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1 植 物 病 理 学 报 ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA 42(3): (2012) 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 病 原 的 分 离 与 鉴 定 王 晓 丽 1, 夏 花 1, 张 平 喜 2, 朱 宏 建 1 1*, 高 必 达 ( 1 湖 南 农 业 大 学 生 物 安 全 科 技 学 院, 长 沙 ; 2 常 德 市 农 业 科 学 研 究 所, 常 德 ) 摘 要 : 在 湖 南 省 常 德 市 西 洞 庭 管 区 种 植 的 朝 鲜 蓟 ( Cynara scolumus L. ) 上 发 现 了 一 种 新 的 病 害, 其 症 状 表 现 为 地 上 部 分 从 外 层 叶 片 开 始 逐 步 枯 萎, 随 后 根 部 和 主 茎 杆 的 髓 部 腐 烂 变 褐, 最 后 整 株 枯 萎 从 田 间 感 病 朝 鲜 蓟 茎 杆 的 病 健 交 界 处 用 NA 培 养 基 分 离, 获 得 10 个 菌 株, 分 别 指 定 为 HNXDT001 ~ 010, 并 进 行 了 致 病 性 测 定 形 态 观 察 和 细 菌 学 特 征 分 析, 同 时 对 HNXDT002 菌 株 进 行 分 子 生 物 学 鉴 定 结 果 表 明, 该 系 列 菌 株 在 NA 培 养 基 上 均 形 成 灰 白 色 圆 形 菌 落, 稍 突 起, 有 光 泽, 半 透 明 在 显 微 镜 下 菌 体 呈 短 杆 状, 两 端 钝 圆, 具 有 2 ~ 8 根 周 生 鞭 毛, 革 兰 氏 阴 性 10 个 菌 株 通 过 针 刺 法 接 种 均 可 导 致 朝 鲜 蓟 茎 杆 胡 萝 卜 辣 椒 白 菜 土 豆 番 茄 和 莴 苣 茎 杆 软 腐, 经 科 赫 法 则 验 证 为 致 病 病 原 菌 该 菌 株 的 16S rdna 序 列 和 果 胶 酶 基 因 片 段 测 序 ( 分 别 用 16S rdna 通 用 引 物 16SF / 16SR 和 果 胶 酶 基 因 引 物 Y1 / Y2 扩 增 ) 与 系 统 发 育 学 分 析 表 明, 其 16S rdna 序 列 (GenBank Accession No. JF721958) 与 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 亚 种 ( Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum) 菌 株 ATCC15713 (GenBank Accession No. U80197) 序 列 同 源 性 高 达 99% ; 果 胶 酶 基 因 序 列 (GenBank Accession No. JF721960) 与 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 亚 种 ( Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum) PC1 菌 株 ( GenBank Accession No. CP001657) 序 列 同 源 性 为 93% 结 果 表 明 : 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 病 原 为 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 亚 种 关 键 词 : 朝 鲜 蓟 ; 根 茎 腐 烂 病 ; 果 胶 杆 菌 属 ; 鉴 定 ; 16S rdna Isolation and identification of bacterial pathogen causing stem and root rot on artichoke WANG Xiao-li 1, XIA Hua 1, ZHANG Ping-xi 2, ZHU Hong-jian 1, GAO Bi-da 1 ( 1 College of Bio-safety Science Technology, Hunan Agricultural University, Changsha , China; 2 Changde Agriculture & Science Research Institute, Changde , China) Abstract: A new disease on globe artichoke ( Cynara scolymus L. ) was observed in commercial fields in Changde, Hunan Province, China. Typical symptoms were wilting and necrosis from the outermost leaves, dark brown discoloration of the vascular tissue and pith of