2016 年 第 1 期 ( 总 第 37 期 ) 2016 年 1 月 目 录 CONTENTS 01 国 际 研 究 动 态 1 2 国 际 信 息 动 态 24 科 技 项 目 研 究 进 展 33 主 要 研 究 成 果 主 办 单 位 : 北 京 三 元 种 业 科 技 股 份 有 限 公

2016 年 第 1 期 ( 总 第 37 期 ) 2016 年 1 月 目 录 CONTENTS 01 国 际 研 究 动 态 1 2 国 际 信 息 动 态 24 科 技 项 目 研 究 进 展 33 主 要 研 究 成 果 主 办 单 位 : 北 京 三 元 种 业 科 技 股 份 有 限 公 司 畜 牧 研 究 院 主 编 : 乔 绿 副 主 编 : 钟 景 田 责 任 编 辑 : 马 慧 阚 远 征 罗 维 真 王 桂 英 潘 学 峰 编 委 会 : 张 广 安 陈 华 林 李 锡 智 刘 林 周 海 深 马 翀 朱 玉 林 卢 纪 和 韩 广 文 黄 毅 贾 泽 颖 邓 露 芳 郭 亮 E-mail: syzyyjy@163.com

国 际 研 究 动 态 通 过 机 器 人 挤 奶 系 统 在 线 体 细 胞 数 监 测 奶 牛 乳 房 健 康 该 项 研 究 提 出 并 验 证 了 利 用 机 器 人 挤 奶 系 统 在 线 体 细 胞 计 数 (OCC) 对 奶 牛 乳 房 炎 进 行 检 测 和 监 控 的 模 型 研 究 人 员 首 先 对 OCC 数 据 进 行 过 滤 和 调 整, 并 与 奶 牛 信 息 相 结 合 处 理 后 的 数 据 被 传 送 到 一 个 时 间 序 列 模 型, 通 过 采 用 双 指 数 平 滑 法 监 测 奶 牛 OCC 的 水 平 和 趋 势 基 于 奶 牛 OCC 的 水 平 和 趋 势, 计 算 奶 牛 乳 房 炎 风 险 (EMR) 指 数,EMR 值 是 连 续 的 (0-1), 接 近 0 的 值 表 明 奶 牛 处 于 健 康 状 态, 而 该 数 值 接 近 于 1 则 表 明 奶 牛 具 有 患 乳 房 炎 的 高 风 险 最 后, 基 于 原 始 数 据 中 的 EMR 值, 确 定 下 一 次 采 集 OCC 样 本 的 时 间 ( 如 图 1) 估 测 的 EMR 值 主 要 是 用 于 发 出 两 种 类 型 的 警 报, 即 新 感 染 警 报 和 持 续 乳 腺 内 感 染 (IMI) 的 警 报 一 旦 EMR 值 超 出 阈 值, 新 感 染 的 警 报 就 会 发 出 IMI 警 报 则 定 义 为 任 何 一 次 EMR 值 超 出 阈 值 所 发 出 的 警 报, 故 IMI 警 报 也 包 含 新 感 染 警 报 如 果 两 次 警 报 发 出 的 时 间 超 过 8 天, 则 最 新 的 一 次 警 报 仍 属 于 新 感 染 警 报 最 后 研 究 人 员 在 不 同 的 取 样 间 隔 下 (24 h 36 h 48 h 72h) 就 商 业 牛 场 所 收 集 的 数 据 (6 个 牛 群,595927 个 乳 样 ) 使 用 时 间 窗 口 分 析 法 (time-window analysis) 对 该 检 测 模 型 进 行 了 评 估 所 记 录 的 乳 房 炎 处 理 时 间 被 用 作 黄 金 标 准 研 究 人 员 发 现, 机 器 人 挤 奶 系 统 在 线 体 细 胞 计 数 (OCC) 与 实 验 室 测 定 的 SCC 存 在 高 度 正 相 关, 相 关 系 数 R 2 均 值 为 0.86 乳 房 炎 处 理 组 的 EMR 值 显 著 高 于 未 处 理 组 使 用 新 感 染 警 报 监 测 乳 房 炎 病 例 的 比 例 在 28.0-43.1% 之 间, 并 且 通 过 固 定 取 样 方 案 对 牛 群 进 行 24h 监 测 时 此 比 例 最 高 使 用 IMI 警 报 监 测 乳 腺 炎 病 例 的 比 例 则 更 高, 在 54.6-89.0% 之 间, 且 使 用 所 有 可 用 的 检 测 方 法 时 此 比 例 均 最 高 当 所 有 的 抽 样 方 式 均 被 采 纳 时, 报 警 的 误 报 率 最 低, 约 每 1000 个 牛 奶 样 品 会 中 有 6.5 个 报 错 结 论 : 当 基 于 持 续 乳 腺 内 感 染 警 报 时, 系 统 内 的 原 始 数 据 结 合 时 间 序 列 模 型 在 检 测 和 监 测 奶 牛 乳 房 炎 上 是 有 效 的, 并 通 过 动 态 调 整 抽 样 方 案 可 以 得 到 几 乎 所 有 的 样 品 信 息 然 而, 当 基 于 新 感 染 警 报 时 结 果 是 不 可 取 图 1 在 线 体 细 胞 计 数 的 监 测 模 型 路 线 图 1

国 际 研 究 动 态 的, 可 能 是 因 为 所 使 用 的 乳 房 炎 黄 金 标 准 未 必 能 反 映 新 警 报 中 乳 房 炎 患 病 和 乳 房 内 感 染 病 例 图 2 整 个 试 验 期 内 (21 天 ), 利 用 乳 房 炎 的 处 理 时 间 ( 向 下 箭 头 ) 来 确 定 乳 腺 内 感 染 的 发 作 时 间 (2 天 ) 及 模 型 发 出 警 报 的 时 间, 即 向 上 的 箭 头 表 示 模 型 发 出 的 阳 性 (TP) 警 报 和 假 阳 性 (FP) 警 报 图 3 机 器 人 挤 奶 系 统 的 在 线 体 细 胞 计 数 (OCC) 与 实 验 室 测 定 的 SCC 的 相 关 性 分 析 2

国 际 研 究 动 态 图 4 在 线 体 细 胞 计 数 的 动 态 模 型 3

国 际 研 究 动 态 图 5 乳 腺 炎 治 疗 的 奶 牛 和 未 经 处 理 的 牛 每 周 新 感 染 (a) 和 IMI(b) 警 报 率 (%) L.P. Sørensen, M. Bjerring, P. Løvendahl. Monitoring individual cow udder health in automated milking systems using online somatic cell counts. J. Dairy Sci. 99:608 620. 4

国 际 研 究 动 态 人 为 探 视 对 饲 喂 不 同 水 平 代 乳 粉 犊 牛 生 长 性 能 的 影 响 科 研 人 员 选 取 36 头 新 生 荷 斯 坦 犊 牛 (28 头 来 自 于 大 学 牛 群,8 头 来 自 于 商 业 牧 场 ) 作 为 试 验 动 物, 采 用 2 2 因 子 完 全 区 组 设 计, 将 试 验 动 物 按 照 出 生 日 期 和 牛 群 随 机 分 为 4 种 处 理 :(1) 人 为 探 视 下 (C1) 饲 喂 常 规 代 乳 粉 (20% 粗 蛋 白,20% 脂 肪 );(2) 无 人 为 探 视 下 (C0) 饲 喂 常 规 代 乳 粉 ;(3) 人 为 探 视 下 (A1) 饲 喂 高 营 养 水 平 (28%CP,20% 脂 肪 ) 代 乳 粉 ;(4 ) 无 人 为 探 视 下 (A0) 饲 喂 高 营 养 水 平 代 乳 粉 常 规 处 理 组 犊 牛 从 2 日 龄 到 41 日 龄 每 天 饲 喂 454g 代 乳 粉 高 营 养 水 平 处 理 组 犊 牛 从 2 日 龄 到 8 日 龄 每 天 饲 喂 916g 代 乳 粉,9 日 龄 到 41 日 龄 每 天 饲 喂 1134g 代 乳 粉 研 究 人 员 利 用 不 透 明 的 帘 子 将 犊 牛 舍 分 开, 前 一 半 作 为 人 为 探 视 处 理, 后 一 半 为 无 人 探 视 处 理 A1 和 C1 人 为 探 视 处 理 组 犊 牛 从 试 验 第 1 天 至 第 56 天, 于 每 日 10:30 和 14:30 进 行 人 为 探 视, 此 时, 研 究 人 员 手 提 开 食 料 桶 进 入 犊 牛 舍, 一 边 用 手 搅 动 开 食 料, 一 边 召 唤 犊 牛, 如 果 犊 牛 站 立 不 动, 研 究 人 员 则 需 走 到 犊 牛 面 前, 将 装 有 开 食 料 的 桶 凑 近 犊 牛 的 鼻 子 和 嘴 唇, 让 每 一 个 犊 牛 都 接 受 到 视 觉 刺 激 及 开 食 料 的 刺 激 所 有 犊 牛 于 43 日 龄 之 前, 即 断 奶 前 饲 喂 犊 牛 代 乳 粉, 从 44 日 龄 到 49 日 龄 ( 断 奶 ) 饲 喂 代 乳 粉 的 量 减 半 接 下 来 的 一 周 对 犊 牛 进 行 跟 踪, 直 到 56 日 龄 ( 断 奶 后 ) 随 着 周 体 重 的 增 加 和 骨 骼 的 发 育 每 日 准 确 称 量 犊 牛 开 食 料 和 代 乳 粉 的 采 食 量 每 个 处 理 组 中 随 机 选 取 一 半 犊 牛 分 别 于 41 43 45 47 49 和 51 日 龄 通 过 静 脉 穿 刺 采 集 血 液 样 品, 测 定 血 糖 尿 素 非 酯 化 脂 肪 酸 和 皮 质 醇 浓 度 研 究 发 现, 在 断 奶 前 和 断 奶 阶 段, A0 处 理 和 A1 处 理 的 犊 牛 代 乳 粉 摄 入 量 较 多 而 开 食 料 的 采 食 量 较 少, 且 体 重 显 著 高 于 C0 和 C1 处 理 组 A0 和 A1 组 犊 牛 断 奶 前 平 均 日 增 重 (ADG) 较 高, 臀 部 较 高, 胸 围 较 大 总 的 来 说,A0 和 A1 组 犊 牛 的 体 重 肩 部 和 髋 部 的 高 度 以 及 胸 围 在 断 奶 阶 段 都 较 高 估 测 的 代 谢 能 (ME) 摄 入 量 (ADG/ME) 利 用 率 相 似 经 人 为 探 视 的 犊 牛 断 奶 前 葡 萄 糖 和 非 酯 化 脂 肪 酸 浓 度 更 高 在 断 奶 阶 段,A1 组 犊 牛 葡 萄 糖 浓 度 最 高,A0 组 犊 牛 葡 萄 糖 浓 度 最 低 人 为 探 视 的 犊 牛 在 断 奶 阶 段 皮 质 醇 有 升 高 趋 势 相 比 于 C0 和 C1 组 犊 牛,A0 和 A1 组 的 犊 牛 在 断 奶 后 血 糖 浓 度 低, 尿 素 和 皮 质 醇 浓 度 趋 于 升 高 高 营 养 饲 喂 水 平 的 犊 牛 血 中 皮 质 醇 浓 度 升 高, 说 明 此 时 犊 牛 由 于 去 除 代 乳 粉 较 常 规 饲 喂 犊 牛 产 生 了 更 大 的 应 激 饲 喂 高 营 养 水 平 代 乳 粉 的 犊 牛 较 饲 喂 传 统 代 乳 粉 的 犊 牛 消 耗 更 多 的 干 物 质 代 谢 能 和 水, 平 均 日 增 重 较 高 身 高 更 高 这 些 犊 牛 的 饲 料 效 率 以 干 物 质 基 础 表 达 更 高, 但 是 以 代 谢 能 为 基 础 表 达 与 常 规 组 5

国 际 研 究 动 态 相 比 无 显 著 性 差 异 总 之, 犊 牛 在 饲 喂 高 营 养 水 平 的 代 乳 粉 时 采 取 人 为 探 视 并 未 减 轻 断 奶 应 激 表 1 断 奶 前 期 犊 牛 的 生 长 和 采 食 数 据 (0-41 天 ) 表 2 断 奶 期 间 犊 牛 的 采 食 和 生 长 数 据 (42-49 天 ) 表 3 断 奶 后 犊 牛 的 采 食 和 生 长 数 据 (50-56 天 ) N.E. Guindon, N.T. Antaya, R.G. Cabral, N.L. Whitehouse, T.J. Earleywine, P.S. Erickson. Effects of human visitation on calf growth and performance of calves fed different milk replacer feeding levels. Journal of Dairy Science. 2015. 98(12):8952 8961. 6

