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1 2017 年 12 月第 50 卷第 12 期 Tobacco Science & Technology Dec Vol. 50 No. 12 印度梨形孢对烟草抗旱性的影响 1,2 惠非琼, 刘剑 1, 高其康 3 *2, 楼兵干 1. 贵州中烟工业有限责任公司, 贵阳市小河区开发大道 96 号浙江大学生物技术研究所, 杭州市余杭塘路 866 号浙江大学农生环分析测试中心, 杭州市余杭塘路 866 号摘要 : 为探明印度梨形孢对烟草抗旱性的影响, 采用聚乙二醇 (PEG 6000) 人工模拟干旱胁迫条件进行盆栽试验在干旱胁迫下, 测定了烟叶中丙二醛 (MDA) 和脯氨酸 (Pro) 的含量叶片相对电导率以及干旱相关基因的表达量结果表明 : 印度梨形孢能定殖于烟草根部, 并促进烟草地上部和地下部的生长在干旱条件下, 根部接种印度梨形孢的烟草缺水症状较轻, 与未接种印度梨形孢的烟草相比, 其烟叶中 Pro 含量显著升高,MDA 含量和叶片相对电导率显著下降, 干旱相关基因 RD29A ERD10A RD26A SDIR1 HAT ERD1 和 DREB2A 的表达量均明显上升印度梨形孢提高烟草的抗旱能力, 是通过降低烟草细胞生物膜的损伤程度增强烟草的抗氧化防御能力促进细胞渗透调节物质 Pro 的积累以及上调干旱胁迫相关基因的表达实现的关键词 : 植物内生真菌 ; 印度梨形孢 ; 干旱 ; 抗旱能力 ; 烟草中图分类号 :TS414 文献标志码 :A 文章编号 : (2017) Effects of Piriformospora indica on drought resistance of Nicotiana tabacum HUI Feiqiong 1,2, LIU Jian 1, GAO Qikang 3, LOU Binggan *2 1. China Tobacco Guizhou Industral Co., Ltd., Guiyang , China 2. Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou , China 3. Analysis Center of Agrobiology and Environmental Sciences, Zhejiang University, Hangzhou , China Abstract: To investigate the effect of Piriformospora indica on drought resistance of Nicotiana tabacum, a pot experiment was conducted by using polyethylene glycol (PEG) 6000 to simulate drought and the malondialdehyde (MDA) and proline contents, relative electrical conductivity and expression levels of drought-related genes in tobacco leaves under drought stress were analyzed. The results showed that P. indica could colonize in the roots of N. tabacum and promote the growth of both root and shoot of the plants. When P. indica-inoculated plants were under drought stress, the symptoms of water shortage were slighter, the proline content in leaves was significantly up-regulated, while the MDA content and relative electrical conductivity of leaves were significantly decreased comparing with those of un-colonized treatment. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qrt-pcr) analysis indicated that the relative expression levels of drought-related genes RD29A, ERD10A, RD26A, SDIR1, HAT, ERD1 and DREB2A were higher in leaves of colonized plants under drought stress. P. indica enhances the drought resistance of N. tabacum via reducing tobacco cell biological membrane damage degree, enhancing the antioxidant ability of tobacco, promoting the accumulation of osmotic substances proline and up-regulating the expression of drought-related genes. Keywords: Plant endophytic fungus; Piriformospora indica; Drought; Drought resistance; Tobacco 收稿日期 : 修回日期 : 基金项目 : 贵州中烟工业有限责任公司项目印度梨形孢对烟草诱导抗病及降低烟叶重金属含量的作用 (201216) 作者简介 : 惠非琼 (1988 ), 硕士, 助理农艺师, 主要从事烟草化学成分与烟叶质量研究 hfq543@126.com; * 通讯作者 : 楼兵干, bglou@zju.edu.cn 引文格式 : 惠非琼, 刘剑, 高其康, 等. 印度梨形孢对烟草抗旱性的影响 [J].,2017,50(12):1-7.(HUI Feiqiong, LIU Jian,GAO Qikang,et al. Effects of Piriformospora indica on drought resistance of Nicotiana tabacum[j]. Tobacco Science & Technology,2017,50(12):1-7.)DOI: /j.issn

2 年植物对干旱胁迫的反应包括感知胁迫压力转导压力信号激活各种应激相关基因的表达和合成各种生理功能的蛋白 [1] 在干旱胁迫下, 植物组织产生大量活性氧细胞发生膜脂过氧化反应, 导致体内积累多种有害物质丙二醛 (MDA) 是膜脂过氧化产物, 能改变细胞膜的渗透性, 进而引起细胞内电解液外渗电导率上升 [2] 丙二醛含量和相对电导率的高低是检测植物抗旱性的指标之一 [3], 其中丙二醛的含量能间接反映膜系统受损程度以及植物的抗逆性植物对干旱胁迫最保守的应激反应是合成脯氨酸 (Pro) 甜菜碱糖类及其衍生物等渗透调节物质其中,Pro 是最有效的渗透调节物质, 其含量是衡量植物抗旱能力的重要指标 [4] 植物对干旱胁迫另一重要的反应是激活抗旱相关基因的表达和合成各种生理功能 [5] 的蛋白 Yang 等将干旱胁迫响应基因分为 3 类 : 一是转录调控因子, 如 DREBJ AREB NF-YB 等 ; 二是转录后对 RNA 和蛋白质进行修饰的基因, 如磷酸化去磷酸化基因 ; 三是渗透调节因子或分子伴侣基因将抗旱相关基因转入到烟草中能提高烟草的抗旱性 [3] 将拟南芥 DREB1A 基因和 rd29a 启动子转入烟草后, 能提高烟草抵抗干旱和低温的能力 [6] 来自印度塔尔沙漠灌木根部的内生真菌印度梨形孢 (Piriformospora indica) 与丛枝菌根真菌 (Arbuscular mycorrhiza fungi,amf) 的功能相似, 可以在人工培养基上培养, 能定殖于十字花科等非菌根植物的根部, 并能促进植物的生长发育提高植物的生物量增强植物对生物和非生物胁迫的抗性 [7] 在干旱条件下, 印度梨形孢能诱导拟南芥中抗旱相关蛋白的上调表达, 提高拟南芥的抗旱性 [8], 通过提高过氧化物酶的活性和干旱相关基因的表达可增强小白菜和水稻等植物的抗旱性 [9-10] 目前, 有关印度梨形孢对烟草抗旱性影响的报道较少为此, 初步研究了印度梨形孢对烟草抗旱性的影响及其机理, 为探明印度梨形孢在烟草抗旱方面的作用奠定基础 1 材料与方法 1.1 材料供试菌株与烟草品种印度梨形孢 (Piriformospora indica) 由德国耶拿大学 Ralf Oelmüller 教授惠赠 ; 供试烟草品种为中烟 100, 由中国烟草总公司郑州烟草研究院提供菌株的培养 (1) 扩繁将印度梨形孢菌丝块置于 KM 培 [11] 养基上, 于恒温 (25 ) 黑暗培养箱中培养 7 d 后, 用直径为 0.5 cm 的打孔器沿菌落边缘打孔, 供转接用 (2) 转接将两块直径为 0.5 cm 