main stem. Eventually, the plants wilted and died. Manual weeding and cuttings often led to the development of typical soft rot during propagation. To investigate the causal agent of the disease, isolations were made from rotted stems of field artichoke plants on nutrient agar ( NA). Bacteria consistently isolated from the diseased tissues formed grey-white, glossy, convex, translucent, and round colonies on NA. The bacterial cells were gram-negative rods with 2 to 8 peritrichous flagella and rounded ends under the microscope. In artificial inoculation test, these isolates could also cause stem rot of Chinese cabbage, pepper, lettuce and artichoke, and slice rot of carrot, tomato and potato within 48 h at 28. The results demonstrated that these isolates are causative agent of soft-rot disease. PCR amplification was carried out by utilizing universal 16S rdna primer pair 16SF / 16SR and pel gene primers Y1 / Y2. The 16S rdna and pel gene sequences of isolate HNXDT002 ( GenBank accessions JF and JF721960, respectively) had 99% and 93% nucleotide identity with strains of Pectobacterium carotovorum subsp. 收 稿 日 期 : ; 修 回 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 支 撑 计 划 项 目 (2012BAD15B04-1); 湖 南 省 高 校 创 新 平 台 开 放 基 金 项 目 (11K033) 通 讯 作 者 : 高 必 达, 教 授, 主 要 从 事 分 子 植 物 病 理 学 研 究 ; Tel: , Fax: , bdgao@yahoo. com. cn 第 一 作 者 : 王 晓 丽 ( ), 女, 湖 南 湘 乡 人, 硕 士 研 究 生, 主 要 从 事 分 子 植 物 病 理 学 研 究 ; vfankiki@yahoo. com. cn

2 3 期 王 晓 丽, 等 : 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 病 原 的 分 离 与 鉴 定 237 carotovorum ( GenBank accessions U80197 and CP001657, respectively). It came to the conclusion that the causal agent of soft-rot disease on artichoke belonged to Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. Key words: Cynara scolymus L. ; stem and root rot; Pectobacterium;identification; 16S rdna 中 图 分 类 号 : S 文 献 标 识 码 : A 文 章 编 号 : (2012) 朝 鲜 蓟 (Cynara scolymus L. ) 又 名 洋 蓟 菊 蓟, 为 菊 科 多 年 生 草 本 植 物, 因 其 花 蕾 形 似 百 合 而 得 名 法 国 百 合 原 产 地 中 海 沿 岸, 欧 洲 南 部 及 北 非 其 食 用 部 分 为 肉 质 花 托 及 花 托 的 肥 嫩 苞 片 朝 鲜 蓟 富 含 钾 磷 铁 等 矿 质 元 素, 蛋 白 质 和 氨 基 酸 含 量 也 较 高, 含 有 较 多 的 果 糖 和 葡 萄 糖, 其 它 营 养 成 分 也 较 为 均 衡 [1] 朝 鲜 蓟 作 为 一 种 冬 季 特 色 作 物, 具 有 很 高 的 经 济 价 值 在 湖 南 常 德 西 洞 庭 管 区, 种 植 朝 鲜 蓟 的 农 业 纯 收 入 可 达 元 hm - 2, 推 广 朝 鲜 