2016-2017 产品目录 08 蛋白表达及检测 无细胞蛋白表达系统简介 299 无细胞蛋白表达系列技术简介 300 Premium PLUS Expression Kit (WM7-EDX-PLUS) 302 WEPO1240/1240H/1240G Expression Kit (WM7-TI-1240) 304 WEPO7240/7240H/7240G Expression Kit (WM7-TI-7240) 305 无细胞蛋白表达系统常见问题分析 306 部分使用 无细胞蛋白表达产品发表的文献列表 306 蛋白质相关产品选择指南 307 SDS-PAGE 凝胶电泳常见问题分析 308 蛋白质分子量标准 (MP102) 309 预染蛋白质分子量标准 (MP203)/MP204/MP205/MP206) 3010 考马斯亮蓝快速染色液 (PA101) 311 常见问题及分析 311 BCA 蛋白质定量试剂盒 (PA115) 312 Bradford 蛋白质定量试剂盒 (PA102) 313 常见问题及分析 313 标签抗体 314 Anti-GST Antibody (AB101) 315 Anti-His Antibody (AB102) 315 可溶型单组分 TMB 底物溶液 (PA107) 316 增强型 HP-DAB 底物显色试剂盒 (PA110) 317 Pro-light HP 化学发光检测试剂 (PA112) 318 Western Blot 常见问题分析 319 WorkBeadsTM 40 Ni (WM6-40 650 001/003/010) 321 BabyBio Ni-NTA 预装柱 (WM6-45-655-101/105) 322
八无细胞蛋白表达系无细胞蛋白表达系统简介 无细胞蛋白表达系统, 含有蛋白合成所需各主要组分 ( 氨基酸 酶 各种因子等 ), 不受细胞核 ( 核酸 DNA/NA) 线粒体 细胞骨架等的干扰, 能够在体外快速 大量表达蛋白 体外无细胞蛋白表达系统分为原核和真核两大类, 原核系统以细 菌裂解物为基础, 如大肠杆菌系统 ; 真核系统以真核细胞裂解物为基础, 包括麦胚系统 昆虫系统 兔网织红细胞系统 等 这一真正的 开放 系统, 能够特异性表达目的蛋白, 产生的蛋白可用于蛋白质功能检测 结构分析等下游实验 统 操作简便 : 只需按照说明书添加各种成分即可, 像做 PC 一样简单 需时短 : 只需 2-24 小时即可完成实验 表达量高 : 可实现规模表达, 最大表达量可达 50 mg/10 ml 反应体系 轻松表达困难蛋白 : 突破传统细胞内表达的极限, 实现毒蛋白 膜蛋白 包涵体及不溶蛋白的表达 蛋白共表达 : 可以进行多个模板的同时表达 开放系统 : 能够添加蛋白酶抑制剂 稀有密码子, 进行氨基酸标记等 无细胞蛋白表达系统与传统细胞表达系统特点比较 特点 无细胞蛋白表达 传统细胞表达 表达特异性 只表达目的蛋白 表达总蛋白 ( 细胞内总蛋白, 例如细胞骨架或线粒体等 ) 氨基酸标记 可以 非常困难 毒蛋白表达 可以 不可以 高通量表达 可以 不可以 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 该系统应用至今, 已成功表达超过 2 万种蛋白, 其中包括 13364 个人类的基因 部分数据列表如下 : 拟南芥蛋白激酶 500 小鼠蛋白激酶 300 欲了解人类基因表达的更多详情, 请登录 Human Gene and Protein Database (HGPD) 无细胞蛋白表达系统与传统的细胞内表达系统相比, 无需诱导培养, 大大简化了操作步骤以及下游实验流程, 能够用于 高通量以及大量表达的实验 ; 体外表达取消了生理限制, 显著提高具有功能性 可溶性 全长蛋白的总体产量 ; 由于能 够实现磷酸化修饰, 并不受蛋白毒性影响, 该系统十分适合激酶 膜蛋白等毒性蛋白的表达 ; 并可通过修饰的 tna, 在特定位点插入非天然氨基酸标记 无细胞蛋白表达系统特点 蛋白磷酸化酶 86 转录因子 900 转录因子 750 蛋白酶 180 蛋白酶 50 膜蛋白 180 蛋白激酶 300 自身抗原 240 蛋白磷酸化酶 80 疟原虫 1000 人类转录因子 900 病毒 70 核受体 38 原核生物 300 蛋白酶 75 (Nature Methods 2008,5,1011-1017) 299
八无细胞蛋白表达系统更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 无细胞蛋白表达系列技术简介 CFS 无细胞蛋白表达系列为真核体外无细胞蛋白表达系统, 使用独特的技术去除了翻译抑制物的麦胚提取物 (WEPO ), 能够大量表达可溶性的全长蛋白 该系列产品采用非偶联的转录和翻译系统, 目的蛋白得率与 TS 系列产品相当 1)CFS 无细胞蛋白表达原理 * 非偶联的转录和翻译系统 CFS 系列产品中包括模板构建 转录和翻译反应所需全部试剂 首先构建携带 SP6 启动子 E01 增强子 目的基因的 线性模板或质粒, 随后在转录反应液中进行体外转录, 再以获得的 mna 为模板进行翻译反应 翻译反应有三种方法 可供选择, 分别为 Bilayer eaction Method epeated Batch Method Filter-and-Feed Method, 这些方法都可以和 仪器配合使用, 其中 Bilayer eaction Method 手工操作非常简便, 因此被广泛使用 * 多种翻译系统 对于 WEPO 而言, 前期的模板准备和转录 mna 相同, 不同的是翻译系统, 可以采用以下三种方法进行翻译 Bilayer eaction Method 利用反应液和麦胚裂解物之间的密度差相互渗透, 在液面相交处进行反应, 随着时间的推进, 溶液逐渐由两相变为单一混合物而终止 用移液器混匀后, 即得到包含目的蛋白的溶液 该方法可以与自动化仪 器 (Protemist DT II, GenDecoder ) 配合使用 也可以手工操作 ( 请参见说明书 ) epeated Batch Method 通过离心的方式不断的使反应液通过麦胚裂解物, 从而不断的合成目的蛋白, 该方法既可以 手工操作 ( 需要离心机 ), 也可以配合仪器使用 Filter-and-Feed Method 利用 Protemist 而大规模生成目的蛋白 XE 仪器, 不断供给 mna 和翻译反应液, 并过滤掉翻译反应的副产物, 从 300
