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543 年临床常见病原菌的分布和耐药率进行统计和分析, 以利于临床合理选用 1 数据与方法 1.1 临床资料收集重庆市荣昌区中医院 2013 年 9 月 2015 年 9 月门诊及各临床科室送检的标本 株 1.2 方法收集患者痰 血液 尿液 ( 晨中段尿 ) 粪便 分泌物 胸腹水等标本,

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福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析

国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!"# $% &' "# " #" ')"* )% $%" )!)#* +)!+), -)%## ).!) )."+% -)%).)'.+. + '')% ) ". %"!!" )-"%' ). )-"%' '."# - ' )'")-#* %#%)# )

北京市2011年1-2月份细菌耐药监测结果

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临床检验杂志 ( 电子版 )201x 年 x 月第 x 卷第 x 期 Clinical Laboratory Journal (Electronic Edition) x 201x, Vol.x No.x use antibiotics reasonably and reduce mortality

2053 近年来, 伴随着抗菌药物用量的不断增加 免疫抑制剂的应用和介入技术的使用, 医院感染和细菌耐药性越来越严重 [1] 病原菌分布和耐药性会随着不同时间 不同地区 不同医院而呈现不同的特点 [2] 所以及时了解医院感染的病原菌分布特点和耐药性状况对于医院感染的控制和抗菌药物的合理使用具有重要价

178 实用器官移植电子杂志 2018 年 5 月第 6 卷第 3 期 Prac J Organ Transplant(Electronic Version),May 2018,Vol.6,No.3 A total number of clinical specimens were co

2016医学版第2期

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国外医药抗生素分册 2017 年 7 月第 38 卷第 4 期. S17. rate of staphylococcus aureus and enterococcus faecium to vancomycin, linezolid and teicoplanin is zero, and to

2015内镜杂志-WMD.FIT)

²4129² non-fermentative bacteria (isolation rate, 26.29%), 346 of fungi (isolation rate, 5.47%), 120 of fastidious bacteria (isolation rate, 1.90%), a

株烧伤患者创面分泌物病原菌种类分布及耐药性分析杨璐等 strains, 49.%), Staphylococcus epidermis (96 strains, 22.4%), and Enterococcus faecalis (75 strains, 8.6%); the

2017 年全国细菌耐药监测报告 2017 年全国细菌耐药监测网成员单位共有 所医院, 其中上报数据医院共 所 上报数据的成员单位中二级医院 379 所, 三级医院 所 ; 经过数据审核, 纳入数据分析的医院共有 所, 其中二级医院 336 所, 占

药物流行病学杂志 204 年第 23 卷 4 期 243 抗菌药是医院应用最为广泛 用药频度较高的菌的分离和耐药性资料进行统计和分析 药品, 其应用涉及临床各科, 在临床治疗中发挥着非.2 抗菌药应用数据资料常重要的作用 但近年来, 随着抗菌药的广泛使用, 从医院信息系统 (HIS) 提取我院 20

复旦学报 医学版 上海多家三甲医院中性粒细胞缺乏伴发热淋巴瘤患者病原菌分布及耐药性分析 励菁菁 朱 琦 王 椿 胡 炯 陈芳源 施菊妹 郝思国 刘 澎 俞夜花 上海交通大学医学院附属第九人民医院血液科 上海 上海交通大学附属第一人民医院血液科 上海 上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科 上海 上海交

2016 年临床分离菌的分布及耐药性分析俞凤等 did not show resistance to vancomycin, tigecycline, and linezolid. For the Gram-negative bacteria in the test, the first

. 86. 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药机制姚欣等 [1] ESBLs 革兰阴性菌的最后一道屏障 肺炎克雷伯菌 (Klebsiella pneumoniae, KPN) 作为院内感染和社区获得性感染重要的肠杆菌科细菌, 对碳青霉烯类耐药 [2] 近年来也有文献报道, 国外 SENTR

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1421 历 360 份, 局 部 使 用 抗 菌 药 物 不 进 行 统 计 1.2 方 法 统 计 分 析 2013 年 住 院 患 者 抗 菌 药 物 的 使 用 情 况 统 计 内 容 包 括 使 用 科 室 年 龄 体 质 量 住 院 时 间 诊 断 抗 菌 药 物 品 种 抗 菌 药 物

2 西安交通大学学报 医学版 第 卷 -&//&/&#/&#&#&/&/2&//&$/2&//2&/ /&"& ##-&$ &#& $&$&22&&#&/#&2/&$"&-# /"#""*"( "$""/!-"#/&/#&/& /&"/&# & -"#"# " /"*"("$2"" "/! -"#$

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检验医学 2014 年 5 月第 29 卷第 5 期 LaboratoryMedicine,May2014,Vol29.No 的大量应用, 细菌对氨基糖苷类药物的耐药越来越严重 产生 16SrRNA 甲基化酶是近年来报道的介导氨基糖苷类高水平耐药的主要机制之一 [1 8] 我们对临床分离

质粒介导的KPC

世界临床药物 WORLD CLINICAL DRUGS Vol.37 NO 随着耐药菌株的出现, 尤其是多重耐药 广泛耐药和全耐药菌株日益增多, 临床治疗面 临极大挑战, 已成为公共卫生领域中的棘手问题 [1] 本次研究对上海交通大学附属第一人民医院 2015 年度细菌耐药结果进行汇总

医院感染发病率前十位的科室分别为 : 综合 ICU(7.20%) 心外科 (6.04%) 神经外科 (5.88%) 胰腺外科 (5.37%) 胸外科 (2.41%) 血液科 (2.09%) 儿科 (1.87%) 呼吸内科 (1.64%) 康复科 (1.39%) 骨科 (1.02%), 见图 2 图