蓟 与 其 他 作 物 套 种, 可 大 大 提 高 农 业 效 益 但 抽 薹 现 蕾 时 的 烂 蔸 死 株 现 象 却 给 朝 鲜 蓟 生 产 造 成 了 严 重 危 害 [2], 症 状 为 感 病 植 株 的 地 上 部 分 从 外 层 叶 片 开 始 逐 步 枯 萎, 随 后 根 部 和 主 茎 杆 的 髓 部 变 褐 腐 烂, 最 后 整 株 枯 萎 除 草 造 成 的 机 械 伤 害 或 虫 害 等 会 加 重 此 病 害 的 发 生 2008 ~ 2010 连 续 三 年 该 病 都 有 不 同 程 度 的 发 生, 造 成 的 损 失 分 别 为 5%,35% 和 4% 目 前, 尚 无 对 该 病 的 病 原 菌 进 行 鉴 定 和 系 统 研 究 的 报 道 为 此, 本 文 对 引 起 朝 鲜 蓟 根 茎 腐 烂 病 的 病 原 菌 进 行 了 分 离 鉴 定 1 材 料 与 方 法 1. 1 病 原 菌 的 分 离 与 纯 化 从 田 间 采 集 发 病 朝 鲜 蓟 植 株, 主 茎 杆 基 部 表 面 用 自 来 水 冲 洗, 再 用 无 菌 水 冲 洗,70% 的 乙 醇 表 面 消 毒, 待 风 干 后 用 无 菌 刀 将 主 茎 杆 基 部 纵 剖 开, 取 病 健 交 界 处 组 织 在 1 ml 无 菌 水 中 捣 碎, 用 无 菌 接 种 环 蘸 取 3 环 放 入 另 1 ml 无 菌 水 中 混 匀, 再 从 中 取 三 环 放 入 第 三 个 1 ml 无 菌 水 中 混 匀 取 后 两 个 较 低 浓 度 的 稀 释 液 各 500 μl 放 入 无 菌 平 皿 中, 各 倒 入 冷 却 至 约 50 的 NA 培 养 基 15 ~ 20 ml 后 混 匀, 待 冷 却 凝 固 后 倒 置 放 入 28 温 箱 中 培 养 20 ~ 30 h 挑 取 优 势 单 菌 落 转 接 纯 化 3 次 1. 2 致 病 性 测 定 针 刺 菌 液 法 在 田 间 选 取 健 康 的 朝 鲜 蓟 植 株, 主 茎 杆 基 部 表 面 用 70% 的 乙 醇 表 面 消 毒, 用 无 菌 针 在 表 面 扎 5 个 孔, 将 无 菌 棉 花 放 入 浓 度 为 10 8 cfu ml - 1 的 病 菌 悬 浮 液 中 浸 湿 后 用 胶 带 绑 在 扎 孔 处, 另 设 无 菌 水 和 空 白 培 养 液 对 照 组,28 放 置, 每 天 观 察 发 病 情 况 单 菌 落 针 刺 法 将 朝 鲜 蓟 茎 杆 胡 萝 卜 辣 椒 土 豆 白 菜 梆 番 茄 和 莴 苣 表 面 用 70% 乙 醇 消 毒 后, 用 无 菌 刀 切 片, 用 无 菌 针 沾 取 单 菌 落 在 白 菜 梆 辣 椒 和 番 茄 的 表 面 朝 鲜 蓟 茎 杆 胡 萝 卜 土 豆 和 莴 苣 横 切 面 的 中 心 刺 三 个 孔 后, 置 垫 有 湿 润 滤 纸 的 无 菌 平 皿 中 对 照 组 用 无 菌 针 扎 孔 28 保 湿 培 养, 每 天 观 察 发 病 情 况 病 原 菌 重 新 分 离 取 田 间 经 人 工 接 种 后 明 显 发 病 的 植 株, 按 照 1. 1 的 方 法 重 新 分 离 病 原 菌 1. 3 病 原 菌 的 形 态 鉴 定 对 回 接 试 验 中 已 确 定 的 具 有 致 病 性 的 细 菌 进 行 菌 落 形 态 观 察, 革 兰 氏 染 色, 鞭 毛 染 色 1. 4 病 原 菌 的 生 理 生 化 反 应 鉴 定 鉴 定 使 用 法 国 梅 里 埃 公 司 的 API 20E 鉴 定 条 进 行 S rdna 序 列 和 果 胶 酶 基 因 的 扩 增 和 序 列 分 析 病 原 菌 基 因 组 DNA 的 提 取 用 无 菌 牙 签 挑 取 在 NA 培 养 基 上 28 培 养 20 ~ 30 h 的 单 菌 落, 洗 入 10 μl 无 菌 去 离 子 水 中,99 处 理 10 min, 离 心 后 收 集 上 清 液, 置 于 冰 上 备 用 S rdna 序 列 和 果 胶 酶 基 因 的 扩 增 分 别 用 16S rdna 序 列 通 用 引 物 和 果 胶 杆 菌 果 胶 酶 [3] 扩 增 引 物 对 细 菌 总 DNA 进 行 扩 增 16S rdna 序 列 扩 增 正 向 引 物 16SF 为 :5 -AGAGTTTGATC- CTGGCTCAG-3, 反 向 引 物 16SR 为 : 5 -AAG- GAGGTGATCCAGCCGCA-3, 预 计 扩 增 片 段 约 为 bp; 果 胶 酶 基 因 扩 增 正 向 引 物 Y1 为 :5 -

