774 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 后发性白内障 (aftercataract) 又称后囊膜混浊 (posteriorcapsularopacification,pco) 是白内障囊 [1] 外摘出术或超声乳化术后最常见并发症 多种调控因素参与了 PCO 的发生发展过程, 其中结

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1 第 34 卷第 6 期 2013 年 11 月 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犡犻 犪狀犑犻犪狅狋狅狀犵犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔 ( 犕犲犱犻犮犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 ) 犞狅犾.34 犖狅.6 犖狅狏.2013 结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 马波, 裴澄, 康前雁, 秦莉, 张小玲, 崔丽臖 ( 西安交通大学医学院第一附属医院眼科, 陕西西安 ) 摘要 : 目的探讨结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor,ctgf) 在人晶状体上皮细胞 (humanlensepi theliumcels,hlecs) 转分化和细胞外基质 (extracelularmatrix,ecm) 合成中的作用 方法采用不同质量浓度 CTGF( μg/L) 对体外培养的人晶状体上皮细胞诱导 24h, 倒置显微镜下观察细胞形态的变化, 免疫荧光法检测 α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA) 在细胞中的表达,Real timepcr 和 Westernblot 方法检测 α SMA Ⅰ 型胶原纤维 (COL I) 和纤维连接蛋白 (Fn) 的表达 结果正常人晶状体上皮细胞为多角形贴壁细胞, 不同浓度 CTGF 诱导 24h 后, 晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形, 细胞间隙变大, 呈纤维细胞样改变 CTGF 可诱导 α SMA 在 HLECs 胞质表达 CTGF 能促进 HLECsα SMA Fn COL I 蛋白和 mrna 的表达, 且这种作用随 CTGF 浓度的增加而增强 ( 犘 <0.05) 结论 CTGF 能促进人晶状体上皮细胞转分化及 CEM 的合成 关键词 : 结缔组织生长因子 ; 晶状体上皮细胞 ; 后囊膜混浊 ;α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA);I 型胶原纤维 (COL I); 纤维连接蛋白 (Fn) 中图分类号 :R776 文献标志码 :A 文章编号 : (2013) 犇犗犐 : /jdyxb 犆狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉狆狉狅犿狅狋犲狊狋狉犪狀狊犱犻犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狅犳犺狌犿犪狀犾犲狀狊犲狆犻狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾狊犪狀犱狊狔狀狋犺犲狊犻狊狅犳犲狓狋狉犪犮犲犾狌犾犪狉犿犪狋狉犻狓 MABo,PEICheng,KANG Qian yan,qin Li,ZHANG Xiao ling,cuili jun (DepartmentofOphthalmology,theFirstAfiliatedHospital,MedicalSchoolof Xi anjiaotonguniversity,xi an710061,china) 犃犅犛犜犚犃犆犜 :Objective 犜狅犲狓狆犾狅狉犲狋犺犲犲犳犲犮狋狊狅犳犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ( 犆犜犌犉 ) 狅狀狋狉犪狀狊犱犻犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狅犳犺狌犿犪狀犾犲狀狊犲狆犻狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾狊 ( 犎犔犈犆狊 ) 犪狀犱狊狔狀狋犺犲狊犻狊狅犳犲狓狋狉犪犮犲犾狌犾犪狉犿犪狋狉犻狓犻狀狏犻狋狉狅.Methods 犎犔犈犆狊狑犲狉犲犻狀犮狌犫犪狋犲犱狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳犆犜犌犉 (0,5,15,30 犪狀犱 60μ 犵 / 犔 ) 犳狅狉 24 犺犻狀狏犻狋狉狅. 犜犺犲犿狅狉狆犺狅犾狅犵犻犮犪犾犮犺犪狀犵犲狊狅犳犎犔犈犆狊狑犲狉犲狅犫狊犲狉狏犲犱狌狀犱犲狉犻狀狏犲狉狋犲犱犿犻犮狉狅狊犮狅狆犲. 犜犺犲犲狓狆狉犲狊犻狅狀狅犳 α 狊犿狅狅狋犺犿狌狊犮犾犲犪犮狋犻狀 (α 犛犕犃 )( 犪犾犪狀犱犿犪狉犽狆狉狅狋犲犻狀狅犳犲狆犻狋犺犲犾犻犪犾犿犲狊犲狀犮犺狔犿犪犾狋狉犪狀狊犻狋犻狅狀 ) 狑犪狊犿犲犪狊狌狉犲犱犫狔犻犿犿狌犿狅犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犿犲狋犺狅犱. 