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慧经
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1 + 论著青少年糖尿病患者血浆及龈沟液中白细胞介素 + 和反应蛋白水平李昕王欣吴迪陈智滨王梦醒高艳霞巩纯秀秦满北京大学口腔医学院口腔医院儿童口腔科国家口腔疾病临床医学研究中心口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室北京 + 首都医科大学附属北京儿童医院内分泌遗传代谢中心北京北京大学口腔医学院口腔医院牙周科北京 + 首都儿科研究所附属儿童医院口腔科北京首都医科大学附属北京儿童医院口腔科北京摘要目的白细胞介素 '&;&! 61 和 ( 反应蛋白 (1;&$.'&);'&(0: 等炎症细胞因子在糖尿病的发生发展过程中起到了重要作用因此牙周炎可能通过共同的炎症病理机制和糖尿病关联通过测定青少年糖尿病患者龈沟液和血浆中 61 和 (0: 的水平探讨糖尿病在发病初期对机体炎症指标的影响结合牙周健康指数分析青少年糖尿病患者罹患牙周疾病的风险方法实验组为岁糖尿病患者名健康对照 + 名检查记录各牙周指数菌斑指数 )$5!& &A:6 改良出血指数 " & && / &A" 探诊深度 ); / &)': 和牙周附着丧失 $'$."&'6 采集龈沟液和静脉血样本以酶联免疫吸附测定法 &<"&1 & ""!;&'$$ 6 检测龈沟液及血浆中 61 和 (0: 浓度结果糖尿病组和对照组的 :6 分别为, 和, 差异有统计学意义 C" 分别为 +,+ 和, 差异有统计学意义 C 两组受试者均未发现牙周附着丧失 : 分别为, "" 和, "" 差异无统计学意义 C+ 部分受试者样本的龈沟液中 (0: 低于可检出水平龈沟液中 (0: 总检出率为 - + 糖尿病组龈沟液中 (0: 检出率 +- 显著高于对照组 -C 糖尿病组血浆 (0: 浓度 + "/6 略高于对照组 + "/6 但差异无统计学意义 C 糖尿病组和对照组血浆中 61 浓度分别为, /6 和, /6 差异无统计学意义 C 两组龈沟液中 61 浓度分别为, /6 和 +, /6 差异无统计学意义 C + 结论青少年糖尿病患者在患病早期尚未发生牙周组织破坏但牙周指数和龈沟液中 (0: 的变化提示青少年糖尿病人群罹患牙周疾病的风险可能高于健康人群关键词糖尿病青少年白细胞介素 1( 反应蛋白质牙周疾病中图分类号 0+ 文献标志码文章编号 ! 001 "! 6 3 (#2 1 3%&/1A/ 349$1A$ 343(!1A! %$ &)$;'"&':& $';.&''; :& / &;'.$ #) '$'"$'/$'$(.$0&&$;. (&'&;;4;$&$& $'$/&&;/6$;$';;/'$$ %$'&;$@&./'"$'/ &/ B&6$;$';/'$'"$'/ &/+ ( $ &)$;'"&'.;/ 3&&'. $ %&'$1 " &/( ;&#) '$ ($) '$%&.$ &;' &/ ( $ &)$;'"&':&;'/ :& / &;'.$ #) '$'"$'/ &/+ ( $ &)$;'"&'&''; ($) '$''!1 '&:& $';. &/ ( $ &)$;'"&'&''; &/( ;&#) '$ ($) '$%&.$ &;1 ' &/ ( $ $%&'& (' &);!.& $;!.&$;&';/.$"& $';$""$' '&;&! 1&'$ 61 $ (1;&$.'&);'& (0: )$&&'$;& '&&&)"&'$ );/;& $&'&"&'!%@!)&;'$ &$&.! &;&$'& '% /.0 '&$"& "& $';$""$'@&$!$'&)$"$$ //$.;&.!