3 卷 植物病理学报 TTACCGGAGCCCGAGCTGTGGCGT-3, 反 向 引 物 Y2 为:5 -CAGGAAGATGTCGTTATCGCGAGT3,预 计 扩 增 片 段 约 为 450 bp PCR 扩 增 体 系 司的琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒回收目的片段; 连接到 PUM-Teasy Vector( Bioteke 公司产品) ;转 化 E. coli Top10 菌体;挑取阳性单菌落培养,提取 (25 μl) : DNA 扩 增 模 板 1 μl,10 PCR Buffer 质粒和 电 泳 检 测 确 认 后 进 行 测 序 所 测 序 列 与 0. 5 μl, Forward Primer ( 10 μm) 1 μl, Reverse DT002 序列与其相似序列用 mega4 软件构件系统 rdna序 列 扩 增 条 件: 预 变 性 94 5 min; 94 2 结果与分析 2. 5 μl,dntps(10 mm)0. 5 μl,taq 酶(2. 5 u μl -1 ) GeneBank 中对应数据进行相似性比对, 将 HNX- Primer ( 10 μm ) 1 μl, ddh2 O μl 16S 发育树 30 s,56 30 s,72 90 s,30 个循环;72 10 min 延伸 果胶酶基因扩增条件:预变性 94 5 min; s,65 30 s,72 60 s,30 个 循 环; 病原菌的分离与回接试验 从湖南常德西洞庭采到的感病植株(图 1)表现 10 min 延伸 反应终止后,取 5 μl PCR 产物,1% 为叶片由外至内枯萎, 根部和主茎杆的髓部变褐腐 琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果 烂(图 2) 从腐烂髓部的病健交界处分离纯化 PCR 产物的克隆测序 采用 TIANGEN 公 株优势明显菌落,分别命名为 HNXDT Fig.1 Symptom of infected artichoke plant in field Fig. 2 Symptom of infected artichoke stem Fig. 3 Symptom produced on carrot,artichoke stem,pepper,lettuce stem,tomato, potato and Chinese cabbage by inoculation of HNXDT002 1,3,6,8,10,12,14: Symptom produced by HNXDT002; 2,4,5,7,9,11,13: Negative control.

4 3期 王晓丽,等:朝鲜蓟细菌性根茎腐烂病病原的分离与鉴定 239 对这 10 个菌株和无菌水以及空白培养液分别 致病性 而对照组没有出现软腐症状 在朝鲜蓟植株上进行了回接试验 结果显示,针刺 2. 2 菌株的形态观察和生理生化分析 菌液法接种后 72 h 后朝鲜蓟植株出现枯萎症状, 同时髓部变褐腐烂 而对照组没有引发软腐症状 对接种发病后的植株按照方法 1. 1 重新分离 病原菌,结果分离到形态同原来完全一致的病原 菌 可见,它们是引起朝鲜蓟根茎腐烂病病原菌的 的致病菌 其它形态的非优势细菌接种,没有表现 腐烂症状 进一步研究了所分离的优势菌株对其它植物 的致病性,用单菌落针刺接种 18 ~ 24 h 即可导致 鲜蓟茎杆 胡萝卜 辣椒 土豆 白菜梆 番茄和莴苣 切片出 现 软 腐 病 变, 并 伴 随 有 恶 臭 HNXDT002 菌株的致病性试验结果见图 3 表明其具有广谱 HNXDT 菌株在 NA 培养基上均形成灰 白色圆形菌落,稍突起,有光泽,半透明 鞭毛染色 结果见图 4 其基本特征为:G-,菌体短杆状,两端 钝圆,周生鞭毛 2 ~ 8 根 其生理生化特征见表 1 10 株细菌的 API 生化谱均为 ,鉴定结 果为 欧 文 氏 菌, 鉴 定 百 分 率 为 92. 9%, T 值 为 0 85 以上所描述的 HNXDT001 ~ 010 菌株的形态 特征和细菌学特征,都与对照菌株胡萝卜果胶杆菌 胡 萝 卜 亚 种 PCC1000 ( GenBank accession JF721959,由湖南农业大学分子与植物病理实验室 Fig. 4 Bacterial cell shape and flagella of strain HNXDT002 after flagellum staining(1 000 ) Table 1 Main bacteriological characteristics of HNXDT001-HNXDT010 Item Result Item Result Catalase Acid produced from glucose Oxydase Acid produced from inositol Arginine dihydrolase Acid produced from rhamnose Lysine decarboxylase Acid produced from melibiose Ornithine decarboxylase Acid produced from arabinose Tryptophan ammonialyase Acid produced from mannitol Urease Acid produced from sorbierite Gelatin liquefaction Acid produced from sucrose Galactosidase Acid produced from amarogentin H2 S VP :Positive reaction;-:negative reaction.