八无细胞蛋白表达系2)CFS 系列简要操作流程 统4) 注意事项 产品名称 真核系统 Premium PLUS WEPO1240 系列 WEPO7240 系列 产品参数 Expression Kit 1240 1240H 1240G 7240 7240H 7240G 最大得率 / 反应 40 µg 20 µg 100 µg 500 µg 40 µg 200 µg 1 mg 标准反应体系 226 µl 226 µl 1.2 ml 6 ml 226 µl 1.2 ml 6 ml 模板类型 线性 / 质粒 质粒 质粒 质粒 质粒 质粒 质粒 反应时间 16h 16h 16h 16h 16h 16h 16h 反应温度 15 /26 15 /26 15 /26 15 /26 15 /26 15 /26 15 /26 质粒浓度越高越好, 推荐浓度为 1 µg/µl 纯度 A 260/280 在 1.7-1.85 之间 试剂不宜长期存放于储存干冰的 -80 冰箱中 推荐使用 Nase-Free ddh 2 O 溶解质粒, 避免 Nase 污染 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 3)CFS 系列选购指南 合成克隆 / 非克隆模板模板生成 体外转录, 获得 mna 体外翻译, 得到目的蛋白 扩大蛋白表达规模, 按 需对蛋白进行标记 转录反应 翻译反应 扩大规模表达 质粒模板 (peu-e01 载体 ) 线性模板 (Premium Plus Expression Kit) 转录 Mix DNA 模板 SP6 NA 聚合酶 NTP Mix 翻译缓冲液 Nase 抑制物 (Premium Plus Expression Kit) SUB-AMIX: 包含 ATP GTP 和 20 种氨 基酸的翻译缓冲液 (Premium Plus Expression Kit) WEPO1240/1240G/1240H WEPO7240/7240G/7240H 301
八无细胞蛋白表达系统更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com Premium PLUS Expression Kit 用于小量蛋白表达, 单次表达量最高可达 40 µg 产品包装 试剂盒组成 实验例 含量 peu-e01-mcs(1.0 µg/µl) 5.0 µl peu-e01-dhf(1.0 µg/µl) 5.0 µl SPU(1 µm) 100 µl desp6e01(10 nm) 100 µl Transcription Premix LM 8 x18 µl WEPO 9240 8 x10 µl SUB-AMIX SGC 8 x206 µl Aluminum seal 2 条 自备试剂特异性引物 保存条件 -80 避光保存 peu-e01-mcs 载体图谱及酶切位点 选择合适的酶切位点后, 将带有起始密码子和终止子的 cdna 插入载体, 即可完成表达模板的构建 目录号 包装 价格 WM7-EDX-PLUS 8 次 8600 元 本试剂盒能够通过线性模板或质粒模板实现小规模蛋白表达, 试剂盒中包含麦胚无细胞蛋白表达系统专用质粒 peu-e01-mcs, 线性模板构建所需引物, 全部翻译试剂, 以及 8 次 226 µl 反应体系所需的转录预混反应液和八连管 另外, 提供 peu-01-dhf 质粒作为阳性对照, 利用该阳性对照质粒单次表达量最高可达 20 µg 本试剂盒采用非偶联的转录和翻译方法, 构建线性 / 质粒模板, 并在体外进行转录后, 以获得的 mna 为模板, 利用双层反应法表达目的蛋白 产品特点 多种选择 : 支持线性模板和质粒模板 表达量高 : 单次反应最高表达量可达 40 µg 方法简单 : 采用 Bilayer 反应方法, 不需要特殊仪器 仪器要求金属浴 ( 推荐金属浴 OSE 系列 ) 构建线性模板需进行两步 PC 反应 第一轮 PC 中, 通过携带公共接头的上游引物及特异性下游引物, 扩增目的基因, 获得加入公共接头的目的基因片段 ; 随后在第二轮 PC 过程中, 加入 SP6 启动子和 E01 增强子原件, 获得用于蛋白表达的线性模板 302
八无细胞蛋白表达系翻译反应采用 Bilayer eaction Method, 该方法通 过反应液和麦胚裂解物造成的密度差, 相互渗透, 在 液面相交处发生反应, 随着时间的推进, 溶液逐渐由两相变为单一混合物而终止 用移液器混匀后, 即得到包含目的蛋白的溶液 该方法可以与自动化仪器 (Protemist DT II, GenDecoder ) 配合使用, 也可 以手工操作 ( 请参见说明书 ) 实验例 DHF 基因克隆入 peu-e01-mcs, 使用 Premium PLUS Expression Kit 表达 DHF 蛋白后, 取 3 µl 样本进行 SDS-PAGE 电泳, 统考马斯亮蓝染色图 A: 分子量蛋白 Marker;B: 阴性对照 ;C:DHF 蛋白更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 303
八无细胞蛋白表达系统更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com WEPO1240/1240H/1240G Expression Kit 真核无细胞体外大规模蛋白表达试剂盒 产品包装 试剂盒组成 实验例 含量 WEPO 1240/ WEPO 1240H/ 2 1 ml WEPO 1240G SUB-AMIX S-1 1.1 ml SUB-AMIX S-2 1.1 ml SUB-AMIX S-3 1.1 ml SUB-AMIX S-4 1.1 ml 5x Transcription Buffer 0.4 ml NTP Mix 0.2 ml SP6 NA Polymerase 30 µl Nase Inhibitor 30 µl Creatine Kinase 20 µl peu-e01-mcs 10 µl peu-e01-dhf 10 µl 自备试剂特异性引物 使用 SDS-PAGE 电泳检测 WEPO1240 和 WE- PO1240G 两种试剂盒表达的 GST-tag 重组蛋白的回收纯度 使用 WEPO1240G 表达, 经过亲和法纯化后, 目的蛋白纯度从 67% 增加到 82% S: 亲和纯化标准 WEPO1240 试剂盒表达目的蛋白 ;G: 亲和纯化预处理的 WEPO1240G 试剂盒表达目的蛋白 目录号包装价格 WM7-TI-1240 200 次 226 µl/ 32250 元 WM7-TI-1240H 40 次 1.2 ml/ 36650 元 WM7-TI-1240G 8 次 6 ml 36650 元 WEPO1240 系列包含三款产品, 根据表达的目的蛋白携带标签不同, 分为 WEPO1240/WEPO1240H/WEPO1240G 各款产品均包含真核体外无细胞蛋白表达系统所需的麦胚裂解物以及转录 翻译试剂, 试剂量足够使用 Protemist DT II 进行 6 次 6 