的印度梨形孢菌丝块转接到直径为 9 cm 装有约 30 ml MS 培 [12] 养基的平板上, 菌丝块距离平板边缘约 2 cm, 使菌丝块之间的距离尽可能最大置于恒温 (25 ) 黑暗培养箱中培养 7 d, 供印度梨形孢与烟草共培养使用 (3) 对照试验将直径为 0.5 cm 的 KM 空白培养基置于 MS 培养基平板上作为对照,KM 培养基距平板边缘约 2 cm, 使两块培养基之间的距离尽可能最大置于恒温 (25 ) 黑暗培养箱中培养 7 d, 作为印度梨形孢与烟草共培养的空白对照植物材料的准备 [13] 参照惠非琼等的方法进行烟苗的准备及印度梨形孢与烟草的共培养 1.2 方法干旱胁迫处理 (1) 盆栽烟草培养印度梨形孢与烟草共培养 30 d 后, 移栽烟苗进行盆栽培养 ( 聚乙烯塑料盆高 7 cm 内径 9 cm) 培养所用的基质成分为营养土蛭石珍珠岩 =4 2 1 置于相对湿度为 60% 的温室中 25 光照培养 16 h,22 黑暗培养 8 h 常规管理,30 d 后进行模拟干旱胁迫试验 (2) 干旱试验采用 20% 的聚乙二醇 (PEG 6000) 溶液进行模拟干旱胁迫试验设 1 个对照和 3 个处理 : 对照 (CC) 是用 200 ml 自来水浇灌根部未接种印度梨形孢的烟草 ; 处理 1(CP) 是用 200 ml 20% PEG 6000 溶液浇灌未接种印度梨形孢的烟草 ; 处理 2(PC) 是用 200 ml 自来水浇灌接种印度梨形孢的烟草 ; 处理 3(PP) 是用 200 ml 20% PEG 6000 溶液浇灌接种印度梨形孢的烟草每个处理与对照共设 5 个重复所有植株置于相对湿度为 60% 的温室中,25 光照培养 16 h,22 黑暗培养 8 h 于 PEG 6000 处理后和 72 h 取烟草叶片, 一份用于测定相关生理生化指标, 另一份用液氮速冻后置于 -80 超低温冰箱中保存生理指标的测定 (1) 丙二醛 (MDA) 含量的测定采用分光光度法进行测定称取 0.3 g 烟草叶片, 剪碎, 加入 5 ml 5% 三氯乙酸溶液和少量石英砂研磨成匀浆, r/min 离心 15 min, 上清液为丙二醛提取液取 1 ml 上清液于 10 ml 试管中, 再加入 2.5 ml 0.67% 硫代巴比妥酸, 摇匀将试管在 100 沸水中

3 第 50 卷第 12 期惠非琼, 等 : 印度梨形孢对烟草抗旱性的影响 3 放置 20 min 后, 取出置于冰上, 冷却后 r/min 离心 5 min, 取上清液待测以 0.67% 硫代巴比妥酸为空白, 使用 T6 新世纪紫外 / 可见分光光度计 ( 北京普析通用仪器有限责任公司 ) 测定样品在和 450 nm 处的吸光度烟叶中丙二醛浓度的计算公式 : C =6.45(A 532-A 600)-0.56A 450 (1) 式中 :C 表示丙二醛的浓度,μmol L -1 ;A 532 A 600 A 450 分别为 nm 处的吸光度烟叶中丙二醛含量的计算公式 : Q=(C V 10-3 )/W (2) 式中 :Q 表示丙二醛的含量,μmol g -1 ;C 表示丙二醛的浓度,μmol L -1 ;V 表示丙二醛提取液的体积,mL;W 表示样品的质量,g (2) 脯氨酸含量的测定采用分光光度法进行测定称取 0.2 g 烟草叶片, 剪碎, 加入 10 ml 3% 磺基水杨酸和少量石英砂研磨成匀浆, 过滤取 1 ml 滤液于 10 ml 的试管中, 在试管中加入 1 ml 酸性茚三酮 1 ml 冰醋酸后, 将试管在 100 沸水中放置 1 h 后, 再将其放在冰上冷却待冷却后, 加入 5 ml 甲苯, 剧烈摇晃 10~15 s, 在室温下放置 20 min, 取上清液待测用 T6 新世纪紫外 / 可见分光光度计测定其在 520 nm 处的吸光度根据绘制的 Pro 标准曲线计算烟叶中的 Pro 含量 (3) 电导率的测定电导率的测定参考惠非 [13] 琼等的方法在 25 ml 的指形管中加入 10 ml ddh 2O, 再加入 10 片直径为 1 cm 的烟草叶片样品 ( 避开主脉 ), 将指形管放入真空干燥器内抽气, 30 min 后取出置于室温环境, 每隔 5 min 振荡一次, 共 6 次用 DDS-11A 型电导仪 ( 上海今迈仪器仪表有限公司 ) 测定外渗液的电导值, 记为 R 1 再将试管放入沸水中煮沸 20 min 后取出置于室温, 待冷却后摇匀, 再次测定外渗液的电导值, 记为 R 2 试验重复 3 次相对电导率 =(R 1/R 2) 100% (3) 干旱相关基因的表达分析烟草样品总 RNA 的提取去除 RNA 中的 DNA cdna 第一条链的合成荧光定量 PCR 扩增 [13] 体系等实验参考惠非琼等的方法进行 (1) 烟草叶片总 RNA 的提取按照 RNAiso Plus[ 宝生物工程 ( 大连 ) 有限公司 ] 的说明书进行实验, 电泳检测提取 RNA 的质量 (2) 去除 RNA 中的 DNA 在 0.5 ml EP 管中分别加入 5 gdna Eraser Buffer 2 μl gdna Eraser 1 μl Total RNA 800 ng, 再加入适量的 RNase Free ddh 2O, 使反应液总体积为 10 μl 轻轻混匀后, 42 反应 2 min,4 终止反应 (3)cNDA 第一条链的合成在本节 (2) 的反应液中加入 4 μ L 5 PrimeScript Buffer 2 1 μ L PrimeScript RT Enzyme Mix Ι 1 μl RT Primer Mix 4 μl DEPC-treated water, 混匀,37 孵育 15 min 后,85 加热 5 s,4 终止反应用 ddh 2O 将反应混合液稀释至 100 μl,-20 保存根据已报道的植物干旱胁迫相关基因的序列设计基因特异引物 [14], 引物由上海生工生物工程有限公司合成, 序列见表 1,Actin 为内参基因基因 ID AY At5g52310 At5g51070 AB At4g27410 At5g05410 At3g55530 At5g56740 表 1 荧光定量 PCR 引物 Tab.1 qrt-pcr primers 引物名称 Actin For Actin Rev RD29A For RD29A Rev ERD1 For ERD1 Rev ERD10A For ERD10A Rev RD26 For RD26 Rev DREB2A For DREB2A Rev SDIR1 For SDIR1 Rev HAT For HAT Rev 引物序列 (5' 3') AGCGGGAAATTGTTAGGGAG ATGACTTGTCCATCAGGCAG CGTGGTTAAAGTGTCAGGAAGAGCC AATCGCCATGGGCGCATACCAACC GGCTCTCCTCCTGGTTATGTTGGC TCCGGAGTGGTCGTGCACCGTA CATGTAAAATGTTGGTCTAATACTTTTGT CCACTAGCACTTAAGAGTCTACC ACCCACTCGAGCTGTACCCG CTCGTAGCCATGGAAGCTCC GGGGTAAATGGGTTGCTGAG TTGGCAACACTGTTCCCCG CCTTGCTGTCTCAACCATGGATC ACTTAGGCTCCAGCTGGCTCTT GCGTTTGACCACTCTTGGAGAC GATGTCACTGATCCTGACTGGC

4 2017 年 (4)qRT-PCR 反应在 0.5 ml PCR 反应管中分别加入 5 μl SYBR Premix Ex TagTM(2 ) 0.2 μl PCR Forward Primer(10 μmol/l) 0.2 μl PCR Reverse Primer(10 μmol/l) 0.2 μl ROX Reference Dye(50 ) 1 μl cdna 3.

4 年 (4)qRT-PCR 反应在 0.5 ml PCR 反应管中分别加入 5 μl SYBR Premix Ex TagTM(2 ) 0.2 μl PCR Forward Primer(10 μmol/l) 0.2 μl PCR Reverse Primer(10 μmol/l) 0.2 μl ROX Reference Dye(50 ) 1 μl cdna 3.4 μl ddh 2O( 灭菌 ) 反应条件为 :95 2 min 预变性 ;95 5 s;60 31 s,35 个循环数据分析采用 SPSS19.0 统计软件进行数据处理及分析 2 结果 2.1 印度梨形孢对烟草生长的影响印度梨形孢与烟苗在培养皿中共培养 21 d 后, 根部接种印度梨形孢烟苗的生物量主根长度侧根数量根和茎的鲜质量干质量明显高于未接种的烟草, 其中根和茎的鲜质量约是未接种烟草的 2 倍 ( 图 1a, 表 2) 把烟苗移栽到聚乙烯塑料盆中进行盆栽培养后, 印度梨形孢仍能促进烟草的生长 ( 图 1b, 表 3) 2.2 干旱胁迫对烟草生长的影响用 PEG 6000 溶液模拟干旱胁迫 48 h 后, 对照烟草 (CP) 叶片边缘卷曲褪绿, 而接种印度梨形孢的烟草叶片微下垂, 褪绿不明显 ( 图 2a) 随 PEG 6000 处理时间的延长 (72 96 h 后 ), 对照烟草 (CP) 叶片卷曲褪绿加剧, 而接种印度梨形孢的烟草干旱症状没有明显加剧 ( 图 2b 和图 2c) a. 