 试验组高于安慰剂组 剔除显性病例和隐性感染者后疫苗免疫持久性分析 第 108 页 / 共 280 页

109 在免疫原性及免疫持久性亚组,827 名受试者完成了免前 首针免后 56 天 第 8 月和第 14 月系列血的检测, 并剔除第 56 天至第 14 月期间 EV71 阳性病例和隐性感染者, 其中试验组 409 人, 安慰剂组 418 人 试验组和安慰剂组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体阳性率 ( 1:8) 分别为 99.76% 99.02% 99.27% 和 16.75% 17.46% 22.49%; 在不同时间点组间抗体阳性率差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间抗体阳性率差异无统计学意义 试验组和安慰剂组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体阳转率 ( 1:8) 分别为 96.33% 90.71% 88.75% 和 4.07% 4.31% 9.09%; 不同时间点组间抗体阳转率差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间抗体阳转率差异有统计学意义, 首针免后第 56 天的阳转率高于第 8 个月和第 14 个月, 后两个时间点间抗体阳转率差异无统计学意义 试验组和安慰剂组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : : 和 1:8.48 1:7.88 1:8.04; 在不同时间点组间 GMT 差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间抗体 GMT 差异有统计学意义, 第 109 页 / 共 280 页

110 首针免后第 56 天的 GMT 高于第 8 个月和第 14 个月, 后两个时间点间 GMT 差异无统计学意义 试验组和安慰剂组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体与免前抗体水平相比,GMI 分别为 和 ; 不同时间点组间 GMI 差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间抗体 GMI 差异有统计学意义, 首针免后第 56 天的 GMI 高于第 8 个月和第 14 个月, 后两个时间点间 GMI 差异无统计学意义 免前抗体阴性者剔除显性病例和隐性感染者接种疫苗后免疫持久性共 695 名免前抗体阴性受试者完成了免前 首针免后 56 天 第 8 月和第 14 月的系列血的检测并剔除第 56 天至第 14 月期间 EV71 阳性病例和隐性感染者, 其中试验组 338 人, 安慰剂组 357 人 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体阳转率 ( 1:8) 分别为 99.70% 98.82% 99.11%, 安慰剂组分别为 2.80% 3.92% 10.08%; 不同时间点组间抗体阳转率差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间阳转率差异无统计学意义 试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 第 110 页 / 共 280 页

111 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : : 和 1:4.45 1:4.35 1:4.58; 不同时间点组间 GMT 差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间抗体 GMT 差异有统计学意义, 首针免后第 56 天的 GMT 高于第 8 个月和第 14 个月, 后两个时间点间 GMT 差异无统计学意义 试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体与免前抗体水平相比,GMI 分别为 和 ; 不同时间点组间 GMI 差异有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 试验组首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月间 GMI 差异有统计学意义, 首针免后第 56 天的 GMI 高于第 8 个月和第 14 个月, 后两个时间点间 GMI 差异无统计学意义 综上, 提供的资料显示 EV71 中和抗体阴性受试者 ( 试验组 492 名 安慰剂组 468 名 ), 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : :65.51 和 1:4.34 1:6.33 1:6.94; 而剔除第 56 天至第 14 月期间 EV71 阳性病例和隐性感染者后,695 名免前抗体阴性受试者 ( 试验组 338 人, 安慰剂组 357 人 ), 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : : 和 1:4.45 1:4.35 1:4.58; 第 111 页 / 共 280 页

112 审评分析 : 两组中分别有 100 多例的阳性病例和隐性感染者, 剔除 EV71 阳性病例和隐性感染者后, 试验组第 56 天 GMT 反而升高, 无法解释 ; 须列表显示两组剔除的 EV71 阳性病例和隐性感染者 ; 并说明试验组如何区分试验疫苗和自然感染所致的抗体 4 倍升高 7.10 免疫替代指标的探索分析 对 EV71 病毒所致疾病的中和抗体的免疫替代指标疫苗有效性免疫替代终点探索分析亚组共包括 87 例 EV71 感染所致疾病病例 (98 例病例中有 11 例未做配对调查被排除 ) 和 422 例没有发生 EV71 感染所致疾病的受试者 ( 另有 11 例对照因 EV71 病毒 PCR 检测阳性和 6 例重复配对被排除 ) 申请人认为, 在 EV71 中和抗体阈值为 1:16 时, 约登指数最大, 约登指数 灵敏度和特异度分别为 和 ; 因此 EV71 中和抗体滴度在 1:16 时, 能有效的区分 EV71 感染所致疾病病例和非病例 表 Ⅲ-34 对 EV71 病毒所致疾病的中和抗体保护水平 累计 EV71 病例累计配对病例中和抗体滴度敏感度特异度约登指数数数 第 112 页 / 共 280 页

113 累计 EV71 病例累计配对病例中和抗体滴度敏感度特异度约登指数数数 对 EV71 阳性病例的中和抗体免疫替代指标疫苗有效性免疫替代终点探索分析亚组共包括 104 例 EV71 阳性病例 (118 例病例中有 14 例未做配对调查被排除 ) 和 507 名没有发生 EV71 阳性病例的受试者 ( 另有 12 例对照因 EV71 病毒 PCR 检测阳性和 6 例重复配对被排除 ) 申请人认为, 在 EV71 中和抗体阈值为 1:16 时, 约登指数最大, 约登指数 灵敏度和特异度分别为 和 ; 因此 EV71 中和抗体滴度在 1:16 时, 能有效的区分 EV71 阳性病例病例和非病例, 但是抗体滴度随时间的推移有明显下降, 为了较长时间的保护效果, 1:32 作为疫苗保护效果免疫替代终点更为合适 详见下表 表 Ⅲ-35 对 EV71 病毒阳性所有病例的中和抗体保护水平 累计 EV71 病例累计配对病例中和抗体滴度敏感度特异度约登指数数数 第 113 页 / 共 280 页

114 累计 EV71 病例累计配对病例中和抗体滴度敏感度特异度约登指数数数 审评认为, 除以上探索研究外, 建议申请人结合本品 Ⅲ 期临床试验中所有 EV71 感染所致疾病的病例的中和抗体水平 ( 急性期和恢复期, 免前 / 免后 ) 进行分析, 包括流调的抗体结果, 综合验证其结论 7.11 中检院中和抗体检测和复核阳性病例的结果在 Ⅲ 期临床试验 2012 年 10 月 ~2013 年 4 月中, 中检院共提供了 8 份血清样本检测报告, 汇总 : 中和抗体共检测免前 1292 份, 免后 份, 急性期恢复期 190 份,EV71 阳性病例 99 份, 不明类别 2396 份 ;IgM 急性期恢复期 190 份 应逐一确认 Ⅲ 期临床试验下述检测报告的样本所对应的临床报告中的结果, 并核对检测样本数和临床报告中样本数 ( 阐明不一致的原因 ): 确认免疫原性每个随访时间点的中和抗体所有检测结果 ; 中检院复核病例的每个报告 ( 中和抗体和 IgM) 对应的临床结果 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2012]1411 号 (2012 年 10 月 23 日 ) 内容 : 送检血清样本 36 份 ( 患者急性期 恢复期 ), 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2012]1427 号 (2012 年 10 月 29 日 ) 第 114 页 / 共 280 页

115 内容 : 送检血清样本 2683 份 ( 其中免前 1292 份, 免后 56 天 1237 份 患者急性期 恢复期共 154 份 ), 其中 1 份免后 56 天样本无血清 ( 编号 1554), 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2012]1524 号 (2012 年 11 月 15 日 ) 内容 : 送检血清样本 99 份 (EV71 阳性病例血清 ), 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2012]1525 号 (2012 年 11 月 15 日 ) 内容 : 送检血清样本 190 份 ( 患者急性期 恢复期 ), 应用 ELISA 法检测 EV71 IgM 抗体 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2013]270 号 (2013 年 3 月 6 日 ) 内容 : 送检血清样本 1198 份, 其中 2 份样本无血清 ( 编号 ), 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2013]278 号 (2013 年 3 月 6 日 ) 内容 : 送检血清样本 13 份, 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2013]280 号 (2013 年 3 月 6 日 ) 第 115 页 / 共 280 页

116 内容 : 送检血清样本 11 份, 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 Ⅲ 期血清样本检测结果 中检生检函 [2013]465 号 (2013 年 4 月 19 日 ) 内容 : 送检血清样本 1176 份, 应用微量细胞病变法检测中和抗体效价 (6) 临床连续三批一致性研究本研究负责单位为江苏省疾病预防控制中心 (PI: 胡月梅 ), 现场协作单位为江苏省句容市疾病预防控制中心 研究现场为江苏省句容市, 试验起止时间为 2012 年 7 月 年 3 月 血清标本的抗 EV71 中和抗体的检测 研究疫苗的编盲 统计分析单位及研究监查单位同 Ⅲ 期 申请人提供了伦理委员会批件 ( 批准日期 2012 年 6 月 20 日 ) 及病例报告表修改后伦理批件 (2012 年 9 月 29 日 ), 主要研究者简历, 临床试验方案 ( 版本日期 :2012 年 5 月 30 日 ), 知情同意书和病例报告表样本, 盲底及揭盲记录等 还提供了中检院血清标本检测 2708 份 ( 除 1 份无血清 ) 结果 ( 中检生检函 [2013]67 号 ) 1. 试验目的 :1 主要目的 : 评价连续三个批次本疫苗在 6 至 59 月龄健康婴幼儿中免疫原性 批间一致性 2 次要目的 : 评价连续三个批次本疫苗在 6 至 59 月龄健康婴幼儿中的安全性 第 116 页 / 共 280 页

117 2. 试验指标 :1 主要指标 : 本品全程接种后 28 天中和抗体的 GMT 2 次要指标 :(1) 本疫苗全程接种后 28 天中和抗体阳性率 阳转率 ;(2) 本疫苗接种至全程免疫后 28 天内不良事件与严重不良事件的发生率 3. 试验设计 : 采用随机双盲 安慰剂对照 优效性临床试验设计 选择 1400 名 6-59 月龄健康受试者, 随机分为 4 组 : 批次 1 组 ( n=350 人 ) 批次 2 组 ( n=350 人 ) 批次 3 组 ( n=350 人 ) 和安慰剂组 (n=350 人 ) 受试者于 0 28 天接种两针试验疫苗或安慰剂, 每次接种后观察 30 分钟即时反应和 0~7 天局部和全身反应 所有受试者于第 0 56 天采集血样, 分离血清, 进行血清中和抗体检测 受试者按照 3:1 比例随机分配接种试验疫苗和安慰剂 每名受试者只有一个研究编号并接种疫苗 研究终点 : 通过检测受试者接种连续三批 EV71 疫苗后的中和抗体水平, 计算中和抗体 GMT GMI 阳性率和阳转率, 评价疫苗免疫原性 ; 通过观察受试者接种连续三批 EV71 疫苗后临床症状和体征, 计算局部不良反应 全身不良反应 征集性不良反应 非征集性不良事件及严重不良事件发生率, 评价疫苗安全性 3.1 随机与编盲 : 疫苗的随机和编盲由独立第三方完成, 为了保证试验的双盲, 采用了相同剂型 相同外观 相同内外包装 相同标签而仅疫苗编号不同 分二次设盲 第 117 页 / 共 280 页

118 3.2 对试验设计及对照组选择的考虑 : 通过疫苗编盲, 随机分成批次 1 组 批次 2 组 批次 3 组和安慰剂组, 即全部受试者均来自同一总体人群 考虑到没有可供选择的对照疫苗, 本研究使用每针剂含氢氧化铝佐剂 0.5mg/ml 的安慰剂作为对照, 经对其进行包装, 使得其与试验疫苗具备相同剂型 相同外观 相同标签, 仅编号不同, 从而达到试验设计双盲的目的 3.3 受试者入选排除标准 : 选择近两年内手足口病疫情中低发区域进行临床试验 招募 6-59 月龄的常住健康人群, 近期无手足口病毒感染及其他接种禁忌者 详细受试者入选排除标准同 Ⅲ 期临床试验要求 3.4 样本量及确定依据 : 以血清中和抗体 GMT 为观察指标进行样本量推算 : 按连续三批疫苗的等效性设计来进行样本量的推算, 计算接种疫苗后试验疫苗组间血清抗体的几何平均滴度之比的双侧 95% 可信区间 (CI) 来分析三批疫苗是否在免疫学上等效 估算其在显著性水平为单侧 α = 0.05 条件下, 进行三次两两组间比较则, 血清中和抗体 GMT 两两组间比值的 95%CI 均落在 0.67~1.5 之间 ( 对数转换后两两组间的差值 95%CI 落在 ~0.176 之间 ), 则认为不同批疫苗具有等效性 按以上标准, 相当于对数转换后血清抗体差值等效性界值取作 δ =±0.176 对数转换后的标准差参照 Ⅱ 期临床试 第 118 页 / 共 280 页

119 验铝佐剂 400U 疫苗组免前阴性受试者 56 天血清中和抗体的结果取值如下表,r = NT1/NT2 =1, 取把握度不低于 80%, α 取 0.05 根据上述参数, 采用 NCSS-PASS 软件, 分别计算出把握度为 80% 85% 90% 下的样本量, 运行结果见下表 表 Ⅳ-1 样本量估计列表 参数 α 1-β σ δ N( 每组 ) 考虑 10% 受 试者脱落 考虑 15% 受试者 免前抗体阳性 考虑试验中受试者脱落和约 15% 受试者免前抗体阳性, 按 90% 把握度推算, 每组例数至少应达到 300 人 按照 1:1 比例, 安慰剂组人数至少为 300 人 3.5 受试者分组 :1400 名受试者, 总体男女比例均衡, 按照 3:1 比例随机分配接种试验疫苗和安慰剂 同时, 按方案规定的各年龄层人数进行入组 表 Ⅳ-2 连续三批疫苗临床试验设计 年龄亚组 样本量试验疫苗试验疫苗试验疫苗安慰剂对照 ( 人 ) 批次 1( 人份 ) 批次 2( 人份 ) 批次 3( 人份 ) ( 人份 ) 6-11 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 月龄 第 119 页 / 共 280 页

120 合计 研究用疫苗 试验疫苗 : 试验疫苗规格均为 400U/0.5ml/ 支 ( 铝佐剂 ), 包括连续三个批次提供了中检院的复核检定报告 涉及商业秘密, 省略报告内容 47 字 目前本品的复核检定报告中提供的解离后抗原含量和效力试验检测指标不能明确本品的实际抗原含量, 请药学审评考虑本品抗原含量的标化和统一问题 安慰剂 : 安慰剂主要成分是氢氧化铝稀释液 规格为 0.5ml/ 支 提供了中检院检定报告 3.7 观察指标及观察时间 免疫原性及批间一致性评价 免疫原性及批间一致性观察时间 : 免疫原性评价指标为免后中和抗体 GMT GMI 阳性率和阳转率, 观察时间为免疫前 (0d) 及首针免后 56 天 免疫原性及批间一致性评定 : 所有符合入选 / 排除标准 进入随机化并至少接种 1 针试验疫苗后, 按各针次实际完成接种和采血, 并具有有效血清学免疫原性检测结果的所有受试者纳入 FAS 集 缺失数据将采用之前最后一次血清学免疫原性检测结果结转 (Last observation carried forward, LOCF) 的方法进行补充 免疫原性评定指标 : 第 120 页 / 共 280 页

121 (1) 抗 EV71 中和抗体阳性判定 :1 阳性率 (1:8): 中和抗体滴度 1:8 的阳性率为主要阳性标准 ;2 阳性率 (1:16): 中和抗体滴度 1:16 的阳性率为参考阳性标准 ;3 阳性率 (1:32): 中和抗体滴度 1:32 的阳性率为参考阳性标准 (2) 抗 EV71 中和抗体阳转判定 :1 阳转率 (1:8): 免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:8 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长为主要阳转标准 ;2 阳转率 (1:16): 免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:16 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长, 为参考阳转标准 ;3 阳转率 (1:32): 免前中和抗体滴度 <1:8, 免后 1:32 或免前 1:8 免后抗体滴度 4 倍增长, 为参考阳转标准 批间一致性评定方法 : 用中和抗体滴度 (GMT) 评价疫苗批间一致性 统计方法 : 对中和抗体滴度做对数变换后, 采用完全随机设计的方差分析, 并用 LSD( 最小显著差 ) 法构建组间差值的同时置信限, 如果三个差值的置信区间上下线均落在 (-0.176~0.176) 内则认为三批疫苗等效 批间一致 此评定方法和标准, 以及结果是否可以接受, 建议咨询专家 安全性评价 : 安全性评价指标的观察时间从首针接种 (0 天 ) 到第 56 天 安全性评价指标 : 第 121 页 / 共 280 页

122 (1) 主要指标 :1 免后征集性全身和局部不良反应发生率 ;2 免后征集性全身和局部不良反应不同严重程度发生率 ;3 免后征集性全身和局部不良反应各症状发生率 (2) 次要指标 :1 免后非征集性不良反应发生率 2 免后与接种无关征集性不良事件发生率 3 免后与接种无关非征集性不良事件发生率 4 免后与接种无关非征集性不良事件 SAE MedDRA 器官系统分类分析 安全性观察时间 : 在每针次免疫后第 0-28 天, 受试者监护人自行密切观察并记录受试者所有不良反应 / 事件 ( 包括严重不良事件 ); 由村医生定时入户随访和指导 ; 同时研究者第 7 天和第 28 天集中面访 记录安全性观察信息 4. 连续三批间一致性研究结果 4.1 受试者分配 脱落及剔除情况描述 受试者免疫接种分配 脱落情况 : 本研究共招募 1727 名志愿者, 最终 1400 名受试者随机入组并接种首针疫苗,1324 人接种第 2 针疫苗, 疫苗全程接种率为 94.57% 批次 1 组脱落率为 6.57%; 批次 2 组脱落率为 3.71%; 批次 3 组脱落率为 5.71%; 安慰剂组脱落率为 5.71%, 各疫苗组间接种脱落率差异无统计学意义 列表显示了脱落 76 例的原因 ( 主要是主动退出 外出, 不良事件 3 例退出 ) 受试者免疫原性及批间一致性评价脱落及剔除情况 第 122 页 / 共 280 页

