26 海洋学报 36 卷 [5] 椒鲷种类的数量都很少朱世华等利用细胞色素犫基因部分序列对 5 种仿石鲈鱼类进行了系统进化研究, 结果显示胡椒鲷犘. 狆犻犮狋狌狊与胡椒鲷鱼类关系较远, 支持胡椒鲷从胡椒鲷属犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊划分出去 [6] 的观点, 但其研究只涉及两种胡椒鲷 ; 任岗等

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俨跪村蓟
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1 第 36 卷第 10 期海洋学报 Vol.36,No 年 10 月 ACTA OCEANOLOGICASINICA October2014 梁日深, 梁志刚, 方浩航, 等. 基于 ND1 基因序列的 16 种胡椒鲷鱼类分子系统进化关系研究 [J]. 海洋学报,2014,36(10):25 32, doi: /j.issn LiangRishen,LiangZhigang,FangHaohang,etal.Molecularphylogeneticrelationshipsof16Sweetlipsfishesbasedonthesequenceof NADHdehydrogenasesubunitIgene[J].ActaOceanologicaSinica(inChinese),2014,36(10):25 32,doi: /j.issn 基于犖犇 1 基因序列的 16 种胡椒鲷鱼类分子系统进化关系研究梁日深 1, 梁志刚 1, 方浩航 1, 谭佳瑜 1, 彭颖暄 1, 薛涛 1 (1. 仲恺农业工程学院生命科学学院, 广东广州 ) 摘要 : 本研究基于线粒体 DNA 分子标记 NADH 脱氢酶亚基 1 基因 (ND1) 部分序列分析了印度西太平洋海域的胡椒鲷属及少棘胡椒鲷属共 16 种胡椒鲷鱼类的系统进化关系采用最大简约法及最大似然法构建了系统进化树进化树上,16 种胡椒鲷鱼类共形成两个形态特征截然不同的类群, 其中类群一的种类体表具有各种鲜艳的颜色与多变的斑纹, 主要分布在西太平洋地区 ; 类群二的种类颜色灰暗单一, 少数体表具有暗色斑点与条纹, 大多数分布在印度洋地区此外, 进化树上, 少棘胡椒鲷属的种类都位于胡椒鲷属的类群一内部, 与斑胡椒鲷, 暗点胡椒鲷形成的姐妹种有较近的亲缘关系基于遗传距离的数据, 少棘胡椒鲷属与胡椒鲷属间的平均遗传距离小于胡椒鲷属内部种间的遗传距离, 显示出少棘胡椒鲷属与胡椒鲷属有非常近的亲缘关系, 支持少棘胡椒鲷归类于胡椒鲷属的观点关键词 : 系统发育 ; 仿石鲈科 ; 胡椒鲷属 ; 少棘胡椒鲷属 ;ND1 中图分类号 :Q 文献标志码 :A 文章编号 : (2014) 引言胡椒鲷鱼类 Sweetlips, 包括胡椒鲷属犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊以及少棘胡椒鲷属犇犻犪犵狉犪犿犿犪的种类, 隶属鲈形目 Perciformes 鲈亚目 Percoidei 仿石鲈科 Haemuli dae 胡椒鲷亚科 Plectorhynchinae, 广泛分布于印度洋及太平洋西部温带, 亚热带及热带沿海及岛礁海域, 是重要的海洋经济食用及观赏性鱼类胡椒鲷在世界上约有 30 余种, 中国大约记载 8~12 种, 主要分布 [1 4] 在南海形态上, 胡椒鲷鱼类近缘物种十分相似, 许多种类都具有近似的体色和斑纹, 且体色与斑纹会随着个体的逐步发育发生巨大的变化, 使幼鱼与成鱼的形态截然不同如一些种类幼鱼具有横跨体表的水平条纹, 而发育成鱼后条纹逐渐破裂成无数小圆点 ( 黄点胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犳犾犪狏狅犿犪犮狌犾犪狋狌狊 ), 另有种类幼鱼体表具不规则斑纹, 而成鱼后却变为明显的水平纵带 ( 东方胡椒鲷犘. 