2 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期緒言蛋黃顏色會影響消費者之購買意願, 顏色深的蛋黃比較受消費者喜愛然而蛋雞就像其他動物, 無法自己合成色素, 必需從飼料中獲得, 目前許多國家如瑞典, 並不允許在蛋雞飼料中添加合成的色素, 因此許多天然色素越來越被重視葉黃質 (xanthophylls)

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锣昀侯
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1 中國畜牧學會會誌 45(1):1~12, 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 (1) 張永鍾 (2) 陳景懿 (2) 李陽李德南 (2) 葉恩廷 (2)(4) (1) 賴柏志 (3) 林傳順摘要 : 金盞花萃取物 (marigold flower extract, MFE) 含豐富之葉黃素 (lutein) 可當作蛋黃色素的來源, 更能富集於雞蛋提供消費者營養補充, 但其添加 MFE 劑量與富集葉黃素濃度尚缺乏資料, 而作為本研究之探討目的研究選用 384 隻 60 週齡海蘭褐殼蛋雞, 逢機分配至 4 個處理組, 分別為添加及 3 g/kg MFE( 商品 ), 以使飼料分別含有 mg/kg 葉黃素每處理組 4 欄, 每欄 24 隻, 平飼飼養於設有巢箱之稻穀地面, 以每週為 1 期, 連續 4 期分析蛋雞的產蛋性能 ; 每欄在試驗開始 12 天內隔日, 及在 14 天後每 7 天逢機選取 2 顆蛋分析蛋品質及以色差儀分析蛋黃顏色, 並額外分析第 28 天之蛋黃葉黃素濃度研究結果顯示, 飼料添加 1 或 2 g/kg MFE 與對照組有相似之產蛋性能, 但添加 3 g/kg MFE 極顯著降低產蛋率蛋生成量及飼料換蛋率 (P < 0.01) 飼料添加 1 或 2 g/kg MFE 可較對照組顯著提高蛋白高度蛋黃高度及霍氏單位 (P < 0.05), 但添加至 3 g/kg MFE 則與對照組相似隨飼料添加 MFE 濃度逐漸加深蛋黃紅色黃色及色度 (hue), 其中以羅氏扇評分作為蛋黃評估方法較為簡單, 但以色度系統最為敏感試驗 28 天時之飼料 MFE 添加量分別與蛋黃之葉黃素濃度羅氏扇評分紅色值 (a*) 色度及彩度 (chroma) 呈正相關 (P < 0.01), 但與蛋黃亮度值 (L*) 呈現高度負相關 (P < 0.01), 而添加 3 g/kg MFE 可以顯著提升蛋黃葉黃素濃度至 4.11 mg/100 g, 其值約為對照組之 29 倍綜合上述結果, 在熱季期間飼料添加 1 或 2 g/kg MFE 雖未影響產蛋性能但可提高雞蛋品質, 而添加 3 g/kg MFE 雖可增加蛋黃顏色和葉黃素濃度, 但不利於產蛋性能 ( 關鍵語 : 蛋雞葉黃素金盞花萃取物蛋黃顏色 ) (1) (2) (3) (4) 國立宜蘭大學食品科學系,26047 宜蘭縣宜蘭市神農路 1 段 1 號國立宜蘭大學生物技術與動物科學系,26047 宜蘭縣宜蘭市神農路 1 段 1 號財團法人農業科技研究院, 動物科技研究所,35035 苗栗縣竹南鎮科東二路 52 號通訊作者, [email protected].