图 2 图 年二季度医院感染发病率前十位科室 2016 年二季度全院医院感染病例漏报率为 14.46%, 其中, 超标 ( 大于目标值 40.00%) 的科室有妇科 手外科 胸外科 神经外科, 如图 3 示 图 年二季度医院感染病例漏报率超标科室医院感染部位前十位顺次为

38 检验医学 2018 年 1 月第 33 卷第 1 期 Laboratory Medicine,January 2018,Vol. 33,No. 1 geriatrics (2 isolates),surgery intensive care unit (ICU)(1 isolate) and

期 李渊婷 金凤玲 #$%$&' 试验检测碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的临床应用 ; 药敏试验指南筛选 即厄他培南抑菌环 77 亚胺培南和美罗培南抑菌环 677 满足任一条件即为可疑菌株 剔除同一患者重复分离株后 共计 株作为试验菌株 阳性对照菌株为 年 月我院分离的第 株产 &/( 产酸克雷伯菌 已

242 中国感染与化疗杂志 2018 年 5 月 20 日第 18 卷第 3 期 Chin J Infect Chemother May 2018 Vol. 18 No. 3 类抗菌药物的耐药率 (23.6% 对 20.9%) 继续呈下降趋势 结论临床分离菌对常见抗菌药物的耐药率仍呈增长趋势 尤其是

804 新乡医学院学报 htp:// 年第 34 卷 specimensofesbls producingklebsielapneumoniaestrainsofelderlypatientsweremainlyfrom urine(36 67%),sputu

441 血流感染是由各种毒素和病原微生物侵入血循环后, 在血液中释放毒素 代谢产物以及进行繁殖, 同时诱导细胞因子释放引起的一种严重的全身感染性疾病 [1], 免疫功能低下的急性白血病患者容易发生血流感染 [2] 近年来, 发生血流感染的致病菌逐渐改变, 革兰阴性 (Gram-negative ba

卷 PCRSu- 菌株 permix 25 滋 L, 补足 ddh 2 O 至总体积 50 滋 L PCR 1.4 ESBLs 基因扩增与测序分析挑取纯培养菌落, 按照说明书提取质粒 反应程序 : 预变性 94 5 min, 变性 94 30s, 退火 30s ( 退火温度参照引物合成

1822 临床与病理杂志, 2015, 35(10) Keywords imipenem and meropenem, and it is 100.0%. Conclusion: The hospital s bloodstream infection pat

125 例糖尿病足感染患者病原菌分布及耐药性分析陈燕, 等 1005 Keywords inhibitor; Gram-positive bacteria were highly susceptible to the glycopeptide, carbapenem and aminoglycosi

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805 aureus (MRCNS) were 38.5% and 77.2%, respectively. No significant difference was found between the gramnegative and gram-positive bacteria. The an

第 0 期 张玉艳, 等 : 泌尿系结石患者尿路大肠埃希菌感染的临床特点及药物敏感性分析 as Ampicillin, Cefazolin, Cefotaxime, Ceftriaxone, Levofloxacin and Ciprofloxacin, with the sensitive rat

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: 403 isolates; type A3 had 4 isolates; type A4 had 3 isolates; type A5 had 2 isolates. Type B C D had no subtypes. Three pairs of isolates had 100% h

42 临床与病理杂志, 2014, 34(1) Key words genes, blamox, blacmy-2, bladha, blaacc, blaact-1, blafox, blaadc were analyzed by PCR. Result

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某院不同病区间由肺炎克雷伯菌引起血流感染的相关分析邓林强等. 63. tazobactam, ceftazidime, imipenem, meropenem, amikacin, ciprofloxacin and levofloxacin but not trimethoprim/ sulfam

6 国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期! " # $ % &! '! 铜绿假单胞菌是医院感染常见的条件致病菌 也是引起医院获得性肺炎和呼吸机相关肺炎最常 见的革兰阴性菌 在形态上可以分为黏液型和非黏液型 在老年慢性呼吸道感染患者的痰样本中常常能分离到黏液型铜绿假单胞菌 近年来较多报道黏液型

522 中南大学学报 ( 医学版 ), 2012, 37(5) method was applied for the drug-susceptibility test; a modified, double-di

期 韩 蕾 雷金娥 祁 杰 等 多重耐药鲍曼不动杆菌的临床流行特征 +,#""##"" &!( "*"/,"#*.*####& ' " ##+,###"# ###!$ 鲍曼不动杆菌 是一种重要的条件致病菌 可引起呼吸机相关性肺炎及创口 血流 泌尿系 中枢神经系统等感染 在长期收住于 '* 的免疫力较

中国现代医学杂志 第 28 卷 Gram-positive bacteria were Enterococcus bacteria. In the catheter associated urinary tract infection group, the Gram-negative bacteri

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446 ChinJPharmacoepidemiol2016,Vol.25,No.7 细菌对抗菌药的耐药率显著增加, 已成为一个严重的公共卫生问题 在日益严峻的多重耐药环境下, 限制和减缓细菌的耐药性已成为当务之急 [1] 细菌的耐药性发展不仅取决于药物自身的特点, 还与某种或某类药物的用量有关 [

Clinical Application and Interpretation of Antimicrobial Susceptibility Testing

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218 中华预防医学杂志 2011 年 3 月第 45 卷第 3 期 ChinJPrevMed,March2011,Vol 45,No 3 DHA,orCIT positiveampc β lactamase producingstrains Antibioticresistantrateswere