狅狉犻犲狀狋犪犾犻狊 ) 此外, 许多种类的成鱼与其自身幼鱼形态相去甚远的同时, 却与其他种类的幼鱼, 半成鱼形态非常相似, 如东方胡椒鲷犘. 狅狉犻犲狀狋犪犾犻狊成鱼与斜纹胡椒鲷犘. 犾犻狀犲犪狋狌狊四带胡椒鲷犘. 犱犻犪犵狉犪犿犿狌狊幼鱼, 体表均为数条黑色水平纵带, 各鳍为黄色, 极易混淆胡椒鲷属的形态差异多样性给传统基于外部性状的分类鉴定带来很大的困扰, 许多种 [1 3] 类的分类与命名相互混淆在分子水平上, 国内外学者对胡椒鲷鱼类的系统进化虽有报道, 但涉及胡收稿日期 : ; 修订日期 : 基金项目 : 仲恺农业工程学院大学生创新基金项目 (2014A23) 作者简介 : 梁日深 (1984 ), 男, 广东省开平市人, 博士研究生, 研究方向为水生生物资源及保护利用 E mail:cheetahliang@126.com

2 26 海洋学报 36 卷 [5] 椒鲷种类的数量都很少朱世华等利用细胞色素犫基因部分序列对 5 种仿石鲈鱼类进行了系统进化研究, 结果显示胡椒鲷犘. 狆犻犮狋狌狊与胡椒鲷鱼类关系较远, 支持胡椒鲷从胡椒鲷属犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊划分出去 [6] 的观点, 但其研究只涉及两种胡椒鲷 ; 任岗等利用 16SrRNA 序列分析了 11 种仿石鲈科鱼类系统进化关系, 其研究包含的 4 种胡椒鲷中, 胡椒鲷位于胡椒 [7] [8] 鲷属的内部 Sanciangco 等与 Tavera 等利用多个分子标记对北美海域的仿石鲈科鱼类的进行较为全面的系统分类研究, 但他们重点放在石鲈亚科 Haemulinae 的种类, 对胡椒鲷亚科的分析内容很少目前关于胡椒鲷鱼类分子研究基本上都是围绕整个仿石鲈科的种类进行, 涉及胡椒鲷属种类很少, 且多数研究重点放在石鲈亚科, 缺乏对胡椒鲷亚科种类的深入探讨, 对于胡椒鲷属鱼类较为全面的分子系统进化研究至今还没见报道 ND1 是 NADH 脱氢酶的第一个亚基, 它可以从 [9] 种的水平来推断某个属的系统发育关系, 是国内外鱼类系统分类研究广泛应用的一个分子标记, 应用于鱼类不同分类阶元的系统发育研究, 解决许多系统分 [10 12] 类及进化关系问题本实验基于 ND1 基因片段序列, 在分子水平上对胡椒鲷属及少棘胡椒鲷属共 16 种鱼类进行系统发育分析, 初步揭示胡椒鲷鱼类的系统进化关系, 为仿石鲈科鱼类的分类研究提供有效的分子信息 2 材料与方法 2.1 材料来源胡椒鲷实验样品于 2009 年 11 月 2011 年 6 月分别采集于广东海南等沿海城市水产市场此外, 部分样品来自于西印度洋非洲沿海的国家, 以及大洋洲岛国新喀里多尼亚主要来源于以下单位 : 西印度洋非洲沿海的样品主要由南非水生物多样性研究院 (SouthAfricanInstituteforAquaticBiodi versity,saiab) 标本管理员 Bernard Makenzie 教授提供以及美国堪萨斯大学 Andrew Bentley 教授提供 ; 大洋洲的样品由岛国新喀里多尼亚努美阿湖水族馆 (Aquarium deslagons)jean LouJustine 教授提供最后共得到胡椒鲷属鱼类 14 种以及少棘胡椒鲷属 2 种实验材料均取肌肉或尾鳍, 于 95% 的乙醇固定, 用于实验室基因组 DNA 提取系统进化选取同为胡椒鲷亚科的矶鲈属中的三线矶鲈犘犪狉犪狆狉犻狊狋犻狆狅犿犪狋狉犻犾犻狀犲犪狋狌犿作为外群的进行分析标本种类与来源见表 