ml 翻译反应或 24 次 1.2 ml 翻译反应, 同时也可以在 6/24/96 孔板中实现手工操作合成目的蛋白 WEPO1240H 是对 WEPO1240 裂解物进行处理后, 去除了能够非特异性吸附 His-tag 亲和纯化树脂的内源性蛋白, 能够用于表达高纯度 His-tag 重组蛋白 ; WEPO1240G 是对 WEPO1240 裂解物进行处理后, 去除了能够非特异性吸附 GST-tag 亲和纯化树脂的内源性蛋白, 用于表达高纯度 GST-tag 重组蛋白 产品特点 选择多 : 三种反应体系可供选择, 满足不同需求 操作简便 : 可以手工操作, 或配合仪器使用 表达量高 : 用于大量蛋白表达 仪器要求 : 手工合成需要恒温装置 ( 推荐金属浴 OSE 系列 ); 自动化合成需要与 Protemist DT II 配合使用 使用 SDS-PAGE 电泳检测 WEPO1240 和 WE- PO1240H 两种试剂盒表达的 His-tag 重组蛋白的回收纯度 使用 WEPO1240H 表达, 并经过亲和纯化方法纯化后, 目的蛋白纯度从 30% 增加到 70% S: 亲和纯化标准 WEPO1240 试剂盒表达目的蛋白 ;H: 亲和纯化预处理的 WEPO1240H 试剂盒表达目的蛋白 304
八无细胞蛋白表达系WEPO7240/7240H/7240G Expression Kit 真核无细胞体外大规模蛋白表达优化试剂盒 产品包装 试剂盒组成 自备试剂特异性引物 统实验例 WEPO1240 和 WEPO7240 试剂盒表达多种蛋白, 亲和法纯化后, 上样 1 µl,sds-page 电泳结果 如图所示,WE- PO7240 试剂盒的表达蛋白纯化后得率是 WEPO1240 的两倍左右 M: 蛋白分子量标准 1: 亲和纯化 WEPO1240 试剂盒表达蛋白纯化后产物 2: 亲和纯化 WEPO7240 试剂盒表达蛋白纯化后产物更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 含量 WEPO7240/WEPO7240H /WEPO7240G 2x1 ml SUB-AMIX SGC S-1 1.1 ml SUB-AMIX SGC S-2 1.1 ml SUB-AMIX SGC S-3 1.1 ml SUB-AMIX SGC S-4 1.1 ml 5x Transcription Buffer LM 0.4 ml NTP Mix 0.2 ml SP6 NA Polymerase 30 µl Nase Inhibitor 30 µl Creatine Kinase 20 µl peu-e01-mcs 10 µl peu-e01-dhf 10 µl 目录号 包装 价格 WM7-TI-7240 200 次 226 µl/ 42400 元 WM7-TI-7240H 8 次 6 ml/ 47050 元 WM7-TI-7240G 40 次 1.2 ml 47050 元 WEPO7240 系列包含三款产品, 根据表达的目的蛋白携带标签不同, 分为 WEPO7240/WEPO7240H/WEPO7240G WEPO7240 系列产品是在 WEPO1240 的基础上去除了干扰蛋白表达的杂蛋白, 得率比 WEPO1240 提高一倍左右 WEPO7240 系列各款产品均包含真核体外无细胞蛋白表达系统所需的麦胚裂解物以及转录 翻译试剂, 试剂量足够使用 Protemist DT II 进行 6 次 6 ml 翻译反应或 24 次 1.2 ml 翻译反应, 同时也可以在 6/24/96 孔板中实现手工操作合成目的蛋白 WEPO7240H 是对 WEPO7240 裂解物进行处理后, 去除了能够非特异性吸附 His-tag 亲和纯化树脂的内源性蛋白, 能够用于表达高纯度 His-tag 重组蛋白 ; WEPO7240G 是对 WEPO7240 裂解物进行处理后, 去除了能够非特异性吸附 GST-tag 亲和纯化树脂的内源性蛋白, 用于表达高纯度 GST-tag 重组蛋白 产品特点 选择多 : 三种反应体系可供选择, 满足不同需求 操作简便 : 手工操作, 或配合仪器使用 表达量高 : 用于大量蛋白表达, 表达量是 WEPO1240 系列的两倍 仪器要求 : 手工合成需要孵育装置 ( 推荐金属浴 OSE 系列 ); 自动化合成需要与 Protemist DT II 配合使用 WEPO1240 WEPO7240 GFP 316 µg 610 µg GUS 403 µg 806 µg DHF 218 µg 446 µg p38 365 µg 749 µg Akt1 209 µg 285 µg JNK2 395 µg 753 µg Average 316 µg 608 µg Av.Two-fold increase 305
八无细胞蛋白表达系统更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com Q&A Q Q 无细胞蛋白表达系统常见问题分析 CFS 系列麦胚无细胞表达系统 peu 质粒特点, 以及对于模板的要求 A-1 A-2 CFS 提供的质粒载体 peu 专门用于麦胚无细胞蛋白表达系统 peu 载体的 5 和 3 序列提高了 mna 转录, 可以生成不含 5 端帽子结构和 poly(a) 尾的 mna 由于取消了 5 端帽子结构和 poly(a) 尾, 麦胚无细胞表达系统不需复杂的 mna 浓度优化 高纯度的质粒 DNA 是 CFS 麦胚无细胞表达系统成功转录和翻译的关键 对模板的要求 质粒纯度 A260/A280 的比值为 1.70-1.85, 浓度为 1 µg/µl 无 Nase 污染 ( 推荐使用无 Nase ddh 2 O 溶解质粒 ) 除 SP6 启动子外, 是否还有其他启动子可以用于 CFS 系列产品 A-1 推荐使用 SP6 启动子的 peu 载体, 包含 T7 启动子的载体也可以在 CFS 系统中进行蛋白表达, 但由于 SP6 和 T7 启动子在 5 转录位点的差异, 同样量的转录本得率可能会较低 部分使用 无细胞蛋白表达产品发表的文献列表 题目 期刊 IF 使用产品 单位 Immunoproteomics Profiling of Blood Stage Plasmodium vivax Infection by High-Throughput J Proteome es 5.056 CFS 爱媛大学 Screening Assays A simple and high-sensitivity method for analysis of ubiquitination and polyubiquitination BMC Plant Biol 4.09 CFS 爱媛大学 based on wheat cell-free