714 现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 31 卷第 5 期 2016 年 5 月 感染性疾病是儿科门诊的重要部分, 由于患儿免疫功能相对低下, 此类疾病又具有起病急 发展迅速的特点, 因此如何迅速 有效地控制感染, 延长抗菌药物作用时效成了儿科重症监护病房治疗任务的重中之重 随着抗

482 中国感染与化疗杂志 2017 年 9 月 20 日第 17 卷第 5 期 Chin J Infect Chemother, September. 2017, Vol. 17, No. 5 霉素耐药肺炎链球菌 ; 碳青霉烯类耐药革兰阴性菌 中图分类号 :R378 文献标识码 :A 文章编号 :

2017医学版第1期分

分 级 和 气 管 是 否 受 侵 是 影 响 预 后 的 独 立 危 险 因 素 关 键 词 状 腺 肿 瘤 ; 癌, 乳 头 状 ; 预 后 Clinical outcomes of 600 papillary thyroid carcinoma patients ZHANG Zong-min,

258 传染病信息 2017 年 10 月 30 日第 30 卷第 5 期 Infect Dis Info, Vol. 30, No. 5, October 30, 2017 其中只有希腊 (1.2%) 和罗马尼亚 (1.9%) 两个国家高于 1.0%; 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率从

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min

03 年 8 月 Vol.5 No.8 支 气 管 哮 喘 ( 简 称 哮 喘 ) 是 儿 童 时 期 最 常 见 的 慢 性 呼 吸 道 疾 病 之 一 近 年 来, 随 着 人 类 文 明 的 发 展 社 会 化 进 程 的 加 快 经 济 水 平 的 提 高 和 科 技 的 进 步, 环 境

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ment group was more effective than that of the control group OR = % CI = Conclusion The clinical efficacy of Chinese medic

1828 临床与病理杂志, 2016, 36(11) 鲍曼不动杆菌是一种非发酵的革兰阴性条 件致病菌, 在自然界 医院环境 人体皮肤及黏 膜表面广泛存在, 可引起各种组织和器官感染, 包括肺炎 脑膜炎 菌血症 尿路感染 外科 伤口感染和软组织感染等

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1938 临床与病理杂志, 2015, 35(11) Keywords were positive for culturing of pathogenic microorganisms (positive rate, 25.64%). The proporti

htp://aammt.tmmu.edu.cn 第三军医大学学报,2017,39(22) 2201 inhibitoryconcentrationmethod.whonet5.6softwarewasusedtoanalyzetheresultsofdrugsensitivity tests.imi

mazef 基因在肠球菌中的分布及与耐药的相关性研究张利霞等 VITEK Compact. Results The mazef gene was found is 86.7% of the genomes in enterococcal isolates. The positive ra

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检验医学 年 月第 卷第 期 ) + ) + *(1 "1 ; 二 试剂与仪器细菌基因组提取试剂盒 北京天根生化科技有限公司 4 & 标准带 A 4 上海生工生物工程有限公司 试验所用引物 上海生工生物工程有限公司 # 159 ) 酶 大连宝生物工程有限公司 1"1 54 聚合酶

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by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2

185 的 天津市儿童医院是华北地区规模较大的综合性的三级甲等儿科医院, 日均门诊量 余人次, 儿科铜绿假单胞杆菌耐药性情况调查具有一定的代表性和临床指导意义 因此, 本研究对 2014 年 6 月 1 日 2017 年 5 月 31 日天津市儿童医院分离得到的 572 株铜绿假单胞菌进

我院 1 6 年革兰阳性菌耐药监测数据研究 汤进等 identification system for bacterial identification. The drug sensitivity test and results were determined by referenci

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3828 中华临床医师杂志 ( 电子版 )2014 年 11 月第 8 卷第 21 期 Chin J Clinicians(Electronic Edition),November 1,2014,Vol.8,No.21 drug resistance was only 12.9%. Conclusi

期 曹 敏等 贵州部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析及. 基因型检测.3" / &,-/ +-+ <A AA /A-++,+*',++,+,-/,+ +-+/ *, +,/,,+-3-+,/+&,-/ -) /*+/-) / /,++,+,-/,+.,-/

Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr

中国抗生素杂志 年 月第 卷第 期 文章编号 : - ( ) - - 感染性心内膜炎患者病原菌分布及耐药性分析 王佳高辉徐益彭传梅黄云昆姚瑶朱雯梅 ( 昆明医科大学附属延安医院 / 云南心血管病医院检验科, 昆明 ) 摘要 : 目的分析感染性心内膜炎患者血培养病原菌及其耐药性, 为临床

310 检验医学 2016 年 4 月第 31 卷第 4 期 laboratory Medicine,april 2016,Vol. 31,no. 4 and ampc-producing isolates were 0.00%,25.00% and 37.50%. Conclusions Mult

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血流感染的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的分子机制及临床研究马晓波等 alignment. The clinical data were analyzed. Results A total of 27 patients with CRAB bacteremia were studied f

不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体混合感染调查

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检验医学 2014 年 6 月第 29 卷第 6 期 LaboratoryMedicine,June2014,Vol29.No ( 编号 :1~30, 无重复标本 ), 经 VITEK 2Compact 微生物分析系统 ( 法国生物梅里埃公司 ) 鉴定, GN 13 药物敏感性卡检测表型