犈狓狆狉犲狊犻狅狀狊狅犳 α 犛犕犃, 犳犻犫狉狅狀犲犮狋犻狀 ( 犉狀 ) 犪狀犱犮狅犾犪犵犲狀犐 ( 犆犗犔 犐 )( 犿犪犼狅狉犮狅犿狆狅狀犲狀狋狊狅犳犲狓狋狉犪犮犲犾狌犾犪狉犿犪狋狉犻狓 ) 狑犲狉犲犲狏犪犾狌犪狋犲犱犫狔犚犲犪犾 狋犻犿犲犘犆犚犪狀犱犠犲狊狋犲狉狀犫犾狅狋犪犳狋犲狉狊狋犻犿狌犾犪狋犲犱犫狔犆犜犌犉.Results 犜犺犲狀狅狉犿犪犾犎犔犈犆狊狆狉犲狊犲狀狋犲犱狆狅犾狔犵狅狀犪犾犪狀犱犪狀犮犺狅狉犪犵犲 犱犲狆犲狀犱犲狀狋犿狅狉狆犺狅犾狅犵狔. 犃犳狋犲狉犻狀犮狌犫犪狋犻狅狀狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳犆犜犌犉犳狅狉 24 犺, 犎犔犈犆狊狋狌狉狀犲犱犳狉狅犿犿狅狀狅犾犪狔犲狉犪狀犱狆狅犾狔犵狅狀犪犾犳犻犫狉狅犮狔狋犲狊犻狀狋狅狊狆犻狀犱犾犲犮犲犾狊, 犪狀犱狋犺犲犻狀狋犲狉犮犲犾狌犾犪狉狊狆犪犮犲犫犲犮犪犿犲犫犻犵犵犲狉.α 犛犕犃狑犪狊犲狓狆狉犲狊犲犱犻狀犮狔狋狅狆犾犪狊犿犪犪犳狋犲狉犻狀犱狌犮狋犻狅狀犫狔犆犜犌犉. 犆犜犌犉犮狅狌犾犱狆狉狅犿狅狋犲犎犔犈犆狊狋狅犲狓狆狉犲狊 α 犛犕犃, 犉狀犪狀犱犆犗犔 犐犪狋狋犺犲犿犚犖犃犪狀犱狆狉狅狋犲犻狀犾犲狏犲犾狊犻狀犪犱狅狊犲 犱犲狆犲狀犱犲狀狋犿犪狀狀犲狉 ( 犘 <0.05).Conclusion 犆犜犌犉犮犪狀狆狉狅犿狅狋犲狋狉犪狀狊犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狅犳犎犔犈犆狊犪狀犱狊狔狀狋犺犲狊犻狊狅犳犲狓狋狉犪犮犲犾狌犾犪狉犿犪狋狉犻狓. 犓犈犢犠犗犚犇犛 : 犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ; 犾犲狀狊犲狆犻狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾 ; 狆狅狊狋犲狉犻狅狉犮犪狆狊狌犾犪狉狅狆犪犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀 ;α 狊犿狅狅狋犺犿狌狊犮犾犲犪犮狋犻狀 (α 犛犕犃 ); 犮狅犾犪犵犲狀犐 ( 犆犗犔 犐 ); 犳犻犫狉狅狀犲犮狋犻狀 ( 犉狀 ) 收稿日期 : 修回日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 (No ) SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No ) 通讯作者 : 裴澄, 硕士生导师.E mail:peich71@163.com 作者简介 : 马波 (1987 ), 男 ( 汉族 ), 博士研究生. 研究方向 : 白内障.E mail:mb780723@stu.xjtu.edu.cn; 裴澄 (1971 ), 男 ( 汉族 ), 副主任医师, 硕士生导师. 研究方向 : 白内障.E mail:peich71@163.com. 共同第一作者. 网络出版时间 : 网络出版地址 :htp://

2 774 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 后发性白内障 (aftercataract) 又称后囊膜混浊 (posteriorcapsularopacification,pco) 是白内障囊 [1] 外摘出术或超声乳化术后最常见并发症 多种调控因素参与了 PCO 的发生发展过程, 其中结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor,ctgf) 转化生长因子 β ( transforminggrowthfactor β, TGF β ) 表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,egf) 和成纤维生长因子 (fibroblastgrowthfactor,fgf) 在 [2] PCO 的发展过程中起着重要作用 CTGF 是近年来发现的重要分泌型生长因子, 通过与不同的受体结合而发挥生物学效应 其主要作用表现为促进细胞有丝分裂和成纤维细胞增殖, 合成胶原 ; 介导细胞黏附和细胞迁移 ; 促纤维化作用等 本实验采用外源性 CTGF 对体外培养的人晶状体上皮细胞进行诱导, 观察人晶状体上皮细胞 (humanlensepithelium cels, HLECs) 细胞形态的变化以及 CTGF 对 HLECs 转分化和细胞外基质 (extracelularmatrix,ecm) 合成的影响, 探讨 CTGF 与 PCO 的关系及其作用机制, 为预防 PCO 的发生和探索新的治疗途径提供实验依据 1 材料与方法 1.1 试剂与仪器人晶状体上皮细胞系 SRA01/04 ( 购于 AmericanTypeCultureColection,ATCC), CTGF( 英国 Peprotech 公司 ),DMEM 培养液 ( 赛默飞世尔生物化学有限公司 ),FASTAgen RNAfast200 试剂盒 ( 中国飞捷生物公司 ), 鼠抗人 α SMA 单克隆抗体 (1 1000) 兔抗人 COL I 多克隆抗体 (1 300) 鼠抗人纤维连接蛋白 (fibronectin, Fn) 单克隆抗体 (1 300)(Milipore), 逆转录试剂盒 Real timepcr 试剂盒 (TaKaRa 公司 );Real time PCR 仪 (BIO RAD IQ5Multicolor Real time PCR detectionsystem) 1.2 细胞处理取 20 