123 1300 名受试者完成第 56 天免疫原性观察, 其中批次 1 组 320 人 批次 2 组 330 人 批次 3 组 326 人 安慰剂组 324 人 ; 脱落 100 人, 其中批次 1 组 30 人, 脱落率为 8.57%; 批次 2 组 20 人, 脱落率为 5.71%; 批次 3 组 24 人, 脱落率为 6.86%; 安慰剂组 26 人, 脱落率 7.43% 数据审核时剔除 7 人, 最终免疫原性脱落 ( 剔除 ) 率为 7.64%, 其中批次 1 组为 8.57% 批次 2 组为 5.71% 批次 3 组为 7.14% 安慰剂组为 9.14% 各试验组间符合方案受试者脱落 ( 剔除 ) 率差异无统计学意义 4.2 试验方案的偏离 受试者使用疫苗异常情况 :1 例受试者在接种第二针时误接种备用疫苗, 纳入全分析集 安全性数据集, 不纳入符合方案数据集 受试者合并用疫苗及禁用药物情况 :1 例受试者在接种第 2 针前 2 天接种狂犬疫苗, 违背方案要求 经审议, 纳入 FAS 集和 SS 集, 不纳入符合方案数据集 1 例受试者受试者在接种第 2 针后 24 天接种狂犬疫苗, 违背方案要求 经审议, 纳入 FAS PPS 集及 SS 集 受试者免后采血超出时间窗情况 :1 例受试者采血时间超出窗口期 ( 应为 天 ) 违背方案要求 经审议, 纳入 FAS PPS 集及 SS 集 4.3 受试者人口学 抗体基线情况 第 123 页 / 共 280 页

124 4.3.1 受试者人口学资料情况 : 入组受试者中在不同年龄亚组中各试验组间年龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 符合方案受试者中和抗体基线情况 : 符合方案 PPS 集 1293 例受试者中, 免前 EV71 中和抗体阳性 194 人,GMT 为 1:7.18, 阳性率 (1:8) 为 15.00% 三个批次组共 975 人,GMT 为 1:7.36, 阳性 151 人, 阳性率为 15.49%; 安慰剂组 318 人,GMT 为 1:6.64, 阳性 43 人, 阳性率 (1:8) 为 13.52% 其中批次 1 组 320 人,GMT 为 1:6.91, 阳性 43 人, 阳性率为 13.44%; 批次 2 组 330 人,GMT 为 1:7.36, 阳性 53 人, 阳性率为 16.06%; 批次 3 组 325 人, GMT 为 1:7.85, 阳性 55 人, 阳性率为 16.92%; 各试验组免前中和抗体 GMT 和阳性率 (1:8) 差异无统计学意义 4.4 依从性分析及数据集定义入选并接种第 1 针受试者 1400 人, 全程接种 1324 人, 全程接种率为 94.57%; 批次 1 组 ~3 组的全程接种率为 93.43%~96.29%; 安慰剂组全程接种率为 94.29%; 接种依从性良好 安全性观察的依从性分析及数据集 : 受试者均按照方案完成安全性观察且依从性良好, 全部 1400 人按照方案要求均进入安全性分析数据集 免疫原性观察的依从性分析 : 在免疫原性组中, 有 1400 第 124 页 / 共 280 页

125 人在接种疫苗前 ( 第 0 天 ) 采集血标本, 其中 1293 人完成接种前及接种后第 56 天中和抗体检测及免疫原性评价, 完成率为 92.36%, 依从性良好 4.5 合并用药结果及分析在 0-56 天中,696 人合并使用药物 主要是解热镇痛抗风湿类 (35.79%) 和抗生素类 (27.21%), 各组间合并用药种类使用率差异无统计学意义 ; 有 5 人使用狂犬疫苗, 合并疫苗使用率为 0.36%, 各试验组合并疫苗使用率差异无统计学意义 4.6 受试者免后 56 天免疫原性分析 符合方案受试者免后 56 天免疫原性分析 (PPS) 符合方案受试者免后 56 天免疫原性分析共有 1293 名符合方案 PPS 受试者进入最终免疫原性分析 免后 56 天, 批次 1 组 320 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率(1:8) 为 99.69% 阳转率(1:8) 为 97.19%; 批次 2 组 330 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率 (1:8) 为 % 阳转率(1:8) 为 97.27%; 批次 3 组 325 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率(1:8) 为 % 阳转率 (1:8) 为 95.69%; 安慰剂组 318 人,GMT 为 1:7.30 GMI 为 1.10 阳性率(1:8) 为 16.98% 阳转率(1:8) 为 6.60% 各试验组免后 56 天 GMT GMI 阳性率及阳转率差异均有统计学意义, 其中三个批次组均高于安慰剂组 同时提供了 第 125 页 / 共 280 页

126 第 8 个月和 14 个月以 1:16 和 1:32 为标准的阳性率和阳转率结果, 及反向累积分布曲线图 以上结果显示共有 1293 名 PPS 受试者进入最终免疫原性分析 ( 免前和免后 ), 与中检院原始血清检测报告 ( 中检生检函 [2013]67 号,2013 年 1 月 16 日 ) 结果不一致, 显示血清标本检测 2708 份 ( 除 1 份无血清 ) 结果, 须详细说明 表 Ⅳ-5 符合方案受试者免后 56 天中和抗体情况分析 时间 指标 批次 1 组 N=320 批次 2 组 N=330 批次 3 组 N=325 三个批次组 N=975 安慰剂组 N=318 统计量 P 四组值 免前 GMT (1: ) (95% CI) 5.85~ ~ ~ ~ ~ 阳性率 (1:8)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ 阳性率 (1:16)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ 阳性率 (1:32)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ 第 56 天 GMT (1: ) (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < GMI (95% CI) 17.85~ ~ ~ ~ ~1.19 < 阳性率 (1:8)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 阳转率 (1:8)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 阳性率 (1:16)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 阳转率 (1:16)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 第 126 页 / 共 280 页

127 阳性率 (1:32)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 阳转率 (1:32)% (95% CI) ~ ~ ~ ~ ~ < 免前中和抗体阴性 (<1:8) 受试者免后 56 天免疫原性分析 (PPS) 免前中和抗体阴性 (<1:8) 受试者免后 56 天免疫原性分析 : 共有 1099 名免前中和抗体阴性 (<1:8) 受试者进入最终免疫原性分析 免后 56 天, 批次 1 组 277 人,GMT 为 1:93.38 GMI 为 阳转率(1:8) 为 99.64%; 批次 2 组 277 人,GMT 为 1:85.85 GMI 为 阳转率(1:8) 为 %; 批次 3 组 270 人,GMT 为 1:89.33 GMI 为 阳转率 (1:8) 为 %; 三个批次组 824 人,GMT 为 1:89.47 GMI 为 阳转率(1:8) 为 99.88%; 安慰剂组 275 人, GMT 为 1:4.54 GMI 为 1.14 阳转率(1:8) 为 6.91% 各试验组免后 56 天 GMT GMI 阳性率及阳转率差异均有统计学意义, 其中三个批次组均高于安慰剂组 提供了反向累积分布曲线图 免前中和抗体阳性 ( 1:8) 受试者免后 56 天免疫原性分析共有 194 名免前中和抗体 1:8 受试者进入最终免疫原性分析 免后 56 天, 批次 1 组 43 人,GMT 为 1: GMI 第 127 页 / 共 280 页

128 为 8.22 阳转率为 81.40%; 批次 2 组 53 人,GMT 为 1: GMI 为 阳转率为 83.02%; 批次 3 组 55 人,GMT 为 1: GMI 为 7.76 阳转率为 74.55%; 三个批次组 151 人,GMT 为 1: GMI 为 8.87 阳转率为 79.47%; 安慰剂组 43 人,GMT 为 1: GMI 为 0.89 阳转率为 4.65% 各试验组免后 56 天 GMT GMI 阳性率及阳转率差异均有统计学意义, 其中三个批次组均高于安慰剂组 提供了反向累积分布曲线图 所有受试者免后 56 天免疫原性分析 (FAS) 共有 1400 名 FAS 受试者入组本次研究 免后 56 天, 批次 1 组 350 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率(1:8) 92.00% 阳转率(1:8)89.14%; 批次 2 组 350 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率 95.43% 阳转率 92.00%; 批次 3 组 350 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率 95.14% 阳转率 89.71%; 三个批次组 1050 人,GMT 为 1: GMI 为 阳性率 94.19% 阳转率 90.29%; 安慰剂组 350 人,GMT 为 1:7.31 GMI 为 1.08 阳性率 17.14% 阳转率 6.29% 各试验组免后 56 天 GMT GMI 阳性率及阳转率差异有统计学意义, 其中三个批次组均高于安慰剂组 4.7 批间一致性分析 符合方案受试者免后 56 天批间一致性分析 (PPS) 第 128 页 / 共 280 页

129 共有 975 名符合方案受试者, 接种 3 个批次试验疫苗后进行批间一致性分析 免后 56 天, 批次 1~3 组 GMT 分别为 1: : :146.55, 批次 1 组与批次 2 组 批次 1 组与批次 3 组 批次 2 组与批次 3 组 GMT 对数标准差分别为 0.00(95%CI:-0.11~0.11) -0.02(95%CI:-0.13~0.09) -0.02(95%CI:-0.13~0.10), 均在评价标准 ~0.176 之间, 三个批次组间的变异系数为 2.337%, 表明在符合方案受试者中三个批次试验疫苗等效 表 Ⅳ-6 符合方案受试者接种连续三批疫苗批间一致性分析 指标 GMT (1: ) (95% CI) 评价标准评价结果 GMT 对数差 (95% CI) 批次 1 组批次 2 组批次 3 组批次 1 组与批次 1 组与批次 2 组与 N=320 N=330 N=325 批次 2 组批次 3 组批次 3 组 ( ~ ( ~ ( ~ (-0.11 ~ (-0.13 ~ (-0.13 ~ ) ) ) 0.11) 0.09) 0.10) / / / ~ ~ ~ / / / 两批等效 两批等效 两批等效 免前中和抗体阴性 (<1:8) 受试者免后 56 天批间一致性分析 (PPS) 共有 824 名免前中和抗体阴性受试者, 接种 3 个批次试验疫苗后进行批间一致性分析 免后 56 天, 批次 1~3 组 GMT 分别为 1: : :89.33, 批次 1 组与批次 2 组 批次 1 组与批次 3 组 批次 2 组与批次 3 组 GMT 对数标准差分别为 0.04(95%CI:-0.04~0.12) 0.02(95%CI:-0.06~ 0.10) -0.02(95%CI:-0.10~0.06), 均在评价标准 ~ 第 129 页 / 共 280 页

130 0.176 之间, 三个批次组间的变异系数为 4.210%, 表明在免 前中和抗体阴性受试者中三个批次试验疫苗等效 表 Ⅳ-7 免前中和抗体阴性 (<1:8) 受试者接种连续三批疫苗批间一致性分析 GMT 对数差 (95% CI) 批次 1 组批次 2 组批次 3 组指标批次 1 组与批次 1 组与批次 2 组与 N=277 N=277 N=270 批次 2 组批次 3 组批次 3 组 GMT (1: ) ~ ~ (95% CI) 75.62~ ~ ~ ~ / / / ~ ~ 评价标准 ~ 评价结果 / / / 两批等效两批等效两批等效 所有受试者免后 56 天批间一致性分析 (FAS) 所有 1050 名试验组受试者接种 3 个批次疫苗后, 进入批间一致性分析 3 批次 1~3 组 GMT 分别为 1: : :120.05, 批次 1 组与批次 2 组 批次 1 组与批次 3 组 批次 2 组与批次 3 组 GMT 对数标准差分别为 (95%CI:-0.16~0.07) -0.05(95%CI:-0.17~0.06) (95%CI:-0.12~0.11), 均在评价标准 ~0.176 之间, 三个批次组间的变异系数为 6.275%, 表明在所有试验组受试者中三个批次试验疫苗等效 4.8 安全性分析 受试者接种疫苗后总体不良事件发生情况 (0~56 天 ) 受试者接种疫苗后不良事件发生率 1400 名受试者接种疫苗后第 0~56 天内, 共观察到总体不良事件 1051 例, 发生率为 75.07%, 接种不良反应发生率 58.67%, 各试验组间差异无统计学意义 第 130 页 / 共 280 页

131 征集性不良反应中, 批次 1 组 204 例, 发生率为 58.29%; 批次 2 组 208 例, 发生率为 59.43%; 批次 3 组 198 例, 发生率 56.57%; 三个批次组 610 例, 发生率 58.10%; 安慰剂组 206 例, 发生率为 58.86%, 各试验组间差异无统计学意义 在不同针次不良反应中, 接种第一针疫苗不良反应 632 例, 发生率为 45.14%; 接种第二针疫苗不良反应 403 例, 发生率为 28.79% 各疫苗组间不同针次有关和无关不良事件发生率差异均无统计学意义 局部反应中, 批次 1 组 43 例, 发生率为 12.29%; 批次 2 组 64 例, 发生率为 18.29%; 批次 3 组 63 例, 发生率为 18.00%; 三个批次组 170 例, 发生率 16.19%; 安慰剂组 58 例, 发生率为 16.57%, 各试验组间差异无统计学意义 有关全身反应中, 批次 1 组 186 例, 发生率 53.14%; 批次 2 组 174 例, 发生率为 49.71%; 批次 3 组 169 例, 发生率为 48.29%; 三个批次组 529 例, 发生率 50.38%; 安慰剂组 188 例, 发生率为 53.71%, 各试验组差异无统计学意义 各试验组不良反应中, 以 1 级和 2 级不良反应为主, 全身不良反应有 3 级发生 ( 构成比占 5% 左右 ), 无 4 级不良反应 局部反应和全身反应的不良反应分级差异均无统计学意义 ; 各试验组无关全身反应不良反应分级差异无统计学意义 受试者接种疫苗后征集性不良事件发生率 第 131 页 / 共 280 页

132 1400 名受试者接种疫苗后第 0~56 天内, 共观察到征集性不良事件 833 例, 发生率为 59.50%, 批次 1 组 209 例, 发生率为 59.71%; 批次 2 组 213 例, 发生率为 60.86%; 批次 3 组 200 例, 发生率为 57.14%; 三个批次组 622 例, 发生率 59.24%; 安慰剂组 211 例, 发生率为 60.29% 各试验组间的有关 无关征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组有关的征集性局部不良反应发生率由高到低依次为红 (12.00%) 硬结(4.10%) 疼痛(3.52%) 瘙痒 (2.67%) 肿 (2.29%) 疹 (1.24%); 全身不良反应发生率由高到低依次为发热 (44.00%) 腹泻 (9.33%) 食欲下降 (8.10%) 烦躁 (6.57%) 恶心呕吐 (4.57%) 疲倦乏力 (3.33%) 变态反应(1.90%) 各试验组之间有关的和无关的各种症状不良反应发生率差异均无统计学意义 受试者接种疫苗后非征集性不良事件发生率 1400 名受试者接种疫苗后第 0~56 天内, 共观察到非征集性不良事件 598 例, 发生率为 42.71%, 各试验组间的有关 无关非征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 在非征集性不良反应中, 批次 1 组 3 例, 发生率为 0.86%; 批次 2 组 3 例, 发生率为 0.86%; 三个批次组 6 例, 发生率 0.57%; 安慰剂组 6 例, 发生率为 1.71% 三个批次组非征集性不良反应发生率由高到低依次为呼吸系统胸及纵膈疾病 (0.38%) 代谢和营养失调(0.10%) 及一般性疾病及接种部 第 132 页 / 共 280 页

133 位症状 (0.10%) 4 个试验组之间有关和无关的各种症状不良事件发生率差异均无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后不良事件发生情况 (0~28 天 ) 受试者接种第一针疫苗后总体不良事件发生率 1400 名受试者接种第一针疫苗后第 0~28 天内, 共观察到总体不良事件 849 例, 发生率为 60.64%, 总体不良反应发生率 45.81%, 各试验组间差异无统计学意义 征集性不良反应中, 批次 1 组 155 例, 发生率为 44.29%; 批次 2 组 157 例, 发生率为 44.86%; 批次 3 组 154 例, 发生率为 44.00%; 三个批次组 466 例, 发生率 44.38%; 安慰剂组 164 例, 发生率为 46.86%, 各试验组间差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后征集性不良事件情况 1400 名受试者接种疫苗后第 0~28 天内, 共观察到征集性不良事件 646 例, 发生率为 46.14%, 各试验组间的有关 无关征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组有关的征集性局部不良反应发生率由高到低依次为红 (8.86%) 硬结(3.33%) 疼痛(2.48%) 瘙痒 (2.00%) 肿 (1.52%) 疹 (0.95%); 全身不良反应发生率由高到低依次为发热 (31.71%) 腹泻 (6.95%) 食欲下降 (5.71%) 烦躁 (4.29%) 恶心呕吐 (3.14%) 疲倦乏力 (2.29%) 变态反应(1.33%) 各试验组之间有关和无关各种症状不良反应发生率差异无统计学意义 第 133 页 / 共 280 页

134 各试验组不良反应中, 局部反应和全身反应不同级别之间的差异均无统计学意义 ; 各试验组无关全身反应差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后非征集性不良事件情况 1400 名受试者接种第一针疫苗后第 0~28 天内, 共观察到非征集性不良事件 410 例, 发生率为 29.29%, 各试验组间的有关 无关非征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组非征集性不良反应发生率由高到低依次为呼吸系统胸及纵膈疾病 (0.29%) 代谢和营养失调(0.10%) 及一般性疾病及接种部位症状 (0.10%) 各试验组之间有关和无关的各种症状不良事件发生率差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后 30 分钟不良事件情况 1400 名受试者接种第一针疫苗后 30 分钟, 共观察到总体不良事件 95 例, 不良反应发生率为 6.79%,; 各试验组不良反应中, 以 1 级不良反应为主, 全身不良反应有 1 例发生, 无 4 级不良反应 各试验组间差异无统计学意义 受试者接种第一针疫苗后 0~7 天不良事件情况 1400 名受试者接种第一针疫苗后 30 分钟内, 共观察到总体不良事件 673 例, 发生率为 48.07%, 各试验组差异无统计学意义 总体不良反应为 45.67%, 征集性不良反应发生率为 45.62%, 非征集性不良反应发生率为 6.72%, 各试验组差 第 134 页 / 共 280 页