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中国抗生素杂志 208 年 5 月第 43 卷第 5 期. 53. 文章编号 :00-8689(208)05-053-06 30 株 CRE 临床感染特点及 基因检出情况分析 董爱英 陈东科 2 李春娟 3 邢欢 张嫘 汪亚斯 付玉冰 ( 华北理工大学附属医院, 唐山 063000;2 北京医院检验科, 北京 00730;3 开滦集团总医院, 唐山 063000) 摘要 : 目的 了解我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床分离的 30 株耐碳青霉烯类肠杆菌科 (carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE) 菌株 基因型检出情况, 感染患者的临床特征, 以及对常用抗菌药物的耐药特点 方法 临床分离菌株由美国 BD 公 司生产的 Phoenix-00 全自动细菌鉴定 / 药敏系统进行菌株鉴定和药敏试验 改良 Hodge 试验检测产碳青霉烯酶,EDTA 协同试验 筛查金属 β- 内酰胺酶 利用特异性引物进行 基因 PCR 扩增, 采用双脱氧末端终止法进行 DNA 测序, 所测序列与 GenBank 基因库中的已知序列进行 BLAST 比对 结果 () 菌株分布情况 : 我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床标本中分离出对碳青霉烯类抗 生素耐药肠杆菌科细菌共 30 株, 其中肺炎克雷伯菌 6 株, 占 53.3%; 阴沟肠杆菌 2 株, 占 40.0%; 布氏柠檬酸杆菌和弗氏柠檬酸 杆菌各 株, 基因确证, 共有 5 株为产 NDM- 酶菌株,5 株菌包括肺炎克雷伯菌 2 株, 阴沟肠杆菌 2 株, 布氏柠檬酸杆菌 株, 这些细菌来自不同的科室, 但主要分布在重症医学科 (5/30, 50.0%), 神经内科重症病房 (8/30, 26.7%) 标本主要来源于痰 (20/30, 66.7%), 其次为尿液 (5/30, 6.7%), 血液 4 株 (3.3%), 引流液 株 (3.3%) 5 株产 NDM- 酶菌株分离自 4 例患者,3 株分离自 患者尿液标本,2 株分离自患者痰标本 ; 感染患者平均年龄为 73 岁, 平均住院时间 0 个月,2 例死亡 (2) 药物敏感性试验结果 : 30 株 CRE 对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为 00% 和 86.7%, 对其他 β- 内酰胺类抗生素耐药率均为 00%; 对氯霉素 庆大霉素 左氧氟沙星 环丙沙星的耐药率在 76.7%~93.3% 之间 ; 对多黏菌素和替加环素敏感率高达 00%, 其次为 复方磺胺甲噁唑和阿米卡星, 敏感率分别为 66.7% 和 46.7% 5 株产 NDM- 酶菌株对多黏菌素和替加环素均敏感,3 株对复方磺胺 甲噁唑敏感,2 株对阿米卡星敏感 ; 而对 β- 内酰胺类抗生素以及喹诺酮类 氯霉素类等均耐药 结论 我院流行的 CRE 菌株主要 分离自重症医学科和神经内科重症病房患者, 对多种抗生素呈高度耐药, 其中产 NDM- 酶菌株主要来自长期住院的高龄患者, 且死亡率较高, 应对其感染的风险因素进行调查, 并有针对性的采取感染预防措施进行防控 关键词 : 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌 ; 感染 ; 基因 中图分类号 :R978., R446.5 文献标志码 :A Analysis of the clinical infection characteristics and detection of gene from 30 CRE isolates Dong Ai-ying, Chen Dong-ke 2, Li Chun-juan 3, Xing Huan, Zhang Lei, Wang Ya-si and Fu Yu-bing ( North China University of Science and Technology Affiliated Hospital,Tangshan 063000; 2 Department of Clinical Laboratory, Beijing Hospital, Beijing 00730; 3 Kailuan Group General Hospital,Tangshan 063000) Abstract Objectives To investigate the gene of 30 CRE isolates recovered from April 203 to March 204 in our hospital, and the clinical characteristics of patients with CRE infections, as well as its relationship to antibiotic resistance. Methods Identification and drug resistance were tested by the BD Phoenix-00 system. Modified Hodge Test was used for the screening of carbapenemase. EDTA-synergy test was used for the detection of metallo-β-lactamases. PCR was performed for and the positive products were sequenced and analyzed with 收稿日期 :207-2-08 作者简介 : 董爱英, 女, 生于 968 年, 教授, 主任技师, 研究方向 : 病原微生物感染诊断及耐药研究,E-mail: heweijun@26.com