培养皿中共培养 21 d 的烟苗 b. 盆栽 30 d 的烟苗 +P. indica 为根部接种印度梨形孢的烟草 ;-P. indica 为根部未接种印度梨形孢的空白对照 ; 红色箭头指的是烟草侧根 Fig.1 图 1 印度梨形孢对烟草的促生作用 Growth-promoting effects of P. indica on N. tabacum 处理 -P. indica +P. indica Tab.2 主根长 /mm 31.3±0.20B 37.2±0.27A 表 2 侧根数量 / 条 11.4±0.28B 17.2±0.28A 1 共培养 21 d 后烟草植株的生物学特性 Biological characteristics of N. tabacum on the 21st day after co-culture 根鲜质量 /mg 44.9±0.41B 83.5±0.18A 茎鲜质量 /mg 41.6±0.18B 95.9±0.11A 注 :1 同列数据后标有不同大写字母者表示差异达到极显著水平 (P<0.01) 下同 Tab.3 表 3 盆栽培养 30 d 后烟草植株的生物学特性根干质量 /mg 2.2±0.03B 3.0±0.05A Biological characteristics of N. tabacum on the 30th day after transferring into pot 茎干质量 /mg 3.6±0.03B 5.9±0.05A 处理株高 /cm 叶片数 / 片最大叶长 /cm 最大叶宽 /cm 叶鲜质量 /g 叶干质量 /g -P. indica 4.08±0.37B 6.3±0.16B 5.95±0.19B 13.60±0.16B 9.48±0.15B 1.05±0.16B +P. indica 9.32±0.08A 8.3±0.17A 6.88±0.18A 22.27±0.16A 12.63±0.18A 1.71±0.17A a. 处理 48 h b. 处理 72 h c. 处理 96 h CC 为对照植株水处理 ;CP 为对照植株干旱处理 ;PC 为接种印度梨形孢的植株水处理 ;PP 为接种印度梨形孢的植株干旱处理下同 Fig.2 图 2 干旱处理后烟草植株表型上的差异 Different phenotypes of tobacco after drought treatment

第 50 卷第 12 期惠非琼, 等 : 印度梨形孢对烟草抗旱性的影响 5 2.

5 干旱胁迫对烟草叶片相对电导率的影响正常情况下, 接种与未接种印度梨形孢烟草叶片的相对电导率无显著差异用 PEG 6000 溶液模拟干旱胁迫 24 h 后, 未接种印度梨形孢烟草的相对电导率快速升高, 而接种印度梨形孢的烟草无显著变化干旱胁迫 48 h 后, 接种与未接种印度梨形孢烟草叶片的相对电导率都上升, 但未接种印度梨形孢烟草的相对电导率显著高于接种印度梨形孢的烟草干旱胁迫 72

5 第 50 卷第 12 期惠非琼, 等 : 印度梨形孢对烟草抗旱性的影响干旱胁迫对烟草叶片丙二醛 (MDA) 含量的影响干旱胁迫前, 接种印度梨形孢烟草叶片中的 MDA 含量略低于未接种印度梨形孢的烟草, 但差异不显著在 PEG 6000 溶液处理和 72 h 后, 接种与未接种印度梨形孢烟草叶片中的 MDA 含量都升高, 但未接种印度梨形孢烟草叶片中的 MDA 含量显著高于接种印度梨形孢的烟草 ( 图 3) 2.5 干旱胁迫对烟草叶片相对电导率的影响正常情况下, 接种与未接种印度梨形孢烟草叶片的相对电导率无显著差异用 PEG 6000 溶液模拟干旱胁迫 24 h 后, 未接种印度梨形孢烟草的相对电导率快速升高, 而接种印度梨形孢的烟草无显著变化干旱胁迫 48 h 后, 接种与未接种印度梨形孢烟草叶片的相对电导率都上升, 但未接种印度梨形孢烟草的相对电导率显著高于接种印度梨形孢的烟草干旱胁迫 72 h 后, 未接种印度梨形孢烟草的相对电导率仍显著高于接种印度梨形孢的烟草, 是接种印度梨形孢烟草的 1.8 倍 ( 图 5) 柱状图上不同小写字母表示在 0.05 水平上的差异显著性下同 Fig.3 图 3 干旱处理后烟草叶片中丙二醛含量的变化 Malondialdehyde content in tobacco leaves after drought treatment 2.4 干旱胁迫对烟草叶片脯氨酸含量的影响干旱胁迫前, 各处理烟草叶片中 Pro 含量无明显差异干旱处理和 72 h 后, 接种与未接种印度梨形孢烟草中的 Pro 含量都升高, 接种印度梨形孢烟草叶片中的 Pro 含量显著高于未接种印度梨形孢的烟草 ( 图 4) 表明干旱胁迫下, 印度梨形孢能促进烟草对 Pro 的积累 