2 2 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期緒言蛋黃顏色會影響消費者之購買意願, 顏色深的蛋黃比較受消費者喜愛然而蛋雞就像其他動物, 無法自己合成色素, 必需從飼料中獲得, 目前許多國家如瑞典, 並不允許在蛋雞飼料中添加合成的色素, 因此許多天然色素越來越被重視葉黃質 (xanthophylls) 是蛋黃紅色色素跟黃色色素的良好來源, 其中葉黃素 (lutein) 屬於葉黃質一種, 不僅能夠提供蛋黃紅色色素且具有抗氧化增強免疫功能及預防人類視網膜病變等多種功能人類對葉黃素的生物可利用率會依來源而產生差異, 目前已知食用富含葉黃素的雞蛋較其他補充品或菠菜的利用率提高 (Chung et al., 2004), 因此由雞隻飼料供應葉黃素以達到改變蛋黃顏色和增加蛋黃葉黃素為符合先進國家之法規並且可以符合人類之保健需求金盞花 (Tagetes erecta L.) 含有豐富的葉黃質, 而可當作蛋黃的葉黃素和顏色來源根據報告指出, 飼料添加 3.54 g/kg 之金盞花粉 ( 內含 40 mg/kg 葉黃素 ), 即可較對照組提高羅氏扇蛋黃顏色評分 1.41 分 (5.72 vs. 7.13), 且能增強紅色深度, 而蛋黃葉黃素濃度由未添加時的 1 mg/100 g 增加至添加時之 4 mg/100 g, 顯示金盞花粉為提高蛋黃顏色深度和葉黃素濃度之天然來源 (Skrivan et al., 2015) 在以經過萃取之金盞花抽出物(marigold flower extract, MFE) 進行試驗, 其產品內含 2% 葉黃質 ( 葉黃素濃度為 mg/kg; 玉米黃素濃度為 9.65 mg/kg), 在添加 g/kg MFE 至蛋雞飼料, 發現添加 0.15 g/kg MFE 可以增加產蛋率, 而且可以增加蛋黃紅色和黃色色度 (P < 0.05), 但卻會降低蛋重而飼料添加 0.15 g/kg MFE 即可較對照組增加蛋黃葉黃素 (1.81 vs mg/100 g) 以及玉米黃素 (zeaxanthin) 濃度 (1.23 vs mg/100 g) 而當飼料添加至 0.35 g/kg MFE 時, 其蛋黃葉黃素和玉米黃素可以分別較對照組增加 1.65 和 1.56 倍 (Skrivan et al., 2015) 由於 MFE 之對蛋黃之著色與葉黃素濃度之報告仍然不多, 故本研究目的為探討蛋雞飼料添加不同含量的 MFE, 測量其對蛋雞產蛋性能蛋品質及於蛋黃葉黃素濃度之影響材料與方法一飼養管理與試驗設計 ( 一 ) 試驗設計研究選用育成期飼養之 384 隻 60 週齡海蘭褐殼蛋雞, 逢機分配至四處理組, 每處理 4 重複, 每重複 24 隻處理為添加及 3 g/kg MFE( 商品 ), 經分析其葉黃素和玉米黃素之平均值 ± 標準偏差分別為 36,333±1,155 mg/kg 和 3,186±525 mg/kg(n=3), 而使飼料葉黃素濃度處理為及 108 mg/kg 以每週為一期, 連續測定四週基礎飼料以玉米 - 大豆粕為主, 組成和營養分含量參照海蘭褐殼蛋雞飼養管理手冊 (2014) 的營養標準配製, 飼料組成和營養成分列於表 1

3 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 3 表 1 飼料組成和營養成分 Table 1 Formula and nutrient composition of diet Item Ingredient (%) Yellow corn Soybean meal Wheat bran 2.00 Fish oil 3.50 Salt 0.30 Methionine 0.18 Lysine 0.05 Threonine 0.04 Limestone, pulverized Dicalcium phosphate (P 21%) 1.20 Choline-Cl, 50% 0.10 Vitmin premix a 0.10 Mineral premix b 0.10 Marigold flower extract or wheat bran c 0.30 Chemical component ME (kcal/kg) 2,800 CP (%) Ca (%) 4.85 Available P (%) 0.36 Methionine (%) 0.39 Met + Cys (%) 0.72 Lysine (%) 0.83 Lutein (mg/kg) 1.00 Zeaxanthin (mg/kg) a Supplied per kg diet; vitamin A, 15,000 IU; vitamin D 3, 1,200 IU; vitamin E, 45 IU; vitamin K 3, 3.0 mg; vitamin B 1, 3.0 mg; vitamin B 2, 7.0 mg; vitamin B 6, 6.0 mg; vitamin B 12, 48.0 mg; Niacin, 35.0 mg; pantothenic, 25.0 mg; Biotin, 0.2 mg; Folacin, 2.0 mg. b Supplied per kg diet; Fe, 60 mg; Mn, 40 mg; Zn, 50 mg; Cu, 5 mg; I, 0.05 mg; Co, 0.05 mg. c The marigold flower extract used in this study were obtained from a commercial product, which extracted from marigold petals with g of lutein and 3.19 g of zeaxanthin per kg of product. Wheat bran was substituted for the same percentage of marigold flower extract.