代以内 HLECs 以 / 瓶的密度接种于培养瓶内,150mL/LFBS+DMEM 培养液进行培养, 待细胞密度达 80% 时, 吸去培养液, 用不含血清的 DMEM 培养液饥饿 24h 实验组加入含 CTGF 的无血清培养基 3mL, 使 CTGF 终质量浓度为 μg/L, 对照组加入等体积不含 CTGF 的无血清培养基, 继续培养 24h 后, 倒置显微镜下观察各组细胞形态的变化 1.3 免疫荧光法检测 α 犛犕犃在细胞中的表达将细胞消化传代到预先放有载玻片的六孔板中, 继续培养 12h,30μg/L CTGF 处理细胞 24h; 用温预的 PBS 洗片 3 次, 每次 10min;40g/L 多聚甲醛溶液室温固定 20~30min,PBS 洗片 3 次,2mL/L Triton X 100 透化 2~5 min,50 ml/l 山羊血清封闭 30 min, 以 鼠抗人 α SMA 抗体孵育 4 过夜 荧光二抗避光孵育 30min,PBS 洗片 3 次, 甘油封片 1.4 犚犲犪犾 狋犻犿犲犘犆犚测定 α 犛犕犃 犆犗犔 犐和犉狀犿犚 犖犃的表达 1 总 RNA 的提取 : 取各组样品中的 HLECs, 吸除培养液,PBS 冲洗细胞 3 次, 胰酶消化法消化细胞, 移入离心管中, 按照 FASTAgen RNAfast200 试剂盒说明书进行操作 获得总 RNA, 各组样品质量 ( 犃 260/ 犃 280) 均在 1.8~2.1 之间 2 逆转录 : 按 cdna 合成试剂盒的说明进行 RNA 的转录 37 15min 3( 反转录反应 ) 85 5s( 反转录酶的失活反应 ) 体系进行扩增, 得到 cd NA 3Real timepcr 各引物序列 :α SMA 上游引物 GACAATGGCTCTGGGCTCTGTAA; 下游引物 CTGTGCTTCGTCACCCACGTA,Fn 上游引物 CAGGATCACTTACGGAGAAACAG; 下游引物 GCCAGTGACAGCATACACAGTG,COL I 上游引物 TCTAGACATGTTCAGCTTTGTGGAC; 下游引物 TCTGTACGCAGGTGATTGGTG, β Actin 上游引物 TGGCACCCAGCACAATGAA; 下游引物 CTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCA 引物均由 TaKaRa 公司设计合成 按照 SYBR PrimixEx 犜犪狇 Ⅱ PCR 试剂盒的说明进行目的片段的扩增, 扩增仪反应条件为 :95 30s;95 5s 60 20s,40 个循环,65 15s 1.5 犠犲狊狋犲狉狀犫犾狅狋测定 α 犛犕犃 犆犗犔 犐 犉狀蛋白的表达 HLECs 培养 24h 去除培养液后, 用细胞刮勺将细胞刮下, 加入 100μL 细胞裂解液 ( 配方 ) 冰上重悬 30min, 期间给予适当吹打, 于 r/min 离心 15min, 小心收集上清 BCA 蛋白定量法检测蛋白浓度, 取 50μg 蛋白上样于 80g/L 聚丙烯酰胺凝胶进行电泳 电泳后将样品蛋白转移至 NC 膜上, 50g/L 脱脂奶粉室温封闭 3h, 以鼠抗人 α SMA 兔抗人 COL I 鼠抗人 Fn 抗体 4 孵育过夜 用 TBST( 含 1mL/LTween 20) 缓冲液洗膜 10min, 共 3 次, 以 1:10000 HRP 标记的二抗室温孵育 2h, TBST 洗膜 15min, 共 3 次, 将 NC 膜浸入增强化学发光液中 5min, 暗室 X 线片压片曝光 2min, 洗片 1.6 图像的采集及分析 Real timepcr 通过 Bio Q 程序对结果进行统计, 得到各组 PCR 的 CT 值 Westernblot 图片扫描后, 经 ImageJ 程序对条带中心密度进行测定 1.7 统计学方法采用 SPSS13.0 统计软件进行统计学分析 所有数据均以珔狓 ± 狊表示, 所有试验均重复 3 次 不同浓度 CTGF 组和对照组 α SMA COL I Fn

3 6 期马波, 裴澄, 康前雁, 等. 结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 775 蛋白及 mrna 在 HLECs 中表达的总体比较采用单因素方差分析, 组间的多重比较采用 TurkeyHSD 检验 以犘 <0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 犆犜犌犉诱导后犎犔犈犆狊的形态变化正常 HLECs 为多角形贴壁细胞, 经不同浓度 CTGF 诱导 后, 晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形, 细胞间隙变大, 且随着 CTGF 浓度增大, 变化更明显 在 CTGF 质量浓度为 5μg/L 时仍可见正常 HLECs; 当质量浓度为 15μg/L 时,HLECs 大部分转分化为纤维细胞 ; 当质量浓度达到 60μg/L 时,HLECs 几乎全部转分化为纤维细胞 ( 图 1) 图 1 不同浓度犆犜犌犉诱导后犎犔犈犆狊的形态变化 Fig.1ThemorphologicalchangesofHLECsafterinductionbydiferentconcentrationsofCTGF A:0μg/L;B:5μg/L;C:15μg/L;D:30μg/L;E:60μg/L 2.2 α 犛犕犃在犎犔犈犆狊中的表达分布对照组 HLECs 未见 α SMA 的表达 ; 细胞经 30μg/LCTGF 处理 24h 后,α SMA 在 HLECs 中表达, 