protein synthesis Measurement of naturally acquired humoral immune responses against the C-terminal region of the Plasmodium vivax MSP1 protein Parasitol es 2.852 CFS 国立江原大学 using protein arrays A Cell-Free Translation and Proteoliposome econstitution System for Functional Analysis Plant Physiol Biochem 2.775 CFS 爱媛大学 of Plant Solute Transporters The initiator caspase, caspase-10β, and the BH-3-only molecule, Bid, demonstrate evolutionary conservation in Xenopus of their Genes Cells 2.731 CFS 京都大学 pro-apoptotic activities in the extrinsic and intrinsic pathways Efficient production and purification of functional bacteriorhodopsin with a wheatgerm cell-free system and a combination of Commun Biochem Biophys es 2.406 CFS 爱媛大学 Fos-choline and CHAPS detergents Production and partial purification of membrane proteins using a liposome-supplemented BMC Biotechnol 2.165 CFS 爱媛大学 wheat cell-free translation system obotic large-scaleapplication of wheat cell-freetranslationtostructuralstudiesincluding New Biotechnol 1.706 CFS 威斯康辛大学 membraneproteins 306
八蛋白检测相蛋白质相关产品选择指南 在生物体内, 蛋白质扮演着构筑生命大厦的 砖块 角色, 随着破译生命密码的人类基因组计划进入尾声, 一个以蛋白 质为研究重点的 后基因组时代 已经拉开序幕, 蛋白质将是今后的重点研究方向之一 从 2005 年开始, 公司陆续推出蛋白系列相关产品, 包括抗体, 蛋白质分子量标准, 蛋白质显色试剂, 蛋白胶快速染色液 蛋白质定量试 剂盒等, 力争为蛋白质学研究技术的不断进步和完善发挥力量 关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 307
关于 SDS-PAGE 凝胶电泳 SDS-PAGE 凝胶电泳是在 PAGE 凝胶电泳中引进阴离子去污剂 SDS, 通过 SDS 打开分子内和分子间氢键, 破坏蛋白质的二级和三级结构 蛋白质在一定浓度的含有 SDS 的溶液中, 与 SDS 分子按比例混合, 形成 SDS- 蛋白质复合物, 这种复合物由于结合了大量 SDS, 使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块, 从而降低或消除了各种蛋白质分子间天然的电荷差异 由于 SDS 与蛋白质的结合是与蛋白质分子量成比例的, 因此在进行电泳时, 蛋白质分子的迁移速度取决于蛋白质分子量大小 SDS-PAGE 凝胶的有效分离范围 SDS-PAGE 凝胶电泳常见问题分析 Q 蛋白带型聚团 A-1 上样过量 降低蛋白上样量或降低蛋白浓度 A-2 样品粘度过大 延长煮沸时间 A-3 样品沉淀 加大样品中 SDS 的浓度 A-4 样品中含有不溶物质 离心或过滤样品以除去特定污染物 A-5 制胶不佳 确保制胶均匀, 一次完成 Q 分离胶浓度 (%) 15 10 7.5 5.0 线性分离范围 (kda) 12-43 16-68 36-94 57-212 蛋白 Marker 条带缺失或条带模糊 A-1 分离胶浓度不准确 配制正确浓度的分离胶 A-2 缓冲液放置过长 定期更新缓冲液 A-3 甲叉丙烯酰胺贮存液放置时间过长或配制不准确 及时更新贮存液, 此贮存液配制时在 37 水浴溶解 30 min 以上 A-4 电泳时间过长 观察前面的指示剂染料, 掌握恰当的电泳时间 Q 哑铃形条带或 微笑 条带 A-1 上样体积过大导致不完全堆积 使用恰当的上样体积, 样品不宜过稀 A-2 电压过大 降低电压 A-3 分离胶表面不平 在制胶时使分离胶表面水平 A-4 凝胶过期 在指定的失效期前使用凝胶 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 308
八蛋白检测相蛋白质分子量标准 产品组成 产品名称 保存条件 -20 保存 关26.0 20.0 14.4 目录号 :MP102 12%SDS-PAGE 凝胶电泳 ( 上样量 10 µl) 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 包装 蛋白质分子量 Marker 200 µl 浓度 0.1-0.2 µg/µl 产品特点 电泳图 蛋白质 Marker (14.4kDa-94.0kDa) MP102 MW (kda) 94.0 66.2 45.0 33.0 蛋白质分子量 Marker (14.4-94 kda) 公司研制生产的蛋白质 Marker 是由数种已知氨基酸序列蛋 白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液, 经 SDS-PAGE 凝胶电泳后 用考马斯亮蓝染色可得清晰的蛋白带 建议使用分离胶浓度为 12% 适合于 12%-15%SDS-PAGE 电泳 无需加热, 直接上样, 使用更方便 适用范围 目录号产品名称包装价格 可用于 SDS-PAGE 电泳, 用考马斯亮蓝染色 20 次 90 元 309