4 4 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期 ( 二 ) 飼養管理研究由 104 年 7 月 1 日飼養至 104 年 7 月 28 日, 飼養於開放式左右對稱之長方型水泥地雞舍 ( 長 235 cm 寬 145 cm), 共有 16 欄, 每欄飼養 24 隻, 地面鋪粗糠墊料並架有兩根與欄舍等長的棲木與 8 格產蛋巢箱 ( 長 32 cm 寬 27 cm 高 32 cm), 以水槽供應飲水, 飼料任食, 期間雞舍環境溫度之最高溫平均及最低溫平均 30.34, 雞舍光照期間由上午 6 點開始至下午 10 點結束共 16 h, 每日下午四點集蛋二測定項目與分析方法每週測定產蛋性能 1 次, 包括產蛋率飼料採食量產蛋量 (egg mass) 及飼料換蛋率試驗第及 28 天每欄逢機選取 2 顆蛋測定蛋重蛋殼強度蛋黃高度濃厚蛋白高度及計算霍氏單位 (Haugh unit), 並額外收集第 28 天 2 顆蛋之蛋黃, 以測蛋葉黃素濃度, 所以每種飼料於不同分析天數各有 8 顆蛋之樣品 ( 一 ) 蛋品質分析蛋殼強度使用物性測定儀量測 (NRM-2010J-CW, Fudoh, Japan), 探頭以 50 mm/min 速度下降以測定蛋殼最大破裂強度同顆蛋使用霍氏單位測定儀 (TSS, York, UK) 分析蛋白和蛋黃高度, 並以下列公式計算雞蛋之霍氏單位 : Haugh unit = 100 log(h - 1.7W ) H = 濃厚蛋白高度 (mm);w = 蛋重 (g) ( 二 ) 蛋黃顏色測色蛋黃樣品分別以羅氏比色扇和色差儀 (Nippon Penshoku, Tokyo, Japan) 進行分析, 採用 L* a* b* 之觀測值, 以分別代表亮度 (0 = 黑,100 = 白 ) 紅色( = 綠,100 = 紅 ) 及黃色 ( = 藍,100 = 黃 ), 再分別利用 a* 與 b* 值以計算色度 (hue, a*/b*) 和彩度 (chroma =(a* 2 + b* 2 ) 1/2 ) ( 三 ) 蛋黃葉黃素濃度分析蛋黃葉黃素濃度分析參考 Boonnoun et al.(2012) 之方法, 葉黃素標準品 (Sigma) 溶於含 0.2% butylated hydroxytoluene(bht) 之移動相溶液 ( 乙腈 : 甲醇 = 9: 1, v: v)( 溶液 A), 配製成 1000 mg/kg 之標準品貯備溶液, 再以含 0.2% BHT 之移動相溶液 ( 溶液 A) 配製 mg/kg 葉黃素標準品溶液蛋黃之葉黃素萃取方法參照 Leeson and Caston(2004) 蛋黃於冰上均質 30 sec, 以 - 50 凍藏備用精秤約 0.5 g 樣品, 加入 5 ml 丙酮 ( 含 0.2% BHT), 經超音波震盪 15 min, 靜置 1 h 後取上清液 1 ml, 經氮氣吹乾後, 以含 0.2% BHT 之 1 ml 移動相溶液 ( 溶液 A) 重新溶解取 20 µl 標準品溶液注入高效能液相層析儀 (high performance liquid chromatography, HPLC)(Ecom LCP 4100, Singapore), 分析三重複, 以波峰面積對濃度製作檢量線, 分析管柱採用 Phenomenex C18 管柱 ( mm, 5 mm), 偵測波長 450 nm(jasco UV/VIS-2070, Japan) 移動相為乙腈: 甲醇 (9: 1, v: v)( 溶液 A) 和乙酸乙酯 ( 溶液 B), 總流速 1.0 ml/min 進行線性梯度沖提, 沖提條件為移動相 ( 溶液 B) 經 30 min 由 0% 增加到 100%

5 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 5 三統計分析研究各項資料採用 SAS(2002) 統計軟體, 產蛋率以開方進行資料轉換, 所有資料利用 MIXED 程式進行不同時間之重複測量資料變方分析, 當處理效應 F 值達 P < 0.05 時, 則以最小顯著差異測驗法 (least significant difference test, LSD) 比較處理間之差異顯著性結果飼料添加金盞花萃取物對試驗全期蛋雞產蛋性能之影響, 結果列於表 2 飼料處理未影響單一週別之各項產蛋性能, 但綜合四週之結果發現, 飼料添加 MFE 極顯著影響產蛋率產蛋量及飼料換蛋率 (P < 0.01), 其中以添加 3 g/kg MFE 組顯著較其他三組為低, 但添加量低於 2 g/kg MFE 組則與對照組無顯著差異, 但依 MFE 添加劑量呈直線降低 (P < 0.01) 飼料處理未影響蛋重隻日採食量或破蛋率, 此期平均隻日採食量約為 g/d, 而蛋重約 g, 添加 3 g/kg MFE 組較對照組降低飼料採食量 6 g, 但未達顯著差異水準 (P > 0.05) 表 2 飼料添加金盞花萃取物對試驗全期蛋雞產蛋性能之影響 Table 2 Effect of dietary marigold flower extract on production performance of laying hens during 4 weeks Marigold flower extract (g/kg) Orthogonal contrast Item SEM P value L Q Egg production (%) a a a b Egg weight (g) Egg mass (g/day) a a a b ADFI (g/day) Feed: egg (g/g) 2.00 a 1.99 a 2.04 a 2.20 b a, b Means within the same row without common superscripts differ significantly (P < 0.05). L: Linear effect; Q: Quadric effect. 