2017.11.11 8:00 am 2017.11.12 23 00 pm 60min
Introduction & Epithelial Tissue 绪论和上皮组织 茵梓浙大医学院 Email: yinzi@zju.edu.cn
Histology o 研究机体微细结构及其功能的学科 + 细胞间质 细胞 组织 器官 系统 Cell Tissue Organ system 上皮组织结缔组织肌组织神经组织
Tissue
组织学实验方法 : 样本的制备 1. Obtaining 2. Fixation 3. Dehydration 4. Clearing 5. Embedding 6. Sectioning 7. Staining 8. Mounting 石蜡切片流程 The procedures of paraffin sectioning
Tissue preparation 驱动轮石蜡块组织刀片 切片机 石蜡切片 固定脱水澄清渗透包埋 37% 37% 福尔马林 戊二醛福尔马林 戊二醛石蜡 塑料树脂梯度浓度乙醇二甲苯石蜡 塑料树脂
Tissue Processing 染色 Staining
染色 Staining H&E 染色法 苏木精 (Hematoxylin): 碱性染料 H&E 主要使细胞内的酸性物质, 如细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色, 这些物质称为嗜碱性 伊红 (Eosin): 酸性染料 主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色, 这些物质称为嗜酸性
H&E 血涂片,Wright s 染色 肠系膜铺片, 偶氮焰红和醛品红染色 骨磨片, 硫堇染色
Histochemistry PAS H&E 染色 小肠上皮 PAS+H&E
Immunohistochemistry - 带标记抗体 抗原 直接法 未标记的一级抗体抗原组织切片玻片 带标记的 二级抗体 间接法
小肠上皮, anti-β actin, 过氧化物酶标记 Immunohistochemistry - 大鼠丘脑, GFAP/Neurofilament, 荧光标记 http://www.abcam.com/beta-actin-antibody-mabcam-8226- ab8226.html#description_images_9 http://fluoview.magnet.fsu.edu/gallery/ratbrain/thalamusexlarge.ht ml
Light Microscopy o o 体外培养的神经嵴细胞 肠系膜组织 明场显微镜 相差显微镜 明场显微镜
o 肌动蛋白微丝 / 细胞核 o o o o
Relative Sizes in Histology Standard Units of Measure micrometer: 10-6 meter nanometer: 10-9 meter
Electron Microscopy (Transmission Electron Microscopy, TEM) (Scanning Electron Microscopy, SEM)
一般流程 样品 细胞 组织培养 组织处理 染料染色 组织化学 / 细胞化学 免疫组化 / 免疫细胞化学等 光学 / 电子显微镜
Electron microscopy Light microscopy Unaided eye 10 m 1 m 0.1 m Human height Length of some nerve and muscle cells Chicken egg 1 cm 1 mm Frog egg 100 m Human egg 10 m 1 m Most plant and animal cells Nucleus Most bacteria Mitochondrion 100 nm 10 nm 1 nm Smallest bacteria Viruses Ribosomes Proteins Lipids Small molecules Superresolution microscopy 0.1 nm Atoms
舒张状态 收缩状态
组织胚胎学研究技术 问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜 观察对象无色, 无反差 染色 (HE 染色 ) 观察对象生化成分不同 细胞化学 免疫组织化学 观察对象是活体 培养
上皮组织 Epithelium Tissue
上皮组织概述 Epithelium General feature 游离面 基膜 侧面 基底面