1 表 1 实验材料的种类和采集地犜犪犫.1 犛狆犲犮犻犲狊犪狀犱犾狅犮犪犾犻狋犻犲狊狅犳犿犪狋犲狉犻犪犾狊科属种标本来源标签少棘胡椒鲷属少棘胡椒鲷犇犻犪犵狉犪犿犿犪狆犻犮狋狌犿广东, 深圳 GDSZ 犇犻犪犵狉犪犿犿犪广东, 阳江 GDYJ 少棘胡椒鲷犇犻犪犵狉犪犿犿犪犮犲狀狋狌狉犻狅塞舌尔, 马埃岛 SMA 胡椒鲷属花尾胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犮犻狀犮狋狌狊广东, 深圳 GDSZ 犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊广东, 阳江 GDYJ 广东, 阳江 GDYJ 斜纹胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犾犻狀犲犪狋狌狊海南, 三亚 HNSY 新喀里多尼亚, 努美阿 NCN 东方胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狅狉犻犲狀狋犪犾犻狊海南, 三亚 HNSY1 海南, 三亚 HNSY2 四带胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犱犻犪犵狉犪犿犿狌狊海南, 三亚 HNSY1 海南, 三亚海南, 三亚 HNSY2 HNSY3 斑胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犮犺犪犲狋狅犱狅狀狅犻犱犲狊海南, 三亚 HNSY1 海南, 三亚 HNSY2

3 10 期梁日深等 : 基于 ND1 基因序列的 16 种胡椒鲷鱼类分子系统进化关系研究 27 续表 1 科属种标本来源标签暗点胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狆犻犮狌狊海南, 三亚 HNSY 白带胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犪犾犫狅狏犻狋犪狋狌狊新喀里多尼亚, 努美阿 NCN 密点胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犵犪狋犲狉犻狀狌狊坦桑尼亚 NyamaReef TNR1 坦桑尼亚 NyamaReef TNR2 条纹胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狏犻狋犪狋狌狊塞舌尔, 马埃岛 SMA1 塞舌尔, 马埃岛 SMA2 查氏胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犮犺狌犫犫犻南非, 夸祖鲁纳塔尔 SAK 黑胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊犵犻犫犫狅狊狌狊塞舌尔, 马埃岛 SMA1 塞舌尔, 马埃岛 SMA2 白条胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狆犾犪狔犳犪犻狉犻莫桑比克, 马普托 MMI 红唇胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狊狅狉犱犻犱狌狊肯尼亚, 迪亚尼海滩 KDB 肖氏胡椒鲷犘犾犲犮狋狅狉犺犻狀犮犺狌狊狊犮犺狅狋犪犳莫桑比克, 马普托 MMI 外群矶鲈属三线矶鲈犘犪狉犪狆狉犻狊狋犻狆狅犿犪狋狉犻犾犻狀犲犪狋狌犿广东, 阳江 GDYJ1 犘犪狉犪狆狉犻狊狋犻狆狅犿犪广东, 阳江 GDYJ2 2.2 总基因组犇犖犃的提取取 