Polyclonal Goat Anti-Rabbit IgG *HRP

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1 亲硫层析介质 (6FF) Thiophilic Adsorbent Beads 6FF 货号 BDTL BDTL BDTL BDTL 规格 50ml 250ml 1. 产品介绍本品可以快速有效地从血清 腹水或组织培养液中纯化抗体 本品的配体主要通过与抗体形成电子供体 - 受体复合物, 从而达到对抗体的选择性吸附 本品使用耐压的基质, 可以耐受最高 0.3 MPa 的压力, 更稳定, 可用于工业大规模抗体的纯化 亲硫层析介质 (6FF) 性能表 指标基质配体载量 性能高度交联的 6% 琼脂糖微球巯基乙醇 >20mg 人 lgg/ml 介质 粒径 (μm) 最大流速 0.3 MPa, 3 bar ph 稳定范围 3-11 储存缓冲液 含 20% 乙醇的 1 PBS 储存温度 纯化流程 2.1 Buffer 的准备所用水和 Buffer 在使用之前建议用 0.22μm 或 0.45 μm 滤膜过滤 Binding Buffer:50mM 磷酸盐,0.5M 硫酸钠,pH 8.0 Elution Buffer:50mM 磷酸盐,pH 8.0 Sample Buffer:50mM 磷酸盐,0.5M 硫酸钠,pH 8.0 Regeneration Buffer:50mM 磷酸盐,30% 异丙醇,pH 8.0

2 注 : 原则上高盐上样低盐洗脱 盐可以选择硫酸钠 硫酸钾和硫酸铵, 都可以促进本品对抗体的吸附 2.2 样品准备上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和 ph 值, 可以用结合 / 洗涤缓冲液对血清样品 腹水或细胞培养液稀释, 或者样品用结合 / 洗涤缓冲液透析 样品在上样前建议离心或用 0.22μm 或 0.45μm 滤膜过滤, 减少杂质, 提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子 2.3 样品纯化 将本品装入合适的层析柱, 层析用 5 倍柱体积的 Binding Buffer 进行平衡, 使层析介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下, 起到保护蛋白的作用 将样品加到平衡好的层析介质中 ( 保证目的蛋白与层析介质充分接触, 提高目的蛋白的回收率 ), 收集流出液 用 倍柱体积的 Binding Buffer 进行清洗, 去除非特异性吸附的杂蛋白, 收集洗杂液 使用 5-10 倍柱体积的 Elution Buffer, 收集洗脱液, 即目的蛋白组分 依次使用 3 倍柱体积的 Binding Buffer 和 5 倍柱体积的去离子水平衡层析介质, 最后再用 5 倍柱体积的 20% 的乙醇平衡, 然后保存在等体积的 20% 的乙醇中, 置于 4 保存, 防止层析介质被细菌污染 2.4 SDS-PAGE 检测将使用纯化产品得到的样品 ( 包括流出组分 洗杂组分和洗脱组分 ) 以及原始样品使用 SDS-PAGE 检测纯化效果 3. 层析介质清洗本品可以重复使用而无需再生, 但随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集, 往往造成流速和结合载量都下降, 严重影响柱子的性能, 这时需要对层析介质进行清洗 Elution Buffer 洗脱后用 5-10 倍柱体积的 Regeneration Buffer 清洗 5 倍柱体积的去离子水平衡填料 最后再用 5 倍柱体积的 20% 的乙醇平衡, 然后保存在等体积的 20% 的乙醇中, 置于 4 度保存, 防止填料被细菌污染

3 4. 可耐受试剂 试剂 可耐受浓度 β-mercaptoethanol CHAPS DTT, DTE EDTA, EGTA 10 mm Ethanol 30% Ethylene glycol HEPES Glycerol* 20%* Guanidinium Imidazole 200 mm (ph 条件下 ) KCl 500 mm MES 20 mm MOPS NaCl 1.0 M NP-40 Phosphate SDS Tris Urea * 上样中 Glycerol( 甘油 ), 样品缓冲液不推荐使用含甘油的缓冲液 5. 抗体纯化介质一览表 通用性抗体纯化产品 蛋白 A 层析介质 ( 普通型 高载量 特异性优良 ) BDTL BDTL BDTL BDTL ml 2 蛋白 A 重力预装柱套装 ( 内含 1 支 3ml 重力预装柱, 以及 3 次量的缓冲液 ) BDTL0001-K 套 蛋白 A 高速层析介质 (4FF) ( 高流速 高载量 特异性优良 耐压 ) BDTL BDTL BDTL

4 蛋白 A 高速层析介质 (4FF) 预装柱 ( 预装柱 高流速 高载量 配套 BioRad 和 GE 等公司机器 ) 蛋白 G 层析介质 ( 普通型 高载量 特异性优良 ) BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL ml+1 1ml 2 蛋白 G 重力预装柱套装 ( 内含 1 支 3ml 重力预装柱, 以及 3 次量的缓冲液 ) 蛋白 G 高速层析介质 (4FF) ( 高流速 高载量 特异性优良 耐压 ) 蛋白 G 高速层析介质 (4FF) 预装柱 ( 预装柱 高流速 高载量 配套 BioRad 和 GE 等公司机器 ) 蛋白 A/G 高速层析介质 (4FF) ( 用于 IP Co-IP 实验 ) 蛋白 L 层析介质 ( 结合更广泛来源及亚类的抗体 ) 单克隆抗体纯化产品蛋白 A 高速耐碱层析介质 (4FF) ( 耐碱 高流速 高载量 特异性优良 耐压 高稳定性 ) 蛋白 A 高速耐碱层析介质 (4FF) 预装柱 ( 预装柱 耐碱 高流速 高载量 耐压 高稳定性 配套 BioRad 和 GE 等公司机器 ) BDTL0003-K BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL 套 ml ml 2 200ml 500ml 1

5 BDTL BDTL ml+1 多克隆抗体纯化产品预活化层析介质 ( 抗原偶联专用 ) ( 预活化层析介质, 可以和氨基 巯基反应, 用来偶联蛋白 核酸 小分子等 适合偶联抗原纯化多克隆抗体 ) 亲硫层析介质 ( 快速从血清 腹水或组织培养液中纯化抗体 ) BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL BDTL ml 250ml

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