. 54. 30 株 CRE 临床感染特点及 基因检出情况分析董爱英等 BLAST. Results () The distribution of isolates: the 30 CRE isolates from the clinical specimens of patients in our hospital between April 203 and March 204, including 6 isolates of Klebsiella pneumoniae (53.3%), 2 isolates of Enterobacter cloacae (40%), one isolate of Citrobacter brinell, and one isolate of Citrobacter freundii. These isolates were mainly collected from the intensive care unit (5/30, 50.0%), and neurological intensive care unit (8/30, 26.7%). Most of them were isolated from the sputum sample (2/30, 66.7%), followed by the urine (5/30, 6.7%), the blood (4/30, 3.3%), and the drainage fluid (/30, 3.3%). The five gene carrying isolates were recovered from four patients with an average age of 73, and the average hospitalization time lasted 0 months; among these, three isolates were collected from urine, and two from sputum; two patients survived and two patients died. (2) The results of the drug resistance test: the resistance rates of 30 CRE to imipenem and meropenem were 00% and 86.7%, respectively; the resistance rates to the other β-lactam antibiotics were 00%. The resistance rates to chloramphenicol, gentamicin, levofloxacin, and ciprofloxacin were among 66.7%~93.3%. All of them were most sensitive to colistin and tigecycline, the sensitive rates were 00%; followed by trimethoprim/sulfamethoxazole and amikacin, the sensitive rates were 66.7% and 46.7%. All of the five NDM--producing isolates were sensitive to colistin and tigecycline; three isolates were sensitive to trimethoprim/sulfamethoxazole, and two isolates were sensitive to amikacin. All of the five NDM- -producing isolates were resistant to β-lactam antibiotics, quinolones, and chloramphenicols. Conclusion 30 CRE isolates in our hospital were mainly collected from ICU and NICU, and were highly resistant to multiple antibiotics. The NDM--producing isolates were mainly recovered from long-term hospitalized senile patients with a high mortality rate. Therefore, we should investigate the risk factors of infections, and take effective measures to control infections. Key words Carbapenem resistant Enterobacteriaceae; Infection; gene 近年来, 随着碳青霉烯类抗菌药物在临床上的使用率增加, 碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌 (carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE) 的检 [-2] 出率呈现出明显的上升趋势 NDM- 是 B 类金属 β- 酰胺酶中最受关注的一种酶, 编码该酶的基因为 该基因作为肠杆菌科细菌对碳青霉烯类耐药机制之一, 自 2008 年首次发现后, 全球 50 多个国 [3-4] 家和地区都出现了产 NDM- 酶菌株的报道 本文分析了我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床分离的 30 株对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌以及其中产 基因菌株检出情况, 感染患者的临床特征, 对常用抗菌药物的耐药特点, 旨在为临床抗感染治疗和减少耐药基因的传播提供一定的理论依据 材料与方法. 材料.. 菌株来源连续收集我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床标本中分离的肠杆菌科细菌, 筛选出对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌 30 株 ( 剔除同一患者同一部位的重复菌株 )..2 主要仪器与试剂美国 BD 公司生产的 Phoenix00 全自动细菌鉴定 / 药敏系统及 BD 公司的配套试剂 ; 电泳仪为美国 Bio- Rad 公司产品 ; 德国艾本德公司生产的 PCR 扩增仪 ; 细菌 DNA 提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公 司 ; 上海生物工程有限公司生产的 PCR 试剂 ; 温州 市康泰生物科技有限公司生产的培养基 ; 药敏纸片 购自英国 Oxoid 公司 替加环素 E-test 试条由温州康 泰公司惠赠..3 质控菌株 铜绿假单胞菌 AT C C 2 7 8 5 3 大肠埃希菌 ATCC25922 金黄色葡萄球菌 ATCC25923 为药敏 质控菌株 ; 肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-705 为改 良 Hodge 试验阳性对照菌株 肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-706 为改良 Hodge 试验阴性对照菌株 质控菌 株全部购自温州市康泰生物科技有限公司.2 方法 使用由美国 BD 公司生产的 Phoenix-00 全自动 细菌鉴定 / 药敏系统进行菌株鉴定和药敏试验 替加 环素药敏方法为 E-test 敏感与耐药判读标准参照美 国临床实验室标准化研究协会 (CLSI)M00-S26 文件 206 年推出的判读标准 [5] 采用改良 Hodge 试验检测 细菌是否产碳青霉烯酶,EDTA 协同试验筛查金属 β- 内酰胺酶 [5] 对 5 株 EDTA 协同试验阳性菌株进行 基因确证试验, 使用细菌 D N A 提取试剂盒按 照操作说明书提取细菌 D N A 作为模板, 利用 引物 P - G T C T G G C A G C A C A C T T C C TA ; P 2 - TAGTGCTCAGTGTCGGCATC 对 基因进行 特异性扩增 反应程序为 :94 预变性 5min, 然后