$;! 3(= &&61$ (0: $&.&'>' % '!;'&;&'/$'&>&'&;% $$ ")$.' '&&&$""$1 ' $.';$'$ &$;'$/& $ '$$<&'&; &&) /)&;'$ &$& $&.&' >' %" ''$ $&.&'$/& ;"'& 'A'&& &$;>&;&&;& $&1.&' $/& >' $&'&"&'!>&;&.&.'& '&%/;!) $ + $&'.$&.&'$ 基金项目首都医学发展科研基金 1 资助!));'& '&=! ($) '$%&.$&&)"&'.&'.0&&$;. 1 (;&) /$!';&1"$.!A!//?$." 5 1"$?A"$." 网络出版时间网络出版地址 ') >>>. &'."&'$0+++'"

2 李昕等青少年糖尿病患者血浆及龈沟液中白细胞介素 1 和 ( 反应蛋白水平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糖尿病 $&'&"&'! % 是由于胰岛素分泌障碍和或功能障碍导致的以慢性高血糖为特征的临床综合征是当前威胁人类健康的最重要的非传染性疾病之一中国糖尿病患病率呈爆发式增长年的中国糖尿病患病率达到 - 糖尿病发病逐渐趋于低龄化儿童及青少年的发病率明显上升且型糖尿病在儿童糖尿病中所占比例逐年增加型糖尿病的增长与人群肥胖率升高的趋势一致 + 青少年及儿童糖尿病成为新的研究热点牙周炎是一类由菌斑微生物刺激引起的多因素参与的慢性炎症性疾病临床主要表现为牙周袋形成牙槽骨吸收以及牙齿松动脱落等研究表明糖尿病和牙周病之间存在双向关系一方面糖尿病是牙周炎的危险因素另一方面牙周炎作为慢性炎症对糖尿病的代谢控制具有负面影响有学者建议将牙周炎列为糖尿病的第个并发症近年来大量研究支持炎症因子在糖尿病的发病机制中起到了重要作用而牙周炎作为一种慢性炎症性疾病可能通过共同的炎症病理机制和糖尿病关联白细胞介素 '&;&! 61 和 ( 反应蛋白 (1;&$.'&);'&(0: 等炎症因子在这两种疾病的发生发展过程中起到了重要作用人体内 61 活性主要由 61 介导在牙周炎免疫反应中引起组织破坏和牙槽骨吸收 61 通过影响胰岛素受体底物 1 的正常磷酸化干扰胰岛素与受体结合后的下一步信号传导从而降低胰岛素敏感性导致胰岛素抵抗还可直接引起胰岛素分泌受损诱导胰岛细胞凋亡牙周炎患者牙周袋内壁溃疡细菌及其代谢产物更容易进入血液系统是潜在影响机体免疫系统的途径之一研究表明成人型糖尿病合并牙周炎患者的血清 61 含量明显高于不伴牙周炎的糖尿病患者牙周系统治疗有利于糖尿病患者控制血糖水平这表明牙周炎可能在糖尿病发病过程中起到一定作用 (0: 是人体的典型急性期反应蛋白与免疫抵抗反应调节者该指标持续增高提示机体存在慢性炎症高水平的血清 (0: 与胰岛素抵抗综合征显著相关在降低胰岛素敏感性影响血糖控制及脂代谢方面均起重要作用是型糖尿病及糖尿病多种严重并发症发病的危险因子牙周炎患者血清中 (0: 水平高于非牙周炎患者在牙周基础治疗后其水平下降 + 因此牙周炎患者高水平的血清 (0: 可能对糖尿病的发生发展起到促进作用以往观点认为糖尿病患者的牙周破坏始于青春期但 6$$ 等观察到糖尿病患者的牙周破坏在儿童时期即存在且在进入青春期后牙周组织的破坏明显加重随着糖尿病发病年龄趋于低龄化未成年糖尿病患者牙周病的发病风险不容忽视现有研究局限于成年人糖尿病和牙周炎发病数年之后的横断面研究缺乏糖尿病发病初期牙周健康状况的数据本研究通过测定青少年糖尿病患者龈沟液血浆中 61(0: 水平探讨糖尿病发病初期对机体炎症指标的影响结合牙周健康指数分析青少年糖尿病患者罹患牙周疾病的风险 +, 资料与方法本研究通过北京大学生物医学伦理委员会审查 01 所有受检者及监护人均自愿