飼料添加金盞花萃取物對蛋品質之影響, 結果列於表 3 28 天試驗期間各處理組之蛋品質在 0-21 天均沒有差異 ( 資料未顯示 ), 因此結果區分成第 28 天以及統合 0-28 天說明單就第 28 天之結果發現, 飼料添加 1 g/kg MFE 組可較對照組和 3 g/kg MFE 組提高蛋白高度和霍氏單位 (P < 0.05), 而飼料添加 1-3 g/kg MFE 組別均可較對照組提升蛋黃高度 (P < 0.05) 統合 0-28 天結果發現, 飼料添加 2 g/kg MFE 組較對照組提升蛋黃高度 (P < 0.05), 而其他 2 組居中, 飼料處理未能影響蛋殼強度蛋白高度或霍氏單位

6 6 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期表 3 飼料添加金盞花萃取物對蛋品質之影響 Table 3 Effect of dietary marigold flower extract on egg quality of laying hens Marigold flower extract (g/kg) Item SEM P value Day 28 Egg shell strength (kg) Egg white height (mm) 5.90 b 7.83 a 7.64 ab 6.32 b Egg yolk height (mm) b a a a Haugh unit (HU + ) c a ab bc Overall mean Egg shell strength (kg) Egg white height (mm) Egg yolk height (mm) b ab a ab Haugh unit (HU + ) HU = 100 log[h 1.7(W) ], H = Egg white height and W = Egg weight. a, b, c Means within the same row without common superscripts differ significantly (P < 0.05). 飼料添加 MFE 對蛋雞蛋黃色澤之目視照片, 結果列於圖 1 經由目視可以發現飼料添加 0-3 g/kg MFE 會隨著試驗期逐漸加深蛋黃顏色飼料添加 MFE 對蛋黃色澤光學之影響, 結果列於圖 2 研究分別針對(a) 羅氏比色扇 (b) 亮度 (c) 紅色 (d) 黃色 (e) 色度及 (f) 彩度進行分析, 結果發現所有項目均受飼料添加 MFE 試驗天數以及二者交互作用之影響 (P < 0.01) 在羅氏扇評分值上 ( 圖 2-a), 所有添加 MFE 組別在試驗第 4 天即可超過 11 分並比對照組提升約 2 3 分, 並持續至第 28 天 (P < 0.01), 此時對照組和添加 3 g/kg MFE 組之羅氏扇評分值分別為 8.63 和 13.63, 以後者較前者提高 1.58 倍 (P < 0.01) 飼料添加 MFE 至第 6 天起, 隨 MFE 添加量增加呈直線降低蛋黃 L* 值 ( 圖 2-b), 至第 28 天時,0 1 2 及 3 g/kg MFE 添加量組之蛋黃 L* 值分別為及 49.29, 顯示添加高量 MFE 會降低蛋黃 L* 值 (P < 0.01), 其值在最大與最小值間差異 1.14 倍飼料添加 MFE 至第 4 天起, 隨 MFE 添加量增加呈直線提高蛋黃 a* 值 ( 圖 2-c), 至第 28 天時,0 1 2 及 3 g/kg MFE 添加量組之蛋黃 a* 值分別為及 11.58, 顯示高量 MFE 組別會降低蛋黃 a* 值 (P < 0.01), 其值在最大與最小值間差異 6.47 倍飼料添加 MFE 處理至第 4 天起, 會隨 MFE 添加量增加呈直線提高蛋黃 b* 值 ( 圖 2-d), 至第 28 天時,0 1 2 及 3 g/kg MFE 添加量組之蛋黃 b* 值分別為及 83.59, 依 MFE 添加量增加呈現二次曲線趨勢提高 (P < 0.01), 且其值在最大與最小值間差異 1.12 倍蛋黃色度以紅色與黃色之比值表示 ( 圖 2-e), 其值在飼料添加 MFE 至第 4 天起, 隨 MFE 添加量增加呈二次曲線提高, 而至第 28 天時, 添加及 3 g/kg MFE 組之蛋黃色度分別為及 0.14, 顯示高量 MFE 會增加色度值 (P < 0.01), 且其值在最大與最小值間差異 9 倍飼料添加 MFE 至第 4 天起, 即可影響蛋黃彩度 ( 圖 2-f), 其反應趨勢隨試驗期產生變化, 至第 28 天時, 添加及 3 g/kg MFE 組之蛋黃彩度分別為及 84.39, 顯示添加 1 g/kg MFE 有最高值, 然後隨 MFE 添加量增加而下降 (P < 0.01), 且其值在最大與最小值間差異僅 1.12 倍