定位于胞质 ( 图 2) 2.3 犆犜犌犉对犎犔犈犆狊表达 α 犛犕犃 犆犗犔 犐和犉狀犿犚犖犃的影响各实验组 HLECs 经不同浓度 CTGF 作用 24h 后,α SMA COL I 和 FnmRNA 表达均较对照组明显增加 ( 表 1), 差异均有统计学意义 ( 犘 <0.05) 各实验组 α SMA COL I 和 FnmRNA 表达随着 CTGF 浓度增加明显增强, 呈现浓度依赖性 ( 表 1) 2.4 犆犜犌犉对犎犔犈犆狊表达 α 犛犕犃 犆犗犔 犐和犉狀蛋白的影响各实验组 HLECs 经不同浓度 CTGF 处理后,α SMA 蛋白表达明显增加 ( 图 3), 并且随 CT GF 浓度的增加表达增强, 呈现浓度依赖性 各个实验组 α SMA 蛋白表达与对照组相比, 差异均有统计学意义 (0.19± ± ± 图 2 对照组和 30μ 犵 / 犔犆犜犌犉实验组 α 犛犕犃在犎犔犈犆狊中的表达 Fig.2 Expressionofα SMAin HLECsincontroland30 μg/lctgfgroups 红色荧光信号为 α SMA 蛋白, 蓝色荧光信号为标记的细胞核 A: 对照组 ;B:30μg/LCTGF 实验组 ±0.07 狏狊.0.07±0.02, 犘 <0.05) HLECsCOL I 蛋白表达随 CTGF 浓度的增加而增强 ( 图 4), 亦呈现浓度依赖性 各实验组 COL I 蛋白表达均较对照组明显增高, 差异均有统计学意义 (1.51± ± ± ±0.04 狏狊.1.40±0.08, 犘 <0.05) 表 1 不同犆犜犌犉浓度对犎犔犈犆狊表达 α 犛犕犃 犆犗犔 犐和犉狀犿犚犖犃的影响 Tab.1 EfectsofdiferentconcentrationsofCTGFontheexpressionsofα SMA mrna,col ImRNAandFnmRNA 组别 mrna 相对表达 α SMA COL I Fn 对照组 μg/LCTGF 组 3.34± ± ± μg/LCTGF 组 4.56± ± ± μg/LCTGF 组 6.58± ± ± μg/LCTGF 组 8.98± ± ±0.47 与对照组比较, 犘 <0.05; 不同浓度 CTGF 组间相互比较, 犘 <0.05

4 776 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 图 3 不同犆犜犌犉浓度对犎犔犈犆狊 α 犛犕犃蛋白表达的影响 Fig.3EfectofdiferentconcentrationsofCTGFontheex pressionofα SMAinHLECs A:α SMA 蛋白印迹图 ;B:α SMA 蛋白的相对表达统计图 ; 与对照组比较, 犘 <0.05 图 5 不同犆犜犌犉浓度对犎犔犈犆狊犉狀蛋白表达的影响 Fig.5 EfectsofdiferentconcentrationsofCTGFonthe expressionoffninhlecs A:Fn 蛋白印迹图 ;B:Fn 蛋白的相对表达统计图 ; 与对照组比较, 犘 < 讨论 PCO 是白内障囊外摘出术或超声乳化摘除术后最常见并发症 白内障术后残留的晶体上皮细胞 (lensepithelium cels,lecs) 在囊膜上转分化 增生 移行, 产生胶原, 是 PCO 发生的主要原因 目前, PCO 的治疗仍以激光后囊膜切开术为主, 但术中可能造成人工晶体损伤, 术后可引起黄斑水肿 眼压升高 视网膜脱落等并发症 因此, 如何预防 PCO 的发生成为近几年研究的热点 生长因子和细胞因子在 图 4 不同犆犜犌犉浓度对犎犔犈犆狊犆犗犔 犐蛋白表达的影响 Fig.4 EfectsofdiferentconcentrationsofCTGFonthe expressionofcol IinHLECs A:COL I 蛋白印迹图 ;B:COL I 蛋白的相对表达统计图 ; 与对照组比较, 犘 <0.05 实验组 HLECsFn 蛋白表达随着 CTGF 浓度增加而增强 ( 图 5), 当质量浓度为 30μg/L 时表达最高 (0.49±0.08),30μg/L 组与 60μg/L 组 (0.37± 0.04) 比较 Fn 的表达无统计学差异 ( 犘 >0.05) 各实验组与对照组 (0.10±0.02) 相比差异均有统计学意义 ( 犘 <0.05) 纤维化发生发展中的作用越来越受到关注, 其中 CT GF 是近年来发现的一个重要分泌型生长因子, 广泛存在于人体多种组织器官中, 尤其在肾脏中含量最高 在不同组织和部位,CTGF 通过与不同的受体结合而发挥生物学效应 其主要作用表现为 :1 促进细胞有丝分裂和成纤维细胞增殖, 合成胶原 ;2 介导细 [3 4] 胞黏附和细胞迁移 ;3 促纤维化作用 ;4 促进血管生成 ;5 调节细胞外基质的合成 诱导细胞凋亡 促进 [5 6] 软骨增生和骨骼发育等 深入研究和探讨 CTGF 与后发性白内障的关系及其作用机制, 将为预防 PCO 的发生和治疗提供新的途径 CTGF 在眼部多种疾病中都发挥着重要作用, 在正常人泪液中存在低浓度的 CTGF [7], 提示 CTGF 可能在眼表纤维化和创伤愈合中有潜在的作用 在角膜瘢痕和损伤修复过程中的角膜中 CTGF 表达增高, 且活化增生的角膜成纤维细胞能合成 CTGF [8]