3 参加本研究监护人签署知情同意书 ++ 研究对象糖尿病组选取年月至年月于首都医科大学附属北京儿童医院内分泌科及首都儿科研究所附属儿童医院内分泌科门诊及病房确诊为型和型糖尿病的例患者为糖尿病组根据 #4 年糖尿病诊断标准确诊时间为 + 个月住院患者在出院前取血样患者住院期间仅用胰岛素治疗纳入标准患者个月内未经过抗生素治疗无其他系统性疾病智力健全排除标准患者个月内曾接受抗生素治疗或有糖尿病并发症患者口内可见明显牙石患者不能配合检查取样糖尿病组人男性人女性人年龄岁平均岁平均糖化血红蛋白 #. 值为其中 #.- 基础代谢控制差例 #.*- 基础代谢控制良好 + 例健康对照组来自北京市丰台区某小学年级学生及就诊于北京大学口腔医院儿童口腔科常规口腔检查的青少年 + 名年龄岁平均岁男性人女性人纳入标准个月内未经过抗生素治疗无其他系统性疾病智力健全排除标准患者口内可见明显牙石个月内曾接受抗生素治疗或有其他系统性疾病不能配合检查取样 +- 口腔检查标准一致性检验所有口腔检查均由两位儿童口腔医师共同完成两位口腔医师分别与同一名牙周科专业医师进行牙周探诊的 B$))$ 值校准其 B$))$ 值分别为 + 和 ++ 牙周健康状况的检查使用 $" 刻度牙周探针检查每颗牙的颊侧近中和舌腭侧远中两个位点的牙周指数包括菌斑指数 )$5!& &A :6 改良出血指数 " & && / &A" 探诊深度 ); /&)': 和牙周附着丧失 $'1 '$."&'6 计分标准如下 :6 & 6& C 龈缘区无菌斑 C 龈缘区的牙面有薄的菌斑但视诊不可见用探诊尖的侧面可刮出菌斑 C 龈缘或邻面可见中等量的菌斑 C 龈沟内或龈缘区及邻面有大量软垢 " C 沿龈缘探诊无出血 C 孤立的点状出血 C 出血在龈沟内呈线状 C 重度或自发出血 : 使用 $" 刻度探针记录牙周袋底到龈缘的距离精确到 "" 6 用 $" 探针记录牙周袋底到釉牙骨质界的距离精确到 "" 分别取同一个受试者口内所有记录位点的 :6": 和 6 的平均值作为该研究个体的最终值 +. 龈沟液及血液标本的采集糖尿病组及健康对照组仅有部分受检者和监护人同意采集龈沟液和静脉血样本最终纳入受检者为糖尿病组人男性人女性人年龄岁平均岁健康对照组名男性人女性人年龄 + 岁平均岁龈沟液的采集和处理选取上下中切牙侧切牙以及第一磨牙共计颗牙在每颗牙的近中颊侧或远中颊侧取样若颊侧有牙龈出血则选择舌侧替代每个牙位收集一次龈沟液全口共计个位点取样前对无菌离心管与滤纸条称重万电子天平取样时棉卷隔湿小挖匙去除龈缘以上菌斑用气枪沿牙面向冠方轻吹将 ""E "" 的 $'"$ 号滤纸条沿牙面长轴轻轻插入龈沟内遇阻力停滞取出有血放弃不用每个滤纸条分别置于无菌离心管随即再次称重每管加入 6 "6 的 : 缓冲液 )#C 在台式恒温振荡器上振荡 " ;" 然后高速离心 " ;" 以去除细菌细胞残渣等杂质将同一患者的龈沟液样本离心后所得上清液合并到个 ) 管中即每人一份龈沟液样本 + 冻存血液标本的采集和处理抗凝管收集受试者静脉血 "6 静置待血浆及红细胞分层后吸取上层血浆及红细胞表面的白细胞层 ;" 离心 " 吸取上层血浆 + 冻存 + 酶联免疫吸附测定 (0: 及 61 水平将血浆及龈沟液样本解冻选用人 (0: 酶联免疫吸附测定 &<"&1& ""!;&'$$ 6 试剂盒及人 61 6 试剂盒 A(& ( $ 根据说明书测定和计算样本浓度 + 统计学分析使用 A.& 软件进行数据录入并核对用 % : '$''. 统计软件对资料进行统计学分析年龄 ::6" 血浆及龈沟液 61 浓度数据符合正态分布采用均数, 标准差表示血浆 (0: 数据属于偏态分布采用中位数及四分位数表示对糖尿病组和健康对照组的性别和年龄构成比进行卡方检验对牙周各检查指数进行 :&$; 相关分析两组间 ::6" 和 61 水平的比较采用独立样本 - 检验龈沟液中 (0: 检出率的两组间比较