7 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 7 圖 1 飼料添加金盞花萃取物對蛋黃色澤之照片 Figure 1 Pictures of egg yolk coloration in dietary fed various marigold flower extract.

8 8 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期圖 2 飼料添加金盞花萃取物對蛋黃色澤 (a) 羅氏比色扇 (b) 亮度 (c) 紅色 (d) 黃色 (e) 色度及 (f) 彩度之影響 Figure 2 Effect of dietary marigold flower meal extract on yolk coloration (a) Roche yolk color fan; (b) lightness; (c) redness; (d) yellowness; (e) hue; and (f) chroma of laying hens. Chroma = (a 2 + b 2 ) 1/2. 飼料添加金盞花萃取物對蛋黃葉黃素濃度之影響, 結果列於表 4 飼料添加 2-3 g/kg MFE 可以顯著提高蛋黃葉黃素玉米黃素及葉黃質濃度 (P < 0.01), 其中添加 3 g/kg MFE 組之蛋黃葉黃素量超過對照組 29 倍 (4.11 vs mg/100 g 蛋黃 ), 而蛋黃玉米黃素含量在處理間亦達顯著差異, 其值以飼料添加 3 g/kg MFE 組較對照組增加倍 (17.18 vs mg/100 g 蛋黃 ), 而蛋黃葉黃質含量亦以飼料添加 3 g/kg MFE 組較對照組增加倍 (21.30 vs mg/100 g 蛋黃 )

9 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 9 表 4 飼料添加金盞花萃取物對蛋黃葉黃素濃度之影響 Table 4 Effect of dietary marigold flower extract on yolk lutein concentration of laying hens Marigold flower extract (g/kg) P Orthogonal contrast Item SEM value L Q Lutein (mg/100 g) 0.14 c 0.70 c 2.23 b 4.11 a Zeaxanthin (mg/100 g) 0.92 b ab a a Xanthophylls (mg/100 g) 1.06 c b ab a a, b,c Means within the same row without common superscripts differ significantly (P < 0.05). 試驗第 28 天飼料金盞花萃取物添加量蛋黃葉黃素濃度及蛋黃色素之相關分析, 結果列於表 5 由各項分析結果顯示, 飼料添加 MFE 與蛋黃葉黃素濃度羅氏扇評分值 a* b* 色度及彩度呈現正相關, 但與蛋黃 L* 呈現負相關 (r = -0.96, P < 0.01) 蛋黃葉黃素濃度與羅氏扇評分和 a* 及色度呈現正相關 (P < 0.01), 但與 L* 值呈現負相關 (P < 0.01) 而羅氏扇評分分別與 a* 色度及彩度呈正相關(P < 0.01), 但與 L* 值呈現高度負相關 (P < 0.01) 而 L* 值分別與 a* 和色度呈現負相關 (P < 0.01),a* 與色度呈現正相關 (P < 0.01), 但是色度與彩度相關性不顯著 (P > 0.05) 表 5 試驗第 28 天飼料金盞花萃取物添加量蛋黃葉黃素濃度及蛋黃色素之相關分析 Table 5 Correlation coefficients among dietary marigold flower extract, yolk lutein, and yolk color parameters of laying hens on day 28 Item Feed Yolk MFE lutein RCF L* a* b* Hue Chroma Feed MFE 1.00 Yolk lutein 0.89 ** 1.00 RCF 0.90 ** 0.72 ** 1.00 L* ** ** -0.95** 1.00 a* 0.93 ** 0.79 ** 0.99** ** 1.00 b* Hue 0.95 ** 0.81 ** 0.98** ** 1.00 ** Chroma 0.21 ** ** ** MFE = marigold flower extract. RCF = Roche color fan scale. **: P < 討論一產蛋性能本研究正值熱季進行, 雞舍配製抽風機進行降溫, 但其平均隻日採食量仍較商業標準減少 g, 且所添加之 MFE 含有濃郁的青草花味, 當添加量提高至 3 g/kg MFE 即會因減低飼料採食量而致降低產蛋率產蛋量及飼料換蛋率類似報告亦有相似之結論, 如 Lokaewmanee et al.(2011) 之報告指出, 飼料添加 0.89 g/kg 金盞花粉 ( 內含 10 mg/kg 葉黃素 ) 或 1.77 g/kg MFE( 內含 40 mg/kg 葉黃素 ) 會分別較對照組減少飼料採食量 7 和 8 g/ 日, 而其產蛋率由 94.3% 分別降低至 78.5 和 76.2% 所以在考慮維持雞隻之產蛋性能時, 需添加 2 g/ kg MFE 或以下劑量, 較不會損害產蛋性能, 但若要以此試驗原料型式添加高劑量以增加雞蛋葉黃素之途徑, 將會損害蛋雞之生產性能