0.1g 肌肉样品, 加入 500μl 抽提液 (0.3mol/ LNaCl 10 mmol/l EDTA,10 mmol/l Tris Cl,pH 8.0) 以及 20uL10mg/mL 蛋白酶 K,55 消化 3h 左右消化产物经饱和酚氯仿抽提,2 倍体积无水乙醇沉淀,70% 乙醇洗涤, 最后溶解于 50uL 无菌水中, 电泳检测,-20 保存备用 2.3 犘犆犚扩增和测序用于扩增 ND1 基因片段序列引物为 :ND1+5 GTTGCMCAAACCATCTCHTAYGAA G 3 和 ND1 5 GGGGTATGGGCCCGATAGC 3 [13] PCR 反应体系总体积为 50μL, 其中包括 10 bufer5μl, dntps( 各 2.5mmol/L)2μL, 上下游引物各 1μL, ExTaq 酶 (1U/ μ L)2μ PCR 反应条件为 :94 预变性 5min,94 变性 30s,55 退火 1min,72 延伸 1.5min,35 个循环, 最后 72 延伸 10min PCR 产物用 1.5% 琼脂糖凝胶电泳分离, 切取特异性片段纯化回收, 纯化产物送到上海英骏生物技术有限公司在 ABI3730 自动测序仪上进行双向测序 2.4 数据分析测序所得序列, 利用 ClustalW [14] 进行排序, 生成序列矩阵去除两端冗余, 保留同源序列进行系统发育分析利用 MEGAversion4.0 [15] 软件对序列的碱基组成碱基差异百分比变异位点简约信息位点及转换 / 颠换值进行统计, 分子系统进化树利用最大简约法和最大似然法进行构建系统树分支的置信度采用重复抽样分析 (Bootstrapanalysis) 方法, 重复抽样的次数为 1000 次 3 结果分析 3.1 序列分析测序得到 16 种胡椒鲷鱼类的 ND1 部分序列长度在 698~712bp 之间, 排列比对去除两端冗余后共得到一致序列为 673bp 利用 Mega4.0 软件分析可知, 去除外群,16 种胡椒鲷鱼类共有保守位点 492 个, 约占 73.2%; 变异位点 181 个, 约占 26.9%; 简约性信息位点 141 个, 约 21.0% T C A G 碱基平均含量分别为 24.9% 31.0% 27.3% 和 16.8%, 显示 G 碱基相对缺乏, 其中 A+T 的含量 (52.2%) 高于 G+ C 含量 (47.8%) 密码子第 1 位 4 种碱基含量相差不大, 其中 C-1 含量比其他 3 种碱基含量稍微偏高, 占 28.3%, 密码子第 2 位中,T-2 含量高于其他 3 种, 占 35.0%, 密码子第 3 位中 A-3,C-3 含量最高, 分别为 34.1% 及 34.0%, 而 G-3 含量最少, 仅有 12.3%, 表现出明显的反 G 偏倚 ( 见图 1) 这一模式与 [16] 其他哺乳动物相似

4 28 海洋学报 36 卷图 1 NADH 脱氢酶亚基 1(ND1) 第一二三位密码子碱基组成 Fig.1 Basecompositionofthe1st,2nd,3rdcodonsofthedehydrogenasesubunitⅠgene 序列中转换与颠换之比值为 2.61(Kimura2 pa rameter 模型 ), 转换明显大于颠换, 显示这些位点没有突变饱和转换和颠换主要发生在密码子的第 3 位, 其中转换数为 84.3%, 而颠换为 80%( 表 3) 这可能与密码子第 3 位发生的碱基替换不易造成氨基酸突变, 第 1, 第 2 位点的替换容易引起氨基酸突变有关碱基替换中转换以 T-C 转换形式为主,T-C 转换多于 A-G, 颠换中 A-T,A-C 的颠换多于 G -T,G-C( 表 2) 表 2 犖犇 1 