国 际 研 究 动 态 缩 短 或 省 略 干 奶 期 对 荷 斯 坦 奶 牛 乳 中 酪 蛋 白 成 分 的 影 响 本 研 究 旨 在 评 估 缩 短 或 省 略 干 奶 期 对 荷 斯 坦 奶 牛 乳 中 酪 蛋 白 成 分 的 影 响 乳 蛋 白 的 主 要 成 分 是 酪 蛋 白 和 乳 清 蛋 白, 其 中 酪 蛋 白 含 量 约 占 乳 蛋 白 总 量 的 80%, 其 主 要 组 成 成 分 是 αs1- 酪 蛋 白 αs2- 酪 蛋 白 β- 酪 蛋 白 和 κ- 酪 蛋 白, 分 别 占 酪 蛋 白 总 量 的 38% 7% 48% 和 7%, 并 以 相 对 稳 定 的 比 例 聚 合 成 微 粒 - 酪 蛋 白 胶 束, 悬 浮 于 乳 清 中, 对 乳 品 品 质 有 很 大 的 影 响 在 该 项 研 究 中, 科 研 人 员 分 析 了 干 奶 期 分 别 为 0 30 60 天 的 90 头 奶 牛 的 乳 样 以 及 泌 乳 早 期 糖 原 或 脂 肪 的 合 成 率 分 别 于 产 前 6 2 周 和 产 后 2 6 12 周 采 集 乳 样, 通 过 毛 细 管 区 带 电 泳 分 析 乳 酪 蛋 白 (CN) 含 量, 利 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 κ- 酪 蛋 白 的 基 因 型 研 究 发 现, 干 奶 期 由 60 天 缩 短 到 30 天 时 αs1- 酪 蛋 白 含 量 降 低 3.8%, 而 αs2- 酪 蛋 白 水 平 增 加 5.5% 无 干 奶 期 的 奶 牛 在 产 前 6 到 2 周, 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 从 8% 增 加 到 12% 产 犊 后, 无 干 奶 期 奶 牛 的 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 (6.7%) 较 60 天 干 奶 期 奶 牛 的 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 (5.2%) 高 产 后 2 周 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 含 量 与 产 奶 量 呈 负 相 关, 表 明 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 与 乳 腺 上 皮 细 胞 的 生 产 力 下 降 相 关 在 泌 乳 早 期, 无 干 奶 期 奶 牛 乳 中 的 β- 酪 蛋 白 降 低 此 外,β- 酪 蛋 白 含 量 与 体 细 胞 数 呈 负 相 关, 即 β- 酪 蛋 白 含 量 越 低, 乳 中 体 细 胞 数 越 高, 可 能 是 由 蛋 白 分 解 所 产 生 的 总 之, 干 奶 期 从 60 天 缩 短 到 30 天 可 7

国 际 研 究 动 态 使 乳 酪 蛋 白 成 分 发 生 变 化, 但 不 会 影 响 到 牛 奶 的 加 工 特 性 省 略 干 奶 期 会 影 响 牛 奶 的 加 工 特 性, 这 可 能 是 由 于 κ- 酪 蛋 白 含 量 高, 或 蛋 白 分 解 活 性 高 的 原 因 图 1 围 产 期 内 κ-cn AA 基 因 型 奶 牛 (8) 或 AB (+ BB) 基 因 型 (7) 奶 牛 糖 基 化 (glyc) 和 非 糖 基 化 (non-glyc)κ-cn 组 成 的 变 化 图 2 产 后 糖 基 化 κ- 酪 蛋 白 含 量 与 产 奶 量 的 相 关 性 分 析 Ruben de Vries, Ariëtte van Knegsel, Monika Johansson, Helena Lindmark-Månsson, Toon van Hooijdonk, Kjell Holtenius, Kasper Hettinga. Effect of shortening or omitting the dry period of Holstein-Friesian cows on casein composition of milk. Journal of Dairy Science. 2015. 98(12):8678 8687. 8

国 际 研 究 动 态 在 学 习 如 何 放 牧 时 小 母 牛 受 益 于 经 验 丰 富 的 同 伴 加 拿 大 哥 伦 比 亚 大 学 研 究 人 员 指 出, 放 牧 对 于 多 数 奶 牛 场 而 言 仍 非 常 重 要, 但 第 一 次 放 牧 的 日 龄 与 犊 牛 出 生 月 份 断 奶 日 龄 和 农 场 管 理 息 息 相 关 无 论 日 龄 大 小, 小 母 牛 必 须 在 初 次 放 牧 时 就 要 学 会 如 何 吃 草 该 项 研 究 重 点 探 讨 是 否 与 经 验 丰 富 的 奶 牛 一 组 会 影 响 小 母 牛 放 牧 行 为 的 形 成 试 验 选 取 63 头 荷 斯 坦 母 牛 ( 平 均 月 龄 为 14.2±1.3 月 ; 体 重 546±60.7 千 克 ) 和 21 头 干 奶 期 荷 斯 坦 奶 牛 ( 泌 乳 期 2.6±0.8; 751±53.9 公 斤 ) 随 机 分 为 7 组, 每 组 12 头 奶 牛 ( 包 括 3 头 干 奶 期 奶 牛 和 9 头 小 母 牛 ), 每 组 分 为 两 个 亚 组 : 分 别 为 有 经 验 亚 组 (3 头 干 奶 牛 和 3 头 小 母 牛 ) 和 无 经 验 亚 组 (6 头 小 母 牛 ) 亚 组 引 入 不 同 围 场 中 的 牧 场, 与 其 它 牛 没 有 任 何 视 觉 接 触 研 究 发 现, 小 母 牛 第 一 次 啃 草 时 间 各 处 理 组 之 间 比 较 无 显 著 性 差 异 [ 经 验 组 :0:23 min:s(0:17-0:43); 无 经 验 组 0:40 min:s(0:35-0:46)] 然 而, 有 经 验 组 小 母 牛 在 开 始 吃 草 之 前 停 顿 时 间 更 短 [ 经 验 组 :0:47 min:s(0:28-00:52) 与 无 经 验 组 2:13 min:s(1:25-2:30)] 在 进 入 牧 场 后 一 小 时 之 内, 有 经 验 组 踩 踏 事 件 发 生 较 少 [ 有 经 验 组 :2.5 次 (1.25-4) 与 无 经 验 组 :6.5 次 (4-8)] 和 喊 叫 较 少 [ 有 经 验 组 :3.5 次 (1.25-5.75 ) 与 无 经 验 组 :7 次 (5-8.75)] 经 历 了 最 初 阶 段 后, 两 个 亚 组 的 个 体 开 始 正 常 放 牧 吃 草, 在 3 天 的 观 测 期 内, 各 处 理 组 间 放 牧 行 为 无 差 异 这 些 结 果 表 明, 与 有 经 验 的 奶 牛 分 配 到 一 组, 可 显 著 改 善 小 母 牛 进 入 牧 场 第 一 个 小 时 内 的 放 牧 行 为 J.H.C. Costa, W.G. Costa, D.M. Weary, L.C.P. Machado Filho, M.A.G. von Keyserlingk. Dairy heifers benefit from the presence of an experienced companion when learning how to graze. J. Dairy Sci. 99: 562 568. 9

国 际 研 究 动 态 日 粮 中 缬 氨 酸 与 赖 氨 酸 比 例 升 高 对 母 猪 代 谢 产 奶 量 和 仔 猪 生 长 的 影 响 该 项 研 究 旨 在 探 明 提 高 日 粮 中 缬 氨 酸 与 赖 氨 酸 比 例 对 育 有 超 过 12 只 仔 猪 的 泌 乳 母 猪 的 影 响 将 558 头 (1-4 胎 次 ) 分 娩 后 2 天 的 母 猪 随 机 分 配 到 6 个 日 粮 处 理 组, 此 时 仔 猪 数 量 统 一 为 14 头 分 析 日 粮 成 分 表 明 总 日 粮 缬 氨 酸 与 赖 氨 酸 之 比 分 别 为 :0.84 0.86 0.88 0.90 0.95 0.99:1 在 妊 娠 108 天 产 仔 后 2 天 25 天 ( 断 奶 ) 记 录 全 部 558 头 母 猪 的 体 重 背 膘 厚 (BF) 和 窝 仔 重 第 二 次 抽 样 72 头 母 猪, 做 额 外 的 测 样,17 天 时 测 体 重 和 背 膘 厚,10 天 和 17 天 时 测 窝 仔 猪 重, 每 周 采 集 血 样 和 尿 样 窝 产 仔 数 不 受 日 粮 缬 氨 酸 : 赖 氨 酸 比 值 影 响 (p=0.23), 母 猪 平 均 断 奶 仔 猪 数 量 为 13.0± 1.1 头 仔 猪 平 均 日 增 重 (2.93± 0.53kg/d, p=0.84) 仔 猪 断 奶 重 ( p=0.67) 平 均 产 奶 量 (11.3±1.4kg/d,p=0.49) 乳 脂 肪 含 量 (p=0.57) 蛋 白 含 量 (p=0.18) 乳 糖 含 量 (p=0.20) 均 不 受 缬 氨 酸 : 赖 氨 酸 比 值 影 响 提 高 日 粮 中 缬 氨 酸 : 赖 氨 酸 比 值 可 以 增 加 乳 中 缬 氨 酸 (P < 0.05) 和 异 亮 氨 酸 浓 度 (P < 0.01) 母 猪 体 重 和 背 膘 厚 的 改 变 对 于 2-17 天 17-25 天 和 2-25 天 的 所 有 母 猪 都 是 相 似 的 在 哺 乳 期 间, 母 猪 平 均 体 重 减 少 22.1±12.7kg, 背 膘 厚 减 少 2.9±1.7mm 血 浆 葡 萄 糖 (p=0.26) 乳 酸 (p=0.95) 尿 素 氮 (p=0.84) 非 酯 化 脂 肪 酸 (p=0.24), 肌 酐 (p=0.42) 全 血 中 尿 肌 酐 浓 度 和 氨 基 酸 浓 度 不 受 日 粮 中 缬 氨 酸 : 赖 氨 酸 比 值 影 响 总 之, 增 加 日 粮 总 缬 氨 酸 : 赖 氨 酸 比 值 到 0.84:1 以 上, 对 哺 乳 期 母 猪 代 谢 和 仔 猪 生 产 性 能 没 有 影 响 A. V. Strathe, T. S. Bruun, J.-E. Zerrahn, A.-H. Tauson and C. F. Hansen. The effect of increasing the dietary valineto-lysine ratio on sow metabolism, milk production, and litter growth. Journal of Animal Science. 2016. 94:155-164. 10

国 际 研 究 动 态 饲 喂 的 玉 米 种 类 和 屠 宰 前 禁 食 时 间 对 断 奶 仔 猪 生 长 和 血 浆 指 标 的 影 响 研 究 人 员 采 用 2 2 析 因 实 验 来 评 估 日 粮 玉 米 种 类 ( 糯 玉 米 WC 与 非 糯 玉 米 NC) 和 屠 宰 前 禁 食 时 间 (2 小 时 与 12-16 小 时 ) 对 断 奶 仔 猪 的 生 长 和 血 浆 指 标 的 影 响 24 头 杂 交 去 势 公 猪 分 为 4 个 处 理 组, 每 个 处 理 6 个 重 复, 每 个 重 复 1 头 猪 猪 只 饲 养 于 代 谢 笼 内 与 非 糯 玉 米 相 比, 糯 玉 米 含 脂 肪 量 少, 淀 粉 酶 : 支 链 淀 粉 比 例 低, 粗 蛋 白 含 量 高, 淀 粉 含 量 高 饲 喂 WC 日 粮 的 猪 空 肠 食 糜 ph 较 饲 喂 NC 日 粮 的 猪 低 (P < 0.05) 饲 喂 WC 日 粮 猪 空 肠 和 回 肠 粘 膜 麦 芽 糖 酶 活 性 (P < 0.01) 回 肠 粘 膜 蔗 糖 酶 活 性 (P < 0.01) 胰 腺 和 空 肠 食 糜 淀 粉 酶 活 性 (P < 0.05) 高 于 饲 喂 NC 日 粮 的 猪 但 WC 组 猪 日 粮 淀 粉 和 粗 蛋 白 的 总 表 观 消 化 率 (TTAD) 较 低 (P < 0.05) 在 第 二 周, 采 食 NC 日 粮 提 高 了 平 均 日 增 重 (ADG) 和 平 均 日 采 食 量 (ADFI), 但 对 整 个 试 验 期 的 平 均 日 增 重 和 料 重 比 无 影 响 (F:G; P = 0.077) 与 饲 喂 NC 日 粮 猪 相 比, 饲 喂 WC 日 粮 猪 血 糖 浓 度 较 高 (P < 0.01) 肝 门 静 脉 中 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 浓 度 (HDL-C; P < 0.01) 较 低 与 禁 食 12 小 时 组 相 比, 禁 食 2 小 时 后 屠 宰 降 低 了 猪 只 空 肠 和 回 肠 食 糜 ph(p < 0.01) 缩 短 屠 宰 前 禁 食 时 间 引 起 猪 十 二 指 肠 (P < 0.01) 空 肠 (P< 0.05) 绒 毛 高 度 增 加, 十 二 指 肠 的 绒 毛 高 度 与 隐 窝 深 度 比 值 增 加 (P< 0.05) 缩 短 屠 宰 前 禁 食 时 间 导 致 血 糖 浓 度 升 高 (P< 0.05) 和 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 与 低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 比 例 升 高 (p<0.05), 而 肝 门 静 脉 中 低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 浓 度 降 低 本 试 验 结 果 表 明, 尽 管 WC 组 和 NC 组 的 生 产 性 能 相 同, 但 WC 组 的 葡 萄 糖 浓 度 更 高 肝 门 静 脉 的 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 更 低, 且 屠 宰 前 禁 食 时 间 对 断 奶 猪 的 血 浆 指 数 和 小 肠 组 织 形 态 有 影 响 C. Yang, J. He, D. W. Chen, B. Yu, J. Yu, X. B. Mao, K. Y. Yang and Z. C. Yuan. Effects of corn type and fasting time before slaughter on growth and plasma index in weaning pigs. Journal of Animal Science. 2016. 94:106-116. 11