10 10 中國畜牧學會會誌第四十五卷第一期二蛋品質特性 ( 一 ) 蛋品質本研究添加 2 g/kg MFE 即可較對照組改善試驗 28 天起之蛋白高度蛋黃高度及其對應之霍氏單位而根據盧等 (2013) 之報告顯示, 蛋雞飼料中添加 1 g/kg MFE( 內含 25 mg/kg 葉黃素 ) 同樣可較對照組提升蛋之霍氏單位由於蛋白的分泌主要在輸卵管膨大部, 分泌腺依次分泌內稀蛋白濃厚蛋白和外稀蛋白包裹在卵黃外因此, 飼料 MFE 如何影響輸卵管之分泌部, 以致改變蛋白高度之原因尚不清楚, 雖然劉等 (2009) 之報告為推論與葉黃素的抗氧化作用有關, 但是本試驗亦發現 MFE 添加量達 3 g/kg 即會降低蛋白高度, 顯出其作用機制恐怕相當複雜, 其中至少可能與其飼料採食量有關 ( 二 ) 蛋黃顏色葉黃素在動物體內不能轉化為維生素 A, 其在吸收後不發生結構改變而可直接轉移至卵巢蓄積, 因此飼料添加葉黃素能夠提高蛋黃顏色本研究分析蛋黃顏色採用羅氏比色扇, 其顏色分為 15 級, 再者為使用色差儀可測得代表亮度之 L* 代表紅色深淺之 a* 代表黃色深淺之 b* 色度(a*/b*) 及彩度研究結果顯示隨著 MFE 添加量與試驗天數交互影響蛋黃顏色變化, 其 MFE 添加量高時在試驗第 4 天起, 而添加量低時需延長至第 6 天即會加深蛋黃顏色, 此研究結果和其他報告相似 (Lokaewmanee et al., 2011; Skrivan et al., 2015) 本研究之所有添加 MFE 組別在試驗第 4 天蛋黃顏色即可超過羅氏比色扇 11 分, 其值較對照組提升 2 3 分, 並可滿足消費者對顏色之需求, 而此評估方法最為簡單, 但其敏感度差異比在飼料處理間約 1.58 倍而顯示出稍低之敏感度蛋黃 L* 值 a* 值 b* 值及色度系統均與飼料 MFE 添加量呈正相關, 而其在飼料處理間之敏感度差異比分別約為 1.14 倍 6.47 倍 1.12 倍及 9 倍由此結果顯示蛋黃 a* 值和色度之處理間差異最大, 其隨 MFE 添加量增加而提高蛋黃紅色深度, 而色度為評估蛋黃顏色之最敏感方法, 此結果亦和文獻報告類似 (Lokaewmanee et al., 2011) 三蛋葉黃素濃度變化由於金盞花含有豐富的葉黃質, 而可當作蛋黃的葉黃素來源, 其在腸道中須經過膽汁乳化分散皂化或脂質水解過程, 使以酯化成為游離態, 然後在腸道中與類似脂溶性維生素之途徑吸收 (Yonekura and Nagao, 2007) 依據本研究之資料, 飼料添加 3 g/kg MFE 可以顯著提高蛋黃葉黃素濃度, 顯示本研究所使用之 MFE 材料可經吸收並轉移至蛋黃中蓄積, 且其值在添加 3 g/kg MFE 組之蛋黃葉黃素量為 4.11 mg/100 g 蛋黃, 較對照組提升 29 倍而依此結果, 利用飼料葉黃素濃度以計算出蛋黃葉黃素濃度, 所獲得之迴歸方程式如下 : 2 Yolk lut = Feed lut (R 2 = 0.89) 其中 Yolk lut : 代表蛋黃葉黃素濃度 (mg/100 g) Feed 2 lut : 代表飼料葉黃素濃度之平方 (mg/g) 參考文獻指出, 飼料中添加至 3.54 g/kg 之金盞花粉 ( 內含 40 mg/kg 葉黃素 ), 可較對照組提高蛋黃葉黃素濃度 4 倍 (Lokaewmanee et al., 2011), 飼料添加 350 mg/kg MFE( 葉黃素含量 7.44 mg/kg), 可提升蛋黃葉黃素濃度倍, 即蛋黃葉黃素濃度可達 2.98 和 2.03 mg/100 g DM(Skrivan et al., 2015) 因本研究發現添加過量 MFE 會導致生產性能

11 蛋雞飼料添加金盞花萃取物對蛋黃顏色和葉黃素濃度之影響 11 之損害, 因此若要再提升蛋黃葉黃素濃度, 應可參考 Leeson and Caston(2004) 和 Leeson et al.