5 6 期马波, 裴澄, 康前雁, 等. 结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 777 研究发现兔青光眼滤过手术后结膜滤过泡组织中存在 CTGF 和 TGF β 的表达 ; 用外源性 CTGF TGF β 和生理盐水注入丝裂霉素 C 处理的滤泡, 发现 CT [9] GF 和 TGF β 显著增加滤泡失败的比率 研究证实 PVR 增生膜中 CTGF TGF β2 蛋白和 mrna 表达明显上调, 阳性表达主要位于视网膜色素上皮细胞 (retinalpigmentepithelium,rpe) [10] CTGF 可以剂量依赖性促进 RPE 细胞的移行 黏附 增生, 合成 FN 胶原等 ECM,Rho 激酶抑制剂及 CTGF 反义寡核苷酸均可抑制 RPE 细胞的移行和 FN 胶原等 [11] ECM 合成 CTGF 可能作为 TGF β 部分生物学功能的下游效应介质, 介导其促纤维化作用 刺激成纤维细胞增生和 ECM 的合成, 即在促进创伤修复 [12 14] 组织纤维化方面起重要作用 研究发现血管紧张素 Ⅱ 可以诱导大鼠血管平滑肌细胞表达 CTGF, 并 [15] 且可以被 PPAR γ 抑制 正常人晶状体细胞株 SRA01/04 为多角形贴壁细胞, 在前囊下型白内障和后发性白内障时,LECs 可发生斑块状聚集和梭形变 [16] 化, 在光镜下 LECs 似梭形细胞或成纤维系细胞样, 即晶状体上皮细胞转分化 (epithelialmesenchy maltransition,emt),col I α SMA Fn 大量表达 本实验用不同浓度 CTGF 干预 HLECs, 晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形, 细胞呈多层排列 间隙变大, 斑块状聚集, 呈现成纤维细胞样改变, 且随着 CTGF 的浓度增大变化越明显, 表明 CTGF 可诱导晶状体上皮细胞向纤维细胞样转化 晶状体上皮细胞发生 EMT 是 PCO 发生的主要 [17] 病理改变 细胞发生表型转变, 丧失上皮表型, 获得肌动蛋白重组等间质细胞表型是 EMT 发生的特点, 其中 α SMA 表达是晶状体上皮细胞发生上皮间质转分化的重要环节 α SMA 被认为是肉芽组织中成纤维细胞分化为肌成纤维细胞的特征性标志, 也是参与组织纤维化的关键因素 肌动蛋白细胞骨架重新排列和 α SMA 诱导, 为转分化细胞的迁移 浸润以及收缩能力的获取提供了结构基础 Fn COL I 是细胞外基质的主要成分, 分布于细胞表面或细胞之间, 形成网络结构为细胞的迁移提供支架 研究发现, 在前囊膜下及后发性白内障的浑浊斑块中存在 CTGF mrna 的表达, 并证实它是由转分化的晶状体上皮细胞产生的, 同时伴随有 COL I α SMA 和粘 [18 19] 蛋白的大量表达 α SMA 在皮质型和核性白内障中与正常晶状体中的表达没有差异, 而在前囊下性 [20] 和后囊膜混浊中表达明显升高 CTGF 可以诱导牛晶状体上皮细胞转分化为肌成纤维细胞 (MyoF); 促进牛晶状体上皮细胞 α SMA 的表达, 并且呈剂量 依赖性, 同时还可以促进牛晶状体上皮细胞发生迁 [18] 移 在体外应用特异性抗 CTGF 抗体或 CTGF 反义寡核苷酸探针可有效抑制 TGF β1 诱导肾小管 [21 22] 成纤维细胞增生和胶原的合成 本实验采用免疫荧光染色发现, 经 CTGF 诱导后,α SMA 在 HLECs 胞质表达 用 Real timepcr 和 Western blot 方法研究表明,CTGF 可以诱导 HLECs 表达 α SMA, 并且随着 CTGF 浓度的增高,α SMA 蛋白及 mrna 的表达均相应增高 提示 CTGF 可促进 HLECs 上皮间质转分化 CTGF 诱导 HLECs24h 后,Fn 和 COL I 在基因和蛋白水平的表达均增加, 并且这种作用随 CTGF 浓度的增高而增强 提示 CTGF 可促进晶状体上皮细胞 ECM 的合成 综上所述,CTGF 可促进人晶状体上皮细胞 α SMA Fn 及 COL I 基因和蛋白的表达, 并且随浓度的增加作用增强 由此推测 PCO 发生的过程可能为 : 白内障术后患者房水中 CTGF 浓度增加, 从而诱导 LECs 转分化成梭形的肌成纤维细胞 ;CTGF 进一步促进转分化细胞增殖及 ECM 的合成, 形成斑块状聚集, 大量 ECM 的过度合成 蓄积, 导致后囊膜混浊的发生 本研究将为预防 PCO 的发生和探索 PCO 新的治疗途径提供实验依据, 具有潜在的应用价值 参考文献 : [1] 犘犃犖犇犈犢犛犓, 犃犘犘犔犈犇犑, 犠犈犚犖犈犚犔, 犲狋犪犾. 犘狅狊狋犲狉犻狅狉犮犪狆 狊狌犾犲狅狆犪犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀 : 犪狉犲狏犻犲狑狅犳狋犺犲犪犲狋犻狅狆犪狋犺狅犵犲狀犲狊犻狊, 犲狓狆犲狉犻 犿犲狀狋犪犾犪狀犱犮犾犻狀犻犮犪犾狊狋狌犱犻犲狊犪狀犱犳犪犮狋狅狉狊犳狅狉狆狉犲狏犲狀狋犻狅狀 [ 犑 ]. 犐狀犱犻 犪狀犑犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾,2004,52(2): [2] 犠犗犚犕犛犜犗犖犈犕, 犠犃犖犌犔, 犔犐犝犆犛. 犘狅狊狋犲狉犻狅狉犮犪狆狊狌犾犲狅狆犪犮犻犳犻 犮犪狋犻狅狀 [ 犑 ]. 犈狓狆犲狉犻犿犈狔犲犚犲狊,2009,88(2): [3] 王红, 赵占正, 申万琴, 等. 腹膜透析大鼠腹膜组织中犎犐犉 1α 和犆犜 犌犉的表达 [ 犑 ]. 郑州大学学报 : 医学版,2012,47(2): [4] 张曼丽, 高普均, 高润平. 慢性乙型肝病患者血清犜犌犉 β1 犆犜犌犉和犆狅犾 Ⅰ 水平的检测及其意义 [ 犑 ]. 吉林大学学报 : 医学版, 2010,36(1): [5] 犛犗犖犌犑犑, 犃犛犠犃犇犚, 犓犃犖犃犃犖犚犃, 犲狋犪犾. 