135 异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后不良事件发生情况 (0~28 天 ) 受试者接种第二针疫苗后不良事件情况 1324 名受试者接种第二针疫苗后第 0~28 天内, 共观察到总体不良事件 581 例, 发生率为 43.88%, 各试验组间差异无统计学意义 总体不良反应发生率和征集性不良反应发生率为 30.99%,32.12%, 非征集性不良反应发生率为 0.36%, 各试验组间差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后征集性不良事件情况 1324 名受试者接种疫苗后第 0~28 天内, 共观察到征集性不良事件 415 例, 发生率为 31.34%, 各试验组间的有关 无关征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组征集性局部不良反应发生率由高到低依次为红 (4.33%) 疼痛(1.21%) 硬结(0.91%) 肿(0.80%) 瘙痒 (0.70%) 疹 (0.30%); 全身不良反应发生率由高到低依次为发热 (21.93%) 食欲下降 (3.42%) 腹泻 (3.22%) 烦躁 (2.92%) 恶心呕吐(1.91%) 疲倦乏力(1.31%) 变态反应 (0.70%) 疲倦乏力发生率差异有统计学意义, 安慰剂组高于试验疫苗组 其他症状差异无统计学意义 各试验组不良反应中的局部 全身反应的不良反应分级 第 135 页 / 共 280 页

136 差异均无统计学意义 ; 各试验组无关全身反应的不良反应分级差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后非征集性不良事件情况 1324 名受试者接种疫苗后第 0~28 天内, 共观察到非征集性不良事件 260 例, 发生率为 19.64%, 各试验组间的有关 无关非征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组非征集性不良反应症状仅有呼吸系统胸及纵膈疾病发生率为 0.10% 各试验组间有关和无关症状不良事件发生率差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 30 分钟不良反应情况 1324 名受试者接种第二针疫苗后 30 分钟, 共观察到有关不良反应 60 例, 发生率为 4.53%, 均为发热反应 各试验组间差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0~7 天不良事件情况 1324 名受试者接种第一针疫苗后 30 分钟内, 共观察到总体不良事件 435 例, 发生率为 32.85%, 总体不良反应和征集性不良反应发生率均接近, 各试验组差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0~7 天征集性不良事件情况 1324 名受试者接种疫苗后第 0~7 天内, 共观察到征集性不良事件 415 例, 发生率为 31.34%, 各试验组间的有关 无关征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 第 136 页 / 共 280 页

137 三个批次组有关的征集性局部不良反应发生率由高到低依次为红 (4.33%) 疼痛(1.21%) 硬结(0.91%) 肿 (0.80%) 瘙痒 (0.70%) 皮疹 (0.30%); 全身不良反应发生率由高到低依次为发热 (21.93%) 食欲下降 (3.42%) 腹泻 (3.12%) 烦躁(2.92%) 恶心呕吐(1.91%) 疲倦乏力 (1.31%) 变态反应(0.70%) 各试验组之间有关的和无关的各种症状不良反应发生率中仅有关反应中的疲倦乏力症状的组间发生率差异有统计学意义, 各试验组中发生率由高到低依次为批次 2 组 (2.97%) 安慰剂组(2.42%) 批次 1 组 (0.61%) 及批次 3 组 (0.30%) 各试验组不良反应中的局部 全身反应的不良反应分级差异均无统计学意义 ; 各试验组无关全身反应的不良反应分级差异无统计学意义 受试者接种第二针疫苗后 0~7 天非征集性不良事件情况 1324 名受试者接种第二针疫苗后第 0~7 天内, 共观察到非征集性不良事件 62 例, 发生率为 4.68%, 各试验组间的有关 无关非征集性不良事件发生率差异均无统计学意义 三个批次组非征集性不良反应症状仅有呼吸系统胸及纵膈疾病发生率为 0.10% 各试验组间有关和无关症状不良事件发生率差异无统计学意义 受试者接种疫苗后严重不良事件 第 137 页 / 共 280 页

138 本次研究共发现 6 例严重不良事件, 其中批次 1 组 安慰剂组各 2 例, 批次 2 组 批次 3 组各 1 例 经 DSMB 最终确认,5 例与疫苗接种可能有关 ( 随访均痊愈康复 ),1 例与疫苗接种无关 审评认为, 本品的 Ⅱ-Ⅲ 期临床试验中均选择 6-35 月龄婴幼儿作为受试者, 而在此三批一致性研究中选择 6-59 月龄婴幼儿作为受试者, 本品上市适用人群定位需进一步综合考虑 ( 二 ) 生物统计专业审评意见数据来源申办者递交了 Ⅰ 期临床研究报告 统计分析报告,Ⅱ 期临床研究报告 统计分析报告,Ⅲ 期临床研究报告 统计分析报告,III 期临床试验数据库 ( 包括数据管理方提供的原始数据库及变量说明 第四军医大学提供的分析数据库及变量说明 ) 连续三批临床试验数据库 ( 包括数据管理方提供的原始数据库及变量说明 第四军医大学提供的分析数据库及变量说明 ),III 期临床试验数据管理总结报告 未提交 Ⅰ-Ⅲ 期的统计分析计划书, 以及分析用的 SAS 程序 未提供 I/II 期试验的临床数据库 数据格式不符合 CDE 发布的 关于 EV71 疫苗完成 Ⅲ 期临床试验后的临床数据库及统计结果申报资料的若干要求 第 138 页 / 共 280 页

139 其它数据和程序审评中有效性评价是基于 III 期试验递交原始数据库所包含的数据集完成, 而安全性则需基于 I-III 期试验递交原始数据库所包含的安全性数据进行汇总评价, 由于申办者未提交 I/II 期临床数据库, 故本次审评仅针对 III 期试验进行, 审评中未定义新变量及衍生形成新数据集 审评中数据质量核查针对申报的所有数据库及数据管理相关资料完成, 亦未定义新变量及生成新数据集 专业审评要点 : 数据质量的审评临床现场核查由北京市食品药品监督管理局 ** 等组织, 核查报告结论显示原始记录未发现真实性问题, 与申报资料一致 审评时针对所报数据库与相关数据管理文档进行了核查, 确认该品种 III 期试验的分析数据集可从原始数据集衍生, 分析数据集中的各主要指标数据可根据原始数据集获得 但 III 期临床试验数据库中不良事件数据存在多处逻辑问题, 举一例如下 : 疫苗编号 940 号第 1 针接种后第 0-7 天征集性不良事件 ( 全身症状 ) 为 无, 但在随后又记录了腹泻 食欲下降不良事件 此类矛盾之处需请申办方进一步清理不良事件数据, 核实不良事件统计的完整性和准确性 第 139 页 / 共 280 页

140 统计分析的审评本品完成 Ⅰ-Ⅲ 期的全部临床研究共 3 个试验 其中 I II 期试验简介如下 : I 期试验采取单中心 随机双盲 对照设计, 试验疫苗为 EV71 灭活疫苗, 以无疫苗成分的氢氧化铝稀释液作为安慰剂对照 在受试者知情同意的前提下, 对 岁成人 3-11 岁儿童 以及 6-35 月龄婴幼儿进行临床研究 本试验共入组 168 名健康受试者, 其中成人 36 人 ( 随机分为 3 组, 每组 12 人 ), 儿童 36 人 ( 随机分为 3 组, 每组 12 人 ), 婴幼儿 96 人 ( 随机分为 4 组, 每组 24 人 ) 成人于第 0 14 和 28 天接种 3 剂 EV71 灭活疫苗或安慰剂, 儿童和婴幼儿于第 0 28 和 56 天接种 3 剂 EV71 灭活疫苗或安慰剂 本试验顺序为, 先完成成人组全程免疫安全性观察后, 再开始儿童组和婴幼儿组, 每个年龄组从低剂量到高剂量, 分阶段进行不同人群试验疫苗安全性和耐受性研究 Ⅰ 期临床研究结果和结论如下 : 本次研究不良反应总体发生率为 33.3%( %), 其中 1 级 ( 轻度 ) 不良反应 29 例, 发生率为 17.3%( %); 2 级 ( 中度 ) 不良反应 23 例, 发生率为 13.7%( %); 3 级 ( 重度 ) 不良反应 4 例, 发生率为 2.4%( %) 所观察到的不良反应以 1 2 级反应为主 3 级不良反应发生率低, 在各年龄组中发生率均不足 3% 未见严 第 140 页 / 共 280 页

141 重不良反应 接种疫苗后局部和全身不良反应发生率分别为 3.6% 和 31.5% 在所有受试人群中, 常见局部不良反应包括注射部位疼痛 硬结和搔痒 ; 全身不良反应以发热症状最为多见, 发生率为 25.6%, 其它症状包括头痛 烦躁 腹泻 全身瘙痒 / 风团 恶心呕吐 嗜睡 / 乏力 食欲下降 散在小疹和咳嗽 婴幼儿组免前中和抗体阴性者, 在免后 28 天 ( 一针接种 ), 抗体阳转率为 80%-100%,GMT 为 ,GMT 增长倍数为 倍, 1:32 阳性率约为 50.0%; 在免后 56 天 ( 两针接种 ), 各组抗体阳转率均达到 100%,GMT 为 ,GMT 增长倍数为 倍,100U 组中和抗体 1:32 阳性率为 80.0%,200U 组 1:64 阳性率为 80.0%, 400U 组 1:128 阳性率为 88.9% 表明, 疫苗在空白人群中, 有明显的剂量效应相关性, 且接种两针疫苗中和抗体水平显著高于一针疫苗 免后 84 天 ( 三针接种后 ) 各组血清抗体 GMT 达到 ,GMT 增长倍数为 倍, 显示第三针加强后受试者对疫苗免疫产生的十分显著的回忆反应 II 期试验为分层随机双盲安慰剂对照设计 在单一中心, 选择 540 名健康受试者, 其中 6~11 月龄 300 人 12~23 月龄 120 人 24~35 月龄 120 人 接种两针不同剂量铝佐剂疫 第 141 页 / 共 280 页

142 苗或无佐剂疫苗或安慰剂, 评价 EV71 灭活疫苗在目标人群中的免疫原性及安全性 受试者经知情同意 入选及排除标准筛选合格后入组 在 6~11 月龄层, 随机将受试者分为 5 组, 每组 60 人, 分别为 100U( 铝佐剂 ) 组 200U( 铝佐剂 ) 组 400U( 铝佐剂 ) 组,200U( 无佐剂 ) 组及安慰剂组 ; 在 12~23 月龄和 24~35 月龄层, 随机将受试者分为 4 组, 每组 30 人, 分别为 100U( 铝佐剂 ) 组 200U( 铝佐剂 ) 组 400U( 铝佐剂 ) 组及安慰剂组 所有受试者按照 0, 28 天免疫程序接种两针试验疫苗或安慰剂 对于 6~11 月龄婴幼儿受试者, 免疫接种前及接种后第 8 天, 全程免疫后第 28 天, 采集尿液样本进行尿常规检查 观察每针接种后 30 分钟即时反应和 0~7 天局部反应和全身反应 中和抗体效价检测时间点为免前及免后第 28 天 第 56 天 Ⅱ 期临床研究结果和结论如下 : 研究中不良反应总体发生率为 54.6% 其中,1 级 ( 轻度 ) 不良反应 152 例 ( 占不良反应的 51.5%); 2 级 ( 中度 ) 不良反应 132 例 ( 占 44.7%); 3 级 ( 重度 ) 不良反应 11 例 ( 占 3.7%) 所观察到的不良反应以 1 2 级反应为主 ;3 级不良反应发生率低, 在各年龄组中发生率均不足 3% 研究期间发生 3 例严重不良事件, 经研究者判断与疫苗接种无关 接种疫苗后局部和全身不良反应发生率分别为 3.2% 和 53.2% 在所有受试人群中, 常见局部不良反应包括接种部 第 142 页 / 共 280 页

143 位疼痛 瘙痒和发红 ; 全身不良反应以发热症状最为多见, 发生率为 42.6%, 其它症状包括烦躁 腹泻 呕吐 嗜睡 厌食 变态反应 扁桃体炎 / 咽炎 感冒 / 上感症状 胃肠型感冒和疱疹性咽峡炎 在两针免疫程序条件下, 试验疫苗在不同年龄层受试者中, 以及在免前中和抗体阴性和阳性受试者中, 均表现出基本一致的免疫诱导效应 即受试者完成两针疫苗接种后, 中和抗体阳性率可达 81.82%-100%, 且 GMT 值 ( ) 均出现显著性升高, 增长倍数范围在 倍之间 在 100U-400U 剂量范围内, 试验疫苗在免疫原性分析人群中均具有较高免疫原性, 其中以 400U 剂量的免疫诱导效应最为显著, 表现出剂量效应关系 上述研究结果与 I 期临床结论基本一致, 进一步支持试验疫苗的两针免疫接种程序 400U 剂量所诱导的免疫效应最为理想 ( 针对不同年龄层免前中和抗体阴性受试者, 两针免疫后中和抗体阳性率可达到 95%-100%,GMT 值范围在 ) Ⅲ 期临床试验作为评价该品种安全性和有效性的上市注册的关键性研究, 是生物统计学审评的重点, 疫苗有效性的审评是基于 III 期试验递交的分析数据集完成, 而疫苗安全性的审评则应基于 I-III 期试验的安全性数据进行汇总分析和评价, 由于申办者未提交 I/II 期临床数据库, 故本次审评 第 143 页 / 共 280 页

144 仅针对 III 期试验进行 研究设计和终点 (1) 研究设计本研究采用多中心 随机 双盲 安慰剂对照的优效性临床试验设计 选择江苏省赣榆县疾病预防控制中心 射阳县疾病预防控制中心和泰兴市疾病预防控制中心为分中心 有效性评价 : 在本项研究中, 对所有接种过第一针疫苗的受试者在接种后第 57 天至第 14 个月期间, 通过建立肠道病毒病监测系统, 及时发现肠道病毒病病例 在肠道病毒病监测期间, 当监测对象 ( 所有接种过第一针的受试者 ) 符合筛查对象要求时, 及时进行登记调查, 在发病 3 天内采集其咽拭子和肛拭子各 1 份进行肠道病毒特异性核酸筛查 根据实验室检测结果, 符合可疑肠道病毒病诊断标准时 ( 如筛查对象采集咽拭子和肛拭子标本中, 至少 1 份标本 EVG CA16 或 EV71 检测 1 项或 1 项以上指标结果为阳性者, 则为可疑肠道病毒病病例 ), 对监测对象再次采集咽拭子 肛拭子进行肠道病毒特异性核酸复检 可疑肠道病毒病病例经复检, 如符合肠道病毒病标准, 则初步诊断为肠道病毒病病例 确认病例是初步判断后, 将病例的临床资料 实验室检测资料和流行病学个案调查资料送交数据安全监查委员会 (DSMB) 审查, 并由其进行最终的确诊或排除 本次研究的肠道病毒病病例包括 EV71 阳性病例 ( 含 EV71 第 144 页 / 共 280 页

145 感染所致疾病和 EV71 型阳性其他病例 ) CA16 型阳性病例以及其他肠道病毒阳性病例 本次临床试验的肠道病毒病例诊断标准如下 : 病例分类及临床诊断依据 分类手足口病病例疱疹性咽峡炎病例呼吸道感染病例消化道感染病例其他病例 病例判断标准 1. 手 足 口 臀等部位中 1 个部位有疹, 有些伴发热等症状 ; 2. 同时有颊部或咽峡部疱疹或溃疡症状者, 按手足口病病例计 ; 3. 有高热 呼吸急促 烦躁不安 惊厥 四肢发凉等症状者, 则判为重症手足口病病例 ; 4. 单纯躯干 四肢 面部等其他部位有疹者不纳入 有颊部或咽峡部疱疹或溃疡症状, 伴发热等症状, 有些伴口部疹 ( 手 足 臀等部位无疹 ) 1. 主要症状为咳嗽 流涕 咽痛 肺部痰鸣音 肺部湿罗音等 2 个呼吸道症状, 或具有 1 个呼吸道症状同时伴发热 ; 2. 同时具有呼吸道症状及消化道症状的按呼吸道感染病例计 1. 主要症状为恶心 呕吐 腹痛 腹泻等 2 个消化道症状, 或具有 1 个消化道症状同时伴发热 单纯发热或其他不属于以上 4 类病例的情况 EV71 阳性病例确诊主要依据 临床诊断 实验室检测 病例确定 手足口病病例 至少满足以下条件之一者 : EV71 感染所致手足口病病例 疱疹性咽峡炎病例 1 肠道病毒 71 型特异性核酸 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 呼吸道感染病例 检测阳性 消化道感染病例 2 分离出肠道病毒, 并鉴定为其他病例肠道病毒 71 型 EV71 阳性其他病例 注 : 病例确定需同时满足临床诊断和实验室检测结果 ;EV71 中和抗体和 IgM 仅为参考 CA16 阳性病例确诊主要依据 临床诊断实验室检测病例确定 手足口病病例疱疹性咽峡炎病例呼吸道感染病例消化道感染病例其他病例 肠道病毒 CoxA16 型特异性核酸 检测阳性 CA16 感染所致手足口病病例 CA16 感染所致疱疹性咽峡炎病例 CA16 阳性其他病例 第 145 页 / 共 280 页

146 注 : 病例确定需同时满足临床诊断和实验室检测结果 其他肠道病毒阳性病例确诊主要依据 临床诊断 实验室检测 病例确定 手足口病病例 其他肠道病毒感染所致手足口病病例 疱疹性咽峡炎病例 肠道病毒 71 型特异性核酸检测其他肠道病毒感染所致疱疹性咽阴性 且肠道病毒 CoxA16 型特峡炎病例 呼吸道感染病例 异性核酸检测阴性 且肠道病毒通用特异性核酸检测阳性 消化道感染病例 其他肠道病毒阳性其他病例 其他病例 注 : 病例确定需同时满足临床诊断和实验室检测结果 免疫原性评价 : 从 3 个研究中心整群抽取大约 1200 名受试者 ( 每个中心约 400 名 ) 为免疫原性的研究对象 在第 0 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 分析受试者免前抗体状况 ; 在第 56 天采血检测抗 EV71 中和抗体, 分析阳转率 GMT GMI 和阳性率, 评价试验疫苗的免疫原性, 并对免前阴性人群做进一步分析 免疫持久性评价 : 在完成免疫原性观察基础上, 对免疫原性亚组受试者继续于第一针免疫后第 8 个月和第 14 个月分别采集血样, 进行抗 EV71 中和抗体检测, 分析阳转率 GMT GMI 和阳性率, 并对免前阴性人群做进一步分析, 分析阳转率 GMT GMI, 以观察疫苗免疫持久性 安全性评价 :(1) 接种期安全性观察 : 对每个受试者在每针次疫苗接种后 30 分钟内进行现场即时反应观察 每针剂接种后 0-28 天内, 由受试者监护人密切观察受试者不良反应 / 事件发生情况, 并自行将观察结果记录在日记卡 研究人 第 146 页 / 共 280 页