序列碱基转换和颠换数犜犪犫.2 犖狌犿犫犲狉狊狅犳狋犺犲狋狉犪狀狊犻狋犻狅狀狊犪狀犱狋狉犪狀狏犲狉狊犻狅狀狊狅狀狋犺犲犖犇 1 狊犲狇狌犲狀犮犲狊密码子 i si sv R TT TC TA TG CC CA CG AA AG GG Avg st nd rd 注 :i, 同义突变数 ;si, 颠换数 ;sv, 转换数 ;R, 颠换数与转换数比值基于 Kimura2 parameter 模型计算出 16 种胡椒鲷遗传距离如表 3 所示, 在内类群中,16 种鱼类遗传距离范围在 0.027~0.177 之间其中, 两种少棘胡椒鲷遗传距离最小, 序列中仅有几个碱基的差异其次是查氏胡椒鲷与红唇胡椒鲷, 为 0.034; 而东方胡椒鲷与肖氏胡椒鲷遗传距离最大, 为 0.177, 其次是四带胡椒鲷与肖氏胡椒鲷, 为同时, 我们统计了少棘胡椒鲷属与胡椒鲷属的种类遗传距离范围在 ~0.160 之间, 平均遗传距离为 0.112, 少于胡椒鲷属内部种间的遗传距离范围 0.034~0.177, 平均遗传距离表 3 基于犓犻犿狌狉犪 2 狆犪狉犪犿犲狋犲狉模型计算 16 种胡椒鲷犖犇 1 序列遗传距离 ( 下三角 ) 以及序列间的转换 / 颠换数 ( 上三角 ) 犜犪犫.3 犘犪犻狉狑犻狊犲犱犻狊狋犪狀犮犲狊 ( 犫犲犾狅狑犱犻犪犵狅狀犪犾 ) 犪狀犱狀狌犿犫犲狉狅犳狋狉犪狀狊犻狋犻狅狀狊 / 狋狉犪狀狊狏犲狉狊犻狅狀狊 ( 犪犫狅狏犲犱犻犪犵狅狀犪犾 ) 狅犳 16 狊狑犲狋犾犻狆狊犳狅狉犖犇 1 狊犲狇狌犲狀犮犲狊犫犪狊犲犱狅狀犓犻犿狌狉犪 2 狆犪狉犪犿犲狋犲狉犿狅犱犲犾 /9 43/5 39/9 47/11 40/8 57/5 47/5 47/17 48/19 52/25 53/25 54/23 56/26 54/17 45/22 75/ /10 38/14 45/16 38/11 43/12 42/12 45/22 47/24 50/32 52/32 52/30 55/33 56/20 50/25 73/ /10 55/12 46/9 62/8 56/8 52/20 54/22 64/26 64/26 71/24 76/28 59/18 54/23 81/ /13 54/12 49/12 45/24 45/26 55/26 55/26 60/24 64/27 59/20 52/21 81/29

5 10 期梁日深等 : 基于 ND1 基因序列的 16 种胡椒鲷鱼类分子系统进化关系研究 29 续表 /9 66/14 58/14 51/24 55/24 57/34 61/34 65/32 68/34 60/24 50/29 83/ /11 45/11 56/21 61/26 53/29 57/29 58/27 62/29 56/19 49/24 78/ /0 55/18 55/22 64/28 62/28 58/26 62/29 64/20 60/23 88/ /18 49/23 53/28 55/28 51/26 55/29 60/20 56/23 77/ /11 51/28 56/28 59/26 64/29 47/22 48/25 72/ /29 57/28 57/26 62/30 47/24 49/28 73/ /2 32/2 37/11 50/28 48/31 67/ /2 36/11 54/28 48/31 72/ /10 59/26 54/29 74/ /30 57/31 76/ /5 77/ / 注 :1. 斑胡椒鲷犘. 犮犺犪犲狋狅犱狅狀狅犻犱犲狊,2. 暗点胡椒鲷犘. 狆犻犮狌狊,3. 四带胡椒鲷犘. 犱犻犪犵狉犪犿犿狌狊,4. 斜纹胡椒鲷犘. 犾犻狀犲犪狋狌狊,5. 东方胡椒鲷犘. 狅狉犻犲狀狋犪犾犻狊,6. 条纹胡椒鲷犘. 狏犻狋犪狋狌狊,7. 