国 际 信 息 动 态 研 究 发 现 犊 牛 去 角 后 会 出 现 抑 郁 和 焦 虑 哥 伦 比 亚 大 学 的 最 新 研 究 表 明, 犊 牛 在 去 角 后 会 出 现 抑 郁 和 焦 虑 科 研 人 员 首 先 使 用 认 知 测 试 去 探 明 除 人 类 以 外 的 其 它 物 种 对 疼 痛 的 情 绪 反 应, 研 究 发 现 犊 牛 在 去 角 后 表 现 出 悲 观 情 绪 由 此 判 断 犊 牛 不 仅 仅 是 有 感 官 反 应 的 动 物, 他 们 还 拥 有 认 知 判 断 能 力 牛 场 管 理 人 员 通 常 使 用 化 学 粘 贴 或 热 铁 给 犊 牛 去 角, 以 降 低 牛 场 工 作 人 员 和 其 它 动 物 受 伤 的 风 险 之 前 的 研 究 表 明, 去 角 过 程 可 引 起 动 物 行 为 和 生 理 反 应, 但 未 发 现 对 其 情 感 方 面 有 影 响 哥 伦 比 亚 大 学 乳 品 研 究 中 心 利 用 三 个 星 期 训 练 17 头 犊 牛 执 行 一 个 简 单 的 任 务, 他 们 依 据 屏 幕 上 出 现 的 颜 色, 决 定 是 否 接 近 犊 牛 笼 内 的 视 频 监 视 器 用 牛 奶 作 为 奖 励, 一 半 犊 牛 被 训 练 当 屏 幕 显 示 器 为 红 色 时, 接 近 显 示 器, 当 屏 幕 为 白 色 时, 拒 绝 接 近 显 示 器 另 一 半 则 相 反 犊 牛 很 快 就 学 会 了 辨 别 两 种 颜 色, 接 下 来 研 究 人 员 又 引 入 第 三 个 颜 色, 粉 色, 这 种 颜 色 可 能 是 积 极 的 也 可 能 是 消 极 的 研 究 人 员 观 察 犊 牛 在 用 电 烙 铁 去 角 前 后 30 天 内 的 情 感 变 化 小 犊 牛 在 接 近 红 色 或 白 色 屏 幕 的 方 式 并 未 发 生 改 变, 但 对 于 接 近 模 糊 的 粉 红 色 屏 幕 犊 牛 则 不 会 遵 循 常 规 的 训 练, 会 减 少 对 这 个 模 糊 颜 色 作 出 回 应, 以 至 于 最 后 得 不 到 牛 奶 奖 励 研 究 认 为, 犊 牛 所 表 现 出 的 这 种 悲 观 的 反 应 显 示 了 小 牛 正 在 经 历 负 面 情 绪 人 文 学 家 指 出 情 绪 可 以 影 响 我 们 对 模 糊 信 息 的 解 读 和 判 断, 这 与 犊 牛 在 去 角 后 所 表 现 出 的 反 应 相 类 似 研 究 学 者 希 望 牛 场 管 理 人 员 可 以 在 牛 只 去 角 前 使 用 镇 静 剂 和 麻 醉 剂, 在 术 后 使 用 止 痛 药 目 前, 许 多 牛 场 兽 医 在 整 个 去 角 过 程 中 确 实 给 犊 牛 提 供 止 痛 药, 但 犊 牛 经 历 痛 苦 之 后 通 常 对 其 不 做 任 何 治 疗 因 此 在 该 项 研 究 中, 经 过 训 练 后 的 犊 牛 在 去 角 前 服 用 镇 静 剂 和 麻 醉 剂, 但 去 角 后 不 使 用 止 痛 药 因 为 大 多 12

国 际 信 息 动 态 数 牛 场 管 理 者 以 时 间 和 成 本 为 由 对 犊 牛 并 不 提 供 去 角 后 缓 解 疼 痛 处 理 其 他 科 研 人 员 也 使 用 相 同 的 实 验 来 研 究 犊 牛 与 母 亲 分 开 对 其 产 生 的 影 响, 并 调 查 将 犊 牛 与 其 他 小 伙 伴 安 置 在 一 起 的 潜 在 益 处 之 前 研 究 已 经 证 实, 断 奶 前 犊 牛 群 平 均 日 增 重 每 增 加 1kg, 在 它 们 的 第 一 个 泌 乳 期 产 奶 量 就 会 增 加 1113kg(Soberon 等,2012) 当 小 犊 牛 与 其 他 同 龄 小 伙 伴 一 起 饲 养 时, 犊 牛 的 负 面 情 绪 减 少, 断 奶 时 也 无 明 显 的 应 激, 且 犊 牛 在 断 奶 前 和 断 奶 期 间 的 生 长 性 能 明 显 得 到 改 善 增 殖 乳 腺 干 细 胞 提 高 奶 牛 产 奶 量 的 新 策 略 奶 牛 产 奶 量 受 乳 腺 上 皮 细 胞 数 目 和 每 个 细 胞 分 泌 活 性 的 影 响 乳 腺 上 皮 细 胞 的 分 化 状 态 决 定 其 分 泌 活 性 低 分 化 的 乳 腺 上 皮 细 胞 通 常 不 分 泌 乳 汁, 而 中 间 和 完 全 分 化 的 细 胞 可 以 分 泌 虽 然 激 素, 如 雌 激 素 孕 激 素 和 催 乳 素 影 响 这 些 细 胞 的 分 化, 但 其 再 生 取 决 于 乳 腺 干 细 胞 (MaSCs) 的 活 性 MaSCs 属 于 多 能 成 体 干 细 胞, 具 有 自 我 更 新 和 分 化 为 其 它 类 型 细 胞 的 能 力 不 同 发 育 时 期 的 动 物 乳 腺 中 都 存 在 一 定 比 例 的 干 细 胞, 其 主 要 作 用 是 增 殖, 以 保 证 乳 腺 的 正 常 发 育 和 维 持 组 织 稳 态 MaSCs 在 奶 牛 乳 腺 发 育 中 的 作 用 MaSCs 及 其 增 殖 在 牛 妊 娠 泌 乳 和 泌 乳 衰 退 周 期 中 乳 腺 正 常 生 长 分 化 和 再 生 具 有 重 要 作 用 MaSCs 可 以 分 化 为 各 级 祖 细 胞 和 终 末 细 胞 ( 腺 上 皮 细 胞 和 肌 上 皮 细 胞 ) 腺 上 皮 细 胞 和 肌 上 皮 细 胞 分 别 发 育 成 乳 腺 的 腺 泡 和 导 管, 完 成 乳 汁 的 生 成 和 排 泄 腺 泡 和 导 管 是 构 成 乳 腺 实 质 的 主 要 部 分, 乳 腺 结 构 常 处 于 变 化 过 程 中, 其 基 本 特 征 与 动 物 年 龄 怀 孕 哺 乳 有 直 接 关 系 犊 牛 出 生 后 乳 腺 未 发 育, 到 初 情 期 时,MaSCs 活 性 增 加, 引 起 导 管 生 长, 形 成 分 支 复 杂 的 细 小 导 管 系 统, 乳 房 体 积 开 始 膨 大 在 以 后 的 发 情 周 期 中, 继 续 发 育 牛 妊 娠 后, 乳 腺 组 织 生 长 比 较 迅 速, 乳 腺 导 管 数 量 继 续 增 加, 并 且 在 每 个 导 管 末 端 开 始 形 成 没 有 分 泌 腔 的 腺 泡 ; 在 妊 娠 中 期, 腺 泡 逐 渐 出 现 分 泌 腔, 腺 泡 和 导 管 体 积 不 断 增 大, 妊 娠 后 期 腺 泡 的 分 泌 上 皮 ( 乳 腺 上 皮 细 胞 ) 开 始 具 有 分 泌 功 能 分 娩 前, 腺 泡 分 泌 初 乳 ; 分 娩 后, 乳 腺 开 始 正 常 泌 乳 经 过 一 段 时 间 的 泌 乳 活 动 后,MaSCs 活 性 降 低, 乳 腺 开 始 13

国 际 信 息 动 态 渐 进 性 回 缩, 腺 泡 体 积 重 新 缩 小, 分 泌 腔 逐 渐 消 失, 细 小 乳 导 管 重 新 萎 缩, 最 终 导 致 泌 乳 停 止, 进 入 干 奶 期 ( 通 常 为 50~60d) 在 干 奶 期 内, 乳 腺 组 织 能 最 大 限 度 地 重 新 形 成 奶 牛 一 般 在 第 6~8 个 泌 乳 期 中, 乳 腺 的 发 育 达 到 最 大 程 度, 泌 乳 量 也 达 到 最 高 峰 以 后 随 年 龄 增 大, 泌 乳 量 逐 年 降 低 乳 腺 生 长 发 育 呈 现 明 显 的 周 期 性 变 化, 这 些 变 化 与 性 周 期 中 卵 巢 所 分 泌 激 素 ( 主 要 是 雌 激 素 和 孕 激 素 ) 调 节 有 关 MaSCs 的 扩 增 方 法 MaSCs 扩 增 可 以 增 加 细 胞 更 新 增 强 组 织 再 生 和 乳 腺 上 皮 细 胞 的 分 泌 活 性 内 源 性 ( 包 括 雌 激 素 孕 激 素 和 生 长 激 素 ) 和 外 源 性 ( 包 括 牛 生 长 激 素, 黄 苷 和 肌 苷 ) 物 质 能 扩 增 MaSCs 和 乳 腺 上 皮 细 胞 数 目 具 体 方 法 如 下 :(1) 使 用 黄 嘌 呤 核 苷 和 肌 苷 ;(2) 使 用 生 长 激 素 和 雌 激 素 : 在 发 育 期, 雌 激 素 和 生 长 激 素 会 引 起 乳 腺 树 中 的 导 管 增 长 因 此, 雌 激 素 和 生 长 激 素 可 能 会 促 使 导 管 中 MaSCs 的 增 殖 (3) 使 用 黄 体 酮 和 孕 激 素 ;(4) 使 用 黄 嘌 呤, 次 黄 嘌 呤 : 黄 苷 已 被 证 明 能 增 加 乳 腺 上 皮 细 胞 的 增 殖 上 皮 细 胞 分 泌 活 性 的 增 强 会 增 加 奶 牛 泌 乳 早 期 到 哺 乳 期 峰 值 的 奶 产 量 然 而, 这 一 时 期 奶 产 量 下 降 的 主 要 原 因 是 由 于 未 孕 牛 细 胞 凋 亡 增 加 引 起 上 皮 细 胞 数 量 减 少 造 成 的, 虽 然 每 个 细 胞 分 泌 活 性 没 有 显 著 改 变 黄 苷 能 使 泌 乳 后 期 细 胞 凋 亡 率 减 弱, 这 将 有 可 能 导 致 分 泌 细 胞 可 用 性 增 加, 从 而 延 长 了 泌 乳 时 间 加 快 乳 腺 上 皮 细 胞 更 新, 缩 短 干 奶 期 干 奶 期 对 乳 腺 上 皮 细 胞 再 生 非 常 重 要 在 这 个 时 期, 新 上 皮 细 胞 取 代 丧 失 产 奶 能 力 的 衰 老 细 胞, 为 下 一 个 哺 乳 期 做 准 备 如 果 能 在 干 奶 期 提 高 MaSCs 的 活 性, 加 快 细 胞 更 新, 那 么 干 奶 期 越 短, 牛 泌 乳 总 量 越 多 因 此, 缩 短 干 奶 期 是 增 加 泌 乳 效 率 的 另 一 种 方 法 研 究 表 明, 在 牛 生 长 激 素 作 用 下, 缩 短 干 奶 期 (30d) 或 省 略 干 奶 期, 在 下 一 泌 乳 期 中 没 有 改 变 经 产 奶 牛 的 奶 产 量 对 哺 乳 期 荷 斯 坦 奶 牛 使 用 牛 生 长 激 素 后, 增 殖 标 志 物 的 表 达 比 对 照 组 增 加 了 3 倍, 这 就 证 明 牛 生 长 激 素 提 高 了 乳 腺 上 皮 细 胞 的 更 新 能 力 换 句 话 说, 对 于 乳 腺 上 皮 细 胞 可 再 生 的 奶 牛,60d 的 干 奶 期 缩 短 到 30d 没 有 对 下 一 哺 乳 期 产 奶 量 产 生 不 利 影 响 提 高 泌 乳 动 物 的 产 奶 量 一 直 是 乳 腺 干 细 胞 生 物 学 家 的 最 终 目 标 通 过 激 素 ( 如 孕 酮 雌 激 素 生 长 激 素 黄 苷 或 肌 苷 ) 疗 法 增 殖 MaSCs, 可 能 会 增 加 14