5 240 植 物 病 理 学 报 42 卷 提 供 ) 的 相 似 程 度 很 大 2. 3 HNXDT002 的 16S rdna 序 列 和 果 胶 酶 基 因 测 定 分 析 结 果 由 于 10 株 菌 株 在 形 态 和 生 理 生 化 特 征 上 表 现 高 度 相 似 性, 本 研 究 选 用 其 中 一 个 菌 株 即 HNX- DT002 进 行 分 子 生 物 学 鉴 定 电 泳 结 果 见 图 5 和 图 6, 扩 增 目 标 片 段 大 小 符 合 预 期 将 片 段 割 胶 回 收, 连 接 入 载 体 后 转 化 进 E. coli Top10 菌 株, 挑 取 白 色 阳 性 菌 落 提 取 质 粒, 送 上 海 生 工 测 序, 结 果 显 示 扩 增 片 段 大 小 分 别 为 408 bp,1 479 bp Fig. 6 16S rdna eletrophoresis of PCR amplification products of HNXDT-002 by primer 16SF / 16SRK) M: DL2000 Marker ( TaKaRa ); 1: Negative control; 2: HNXDT 讨 论 Fig. 5 Pel gene eletrophoresis of PCR amplification products of HNXDT-002 by primer Y1 / Y2 M: 100 bp DNA Ladder ( TIANGEN); 1: HNXDT002; 2: Negative control. 与 NCBI( http: / / www. ncbi. nlm. nih. gov) 上 相 似 序 列 经 BLAST 比 对 结 果 表 明 : 其 16S rdna 序 列 与 多 株 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 软 腐 亚 种, 如 ATCC15713 菌 株 ( GenBank Accession No. U80197) 序 列 同 源 性 达 99% ; 其 果 胶 酶 基 因 序 列 与 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 软 腐 亚 种 菌 株 PC1 (GenBank Accession No. CP001657) 序 列 同 源 性 达 93% 采 用 MEGA4 软 件 以 16S rdna 相 似 序 列 构 建 的 系 统 发 育 树 见 图 7 据 了 解, 湖 南 常 德 西 洞 庭 湖 区 朝 鲜 蓟 种 植 面 积 已 达 hm 2 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 的 发 生 造 成 了 严 重 的 经 济 损 失, 极 大 地 打 击 了 农 民 种 植 朝 鲜 蓟 的 积 极 性 因 此, 有 必 要 对 该 病 进 行 流 行 病 学 和 田 间 综 合 防 治 的 研 究 朝 鲜 蓟 是 一 种 价 值 可 观 的 冬 季 农 作 物 [2], 有 关 于 其 高 产 栽 培 技 术 的 研 究 引 起 人 们 的 广 泛 关 注 在 众 多 有 关 朝 鲜 蓟 栽 培 技 术 的 文 献 中 都 提 及 过 朝 鲜 蓟 根 腐 病 [4 ~ 6], 症 状 为 茎 髓 及 根 部 腐 烂 变 黑, 整 株 萎 蔫 倒 伏, 根 腐 病 的 发 生 规 律 病 症 特 点 等 都 与 本 文 中 报 道 的 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 极 为 相 似 但 在 朝 鲜 蓟 病 害 相 关 报 道 中, 未 见 对 根 腐 病 病 原 的 系 统 性 报 道 若 要 明 确 朝 鲜 蓟 的 这 两 种 疾 病 是 否 为 同 一 种 病 原 引 起, 还 需 对 这 两 种 病 的 病 原 进 行 研 究 对 比 翻 阅 近 十 年 国 内 外 朝 鲜 蓟 的 相 关 病 害 的 报 道, [7] 国 内 除 了 Liu 等 报 道 了 有 关 朝 鲜 蓟 根 结 线 虫 的 发 生 规 律 与 防 治 外, 未 见 其 他 有 关 朝 鲜 蓟 病 害 的 系 统 性 研 究 报 道 国 外 已 报 道 的 朝 鲜 蓟 病 害 有 斑 状 褪 绿 矮 化 病 ( APCS) [8], 斑 萎 病 [9], 霜 霉 病 [10], 黄 萎 病 [11], 黑 腐 病 [12], 细 菌 性 苞 片 斑 点 病 [13] 和 [14] 线 虫 病 害 等 近 年 来, 曾 报 道 过 胡 萝 卜 软 腐 果

6 3 期 王 晓 丽, 等 : 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病 病 原 的 分 离 与 鉴 定 241 Fig. 7 Phylogenesis of 16S rdna of HNXDT002 with related bacteria nucleotide substitutions [15] [16] 胶 杆 菌 引 起 半 夏 和 大 白 菜 等 的 软 腐 病 本 文 中 所 报 道 的 胡 萝 卜 软 腐 果 胶 杆 菌 胡 萝 卜 亚 种 ( Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum) 引 起 朝 鲜 蓟 细 菌 性 根 茎 腐 烂 病, 在 国 内 外 都 属 首 次 报 道 参 考 文 献 [1] Song S H,He H J,Wu D X,et al. Analysis of the nutritional composition of artichoke ( in Chinese) [ J]. Acta Nutrimenta Sinica ( 营 养 学 报 ), 2006, 28 (3): [2] Xu G C, Xia J G,You L W,et al. Cultivation technique of artichoke at Xi Dong Ting(in Chinese) [ J]. Hunan Agricultural Sciences( 湖 南 农 业 科 学 ), 2010, 11: [3] Brenner D J, Krieg N R,Staley J T. Bergey s manual of systematic bacteriology,vol. 2 [ M]. New York: Springer, 2005: 722. [4] Deng H S,Li X L,Wang X J. Study progress in highyield techniques of Cynara scolumus L. planting ( in Chinese) [ J]. Journal of Anhui Agri. Sci.,( 安 徽 农 业 科 学 ). 2007, 35(33): 10737, [5] Cheng L P, Yu G H, Zhang C Y, High-yield techniques of artichoke( in Chinese) [ J],Yunnan Agricultural( 云 南 农 业 ), : 11. [6] You L W,Xia J G. High-yield techniques of artichoke at Dongting lake ( in Chinese ) [ J ]. Journal of Changjiang Vegetables( 长 江 蔬 菜 ), 2008(13): [7] Liu C X,Fan C X,Xu D K, et al. Artichoke root-knot nematode disease occurrence and prevention ( in Chinese) [ J]. Journal of Shandong Agricultural Science ( 山 东 农 业 科 学 ),1996, 5: [8] Kyriakopoulou P E. Artichoke Italy latent virus causes artichoke patchy chlorotic stunting disease [ J]. Association of Applied Biologists, 1995, 127: [9] Vilchez M, Paulus A O, Moyer J W, et al. First report of tomato spotted wilt virus affecting globe artichoke in California. USA [ J]. Acta Hort., 2005, 681: 607. [10] Carranza M, Larran S, Alippi H. First report of artichoke downy mildew caused by Bremia lactucae in Argentina [ J]. Plant Disease, 2001, 85: 446. [11] Amenduni M,Cirulli M,D amico M, et al. Verticillium wilt of artichoke caused by Verticillium dahliae Kleb [J]. Acta Hort., 2005, 681: 603. [12] Gen J. Black rot of artichoke in Japan [ J ]. Plant Pathol., 2002, 68: [13] Trebaol G,Gardan L,Manceau C, et al. Genomic and phenotypic characterization of Xanthomonas cynarae sp. nov., a new species that causes bacterial bract spot of artichoke( Cynara scolymus L. ) [ J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2000, 50: [14] Greco N, Vito M D, Basile M. Nematode parasite of artichoke and their management [ J ]. Acta Hort., 2005, 681: 508. [15] He Y B,Hu X F,Chen H M, et al. Isolation and identification of a bacterial pathogen causing soft rot on Pinellia ternata( in Chinese) [ J], Acta Phytopathologica Sinica( 植 物 病 理 学 报 ), 2007, 37(4): [16] Yuan F,Qu S P,Cui C S, et al. Isolation and identification of a new Erwinia carotovora(in Chinese) [ J]. Acta Microbiologica Sinica( 微 生 物 学 报 ), 2004, 44 (2): 136. 责 任 编 辑 : 李 晖

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