147 员系统地收集和记录每针次疫苗接种后 7 天内的征集性不良 / 反应事件, 收集和记录每针次疫苗接种后 28 天内发生的所有非征集性不良事件, 不管强度大小以及是否与疫苗接种有关 (2) 严重不良事件观察 : 在首针疫苗接种后第 0 天至全部观察结束 ( 第 14 个月 ) 期间, 收集和记录所有受试者发生的所有严重不良事件 (SAE) 探索疫苗有效性免疫替代终点 : 以确诊的 EV71 阳性病例为病例组, 每个病例在发病初步确诊后按 1:5 的比例进行匹配, 组成一个探索性分析亚组 所有最终确定的 EV71 阳性病例和对照受试者, 进行第一针疫苗接种后第 56 天抗 EV71 中和抗体滴度检测 计算各个中和抗体滴度值下的敏感度 特异度和约登指数, 当约登指数取值最大时, 相应的阈值则可能为疫苗有效性免疫替代终点 (2) 研究终点保护效果评价指标主要指标 EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的保护率和效果指数 方案中对肠道病毒 71 型 ( 简称 EV71) 感染所致疾病是由 EV71 感染引起的传染病, 其所致疾病在临床上的症状包括脑炎 脑干脑炎 脑脊髓炎 脊髓灰质炎综合征 格林巴利综合征 无菌性脑膜炎 手足口病 疱疹性咽峡炎 急性 第 147 页 / 共 280 页

148 出血性结膜炎 肺水肿 / 肺出血 心肺功能衰竭 严重脑功能衰竭 头痛 发热及呕吐等, 而其中以手足口病及疱疹性咽峡炎最为常见 而临床总结报告中对 EV71 感染所致疾病定义为 : 在 EV71 感染所致疾病病例中, 临床表现为手足口病和疱疹性咽峡炎者, 实验室检测 EV71 特异性核酸阳性, 则可诊断为 EV71 感染所致疾病 审评认为, 两者定义存在一定的偏差 请临床专业审评予以关注和核实 次要指标 EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型感染所致手足口病的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型感染所致疾病重症病例的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型感染所致疾病住院病例的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型阳性病例的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防柯萨奇病毒 A16 型感染所致疾病的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防柯萨奇病毒 A16 型感染所致手足口病的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防柯萨奇病毒 A16 型阳性病例的保护率和 第 148 页 / 共 280 页

149 效果指数 ; EV71 疫苗预防其他肠道病毒感染所致疾病的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防其他肠道病毒感染所致手足口病的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防其他肠道病毒阳性病例的保护率和效果指数 ; EV71 疫苗预防手足口样病例的保护率和效果指数 EV71 疫苗预防手足口病住院病例的保护率和效果指数安全性指标免疫后 0-56 天征集性不良反应分析 : 主要指标免后征集性全身和局部不良反应发生率 ; 免后征集性全身和局部不良反应不同严重程度发生率 ; 免后征集性全身和局部不良反应各症状发生率 次要指标免后非征集性不良反应发生率 ; 免后与接种无关征集性不良事件发生率 ; 免后与接种无关非征集性不良事件发生率 ; 免后与接种无关非征集性不良事件 SAE MedDRA 器官系统分类分析 评价疫苗接种后第 0 天 - 第 14 个月严重不良事件 : 主要指标 第 149 页 / 共 280 页

150 免后第 0-56 天 SAE 发生率 ; 免后第 57 天 - 第 14 个月 SAE 发生率 ; 免后第 0 天 - 第 14 个月 SAE 发生率 次要指标免后第 0-56 天 SAE MedDRA 器官系统分类发生率 ; 免后第 57 天 - 第 14 个月 SAE MedDRA 器官系统分类发生率 免疫原性免疫原性亚组人群主要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体阳转率 ; 次要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体 GMT GMI 和阳性率 免疫原性亚组免前阴性人群主要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体阳转率 ; 次要评价指标 : 第 56 天抗 EV71 中和抗体 GMT GMI 和阳性率 免疫持久性免疫原性亚组人群主要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMT; 次要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMI 和阳性率 阳转率 免疫原性亚组免前阴性人群主要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMT; 次要评价指标 : 第 8 个月和第 14 个月抗 EV71 中和抗体 GMI 和阳性率 阳转率 探索疫苗有效性免疫替代终点指标主要评价指标 : 预防 EV71 感染所致疾病抗 EV71 中和抗体免疫替代终点 第 150 页 / 共 280 页

151 次要评价指标 : 预防 EV71 阳性病例抗 EV71 中和抗体免疫替代终点 针对研究设计和终点部分, 审评认为, 该试验设计合理, 为多中心 随机 双盲 安慰剂对照的优效性设计, 试验目的明确, 建立的统计假设正确, 样本量估算合理 主要和次要终点指标明确, 但主要终点指标 EV71 感染所致疾病的定义在方案和总结报告中存在一定偏差, 需要申办者给予解释 请临床专业审评予以关注和核实 统计学方法 1 保护效果分析包括监测期数据的描述性分析 保护率及其 95% 可信区间的估计 其中, 监测期数据的描述性分析内容包括 : 1.1 按例数描述分析监测期监测到的有不适症状接受采样的受试者总数量, 以及其在试验组和对照组的分布情况 1.2 按例数描述性分析所有有不适症状受试者所患疾病的分类, 每类病例的频数 百分比等, 以及其在试验组和对照组的分布情况 1.3 按例数描述分析各类病例中肠道病毒阳性总检出情况, 以及各类阳性 (EV71 CA16 其他肠道病毒) 病例的分布情况, 在试验组和对照组的分布情况 1.4 以周为单位对监测到的受试者例数 各类病例的例数 第 151 页 / 共 280 页

152 阳性检出例数 各类阳性病例的例数的时间分布进行分析 1.5 对以上分析按人群分布 ( 不同年龄层 不同性别 ) 地 区分布 ( 不同中心 ) 进行描述性分析并进行比较 1.6 上述 5 点分析内容为按例数进行的统计, 还需按例次进 行上述所有的描述性分析和比较 1.7 对 EV71 阳性病例进行症状谱的描述性分析, 包括症状 的频数 百分比 对症状按 MedDRA 系统分类的构成比 对所有监测到的以上由 EV71 感染所致疾病并且 EV71 核酸检测或病毒分离阳性的受试者按以下公式计算保护率 及保护率的 95% 可信区间 (Poisson 回归模型 ) 计算效果指 数 发病密度 全程接种的发病人数全程接种者有效观察人年数对照组发病密度 100% 试验疫苗组发病密度保护率 (%) 100 对照组发病密度对照组发病密度效果指数 试验组发病密度 审评认为, 监测期数据的充分分析较为重要, 既能反映 该临床试验所建立的疾病监测系统的灵敏度和特异度, 又为 最终数据提供溯源, 是反映数据质量的一个方面 尤其监测 期所患疾病的分类分析, 以及时间分布分析等 但申办者递 交的统计分析报告中未包括该内容, 需要补充分析 2 免疫原性和免疫持久性分析 对总体 各中心 各月龄层的免疫原性亚组人群分别进 行疫苗免疫效果的分析, 其中免疫原性分析包括免疫前后 第 152 页 / 共 280 页

153 ( 第 56 天 ) 抗体阳性率 抗体 GMT GMI, 免疫持久性分析包括免疫前后 ( 第 8 14 个月 ) 抗体阳性率 抗体 GMT GMI 另绘制抗体滴度逆分布曲线图 3 安全性指标参照 国际医学用语词典 (MedDRA,12.0 版 ) 系统 / 器官分类体系对所有不良事件进行编码和分类 列出各组不良事件及不良反应人次和人数, 计算总体 各中心 各月龄层 各组不良事件及不良反应发生率和相应的严重程度, 某一研究对象多次发生同一不良事件 ( 反应 ) 时, 取严重程度最重的一次 组间不良事件 ( 反应 ) 发生率采用 Fisher 确切概率法比较 0-7 天征集性不良事件按与疫苗接种有关进行分析,0-28 天非征集性不良事件和 8-28 天的征集性不良事件的分析按研究判定的相关性进行统计和检验比较 SAE 的评价为自疫苗接种开始观察到的所有严重不良事件, 比较分析试验组与对照组 SAE 发生率是否存在统计学差异 特别对 SAE 报告中诊断为手足口病的病例, 按不同病原进行统计并作组间比较 针对统计学方法部分, 审评认为, 保护效果 免疫原性和持久性分析所采用方法为通用方法, 保护率 发病密度 GMT GMI 等指标的计算公式准确, 采用 Poisson 回归模型估算保护率及其 95% 可信区间正确合理 第 153 页 / 共 280 页

154 病例的处置 人口统计学和基线特征 3.1 病例的处置和流向共有 名志愿者完成知情同意, 依据入选排除标准排除 2369 名, 共 名受试者随机入组 (EV71 疫苗组 :5044 例 安慰剂组 :5033 例 ), 全部入组受试者均完成第一针疫苗接种, 均进入安全性分析集 SS 和第一针分析集 SS1; 其中完成两针接种受试者 9430 例 (EV71 疫苗组 :4719 例 安慰剂组 :4711 例 ) 均进入第二针分析集 SS2; 第二针接种时脱落 647 例 (EV71 疫苗组 :325 例 安慰剂组 :322 例 ), 脱落率为 6.42%(EV71 疫苗组 :6.44% 安慰剂组:6.40%) 例被随机分组 试验疫苗组 : 5044 例接种第一针 4719 例接种第 二针 安慰剂对照组 : 5033 例接种第一针 4711 例接种第 二针 3 例失访 4 例失访 1 例死亡 5041 例进入监测期 5028 例进入监测期 126 例外出失访 15 例迁居 2 例死亡 1 例非本村居民 125 例外出失访 19 例迁居 3 例死亡 2 例非本村居民 4897 例完成 14 个 月随访 4879 例完成 14 个 月随访 图 8.1 受试者完成试验简图 第 154 页 / 共 280 页

155 全部入组受试者 例中 8 例在第 56 天 5 个月 8 个月 11 个月 14 个月随访时的状态均为失访 ( 外出 / 迁居 / 死亡 ), 不纳入保护效果分析, 故 例 (EV71 疫苗组 :5041 EV71 疫苗组 (%) 安慰剂组 (%) 合计 (%) 随机入组 5044(100.0) 5033(100.0) 10077(100.0) 有效性分析人群 FAS 5041(99.94) 5028(99.90) 10069(99.92) 接种后 56 天内死亡 0( 0.00) 1( 0.02) 1( 0.01) 各随访状态均失访 3( 0.06) 4( 0.08) 7( 0.07) PPS 4587(90.94) 4578(90.96) 9165(90.95) 接种后 56 天内死亡 0( 0.00) 1( 0.02) 1( 0.01) 各随访状态均失访 3( 0.06) 4( 0.08) 7( 0.07) 未完成全程接种 322( 6.38) 318( 6.32) 640( 6.35) 第 2 针接种错误疫苗 0( 0.00) 2( 0.04) 2( 0.02) 未完成接种后 56 天安全性观察 3( 0.06) 3( 0.06) 6( 0.06) 接种期间接受血液制品 3( 0.06) 3( 0.06) 6( 0.06) 免后 57 天 -14 个月定期随访脱落 126( 2.50) 124( 2.46) 250( 2.48) 例 安慰剂组 :5028 例 ) 进入保护效果分析 FAS 集 ; 其中有 9776 例受试者完成第 14 个月访视 (EV71 疫苗组 :4897 例 安慰剂 组 :4879 例 ), 最终符合方案 9165 例 (EV71 疫苗组 :4587 例 安慰剂组 :4578 例 ) 进入保护效果分析 PPS 集 审评认为, 该 Ⅲ 期试验进入 FAS 集和 PPS 集均有不少的 失访或脱落病例, 但未说明处理脱落和缺失数据的具体方 法 需要申办者予以核实, 特别是对主要终点变量如何填补, 必要时按保守方法 ( 如视为发生 EV71 感染所致疾病 ) 进行 分析计算 全部入组受试者 例中 1293 例 (EV71 疫苗组 :648 例 安慰剂组 :645 例 ) 计划接种前采血, 进入免疫原性亚组分 析人群, 申办者称免疫原性人群是由整群抽样完成, 但未提 第 155 页 / 共 280 页

156 供具体操作说明及相关文件, 需进一步补充资料 完成接种前采血 1291 例 (EV71 疫苗组 :648 例 安慰剂组 :643 例 ) 均有血清检测值, 缺失数据采用 LOCF(last observation carry forward) 方法估计, 进入免疫原性分析 FAS 集 ;1236 例 (EV71 疫苗组 : 622 例 安慰剂组 : 614 例 ) 受试者完成第 56 天采血, 其中 1 例无血清检测值, 最终 1150 例 (EV71 疫苗组 :579 例 安慰剂组 :571 例 ) 进入免疫原性分析 PPS 集 第 156 页 / 共 280 页

157 EV71 疫苗组 安慰剂组 合计 编号 月龄层 入组 FAS PPS mpps1 mpps2 入组 FAS PPS mpps1 mpps2 入组 FAS PPS mpps1 mpps2 1 6~11 月龄 ~23 月龄 ~35 月龄 赣榆 射阳 泰兴 合计 说明 : 1 mpps1 即按方案 1 修订的 PPS: 在 PPS 基础上剔除 8 14 个月无血清检测结果者 可疑隐性感染和 EV71 阳性病例, 其中可 疑隐性感染定义为 56 天到 8 个月 56 天到 14 个月 8 个月到 14 个月抗体有 4 倍及以上增长 ; 2 mpps2 即按方案 2 修订的 PPS: 在 PPS 基础上剔除 8 14 个月无血清检测结果者 ; 免疫持久性分析的研究对象是免疫原性亚组人群 纳入 FAS 集和 PPS 集均要求 符合纳入标准, 进行随机化, 按方案完成全程 2 针次接种,56 天血清 EV71 中和抗体阳性, 完成第 8/14 月采血, 并具有有效 EV71 中和抗体检测结果, 且在第 8/14 个月内未患 EV71 感染所致疾病的受试者, PPS 集还要求 免前 EV71 中和抗体水平阴性 申办者分析时按 0-8 个月和 0-14 个月分别进行了分析 全部入组受试者 例中 9804 例 (EV71 疫苗组 : 4645 例 安慰剂组 : 4632 例 ) 完成第 56 天采血, 其中 6 例无血清检测值, 最终 9789 例 (EV71 疫苗组 :4902 例 安慰剂组 :4887 例 ) 进入有效性抗体水平探索数据集 审评认为, 病例的人群划分方法基本合理, 审评分析和验算结果与申报结果基本一致 申办者还建立了修订的 PPS 集 mpps1 和 mpps2 作为敏感性分析结果, 但未提供锁定数据库的盲态审核决议, 需补充 第 157 页 / 共 280 页

158 年龄亚组指标试验组安慰剂组 P 值 6~11 月龄 12~23 月龄 24~35 月龄 合计 人数 年龄 ( 月 ) 8.73± ± 身高 (cm) 73.77± ± 体重 (kg) 10.85± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人数 年龄 ( 月 ) 17.35± ± 身高 (cm) 82.20± ± 体重 (kg) 12.75± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人数 年龄 ( 月 ) 28.79± ± 身高 (cm) 91.48± ± 体重 (kg) 15.16± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人数 年龄 ( 月 ) 18.40± ± 身高 (cm) 82.71± ± 体重 (kg) 12.95± ± 性别比 ( 男 / 女 ) 人口统计学等基线特征 在不同年龄亚组, 试验组与安慰剂组年龄 身高 体重 和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 在不同年龄亚组, 预防效果受试者试验组与安慰剂组年 龄 身高 体重和性别四项指标均衡, 具有良好的可比性 三个分中心的 1291 名受试者, 接种疫苗前 EV71 中和抗 体阳性 205 人, 阳性率为 15.88% 其中试验组 648 人, 阳性 94 人, 阳性率为 14.51%,GMT 为 1:7.34; 安慰剂组 643 人, 阳性 111 人, 阳性率为 17.26%,GMT 为 1:7.94 试验组与 安慰剂组免前基线水平无差异 统计复核验算结果与申报结果一致, 审评认为基线两组 第 158 页 / 共 280 页

159 均衡, 对试验结果无影响 结果和结论 (1) 疗效评价保护效果评价观察期间共发现 EV71 阳性病例 119 例 CA16 型阳性病 表 EV71 阳性病例概况 (FAS) EV71 疫苗组 安慰剂组 合计 (5041 例 ) (5028 例 ) (10069 例 ) Fisher_P 疾病名称 例次 例数发生率例次 例数发生率例次 例数发生率 各系统合计 < 手足口病 < 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染病例 消化道感染病例 其它阳性病例 表 EV71 阳性病例概况 (FAS)( 病毒阳性 ) EV71 疫苗组 安慰剂组 合计 (5041 例 ) (5028 例 ) (10069 例 ) Fisher_P 疾病名称 例次 例数发生率例次 例数发生率例次 例数发生率 各系统合计 手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染病例 消化道感染病例 其它阳性病例 表 EV71 阳性病例概况 (PPS) EV71 疫苗组 安慰剂组 合计 (4587 例 ) (4578 例 ) (9165 例 ) Fisher_P 疾病名称 例次 例数发生率例次 例数发生率例次 例数发生率 各系统合计 < 手足口病 < 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染病例 消化道感染病例 其它阳性病例 表 EV71 阳性病例概况 (PPS)( 病毒阳性 ) EV71 疫苗组 安慰剂组 合计 (4587 例 ) (4578 例 ) (9165 例 ) Fisher_P 疾病名称 例次 例数发生率例次 例数发生率例次 例数发生率 各系统合计 手足口病 疱疹性咽峡炎 第 1592 页 / 共 页 呼吸道感染病例 消化道感染病例 其它阳性病例

160 例 1113 例以及其他肠道病毒阳性病例 1677 例 审评认为, 方案中明确提出进行监测期数据的描述性分 析, 包括所有有不适症状受试者接受采样的受试者总数量 所患疾病的分类 时间分布等, 但统计分析报告中未涵盖该 内容, 需要补充分析 主要疗效评价 : 表 EV71 病毒感染所致疾病发病密度 ( 总体 ) FAS PPS 发病数人年数 * 发病密度 (%,95%CI) 发病数人年数发病密度 (%,95%CI) EV71 疫苗组 (0.042,0.242) (0.046,0.263) 安慰剂组 (1.576,2.361) (1.629,2.462) 保护率 (95%CI) P 值 保护率 (95%CI) P 值 EV71 疫苗组 / 安慰剂组 94.8(87.2,97.9) < (86.5,97.8) < 效果指数 (95%CI) P 值 效果指数 (95%CI) P 值 安慰剂组 /EV71 疫苗组 19.16(7.80,47.09) < (7.43,44.98) < * 发病密度及保护率采用 Poisson 回归模型计算 申办者认为 EV71 疫苗预防 EV71 感染所致疾病的保护 率 (PPS) 为 94.5%(95%CI 为 86.5%-97.8%), 效果指数为 18.28(95%CI 为 ) 但审评认为, 该结果仅包含手 足口病和疱疹性咽峡炎不合理, 而应包含对 EV71 阳性的所 有病例的保护效果 故其主要疗效应采用 EV71 阳性所有病 例的保护率 ( 申报结果显示为 87.3%,95%CI 为 77.4%-92.9%, 保护效果指数为 7.90,95%CI 为 ), 由于申报资料 对 FAS 集中脱落病例和失访病例的具体数据处理未明确说 明, 故需待申办者进一步补充资料后进行审评核算 第 160 页 / 共 280 页