国 际 信 息 动 态 细 胞 更 新 或 哺 乳 期 的 持 续 性, 进 而 提 高 奶 牛 泌 乳 量 进 一 步 研 究 MaSCs 的 生 物 学 特 性 以 及 它 们 在 乳 腺 形 成 组 织 转 化 和 平 衡 中 的 作 用 很 有 必 要 此 外 在 奶 牛 不 同 的 泌 乳 阶 段,MaSCs 发 挥 的 作 用 有 何 不 同, 如 何 在 不 同 的 泌 乳 阶 段 采 用 不 同 的 策 略 ( 使 用 激 素 药 物 等 措 施 ) 调 动 和 调 节 MaSCs 的 活 性, 使 之 达 到 效 益 ( 泌 乳 量 ) 最 大 化, 是 未 来 的 主 要 研 究 方 向 沙 床 在 奶 牛 场 应 用 的 要 点 奶 牛 每 天 用 于 采 食 的 时 间 为 4.5-5 h, 颈 枷 ( 用 于 治 疗 输 精 ) 的 时 间 小 于 等 于 1.5 h, 社 交 活 动 的 时 间 约 为 1.5 h, 喝 水 的 时 间 约 为 1h, 挤 奶 时 间 小 于 等 于 3 h, 而 躺 卧 的 时 间 则 大 于 等 于 12 h, 由 于 奶 牛 需 要 长 期 躺 卧, 所 以 卧 床 的 好 坏 对 奶 牛 的 影 响 很 大 目 前 卧 床 垫 料 的 类 型 主 要 有 橡 胶 垫 木 屑 干 草 和 沙 子, 每 种 垫 料 都 有 其 优 缺 点, 但 越 来 越 多 的 奶 牛 养 殖 者 认 为 深 沙 床 是 奶 牛 最 理 想 的 卧 床 m, 卧 床 分 隔 栏 的 高 度 约 为 1.2 m, 挡 胸 板 高 度 一 般 高 于 后 缘 挡 沙 板 8-10 cm 牛 床 后 缘 的 挡 沙 板 高 度 为 15-20 cm, 且 上 缘 圆 钝, 约 倾 向 牛 床 内 下 侧, 沙 子 下 面 的 土 或 其 它 填 充 物 至 少 在 挡 胸 板 上 缘 以 下 15-20 cm, 这 样 可 以 至 少 保 证 沙 子 的 厚 度 在 15 cm 以 上 一 般 沙 床 的 水 平 面 会 低 于 后 缘 挡 沙 板 上 缘 2.5-5 cm 图 1 是 常 见 的 沙 床 示 意 图 沙 床 应 用 的 技 术 要 点 ( 1 ) 沙 床 主 要 适 合 于 散 栏 式 饲 养 的 牛 舍, 栓 系 式 牛 舍 由 于 其 维 护 和 清 理 不 便 很 少 使 用 沙 床 正 常 情 况 下, 成 乳 牛 头 对 头 式 的 卧 栏, 单 个 卧 床 的 长 度 应 该 在 2.4 m 左 右, 宽 度 在 1.1-1.2 15

国 际 信 息 动 态 或 奶 杯 中 的 沙 子, 以 免 引 起 设 备 的 故 障 和 乳 质 量 的 降 低 (2) 沙 床 需 要 定 期 维 护, 每 次 躺 卧 之 后 沙 床 表 面 都 会 下 陷, 所 以 都 要 经 常 添 加 沙 沙 床 每 月 需 要 彻 底 清 理 一 次, 每 周 添 加 一 次, 每 次 加 完 之 后, 厚 度 在 15-20 cm 机 器 加 沙 不 会 很 均 匀, 需 要 人 工 进 行 后 续 处 理, 将 其 尽 量 整 平 均 匀 分 布 填 充 沙 子, 可 以 用 专 业 的 添 沙 机 械, 这 就 需 要 过 道 足 够 宽, 每 头 牛 每 年 需 要 3-4 t 的 沙 子 如 沙 子 铺 放 在 橡 胶 垫 上, 要 注 意 沙 子 不 能 太 薄, 否 则 就 形 成 了 砂 纸, 摩 擦 力 增 大, 损 害 奶 牛 皮 肤 和 关 节 (3) 沙 子 的 选 择 关 乎 到 沙 床 的 舒 适 程 度, 在 选 购 沙 子 时, 应 注 意 以 下 几 点 : 首 先, 沙 子 的 引 流 要 好, 奶 牛 会 经 常 在 牛 床 上 排 尿, 好 的 沙 子 可 以 尽 快 让 这 些 尿 水 渗 走, 从 而 保 持 沙 床 表 面 的 干 燥 ; 其 次, 有 机 物 含 量 尽 可 能 少, 否 则 会 给 病 原 微 生 物 提 供 繁 殖 的 机 会 泥 土 或 粘 土 的 含 量 小 于 2%, 颗 粒 尺 寸 在 0.1-1 mm, 粗 沙 的 摩 擦 力 太 大, 会 损 伤 奶 牛 的 皮 肤 及 被 毛 (4) 沙 子 会 附 着 在 乳 房 上, 当 挤 奶 时 需 要 清 理 干 净, 可 用 干 燥 的 小 毛 巾 擦, 一 牛 一 巾, 挤 奶 间 隔 期 间 要 洗 净 并 烘 干 同 时 要 定 期 清 理 挤 奶 机 器 管 道 沙 床 的 使 用 效 果 (1) 可 以 降 低 乳 房 炎 的 发 病 率 由 于 沙 子 属 于 无 机 垫 料, 据 分 析, 沙 子 中 的 有 机 物 含 量 小 于 等 于 0.5%, 使 用 沙 子 可 以 减 少 致 病 菌 滋 生 的 机 会 研 究 表 明, 使 用 沙 床 后, 大 肠 杆 菌 和 环 境 性 链 球 菌 引 起 的 乳 房 炎 数 量 减 少, 牛 奶 体 细 胞 数 下 降 (2) 可 以 减 少 肢 蹄 病 的 发 病 率 奶 牛 喜 欢 躺 卧 于 柔 软 的 地 面, 沙 床 较 为 柔 软, 柔 软 的 沙 床 可 以 避 免 奶 牛 前 后 肢 蹄 在 起 卧 时 受 到 损 伤 使 用 沙 床, 后 踝 关 节 肿 胀 以 及 膝 关 节 损 伤 的 牛 只 数 量 减 少 了, 肢 蹄 病 的 发 病 率 也 因 此 而 降 低 舒 适 的 卧 床, 牛 床 的 使 用 率 很 高 (3) 可 以 提 高 奶 牛 的 繁 殖 性 能 研 究 表 明, 使 用 沙 床 的 牛 舍, 牛 只 在 过 道 上 行 走 时 打 滑 的 几 率 减 少, 发 情 表 现 明 显, 增 加 了 受 胎 的 机 会, 提 高 了 繁 殖 性 能 牛 只 休 息 好 了, 身 体 健 康, 使 用 年 限 也 得 到 了 提 高 (4) 可 以 增 加 奶 产 量 奶 牛 每 生 产 1 L 牛 奶, 就 有 500 L 的 血 液 流 经 乳 房 当 奶 牛 站 立 时, 每 小 时 有 228 L 的 血 液 流 入 乳 房 ; 当 奶 牛 躺 卧 时, 每 小 时 有 342 L 的 血 液 流 入 乳 房 研 究 表 明 沙 床 可 以 增 加 奶 牛 一 天 内 躺 卧 的 时 间, 躺 卧 的 奶 牛 反 刍 次 数 比 站 立 的 要 多, 因 此 奶 牛 的 奶 产 量 可 以 得 到 提 高 16

国 际 信 息 动 态 上 海 兽 医 所 发 现 抗 猪 蓝 耳 病 重 要 细 胞 分 子 从 中 国 农 业 科 学 院 上 海 兽 医 研 究 所 获 悉, 童 光 志 研 究 员 领 衔 的 猪 病 毒 性 繁 殖 障 碍 综 合 症 研 究 团 队 最 新 研 究 发 现 细 胞 分 子 微 小 RNA(miR-130b) 在 动 物 体 内 外 均 可 有 效 抑 制 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 (PRRSV) 的 感 染 和 复 制 相 关 研 究 成 果 发 表 在 著 名 国 际 期 刊 科 学 报 告 (Scientific Reports) 上 据 悉, 猪 繁 殖 与 呼 吸 障 碍 综 合 征 (PRRS) 是 由 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 (PRRSV) 引 起 的 一 种 严 重 危 害 我 国 养 猪 业 的 疾 病, 每 年 造 成 巨 大 的 经 济 损 失, 临 床 可 引 起 母 猪 流 产 和 仔 猪 呼 吸 困 难 发 病 猪 耳 朵 发 绀, 呈 蓝 紫 色, 因 而 常 被 称 为 蓝 耳 病 近 年 来, 微 小 RNA 被 证 明 是 一 类 可 以 调 控 病 毒 复 制 的 分 子, 已 有 报 道 表 明 其 是 机 体 天 然 抗 病 毒 的 新 防 线, 具 备 开 发 成 小 分 子 抗 病 毒 药 物 的 潜 力 为 了 探 索 宿 主 微 小 RNA 是 否 可 以 影 响 PRRSV, 童 光 志 研 究 团 队 通 过 生 物 信 息 学 预 测 将 目 光 聚 焦 到 mir- 130 家 族 上 研 究 发 现, mir-130 家 族 可 显 著 抑 制 北 美 型 PRRSV 在 MARC-145 细 胞 和 PAM 细 胞 上 的 复 制, 且 尤 以 mir-130b 的 作 用 最 为 显 著 更 为 可 喜 的 是, 动 物 体 内 试 验 证 明 对 仔 猪 滴 鼻 给 药 mir-130b 后 再 攻 毒, 可 以 显 著 地 缓 解 高 致 病 性 蓝 耳 病 的 临 床 症 状 和 病 毒 血 症, 同 时 形 成 部 分 保 护 的 效 果 这 项 研 究 成 果 揭 示 了 mir-130 家 族 在 抑 制 PRRSV 感 染 和 复 制 中 的 潜 在 价 值, 为 临 床 应 用 微 小 RNA 进 行 抗 病 毒 治 疗 提 供 了 十 分 宝 贵 的 数 据, 弥 补 了 该 方 面 研 究 的 空 白 17

国 际 信 息 动 态 养 猪 业 面 临 的 霉 菌 毒 素 威 胁 及 其 解 决 方 案 人 们 已 普 遍 认 识 到, 饲 料 原 料 中 的 霉 菌 毒 素 会 对 猪 只 健 康 和 生 产 性 能 造 成 严 重 威 胁 事 实 上, 在 所 有 家 畜 中, 猪 是 最 容 易 受 到 霉 菌 毒 素 危 害 的, 已 知 镰 刀 菌 产 生 的 伏 马 菌 素 (FUM) 和 玉 米 赤 霉 烯 酮 (ZON) 可 对 猪 产 生 急 性 毒 性 然 而, 直 到 最 近, 霉 菌 毒 素 对 不 同 动 物 的 特 异 性 威 胁 及 其 潜 在 的 解 决 方 案 在 很 大 程 度 上 是 被 忽 视 的 这 样 一 来, 研 发 添 加 到 饲 料 中 的 吸 附 剂 和 失 活 剂 主 要 集 中 在 一 种 通 用 策 略 上 然 而, 随 着 针 对 特 定 种 类 的 霉 菌 毒 素 的 解 决 方 案 的 出 现 以 及 不 同 动 物 种 类 的 生 理 差 异, 这 种 情 况 现 在 已 有 所 转 变 区 分 危 害 严 重 程 度 影 响 猪 只 健 康 和 生 产 性 能 的 最 大 风 险 来 自 于 饲 料 原 料 中 的 镰 刀 菌 感 染 产 生 的 各 种 的 霉 菌 毒 素, 例 如 烟 曲 霉 毒 素 和 玉 米 赤 霉 烯 酮, 以 及 单 端 孢 霉 烯 族 毒 素 类 (DON) 和 T2 毒 素 曲 霉 菌 产 生 的 黄 曲 霉 毒 素 也 很 重 要 每 种 霉 菌 毒 素 给 猪 带 来 了 一 系 列 的 不 同 的 威 胁 ( 如 图 1) 对 商 品 猪 的 负 面 影 响 一 项 对 超 过 85 项 公 开 研 究 的 荟 萃 分 析 显 示, 霉 菌 毒 素 对 生 长 速 度 影 响 的 两 个 最 重 要 的 因 素 是 年 龄 和 毒 素 的 总 接 触 量 青 年 动 物 被 认 为 是 最 敏 感 的, 公 猪 比 母 猪 更 易 感 尽 管 风 险 随 着 猪 只 月 龄 增 长 而 下 降, 并 与 生 产 阶 段 明 显 相 关, 但 饲 料 霉 菌 毒 素 始 终 对 于 猪 的 生 产 构 成 威 胁 对 生 长 繁 殖 和 疾 病 易 感 性 的 负 面 影 响 会 大 幅 降 低 整 体 生 产 效 率 和 盈 利 能 力, 即 使 在 长 期 的 低 污 染 水 平 也 是 如 此 然 而, 在 大 多 数 商 品 猪 舍, 总 的 霉 菌 毒 素 负 荷 相 对 较 高, 这 主 要 是 由 于 猪 饲 料 对 谷 物 的 依 赖 严 重 镰 刀 菌 真 菌 性 疾 病 在 谷 类 作 物 较 为 普 遍, 可 产 生 高 水 平 的 FUM ZON 与 DON 污 染 在 这 些 污 染 饲 料 的 霉 菌 毒 素 中, 猪 饲 料 中 最 常 见 的 霉 菌 毒 素 是 DON, 尽 管 某 种 霉 菌 毒 素 很 少 能 被 单 独 发 现 在 2014 年 和 2015 年,Micron Bio- Systems 公 司 对 欧 洲 和 中 东 共 同 的 猪 饲 18