少棘胡椒鲷犇. 犮犲狀狋狌狉犻狅,8. 少棘胡椒鲷犇. 狆犻犮狋狌犿,9. 白带胡椒鲷犘. 犪犾犫狅狏犻狋犪狋狌狊,10. 密点胡椒鲷犘. 犵犪狋犲狉犻狀狌狊,11. 红唇胡椒鲷犘. 狊狅狉犱犻犱狌狊,12. 查氏胡椒鲷. 犘. 犮犺狌犫犫犻,13. 白条胡椒鲷犘. 狆犾犪狔犳犪犻狉犻,14. 肖氏胡椒鲷犘. 狊犮犺狅狋犪犳,15. 花尾胡椒鲷犘. 犮犻狀犮狋狌狊,16. 黑胡椒鲷犘. 犵犻犫犫狅狊狌狊,17. 三线矶鲈犘. 狋狉犻犾犻狀犲犪狋狌犿 3 2 分子系统进化树的构建基于所得的 ND1 部分序列, 以三线矶鲈犘. 狋狉犻犾犻狀犲犪狋狌犿作为外类群进行系统进化分析利用最大简约法 (MP) 和最大似然法 (ML) 构建的分子系统进化树最后构建得到 MP 和 ML 树拓扑结构几乎一致, 仅在一些节点的支持率不同其中最大简约树树长 (TreeLength,TL) 为 507, 一致性指数 (Consistency Index,CI)) 为 , 保留指数 (RetentionIndex,RI) 为最大似然树似然率 lnl= 这里把 MP 树与 ML 树合并 ( 见图 2), 树上各分支的数字用 1000 次 Bootstrap 表示统计分析后对该支的支持率 (MP/ML) 由图可知, 研究的 16 种胡椒鲷鱼类中, 在系统进化树上大致可分成两个形态截然不同的类群类群一包括斑胡椒鲷, 条纹胡椒鲷等 10 种胡椒鲷, 该类群的种类体表均有各种鲜艳的色彩和斑纹类群二包括花尾胡椒鲷, 黑胡椒鲷等 6 个种类, 与第一类群不同的是, 该类群的种类体色均暗淡单一, 无鲜艳色彩与斑纹同时, 在进化树上, 许多胡椒鲷都两两聚成姐妹种, 而聚成姐妹种的胡椒鲷在外部形态上均有高度相似的特征如 : 东方胡椒鲷与条纹胡椒鲷, 体侧均有明显横跨体表的黑带, 斑胡椒鲷与暗点胡椒鲷, 体表分布着密集的小黑点此外, 我们发现少棘胡椒鲷属的两个种类都位于在类群一的胡椒鲷种类中, 并与斑胡椒鲷, 暗点胡椒鲷聚成的分支有比较近的亲缘关系系统进化树大部分节点都拥有较高的支持率 4 讨论 4.1 胡椒鲷属鱼类的系统进化关系本研究共采集到 14 种胡椒鲷和 2 种少棘胡椒鲷, 其中 7 种主要采自南海, 另外 9 种来自西印度洋 [1 4] 非洲海域, 几乎囊括我国记录的胡椒鲷种类, 部 [1 2,17 18] 分种类甚至在我国并无分布, 具有一定的代表性基于 ND1 基因部分序列构建的系统发育树中,16 种鱼类共形成两个形态特征截然不同的的类群, 类群 Ⅰ 包括斑胡椒鲷等 7 种胡椒鲷以及 2 种少棘胡椒鲷, 类群 Ⅱ 包括花尾胡椒鲷等 5 种胡椒鲷形态上, 类群 Ⅰ 的胡椒鲷种类体表均具有各种鲜艳的色彩和斑纹, 色彩斑纹随着个体发育会产生变化类群 Ⅱ 的胡椒鲷种类体色暗淡单一, 无鲜艳色彩与斑纹, 或仅有少量暗色斑纹, 幼鱼与成鱼形态无明显差异在地理分布上, 类群 Ⅰ 的胡椒鲷种类主要分布在西太平洋地区, 类群 Ⅱ 的种类大多数仅分布于印度洋, 少数在 [17 18] 西太平洋也有分布形态学对于类群 Ⅰ 中胡椒鲷的分类存在较大争议, 皆因该类群近缘种类形态相似, 体色与斑纹还会

6 海洋学报３６卷３０图２１６种胡椒鲷鱼类ＮＤ１基因部分序列利用最大简约法与最大似然法构建的分子系统树Ｆｃｕｒｐｈｙｏｇｎｃｒｏｆ１６ｓｗｓｂｓｄｏｎｐｒＮＤ１ｇｎｓｎｃｓｃｏｎｓｒｕｃｄｂｙｍｘｍｕｍｇ２Ｍｏｐｑｕｒｓｍｏｎｙｎｄｍｘｍｕｍｋｈｏｏｄｍｈｏｄｐ随着个体发育产生巨大变化如前言所述这种形态条纹胡椒鲷与东方胡椒鲷以较高的支持率两两聚成差异多样性给传统形态分类鉴定带来很大的困扰许姐妹分支形态上它们均拥有相似的形态特征并多物种分类不清本研究构建的聚类结果对上述胡且在个体发育过程中两两还具有几乎一致的变化过椒鲷鱼类的分类关系有较为清晰的展现进化树上程２１７１８如斑胡椒鲷与暗点胡椒鲷两者在幼鱼期斑胡椒鲷与暗点胡椒鲷四带胡椒鲷与斜纹胡椒鲷体表具有棕色或黑色的斑纹而成鱼体表的斑纹逐渐