(2007) 之方法, 於飼料供應純度更高之葉黃素產品, 且配合飼料選用 8% 玉米筋粉和 2.5% 苜蓿粉並添加 250 mg/kg 之葉黃素, 而使蛋黃葉黃素蓄積至 1.6 mg/60 g 蛋, 其值若由 60 g 蛋含 16 g 蛋黃之比例計算, 每 100 g 蛋黃將可蓄積 10 mg 之葉黃素結論飼料添加 1-2 g/kg 金盞花抽出物可以提高蛋雞蛋品質以及改善蛋黃顏色, 而添加 3 g/kg MFE 雖可增加蛋黃葉黃素濃度但不利於產蛋性能, 而評估蛋黃顏色以羅氏比色扇評分較為簡單, 且以色度系統最為敏感誌謝本研究承蒙宜蘭大學吳輔祐博士指導色差儀使用與動科所楊天樹博士修改文稿, 特此致謝參考文獻飼養管理手冊 2014 海蘭紅寶書 - 在線飼養管理手冊劉春泉李大婧雷芳宋江峰 2009 葉黃素軟膠囊抗氧化功能人體試食試驗研究江蘇農業科學 2009: 盧建王克華曲亮童海兵李尚民 2013 萬壽菊提取物對蘇禽青殼蛋雞產蛋性能蛋品質和蛋黃膽固醇含量的影響動物營養學報 25: Boonnoun, P., T. Opaskonkun, P. Prasitchoke, M. Goto, and A. Shotipruk Purification of free lutein from marigold flowers by liquid chromatography. Eng. J. 16: Chung, H. Y., M. H. Rasmussen, and E. J. Johnson Lutein bioavailability is higher from luteinenriched eggs than from supplements and spinach in men. J. Nutr. 134: Froescheis, O., S. Moalli, H. Liechti, and J. Bausch Determination of lycopene in tissues and plasma of rats by normal-phase high-performance liquid chromatography with photometric detection. J. Chromatogr. B. Biomed. Sci. Appl. 739: Leeson, S., and L. Caston Enrichment of eggs with lutein. Poult. Sci. 83: Leeson, S., L. Caston, and H. Namkung Effect of dietary lutein and flax on performance, egg composition and liver status of laying hens. Can. J. Anim. Sci. 87: Lokaewmanee, K., K. Yamauchi, T. Komori, and K. Saito Enhancement of yolk color in raw and boiled egg yolk with lutein from marigold flower meal and marigold flower extract. J. Poult. Sci. 48: SAS SAS/STAT User' s Guide (Release 9.0). SAS Inst. Inc., Cary, NC. Skrivan, M., M. Englmaierova, E. Skrivanova, and I. Bubancova Increase in lutein and zeaxanthin content in the eggs of hens fed marigold flower extract. Czech J. Anim. Sci. 60: Yonekura, L., and A. Nagao Intestinal absorption of dietary carotenoids. Mol. Nutr. Food Res. 51:

12 J. Chin. Soc. Anim. Sci. 45 (1):1~12, 2016 Effects of dietary supplementation of marigold flower extract on yolk color and lutein concentration in laying hens Yung-Chung Chang (1), Jling-Yi Chen (2), Yang Li (2), An-Ting Yeh (2), Po-Chih Lai (1), Chuan-Shun Lin (3) and Der Nan Lee (2)(4) ABSTRACT Marigold flower extract is abundant in lutein and it has been reported that it could enrich pigments and lutein content in yolk once supplemented to laying hens. But the dosage response of yolk retention of lutein has not yet been revealed. A total of week-old laying hens were randomly allocated into 4 diet treatments for 28 days: basal diet supplemented with 0 (control), 1, 2, and 3 g/kg MFE containing 36 mg/g lutein, i.e., lutein level was 0, 36, 72, and 108 mg/kg, respectively. Each treatment consisted