国 际 信 息 动 态 料 原 料 样 品 ( 包 括 小 麦 饲 用 小 麦 玉 米 酒 糟 ) 进 行 分 析 发 现, 分 别 有 66% 56% 和 53% 的 样 本 种 含 有 DON FUM 和 ZON 玉 米 最 常 出 现 霉 菌 毒 素 污 染, 且 含 量 最 高 总 体 而 言, 研 究 发 现 近 一 半 的 样 本 中 霉 菌 毒 素 水 平 处 于 高 风 险 水 平 ( 超 过 500ppb 的, 图 2a) Mycocheck 霉 菌 毒 素 检 测 服 务 机 构 通 过 检 测 猪 饲 料 报 道 了 类 似 的 结 果 ( 图 2b) 猪 日 粮 对 人 类 食 用 成 分 的 依 赖 也 较 重, 有 些 批 次 不 符 合 更 严 格 的 供 人 类 食 用 的 霉 菌 毒 素 限 量, 常 常 会 通 过 一 定 方 式 进 入 动 物 饲 料 三 个 关 键 策 略 鉴 于 对 霉 菌 毒 素 威 胁 的 认 识 逐 渐 增 强, 所 以 饲 料 中 也 在 使 用 霉 菌 毒 素 失 活 剂 和 吸 附 剂 旨 在 结 合 转 化 或 降 解 毒 素, 市 场 上 有 很 多 这 样 的 产 品 可 供 选 择 结 合 ( 吸 附 ) 是 饲 料 工 业 中 最 常 用 的 方 法, 用 粘 土 矿 物 如 膨 润 土 用 于 结 合 极 性 霉 菌 毒 素 ( 黄 曲 霉 毒 素 ); 酵 母 细 胞 壁 证 实 针 对 非 极 性 镰 刀 菌 霉 菌 毒 素 有 一 些 功 效 一 定 的 ph 值 范 围 是 保 持 成 功 效 果 的 关 键, 通 常 猪 的 胃 肠 道 内 的 ph 值 范 围 为 3~7 另 外 一 个 策 略 可 特 别 用 于 非 极 性 霉 菌 毒 素, 即 去 除 或 修 改 霉 菌 毒 素 表 面 的 特 定 功 能 性 位 点 这 种 转 变 可 以 使 霉 菌 毒 素 无 害 或 暴 露 分 子 的 结 合 位 点, 使 其 与 矿 物 结 合, 通 常 在 ph 值 为 3 或 7 时, 实 现 矿 物 质 与 靶 位 点 之 间 的 结 合 最 后, 降 解 是 应 用 多 种 转 化 方 式 确 保 转 化 后 的 任 何 霉 菌 毒 素 成 分 不 会 保 留 任 何 毒 性 作 用 对 于 养 猪 生 产 者, 转 化 19

国 际 信 息 动 态 和 降 解 策 略 特 别 适 用, 因 为 可 以 最 有 效 地 消 除 DON, 其 在 猪 饲 料 中 非 常 普 遍 且 会 对 猪 产 生 急 性 毒 性 不 同 动 物 种 类 特 异 性 解 决 方 案 最 有 效 的 方 法 通 常 是 这 三 种 策 略 的 组 合, 并 且 以 上 研 究 表 明, 霉 菌 毒 素 威 胁 的 严 重 程 度 将 决 定 应 当 如 何 确 定 这 些 策 略 的 优 先 次 序 同 时 必 须 强 调, 无 论 是 在 接 触 程 度 和 敏 感 性 方 面, 了 解 不 同 动 物 种 类 之 间 的 差 异 非 常 重 要 例 如, 在 养 猪 生 产 中,ZON 会 被 代 谢 为 毒 性 更 大 的 α- 玉 米 赤 霉 烯 醇, 而 在 家 禽 中, 它 会 被 代 谢 成 毒 性 较 小 的 β- 玉 米 赤 霉 烯 醇, 主 要 监 管 机 构 已 经 认 识 到 这 种 差 异 在 欧 盟, 猪 饲 料 中 允 许 的 FUM 和 ZON 的 最 大 限 度 被 分 别 设 定 为 5ppm 和 0.1ppm, 而 在 家 禽,FUM 的 限 制 为 20ppm, 并 且 没 对 于 ZON 的 特 定 限 制 因 此, 最 新 的 动 物 种 属 特 异 性 饲 料 霉 菌 毒 素 解 决 方 案 代 表 了 霉 菌 毒 素 治 理 的 一 大 进 步, 并 且 已 经 出 现 了 基 于 单 个 农 场 的 霉 菌 毒 素 情 况 定 制 解 决 方 案 的 做 法 虽 然 实 际 的 霉 菌 毒 素 污 染 水 平 依 赖 于 有 效 并 及 时 地 对 饲 料 样 品 进 行 检 测, 这 种 灵 活 却 针 对 性 非 常 高 的 方 法 可 能 会 在 未 来 的 几 年 引 发 更 多 关 注, 并 产 生 潜 在 效 益 豆 粕 的 固 态 发 酵 大 豆 发 酵 物 是 降 低 豆 粕 中 抗 营 养 因 子 和 提 高 动 物 日 粮 中 营 养 价 值 的 一 种 方 法 豆 粕 (SBM) 是 一 种 为 大 多 数 动 物 日 粮 提 供 绝 大 部 分 蛋 白 质 营 养 成 份 的 常 见 蛋 白 源, 其 极 具 吸 引 力 的 氨 基 酸 组 成 和 易 获 取 性 均 促 使 之 成 为 一 种 重 要 蛋 白 质 来 源 但 豆 粕 存 在 限 制 动 物 日 粮 中 添 加 量 的 抗 营 养 因 子, 如 棉 子 糖 水 苏 糖 和 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 (TI), 这 些 抗 营 养 因 子 均 会 限 制 豆 粕 在 动 物 日 粮 中 的 使 用 量 固 态 发 酵 与 深 层 发 酵 的 益 处 Soares 等 对 固 态 发 酵 (SSF) 和 深 层 发 酵 (SF) 后 枯 草 芽 孢 杆 菌 的 蛋 白 酶 产 量 进 行 了 比 较, 研 究 发 现 固 态 发 酵 中 的 酶 含 量 比 深 层 发 酵 高 10 倍, 产 酶 能 力 比 深 层 发 酵 高 45%(Soares VF,2005) 这 表 明, 与 深 层 发 酵 相 比, 固 态 发 酵 可 产 生 更 多 的 蛋 白 酶 固 态 发 酵 中 的 物 理 转 化 在 亚 洲, 多 年 来 人 们 一 直 在 利 用 曲 霉 菌 来 将 大 豆 或 谷 物 产 品 转 化 为 风 味 增 强 食 品 含 酒 精 饮 料, 甚 至 作 为 天 然 20

国 际 信 息 动 态 防 腐 剂 曲 霉 菌 可 产 生 被 称 为 菌 丝 的 丝 状 根, 这 种 根 可 以 生 长 进 入 基 质 在 菌 丝 生 长 过 程 中, 即 可 将 酶 分 泌 至 基 质 内, 这 有 助 于 转 化 天 然 产 物 最 近, 人 们 发 现 用 米 曲 霉 对 豆 粕 进 行 固 态 发 酵 可 增 强 豆 粕 的 营 养 特 性, 并 可 减 少 抗 营 养 因 子, 从 而 使 其 成 为 适 合 动 物 日 粮 的 蛋 白 源 双 微 生 物 在 固 态 发 酵 中 的 应 用 虽 然 米 曲 霉 似 乎 可 以 通 过 其 产 生 内 切 蛋 白 酶 和 其 它 酶 类 成 为 豆 粕 转 化 的 主 要 菌 种, 但 仍 存 在 一 定 的 局 限 性 使 用 枯 草 芽 孢 杆 菌 可 协 同 提 高 固 态 发 酵 的 营 养 素 质 量, 因 为 这 样 可 以 产 生 细 胞 外 蛋 白 酶 在 豆 粕 发 酵 过 程 中, 米 曲 霉 可 产 生 菌 丝, 这 些 菌 丝 会 进 入 豆 粕 颗 粒 图 1 显 示 了 这 些 菌 丝 结 构 是 如 何 为 枯 草 芽 孢 杆 菌 打 通 进 入 基 质 路 径 的 随 着 菌 丝 穿 透 入 豆 粕 颗 粒, 米 曲 霉 和 枯 草 芽 孢 杆 菌 会 继 续 产 生 酶, 如 蛋 白 酶 淀 粉 酶 和 其 它 酶 类 随 着 进 一 步 穿 透 基 质, 这 些 酶 类 会 继 续 降 解 豆 粕 这 种 强 化 降 解 技 术 能 够 从 大 豆 内 部 ( 而 不 仅 仅 是 从 表 面 ) 利 用 蛋 白 酶 淀 粉 酶 和 其 它 酶 类 降 解 蛋 白 淀 粉 和 其 它 重 要 营 养 素 21

国 际 信 息 动 态 降 低 豆 粕 中 的 抗 营 养 因 子 豆 粕 中 发 现 的 大 多 数 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 的 分 子 量 为 21.5kDa( Hwang, 1977), 这 一 分 子 量 范 围 内 蛋 白 质 的 水 解 可 能 会 降 低 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 的 含 量 最 新 发 酵 技 术 已 经 表 明 了 将 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 降 至 实 验 室 几 乎 无 法 检 测 水 平 的 益 处, 这 是 由 在 发 酵 过 程 中 曲 霉 菌 产 生 的 蛋 白 酶 来 完 成 的 Hong 等 进 行 的 一 项 研 究 评 估 了 用 米 曲 霉 发 酵 食 品 级 大 豆 和 饲 料 级 豆 粕 的 效 果, 他 们 发 现 发 酵 可 显 著 降 低 大 豆 和 豆 粕 中 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 含 量 (Hong,2004) 在 图 4 中, 十 二 烷 基 硫 酸 钠 - 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 (SDS PAGE) 显 示 了 用 米 曲 霉 发 酵 豆 粕 的 蛋 白 质 转 化 情 况 注 意, 左 图 缺 少 21.5 kda 带, 这 表 明 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 含 量 已 显 著 降 低 或 已 被 清 除 他 们 还 发 现 与 豆 粕 相 比 蛋 白 分 子 量 也 出 现 了 显 著 下 降 (P < 0.05) GAO 等 进 行 了 另 一 项 研 究 表 明, 与 传 统 豆 粕 相 比, 发 酵 豆 粕 中 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 含 量 下 降 了 89.2%(You-ling GAO,2013) 另 有 研 究 表 明 曲 霉 菌 还 可 产 生 α- 半 乳 糖 苷 酶, 可 有 效 降 低 棉 子 糖 和 水 苏 糖 的 含 量 Cruz 等 进 行 的 研 究 表 明 霉 菌 产 生 的 α- 半 乳 糖 苷 酶 可 成 功 从 大 豆 乳 清 和 豆 浆 中 清 除 棉 子 糖 和 水 苏 糖 Mansour 和 Khalih 的 研 究 表 明, 经 霉 菌 源 性 α- 半 乳 糖 苷 酶 处 理 的 鹰 嘴 豆 粉 中 的 棉 子 糖 和 水 苏 糖 出 现 显 著 降 低 为 各 方 利 益 应 停 止 仔 猪 去 势 停 止 阉 割 是 猪 肉 产 业 链 所 有 成 员 的 共 同 责 任 这 是 为 了 猪 只 的 权 益 消 费 者 的 利 益, 也 为 了 养 猪 业 的 利 益 22

国 际 信 息 动 态 仔 猪 去 势 的 主 要 原 因 是 为 了 防 止 公 猪 的 异 味, 那 是 在 性 成 熟 的 公 猪 猪 肉 中 存 在 的 一 种 难 闻 的 气 味 同 时, 去 势 也 能 减 少 争 斗, 使 应 激 更 少 伤 害 更 小 另 一 种 替 代 方 法 是 饲 养 不 去 势 的 公 猪, 在 猪 只 日 龄 较 小 的 时 候 就 对 其 进 行 屠 宰 ( 体 重 也 较 轻 ), 在 公 猪 产 生 异 味 和 发 生 争 斗 之 前 进 行 屠 宰 在 英 国 爱 尔 兰 以 及 西 班 牙 葡 萄 牙 和 希 腊 的 部 分 地 区, 这 是 常 见 的 替 代 方 法 公 猪 不 去 势 促 进 了 猪 的 福 利 健 康 和 完 整 性 此 外, 改 善 了 饲 料 转 化 率 即 生 产 1 千 克 的 体 重 需 要 的 饲 料 的 千 克 数, 这 直 接 转 化 为 生 产 者 经 济 效 益 的 提 高, 可 更 为 有 效 地 利 用 自 然 资 源 未 去 势 的 公 猪 比 去 势 公 猪 具 有 异 味 的 风 险 要 大 得 多, 但 屠 宰 线 上 检 测 异 味 的 方 法 也 在 不 断 地 开 发 和 应 用 也 有 证 据 表 明, 它 可 以 通 过 遗 传 营 养 和 管 理 来 降 低 公 猪 异 味 与 此 同 时, 市 场 之 间 对 公 猪 异 味 敏 感 度 存 在 差 异, 而 且 人 们 对 于 什 么 是 可 接 受 的 标 准 也 缺 乏 共 识 由 于 猪 只 必 须 在 较 轻 的 体 重 时 屠 宰 以 有 效 控 制 公 猪 异 味, 对 需 要 较 重 的 猪 只 用 于 特 种 产 品 ( 如 帕 尔 马 和 伊 比 利 亚 火 腿 ) 的 市 场 而 言, 这 种 方 法 的 接 受 度 进 一 步 受 到 限 制 对 不 实 行 或 不 接 受 未 去 势 公 猪 生 产 的 市 场 而 言, 公 猪 异 味 控 制 疫 苗 给 去 势 手 术 提 供 了 一 个 有 效 的 的 替 代 方 案 通 过 刺 激 猪 的 免 疫 系 统 可 暂 时 推 迟 青 春 期, 疫 苗 不 仅 降 低 了 公 猪 异 味, 而 且 还 可 以 降 低 因 争 斗 和 性 行 为 引 起 的 应 激 和 伤 害 与 未 去 势 的 公 猪 生 产 相 似, 疫 苗 消 除 了 跟 去 势 相 关 的 痛 苦 和 健 康 风 险 猪 只 生 长 到 目 标 体 重 时, 疫 苗 还 可 以 延 迟 青 春 期 与 未 去 势 的 公 猪 生 产 相 比, 它 能 够 适 应 更 广 泛 的 市 场, 包 括 特 种 产 品 该 疫 苗 最 早 于 1998 年 在 澳 大 利 亚 注 册, 目 前 已 在 全 球 超 过 60 个 国 家 使 用, 其 中 包 括 28 个 欧 盟 成 员 国 与 其 他 疫 苗 相 似, 公 猪 异 味 控 制 疫 苗 的 原 理 是 产 生 免 疫 应 答, 所 以 没 有 使 用 化 学 品, 且 对 睾 丸 没 有 损 害 它 不 是 一 种 激 素, 不 会 累 积 在 动 物 的 组 织 中, 所 以 对 人 类 而 言 也 完 全 是 安 全 的 结 束 阉 割 是 猪 肉 产 业 链 中 所 有 成 员 的 共 同 责 任 作 为 供 应 商 和 消 费 者 之 间 的 联 系 者, 零 售 商 处 于 特 别 的 强 势 地 位, 可 极 大 地 影 响 农 场 的 动 物 福 利 政 策 幸 运 的 是, 公 猪 去 势 的 良 好 替 代 方 法 已 经 存 在 不 过, 这 些 方 法 的 采 用 在 很 大 程 度 上 取 决 于 零 售 商 逐 步 的 认 可 为 了 猪 只 福 利 消 费 者 的 利 益 和 养 猪 业 的 利 益, 应 敦 促 零 售 商 采 取 更 多 措 施 来 确 保 源 自 未 去 势 和 疫 苗 免 疫 公 猪 的 猪 肉 的 接 受 度 不 只 是 在 纸 面 上, 而 是 在 实 践 中 23