7 10 期梁日深等 : 基于 ND1 基因序列的 16 种胡椒鲷鱼类分子系统进化关系研究 31 断裂成无数的小黑点四带胡椒鲷与斜纹胡椒鲷在幼鱼期体表均有数条黑色水平纵带, 成鱼后, 四带胡椒鲷体表保留为四条水平条带, 而斜纹胡椒鲷发育为许多斜行波状条纹对于条纹胡椒鲷与东方胡椒鲷, 这两种胡椒鲷幼鱼体表都覆盖着不规则断裂状的黑 [2,17] 色斑纹, 成鱼后斑纹逐渐变成笔直的水平纵带当前形态分类资料对上述的胡椒鲷种类聚类关系不清, 皆因各分类资料依据的分类标准不同成庆泰和 [1] 郑葆珊主编的鱼类检索系统主要根据成鱼的形态进行分类,McKay [17],Carpenter 和 Niem [18] [2], 沈世杰等分类资料却结合了幼鱼形态以及个体发育形态变化过程 McKay [17] 认为, 胡椒鲷属许多种类的颜色斑纹在个体发育中差异巨大, 形态分类需要根据幼鱼, 半成鱼与成鱼颜色斑纹, 鳍棘与鳃耙数, 才能较好的区分本研究的系统进化树对上述胡椒鲷种类有比较清晰的分类关系结果支持 McKay [17] 分类观点, 认为胡椒鲷鱼类的分类与亲缘关系的确定需要结合幼鱼, 成鱼形态及发育过程才能真实反应其分类关系研究为部分形态分类混乱的胡椒鲷种类提供了有效的分子水平的分类证据 4.2 少棘胡椒鲷属的系统进化地位我国的大部分分类资料中, 少棘胡椒鲷犇. 狆犻犮狋狌犿一直被称为胡椒鲷犘. 狆犻犮狋狌狊, 归为胡椒鲷 [1 2,19 20] 属, 而许多国外的资料却根据背鳍鳍棘条数而把它归入到少棘胡椒鲷属中, 皆因其背鳍鳍棘数为 9~10, 而其他的胡椒鲷背鳍鳍棘都是 12~ 14 [17 18,21 23] 本研究共采集到两种少棘胡椒鲷, 一种是我国广泛分布的少棘胡椒鲷犇. 狆犻犮狋狌犿, 另一种少棘胡椒鲷犇. 犮犲狀狋狌狉犻狅采自非洲塞舌尔马埃岛本研究结果显示两种少棘胡椒鲷紧密聚在一起, 位于胡椒鲷属的内部遗传距离数据分析上, 少棘胡椒鲷属与胡椒鲷属种类之间平均遗传距离为 0.112, 少于胡椒鲷属内部的平均遗传距离显示少棘胡椒鲷与胡椒鲷属的种类有很近的亲缘关系形态上, 少棘胡椒鲷与其他色彩鲜艳的胡椒鲷种类一样, 体色和斑纹会随着个体发育逐渐变化两种少棘胡椒鲷的幼鱼体侧有 3 条黑色纵带, 发育成鱼后纵带逐渐破裂成无数深色小斑点把它归为少棘胡椒鲷属, 可能仅仅是基于鳍棘数目的多少而得出的结论但也有资料揭示少棘胡椒鲷属除了鳍棘数与胡椒鲷属不一样之外, 软鳍条数目以及侧线上鳞数也与胡椒鲷属的不一 [9,18] 致基于 ND1 序列的系统发育研究结果, 在分子水平上, 它们与胡椒鲷属有着很近的亲缘关系, 这与当今部分分子水平的分类研究结果一致 Sanciangco [8] [9] 等与 Tavera 等曾利用多个分子标记对北美仿石鲈科鱼类的系统分类研究也发现少棘胡椒鲷位于胡椒鲷属的内部, 并没有单独形成一支 Tavera 认为少棘胡 [7] 椒鲷属与胡椒鲷属应该是同一个属任岗利用 16SrRNA 序列对 12 种石鲈科鱼类系统进化树也揭示胡椒鲷犘. 狆犻犮狋狌狊与胡椒鲷属的种类聚在一起因此, 研究结果支持我国绝大多数传统的分类资料, 认为少棘胡椒鲷属的种类归为胡椒鲷属比较合适本研究通过利用线粒体 DNA 分子标记 ND1 部分序列对胡椒鲷属鱼类进行了系统进化研究, 初步阐明胡椒鲷属内种间的分类关系以及少棘胡椒鲷的分类问题, 为仿石鲈科鱼类的系统进化研究提供新的分子信息但要彻底弄清胡椒鲷鱼类的进化关系, 还需以后更进一步的研究参考文献 : [1] 成庆泰, 郑葆珊. 