犆狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ( 犆犜犌犉 ) 犪犮狋狊犪狊犪犱狅狑狀狊狋狉犲犪犿犿犲犱犻犪狋狅狉狅犳犜犌犉 犫犲狋犪 1 狋狅犻狀犱狌犮犲犿犲狊犲狀犮犺狔犿犪犾犮犲犾犮狅狀犱犲狀狊犪狋犻狅狀 [ 犑 ]. 犑犆犲犾犘犺狔狊犻狅犾,2007,210(2): [6] 犌犃犗犚, 犅犚犐犌犛犜犗犆犓犇犚. 犃狀狅狏犲犾犻狀狋犲犵狉犻狀犪犾狆犺犪 5 犫犲狋犪 1 犫犻狀犱犻狀犵犱狅犿犪犻狀犻狀犿狅犱狌犾犲狅犳犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ( 犆犆犖 2/ 犆犜 犌犉 ) 狆狉狅犿狅狋犲狊犪犱犺犲狊犻狅狀犪狀犱犿犻犵狉犪狋犻狅狀狅犳犪犮狋犻狏犪狋犲犱狆犪狀犮狉犲犪狋犻犮狊狋犲犾 犾犪狋犲犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犌狌狋,2006,55(6): [7] 犛犈犜犜犈犖犌犅, 犅犔犃犔犗犆犓犜犇, 犌犚犗犜犈犖犇犗犚犛犜犌, 犲狋犪犾. 犇犲 狋犲犮狋犻狅狀狅犳犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犻狀犺狌犿犪狀狋犲犪狉犳犾狌犻犱 : 狆狉犲犾犻犿犻狀犪狉狔狉犲狊狌犾狋狊 [ 犑 ]. 犃犮狋犪犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾犛犮犪狀犱,2003,81(1): [8] 黄琼, 胡燕华, 李琦涵, 等. 兔角膜成纤维细胞结缔组织生长因子的表达 [ 犑 ]. 中华眼科杂志,2004,40(6): [9] 犈犛犛犗犖犇犠, 犖犈犈犔犃犓犃犖犜犃犖犃, 犐犢犈犚犛犃, 犲狋犪犾. 犈狓狆狉犲狊 狊犻狅狀狅犳犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犪犳狋犲狉犵犾犪狌犮狅犿犪犳犻犾狋狉犪狋犻狅狀

6 778 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 狊狌狉犵犲狉狔犻狀犪狉犪犫犫犻狋犿狅犱犲犾 [ 犑 ]. 犐狀狏犲狊狋犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾犞犻狊犛犮犻, 2004,45(2): [10] 犕犈犢犈犚犘, 犠犝犖犇犈犚犔犐犆犎犓, 犓犃犐犖犎犔, 犲狋犪犾. 犎狌犿犪狀犮狅狀 狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犿犚犖犃犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犲狆犻狉犲狋犻狀犪犾犪狀犱狊狌犫狉犲狋犻狀犪犾犳犻犫狉狅狏犪狊犮狌犾犪狉犿犲犿犫狉犪狀犲狊 : 犪狉犲狆狅狉狋狅犳狋犺狉犲犲犮犪狊犲狊 [ 犑 ]. 犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾狅犵犻犮犪,2002,216(4): [11] 犓犐犜犃犜, 犎犃犜犃犢, 犓犃犖犗犓, 犲狋犪犾. 犜狉犪狀狊犳狅狉犿犻狀犵犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 β2 犪狀犱犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犻狀狆狉狅犾犻犳犲狉犪狋犻狏犲狏犻狋狉犲狅狉犲狋犻狀犪犾犱犻狊犲犪狊犲狊 [ 犑 ]. 犇犻犪犫犲狋犲狊,2007,56(1): [12] 犈犞犃犖犛犚犃, 犜犐犃犖犢犆, 犛犜犈犃犇犕犃犖犚, 犲狋犪犾. 犜犌犉 犫犲狋犪 1 犿犲犱犻犪狋犲犱犳犻犫狉狅犫犾犪狊狋犿狔狅犳犻犫狉狅犫犾犪狊狋狋犲狉犿犻狀犪犾犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狋犺犲狉狅犾犲狅犳狊犿犪犱狆狉狅狋犲犻狀狊 [ 犑 ]. 犈狓狆犆犲犾犚犲狊,2003,282(2): [13] 犓犅犃犖犓犃犖犚, 犗犔犐犞犈犚犖, 犎犈犛, 犲狋犪犾. 犚犲犵狌犾犪狋犻狅狀狅犳犳犻 犫狉狅狀犲犮狋犻狀 犈犇犃狋犺狉狅狌犵犺犆犜犌犉犱狅犿犪犻狀 狊狆犲犮犻犳犻犮犻狀狋犲狉犪犮狋犻狅狀狊狑犻狋犺犜犌犉 β2 犪狀犱犻狋狊狉犲犮犲狆狋狅狉犜犌犉 β 犚犐犐 [ 犑 ]. 犐狀狏犲狊狋犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾犞犻狊犛犮犻,2011,52(8): [14] 犔犈犃犛犓犃. 犜狉犪狀狊犮狉犻狆狋犻狅狀犪犾狆狉狅犳犻犾犻狀犵狅犳狋犺犲狊犮犾犲狉狅犱犲狉犿犪犳犻犫狉狅 犫犾犪狊狋狉犲狏犲犪犾狊犪狆狅狋犲狀狋犻犪犾狉狅犾犲犳狅狉犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ( 犆犜犌犉 ) 犻狀狆犪狋犺狅犾狅犵犻犮犪犾犳犻犫狉狅狊犻狊 [ 犑 ]. 犓犲犻狅犑犕犲犱,2004,53 (2): [15] 高登峰, 牛小麟, 郝广华, 等. 犘犘犃犚 γ 激活对血管平滑肌细胞外基质释放及结缔组织生长因子表达的影响 [ 犑 ]. 西安交通大学学报 : 医学版,2012,33(1):5 10. [16] 犉犝犕, 犣犎犃犖犌犑, 犣犎犝犡, 犲狋犪犾. 犘犲狉狅狓犻狊狅犿犲狆狉狅犾犻犳犲狉犪狋狅狉狊 犿犪狀犪狅狉狋犻犮狊犿狅狅狋犺犿狌狊犮犾犲犮犲犾狊犫狔犻狀狋犲狉犳犲狉犻狀犵狑犻狋犺犛犕犃犇 3[ 犑 ]. 