预染蛋白质分子量标准 产品组成 产品名称包装预染蛋白质 Marker Ⅱ ( 蓝色 ) 100 µl 预染蛋白质 Marker Ⅲ ( 蓝色 ) 200 µl 双色预染蛋白质 Marker 200 µl 宽范围彩色预染蛋白质 Marker 100 µl 浓度 0.2-0.4 µg/µl 保存条件 -20 保存 预染蛋白质 Marker Ⅱ ( 蓝色 )(19 kda-117 kda) MW (kda) 117 85 49 34 25 19 目录号 :MP203 12% SDS-PAGE 电泳 ( 上样量 5 µl) 目录号 :MP204 12% SDS-PAGE 电泳 ( 上样量 10 µl) 目录号产品名称包装价格 MP203 预染蛋白质 Marker Ⅱ ( 蓝色, 19-117 kda) 20 次 260 元 MP204 预染蛋白质 Marker Ⅲ ( 蓝色, 18-94 kda) 20 次 180 元 MP205 双色预染蛋白质 Marker (18-100 kda) 20 次 220 元 MP206 宽范围彩色预染蛋白质 Marker (11-245 kda)20 次 350 元 预染蛋白质 Marker Ⅲ ( 蓝色 )(18 kda-94 kda) MW (kda) 94 60 45 27 18 预染蛋白质 Marker 为几种蛋白质分别纯化预染后混合而成的蛋白 质溶液, 这些蛋白混合物与蓝色或彩色染料共价偶联, 可在凝胶电泳时出现强度均匀的蛋白带, 可以直接观察蛋白电泳及判断 Western 转移效果 同未预染的蛋白标准相比, 预染蛋白 Marker 因与染料共价偶联而在 SDS-PAGE 电泳时的迁移特性发生某些改变 如果要精确判定分子量, 推荐将 公司的非预染蛋白质 Marker( 目录号 :MP102) 与预染蛋白 Marker 配合使用 适用范围蛋白质凝胶电泳和蛋白质转移 ( 从胶上到膜上 ) 产品特点 电泳时 电泳后或转膜后均能通过肉眼观察蛋白条带 无需加热, 直接上样, 使用更方便 双色预染蛋白质 Marker(18 kda-100 kda) MW (kda) 100 60 45 28 18 目录号 :MP205 12% SDS-PAGE 电泳 ( 上样量 10 µl) 宽范围彩色预染蛋白质 Marker (11 kda-245 kda) MW (kda) 245 180 135 100 75 63 48 35 25 20 17 11 目录号 :MP206 4%-20% SDS-PAGE 电泳 ( 上样量 5 µl) 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 310
八蛋白检测相考马斯亮蓝快速染色液 CBB Fast Staining Solution 快速染色 灵敏度高 安全无害 适用范围 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 蛋白电泳胶的快速染色, 或 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测 自备试剂双蒸水或去离子水 保存条件 2-8 保存 BSA 关常见问题及分析 Q 背景高 A-1 脱色不充分 电泳结束后, 取胶放入双蒸水或去离子水中, 延长洗涤时间或增加洗涤次数 Q 染色后未见蛋白条带 A-1 SDS 及盐类等杂质未除尽 电泳结束后, 取胶放入双蒸水或去离子水中, 延长洗涤时间或增加洗涤次数 A-2 染色时间过短 延长煮沸时间或染色时间 A-3 蛋白上样量太少 建议在电泳时加两个不同量的 BSA, 并将此两个泳道作为阳性对照 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 产品特点 ( 与常规考马斯亮蓝染色液相比较 ) 考马斯亮蓝快速染色液 染色快, 脱色快, 全过程仅需 10 min 全新配方, 不含甲醇 乙酸, 无毒, 无刺激性气味 低背景, 高灵敏度,BSA 灵敏度可低至 30 ng 易操作, 易保存, 不需特殊设备, 脱色后凝胶可在纯水中保存数月 染色结果 BSA ng 30 300 1000 常规甲醇考马斯亮蓝染色液 目录号 包装 价格 PA101 100 ml 50 元 公司研制生产的考马斯亮蓝快速染色液是一种即用型快速灵敏而且安全的考马斯亮蓝 G-250 染液, 采用独特配方配制而成, 用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 蛋白电泳胶的快速染色 这种染料节省了制备相关溶液所需的时间和精力, 完全没有毒性而且不需要酸 醇固定或者脱色, 以其方便快捷的操作, 卓越的灵敏度, 成为蛋白质染色产品中的首选 染色 脱色长达 4 h 以上 含甲醇 乙酸, 强刺激性气味, 影响身体健康 灵敏度低,BSA 灵敏度达到 100 ng 需要特殊配制的缓冲液来保存凝胶, 长期保存需要制成干胶 311
BCA 蛋白质定量试剂盒 BCA Protein Assay Kit 快速 便捷 灵敏 兼容性好 产品组成 试剂盒组成 PA115-01 PA115-02 BCA 试剂 A 100 ml 500 ml BCA 试剂 B 3 ml 15 ml BSA 标准品 (2 mg/ml) 2 1 ml 10 1 ml 保存条件 BCA 试剂 A 和 BCA 试剂 B: 室温 (15-25 ) 保存 BSA 标准品 :-20 保存 产品应用测定含有较高浓度去垢剂蛋白溶液中的蛋白浓度 使用说明 采用 37 孵育 30 min 或室温放置 2 h 进行反应, 结果无差异 蛋白溶液中含有物质不同需采用不同的定量方法 实验例 562 nm 吸光度值 2.5 2 1.5 1 0.5 y=0.0009x+0.0532 2 =0.9941 0 0 500 1000 1500 2000 2500 BSA 浓度 (µg/ml) 试管检测 BSA 浓度标准曲线 目录号 包装 价格 PA115-01 50 次 ( 试管检测 ) 380 元 500 次 ( 微板检测 ) PA115-02 250 次 ( 试管检测 ) 1000 元 2500 次 ( 微板检测 ) BCA 蛋白质定量试剂盒 (BCA Protein Assay Kit) 是根据目前世界 上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一 BCA(bicinchoninic acid) 法研制而成, 实现了对蛋白质进行快速 稳定 灵敏的浓 度测定 本试剂盒的原理是蛋白质分子中的肽键结构在碱性环境下能与 Cu 2+ 络合生成络合物, 将 Cu 2+ 还原成 Cu +, 而 BCA 试剂可敏感特异地与 Cu + 结合, 形成稳定的有颜色的复合物, 并在 562 nm 处有最大光吸收值, 该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比, 可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量 1 h 内即可完成蛋白质定量检测 本试剂盒含有牛血清白蛋白 (BSA) 溶液作为蛋白质标准溶液, 测定范围为 20-2000 µg/ml 产品特点 便捷快速 : 与 Lowry 法相比, 该方法可在 1 h 内完成蛋白质定量检测, 工作液配制后 24 h 内使用无影响 灵敏准确 : 测定范围是 20-2000 µg/ml(562 nm 读数 ) 在测定范围内有良好的线性关系, 变异系数小 兼容性好 : 与 Bradford 法相比, 对去垢剂耐受能力大为提高, 在 Tween20 低于 4%,NP40 低于 5%,SDS 低于 4%, Triton X-100 低于 4% 的浓度范围内, 即可获得准确定量结果 ( 其余物质耐受度详见说明书 ) 使用微板法测定时将体积按比例减小 562 nm 吸光度值 2 1.5 1 y=0.0009x+0.048 0.5 2 =0.9967 0 0 500 1000 1500 2000 2500 BSA 浓度 (µg/ml) 微板检测 BSA 浓度标准曲线 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 312