161 因方案中未交待计算人年数时选取的时间截点, 审评时采用 最后一次随访日期减去第 56 天随访日期 +1 进行复核, 所得人年数结果及发病密度的 95% 可信区间估计与申报结果不一致, 故需申办者对此进一步阐释说明 次要疗效评价 : EV71 疫苗对 EV71 感染所致手足口病保护率为 94.3% (95%CI 为 86.1%-97.7%), 效果指数为 17.67(95%CI 为 ) EV71 疫苗预防重症 EV71 感染所致疾病保护率为 100.0%(95%CI 为 42.4%-100.0%) EV71 疫苗预防住院 EV71 感染所致疾病保护率为 100.0%(95%CI 为 82.9%-100.0%) EV71 疫苗对 EV71 阳性所有病例保护率为 87.3% (95%CI 为 77.4%-92.9%), 保护效果指数为 7.90(95%CI 为 ) EV71 疫苗预防 CA16 感染所致疾病保护率为 6.1% (95%CI 为 -10.2%-20.0%), 效果指数为 1.07(95%CI 为 ), EV71 疫苗对 CA16 感染所致疾病无预防保护作用 EV71 疫苗预防 CA16 感染所致手足口病保护率为 7.5% (95%CI 为 -9.9%-22.1%), 效果指数为 1.08(95%CI 为 ), EV71 疫苗对 CA16 感染所致手足口病无预防保 第 161 页 / 共 280 页

162 护作用 EV71 疫苗预防 CA16 阳性病例保护率为 3.7%(95%CI 为 -8.2%-14.3%), 效果指数为 1.04(95%CI 为 ), EV71 疫苗对 CA16 阳性病例无预防保护作用 EV71 疫苗预防其他肠道病毒感染所致疾病保护率为 16.5%(95%CI 为 1.6%-29.2%), 效果指数为 1.20(95%CI 为 ) EV71 疫苗预防其他肠道病毒感染所致手足口病保护率为 15.4%(95%CI 为 -1.0%-29.2%), 效果指数为 1.18(95%CI 为 ) EV71 疫苗对其他肠道病毒感染所致手足口病无预防保护作用 EV71 疫苗预防其他肠道病毒阳性病例保护率为 3.3% (95%CI 为 -6.2%-11.9%), 效果指数为 1.03(95%CI 为 ), EV71 疫苗对其他肠道病毒阳性病例无预防保护作用 EV71 疫苗预防手足口样病例保护率为 21.0%(95%CI 为 11.9%-29.2%), 效果指数为 1.27(95%CI 为 ) EV71 疫苗预防手足口病住院病例保护率为 72.3% (95%CI 为 45.8%-85.8%), 效果指数为 2.68(95%CI 为 ) 免疫原性评价本次研究共有 1150 名受试者 ( 试验组 579 名, 对照组 571 第 162 页 / 共 280 页

163 名 ) 进入 PP 集进行免疫原性评价 试验组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体阳性率 ( 1:8) 为 98.79%, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 95.51%,GMT 为 1:165.79,GMI 为 安慰剂组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体的阳性率 ( 1:8) 为 19.61%, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 3.50%,GMT 为 1:8.90,GMI 为 1.08 试验组与安慰剂组间首针免后第 56 天抗体阳性率 ( 1:8) 阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差别均具有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 共有 960 名接种疫苗前 EV71 中和抗体阴性受试者 ( 试验组 492 名 安慰剂组 468 名 ) 完成了免疫原性评价 试验组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体的阳转率 ( 1:8) 为 98.58%,GMT 为 1:103.44,GMI 为 安慰剂组首针免后 56 天的 EV71 中和抗体阳转率 ( 1:8) 为 2.35%,GMT 为 1:4.34,GMI 为 1.09 试验组与安慰剂组间首针免后第 56 天抗体阳转率 ( 1:8) GMT GMI 差别均具有统计学意义, 试验组高于安慰剂组 第 163 页 / 共 280 页

164 免疫持久性评价受试者接种疫苗后, 有 1098 人完成首针免后第 8 个月免疫持久性观察,EV71 中和抗体阳性 ( 1:8)700 人 其中试验组 550 人,EV71 中和抗体阳性率 ( 1:8) 为 99.27%; GMT 为 1:88.77; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 92.00%,GMI 为 安慰剂组 548 人, 抗体阳性率 ( 1:8) 为 28.10%;GMT 为 1:12.50; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 14.50%,GMI 为 1.50 试验组与安慰剂组间首针免后第 8 个月抗体阳性率 ( 1:8) 阳转率( 1:8) GMT GMI 均有统计学差异, 试验组高于安慰剂组 受试者接种疫苗后, 有 1050 人完成首针免后第 14 个月免疫持久性观察,EV71 中和抗体阳性 ( 1:8)705 人 其中试验组 528 人,EV71 中和抗体阳性率 ( 1:8) 为 99.24%, GMT 为 1:92.12; 与接种前中和抗体比较, 阳转率 ( 1:8) 为 90.15%,GMI 为 安慰剂组 522 人, 抗体阳性率 ( 1:8) 第 164 页 / 共 280 页

165 为 34.67%,GMT 为 1:13.19; 与接种前中和抗体比较, 抗体阳转率 ( 1:8) 为 20.50%,GMI 为 1.59 试验组与安慰剂组间首针免后第 14 个月抗体阳性率 ( 1:8) 抗体阳转率( 1:8) GMT GMI 均有统计学差异, 试验组高于安慰剂组 免疫替代指标的探索分析疫苗有效性免疫替代终点探索分析亚组共包括 87 例 EV71 感染所致疾病病例 (98 例病例中有 11 例未做配对调查被排除 ) 和 422 例没有发生 EV71 感染所致疾病的受试者 ( 另有 11 例对照因 EV71 病毒 PCR 检测阳性和 6 例重复配对被排除 ) 在 EV71 中和抗体阈值为 1:16 时, 约登指数最大, 约登指数 灵敏度和特异度分别为 和 ; 因此 EV71 中和抗体滴度在 1:16 时, 能有效的区分 EV71 感染所致疾病病例和非病例 (2) 安全性评价审评计算的不良事件统计数据与递交的统计报告中数值有一些出入, 见下表 征集性局部反应不良事件发生例次复核结果与原结果 第 165 页 / 共 280 页

166 不一致 与研究疫苗有关的不良事件发生例数与原结果不一致 ( 例次未复核 ) 与研究疫苗无关的不良事件发生例数与原结果不一致 ( 例次未复核 ) 审评中发现有以上不一致需申办者解释说明, 另尚需临床审评进一步进行评价 此外建议企业根据 Ⅰ-Ⅲ 期试验的安全性数据进行汇总分析, 并请补充提交 Ⅰ Ⅱ 期数据库 (3) 在特殊人群 / 亚组人群中的发现递交的统计分析报告中对以下因素进行了分层分析 : 不同中心 月龄组的保护效果 免疫原性 持久性和安全性评价 其中, 保护效果的评价还按性别进行了分层分析, 另外, 还按 57 天 -5 个月 57 天 -8 个月 57 天 -11 个月 57 天 -14 个月分别进行了保护效果的分层分析 ; 第 166 页 / 共 280 页

167 免疫持久性按照 0-8 个月 0-14 个月分别进行了分层分析 审评认为, 申办者递交的分层分析内容较充分, 单保护效果的分析, 就从 EV71 感染所致疾病 所致疾病 ( 重症 ) 所致疾病 ( 住院 ) 所致手足口病 所致疱疹性咽颊炎 所致其它阳性病例 所致阳性所有病例, 以及对 CA16 其他 EV 所致疾病等的保护进行了分析, 并提供了分年龄组 分中心 分性别的结果, 并且按随访时间段进行了分层分析 保护效果 免疫原性和持久性的分层分析结果与试验总体结果基本一致 统计复核发现,57 天 -5 个月 57 天 -8 个月 57 天 -11 个月两组的发病人数与统计报告结果不一致, 见下表中发病人数, 需申办人进一步进行解释说明 结果 57 天 -5 个月 57 天 -8 个月 57 天 -11 个月 57 天 -14 个月试验组对照组试验组对照组试验组对照组试验组对照组 原报结果 复核结果 ( 三 ) 药学专业审评意见 1 批件遗留的问题本品药物临床试验批件遗留以下药学问题 : 临床试验期间需继续进行 2-8 保存疫苗的稳定性研究, 稳定性研究需重点关注疫苗的抗原含量及免疫原性 继续开展检测方法的标准化研究 批件遗留问题完成情况及评价分别见稳定性研究部分 第 167 页 / 共 280 页

168 和质量标准部分 2 临床试验期间完成的工作及工艺变更情况 2.1 整体变更情况申报单位通过邮件方式提供了临床期间生产工艺变更概况列表, 具体如下 : 涉及商业秘密, 省略报告内容 671 字 列表显示, 申报单位在临床前 临床试验和 III 期临床试验完成后进行的变更包括省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 审评认为, 尽管临床期间的变更省略内容! 省略内容! 已经 III 期临床试验的验证, 但对于临床期间的变更申报单位仍需补充变更的依据及相关研究数据 从风险控制角度, III 期临床试验完成后的变更事项为审评重点评价, 涉及商业秘密, 省略报告内容 316 字 变更前后产品的可比性研究 : 涉及商业秘密, 省略报告内容 172 字 2.2 采用商业化规模进行了培养基变更前后各 3 批收获液 3 批原液的比较研究数据, 包括产量和质量特性的比较, 涉及商业秘密, 省略报告内容 1511 字 审评认为, 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内 第 168 页 / 共 280 页

169 容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 可比性研究数据仍需完善省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 未提供省略内容! 省略内容! 工艺变更前后多批原液检测结果的比较, 需补充提供 3 质量标准 3.1 病毒收获液标准涉及商业秘密, 省略报告内容 101 字 3.2 病毒灭活液质量标准灭活效果验证 : 符合规定 3.3 疫苗原液标准 : 涉及商业秘密, 省略报告内容 243 字 3.4 半成品标准 : 涉及商业秘密, 省略报告内容 65 字 3.5 成品标准涉及商业秘密, 省略报告内容 297 字 审评认为, 本品质量标准项目及标准参照了 中国药典 Vero 细胞病毒疫苗, 项目设置基本齐全 ; 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 但是, 本品质量 第 169 页 / 共 280 页

170 标准存在以下问题需完善 :1) 请进行临床试验研究用品质量标准和上市生产质量标准的比较, 如果有修订, 需说明修订理由并提供试验数据 2) 结合临床前及临床期间的生产批次, 根据多批产品的具体检定数据, 经统计分析, 拟订企业注册标准并提供拟定过程 对于质量标准中的定量指标尽量增加上下限的要求省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!3) 提供 I II III 期临床试验批次疫苗的配制 分装记录, 自检记录及中检院复核检定结果, 列表分析临床试验疫苗 ( 尤其是 III 期临床试验疫苗 ) 实际省略内容! 省略内容!, 结合稳定性研究数据论证省略内容! 省略内容! 标准的合理性 尽可能提高效力试验的标准 4) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!5) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!6) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!7) 本品 Vero 细胞 DNA 残留标准虽与 中国药典 狂犬病等疫苗相同, 但使用人群有一定差别, 请论证该标准的科学性与合理性省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 4 检测方法与标准品 4.1 抗原含量检测方法 : 本次申请未提供抗原含量检测方法的相关资料 审评认为, 申请人需提供抗原含量检测方法 SOP 试剂 第 170 页 / 共 280 页

171 盒来源 方法学验证资料 抗原含量检测标准品的标定过程及使用情况, 需补充 说明检测过程中中检院建立抗原含量检测标准品的使用情况 临床前中检院已建立抗原含量检测标准品, 该标准品在检测中如何使用, 能否起到质控作用, 建议咨询专家 此外,3 家企业抗原含量检测采用各自试剂盒, 具体方法不同, 是否需要统一方法, 建议咨询专家 4.2 体内效力检测方法 : 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 审评认为, 需说明中和抗体检测所使用的中和病毒是否为国家统一的标准毒株 补充提供体内效力试验的 SOP, 提供体内效力试验的方法学验证资料 3 家企业成品效力检测方法不同, 包括免疫剂量及梯度不同 中和病毒不同 质量标准不同 建议咨询专家, 是否应统一效力检测方法, 包括免疫剂量及梯度 中和病毒 质量标准 是否需要建立统一的体内效价标准品 5 制造及检定规程涉及商业秘密, 省略报告内容 222 字 制检记录提供了采用变更后工艺生产的 3 批成品省略内容! 省略 第 171 页 / 共 280 页

172 内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 的制检记录, 格式规范, 自检合格 6 稳定性研究 6.1 原液稳定性研究涉及商业秘密, 省略报告内容 176 字 6.2 成品稳定性研究涉及商业秘密, 省略报告内容 129 字 商业化规模产品的稳定性研究涉及商业秘密, 省略报告内容 181 字 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 需补充提供商业化规模产品 ( 工艺变更后 ) 与临床试验研究用产品加速稳定性研究降解趋势的比较, 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 7 内包材省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! ( 四 ) 药理毒理专业审评意见本品为报产品种, 临床期间无药理毒理方面遗留内容 ( 五 ) 综合审评意见 第 172 页 / 共 280 页

173 本品系用肠道病毒 71 型 ( H07 株 ) 接种非洲绿猴肾细胞 ( 简称 Vero 细胞 ), 经培养 收获病毒液 灭活病毒 浓缩 纯化和氢氧化铝吸附制成 拟申请用于预防 6 个月以上易感者 EV71 引起的手足口病及相关疾病 用法用量 : 基础免疫程序为 2 剂, 第 1 剂接种后 28 天接种第二剂 每次每剂量为 0.5ml 规格: 含 EV71 病毒抗原 400U 按 药物注册管理办法 中预防用生物制品注册分类第 1 类申报 与本品同时申报生产 ( 包括新药证书 ) 的同类品种还包括中国医学科学院申报的肠道病毒 71 型灭活疫苗 ( 人二倍体细胞 )( 受理号 :CXSS ) 武汉生物制品研究所有限责任公司和北京微谷生物医药有限公司联合申报的肠道病毒 71 型灭活疫苗 (Vero 细胞 )( 受理号 :CXSS ) 国外尚无同类产品上市 提供了北京局对药品注册研制现场 临床试验现场的核查报告, 通过 中心于 2014 年 8 月 19 日召开肠道病毒 71 型灭活疫苗研讨会, 国家 CDC 专家介绍 年手足口病重症比例为 1.1%, 总病死率为 0.03%, 重症死亡比例 :3.0% 手足口病年发病数连续四年位居法定报告传染病首位, 死亡数位居第五位 ; 全国发病率 重症率 死亡率呈现隔年升高的趋势 对 2008 年 年 8 月手足口病不同临床严重程度病例中肠道病毒血清型构成进行了分析, 结果显示 :6 年监测过程中, 第 173 页 / 共 280 页

174 轻症病例中,40-60% 为 EV71 感染 ; 重症和死亡病例分别为 76% 和 93%EV71 感染 2013 年存在优势株的替换现象, 该年份中其他肠道病毒成为优势循环毒株 ( 占轻症病例 49%) 手足口病病原分布存在较大的地域性特点, 如 2014 年, 全国有 10 个省市优势流行株毒株为非 EV71 的其他肠道病毒 本品于 2010 年 12 月 23 日获得临床批件, 批件内容为 请按照国家食品药品监督管理局发布的 药品注册管理办法 和 疫苗临床试验技术指导原则, 进一步完善临床研究方案, 制定终止临床试验的标准, 并严格遵守 GCP 及相关规定实施 : 所有试验用疫苗及对照均需经中国食品药品检定研究院检定合格 此外, 还需按照以下要求进行临床试验 : (1) 应按照相关要求开展每期的临床试验, 每期临床研究结果报药品审评中心 (2) 临床试验中需开监测抗核抗体的产生及可能带来的不良反应 (3) 在 Ⅲ 期临床试验中进行流行病学保护效力研究及免疫持久性研究 (4) 进行血清学抗体水平与流行病学保护效力关系的研究 (5) 进行含佐剂疫苗与无佐剂疫苗血清学抗体水平的比较研究 (6) 鉴于 3 家企业的生产毒株 生产工艺 抗原含量等方面的不同, 建议在临床试验中设计相关的试验组, 比较 3 家企业疫苗的血清学抗体水平 临床试验期间需继续进行 2~8 保存疫苗的稳定性研究, 稳定性研究需重点关注疫苗的抗原含量及免疫原性 继续开展检测方法标准化的研究 第 174 页 / 共 280 页