中国抗生素杂志 208 年 5 月第 43 卷第 5 期 94 变性 min,55 退火 min, 最后 72 min, 循环 30 个周期, 最后 72 延伸 0min; 取 0μL 扩增产物点样于.0% 琼脂糖凝胶, 在 00V 电压电泳 40min, 电泳结束后, 用凝胶成像仪观察结果, 出现目的性条带即为检测基因阳性 PCR 扩增产物经基因测序后与 GenBank 基因库中的已知序列进行 BLAST 比对,PCR 基因扩增及基因序列比对由卫生部北京医院陈东科老师协助完成 2 结果 2. 菌株分布及临床特征我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床标本中分离出对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌共 30 株,. 55. 其中肺炎克雷伯菌 6 株, 占 53.3%; 阴沟肠杆菌 2 株, 占 40.0%; 布氏柠檬酸杆菌和弗氏柠檬酸杆菌各 株主要分布在重症医学科 5 株 (50.0%), 神经内科重症病房 8 株 (26.7%) 标本主要来源于痰 20 株, 占 66.7%, 其次为尿液 5 株 (6.7%), 血液 4 株 (3.3%), 引流液 株 (3.3%) 30 株肠杆菌科细菌分离自 28 例患者,A8 号和 A9 号 A25 号和 A26 号菌株分离均自同一位患者 28 例细菌感染患者平均年龄约为 74 岁, 多有较严重的呼吸道疾病, 心脑血管疾病, 严重外伤, 重症感染等基础疾病, 平均住院时间 8 个月, 具体情况见表 2.2 药物敏感性试验 表 细菌感染患者的临床特征 Tab. The cinical characteristics of patients with bacterial infection 菌株编号 性别 / 年龄 ( 岁 ) 住院科室 基础疾病 标本来源 菌株名称 住院时间 / 月 A0 女 /75 重症医学科 重症肺炎 痰 肺炎克雷伯菌 A02 # 男 /90 重症医学科 肾功能不全 痰 肺炎克雷伯菌 0 A03 男 /77 重症医学科 重症肺炎 痰 肺炎克雷伯菌 4 A04 女 /88 重症医学科 双侧肺炎 痰 肺炎克雷伯菌 4 A05 男 /86 重症医学科 慢性阻塞性肺疾病 痰 肺炎克雷伯菌 A06 男 /82 重症医学科 重症肺炎 痰 肺炎克雷伯菌 6 A07 女 /76 重症医学科 冠心病 血液 肺炎克雷伯菌 4 A08 男 /76 神经内科重症病房 抽搐待查 痰 肺炎克雷伯菌 2 A09 男 /7 神经内科 意识不清待查 痰 肺炎克雷伯菌 7 A0 男 /82 神经内科重症病房 脑梗死 痰 肺炎克雷伯菌 6 A 男 /80 神经内科重症病房 脑梗死 痰 肺炎克雷伯菌 7 A2 男 /86 神经内科重症病房 慢性阻塞性肺疾病 痰 肺炎克雷伯菌 7 A3 男 /83 神经内科重症病房 脑出血 痰 肺炎克雷伯菌 4 A4 男 /97 神经内科重症病房 脑梗死 痰 肺炎克雷伯菌 2 A5 女 /76 呼吸内科 发热待查 痰 肺炎克雷伯菌 9 A6 # 男 /63 神经内科重症病房 脑梗死 尿液 肺炎克雷伯菌 7 A7 男 /79 重症医学科 冠心病 痰 阴沟肠杆菌 2 A8 # 女 /62 重症医学科 感染性休克 痰 阴沟肠杆菌 6 A9 # 女 /62 重症医学科 感染性休克 尿液 阴沟肠杆菌 6 A20 女 /75 重症医学科 发热待查 痰 阴沟肠杆菌 9 A2 男 /84 重症医学科 抽搐待查 痰 阴沟肠杆菌 4 A22 男 /57 重症医学科 喘息待查 痰 阴沟肠杆菌 7 A23 男 /54 重症医学科 慢性肾功能衰竭 尿液 阴沟肠杆菌 3 A24 男 /59 重症医学科 肝癌晚期 血液 阴沟肠杆菌 A25 男 /30 普通外科 头外伤 血液 阴沟肠杆菌 A26 男 /30 普通外科 头外伤 引流液 阴沟肠杆菌 A27 女 /46 普通外科 急性胰腺炎 血液 阴沟肠杆菌 A28 男 /8 普通外科 急性胰腺炎 痰 阴沟肠杆菌 A29 # 男 /78 神经内科重症病房 脑梗死 尿液 布氏柠檬酸杆菌 7 A30 男 /6 康复科 肢体活动障碍 尿液 弗氏柠檬酸杆菌 注 : # 为 NDM- 菌株

. 56. 30 株 CRE 临床感染特点及 基因检出情况分析董爱英等 30 株 CRE 对头孢菌素类 含 β- 内酰胺酶抑制剂的 复合制剂和单环 β- 内酰胺类抗生素的耐药率最高, 均为 00%; 对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为 00% 和 86.7%; 对氯霉素 庆大霉素 左氧氟沙星 环丙沙星的耐药率在 76.7%~93.3% 之间 ; 对多黏菌素 最敏感, 敏感率高达 00%, 其次为复方磺胺甲噁唑 和阿米卡星, 敏感率分别为 66.7% 和 46.7%( 表 2) 2.3 表型确认试验 30 株对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌中, 26 株改良 Hodge 试验阳性, 阳性率为 86.7%(26/30) 5 株双纸片协同试验阳性, 阳性率为 6.7%(5/30), 包 括肺炎克雷伯菌 2 株, 阴沟肠杆菌 2 株, 布氏柠檬酸 杆菌 株 2.4 产 NDM- 酶菌株的实验结果 5 株 EDTA 协同试验阳性菌株进行 基因确 证, 均为产 NDM- 酶菌株, 其实验结果如下 2.4. PCR 基因扩增及基因序列比对 PCR 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离, 并进行 用凝胶成像仪观察结果, 可见待测菌株的目的基因 条带, 结果见图 PCR 扩增产物经基因测序后与 GenBank 基因库中的已知序列进行 BLAST 比对, 表 表 2 30 株细菌对常用抗菌药物的耐药情况 Tab. 2 Resistance of the 30 strains of bacteria to commonly used antibacterial agents 抗菌药物 敏感 /S 耐药 /R # 株数敏感率 /% 株数耐药率 /% 头孢唑林 0 0 30 00.0 头孢他啶 0 0 30 00.0 头孢噻肟 0 0 30 00.0 头孢吡肟 0 0 30 00.0 阿莫西林 / 克拉维酸 0 0 30 00.0 头孢哌酮 / 舒巴坦 0 0 30 00.0 哌拉西林 / 三唑巴坦 0 0 30 00.0 氨曲南 0 0 30 00.0 亚胺培南 0 0 30 00.0 美罗培南 4 3.3 26 86.7 庆大霉素 4 20.0 24 80.0 阿米卡星 4 46.7 6 53.3 左氧氟沙星 3 0.0 27 90.0 环丙沙星 2 6.7 28 93.3 氯霉素 7 23.3 23 76.7 复方磺胺甲噁唑 20 66.7 0 33.3 多黏菌素 30 00.0 0 0.0 * 替加环素 30 00.0 0 0.0 注 : # 中介菌株计入耐药菌株 ; * 替加环素为 E-test 方法 bp 2,000,000 750 500 250 00 明与 基因有 00% 的相似性 2.4.2 菌株分布及其临床特征 5 株菌包括肺炎克雷伯菌 2 株, 阴沟肠杆菌 2 株, 布氏柠檬酸杆菌 株 ; 其中分布在重症医学科 3 株, 神经内科重症病房 2 株 ;3 株分离自患者尿液标本包 括肺炎克雷伯菌 阴沟肠杆菌和布氏柠檬酸杆菌各 株,2 株分离自患者痰标本包括肺炎克雷伯菌 阴 沟肠杆菌各 株 5 株产 NDM- 酶菌株分离自 4 例患 者, 其中一位患者的痰和尿液标本中同时分离出了 产 NDM- 酶的阴沟肠杆菌 4 例细菌感染患者平均年 龄为 73 岁,2 例脑梗死, 例肾功能不全, 例感染性 休克, 平均住院时间 0 个月 4 例细菌感染患者最终 2 例存活,2 例死亡 2.4.3 药物敏感性试验结果 ( 表 3) 5 株细菌对多黏菌素和替加环素均敏感,3 株对 复方磺胺甲噁唑敏感,2 株对阿米卡星敏感 ; 而头孢 菌素类 碳青霉烯类 单环 β- 内酰胺类和含 β- 内酰胺 酶抑制剂的复合制剂等 β- 内酰胺类抗生素以及喹诺 酮类 四环素类 氯霉素类等非 β- 内酰胺类抗生素 均耐药 3 讨论 M 2 3 4 5 阳性对照 注 :DNA Marker DL2000;~5 为菌株编号 图 部分菌株扩增 基因产物电泳图 Fig. Electrophoresis of gene amplification product with from some strains 3. 对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌 本研究中我院 203 年 4 月 204 年 3 月临床标本 中共分离出 30 株对 CRE, 其中以肺炎克雷伯菌最多 6 株, 占 53.3%, 除 株分离自血液标本, 株分离自 尿液标本外, 其余 4 株全部分离自痰标本 其次为 阴沟肠杆菌 2 株, 占 40.0%, 分离自痰标本 6 株, 分 离自血液 尿液 引流液分别为 3 株 2 株和 株 布 氏柠檬酸杆菌和弗氏柠檬酸杆菌各分离出 株, 均来