4 李昕等青少年糖尿病患者血浆及龈沟液中白细胞介素 1 和 ( 反应蛋白水平使用 =&; 确切概率法血浆中 (0: 浓度呈偏态分布采用秩和检验 * 为差异有统计学意义 -, 结果 -+ 牙周指数的比较研究对象基本情况糖尿病组与健康对照组之间年龄差异无统计学意义 -CC 性别比差异亦无统计学意义 C+ C++ 见表糖尿病组的 :6 和 " 均显著高于健康对照组分别为 CC 两组观察对象均未发现牙周附着丧失糖尿病组和对照组间 : 差异无统计学意义 C+ 对牙周各检查指数进行 :&$; 相关分析糖尿病组各牙周指数间无明显相关关系健康对照组的 : C "C 和体重指数 "$&A% C 分别与 :6 呈中度正相关表 +, 糖尿病及对照组间牙周指数的比较 &+,(")$; )&;'$.&&'>&& % $.';/;!) '&" % C ('; C+ - :6,,, ", +,+, :"",,, + % $&'&"&'! :6 )$5!& &A " " & && / &A : ); /&)' --61 及 (0: 水平的比较糖尿病组与健康对照组之间年龄 -C C 差异无统计学意义性别比差异亦无统计学意义 C C+ 61 水平的比较结果见表糖尿病组和对照组间血浆及龈沟液中 61 水平的差异无统计学意义分别为 CC+ 表 -, 糖尿病组和对照组间 61 水平的比较 &-,(")$; 61&&&'>&& % $.';/;!) '&" % C ('; C - 61 )$"$ /6, 61 3(= /6,,,, +, + % $&'&"&'! 6 '&;&! 3(= //$.;&.!$;! 两组中并不是所有的龈沟液样本都可以检测到 (0:(0: 的总检出率为 - + 其中糖尿病组为 +- 对照组为 - 糖尿病组检出率显著高于对照组 C 糖尿病组的血浆 (0: 浓度 + "/ 6 高于对照组 + "/6 但两组差异无统计学意义 C., 讨论菌斑是慢性牙周炎的始动因素则是牙龈炎症的重要指标本项研究结果中糖尿病组 :6 和显著高于健康对照组这说明青少年糖尿病组牙龈炎的严重程度高于健康组罹患牙周疾病的风险也较高这与以往的研究结果一致有研究发现牙周破坏在糖尿病患儿的儿童时期就已经出现并在进入青春期后加重本研究中所有青少年糖尿病患者虽未观察到牙周附着丧失但牙龈炎较健康对照严重表明其远期患牙周炎的风险不可忽视本研究中健康对照组的 :" 与 :6 呈中度正相关关系这符合现有牙周病的病因理论糖尿病组的 :" 与 :6 间未见相关关系说明糖尿病本身对牙龈健康状况有一定影响在牙周炎和健康牙龈的龈沟液中均可以检测到 (0: 慢性牙周炎及侵袭性牙周炎患者龈沟液中的 (0: 水平高于健康对照而慢性牙周炎伴发糖尿病患者的龈沟液中 (0: 指标又高于单纯慢性牙周炎患者龈沟液中 (0: 的水平与局部牙龈炎症表现一致 :6 牙周袋深度数值越大者其 (0: 检出率越高 ='<"" 等进一步证实 (0: 可以作为慢性牙周炎伴或不伴糖尿病的局部炎症指标龈沟液中高水平的 (0: 预示着罹患牙周炎的高风险本研究糖尿病组的龈沟液样本 (0: 检出率显著高于对照组这提示青少年糖尿病患者患牙周疾患的风险性可能高于正常对照既往观点认为 (0: 主要由肝脏生成并可在其他组织局部如单核细胞和淋巴细胞中合成但 6! 等证实牙龈组织的上皮细胞以及结缔组织的内皮细胞能够自行合成 (0: 因此龈沟液中的 (0: 可能来自于循环系统经肝脏合成也可能来源于局部牙龈组织本研究中糖尿病组龈沟液中 (0: 的检出率高于健康对照组但是血浆 (0: 水平无显著差异这表明局部合成的 (0: 可能是龈沟液中 (0: 水平的主要影响因素但尚不足以对血浆 (0: 造成显著影响龈沟液中 (0: 与血浆 (0: 水平的关系有待进一步研究在牙龈存在炎症时龈沟液中 61 浓度升高现有研究证实成人牙周炎患者龈沟液中 61 水平高于健康牙龈或牙龈炎者活动性炎症部位的 61