175 临床方面 : 本品主要关键性试验如下汇总的综表 1-2, 其中 Ⅰ Ⅱ 期临床试验负责单位为广西疾病预防控制中心 ; Ⅲ 期临床试验和临床 3 批一致性研究的负责单位为江苏省疾病预防控制中心 综表 1 本品临床研究分期及关键性研究汇总 临床分期 年龄分层 受试者人数 剂量和免疫程序 临床试验持续时间 Ⅰ 期耐受性和初步免疫原性试验 岁 36 人 3-11 岁 36 人 6-35 月龄 96 人 按照 ( 天 ) 三针程序接种疫苗为 200U 400U 及安慰剂按照 ( 天 ) 三针程序接种疫苗为 200U 400U 及安慰剂按照 ( 天 ) 三针程序接种疫苗为 100U 200U 400U 及安慰剂 2010 年 12 月至 2011 年 10 月 Ⅱ 期剂量探索试验 月龄 120 人 月龄 120 人 6-11 月龄 300 人 按照 0 28 天程序接种了 100U 200U 400U 200U( 无佐剂 ) 及安慰剂 2011 年 7 至 11 月 Ⅲ 期临床保护力试验临床三批一致性试验 6-35 月龄 人按照 0 28 天免疫程序接种 400U 或安慰剂 2012 年 1 月至 2013 年 3 月 6-59 月龄 1400 人按照 0 28 天免疫程序接种 400U 或安慰剂 2012 年 7 月至 2013 年 3 月 综表 2 本品其他支持性临床研究汇总 临床类型 年龄 受试者人数 剂量和免疫程序 临床试验持续时间 Ⅱ 期免疫原性持久性研究 6-35 月龄 275 例 同 Ⅱ 期剂量探索试验 免后 28 天 8 个月和 14 个月 Ⅲ 期免疫原性亚组试验 6-35 月龄 1150 例 同 Ⅲ 期临床保护力试验 免后 28 天 Ⅲ 期免疫替代指标的探索性研究 6-35 月龄 例 同 Ⅲ 期临床保护力试验 接种 2 剂后后 14 个月 Ⅲ 期免疫原性持久性研究 6-35 月龄 1098 例 同 Ⅲ 期临床保护力试验 免后 28 天 8 个月和 14 个月 后续临床保护力观察研究 6-35 月龄 9776 例 同 Ⅲ 期临床保护力试验 至今 ( 待提供 ) 本品 Ⅰ Ⅱ 期均在广西进行, 试验设计均采用随机 双盲 安慰剂对照设计 Ⅰ 期的试验目的是评价本品在成人 儿童及婴幼儿人群的安全性和耐受性, 共有 168 名受试者参加该期临床试验, 其中成人组 儿童组各 36 人按照 (0 28 第 175 页 / 共 280 页

176 56 天 ) 三针程序接种疫苗为 200U 400U 及安慰剂 ; 婴幼儿组 96 人, 按照三针程序接种疫苗为 100U 200U 400U 及安慰剂 Ⅱ 期试验目的是评价不同 EV71 抗原含量疫苗的免疫效果, 为 Ⅲ 期临床试验的疫苗剂量与接种程序的选择提供依据 共有 540 名 6-35 月龄受试者分别按照 0 28 天程序接种了 100U 200U 400U 200U( 无佐剂 ) 及安慰剂 1 Ⅰ~Ⅱ 期临床试验结果 Ⅰ 期 168 例临床试验结果显示本品在成人组 儿童组及婴幼儿组的耐受性和安全性尚可接受, 常见的接种部位不良反应主要包括注射部位疼痛 硬结及瘙痒 ; 全身不良反应以发热最为多见 (25.6%) 接种疫苗各年龄组基本相似, 未见增加针次不良反应增加的趋势 血 尿常规 血生化及抗核抗体检测结果异常未见与安全性结果明显的相关性 初步免疫结果显示, 免前中和抗体为阴性的婴幼儿受试者, 在完成 2 针免疫后其抗体 GMT 水平出现明显升高, 并呈现出一定的量效关系 2 针免疫后婴幼儿 儿童和成人中均表现出良好的免疫原性, 故考虑在 Ⅱ 期临床试验中采用 2 针免疫接种程序 Ⅱ 期临床 6-35 月龄婴幼儿无论接种 1 剂或 2 剂, 其抗体 GMT 均以 400U 组高于其他试验组, 差异有显著性 ; 不同年龄层中,6-11 月龄组和 月龄组亦均以 400U 剂量组抗体水平显著高于其他试验组, 仅 月龄组各剂量组间 第 176 页 / 共 280 页

177 GMT 无显著差异 试验疫苗各组抗体水平显著高于安慰剂组, 有佐剂 200U 和无佐剂 200UGMT 水平相当 免前抗体滴度 <1:8 的受试者不同针次免疫后抗体水平结果一致 275 例中 242 例免前易感者, 排除 105 例手足口病及可疑隐性感染者, 共有 137 例受试者纳入最终免疫持久性分析 各剂量组抗体的阳性率和 GMT 均随观察时间的延长而降低, 其中 400U 组 (40 例 ) 在接种后 56 天 8 个月和 14 个月后, GMT 分别为 和 37.48, 均明显高于同期其他剂量组, 差异有统计学意义 540 例受试者中,100U 200U 400U 三个剂量组总不良反应率分别为 56.67% 50.83% 和 51.67%, 安慰剂组 58.3%; 所观察到的不良反应以 1 2 级反应为主 ;3 级不良反应发生率低, 在各年龄组中发生率均不足 3% 各组不良反应发生率无明显差异, 未见严重不良反应 从上述数据分析基本支持申请人以 400U( 含铝佐剂 ) 剂量组进行 Ⅲ 期临床试验 但前期临床试验各年龄组中有 47 例受试者接种疫苗后, 出现一过性尿红细胞和尿蛋白异常 (1 级 ), 须提供在各剂量组的分布情况, 并分析与接种疫苗是否具有关联性及临床意义 另, 在此期间发生 3 例 200U( 无佐剂 ) 和有佐剂 100U 的手足口病, 未提供病原学诊断和中和抗体检测结果, 若有可补充提供 2 Ⅲ 期临床试验结果 第 177 页 / 共 280 页

178 2.1 临床保护力研究 : 主要目的是评价本品在 6-35 月龄健康人群中预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的有效性 次要目的是评价本品在 6-35 月龄健康人群的安全性 免疫原性和免疫持久性 探索性目的是研究针对 EV71 感染所致疾病的抗 EV71 中和抗体的免疫学替代指标 在江苏 3 个县进行 本研究中对所有接种过第 1 针疫苗的 名受试者均完成第 1 针疫苗接种 ;9430 例完成第 2 针接种, 其中试验组 4719 例, 安慰剂组 4711 例 ; 有 9776 例受试者完成第 14 个月访视, 其中试验组 4897 人, 安慰剂组 4879 人 受试者在接种后第 57 天至第 14 个月期间, 通过建立肠道病毒病监测系统, 及时发现病例 肠道病毒病病例监测范围包括 EV71 阳性病例 CA16 型阳性病例以及其他肠道病毒 ( 非 EV71 型和非 CA16 型 ) 阳性病例 根据试验组和对照组受试者的观察人年以及确诊 EV71 感染所致疾病的病例数计算发病率 / 发病密度, 并计算出 EV71 疫苗预防 EV71 感染所致疾病的保护率 有效性 : 试验疫苗免后 1 年内, 全程接种纳入 PPS 的受试者共报告 EV71 阳性病例 114 例, 试验组 13 例, 其中 EV71 感染所致手足口病例 5 例 EV71 感染所致呼吸道感染病例 6 例 消化道感染病例 1 例和所致其他病例 1 例 ; 安慰剂组报告 101 例, 其中 EV71 感染所致手足口病例 87 例 EV71 感染所致疱疹性咽峡炎病例 3 例 所致呼吸道感染病例 8 例 第 178 页 / 共 280 页

179 消化道感染病例 2 例和所致其他病例 1 例 试验疫苗对 EV71 感染所致疾病保护率为 87.3%(95%CI 为 77.4%-92.9% ), 保护效果指数为 7.90 ( 95%CI 为 ); 对 EV71 感染所致手足口病保护率 94.3%(95%CI 为 86.1%-97.7%), 效果指数为 17.67(95%CI 为 ) 对 EV71 感染所致疾病重症病例的保护率为 %(95%CI 为 42.4%-100.0%) 但由于重症病例相对较少(8 例 ), 导致 EV71 感染所致疾病的重症病例的保护率 95% 可信区间很宽 同时对完成全程接种的 2130 名 6-11 月龄受试者, 本疫苗对 EV71 感染所致手足口病保护率为 80.7% ( 95%CI 为 33.3%-94.4%), 效果指数为 5.18(95%CI 为 ) 本品预防此年龄段的保护效力偏低, 建议咨询专家此年龄组的保护率是否可以接受, 本品对于 EV71 感染所致手足口病是否可认为达到了试验假设的要求 ; 如何评估对重症病例的保护 本品对 CA16 所有阳性病例和其他肠道病毒阳性病例均无保护作用 审评认为, 本研究主要终点和病例确认的问题是, 实验室检测 EV71 阳性病例不完全等同于 EV71 感染所致的疾病, 尤其对于呼吸道感染病例和肠道感染病例如何判断其发病与 EV71 感染关系的特异性, 由于未进行非肠道病毒的其他病原检测, 无法排除 EV71 感染非 HFMD 病例中其他病原的 第 179 页 / 共 280 页

180 合并感染情况 ; 另由于病例诊断流程的局限性排除了 EV71 阴性病例但 EV71 中和抗体 4 倍增高的阳性病例, 可能降低了病例监测的特异性和敏感性 须申请人说明和提供 DSMB 确定病例采用的原则和记录 数据显示本品在江苏省临床现场 EV71 所致手足口病占所有手足口病的 8.68%(EV71 共 92 例 / 所有 1072 例 ), 我国各省 EV71 CA16 及其他肠道病毒流行所致手足口病的构成比例相差很大, 其疫苗对 EV71 所致手足口病的保护效果相差可能更大 须申请人提供同期和近 5 年江苏省和临床试验现场进行手足口病监测的详细资料 为进一步确认本品临床保护力结果, 建议补充汇总和提供发生 EV71 感染所致手足口病和相关疾病的所有确诊病例信息, 主要体现 EV71 阳性 / 阴性的所有手足口病 ( 包括 CA16 阳性 ) 和相关疾病的汇总信息 ( 两组 ); 具体包括所有中和抗体基线情况 接种研究疫苗 ( 免前 / 后 ) 抗体变化 发病期抗体变化 (4 倍升高 降低和维持不变 ) 伴随 IgM 水平变化等 本 Ⅲ 期临床保护效力试验中未总结接种本品 2 剂不同时间间隔及只接种 1 剂亚组的有效性结果, 建议提供 安全性 : 接种首针至 14 月期间, 试验组总体不良反应发生率为 51.70%, 安慰剂组为 52.77%; 试验组和安慰剂组发生严重不良事件 (SAE) 发生率分别为 2.20% 和 2.50%, 组间发生率差异均无统计学意义 第 180 页 / 共 280 页

181 试验组征集性局部不良反应发生率为 13.88%; 安慰剂组为 13.59%, 以红斑 硬结 触痛多见, 其余症状 ( 肿胀和瘙痒 ) 发生率均低于 5%;1 级不良反应为主, 占 87.36%,3 级不良反应占 0.36%, 未发现 4 级不良反应 试验组非征集不良反应发生率为 0.85%, 安慰剂组为 0.83%, 两组间差异均无统计学意义 试验组征集性全身不良反应发生率为 45.56%; 安慰剂组为 46.53% 以发热 腹泻 食欲下降 恶心呕吐 烦躁多见, 其余症状 ( 疲倦乏力 变态反应 ) 的发生率均低于 5% 1 级和 2 级不良反应为主,3 级不良反应占 6.53%(303/4640), 未发现 4 级不良反应 试验组免后 0-56 天 SAE 发生率为 0.89%, 安慰剂组发生率为 0.93%, 两组间严重不良事件发生率差别无统计学意义 经判断, 试验组有 5 例 SAE 与接种有关, 发生率为 0.10%; 安慰剂组 6 例, 发生率为 0.12%;11 例 (11 例次 ) 与接种有关的严重不良事件包括感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ), 应说明与 EV71 阴性病例的关系和两组发生情况 2.2 免疫原性亚组和持久性研究免疫原性亚组受试者 1293 例, 其中试验组 648 例, 安慰剂组 645 例 ;1236 名受试者完成第 56 天血清样本采集, 其中试验组 622 例, 安慰剂组 614 例 共有 1150 名受试者 ( 试验组 579 名, 对照组 571 名 ) 完成 第 181 页 / 共 280 页

182 了免疫原性评价 共 1098 人完成免后第 8 个月观察 ( 试验组 550 人, 对照组 548 人 ); 共 1050 人完成免后第 14 个月观察 ( 试验组 528 人, 安慰剂组 522 人 ) 资料显示 EV71 中和抗体阴性受试者 ( 试验组 492 名 安慰剂组 468 名 ), 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : :65.51 和 1:4.34 1:6.33 1:6.94; 而剔除第 56 天至第 14 月期间 EV71 阳性病例和隐性感染者后,695 名免前抗体阴性受试者 ( 试验组 338 人, 安慰剂组 357 人 ), 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : : 和 1:4.45 1:4.35 1:4.58; 审评分析 : 两组中分别有 100 多例的阳性病例和隐性感染者, 剔除 EV71 阳性病例和隐性感染者后, 试验组第 56 天 GMT 反而升高, 无法解释 ; 须列表显示两组剔除的 EV71 阳性病例和隐性感染者 ; 并说明试验组如何区分试验疫苗和自然感染所致的抗体 4 倍升高 2.3 免疫替代指标的探索性研究此 6-35 月龄研究亚组共包括 104 例 EV71 阳性病例和 507 名非 EV71 阳性病例的受试者 申请人认为, 在 EV71 中和抗体阈值为 1:16 时, 约登指数最大, 约登指数 灵敏度和特异度分别为 和 ; 因此 EV71 中和 第 182 页 / 共 280 页

183 抗体滴度在 1:16 时, 能有效的区分 EV71 阳性病例病例和非病例 但是抗体滴度随时间的推移有明显下降, 为了较长时间的保护效果, 1:32 作为疫苗保护效果免疫替代终点更为合适 审评认为, 除以上探索研究外, 建议申请人结合本品 Ⅲ 期临床试验中所有 EV71 感染所致疾病的病例的中和抗体水平 ( 急性期和恢复期, 免前 / 免后 ) 进行分析, 包括流调的抗体结果, 综合验证其结论 2.4 三批临床一致性研究本研究入选 6-59 月龄婴幼儿受试者, 各试验组免疫原性受试者抗体基线一致性较好且均衡可比 疫苗接种 56 天血清抗体检测结果显示, 在符合方案人群 免前中和抗体阴性 免前中和抗体 1:8 及各年龄亚组受试者中, 三个批次疫苗组 GMT GMI 阳性率及阳转率均高于安慰剂组, 且差异均有统计学意义 1400 名受试者两针疫苗接种后的 0~56 天安全性观察中, 不良反应发生率为 58.43%, 三个批次各组发生率为 56.57%~59.71%; 安慰剂组发生率为 59.14%, 各试验组间差异无统计学意义 各试验组收集到不良反应分级均以轻中度为主, 为常见疫苗不良反应 结果显示共有 1293 名 PPS 受试者进入最终免疫原性分析 ( 免前和免后 ), 与中检院原始血清检测报告 ( 中检生检 第 183 页 / 共 280 页

184 函 [2013]67 号 ) 结果不一致, 显示血清标本检测 2708 份 ( 除 1 份无血清 ) 结果, 须申请人详细说明 此评定方法和标准, 以及结果是否可以接受, 建议咨询专家 本品的 Ⅱ Ⅲ 期临床试验中均选择 6-35 月龄婴幼儿作为受试人群, 而在临床连续三批一致性研究中选择 6-59 月龄婴幼儿作为受试者, 本品上市后适用人群的年龄如何定位需综合考虑 在 Ⅲ 期临床试验 2012 年 10 月 ~2013 年 4 月中, 中检院共提供了 8 份血清样本检测报告, 汇总 : 中和抗体共检测免前 1292 份, 免后 份, 急性期恢复期 190 份,EV71 阳性病例 99 份, 不明类别 2396 份 ;IgM 急性期恢复期 190 份 应逐一确认 Ⅲ 期临床试验下述检测报告的样本所对应的临床报告中的结果, 并核对检测样本数和临床报告中样本数 ( 阐明不一致的原因 ): 免疫原性每个随访时间点的中和抗体所有结果 ; 中检院复核病例的每个报告 ( 抗原和抗体 ) 对应的临床结果 临床报告称病例诊断流程中的病例实验室初检在 3 个县 CDC 实验室, 病例实验室确认由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ( 北京 ) 进行, 未提供复核检测报告 建议阐明病例诊断过程中实验室检测初检和复检的流程和方法, 提供方法学相关资料 ; 并提供病例实验室确认 ( 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ) 的检测报告 第 184 页 / 共 280 页

185 本品还须提供本品在临床现场经过第二个流行年临床保护效力的总结, 及与当地自然流行率的对比分析 综合本品目前完成的所有临床试验数据, 结合本品第二年疫苗临床保护效力 免疫持久性结果及血清抗体与保护效力的分析, 还要结合我国 EPI 接种的实际情况, 提出本品合理的目标接种人群 基础免疫程序和是否需要加强免疫的建议 本品按预防用生物制品注册分类第 1 类申报, 其完成的所有临床试验结果是否本品安全有效支持批准注册上市, 建议召开合审会和咨询专家 临床主要咨询专家本品目前提供的临床试验数据 ( 包括 EV71 感染所致的疾病 / 手足口病保护率 ) 是否满足相关要求, 临床目标接种人群和适应证定位 如何评价本品预防重症 EV71 感染问题 还有临床批件中要求的需监测抗核抗体问题, 及如何进行进一步要求和综合评价 3 家研究结果 生物统计方面 : 统计学审评内容包括数据质量和统计分析两大方面, 审评中本品疫苗的有效性评价是基于 III 期试验递交原始数据库所包含的数据集完成, 而安全性则需基于 I-III 期试验递交原始数据库所包含的安全性数据进行汇总评价, 由于申办者未提交 I/II 期临床数据库, 故本次审评仅针对 III 期试验进行, 审评中未定义新变量及衍生形成新数据集 审评中数据质量核查针对申报的所有数据库及数据管理相关资料完成, 亦未定义新变量及生成新数据集 第 185 页 / 共 280 页

186 从数据质量评价来看, 北京市药监局组织的临床现场核查显示数据真实 III 期试验的分析数据集可从原始数据集衍生, 分析数据集中的各主要指标数据可根据原始数据集获得 统计单位的数据库可从数据管理单位数据库中溯源, 但 III 期临床试验数据库中不良事件数据存在多处逻辑错误问题, 需请申办方进一步核实其完整性和准确性 关于统计分析的评价, 审评认为,Ⅲ 期确证性临床试验设计合理, 目的明确, 统计假设正确, 样本量估算合理 主要和次要终点指标明确, 统计方法使用适当, 分析结果基本可以重现 分层分析内容较充分, 单保护效果的分析, 就从 EV71 感染所致疾病 所致疾病 ( 重症 ) 所致疾病( 住院 ) 所致手足口病 所致疱疹性咽颊炎 所致其它阳性病例 所致阳性所有病例, 以及对 CA16 其他 EV 所致疾病等的保护进行了分析, 并提供了分年龄组 分中心 分性别的结果, 并且按随访时间段进行了分层分析 同时, 统计审评过程中发现如下问题 : 申办方未提交 Ⅰ -Ⅲ 期的统计分析计划书, 以及盲态审核决议 未提供 I/II 期试验的临床数据库 数据格式不符合 CDE 发布的 关于 EV71 疫苗完成 Ⅲ 期临床试验后的临床数据库及统计结果申报资料的若干要求 针对保护效果的主要疗效指标 EV71 疫苗预防肠道病毒 71 型感染所致疾病的保护率和效果指数, 临床研究方案与 第 186 页 / 共 280 页