of 4 pens and within each, 24 hens were floor fed and set nests. Production performance was measured weekly, and 2 eggs per pen were randomly collected every 2 days for analyzing egg quality and yolk color during 0-12 post treatment; during treatment day of 14-28, eggs were collected weekly. Yolk lutein concentration of laying hens was only analyzed in samples of day 28. Results showed that both 1 and 2 g/kg MFE supplementation increased the egg white height, yolk height, and Haugh unit (P < 0.01), however, 3 g/kg MFE treatment affected little on parameters measured as they were similar to that of control group, no improvement in egg production, egg mass, or feed: egg (g/g). The redness, yellowness, and hue of yolk were enhanced following the diet adding of MFE. Moreover, the Roche color fan scale and hue were realized as the simple and sensitivity method in yolk color measurement, respectively. The dietary MFE content was positively correlated with yolk lutein concentration, Roche color fan scale, redness (a*), hue, and chroma of laying hens on day 28, however, there were negatively correlation with yolk lightness (L*) (P < 0.01). Diet supplemented with 3 g/kg MFE increased the yolk lutein concentration to 4.11 mg/100 g, 29 fold higher than the control. In conclusion, diet added with 1-2 g/kg MFE evidently could improve egg quality during the hot environment, but not on the production performance. However, although 3 g/kg MFE supplementation could enhance the yolk color and lutein concentration, it reduced the production performance of hens. (Key Words: Hen, Lutein, Marigold flower extract, Yolk coloration) (1) Department of Food Science, National Ilan University. 1, Sec. 1, Shen Lung Road, Ilan 260, Taiwan, R.O.C. (2) Department of Biotechnology and Animal Science, National Ilan University. 1, Sec. 1, Shen Lung Road, Ilan 260, Taiwan, R.O.C. (3) Animal technology laboratories, Agricultural Technology Research Institute, No. 52, Kedong 2nd Road, Zhunan Township, Miaoli 350, Taiwan, R.O.C. (4) Corresponding author, [email protected]

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13期xin 中国农学通报 2014,30(13):225-229 hinese gricultural Science ulletin 滴灌加工番茄测土配方施肥效果分析 1,2 张晓宏, 王著龙 3 1, 盛建东 ( 1 新疆农业大学草业与环境科学学院, 乌鲁木齐 830052; 2 新疆农业职业技术学院生