犑犅犻狅犾犆犺犲犿,2001,276(49): [17] 犔犗犞犐犆犝犉犑, 犛犆犎犝犔犣犕犠, 犎犃犔犈犛犃犕, 犲狋犪犾. 犜犌犉 犫犲狋犪犻狀 犱狌犮犲狊犿狅狉狆犺狅犾狅犵犻犮犪犾犪狀犱犿狅犾犲犮狌犾犪狉犮犺犪狀犵犲狊狊犻犿犻犾犪狉狋狅犺狌犿犪狀犪狀狋犲狉犻狅狉狊狌犫犮犪狆狊狌犾犪狉犮犪狋犪狉犪犮狋 [ 犑 ]. 犅狉犑犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾,2002,86 (2): [18] 犠犝犖犇犈犚犔犐犆犎犓, 犘犈犆犎犕, 犈犅犈犚犔犈犃犖, 犲狋犪犾. 犈狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 ( 犆犜犌犉 ) 犿犚犖犃犻狀狆犾犪狇狌犲狊狅犳犺狌犿犪狀犪狀狋犲狉犻狅狉狊狌犫犮犪狆狊狌犾犪狉犮犪狋犪狉犪犮狋狊犪狀犱犿犲犿犫狉犪狀犲狊狅犳狆狅狊 狋犲狉犻狅狉犮犪狆狊狌犾犲狅狆犪犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀 [ 犑 ]. 犆狌狉狉犈狔犲犚犲狊,2000,21(2): [19] 犔犈犈犈犎, 犑犗犗犆犓. 犚狅犾犲狅犳狋狉犪狀狊犳狅狉犿犻狀犵犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 β 犻狀狋狉犪狀狊犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀犪狀犱犳犻犫狉狅狊犻狊狅犳犾犲狀狊犲狆犻狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犐狀 狏犲狊狋犗狆犺狋犺犪犾犿狅犾犞犻狊犛犮犻,1999,40(9): [20] 犚犝犖犌犌犈犚 犅犚犃犖犇犔犈犈, 犆犗犖犜犐犃, 犔犈犝犈犖犅犈犚犌犈犚犘犕, 犲狋犪犾. 犈狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳 α 狊犿狅狅狋犺犿狌狊犮犾犲犪犮狋犻狀犻狀犾犲狀狊犲狆犻狋犺犲犾犻犪犳狉狅犿犺狌犿犪狀犱狅狀狅狉狊犪狀犱犮犪狋犪狉犪犮狋狆犪狋犻犲狀狋狊 [ 犑 ]. 犈狓狆犈狔犲犚犲狊,2005, 81(5): [21] 陈博, 曹阳, 胡义珍. 犆犜犌犉作用与体外培养牛晶状体上皮细胞的研究 [ 犑 ]. 眼科研究,2009,27(12): [22] 犇犝犖犆犃犖犕犚, 犉犚犃犣犐犈犚犓犛, 犃犅犚犃犕犛犗犖犛, 犲狋犪犾. 犆狅狀 狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犿犲犱犻犪狋犲狊狋狉犪狀狊犳狅狉犿犻狀犵犵狉狅狑狋犺犳犪犮 狋狅狉犫犲狋犪 犻狀犱狌犮犲犱犮狅犾犪犵犲狀狊狔狀狋犺犲狊犻狊 : 犱狅狑狀 狉犲犵狌犾犪狋犻狅狀犫狔犮犃犕犘 [ 犑 ]. 犉犃犛犈犅犑,1999,13(13): 犪犮狋犻狏犪狋犲犱狉犲犮犲狆狋狅狉犵犪犿犿犪犻狀犺犻犫犻狋狊狋狉犪狀狊犳狅狉犿犻狀犵犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉 犫犲狋犪犻狀犱狌犮犲犱犮狅狀狀犲犮狋犻狏犲狋犻狊狌犲犵狉狅狑狋犺犳犪犮狋狅狉犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀犻狀犺狌 ( 编辑 韩维栋 ) 櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵 ( 上接第 767 页 ) 狀犻狋狉犻犮狅狓犻犱犲狉犲犾犲犪狊犲 [ 犑 ]. 犘狉狅犮犖犪狋犾犃犮犪犱犛犮犻犝犛犃,2007,104 [3] 犇犃犞犐犌犖犗犖犑, 犌犃犖犣犘. 犚狅犾犲狅犳犲狀犱狅狋犺犲犾犻犪犾犱狔狊犳狌狀犮狋犻狅狀犻狀 (41): 犪狋犺犲狉狅狊犮犾犲狉狅狊犻狊 [ 犑 ]. 犆犻狉犮狌犾犪狋犻狅狀,2004,109(23 犛狌狆狆犾 1):Ⅲ27 [12] 犔犐犑, 犠犎犐犜犈犑, 犌犝犗犔, 犲狋犪犾. 犛犪犾狋犻狀犪犮狋犻狏犪狋犲狊犲狀犱狅狋犺犲犾犻犪犾狀犻 32. 狋狉犻犮狅狓犻犱犲狊狔狀狋犺犪狊犲犻狀犲狀犱狅狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犑犖狌狋狉犻,2009,139 [4] 犅犚犃犌犝犔犃犜犈, 犇犈犔犃犛犐犈犚犚犃犃. 犛犪犾狋犻狀狋犪犽犲, 犲狀犱狅狋犺犲犾犻犪犾 (3): 犱狔狊犳狌狀犮狋犻狅狀, 犪狀犱狊犪犾狋 狊犲狀狊犻狋犻狏犲犺狔狆犲狉狋犲狀狊犻狅狀 [ 犑 ]. 犑犆犾犻狀犎狔狆犲狉 [13] 犜犃犖犌犃, 犉犚犃犖犓犈犔犚, 犆犗犗犓犑, 犲狋犪犾. 犘犚犕犜 1 犻狊狋犺犲狆狉犲 狋犲狀狊,2002,4(1): 犱狅犿犻狀犪狀狋狋狔狆犲犐狆狉狅狋犲犻狀犪狉犵犻狀犻狀犲犿犲狋犺狔犾狋狉犪狀狊犳犲狉犪狊犲犻狀犿犪犿犿犪 [5] 犜犗犇犃犖, 犃犚犃犓犃犠犃犓. 犛犪犾狋 犻狀犱狌犮犲犱犺犲犿狅犱狔狀犪犿犻犮狉犲犵狌犾犪 犾犻犪狀犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犑犅犻狅犾犆犺犲犿,2000,275 (3): 狋犻狅狀犿犲犱犻犪狋犲犱犫狔狀犻狋狉犻犮狅狓犻犱犲 [ 犑 ]. 犑犎狔狆犲狉狋犲狀狊,2011,29 (3): [14] 楚玉峰, 高平进. 犚犺狅犃 犚犗犓通路与高血压 [ 犑 ]. 中华高血压杂 志,2007,15(9): [6] 犛犆犎犕犐犇犔犐犖犗, 犉犗犚犕犃犖犃, 犔犈犗犖犈犃, 犲狋犪犾. 犛犪犾狋狊犲狀狊犻狋犻狏犻 [15] 犔犗犐犚犃犖犇犌, 犌犝犈犚犐犖犘, 犘犃犆犃犝犇犘. 