187 临床总结报告中对 所致疾病 定义有一定偏差, 方案的定义包括呼吸道 消化道等其他系统的疾病, 但统计分析与临床总结中均只限定为手足口病及疱疹性咽峡炎两种疾病 需要申办者给予解释, 并请临床专业审评予以关注和核实 方案中明确提出进行监测期数据的描述性分析, 包括所有有不适症状受试者接受采样的受试者总数量 所患疾病的分类 时间分布等, 但统计分析报告中未涵盖该内容, 申办方应补充完善对监测期数据的分析 该 Ⅲ 期试验进入 FAS 集和 PPS 集均有不少的失访或脱落病例, 但未说明处理脱落和缺失数据的具体方法 需要申办者予以核实, 特别是对主要终点变量如何填补, 必要时按保守方法 ( 如视为发生 EV71 感染所致疾病 ) 进行分析计算 申办者认为 EV71 疫苗预防 EV71 感染所致疾病的保护率 (PPS) 为 94.5%(95%CI 为 86.5%-97.8%), 效果指数为 18.28(95%CI 为 ) 但审评认为, 该结果仅包含手足口病和疱疹性咽峡炎不合理, 而应包含对 EV71 阳性的所有病例的保护效果 故其主要疗效应采用 EV71 阳性所有病例的保护率 ( 申报结果显示为 87.3%,95%CI 为 77.4%-92.9%, 保护效果指数为 7.90,95%CI 为 ), 由于申报资料对 FAS 集中脱落病例和失访病例的具体数据处理未明确说明, 故需待申办者进一步补充资料后进行审评核算 因方案中未交待计算人年数时选取的时间截点, 审评时 第 187 页 / 共 280 页

188 采用 最后一次随访日期减去第 56 天随访日期 +1 进行复核, 所得人年数结果及发病密度的 95% 可信区间估计与申报结果不一致, 故需申办者对此进一步阐释说明 另外, 统计复核发现发病密度的 95% 可信区间估计与统计报告结果不一致,57 天 -5 个月 57 天 -8 个月 57 天 -11 个月两组的发病人数与统计报告结果不一致, 需申办人进一步进行解释说明 药学方面 : 临床期间申报单位进行了工艺改进和生产规模的调整, 涉及商业秘密, 省略报告内容 467 字 但可比性研究数据仍需完善, 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 未提供纯化工艺变更前后多批原液检测结果的比较, 需补充提供 本品质量标准项目及标准参照了 中国药典 Vero 细胞病毒疫苗, 项目设置基本齐全 ; 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 但是, 本品质量标准存在以下问题需完善 :1) 请进行临床试验研究用品质量标准和上市生产质量标准的比较, 如果有修订, 需说明修订理由并提供试验数据 2) 结合临床前及临床期间的生产批次, 根据多批产品的具体检定数据, 经统计分析, 拟订企业注册标准并提供拟定过程 对于质量标准中的定量指标尽量增加上下限的要求, 例如收获液的总蛋白含量, 抗原含量等 3) 提供 I II III 期临床 第 188 页 / 共 280 页

189 试验批次疫苗的配制 分装记录, 自检记录及中检院复核检定结果, 列表分析临床试验疫苗 ( 尤其是 III 期临床试验疫苗 ) 实际省略内容! 省略内容! 等, 结合稳定性研究数据论证省略内容! 省略内容! 标准的合理性 尽可能提高效力试验的标准 4) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!5) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!6) 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容!7) 本品 Vero 细胞 DNA 残留标准虽与 中国药典 狂犬病等疫苗相同, 但使用人群有一定差别, 请论证该标准的科学性与合理性 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 本次申请未提供抗原含量检测方法的相关资料 审评认为, 申请人需提供抗原含量检测方法 SOP 试剂盒来源 方法学验证资料 抗原含量检测标准品的标定过程及使用情况, 需补充 说明检测过程中中检院建立抗原含量检测标准品的使用情况 临床前中检院已建立抗原含量检测标准品, 该标准品在检测中如何使用, 能否起到质控作用, 建议咨询专家 此外,3 家企业抗原含量检测采用各自试剂盒, 方法学不同, 是否需要统一方法, 建议咨询专家 申请人提供了体内效力检测方法 审评认为, 需说明中和抗体检测所使用的中和病毒是否为国家统一的标准毒株 补充提供体内效力试验的 SOP, 提供体内效力试验的方法学 第 189 页 / 共 280 页

190 验证资料 3 家企业成品效力检测方法不同, 包括免疫剂量及梯度不同 中和病毒不同 质量标准不同 建议咨询专家, 是否应统一效力检测方法, 包括免疫剂量及梯度 中和病毒 质量标准 是否需要建立统一的体内效价标准品 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 制检规程仍需进一步完善 提供了采用变更后工艺生产的 3 批成品的制检记录, 格式规范, 自检合格 提供了临床试验研究批次和上市生产验证批次原液 成品的稳定性研究, 稳定性考察较为全面, 结果提示本品较为稳定 但目前长期稳定性研究考察时间较短, 需继续完成原液和成品的长期稳定性研究, 作为上市产品拟定有效期的基础 对于变更前后稳定性可比性研究尚需进行进一步分析 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! ( 六 ) 处理意见咨询专家 xxx 咨询会资料需求 : 分为临床资料 统计学资料和药学资料 按照专业分开放置并明显标示 申报单位需派 1 人 ( 熟悉申报资料的 ) 在专家看资料前到会场 第 190 页 / 共 280 页

191 (1) 临床资料 9 套 : 原报资料 ( 资料项目号 : )+ 临床方面的补充资料 + 会议补充资料 ( 临床部分 ) (2) 统计学资料 4 套 : 原报资料统计学部分 + 会议补充资料 ( 统计学部分 ) (3) 药学资料 9 套 : 原报资料药学学部分 + 会议补充资料 ( 药学学部分 ) 咨询问题如下 : 1 临床方面 1.1 本品目前提供的临床试验数据 ( 包括 EV71 感染所致疾病 / 手足口病保护率 ) 是否满足临床方案 / 统计分析计划和注册的要求? 由于重症病例少, 如何评价本品预防重症 EV71 感染性疾病的结果? 临床目标接种人群和适应证如何定位? 按试验方案的主要终点, 本品对 EV71 感染所致疾病的保护率应该是 87.3%(95%CI 为 77.4%-92.9%), 保护效果指数为 7.90(95%CI 为 ) 其中在 6-11 月龄亚组的保护率为 73.2%(95%CI 为 27.8%-90.0%), 保护效果指数为 3.73(95%CI 为 ) 如何考虑? 此外, 本临床试验对手足口病及重症的判定标准是否正确, 实际判定是否准确 1.2 本品临床三批一致性研究中采用的批间一致性评定的方法和标准, 以及结果是否可以接受 1.3 结合本品第二年疫苗临床保护效力和免疫持久性结果, 第 191 页 / 共 280 页

192 及血清抗体与保护效力的分析, 提出本品基础免疫程序和是否需要加强免疫的建议 1.4 临床批件中要求 临床试验中需监测抗核抗体的产生及可能带来的不良反应, 本品在所有临床试验中数据库所反映的安全性特征对于目标接种人群是否可以接受 1.5 临床批件中还要求 鉴于 3 家企业的生产毒株 生产工艺 抗原含量等方面的不同, 建议在临床试验中设计相关的试验组, 比较 3 家企业疫苗的血清学抗体水平, 申请人目前缺少此研究资料, 如何进一步要求和综合评价 3 家研究结果 2 生物统计方面 2.1 申办方在发补问题答复中提出的保护效果研究主要终点缺失数据的填补方法是否保守合适?LOCF 方法对于免疫原性研究缺失数据的填补是否保守? 2.2 在发补问题答复中, 申办方说明了用于计算人年数的起止时间的定义, 对于末次随访时间的计算方法, 是否正确合理? 3 药学方面 3.1 检测方法方面及标准方面 : 临床前中检院已建立抗原含量检测标准品, 企业如何使用该标准品能够最大限度的起到质控作用 请对企业自建的抗原含量测定方法进行分析评价 3 家企业抗原含量检测采用各自试剂盒, 方法学不同, 是否需要统一方法 第 192 页 / 共 280 页

193 3.1.2 本品体内效力检测中使用的中和用毒株是否需要国家统一的标准毒株, 该方法以及标准限度省略内容! 是否合理? 3 家企业成品效力检测方法不同, 包括免疫剂量及梯度不同 中和病毒不同 质量标准不同 是否应统一效力检测方法, 包括免疫剂量及梯度 中和病毒 质量标准 是否需要建立统一的体内效价标准品 3.2 使用剂量方面 : 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 同类 3 个品种能否批准 3 个剂量, 是否会引起国际上的置疑 如果批准 1 个剂量则如何分析 评价及要求 3.3 质量标准方面 : 本品质量标准是否全面合理? 成品省略内容! 省略内容! 限度标准是否合理省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 3.4 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 申请人需在咨询会上提交的补充资料 1 临床方面 1.1 关于 Ⅲ 期临床保护效力试验 : 汇总和提供发生 EV71 感染所致手足口病和相关疾病的所有确诊病例信息, 体现两组 EV71 阳性 / 阴性的所有手足口 第 193 页 / 共 280 页

194 病 ( 包括 CA16 阳性 ) 和相关疾病的汇总信息, 具体包括所有中和抗体基线情况 接种研究疫苗 ( 免前 / 后 ) 抗体变化 发病期抗体变化 (4 倍升高 降低和维持不变 ) 伴随 IgM 水平变化等 ; 并进行归类分析 在 2012 年 10 月 ~2013 年 4 月, 中检院共提供了 8 个检测报告 ( 血清样本检测 ), 包括中和抗体共检测免前血样 1292 份, 免后血样 份, 急性期恢复期样本 190 份, EV71 阳性病例 99 份, 不明类别 2396 份 ;IgM 急性期恢复期 190 份 请逐一确认每个检测报告的样本所对应的临床报告中的结果, 并核对检测样本数和临床报告中样本数 ( 阐明不一致的原因 ), 包括免疫原性每个随访时间点的中和抗体所有结果 ; 中检院复核病例的每个报告 ( 抗原和抗体 ) 对应的临床结果 提供病例诊断过程中实验室检测初检和复检的流程和方法, 提供方法学相关资料 ; 应按 药物临床试验生物样本分析实验室管理指南 ( 试行 ) 要求, 提供病例实验室确认 ( 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ) 的检测报告 提供 DSMB 最终确定病例的记录文件, 包括盲态审核决议 ; 实验室检测 EV71 阳性病例不完全等同于 EV71 感染所致的疾病, 请说明对于手足口病以外其他感染病例如何判断其发病与 EV71 感染关系的特异性, 提供资料说明 DSMB 确定此类病例采用的原则 第 194 页 / 共 280 页

195 1.1.5 提供近 5 年和同期江苏省与临床试验现场 3 个县日常 传染病报告网络系统 网络报告监测手足口病数据, 并与本临床试验现场手足口病监测病例进行比较, 分析本临床试验中建立的 EV71 相关疾病 / 手足口病进行症状监测系统的敏感性及特异性 请总结和分析本 Ⅲ 期临床保护效力试验中接种本品 2 剂不同时间间隔及只接种 1 剂亚组的有效性结果 提供 Ⅲ 期临床试验的统计分析计划 ; 结合本品临床试验报告中采用 COX 模型进行影响 EV71 感染所致疾病和影响 EV71 阳性病例的多因素分析结果, 即 EV71 感染所致疾病的发生与试验疫苗分组 研究中心和年龄亚组等因素有相关性, 与性别无相关性 分别阐述其临床意义 安全性结果中,11 例 (11 例次 ) 与接种有关的严重不良事件包括感染和感染性疾病 ( 非 EV71 阳性病例 ), 请详细说明与 EV71 阴性病例的关系和两组发生情况 1.2 关于 Ⅲ 期临床的免疫原性亚组研究 : 提供的资料显示试验组和安慰剂组的 EV71 中和抗体阴性受试者首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月,EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: : :65.51 和 1:4.34 1:6.33 1:6.94; 而剔除第 56 天至第 14 月期间 EV71 阳性病例和隐性感染者后, 其试验组和安慰剂组的首针免后第 56 天 第 8 个月和第 14 个月 EV71 中和抗体 GMT 分别为 1: 第 195 页 / 共 280 页

196 : : 和 1:4.45 1:4.35 1:4.58; 请详细说明和分析试验组第 56 天 GMT 反而升高的原因 ; 须列表显示两组剔除的 EV71 阳性病例和隐性感染者 ; 并说明试验组如何区分试验疫苗和自然感染所致的抗体 4 倍升高 1.3. 免疫替代指标的探索分析 : 请结合本品 Ⅲ 期临床试验中所有 EV71 感染所致疾病的病例的中和抗体水平 ( 急性期和恢复期, 免前 / 免后 ) 进行分析, 包括流行病学调研的抗体结果, 综合验证其免疫替代指标研究的结论 1.4. 临床连续三批一致性研究 : 请详细说明本研究采用批间一致性评定的方法和标准的依据, 对结果进行详细的分析 结果显示共有 1293 名 PPS 受试者进入最终免疫原性分析 ( 免前和免后 ), 与中检院原始血清检测报告结果不一致, 中检生检函 [2013]67 号 (2013 年 1 月 16 日 ) 显示血清标本检测 2708 份 ( 除 1 份无血清 ) 结果, 请详细说明 1.5. 关于 Ⅰ~Ⅱ 期临床试验 : 请提供一过性尿红细胞和尿蛋白异常 (1 级 ) 在各剂量组的分布情况, 并分析与接种疫苗是否具有关联性及临床意义 在此期间发生 3 例 200U( 无佐剂 ) 和有佐剂 100U 的手足口病, 请提供病原学诊断和抗体检测结果 第 196 页 / 共 280 页

197 1.6. 请提供本品在临床现场经过第二个流行年临床保护效力的总结, 及与当地自然流行率的对比分析 1.7 临床批件中要求 进行血清学抗体水平与流行病学保护效力关系的研究 的相关结果, 请结合本品所有临床研究数据进行分析 1.8. 数据安全监查委员会 (DSMB) 贯穿本品整个临床试验计划中, 涉及多个职能, 申请人应提供数据安全监查委员会章程 人员组成及简历等, 还应包括数据安全监查委员会召开涉及本品的会议纪要等 1.9. 请整理合并 Ⅰ-Ⅲ 期临床试验和 3 批临床一致性研究等所有研究的安全性数据, 重点汇总分析与疫苗接种相关的不良反应和严重不良事件的发生情况 在整体分析的基础上, 分别按不同年龄组 剂量 剂次 接种后时间及严重程度进行深入分析 年龄组分为 月龄 ( 如有 ); 剂次分为第 1 2 剂 ; 接种后时间分为接种后 30 分钟 0-7 天 0-28 天及监测期内 提供国家局对所有临床试验的现场进行 疫苗临床试验机构一次性资格认定 的文件 综合本品目前完成的所有临床试验数据, 结合本品第二年疫苗临床保护效力 免疫持久性结果及血清抗体与保护效力的分析, 还要结合我国 EPI 接种的实际情况, 提出本品合理的目标接种人群 基础免疫程序和是否需要加强免疫的建 第 197 页 / 共 280 页

198 议 2 统计学方面 2.1 请申办方补充递交 Ⅰ-Ⅲ 期的统计分析计划书, 以及 Ⅲ 期试验的盲态审核决议 数据格式请执行 CDE 发布的 关于 EV71 疫苗完成 Ⅲ 期临床试验后的临床数据库及统计结果申报资料的若干要求 2.2 针对数据质量进行核查和评价, 发现 III 期临床试验数据库中不良事件数据存在多处逻辑问题, 举一例如下 : 疫苗编号 940 号第 1 针接种后第 0-7 天征集性不良事件 ( 全身症状 ) 为 无, 但在随后又记录了腹泻 食欲下降不良事件 请申办方进一步清理不良事件数据, 核实不良事件统计的完整性和准确性 2.3 III 期临床研究方案对 EV71 感染所致疾病 的定义包括多种疾病, 但针对 EV71 疫苗对 EV71 感染所致疾病保护效果的统计分析, 为什么仅纳入手足口病及疱疹性咽峡炎, 所观察到的呼吸道 消化道系统感染病例和其他阳性病例都具体是一些什么疾病, 是否有方案中所定义的疾病? 请申办方给予详细说明 2.4 临床方案中明确提出进行监测期数据的描述性分析, 包括所有有不适症状受试者接受采样的受试者总数量 所患疾病的分类 时间分布等, 但统计分析报告中未涵盖该内容, 申办方应补充完善对监测期数据的分析 第 198 页 / 共 280 页

199 2.5 该 Ⅲ 期试验进入 FAS 集和 PPS 集均有不少的失访或脱落病例, 但未说明处理脱落和缺失数据的具体方法 需要申办者予以核实, 特别是对主要终点变量如何填补, 必要时按保守方法 ( 如视为发生 EV71 感染所致疾病 ) 进行分析计算 2.6 申办者认为 EV71 疫苗预防 EV71 感染所致疾病的保护率 (PPS) 为 94.5%(95%CI 为 86.5%-97.8%), 效果指数为 (95%CI 为 ) 但审评认为, 该结果仅包含手足口病和疱疹性咽峡炎不合理, 而应包含对 EV71 阳性的所有病例的保护效果 故其主要疗效应采用 EV71 阳性所有病例的保护率 ( 申报结果显示为 87.3%,95%CI 为 77.4%-92.9%, 保护效果指数为 7.90,95%CI 为 ), 由于申报资料对 FAS 集中脱落病例和失访病例的具体数据处理未明确说明, 故需待申办者进一步补充资料后进行审评核算 2.7 因方案中未交待计算人年数时选取的时间截点, 审评时采用 最后一次随访日期减去第 56 天随访日期 +1 进行复核, 所得人年数结果及发病密度的 95% 可信区间估计与申报结果不一致, 故需申办者对此进一步阐释说明, 对应数据库中的变量是什么? 2.8 请根据 Ⅰ-Ⅲ 期试验的安全性数据进行汇总分析, 并请补充提交 Ⅰ Ⅱ 期临床数据库 2.9 请说明保护效果研究中未完成病例 ( 包括失访脱落等 ) 在两组的分布情况, 以及两组主要终点缺失 ( 需要考虑填补 ) 第 199 页 / 共 280 页