中国抗生素杂志 208 年 5 月第 43 卷第 5 期. 57. 菌株编号头孢噻肟亚胺培南美罗培南氨曲南 表 3 常用抗菌药物对产 NDM- 酶菌株的 MIC 值 (μg/ml) Tab. 3 The MIC values (μg/ml) of common antibiotics on NDM- isolates 阿莫西林 / 克拉维酸 * 左氧氟沙星氯霉素阿米卡星复方磺胺甲噁唑替加环素 多黏菌素 A02 >32 >8 >8 >6 >6/8 >8 >6 >32 0.5/9.5(S) 0.25(S) 0.5(S) A6 >32 >8 >8 >6 >6/8 >8 >6 >32 >2/38 0.25(S) 0.5(S) A8 >32 >8 >8 >6 >6/8 >8 >6 8(S) 0.5/9.5(S) 0.25(S) 0.5(S) A9 >32 >8 >8 >6 >6/8 >8 >6 8(S) 0.5/9.5(S) 0.25(S) 0.5(S) A29 >32 >8 >8 >6 >6/8 >8 >6 >32 >2/38 0.25(S) 0.5(S) 注 : * 为 E-test 方法, S 为敏感 自于尿液标本 此结果显示我院 CRE 在临床能引起患者多个部位的感染 这些细菌来自不同的科室, 主要分布在重症医学科 5 株 (50.0%), 神经内科重症病房 8 株 (26.7%), 其次为普通外科 4 株 (3.3%), 神经内科 呼吸内科和康复科各 株 ; 分析造成这种分布的原因是重症医学科和神经内科重症病房这两个科室内多为老年及危重患者, 基础疾病严重须长期住院治疗, 长期使用大剂量广谱抗生素, 机体免疫力低下, 大部分患者须进行气管插管及机械通气 留置导尿管 胃管 静脉留置导管等侵入性诊疗操作破坏了皮肤黏膜屏障, 这些都是导致 CRE 感染传播 [6] 或定植的危险因素 本研究中对 30 株菌进行体外药敏检测结果显示, 对头孢菌素类 含 β- 内酰胺酶抑制剂的复合制剂和单环 β- 内酰胺类抗生素的耐药率最高, 均为 00%; 对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率也分别达到了 00% 和 86.7%; 对氯霉素 庆大霉素 左氧氟沙星 环丙沙星的耐药率在 66.7%~93.3% 之间 对多黏菌素和替加环素敏感率高达 00%, 其次为复方磺胺甲噁唑和阿米卡星, 敏感率分别为 66.7% 和 46.7%; 无对抗生素中介菌株 因此, 多黏菌素和替加环素也是目前国内外治疗 CRE 感染首选推荐用药 而复方磺胺甲噁唑以及同为氨基糖苷类抗生素的阿米卡星和庆大霉素, 也可根据其敏感程度, 作为临床治疗的备选用药, 但本研究中阿米卡星和庆大霉素二者的敏感率却相差很大, 前者为 46.7%, 后者为 20.0%, 分析其原因可能是细菌所产生的氨基糖苷类钝化酶 AAC(3)-II 对后者具有很强的水解能力, 因此易耐药, 氨基糖苷类的主要不良反应是耳毒性和肾毒性, 临床对于肾功能不全者要慎用 3.2 产 NDM- 酶肠杆菌科细菌 基因我国最早在屎肠球菌和鲍曼不动杆 [7] 菌等非发酵菌中被发现, 在 20 年以后开始出现产 [8] NDM- 酶的肠杆菌科细菌, 而且产 NDM- 酶肠杆菌科细菌主要菌种为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌, 其他 [9-0] 细菌有阴沟肠杆菌 变形菌 弗氏柠檬酸菌等 本文通过对 CRE 菌株进行了 基因检测,5 株产 NDM- 酶肠杆菌科细菌包括肺炎克雷伯菌 2 株, 阴沟肠杆菌 2 株, 布氏柠檬酸杆菌 株,203 年 4 月 204 年 3 月间并未检测到大肠埃希菌 CRE 菌株以及携带 基因菌株 ; 分析造成这种差异的原因, 首先不除外监测范围和菌株数量的局限造成的漏检情况, 再有就是细菌耐药性的产生和发展受多种因素的影响, 由于不同地区或同一地区不同医院的经验用药习惯不同所以形成了不同的药物选择性压力, [] 造成不同耐药菌株的流行 因此, 我们下一步计划扩大研究范围, 对 204 207 年所有 CRE 菌株进行基因型检测, 进一步明确不同基因型的菌株分布及流行趋势 另外,5 株菌株分别分离自 4 例患者, 原因是在一位患者的痰和尿液标本中同时分离出了产 NDM- 的阴沟肠杆菌, 两株细菌有待于进一步进行同源性分析 患者分布在重症医学科和神经内科重症病房, 平均年龄为 73 岁,2 例脑梗死, 例肾功能不全, 例感染性休克, 平均住院时间 0 个月 目前多个国家和地区都有了产 NDM- 酶菌株的报道, 经研究发现 [] 细菌感染患者多有曾在印度旅游或就医的经历 本研究中 4 位患者并未曾和外国人接触, 也无出国史, 其 基因的来源须进一步探究 4 例细菌感染患者最终 2 例存活,2 例死亡 基因能通过质粒在细菌间进行自由复制和转染, 也可随转座子 整 [2] 合子等可移动基因元件进行细菌间的水平传播, 从而使产 NDM- 酶菌株具有广泛传播和变异的巨大潜能 因此, 对于已经确诊感染患者要及时进行隔离治疗和跟踪监测 加强产 NDM- 酶菌株的网络监测工作, 规范化管理抗生素的使用, 争取做到对产 NDM- 酶菌株的 零容忍