八蛋白检测相Bradford 蛋白质定量试剂盒 Bradford Protein Assay Kit 目录号 包装 价格 快速灵敏 操作简便 兼容性广 PA102 100 次 ( 试管检测 ) 500 次 ( 微板检测 ) 200 元 产品组成 试剂盒组成考马斯亮蓝染液牛血清白蛋白 BSA 标准溶液 (1 mg/ml) 关常见问题及分析 Q 空白对照光吸收值正常, 但标准对照和样品中的吸收值不佳 A-1 试剂保存不当 置于 4 保存 A-2 试剂温度过低 使试剂温度逐渐恢复成室温 A-3 未在正确波长检测吸光度 在 595 nm 处读数 Q 样品试管中有沉淀物 A-1 样品中含有表面活性剂 ( 去垢剂 ) 透析或稀释样品以去除杂质 A-2 样品未充分混匀或放置时间过长, 与染料形成聚合体 定量前充分混匀样品 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 包装 300 ml 10 1 ml 保存条件考马斯亮蓝 :2-8 避光保存蛋白标准 BSA:-20 保存 实验例 用 BSA 制备的标准曲线 吸光度值 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 10 20 30 40 50 60 70 y=0.0151x-0.001 2 =0.9999 BSA 浓度 (µg/150 µl) Bradford 蛋白质定量试剂盒是根据目前世界上最常用的两 种蛋白浓度检测方法之一 : 考马斯亮蓝 G-250(Coomassie Brilliant Blue G) 法研制而成, 实现了蛋白浓度测定的快速, 稳定和高灵敏度, 其原理是考马斯亮蓝 G-250 可以在酸性条件下和蛋白质结合产生特殊的蓝色, 最大吸收波长在 595 nm 处 染色反应可在 5-10 min 内完成, 颜色能保持 30 min 稳定, 因此可通过比色分析在几分钟内快速测定蛋白质含量 本试剂盒含有配制好的考马斯亮蓝溶液和牛血清白蛋白 (BSA) 溶液作为蛋白质标准溶液, 测定范围为 50-1000 µg/ml 产品特点 快速方便 : 即开即用, 操作简便 灵敏准确 : 测定范围是 50-1000 μg/ml(595 nm 读数 ), 可检测 25 μg/ml 的蛋白质, 在测定范围内有较好的线性关系, 变异系数小 兼容性广 : 与其它蛋白浓度测定方法 ( 如 Lowry 法 ) 相比, 该方法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响 样品中的 DTT 浓度可高达 5 mm, 但受略高浓度的去垢剂影响, 需确保 SDS 低于 0.1%,Triton X-100 低于 0.1%,Tween-20,60 和 80 低于 0.06%, 使用微板法测定时将体积按比例减小 313
标签抗体 工作浓度 Western Blot 杂交 (ECL 显色 ): 1:200-5000 稀释, 室温孵育 1 h 免疫染色 :1:500-2000 稀释 免疫沉淀 ELISA Dot Blot: 需通过滴定实验确定最佳反应浓度 适用范围 ELISA Dot Blot Western Blot 免疫沉淀和免疫染色 保存条件 -20 避光保存 应用 Anti-His 检测 His-Tag 融合蛋白 免疫荧光染色检测 (HEK293 细胞 ) 红色荧光显示表达的 His-Tag 融合蛋白 1 2 应用举例 应用不同公司提供的不同浓度 体积的 anti-his 单克隆抗体检测 His-Tag 蛋白 Marker 融合蛋白显示 :Line3 所用的 anti-his 灵敏度显著高于 Line 1 和 2 1 2 3 1 2 3 1.25 µl 2.5 µl 1.25 µl 2.5 µl Anti-His 抗体 0.1 µg/ml 1 2 3 1 2 3 Anti-His 抗体 0.2 µg/ml (C- 末端 ), 蓝色荧光为细胞核 1: 未转染表达载体 ; 2: 转染 His-Tag 融合蛋白表达载体 Line1: 进口 anti-his 抗体 -A; Line2: 进口 anti-his 抗体 -B; Line3: anti-his 单克隆抗体 Western Blot 检测转染 His-Tag 融合蛋白表达载体的 HEK293 细胞 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 314
八蛋白检测相Anti-GST Antibody 宿主 小鼠, 单克隆抗体 适用范围 关小鼠, 单克隆抗体 Anti-His Antibody 为高纯度的小鼠单克隆抗体, 属 IgG2b 亚 适用范围 型 适于检测各种商品化编码 6 His-Tag 序列的载体表达的 含组氨酸标签的蛋白产物 该抗体可高度特异性地结合位于 ELISA Dot Blot Western Blot 免疫沉淀和免疫染色 蛋白质 C 末端,N 末端和内部的六个连续组氨酸 在蛋白质工作浓度免疫相关实验中使用该抗体, 可获得特异性高, 目的条带清 Western Blot 杂交 (ECL 显色 ):1:200-5000 稀释, 晰的理想的实验结果 室温孵育 1 h( 稀释比例与抗原的纯度和量有关, 由实验经验值决定 ) 产品特点 免疫染色 :1:500-2000 稀释 高纯度 高浓度 (1 mg/ml 的抗体浓度 ) 免疫沉淀 ELISA Dot Blot: 需通过滴定实验确定 高特异性 : 特异检测 HisHisHisHisHisHis 和 C- 末端 N- 最佳反应浓度 末端或内部 His-Tag 融合蛋白 自备试剂 高灵敏度 : 可检测 1-2 ng His-Tag 融合蛋白 (WesternBlot PBS 或 TBS 杂交,ECL 显色 ) 