科 技 项 目 研 究 进 展 北 京 三 元 种 业 2013 年 自 立 科 研 课 题 提 高 优 秀 种 公 牛 冷 冻 精 液 质 量 关 键 技 术 的 研 究 一 课 题 基 本 情 况 在 国 外, 奶 业 发 达 国 家 在 冷 冻 稀 释 液 冻 精 生 产 工 艺 冻 精 产 量 的 生 理 与 遗 传 选 择 等 方 面 取 得 了 重 大 进 展 冷 冻 精 液 的 冻 后 活 力 普 遍 达 到 0.5 以 上, 高 产 种 公 牛 年 产 冻 精 20 万 剂 以 上, 终 生 产 量 100 万 剂 以 上 近 年 来, 经 过 国 内 奶 牛 育 种 者 的 不 懈 努 力, 我 国 初 步 建 立 起 了 良 种 繁 育 技 术 体 系 但 是 奶 牛 整 体 遗 传 素 质 差 良 种 数 量 少 覆 盖 率 低, 地 区 差 异 巨 大, 尤 其 是 缺 乏 遗 传 素 质 高 的 优 秀 种 公 牛 2010 年 农 业 部 公 布 的 良 种 补 贴 公 牛 中, 验 证 公 牛 总 体 比 例 不 足 35% 这 说 明 我 国 优 秀 种 公 牛 冷 冻 精 液 生 产 水 平 仍 较 低 下, 无 法 满 足 奶 牛 遗 传 改 良 的 整 体 需 求 目 前 我 国 奶 用 种 公 牛 平 均 年 单 产 3.5 万 剂 / 头, 最 高 年 单 产 冻 精 也 不 过 10 万 剂 / 头, 与 发 达 国 家 高 产 冻 精 种 公 牛 最 高 年 单 产 可 达 25 万 剂 / 头 的 水 平 差 距 甚 远 要 想 达 到 发 达 国 家 后 备 公 牛 选 育 及 冷 冻 精 液 生 产 水 平, 可 考 虑 种 公 牛 个 体 的 繁 殖 力, 在 不 降 低 母 牛 受 胎 率 的 前 提 下 适 当 降 低 有 效 精 子 数 的 标 准 这 样 可 以 大 大 降 低 引 种 和 饲 养 费 用, 尤 其 是 选 择 的 强 度 和 优 秀 种 公 牛 利 用 率 会 提 高, 将 会 产 生 更 大 的 经 济 和 社 会 效 益 常 规 牛 冷 冻 精 液 精 子 通 常 在 母 畜 生 殖 道 内 仅 能 存 活 24 小 时 左 右, 人 工 授 精 效 果 受 发 情 鉴 定 准 确 性 的 制 约, 整 体 情 期 受 胎 率 难 以 提 高 通 过 在 冻 精 冷 冻 保 护 液 中 添 加 特 异 性 生 物 活 性 物 质, 延 长 有 效 精 子 在 母 牛 体 内 的 存 活 时 间, 降 低 人 工 授 精 对 发 情 鉴 定 准 确 性 的 依 赖, 是 提 高 母 牛 情 期 受 胎 率 的 关 键 技 术 难 点 本 课 题 实 施 期 间, 通 过 长 效 冷 冻 精 液 的 研 究, 分 析 精 子 冷 冻 过 程 对 线 粒 体 的 损 伤 以 及 降 低 精 子 的 运 动 状 态, 分 别 向 精 液 稀 释 液 中 添 加 不 同 的 活 性 物 质, 提 高 精 子 冷 冻 后 线 粒 体 的 完 整 性 以 及 冷 冻 精 液 的 存 活 时 间, 进 而 提 高 长 效 冷 冻 精 液 人 工 输 精 率 ; 通 过 低 精 子 数 的 研 究, 在 不 影 响 其 情 期 受 胎 率 的 前 提 下, 最 大 限 度 的 提 高 优 秀 种 公 牛 的 遗 传 价 值 二 课 题 的 组 织 与 管 理 1. 课 题 的 组 织 与 实 施 课 题 具 体 实 施 与 运 行 将 以 专 家 意 见 和 单 位 科 研 主 管 部 门 的 意 见 和 建 议 为 导 24

科 技 项 目 研 究 进 展 向, 充 分 发 挥 本 部 门 在 保 障 资 源 统 一 配 置 力 量 统 一 整 合 中 的 作 用, 充 分 发 挥 本 部 门 专 家 和 高 级 技 术 人 员 科 研 人 员 在 种 公 牛 饲 养 管 理 健 康 保 健 采 精 技 术 及 冻 精 生 产 等 各 方 面 的 指 导 作 用, 充 分 发 挥 课 题 论 证 评 审 考 核 监 督 方 面 的 作 用, 做 到 优 势 互 补, 统 一 协 调 定 时 召 开 课 题 实 施 情 况 通 报 会, 及 时 发 现 和 解 决 课 题 实 施 过 程 中 存 在 的 问 题, 及 时 和 主 管 领 导 及 科 研 管 理 部 门 进 行 沟 通, 对 本 课 题 实 施 所 取 得 的 成 果 以 简 报 的 形 式 宣 传 和 交 流 2. 课 题 经 费 管 理 本 项 目 中 各 课 题 独 立 核 算 专 款 专 用, 严 格 按 照 课 题 预 算 执 行, 保 证 配 套 资 金 足 额 到 位 每 年 组 织 通 报 课 题 经 费 使 用 情 况, 发 现 问 题 及 时 解 决 三 课 题 任 务 书 中 规 定 的 研 究 内 容 和 考 核 指 标 1. 课 题 的 研 究 内 容 (1) 牛 冷 冻 精 液 存 活 时 间 的 研 究 通 过 相 关 文 献 的 检 索 以 及 国 内 有 关 科 研 成 果 的 交 流, 对 新 鲜 常 规 冻 精 两 个 组 分 别 进 行 精 子 存 活 时 间 观 察, 之 后 对 每 剂 量 中 有 效 精 子 数 200 万 -800 万 个 / 剂, 每 100 万 为 一 个 梯 度, 进 行 精 子 存 活 实 验, 比 较 其 差 异 (2) 牛 冷 冻 精 液 线 粒 体 活 性 的 研 究 通 过 国 内 外 的 研 究 成 果, 分 别 对 新 鲜 冷 冻 精 液 进 行 线 粒 体 观 察, 检 测 其 ATP 含 量, 比 较 其 差 异 之 后 精 液 冷 冻 稀 释 液 中 添 加 谷 胱 甘 肽 HSP90 等 物 质, 检 测 其 对 线 粒 体 的 保 护 作 用 (3) 牛 长 效 冷 冻 精 液 的 体 外 试 验 研 究 通 过 在 冻 精 冷 冻 保 护 液 中 分 别 添 加 不 同 浓 度 的 精 胺 Zn 2+ Ca 2+ 转 运 抑 制 蛋 白 等 特 异 性 生 物 活 性 物 质, 延 长 有 效 精 子 在 母 牛 体 内 的 存 活 时 间, 以 生 产 长 效 牛 冷 冻 精 液, 达 到 母 牛 生 殖 道 内 长 时 间 保 持 具 有 受 精 能 力 精 子 的 目 的 通 过 体 外 试 验 测 定 解 冻 后 不 同 时 间 的 精 子 活 力 和 人 工 授 精 试 验, 验 证 特 异 性 活 性 物 质 对 延 长 精 子 有 效 受 精 时 间 的 效 果 (4) 低 精 子 数 冷 冻 精 液 人 工 输 精 效 果 的 研 究 本 研 究 重 点 进 行 不 同 前 进 运 动 精 子 含 量 的 冷 冻 精 液 人 工 授 精 梯 度 试 验 (200 万 -800 万 个 / 剂, 每 100 万 为 一 个 梯 度, 每 25

科 技 项 目 研 究 进 展 个 梯 度 的 试 验 冷 冻 精 液 至 少 500 剂 ), 根 据 不 同 梯 度 冷 冻 精 液 单 剂 精 子 含 量 与 奶 牛 情 期 受 胎 率 的 关 系, 筛 选 最 宜 前 进 运 动 精 子 数 的 冷 冻 精 液 技 术 指 标, 同 时 针 对 低 精 子 数 冻 精 输 配 技 术 建 立 新 的 技 术 操 作 规 程, 为 奶 牛 冷 冻 精 液 和 人 工 授 精 国 家 技 术 标 准 的 修 订 提 供 依 据 其 中,2015 年 研 究 内 容 为 继 续 实 施 低 精 子 冷 冻 精 液 人 工 授 精 实 验 ; 分 别 向 精 液 稀 释 液 中 添 加 活 性 物 质, 延 长 精 子 体 外 存 活 时 间 2. 考 核 指 标 (1) 通 过 低 精 子 数 冷 冻 精 液 人 工 授 精 技 术 研 究, 形 成 适 用 于 低 精 子 数 冷 冻 精 液 人 工 授 精 操 作 技 术 规 程 (2) 通 过 长 效 冻 精 稀 释 液 研 究, 达 到 25% 活 力 的 精 子 存 活 时 间 由 4h 提 高 到 6h (3) 在 核 心 期 刊 发 表 论 文 2-3 篇 四 课 题 实 施 过 程 中 所 做 的 具 体 工 作 进 展 课 题 实 施 过 程 中 所 做 的 工 作 如 下 : 1. 低 精 子 梯 度 人 工 授 精 实 验 本 研 究 通 过 在 北 京 奶 牛 中 心 良 种 场 广 西 壮 族 自 治 区 2 个 规 模 化 牛 场 以 及 飞 鹤 原 生 态 第 一 牧 场, 四 个 规 模 化 牧 场 进 行 精 子 梯 度 实 验, 分 析 统 计 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 中 前 进 运 动 精 子 数 人 工 授 精 后 对 情 期 受 胎 率 的 影 响 本 研 究 冻 精 来 源 于 北 京 奶 牛 中 心 种 公 牛 站 生 产 的 0.25 ml 细 管 冻 精 品 种 为 荷 斯 坦 种 公 牛 11109665,11104737,11106002 冻 精 符 合 2008 年 牛 冷 冻 精 液 国 家 标 准 1 实 验 共 分 四 个 组 :Al A2 A3 为 试 验 组,A4 为 对 照 组, 三 组 的 试 验 冻 精 和 对 照 组 冻 精 均 来 源 于 同 一 品 种 的 同 一 头 公 牛 的 同 批 次 生 产 A1 组 细 管 冻 精 每 一 剂 量 含 直 线 前 进 精 子 数 为 200 万 个,A2 组 细 管 冻 精 每 一 剂 量 所 含 直 线 前 进 精 子 数 为 400 万 个,A3 组 细 管 冻 精 每 一 剂 量 所 含 直 线 前 进 精 子 数 为 600 万 个,A4 组 细 管 冻 精 每 一 剂 量 所 含 直 线 前 进 精 予 数 为 800 万 个 2 选 择 配 种 点 及 受 配 牛 来 源 选 择 冷 冻 精 液 配 种 点 是 北 京 奶 牛 中 心 良 种 场 广 西 壮 族 自 治 区 两 个 规 模 化 奶 牛 场 飞 鹤 原 生 态 第 一 牧 场 授 配 母 牛 来 源 于 四 个 规 模 化 奶 牛 场 青 年 牛 及 成 母 牛 每 梯 度 冻 精 输 精 头 数 不 少 于 100 头 (1) 降 低 每 剂 量 中 直 线 运 动 精 子 数 牛 冷 冻 精 液 人 工 输 精 效 果 的 研 究 ( 北 京 奶 牛 中 心 ) 降 低 牛 冷 冻 精 液 每 剂 量 中 前 进 运 动 精 子 数 人 工 输 精 的 结 果 见 表 1, 试 验 结 果 表 明,A1 组 配 种 头 数 为 129 头, 一 次 配 种 受 胎 头 数 为 74, 第 一 情 期 受 胎 率 为 57.36%,3 个 情 期 总 受 胎 率 为 61.15%, 与 A3 组 均 差 异 不 显 著 (60.20%, 64.32%)(P>0.05) A2 组 组 配 种 头 数 为 124 头, 第 一 次 配 种 受 胎 头 数 为 70 头, 第 一 情 期 受 胎 率 为 56.45%,3 个 情 期 总 受 胎 率 为 61.83%, 与 A3 组 均 差 异 不 显 著 (60.20%,64.32%)(P>0.05) 26