. 58. 30 株 CRE 临床感染特点及 基因检出情况分析董爱英等 参考文献 [] Kaase M, Szabados F, WaSsill L, et a. Detection of carbapenemases in Enterobacteriaceae by a commercial multiplex PCR[J]. J Clin Microb, 202, 50(9): 35-38. [2] Kaezmarek F, Dib-Hajj F, Shang W, et al. High-level carbapenem resistance in a Klebsiella pneumoniae clinical isolate is due to the combination of bla (ACT-l) beta-lactamase production, porin ompk35/36 insertional inactivation, and down-regulation of the phosphate transport porin phoe[j]. Antimicrob Agents Chemother, 2006, 50(0): 3396-3406. [3] Deshpande P, Rodrigues C, Shetty A, et a. New delhi metallo-β lactamase (NDM-) in Enterobacteriaceae: Treatment options with carbapenems compromised[j]. Assoc Physic India, 200, 58: 47-50. [4] Yong D, Toleman M A, Giske C G, et a. Characterization of a new met allo-beta-lactamase gene, bla (NDM-), and a novel erythromycin esterase gene carried on a unique genetic structure in Klebsiella pneumoniae sequence type 5 from India[J]. Antimicrob Agents Chemother, 2009, 53(2): 5046-5054. [5] Clinical and Laboratory Standards Institute. M00S. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing: Twenty-sixth edition[s]. Wayne, PA: CLSI, 206. [6] Qin X, Yang Y, Hu F, et al. Hospital clonal dissemination of enterobacter aerogenes producing carbapenemase KPC- 2 in a Chinese teaching hospital[j]. J Med Microbiol, 204, 63(Pt2): 222-228. [7] 黄留玉. 关于超级细菌 NDM-l 的若干思考 [J]. 解放军医学杂志, 200, 35(2): 409-4. [8] Dai W, Sun S, Yang P, et al. Characterization of carbapenemases, extended spectrum β-lactamases and molecular epidemiology of carbapenem-non-susceptible Enterobacter cloacae in a Chinese hospital in Chongging[J]. Infect Genet Evol, 203, (4): -7 [9] 孙长贵, 杨燕, 杨丽君, 等. 临床细菌耐药流行病学变化 [J]. 临床检验杂志, 202, 30(0): 803-82. [0] 孙秋, 黄文祥. 新德里金属 -β- 内酰胺酶 的研究进展 [J]. 中华临床感染病杂志, 203, 6(6): 37-377. [] Kumarasamy K K, Tolema M A, Walsh T R, et al. Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India, Pakistan, and the UK: A molecular, biological, and epidemiological study[j]. Lancet Infect Dis, 200, 0(9): 597-602. [2] Gupta N, Limbago B M, Patel J B, et a. Carbapenemresistant Enterobacteriaceae: Epidemiology and prevention[j]. Clin Infect Dis, 20, 53(): 60-67.