保存条件 进口品质, 无交叉反应性 : 与细菌 酵母 昆虫细胞或哺 -20 保存 乳动物细胞裂解物无交叉反应 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com ELISA Dot Blot Western Blot 免疫沉淀和免疫染色 工作浓度 Western Blot 杂交 (ECL 显色 ):1:200-5000 稀释, 室温孵育 1 h 免疫染色 :1:500-2000 稀释 免疫沉淀 ELISA Dot Blot: 需通过滴定实验确定 最佳反应浓度 自备试剂 PBS 或 TBS 保存条件 -20 保存 Anti-His Antibody 宿主 Anti-GST( 谷胱甘肽 -S- 转移酶 ) Antibody 为高纯度的小鼠单 克隆抗体, 属 IgG2a 亚型 该抗体与 GST 结构域具有高亲 和性, 可特异性地检测各种商品化含 GST 序列表达载体表 达的 GST-Tag 融合蛋白 在蛋白质免疫相关实验中使用该抗 体, 可以最大限度的检测目的蛋白, 获得特异性高, 目的条 带清晰的理想的实验结果 产品特点 高特异性 : 特异检测变性和非变性形式的 GST 和 GST 编 码载体表达的 GST-Tag 融合蛋白 高灵敏度 : 可检测 10-50 ng 纯化的 GST 或 GST-Tag 融 合蛋白 (Western Blot 杂交,ECL 显色 ) 进口品质无交叉反应性 : 与细菌 酵母 昆虫细胞或哺乳 动物细胞裂解物无交叉反应 目录号包装价格 AB101-01 20 µl (1 mg/ml) 320 元 AB101-02 100 µl (1 mg/ml) 1180 元 高纯度 高浓度 (1 mg/ml 的抗体浓度 ) 目录号包装价格 AB102-01 20 µl (1 mg/ml) 320 元 AB102-02 100 µl (1 mg/ml) 1180 元 315
可溶型单组分 TMB 底物溶液 Soluble TMB Substrate Solution 灵敏 无毒 使用方便 应用范围 ELISA 其它通过液体反应检测 HP 的应用 自备试剂 0.1M H 2 SO 4 检测试剂 保存条件 2-8 避光保存 1. 二抗稀释 1:100; 2. 二抗稀释 1:500; 3. 二抗稀释 1:1000; 4. 二抗稀释 1:2000; 5. 二抗稀释 1:3000 目录号 包装 价格 PA107-01 100 ml 180 元 PA107-02 5 100 ml 680 元 在辣根过氧化物酶 (HP) 的数种颜色反应底物中,TMB 因其灵敏 度较高及无致癌性而得到广泛应用 可溶型单组分 TMB 底物溶液 与 HP 反应形成可溶性蓝褐色产物, 反应动力学较常规 TMB 底 物快 40% 左右, 适用于通过液体反应快速检测 HP 的情形如 ELI- SA 本产品为一步即用型溶液, 无需混合, 方便用户使用 主要成分 TMB 稳定的过氧化物 应用 可溶型单组分 TMB 显色试剂盒显色实验 1 2 3 4 5 注 : IgG-HP 二抗 ELISA 效价为 1:500-1000 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 316
八蛋白检测相增强型 HP-DAB 底物显色试剂盒 Enhanced HP-DAB Chromogenic Substrate Kit 操作简便 灵敏度高 关1. 二抗稀释 1:100; 2. 二抗稀释 1:300; 3. 二抗稀释 1:500; 4. 二抗稀释 1:1000; 5. 二抗稀释 1:2000 注 : IgG-HP 二抗 Western blot 效价为 1:400-500 增强型 HP-DAB 显色试剂盒应用于 Western blot 实验更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 应用范围 Western blot 沉淀 免疫组化 其它通过沉淀反应检测 HP 的应用 保存条件 2-8 避光保存 目录号包装价格 PA110 20 试剂 A:2 1.5 ml 20 试剂 B:2 1.5 ml 20 试剂 C:2 1.5 ml 1 HP 缓冲液 :60 ml 170 元 公司研究开发的增强型 HP-DAB 底物显色试剂盒中 含有检测辣根过氧化物酶 (HP) 的所有试剂, 适合于免疫组化 中的组织切片染色或 Western blot 杂交的 PVDF 膜 尼龙膜等的 染色 经免疫反应固定的辣根过氧化物酶可以催化底物 DAB 在 目的蛋白所在的位置转变为蓝紫色的化合物, 可根据颜色反应来鉴定辣根过氧化物酶的量, 进而确定目的蛋白的位置及含量 产品特点 应用 增强型 HP-DAB 显色试剂盒显色实验 1 2 3 4 5 该显色试剂盒由试剂 A:DAB 底物储存液 ; 试剂 B: 稳定的 过氧化物 ; 试剂 C: 增色溶液组成 显色过程中需要避光, 在显色后可拍照或扫描 使用 A B C 试剂显色后的免疫组织可用 Nuclear fast red 复染 应用举例 317
Pro-light HP 化学发光检测试剂 Pro-light HP Chemiluminesent Detection eagent 方便快捷 高灵敏度 主要成分溶液 A:Luminol 及特制发光增强剂溶液 B: 过氧化物及特制稳定剂 使用说明 将 A 液和 B 液同等体积混匀组成工作液即可使用 用量以充分覆盖膜或酶标板微孔为基准 ( 每 10 cm 2 膜需要大约 1 ml 工作液,96 孔酶标板每孔建议使用 100 µl 工作液 ) 自备试剂 含 0.05%-0.1%Tween-20 的 PBS Western Blot 膜封闭液 以合适的稀释比率稀释在封闭液或 PBS 中的一抗 以合适的稀释比率稀释在封闭液或 PBS 中的 HP 标记的二抗 保存条件 2-8 避光保存 Pro-Light HP 化学发光试剂盒, 灵敏度检测实验 目录号包装价格 PA112-01 PA112-02 试剂 A:25 ml 试剂 B:25 ml 试剂 A:2 25 ml 试剂 B:2 25 ml 280 元 520 元 Pro-Light HP 化学发光检测试剂是基于 Luminol 的化学发光底物试剂, 它由辣根过氧化物酶 (HP) 催化发生化学反应, 发出荧光, 结果可以通过 X 光片压片和其它显影技术展现或使用 Luminometer 检测 产品特点 灵敏度高 : 可检测 pico 级抗原 高信噪比, 背景干净 发光迅速, 持续时间达 1 h 可检测低丰度蛋白, 节省抗体 ( 一抗 1:2000-1:5000; 二抗 1:4000-1:10000) 稳定性好 :Pro-Light HP 化学发光检测试剂在 A 液和 B 液分开的情况下,4 避光可保存至少一年 应用范围 Western & Far-Western Blot ELISA Southern Blot Northern Blot Dot Blot 应用举例 Pro-Light HP 化学发光试剂盒应用于 Western blot 实验 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 318