科 技 项 目 研 究 进 展 表 1 降 低 每 剂 量 中 直 线 运 动 精 子 数 牛 冷 冻 精 液 人 工 输 精 效 果 的 研 究 组 别 配 种 头 数 ( 头 ) 第 一 次 情 期 受 胎 头 数 ( 头 ) 3 个 情 期 受 胎 头 数 ( 次 ) 第 一 情 期 受 胎 率 (%) 3 个 情 期 总 受 胎 率 (%) A1 129 74 85 57.36 61.15 A2 124 70 81 56.45 61.83 A3 - - 60.20 64.32 注 :A1 组 细 管 冻 精 每 一 剂 量 含 直 线 前 进 精 子 数 为 200 万 个 ;A2 组 细 管 冻 精 每 剂 量 所 含 直 线 前 进 精 子 数 为 400 万 个 ;A3 组 细 管 冻 精 每 剂 量 所 含 前 进 精 子 数 为 800 万 个 (2) 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 ( 广 西 壮 族 自 治 区 两 个 规 模 化 牛 场 ) 1 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 青 年 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 青 年 牛 情 期 受 胎 率 的 影 响 见 图 1, 从 图 1 结 果 表 明, 牛 场 1 及 牛 场 2 中 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 为 200 万 时, 其 人 工 输 精 后 的 第 一 情 期 受 胎 率 与 800 万 差 异 不 显 著 (P)0.05) 牛 场 2 中 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 为 200 万 时, 其 人 工 输 精 后 的 第 一 情 期 受 胎 率 高 于 进 口 冻 精, 差 异 显 著 (P<0.05) 注 : * 代 表 差 异 显 著 图 1 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 青 年 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 27

科 技 项 目 研 究 进 展 2 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 前 进 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 成 母 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 成 母 牛 情 期 受 胎 率 的 影 响 见 图 2, 从 图 2 结 果 表 明, 牛 场 1 及 牛 场 2 中 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 为 200 万 时, 其 人 工 输 精 后 的 第 一 情 期 受 胎 率 与 800 万 差 异 不 显 著 (P) 0.05) 而 牛 场 1 中 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 为 400 万 时, 人 工 输 精 后 的 第 一 情 期 受 胎 率 低 于 进 口 冻 精, 差 异 显 著 (P<0.05) 牛 场 1 及 牛 场 2 中 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 为 200 万 时, 其 人 工 输 精 后 的 第 一 情 期 受 胎 率 与 进 口 冻 精 差 异 不 显 著 (P 0.05) 注 : * 代 表 差 异 显 著 图 2 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 直 线 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 成 母 牛 情 期 受 胎 率 的 影 响 (3) 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 前 进 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 成 母 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 ( 飞 鹤 原 生 态 第 一 牧 场 ) 2014 年 在 飞 鹤 原 生 态 第 一 牧 场 进 行 降 低 单 剂 量 前 进 运 动 精 子 数 的 人 工 授 精 实 验, 并 对 成 母 牛 的 第 一 情 期 受 胎 率 进 行 统 计 具 体 结 果 见 表 3, 当 每 剂 量 中 的 前 进 运 动 精 子 数 降 低 为 400 万 时 (39.56%,40.91%), 与 全 群 成 母 牛 对 照 组 差 异 不 显 著 (40.09%)(P)0.05), 而 精 子 数 为 200 万 时, 与 全 群 成 母 牛 对 照 粗 差 异 显 著 (P<0.05) 28

科 技 项 目 研 究 进 展 表 2 降 低 牛 冷 冻 精 液 单 剂 量 前 进 运 动 精 子 数 人 工 输 精 后 对 成 母 牛 第 一 情 期 受 胎 率 的 影 响 种 公 牛 牛 号 精 液 种 类 配 种 头 数 受 胎 头 数 第 一 情 期 受 胎 率 200 万 79 26 32.91% a 11104737 400 万 91 36 39.56% 600 万 80 34 42.05% 200 万 130 46 35.38% a 11106002 400 万 66 27 40.91% 600 万 146 60 41.38% 全 群 成 母 牛 1609 645 40.09% 2 牛 长 效 冷 冻 精 液 的 体 外 试 验 牛 的 受 胎 率 与 很 多 因 素 有 关, 除 了 授 配 人 员 的 技 术 水 平 母 牛 的 营 养 状 况 外, 输 精 的 准 确 时 间 是 一 个 主 要 的 方 面 精 子 在 母 畜 生 殖 道 内 的 存 活 时 间 : 常 规 牛 冷 冻 精 液 精 子 通 常 在 母 畜 生 殖 道 内 仅 能 存 活 24 小 时 左 右, 人 工 授 精 效 果 受 发 情 鉴 定 准 确 性 的 制 约, 整 体 情 期 受 胎 率 难 以 提 高 通 过 在 冻 精 冷 冻 保 护 液 中 添 加 特 异 性 生 物 活 性 物 质, 延 长 有 效 精 子 在 母 牛 体 内 的 存 活 时 间, 降 低 人 工 授 精 对 发 情 鉴 定 准 确 性 的 依 赖, 是 提 高 母 牛 情 期 受 胎 率 的 关 键 技 术 难 点 分 别 对 新 鲜 精 子 与 冷 冻 精 子 采 用 流 式 细 胞 仪 以 及 透 视 电 镜 对 精 子 质 膜 以 及 精 子 线 粒 体 进 行 观 察 之 后 对 300 支 牛 常 规 冷 冻 精 液 进 行 存 活 实 验 进 行 研 究, 分 别 向 冷 冻 精 液 稀 释 液 中 添 加 不 同 的 活 性 物 质 对 精 子 的 线 粒 体 完 整 性 线 粒 体 活 性 以 及 精 子 的 存 活 实 验 进 行 研 究 分 别 将 分 别 将 不 同 浓 度 的 Z 2+ Ca 2+ 转 运 蛋 白 NYD-SP27 加 入 常 规 含 Ca 2+ 冷 29

科 技 项 目 研 究 进 展 冻 精 液 稀 释 液 中, 对 新 鲜 精 液 进 行 冷 冻, 以 及 将 新 鲜 精 液 放 入 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液 中 进 行 冷 冻, 与 常 规 冷 冻 精 液 组 相 比 差 异 不 显 著, 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液 组 获 能 精 子 比 例 仅 有 40%, 均 低 于 其 他 组, 差 异 显 著 (P<0.05), 而 对 四 个 组 精 子 进 行 ATP 含 量 测 定 后, 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液 组 ATP 含 量 最 高,180.3 pmol/10 6, 与 对 照 组 差 异 显 著 (1) 冷 冻 对 精 子 线 粒 体 损 伤 的 研 究 冷 冻 后, 具 有 高 能 线 粒 体 的 精 子 的 比 例 显 著 降 低 ( 表 3) 冷 冻 后 精 子 线 粒 体 排 列 无 规 律, 疏 密 不 一, 线 粒 体 呈 多 层 重 叠 环 绕 于 尾 内 轴 丝, 部 分 线 粒 体 呈 囊 性 扩 张 其 上 的 交 叉 机 构 明 显 减 少, 线 粒 体 膜 增 厚 等 ( 图 3-4) 其 损 伤 的 原 因 一 方 面 是 由 于 当 精 子 细 胞 遭 受 冻 融 后, 细 胞 内 及 细 胞 间 形 成 冰 晶 与 冰 晶 融 化 是 造 成 细 胞 损 伤, 另 一 方 面 是 由 于 冷 冻 保 护 剂 的 毒 害 作 用, 其 对 生 物 膜 ( 如 细 胞 膜, 高 尔 基 体 膜, 线 粒 体 膜 ) 的 影 响 更 为 明 显 细 胞 膜 上 的 膜 蛋 白 变 性, 改 变 了 膜 脂 和 蛋 白 质 之 间 的 相 互 作 用 膜 的 透 性 改 变, 钠 离 子 和 钾 离 子 的 透 性 加 大, 钾 离 子 与 钙 离 予 发 生 置 换, 降 低 了 膜 的 稳 定 性, 细 胞 表 面 的 电 荷 改 变 质 膜 和 细 胞 内 的 酶 活 性 降 低 线 粒 体 膜 破 坏, 氧 化 磷 酸 化 偶 联 化 解, 能 量 代 谢 紊 乱, 减 少 了 能 量 供 应 表 3 牛 精 子 冷 冻 损 伤 的 研 究 组 别 质 膜 完 整 率 (%) 顶 体 完 整 率 (%) 高 能 线 粒 体 (%) 线 粒 体 活 性 低 能 线 粒 体 (%) AR (%) CTC 染 色 B (%) F (%) 新 鲜 精 子 89.7 89.5 45.5 40.1 94.6 2.6 冷 冻 精 子 48.0 75.3 20.1 27.6 70.0 12.2 18.4 图 3 新 鲜 精 子 超 显 微 透 视 电 镜 图 图 4 冷 冻 精 子 超 显 微 透 视 电 镜 图 30

科 技 项 目 研 究 进 展 (2) 牛 长 效 冷 冻 精 液 的 体 外 实 验 研 究 1 不 同 添 加 物 对 精 子 线 粒 体 的 保 护 研 究 本 研 究 通 过 在 精 液 冷 冻 稀 释 液 中 添 加 褪 黑 色 素 后, 对 精 子 冷 冻, 解 冻 后 精 子 线 粒 体 能 量 为 205.1pmol/10 6, 显 著 高 于 常 规 冷 冻 精 液 对 照 组 ( 130.7pmol/10 6 )(P<0.05)( 表 4) 褪 黑 素 (MLT) 是 一 种 有 效 的 内 源 性 ROS 清 除 剂 MLT 为 一 种 光 谱 抗 氧 化 剂, 可 消 除 过 氧 化 氢 羟 基 自 由 基 一 氧 化 碳 等 MLT 具 有 保 护 精 子 线 粒 体 对 抗 ROS 攻 击 的 作 用 表 4 不 同 添 加 物 对 精 子 线 粒 体 的 保 护 研 究 冻 后 活 率 ATP 含 量 褪 黑 素 (MLT) 38% 205.1pmol/10 6 冷 冻 精 液 对 照 35% 130.7pmol/10 6 2 牛 长 效 冷 冻 精 液 的 体 外 试 验 稀 释 液 中 添 加 的 活 性 物 质 主 要 是 使 冷 冻 前 精 子 处 于 未 获 能 状 态, 保 存 精 子 能 量 本 实 验 通 过 对 新 鲜 精 液 进 行 处 理, 降 低 冷 冻 精 液 的 获 能 比 率, 进 而 达 到 提 高 受 精 率 的 目 的, 筛 选 出 精 液 冷 冻 稀 释 液 中 分 别 添 加 Zn 2+ Ca 2+ 转 运 蛋 白 NYD-SP27 以 及 采 用 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液, 对 其 效 果 进 行 检 测 冷 冻 精 液 稀 释 液 中 分 别 添 加 Zn 2+ Ca 2+ 转 运 蛋 白 NYD-SP27, 对 精 子 进 行 冷 冻 解 冻, 对 精 子 获 能 状 态 以 及 精 子 线 粒 体 活 性 进 行 检 测, 研 究 结 果 见 下 表 5, 当 稀 释 液 中 添 加 Zn 2+ Ca 2+ 转 运 蛋 白 NYD-SP27, 对 精 子 冷 冻 解 冻 后 的 获 能 状 态 没 有 太 大 影 响, 而 当 采 用 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液 时, 精 子 线 粒 体 活 性 达 到 最 高, 并 且 处 于 未 获 能 状 态 的 精 子 比 例 增 大 表 5 不 同 添 加 物 对 精 子 线 粒 体 及 获 能 状 态 的 影 响 添 加 物 获 能 精 子 比 例 冻 后 活 率 ATP 含 量 Ⅰ 75% b 40% 106.8pmol/10 6c Ⅱ 40% a 42% 190.3 pmol/10 6d Ⅲ 64% b 40% 90.9pmol/10 6a Ⅳ 66% b 40% 145.1pmol/10 6b 冷 冻 精 液 对 照 78% b 40% 130.7pmol/10 6b 31

科 技 项 目 研 究 进 展 五 课 题 考 核 指 标 完 成 情 况 在 课 题 实 施 期 间, 通 过 奶 牛 遗 传 物 质 创 新 生 产 技 术 的 研 发, 全 面 提 高 优 秀 种 牛 冷 冻 精 液 胚 胎 ( 包 括 性 控 ) 的 生 产 效 率 完 成 奶 牛 常 规 遗 传 物 质 的 生 产 技 术 创 新 通 过 低 精 子 数 冷 冻 精 液 人 工 授 精 技 术 研 究, 形 成 适 用 于 低 精 子 数 冷 冻 精 液 人 工 授 精 操 作 技 术 规 程, 低 精 子 数 精 子 数 200 万 / 剂 与 800 万 / 剂 的 精 液 配 种 效 果 ( 情 期 受 胎 率 ) 相 近, 差 异 不 显 著, 可 以 大 幅 度 提 高 成 年 公 牛 冻 精 生 产 量, 显 著 提 高 我 国 优 秀 种 公 牛 冷 冻 精 液 生 产 水 平 与 推 广 效 率 ; 通 过 长 效 冷 冻 精 液 生 产 技 术 研 究 提 高 情 期 受 胎 率, 目 前 该 研 究 内 容 尚 处 于 研 究 阶 段 截 止 到 2015 年 12 月 份 本 课 题 已 经 全 部 完 成 降 低 单 剂 量 前 进 运 动 精 子 数 对 母 牛 情 期 受 胎 率 影 响 的 研 究 已 经 基 本 完 成 2015 年 关 于 长 效 冷 冻 精 液 方 面 的 研 究 精 液 可 大 幅 度 提 高 优 秀 种 公 牛 的 冷 冻 精 液 产 量, 迅 速 扩 大 优 秀 种 公 牛 遗 传 影 响 力 ; 通 过 本 研 究 撰 写 研 究 报 告, 为 修 改 我 国 牛 冷 冻 精 液 国 家 标 准 提 供 实 验 理 论 依 据 长 效 精 子 实 验 表 明, 冷 冻 稀 释 液 中 添 加 Zn 2+ Ca 2+ 转 运 蛋 白 NYD- SP27 对 精 子 的 获 能 没 有 帮 助 ; 而 采 用 无 Ca 2+ 冷 冻 精 液 稀 释 液 时, 冷 冻 精 子 获 能 比 例 下 降, 精 子 ATP 水 平 得 以 保 存, 精 子 能 较 长 时 间 存 活, 延 长 精 子 在 生 殖 道 内 的 存 活 时 间, 提 高 配 种 效 率 七 课 题 资 金 使 用 情 况 课 题 预 算 经 费 使 用 严 格 按 照 课 题 实 施 方 案 及 任 务 书 中 所 规 定 的 经 费 使 用 细 节 进 行,2015 年 本 课 题 预 算 经 费 4 万 元, 目 前 实 际 经 费 2 万 元, 种 业 拨 课 题 经 费 使 用 率 100% 六 课 题 取 得 的 主 要 成 果 和 效 益 目 前 实 验 进 展 顺 利, 已 基 本 完 成 2015 年 工 作 任 务 低 精 子 数 实 验 得 出 低 精 子 数 精 液 配 种 与 国 标 所 规 定 的 精 子 数 精 液 配 种 效 果 相 近, 且 差 异 不 显 著, 采 用 低 精 子 数 生 产 冷 冻 32