中国鱼类系统检索 [M]. 北京 : 科学出版社,1987: [2] 沈世杰. 台湾鱼类志 [M]. 台北 : 台湾大学动物学系,1993: [3] 黄宗国. 中国海洋生物种类与分布 [M]. 北京 : 海洋出版社,1994: [4] 孟庆闻, 苏锦祥, 缪学祖. 鱼类分类学 [M]. 北京 : 中国农业出版社,1995: , , [5] 朱世华, 郑文娟, 邹记兴, 等.5 种石鲈科鱼类细胞色素 b 基因序列及分子系统分析 [J]. 热带海洋学报,2006,25(4): [6] 任岗, 章群, 钱开诚, 等.12 种石鲈科鱼类线粒体 16SrRNA 基因的部分序列分析 [J]. 热带海洋学报,2007,26(3): [7] SanciangcoM D,RochaLA,CarpenterKE.AmolecularphylogenyoftheGrunts(Perciformes:Haemulidae)inferedusingmitochondrialandnu cleargenes[j].zootaxa,2011,2966: [8] TaveraJJ,AceroA,BalartEF,etal.Molecularphylogenyofgrunts(Teleostei,Haemulidae),withanemphasisontheecology,evolution,andspe ciationhistoryofnew Worldspecies[J].BMCEvolutionaryBiology,2012,12:57. [9] SerbJM,BuhayJE,LydeardC.MolecularsystematicsoftheNorthAmericanfreshwaterbivalvegenus 犙狌犪犱狉狌犾犪 (Unionidae:Ambleminae)based onmitochondrialnd1sequences[j].molecularphylogeneticsandevolution,2003,28(1):1-11. [10] UtevskySY,UtevskyAY,SchiapareliS,etal.Molecularphylogenyofpontobdelineleechesandtheirplaceinthedescentoffishleeches(Hiru dinea,piscicolidae)[j].zoologicascripta,2007,36(3):

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BuletinofSoiland WaterConservation Vol.38,No.3 Jun.,2018 & X R( + 1, 1, < 1,=> 3 (1. E^ IFTU ^,NO ; 2.NO\ ^,NO ;3.NO B`a -

$BuletinofSoiland WaterConservation Vol.38,No.3 Jun.,2018 & X R( + 1, 1, < 1,=> 3 (1. E^ IFTU ^,NO ; 2.NO\ ^,NO ;3.NO B`a -$ 383 0186 BuletinofSoiland WaterConservation Vol.38,No.3 Jun.,018 & X R( + 1, 1, < 1,=>,?@A 3 (1. E^ IFTU ^,NO 730070;.NO\ ^,NO 730070;3.NO B`a -[/H,NO 730000) -.:[# ] _D5 & % I /, + -. I P+- [ ] ( 犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