八蛋白检测相Q&A 关A-1 所使用的第一抗体 第二抗体及显色方法不合适 选择适于目的蛋白的第一抗体 ; 适于第一抗体的第二抗体 ; 适于第二抗体的显色方法 A-2 封闭液中起封闭作用的物质过浓 降低起封闭作用物质的浓度 A-3 目的条带含量低于一抗的检测灵敏度 使用合适方法增加目的条带的含量 A-4 一抗的效价低或稀释倍数过大 增加一抗的浓度即减少稀释倍数 A-5 二抗的效价低 增加二抗的浓度即减少稀释倍数 A-6 显色剂底物浓度不足 增加显色剂的用量 A-7 一抗或二抗的作用时间不足 相应地增加作用时间, 保证在 37 作用的时间在 1h 以上 更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com Western Blot 常见问题分析 Q 转印膜上蛋白样品量少 A-1 蛋白质上样量不足或蛋白样品中目的蛋白的含量低 通过预实验确定最佳上样量, 保证目的蛋白的量在一抗检测范围内 Q 转膜效率低 A-1 蛋白质变性不充分 在转移缓冲液中加入 SDS, 利于蛋白质的变性和转移 A-2 转移过程中凝胶和转印膜之间存在气泡, 使蛋白转移不完全 操作中使用表面光滑的玻璃棒彻底地赶走凝胶和转印膜之间的气泡 A-4 转印膜过期或不适合 选用合适合格的转印膜 Q 显色过程中无条带出现 A-5 电压或电流过小 严格按照每种蛋白转移装置的要求进行操作 A-6 转印的时间过短 根据不同的转移装置保证转移的时间 A-7 蛋白转移过程中环境过热 应配备冷却装置, 保证凝胶和膜处于 20 以下 A-3 凝胶和转印膜两侧的滤纸过大互相接触, 造成电流直接从滤纸通过, 蛋白质没有转移的推动力 将凝胶和转印膜两侧的滤纸裁成与凝胶一般大小, 对齐滤纸 转印膜及两侧的滤纸的四边, 避免彼此长出边缘的直接接触 319
A-8 一抗或二抗后洗涤的时间和次数过长 减少洗涤次数和时间, 以 37,5-10 min, 三次为好, 可以酌情增减 A-9 显色剂失效 用二抗直接检测显色剂 Q 显色背景过高 A-1 封闭液中封闭物质不足 增加起封闭作用的物质的浓度 A-2 转印膜未能完全的被封闭液所覆盖, 膜上的非蛋白样品的部位暴露未能被封闭物质占据 注意使封闭液完全的覆盖转印膜的每一部份 A-3 封闭的时间和温度不够 37 下至少应轻轻振摇封闭 2 h 以上或 4 过夜 A-4 一抗为多克隆抗体, 与非目的条带也有作用 适当的减少一抗的浓度和作用的时间, 增加洗涤的次数 A-5 二抗浓度过高洗涤不彻底 降低二抗的浓度, 适当增加洗涤的时间 A-6 化学显色底物过多 按照说明适量加入显色剂各种成分 Q 条带信号弱 A-1 一抗或二抗浓度低 减少一抗及二抗的稀释倍数或增加作用的时间 A-7 二抗的显色时间过长 ( 如辣根过氧化物酶 ) 如果选用的是在短时间内褪色的二抗显色法应注意避光显色时间不宜太长, 显色后即拍照留图 A-2 目的条带量少于一抗检测的灵敏度 浓缩目的蛋白或增加上样用量 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 320
八蛋白检测相WorkBeads TM 40 Ni 应用于高通量 His-tag 重组蛋白分离纯化 性能参数 琼脂糖含量 (%) 7.4-7.8 金属离子载量 ( µeqv Ni 2+ /ml) 40-50 颗粒大小 (μm) 32-60 最大流速 (20 cm 柱床,5Bar 压力 ) >500 cm/h ph 稳定性 ph 2-14 化学稳定性 100% 甲醇,100% 乙 醇,8M 尿素,6M 盐 酸胍,30% 乙腈,70% 甲酸,30% 三氟乙酸 目录号产品名称包装价格 WM6-40 650 001 WorkBeads TM 40 Ni Bulk Media 25 ml 询价 WM6-40 650 003 WorkBeads TM 40 Ni Bulk Media 150 ml 询价 WM6-40 650 010 WorkBeads TM 40 Ni Bulk Media 1 L 询价 WorkBeads TM 40Ni 采用了专利技术的交联方法 该产品可以 承受高流速以及拥有极好的物理稳定性 琼脂糖为基质的填 料已经应用于工业生产几十年, 其与生物分子 ( 如蛋白质, 核酸, 以及糖类等 ) 相容性好并且特异性高 另外人工合成 材的基质存在许多微孔, 这会导致柱子微环境 ph 值的变化, 而琼脂糖基质没有微孔, 这极大的提高了柱子的分离效果 该填料采用溴醇方法活化, 在 Ni 离子和琼脂糖基质之间存在 一个间隔臂 Workbeads 40Ni 已经预螯合了 Ni, 因此用户只 需将琼脂糖装入柱中即可以直接进行重组蛋白的分离纯化 该填料温保存在 22% 的乙醇中, 经过冲洗后可以直接使用 产品特点 以琼脂糖为基质的填料, 在生物行业中广泛应用 非常高的蛋白载量, 可以高达 60 mg/ml 高特异性, 高纯度 高流速 >500 cm/h 关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 321
BabyBio Ni-NTA 预装柱 BabyBio Ni-NTA column 一种方便, 快速的 His 标签重组蛋白预装柱 产品包装 试剂盒组成 WM6-45-655-101 WM6-45-655-105 BabyBio 1 ml 5 ml Ni-NTA column 保存条件置于室温 (15-25 ) 干燥条件下 BabyBio Ni-NTA 为 Bioworks 公司隆重推出的新一代预装柱产品 品牌 目前包含的规格为 1 ml/5 ml 用于快速 方便地纯化 His 标签重组蛋白 BabyBio Ni-NTA 包含了专门为 His 标签蛋白纯化而研制的 Ni- NTA 琼脂糖基质 workbeads Workbeads 为交联的琼脂糖, 其物理性质非常稳定, 非常适合在高流速下进行蛋白纯化 产品特点 目录号 包装 价格 WM6-45-655-101 1 ml 询价 WM6-45-655-105 5 ml 询价 快速纯化 His 标签蛋白 更高的载量以及纯度 操作简单容易并且结果重复性高 八蛋白检测相关更多信息请参见 : www.tiangen.com 免费电话 : 800-990-6057 400-810-6057 E-mail: people@tiangen.com 322