200 的例数 2.10 定期随访数据库的随访信息只记录受试者第 6-9 次随访居住状态 ( 本地 外出 迁居 死亡 非本地居民 ) 和随访日期, 无任何症状和发病等研究记录 请补充提供第 57 天 -14 月症状 / 疾病监测的相关数据汇总表和原始记录 3 药学方面涉及商业秘密, 省略报告内容 1032 字 第 200 页 / 共 280 页

201 四 专家咨询会后技术审评情况 ( 一 ) 专家咨询会咨询的问题 1 临床方面 1.1 本品目前提供的临床试验数据 ( 包括 EV71 感染所致疾病 / 手足口病保护率 ) 是否满足临床方案 / 统计分析计划和注册的要求? 由于重症病例少, 如何评价本品预防重症 EV71 感染性疾病的结果? 临床目标接种人群和适应证如何定位? 按试验方案的主要终点, 本品对 EV71 感染所致疾病的保护率应该是 87.3%(95%CI 为 77.4%-92.9%), 保护效果指数为 7.90(95%CI 为 ) 其中在 6-11 月龄亚组的保护率为 73.2%(95%CI 为 27.8%-90.0%), 保护效果指数为 3.73(95%CI 为 ) 如何考虑? 此外, 本临床试验对手足口病及重症的判定标准是否正确, 实际判定是否准确 1.2 本品临床三批一致性研究中采用的批间一致性评定的方法和标准, 以及结果是否可以接受 1.3 结合本品第二年疫苗临床保护效力和免疫持久性结果, 及血清抗体与保护效力的分析, 提出本品基础免疫程序和是否需要加强免疫的建议 1.4 临床批件中要求 临床试验中需监测抗核抗体的产生及可能带来的不良反应, 本品在所有临床试验中数据库所反映的安全性特征对于目标接种人群是否可以接受 第 201 页 / 共 280 页

202 1.5 临床批件中还要求 鉴于 3 家企业的生产毒株 生产工艺 抗原含量等方面的不同, 建议在临床试验中设计相关的试验组, 比较 3 家企业疫苗的血清学抗体水平, 申请人目前缺少此研究资料, 如何进一步要求和综合评价 3 家研究结果 2 生物统计方面 2.1 申办方在发补问题答复中提出的保护效果研究主要终点缺失数据的填补方法是否保守合适?LOCF 方法对于免疫原性研究缺失数据的填补是否保守? 2.2 在发补问题答复中, 申办方说明了用于计算人年数的起止时间的定义, 对于末次随访时间的计算方法, 是否正确合理? 3 药学方面 3.1 检测方法方面及标准方面 : 临床前中检院已建立抗原含量检测标准品, 企业如何使用该标准品能够最大限度的起到质控作用 请对企业自建的抗原含量测定方法进行分析评价 3 家企业抗原含量检测采用各自试剂盒, 方法学不同, 是否需要统一方法 本品体内效力检测中使用的中和用毒株是否需要国家统一的标准毒株, 该方法以及标准限度 xxx 是否合理?3 家企业成品效力检测方法不同, 包括免疫剂量及梯度不同 中和病毒不同 质量标准不同 是否应统一效力检测方法, 包括免疫剂量及梯度 中和病毒 质量标准 是否需要建立统一 第 202 页 / 共 280 页

203 的体内效价标准品 3.2 使用剂量方面 : 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 同类 3 个品种能否批准 3 个剂量, 如何考虑剂量不同的问题 如果批准 1 个剂量, 如何分析 评价及要求 3.3 质量标准方面 : 本品质量标准是否全面合理? 成品省略内容! 省略内容! 限度标准是否合理省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 3.4 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 省略内容! 是否可以接受 Vero 细胞用于婴幼儿疫苗生产 ( 二 ) 专家咨询会意见中心于 2014 年 11 月 21 日在北京江西大厦召开专家咨询会, 参会专家有流行病专家 :xxx 临床专家:xx 生物统计专家 :xxx 疫苗及细胞专家:xxx 中心人员 : 罗建辉 杨志敏 黄钦 杨焕 王朝云 王骏 高恩明 1 临床方面专家咨询会意见申请人在会上汇报了本品药学方面和临床试验的内容 临床试验部分包括 Ⅰ-Ⅲ 期 连续三批一致性的临床试验设计 结果及总结 1.1 介绍了参与 Ⅲ 期临床试验的各单位的职责 第 203 页 / 共 280 页

204 1.2 提供了 年江苏省 12 个县的手足口病发病情况, 包括临床试验 3 个现场 ( 赣榆 射阳 泰兴 ), 数据显示 12 县市中赣榆县 发病率较高, 特别是 2011 年 80% 为 EV71 感染 ; 射阳 泰兴处于中等发病水平,EV71 所占比例无明显规律 未提供本品进行临床保护力试验的同期江苏省和 3 个现场的手足口病发病 ( 包括重症 ) 的流行病学资料, 建议结合此资料分析本试验中建立的 EV71 相关疾病 / 手足口病监测系统的敏感性及特异性 1.3 阐明了疾病监测及确诊的流程, 研究设计以预防 EV71 感染所致疾病为终点, 主要综合参照了卫生部 2010 年诊疗指南 2011 年专家共识和 WHO 临床诊断标准, 收集包括手足口病 疱疹性咽峡炎 脑炎 脑干脑炎 脑脊髓炎 脊髓灰质炎综合征 格林巴利综合征 无菌性脑膜炎 急性出血性结膜炎 肺水肿 / 肺出血 心肺功能衰竭 严重脑功能衰竭等 12 种临床症状的病例 初步诊断依据临床症状和 PCR 检测结果, 由 DSMB 审核症状 病程 PCR 结果 ( 病毒分离 中和抗体 ) 等结果确诊病例 临床专家认为方案以 EV71 感染相关疾病为主要终点设计, 以手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道 消化道和其它类型疾病为病例监测目标, 但执行标准不明确 按照 6 月龄 -3 岁婴幼儿发病的一般规律推算, 如果监测系统足够敏感, 本研究所得的可疑病例 ( 呼吸道和消化道感染 ) 将远远大于本 第 204 页 / 共 280 页

205 临床现场中监测的 例次 因此目前结果仅能针对 EV71 所致手足口病和疱疹性咽峡炎的发病 获得可疑病例后仅对 EV71 核酸阳性病例进行随访, 可能漏掉 PCR(-) 但抗体阳性的病例, 导致现有保护效力可能高估 审评同意专家意见 审评认为, 虽然设计要求监测包括除手足口病 疱疹性咽峡炎之外 10 种症状, 并将病例分类为手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染疾病 消化道感染疾病和其它病例 本品临床总结报告中 EV71 感染相关疾病的保护效果仅包括手足口病 (92 例 ) 和疱疹性咽峡炎 (3 例 ), 去除了 EV71 感染的呼吸道 (14 例 ) 消化道(3 例 ) 和其它 (2 例 ) 病例, 共 19 例 同时统计部门协助通过搜索数据库 262 例 SAE 报告个案中, 发现 9 例脑炎, 其中 1 例伴心肌损害 (5516 号,2 组 ) 1 例伴腹泻 (5505 号,1 组 ) 2 例伴手足口病 (2965 和 4410 号,2 组 ) 1 例伴气管炎和肠炎 (1266 号,2 组 ) 4 例单纯脑炎和病毒性脑炎 (1366/5021/5034/8873 号,2 组 ) 审评结合昆明所 EV71(-) 但抗体阳性的病例分析 ( 近 7% 高估 ), 现有结果存在高估本品保护效果的可能性, 由于本品的病例监测流程与 EV71 感染相关疾病并不完全一致, 建议申请人结合 SAE 报告中可疑病例再次分析对监测病例体系进行敏感性分析, 保守估计 FAS 集预防 EV71 感染相关疾病 ( 主要终点 ) 的保护力 第 205 页 / 共 280 页

206 1.4 介绍了 Ⅲ 期临床试验主要终点和次要终点的结果 中心咨询专家关于 6-11 月龄亚组的 EV71 感染所致疾病保护率为 73.2%(95%CI 为 27.8%-90.0%), 保护效果指数为 3.73(95%CI 为 ), 如何评价的问题, 统计学家认为现有结果只能说明 6-11 月龄亚组的保护力低于 12 月龄以上年龄组 审评认为, 如前面所述, 本品保护力临床试验可能存在主要终点高估的问题, 而低年龄段保护率的 95%CI 下限低于 30%, 而流行病学资料提示 EV71 重症发生病例和疫苗主要适用人群为 1 岁左右, 在 2 岁以下, 提示本品应用后对 6-11 月龄婴幼儿的保护作用有限 1.5 提供了 8 例重症手足口病病例的相关资料 临床专家认为卫生部制定的 2010 年诊疗指南中关于重症病例的定义较宽泛, 特别是精神症状, 但有经验的临床医生可以区分一般发病与重症手足口病中的精神症状, 依据所获得的资料确诊的重症病例基本准确 ( 但存在 3 个县发病率不均衡 3 个县确诊重症判定病例的执行标准的差异?), 但由于疫苗临床试验现场的基层医院条件有限, 欠缺神经系统的查体和实验室相关检测, 仅提示所有病例符合重症, 尚未达到危重症标准 对此审评基本认可 但也有专家认为临床医生在临床诊断重症时的变异较大, 考虑到 8 例重症较少, 而整个研究脱落 288 例受试者 ( 需 第 206 页 / 共 280 页

207 详细说明脱落原因和分析, 包括 10 例死亡详细原因 ), 现有重症手足口的保护效果可能不稳健 建议进行敏感性分析, 并对比分析临床试验现场 ( 江苏 3 个县 ) 未入组的同年龄人群重症手足口病的发病情况 ( 同前 ) 另外, 还要考虑到疫苗临床试验针对常驻人口, 实际中发生的重症流动人口较多也成为一个因素 1.6 免疫原性和 1 年的持久性结果显示全程免后 28 天抗体阳性率 98.6%,GMT 为 103.4, 抗体 GMT 在免后半年下降一半约为 50.5, 半年到 1 年 GMT 较稳定 1.7 综合监测 2 年的保护效果与 1 年结果相比差异不大专家认为本疫苗接种后第 2 年监测病例仅出现在 1 个分现场, 综合手足口病高发季节和 CA16 病例分布 ( 试验组 7 例 安慰剂组 1 例 ), 流行季特征与第 1 年也不同, 专家认为试验数据不支持第 2 年的保护力 审评认为,2 年的监测体系敏感性差异较大, 第 2 年基本属于受试者被动报告的模式, 仅供参考 1.8Ⅲ 期安全性结果显示试验组 (51.7%) 和对照组 (52.8%) 总体不良事件发生率 与接种有关的不良事件 0-56 天不良反应发生率差异均无统计学意义, 且主要为 1 2 级反应 申请人需按中心提出答辩问题 9 的要求整理合并 Ⅰ-Ⅲ 期临床试验和 3 批临床一致性研究等所有研究的安全性数据, 第 207 页 / 共 280 页

208 目前尚未完成汇总所有临床试验的安全性结果, 待补充 1.9 介绍了连续三批临床试验的设计方法及结果统计学家认为三批一致性基于 Fisher 最小显著差异 (LSD) 方法构建置信区间, 同时要求两两组间抗体滴度对数差值置信区间在 (-0.176,0.176) 内, 其方法可接受, 从临床结果来看三批一致性结论成立 审评认可 专家提出的统计问题由中心统计部门处理 ( 如缺失数据填补方法 发病分布 重症病例的稳定性等 ) 汇总专家意见 : 基本认可本品自 6 月龄开始 (3 岁以下 ), 间隔 28 天接种 2 剂的程序, 目前免疫原性数据暂不能确定是否需要加强免疫 同时未观察到本品导致的免疫病理反应, 安全性可接受 建议上市后 Ⅳ 期大规模应用后对间接保护效果 对重症和住院保护效果 免疫持久性和联合接种进行研究 审评认为现有临床试验研究的主要保护终点在 6-11 月龄婴幼儿组的结果不稳健, 是进一步关注的问题 ; 本品接种起始年龄还须综合国家相关策略进行推荐 目前本品尚未提供针对多种 EV71 基因型病毒的中和试验结果, 建议补充 由于专家会中对于中心要求临床方面答辩内容较多, 申请人汇报中有若干问题并未进行解释, 尚须根据补充提供的相关资料进一步详细审评, 待补充资料 第 208 页 / 共 280 页

209 2 生物统计方面专家咨询会意见咨询会议的统计专家均认为该 Ⅲ 期临床试验的统计分析规范, 分析方法恰当, 结果详尽, 结论可信 对于主要疗效指标数据的缺失, 申请人在发补资料中提供了敏感性分析结果, 按照安慰剂组的发病率估计两组缺失数据的发病人数, 专家认为这会低估疫苗的保护力 审评认为, 即使将此认为是最保守的估计,FAS 集 EV71 感染所致疾病 ( 手足口病和疱疹性咽峡炎 ) 保护率仍可达到 91.9(95%CI: ), 原结果是 94.8( ), 所以该敏感性分析结果提示有效性结论是稳健的 专家认为免疫原性缺失数据用 LOCF 法填补可能不保守, 因为免疫原性抗体呈单峰形状变化, 先上升后下降, 随着远离接种时间, 抗体将逐渐降低, 所以采用除基线外的最差数据结转填补 (WOCF) 或低四分位数 P 25 填补更合适 审评认为, 首先同意专家的意见, 另外, 由于免疫原性是次要终点, 且原结果显示两组免后抗体阳性率 阳转率 4 倍增长率 GMT 和 GMT 增长倍数等指标均有显著性差异 (FAS 集 P<0.0001,PPS 集 P<0.0001), 审评认为即使对 FAS 集再采用 WOCF 法做敏感性分析, 对结果影响不大 故不再要求申办方提供免疫原性缺失数据的敏感性分析结果 专家认为申办方说明了计算人年数的起止时间的定义, 末次随访时间的计算方法是合理的 审评予以认可 第 209 页 / 共 280 页

210 申办方在专家咨询会上口头解释了未完成病例在两组的分布情况, 以及两组免后 57 天 -14 个月定期随访脱落的例数的矛盾 ( 统计分析报告中是 250 例, 补充资料时是 288 例 ), 申办方认为这是由于在列举脱落原因时归类和先后顺序不同导致的差错, 申办方最终确认主要终点缺失数据填补的人数是 288 例 审评按照申办方提交数据库对此进行了确认, 认可其原因解释, 对该 288 例脱落病例按前述主要终点缺失数据处理方法进行敏感性分析, 结果显示对试验疫苗的有效性结论无影响 对于监测阳性病例的个案调查数据库, 审评确认申办方已经提交且有疫苗编号变量用以与其他数据库进行匹配 对专家咨询会上补充资料的审评意见 ( 生物统计方面 ) 针对申办者回复 8 个问题的补充资料, 审评如下 : 2.1 申办方补充递交了 Ⅰ-Ⅲ 期临床试验以及批间一致性的统计分析计划书, 以及 Ⅲ 期试验的盲态审核决议 2.2 申办方回复,Ⅲ 期临床的不良事件 合并用药 合并用疫苗的统计分析是直接基于具体的事件详情记录 用药详情记录分析的, 未根据 有无 变量进行分析 有无 的变量无论显示 有 还是 无, 只要列表内有具体的事件详情或用药详情记录就纳入统计分析 所有不良事件 合并用药 合并用疫苗的详情记录无误, 因此本次数据清理对统计分析结果无影响, 所有不良事件 合并用药 合并用疫苗的统计分析 第 210 页 / 共 280 页

211 是完整的 准确的 审评对申办方统计的方法进行了确认, 予以认可 2.3 申办方回复如下, 在 EV71 疫苗 III 期临床试验中, 对 EV71 感染所致疾病 的病例监测是按照 III 期临床方案进行的, 包括手足口病 疱疹性咽峡炎 脑炎 脑干脑炎 脑脊髓炎 脊髓灰质炎综合征 格林巴利综合征 无菌性脑膜炎 急性出血性结膜炎 肺水肿 / 肺出血 心肺功能衰竭 严重脑功能衰竭等, 共有 12 种临床表现 经过一年监测周期, 监测到 EV71 感染所致疾病的临床表现有手足口病和疱疹性咽峡炎 2 种, 未监测到其他临床表现的 EV71 感染所致病例 为了提高病例监测的灵敏度,III 期临床试验采用症状监测方法, 对于 EV71 PCR 检测阳性的不能纳入临床方案定义的 12 种临床表现的病例, 经 DSMB 专家确诊为 EV71 阳性其他病例, 包括呼吸道感染病例 消化道感染病例和其他病例 因此保护效果的分析除对主要终点 (EV71 感染所致疾病的保护率 ) 外还进行了所有阳性病例保护效果的分析 请临床专业审评给予评价, 统计学审评无额外意见 2.4 申办者回复, 进入保护效果观察 FAS 集共 例, 在一年的监测期中共有 7187 例 ( 试验组 3550 例, 对照组 3637 例 ) 受试者 第 211 页 / 共 280 页

212 发生了 例次 ( 试验组 7793 例次, 安慰剂组 7962 例次 ) 的不适症状并接受了采样及检测, 所有 例病例均由研究者依据临床表现诊断后, 再经 DSMB 专家审核确认诊断 临床诊断病例结合实验室检测结果进行确诊分类, 病例监测情况具体如下表所示 表 1 疾病监测情况 ( 例次 ) EV71 阳性 CA16 阳性 其他 EV 阳性 EV 阴性 合计 试验组手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 其他 合计 安慰剂组手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 其他 合计 总计手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 其他 合计 病例时间分布情况如表 2 表 2 监测期各类病例时间分布情况 3 月 4 月 5 月 6 月 7 月 8 月 9 月 10 月 11 月 12 月 1 月 2 月 合计 试验组 手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 第 212 页 / 共 280 页

213 其他 合计 安慰剂组手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 其他 合计 总计手足口病 疱疹性咽峡炎 呼吸道感染 消化道感染 其他 合计 所有病例实验室检测结果分类分布如下图所示 图 1 监测期病例实验室检测数据按月分布柱状图建议由临床审评提出要求申办方递交以上症状监测的数据 ( 或登记记录等 ) 及相应的实验室检测结果, 即包含 7187 例 ( 试验组 3550 例, 对照组 3637 例 ) 受试者发生 例 第 213 页 / 共 280 页