Fig.5 图干旱胁迫下干旱相关基因的表达分析 qrt-pcr 结果 ( 图 6) 表明, 用 PEG 6000 溶液模拟干旱胁迫前, 接种和未接种印度梨形孢烟草中的转录因子 (RD26A DREB2A HAT) 及干旱相关蛋白基因 (RD29A ERD1 ERD10A SDIR) 的表达量差异不大干旱胁迫 3 h 后,RD29A RD26A 和 DREB2A 基因的表达量在接种和未接种印度梨形孢的烟草中无显著差异, 而在干旱胁迫 6 h 后, 接种印度梨形孢烟草中的表达量显著高于未接种印度梨形孢的烟草在干旱胁迫处理 3 h 后,ERD1 ERD10A SDIR HAT 基因的表达量在接种印度梨形孢的烟草中快速升高, 且显著高于未接种印度梨形孢的烟草干旱处理后烟草叶片相对电导率的变化 Relative electrical conductivity of tobacco leaves after drought treatment 3 讨论图 4 Fig.4 干旱处理后烟草叶片中脯氨酸含量的变化 Proline content in tobacco leaves after drought treatment 非生物逆境对细胞造成损伤的重要途径就是氧化胁迫, 改变膜系统的结构和功能, 破坏其渗透性和选择性, 导致细胞内电解液外渗, 引起电导率

6 年 Fig.6 图 6 干旱相关基因的表达量 Relative expression levels of drought-related genes in tobacco leaves [2] 上升 MDA 是反映氧化胁迫的一个生理指标, 与植物膜系统的氧化程度成正比, 其含量可用于 [3] 评价植物受氧化胁迫的强度及膜损伤程度干旱胁迫下, 接种和未接种印度梨形孢烟草中 MDA 的含量和相对电导率均有所上升在接种印度梨形孢的烟草中,MDA 的含量和相对电导率显著低于未接种印度梨形孢的烟草可能由于在干旱胁迫下, 接种印度梨形孢烟草膜系统的受损程度轻于未接种印度梨形孢的烟草, 印度梨形孢增强了烟草的抗氧化防御系统逆境下, 植物会产生大量的渗透调节物质来缓解细胞脱水所造成的渗透胁迫,Pro 是最常见的 [4] 渗透调节物质之一在非生物胁迫条件下, 植物体内游离 Pro 大量积累, 维持内环境的稳定, 缓解细胞失水对其结构和功能的损伤, 帮助植物适 [14] 应非生物胁迫干旱胁迫下, 印度梨形孢能促进烟草叶片中 Pro 的积累, 表明印度梨形孢可能通过促进渗透调节物质的积累来帮助烟草维持正常的生命活动, 提高烟草对干旱胁迫的抵抗能力植物干旱胁迫相关基因的上调表达能提高植物对干旱胁迫的耐受性因此, 可利用基因工程 [15] 改造技术, 赋予植物更高水平的抗旱能力与基因工程提高植株抗旱性相比, 将印度梨形孢定殖于植株根部进而提高植株抗旱性的方法具有明显优势 :1 印度梨形孢 - 植株互作体系的构建容易实现 2 印度梨形孢可同时作用于植株的多个抗旱基因, 提高抗旱相关基因的表达干旱胁迫下, 接种印度梨形孢的烟草叶片中的 RD29A ERD1 RD26A DREB2A SDIR1 HAT 和 EDR10A 基因都上调表达, 提高了烟草的抗旱性 3 对寄主无副作用 4 结论 1 培养皿和盆栽试验表明印度梨形孢能定殖于烟草根部, 促进烟草的生长 2 利用聚乙二醇 (PEG 6000) 人工模拟干旱胁迫条件的盆栽试验表明, 在干旱胁迫下, 印度梨形孢通过降低烟草细胞膜的损伤程度促进细胞渗透调节物质的积累提高烟草中干旱相关基因的表达, 从而增强烟草的抗旱能力参考文献 [1] Gill S S,Tuteja N. Reactive oxygen species and antioxidant machinery in abiotic stress tolerance in crop plants[j]. Plant Physiology and Biochemistry,2010,48 (12): [2] Khan M H,Panda S K. Alterations in root lipid peroxidation and antioxidative responses in two rice

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吉林农业大学学报２０１６３８１８７９１ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｈｔｔｐｘｕｅｂａｏｊｌａｕｅｄｕｃｎＥｍａｉｌｊｌｎｄｘｂｖｉｐｓｉｎａｃｏｍ神经生长因子ｍｒｎａ在鹅等级前卵泡中的表达刘璐璐隋玉健朱海洋武惠岩杨辉孙永峰吉林农业大学动物科学技术学院长春１３０１１８