主 要 研 究 成 果 TJM-F92 株 弱 毒 疫 苗 应 用 效 果 评 价 译 许 光 勇 徐 利 王 朝 军 北 京 养 猪 育 种 中 心 任 晓 明 北 京 农 学 院 动 物 科 学 技 术 学 院 蓝 耳 病 弱 毒 疫 苗 在 蓝 耳 病 阳 性 不 稳 定 场 的 应 用 效 果, 可 以 通 过 免 疫 前 后 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值 变 化 抗 体 阳 性 率, 以 及 免 疫 后 猪 群 临 床 表 现 以 及 生 产 成 绩 来 进 行 评 判, 同 时 为 选 择 合 适 疫 苗 提 供 理 论 依 据 猪 蓝 耳 病 又 称 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 (PRRS), 感 染 后 在 猪 场 生 产 中 主 要 表 现 为 妊 娠 后 期 流 产 早 产 死 胎 木 乃 伊 和 弱 仔 比 例 增 加, 生 长 群 尤 其 是 保 育 阶 段 易 发 生 呼 吸 道 疾 病 或 继 发 其 他 细 菌 性 疾 病, 种 猪 或 生 长 猪 群 产 生 免 疫 抑 制 等 特 征 蓝 耳 病 首 次 于 1987 年 在 美 国 出 现,2006 年 在 我 国 全 国 范 围 内 暴 发 高 致 病 性 蓝 耳 病, 造 成 灾 难 性 损 失 时 至 今 日, 蓝 耳 病 仍 是 危 害 养 猪 业 发 展 的 最 严 重 传 染 病 之 一, 尤 其 是 高 致 病 性 蓝 耳 病 病 毒 (HP-PRRSV) 目 前, 对 蓝 耳 病 的 防 控 有 蓝 耳 病 净 化 ( 清 场 或 封 群 后 逐 步 剔 除 法 ) 驯 化 依 靠 疫 苗 或 阳 性 血 清 维 持 蓝 耳 病 感 染 动 态 平 衡 等 措 施 对 于 蓝 耳 病 阳 性 不 稳 定 场 来 说, 疫 苗 免 疫 仍 是 主 要 防 控 方 法 本 文 主 要 结 合 两 个 猪 场 蓝 耳 病 实 际 情 况, 尝 试 选 择 该 场 以 前 从 未 使 用 过 的 TJM-F92 株 高 致 病 性 蓝 耳 病 弱 毒 疫 苗, 免 疫 猪 群 后, 从 临 床 表 现 生 产 性 能 和 血 清 学 方 面 评 价 新 疫 苗 在 该 场 的 应 用 效 果 1 材 料 与 方 法 1.1 选 用 猪 只 甲 种 猪 场 连 续 选 取 3 批 18 日 龄 哺 乳 仔 猪, 共 计 300 头 33

主 要 研 究 成 果 乙 种 猪 场 随 机 选 择 妊 娠 30~80 天 母 猪 50 头, 并 随 机 挑 选 连 续 出 生 的 18 日 龄 哺 乳 仔 猪 分 成 2 批, 共 计 400 头 1.2 分 组 及 处 理 甲 种 猪 场 300 头 哺 乳 仔 猪 分 为 3 个 重 复, 每 个 重 复 100 头 随 机 分 为 两 组, 分 别 记 为 A~F 组, 其 中 A C 和 E 组 于 18 日 龄 注 射 该 场 从 未 使 用 过 的 TJM-F92 株 疫 苗 ( 由 某 国 外 公 司 提 供 )1 头 份,B D 和 F 组 于 18 日 龄 注 射 该 场 一 直 使 用 的 另 一 高 致 病 性 毒 株 弱 毒 疫 苗 1 头 份 乙 种 猪 场 妊 娠 30~80 天 母 猪 50 头 及 其 所 产 仔 猪 400 头, 其 中 G 组 116 头 和 I 组 101 头 仔 猪 于 18 日 龄 注 射 该 场 从 未 使 用 过 的 TJM-F92 株 疫 苗 1 头 份, 其 中 H 组 106 头 和 J 组 77 头 仔 猪 于 18 日 龄 注 射 该 场 一 直 使 用 的 另 一 高 致 病 性 毒 株 弱 毒 疫 苗 疫 苗 1 头 份 每 组 随 机 选 取 10 头 仔 猪 分 别 于 免 疫 蓝 耳 病 疫 苗 前 免 疫 后 2 周 和 免 疫 后 4 周 采 血 检 测 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值 分 别 称 取 仔 猪 断 奶 重 和 保 育 下 床 体 重, 称 取 保 育 阶 段 耗 料 量, 记 录 保 育 阶 段 发 病 数 和 死 亡 数 2 结 果 2.1 血 清 学 仔 猪 于 18 日 龄 注 射 蓝 耳 病 疫 苗, 分 别 于 免 疫 前 免 疫 后 2 周 和 免 疫 后 4 周 采 血 并 用 ELISA 法 检 测 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值, 结 果 经 EXCEL 处 理 分 析 后, 各 组 免 疫 前 后 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值 平 均 值 离 散 度 以 及 抗 体 阳 性 率 变 化 情 况 见 图 1~10 图 1 A 与 B 组 PRRSV 抗 体 阳 性 率 图 2 A 与 B 组 PRRSV 抗 体 S/P 平 均 值 及 离 散 度 分 布 通 过 A 与 B 组 结 果 可 知, 免 疫 任 何 一 种 弱 毒 苗 后, 其 抗 体 S/P 平 均 值 和 阳 性 率 均 有 所 提 高 ( 图 1 2) 34

主 要 研 究 成 果 图 3 C 与 D 组 PRRSV 抗 体 阳 性 率 图 4 C 与 D 组 PRRSV 抗 体 S/P 平 均 值 及 离 散 度 分 布 通 过 C 与 D 组 结 果 可 知, 免 疫 TJM-F92 株 和 另 一 常 规 使 用 的 弱 毒 疫 苗 后, 其 抗 体 阳 性 率 分 别 表 现 为 不 变 和 升 高, 其 抗 体 S/P 平 均 值 基 本 稳 定 ( 图 3 4) 图 5 E 与 F 组 PRRSV 抗 体 阳 性 率 图 6 E 与 F 组 PRRSV 抗 体 S/P 平 均 值 及 离 散 度 分 布 通 过 E 与 F 组 结 果 可 知, 免 疫 TJM-F92 株 和 另 一 常 规 使 用 的 弱 毒 疫 苗 后, 其 抗 体 阳 性 率 分 别 表 现 为 降 低 和 升 高, 其 抗 体 S/P 平 均 值 小 幅 上 升 ( 图 5 6) 35

主 要 研 究 成 果 图 7 G 与 H 组 PRRSV 抗 体 阳 性 率 图 8 G 与 H 组 PRRSV 抗 体 S/P 平 均 值 及 离 散 度 分 布 通 过 G 与 H 组 结 果 可 知, 免 疫 TJM-F92 株 和 另 一 常 规 使 用 的 弱 毒 疫 苗 后, 其 抗 体 阳 性 率 分 别 表 现 为 降 低 和 升 高, 其 抗 体 S/P 平 均 值 小 幅 上 升 ( 图 7 8) 图 9 I 与 J 组 PRRSV 抗 体 阳 性 率 图 10 I 与 J 组 PRRSV 抗 体 S/P 平 均 值 及 离 散 度 分 布 通 过 I 与 J 组 结 果 可 知, 免 疫 TJM-F92 株 和 另 一 常 规 使 用 的 弱 毒 疫 苗 后, 其 抗 体 阳 性 率 表 现 下 降 趋 势, 其 抗 体 S/P 平 均 值 基 本 稳 定 ( 图 9 10) 从 A~J 组 结 果 可 知, 分 别 免 疫 两 种 疫 苗 的 猪 群 S/P 平 均 值 和 阳 性 率 并 无 显 著 差 异, 其 真 实 效 果 难 以 评 价, 这 可 能 与 免 疫 疫 苗 后 时 间 间 隔 太 短 有 关 系 因 此, 从 蓝 耳 病 抗 体 水 平 区 别 不 出 疫 苗 效 果 2.2 临 床 表 现 与 生 产 性 能 在 免 疫 疫 苗 后, 记 录 保 育 阶 段 始 末 体 重 耗 料 量 及 死 亡 数 量, 妊 娠 母 猪 产 的 死 胎 木 乃 伊 和 弱 仔 数 量, 观 察 母 猪 产 后 反 应 等 由 表 1 可 知, 免 疫 TJM-F92 株 弱 毒 苗 后, 保 育 猪 料 肉 比 (A 与 B 组 除 外 ) 和 死 亡 率 均 较 低 由 表 2 结 果 可 知, 免 疫 弱 毒 苗 母 猪 所 产 死 木 弱 比 例 TJM-F92 株 较 高 出 现 此 结 果 不 仅 与 疫 苗 有 关, 可 能 还 与 该 猪 场 蓝 耳 病 病 毒 感 染 程 度 病 毒 毒 株 类 型 或 其 他 繁 殖 障 碍 性 疾 病 等 有 关 36

主 要 研 究 成 果 表 1 甲 乙 猪 场 仔 猪 免 疫 不 同 弱 毒 苗 后 临 床 记 录 组 别 断 奶 平 均 体 重 /kg 保 育 下 床 平 均 体 重 /kg 料 肉 比 死 亡 率 /% A 组 8.16 24.33 2.02 8(4/50) B 组 7.29 23.11 1.99 10(5/50) C 组 7.50 22.66 2.04 6(3/50) D 组 7.41 23.98 2.07 10(5/50) E 组 7.66 24.89 2.00 2(1/50) F 组 7.44 24.71 2.09 4(2/50) G 组 7.85 21.32 1.56 7.76(9/116) H 组 8.17 20.16 1.63 9.43(10/106) I 组 6.68 20.20 1.57 11.88(12/101) J 组 6.79 19.99 1.64 13(10/77) 表 2 乙 猪 场 母 猪 免 疫 弱 毒 苗 后 产 仔 情 况 记 录 组 别 产 总 仔 数 / 头 死 木 弱 数 / 头 G 组 117 2 H 组 119 6 I 组 108 10 J 组 86 2 3 总 结 对 于 蓝 耳 病 阳 性 不 稳 定 猪 场 来 说, 疫 苗 免 疫 仍 是 目 前 控 制 蓝 耳 病 的 最 佳 方 式 首 先, 必 须 摸 清 楚 该 猪 场 内 流 行 的 蓝 耳 病 病 毒 毒 株 类 型, 然 后 根 据 毒 株 选 择 相 似 度 最 高 的 蓝 耳 病 疫 苗 进 行 免 疫 其 次, 根 据 各 猪 场 猪 群 感 染 蓝 耳 病 病 毒 日 龄 情 况, 制 定 相 应 蓝 耳 病 疫 苗 免 疫 程 序, 以 达 到 控 制 蓝 耳 病 及 其 他 继 发 疾 病 的 效 果 因 此, 在 选 择 蓝 耳 病 疫 苗 前, 需 要 对 疫 苗 的 安 全 性 与 稳 定 性 等 进 行 评 估 该 文 从 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值 变 化 抗 体 阳 性 率, 免 疫 后 猪 群 临 床 表 现 以 及 生 产 成 绩 评 判 了 TJM-F92 株 疫 苗 的 应 用 效 果 从 结 果 可 知 : 在 发 病 率 死 亡 率 方 面, 使 用 TJM-F92 株 疫 苗 后 有 所 降 低 ; 在 蓝 耳 病 抗 体 S/P 值 等 血 清 学 方 面 并 无 规 律 性 ; 由 于 猪 群 还 受 到 其 他 繁 殖 障 碍 性 疾 病 的 影 响, 故 在 产 死 胎 木 乃 伊 和 弱 仔 方 面 无 法 进 行 评 价 另 TJM-F92 株 高 致 病 性 蓝 耳 病 弱 毒 疫 苗 属 基 因 缺 失 疫 苗, 可 以 和 野 毒 株 进 行 区 分, 因 此 在 条 件 相 符 合 情 况 下, 可 以 考 虑 选 择 使 用 TJM-F92 株 疫 苗 37

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