犚犺狅犽犻狀犪狊犲狊犻狀犮犪狉犱犻 狋狔犻狀犫犾犪犮犽狊 : 犲狏犻犱犲狀犮犲狋犺犪狋狋犺犲犻狀犻狋犻犪犾狆狉犲狊狊狅狉犲犳犳犲犮狋狅犳犖犪犆犾犻狀 狅狏犪狊犮狌犾犪狉狆犺狔狊犻狅犾狅犵狔犪狀犱狆犪狋犺狅狆犺狔狊犻狅犾狅犵狔 [ 犑 ]. 犆犻狉犮犚犲狊,2006, 狏狅犾狏犲狊犻狀犺犻犫犻狋犻狅狀狅犳狏犪狊狅犱犻犾犪狋犪狋犻狅狀犫狔犪狊狔犿犿犲狋狉犻犮犪犾犱犻犿犲狋犺狔犾 98(3): 犪狉犵犻狀犻狀犲 [ 犑 ]. 犎狔狆犲狉狋犲狀狊犻狅狀,2011,58(3): [16] 犠犗犔犉犚犝犕犛, 犇犈犖犇犗犚犉犈犚犃, 犚犐犓犐犜犃犓犈犢, 犲狋犪犾. 犐狀犺犻 [7] 犉犐犈犇犔犈犚犔犚, 犠犗犑犆犐犃犓 犛犜犗犜犎犃犚犇犅. 犜犺犲犇犇犃犎 / 犃犇犕犃 犫犻狋犻狅狀狅犳犚犺狅 犽犻狀犪狊犲犾犲犪犱狊狋狅狉犪狆犻犱犪犮狋犻狏犪狋犻狅狀狅犳狆犺狅狊狆犺犪狋犻犱狔犾犻 狆犪狋犺狑犪狔犻狀狋犺犲犮狅狀狋狉狅犾狅犳犲狀犱狅狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾犿犻犵狉犪狋犻狅狀犪狀犱犪狀犵犻狅犵犲狀犲 狀狅狊犻狋狅犾 3 犽犻狀犪狊犲 / 狆狉狅狋犲犻狀犽犻狀犪狊犲犃犽狋犪狀犱犮犪狉犱犻狅狏犪狊犮狌犾犪狉狆狉狅狋犲犮 狊犻狊 [ 犑 ]. 犅犻狅犮犺犲犿犛狅犮犜狉犪狀狊,2009,37( 犘狋 6): 狋犻狅狀 [ 犑 ]. 犃狉狋犲狉犻狅狊犮犾犲狉犜犺狉狅犿犫犞犪狊犮犅犻狅犾,2004,24(19):1842 [8] 犗犌犃犠犃犜, 犓犐犕犗犜犗犕, 犛犃犛犃犗犓犃犓. 犘狌狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱狆狉狅狆犲狉 狋犻犲狊狅犳犪狀犲狑犲狀狕狔犿犲, 犖犌, 犖犌 犱犻犿犲狋犺狔犾犪狉犵犻狀犻狀犲犱犻犿犲狋犺狔犾犪犿犻狀 [17] 犠犗犑犆犐犃犓 犛犜犗犜犎犃犚犇犅, 犜犗犚犗犖犇犈犔犅, 犜犛犃犖犌犔犢犉, 犲狋 狅犺狔犱狉狅犾犪狊犲, 犳狉狅犿狉犪狋犽犻犱狀犲狔 [ 犑 ]. 犑犅犻狅犾犆犺犲犿,1989,264(17): 犪犾. 犜犺犲犃犇犕犃 / 犇犇犃犎狆犪狋犺狑犪狔犻狊犪犮狉犻狋犻犮犪犾狉犲犵狌犾犪狋狅狉狅犳犲狀犱狅 狋犺犲犾犻犪犾犮犲犾犿狅狋犻犾犻狋狔 [ 犑 ]. 犑犆犲犾犛犮犻,2007,120(6): [9] 犉犃犖犌犢, 犕犝犑犑, 犎犈犔犆, 犲狋犪犾. 犛犪犾狋犾狅犪犱犻狀犵狅狀狆犾犪狊犿犪犪狊狔犿 [18] 犔犐犡犎, 犘犈犖犌犑, 犜犃犖犖, 犲狋犪犾. 犐狀狏狅犾狏犲犿犲狀狋狅犳犪狊狔犿犿犲狋狉犻犮 犿犲狋狉犻犮犪犾犱犻犿犲狋犺狔犾犪狉犵犻狀犻狀犲犪狀犱狋犺犲狆狉狅狋犲犮狋犻狏犲狉狅犾犲狅犳狆狅狋犪狊狊犻狌犿 犱犻犿犲狋犺狔犾犪狉犵犻狀犻狀犲犪狀犱犚犺狅犽犻狀犪狊犲犻狀狋犺犲狏犪狊犮狌犾犪狉狉犲犿狅犱犲犾犻狀犵犻狀 狊狌狆狆犾犲犿犲狀狋犻狀狀狅狉犿狅狋犲狀狊犻狏犲狊犪犾狋 狊犲狀狊犻狋犻狏犲犃狊犻犪狀狊 [ 犑 ]. 犎狔狆犲狉 犿狅狀狅犮狉狅狋犪犾犻狀犲 犻狀犱狌犮犲犱狆狌犾犿狅狀犪狉狔犺狔狆犲狉狋犲狀狊犻狅狀 [ 犑 ]. 犞犪狊犮狌犾 狋犲狀狊犻狅狀,2006,48(4): 犘犺犪狉犿犪犮狅犾,2010,53(5 6): [10] 犎犈犉犑, 犕犃犚犓犃犖犇犝犖犇, 犛犃犌犖犈犔犔犃犌犃, 犲狋犪犾. 犘犾犪狊犿犪狊狅 [19] 犇犐犆犐犃犖犗 犗犔犐犞犈犐犚犃犆, 犛犐犚犗犓犕犃犖犢犌, 犛犣犃犛犣犐犓, 犲狋犪犾. 犱犻狌犿 : 犻犵狀狅狉犲犱犪狀犱狌狀犱犲狉犲狊狋犻犿犪狋犲犱 [ 犑 ]. 犎狔狆犲狉狋犲狀狊犻狅狀,2005, 犎狔狆犲狉狅狊犿狅狋犻犮狊狋狉犲狊犪犮狋犻狏犪狋犲狊犚犺狅 : 犱犻犳犲狉犲狀狋犻犪犾犻狀狏狅犾狏犲犿犲狀狋犻狀犚犺狅 45(1): 犽犻狀犪狊犲 犱犲狆犲狀犱犲狀狋犕犔犆狆犺狅狊狆犺狅狉狔犾犪狋犻狅狀犪狀犱犖犓犆犆犪犮狋犻狏犪狋犻狅狀 [ 犑 ]. [11] 犗犅犈犚犔犈犐犜犎犖犈犚犎, 犚犐犈犜犎犕犝犔犔犈犚犆, 犛犆犎犐犔犔犈犚犛犎, 犃犿犑犘犺狔狊犻狅犾犆犲犾犘犺狔狊犻狅犾,2003,285(3): 犆 555 犆 566. 犲狋犪犾. 犘犾犪狊犿犪狊狅犱犻狌犿狊狋犻犳犳犲狀狊狏犪狊犮狌犾犪狉犲狀犱狅狋犺犲犾犻狌犿犪狀犱狉犲犱狌犮犲狊 ( 编辑 卓选鹏 )

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1 期王鑫, 耿希刚, 谭云鹤, 等.G CSF 动员干细胞系对大鼠心肌缺血再灌注损伤的早期影响 31 犮狅狀狋狉狅犾犵狉狅狌狆 ( 犘 <0.05)24 犺犪犳狋犲狉狅狆犲狉犪狋犻狅狀, 犪狀犱狋犺犲狊犲狉狌犿犾犲狏犲犾狅犳犞犈犌犉狑犪狊犺犻犵犺犲狉犻狀犿狅犫犻犾犻狕犪狋犻狅狀犵狉狅狌狆狋犺犪狀犻 第 35 卷第 1 期 2014 年 1 月 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犡犻 犪狀犑犻犪狅狋狅狀犵犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔 ( 犕犲犱犻犮犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 ) 犞狅犾.35 犖狅.1 犑犪狀.2014 犌 犆犛犉动员干细胞系对大鼠心肌缺血再灌注损伤的早期影响 王鑫 1,2, 耿希刚 1, 谭云鹤 3, 潘龙毅 2, 徐涛 2, 钟守平 2, 李广顺 2 (1. 西安交通大学医学院第一附属医院心血管外科,

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