上皮组织 Classification of Epithelia
covering epithelium
Classification of Epithelia Number of cells 1. Simple Shape of surface cells 1. Squamous 2. Pseudostratified 2. Cuboidal 3. Columnar 3. Stratified 4. Transitional
1 单层扁平上皮 simple squamous epithelium
内皮 (endothelium) 间皮 (mesothelium) 内皮分布于心血管和淋巴管腔表面 促进物质的转运 间皮分布于胸膜 腹膜和心包膜腔面和各内脏器官外表面 有利于内脏的运动
Simple squamous epithelium 肠系膜铺片 肾脏切片
2 单层立方上皮 simple cuboidal epithelium
Thyroid (NO 35): HE
NO.35 Simple cuboidal epithelium 甲状腺切片
3 单层柱状上皮 simple columnar epithelium 高柱状细胞为主, 可夹有其它细胞 核居基部, 长圆形 杯状细胞 (goblet cell): 高脚酒杯状, 顶部有粘原颗粒 纹状缘 : 嗜酸性的带状结构 胃肠 胆囊 子宫内膜等
纹状缘 纹状缘 杯状细胞 柱状上皮细胞
4 假复层纤毛柱状上皮 pseudostratified ciliated columnar epithelium 一层高低不等的细胞, 包括柱状 杯状 锥形 梭形细胞, 以纤毛柱状细胞为主 细胞高低不一, 形似复层, 但均到达基底面 仅柱状和杯状细胞达到上皮游离面 呼吸管道 分泌和保护
(pseudostratified ciliated columnar epithelium)
(pseudostratified ciliated columnar epithelium) 气管切片
5 复层扁平上皮 stratified squamous epithelium 特点 : 多层, 细胞因层次而异, 依次为矮柱状 多边形 梭形和扁平形 ( 表层 ) 基底层细胞为干细胞, 越向表层增生越衰老 基底面与深部的结缔组织连接面凹凸不平 类型 : 角化型 : 皮肤表皮 非角化型 : 口腔 食管 阴道 保护 抗摩擦, 阻止异物侵入
stratified squamous epithelium
No.2 食管 No.14 皮肤 非角化复层扁平上皮 角化复层扁平上皮
6 变移上皮 transitional epithelium 特点 : 多层, 越是表层, 细胞越大 细胞形状和层数可变 分布 : 泌尿管道内表面 保护
膀胱空虚 膀胱充盈 变移上皮 transitional epithelium
transitional epithelium
上皮类型 单层扁平上皮 主要分布 内皮 : 心 血管和淋巴管内面 间皮 : 体腔和各内脏器官外表面 单层上皮 单层立方上皮 肾小管 甲状腺滤泡等 单层柱状上皮 胃 肠 胆囊 子宫等 假复层纤毛柱状上皮 呼吸管道等 复层上皮 复层扁平上皮 非角化的 : 口腔 食管和阴道 角化的 : 皮肤表皮 复层柱状上皮 眼睑结膜 男性尿道等 变移上皮 肾盏 肾盂 输尿管和膀胱
Glandular epithelium
导管 分泌部 / 腺泡 外分泌腺 毛细血管 分泌部 / 腺泡 内分泌腺
唾液腺 导管 外分泌腺 多细胞腺 单细胞腺 杯状细胞 分泌颗粒 分泌部 / 腺泡
粘液性腺 混合性腺 外分泌腺 多细胞腺 单细胞腺 腺泡 导管 浆液性腺 浆液性腺细胞 : 丰富酶原颗粒 黏液性腺细胞 : 丰富黏原颗粒 浆液性腺泡 粘液性腺泡 混合性腺泡
外分泌腺 多细胞腺 单细胞腺 腺泡 导管 单腺 复腺
2.2.2 细胞破裂被膜囊泡胞吐 全浆分泌腺 皮脂腺 顶浆分泌腺 乳腺 局浆分泌腺 唾液腺
- 浆液性腺 腺 内分泌腺 外分泌腺 多细胞腺 单细胞腺 分泌部 / 腺泡 导管 粘液性腺混合性腺单腺复腺
- cell coat 小肠上皮
- microvillus
- microvillus 纹状缘
EM of microvillus
- cilium
EM of cilium
-tight junction
-intermediate junction
-desmosome
-gap junction 6 2nm
-basement membrane
-basement membrane
-plasma membrane infolding 内褶间线粒体丰富, 提供能量
- hemidesmosome
EM of Hemidesmosome 半桥粒
junctional complex
The end!