5 水平高于稳定部位龈沟液中 61 的浓度有个体差异性同一患者牙龈健康和炎症时的龈沟液中 61 水平有相关性而单纯牙龈炎患者龈沟液中 61 水平是否升高目前文献报道不一 &.&; 等报道牙龈炎患者龈沟液中 61 水平与健康对照无显著差异这与本研究结果一致血浆中的 61 受到牙龈炎的影响与龈沟液不同通常血浆中的 61 浓度处于较低的水平介导局部炎症反应仅需较低水平的 61 血循环中较高浓度的 61 会引起发热促进肝内急性期反 + 应蛋白的合成等 4;<. 等的研究表明全身健康无伴发系统性疾病的牙龈炎患者其血清中 61 浓度低于可检测水平本研究中所有观察对象均无牙周炎仅有不同程度的牙龈炎他们血浆中 61 浓度均很低与上述研究结果相符由于本研究受取材条件限制样本量小糖尿病患者确诊发病时间较短未对受试者患病情况纵向观察所以不足以得出确切的研究结论要充分阐明在糖尿病发病早期糖尿病对牙周疾患患病风险性的影响研究需进一步深化且需要多中心大样本的纵向研究本研究结果表明青少年糖尿病患者患病早期尚未发生牙周组织破坏但牙龈炎症程度重于健康对照牙周指数和龈沟液中 (0: 的变化可能增加青少年糖尿病人群罹患牙周疾病的风险参考文献中华医学会糖尿病学分会中国型糖尿病防治指南年版 84 中华内分泌代谢杂志 + (;$/% 8&&;&( $&&$ &'$:(.$:;$.'.& (&!3! &&& ' &) &"/ $.$1.$' $&'&. ;& $ $&.&' 84:& $';$1 &'&!)) 9$/ 6! 8 &/8 &'$:;&$&.& $&'&$"/"& $ >"& ( $ 84 /8%& $&&$ %$&;1$8 $$ &'$:;&$&.&')& $ ')& $&'&$"/. ;& $ $&.&';" ' 848% + + =$<&=$;$ $ &;$%: $ &;7;'%%8 &'$ 3$';& '&.&.&$ );&$&.&')& $&'&. ;& $ $&.&' $'&"$'.;&&> $ &$!$' "&'/.$$));$.& 84$&'/$ ++!&#! 9 $/ &'$@"&';& $'.!")1 ' $ '$.$' >' &'$"/. ;& ( $84 :6 4& & 0&"6 8&80 9!/0 &'$"&;//&) &". ')& $&'&!' 84$&'&($;& + :;$&& $&'&!'!' $84(! ;$ 0&) 孟焕新牙周炎与糖尿病的关系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廖雁婷和璐李蓬等北京城区型糖尿病患者牙周状况研究 84 中国糖尿病杂志 + %&/ ='<""@ $;"$)$' B &'$(1;&$.'&);1 '& //$.;&.!$;! "$&.$'&'&". 1 $""$' 848( :&;' + ='<""@0 $&; $;' :% &'$6.$$ 1 '&". "$;&; //$.;&.!$;!.;&$& )&;''848( :&;' $. B!&; $"(1;&$.'&);'& 848 (&" ! 8 6#!"$ //$ $'&;'&(1;&$.'&);'& ;"$' 848( :&;' + &.&; <'L; 7 '"$.$# &'$3/$.;&.!$;! $ )$"$$.!'&1)$&.' &&& &;&')&;'$ &$&848:&;' + + 4;<. 3&""&.&% &'$'&;&! 1&'$ '&;1 &! 1 $ '&;&! 1+ && //$! $ &;!" )$'&'>' //'$ )&;'' 844;$%.; "1 "! 1+1 收稿本文编辑任英慧

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