体密码子这些基因表达为约 04 0, 的单链酶原目前成熟以及前 46 6/ 蛋白的晶体结构都已经被确定其结构非常相似 4/ 这些 6 6' 折叠成个疏水缔合相互作用的结构域即 /4 链 4 折叠和一个 4 螺旋催化三元体位于两个结构域的交界处根

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袖剖叶
7 years ago
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1 小型综述利用激肽释放酶相关肽酶 6 6' 作为肿瘤生物标志物!! "!! # $ %&! 7 77 背景 7 人类激肽释放酶相关肽酶 6 6' 家族包括个高度保守的丝氨酸蛋白酶均由人类基因组中最大的连续蛋白酶基因群编码目前已有文献报道这个家族中的多个酶具有作为肿瘤生物标志物的潜在价值除了人们已经认识到它们在前列腺癌卵巢癌和乳腺癌中作为生物标志物的价值外最近的研究数据表明 6 6' 在其他肿瘤包括胃肠道头颈部肺和脑部恶性肿瘤中具有相似的作用在 6 6 肿瘤生物标志物中前列腺特异性抗原又称为 6 6 是在泌尿肿瘤学中最为大家所认可的一个内容 7 尽管对于个别 6 6' 用作生物标志物的认识已经取得了实质性进展但是目前的挑战在于设计出生物标志物组合项目以提高预后疗效监测和诊断的准确性迄今为止适用于前列腺癌卵巢癌及肺癌的多参数 6 6 项目组合已经发表除了具有生物标志物作用之外有新的证据显示 6 6' 在肿瘤发病机理方面具有很多关键性的功能作用具有成为治疗靶点的潜在应用价值总结 76 6' 可用作多种肿瘤的生物标志物但是单个酶由于缺乏足够的特异性或灵敏度而无法用于临床 6 6' 和其他可供选择的生物标志物组合后可以提供更好的检测性能 77 肿瘤的分子生物标志物可用于肿瘤的筛查诊断预后肿瘤分级干预治疗时药物疗效的监测确定肿瘤的复发或缓解但直到 8 年前人们才开始对激肽释放酶相关肽酶 6 6' 用作肿瘤生物标志物产生兴趣当时!' 试图定量检测血清中的前列腺特异性抗原!. 也称作 6 6 随后又对这个蛋白作为前列腺癌标志物的潜在应用进行了临床研究从那时起!. 作为前列腺癌的生物标志物广为人知由于!. 和其他 6 6' 的结构相似因此近年来对该家族其他成员作为肿瘤生物标志物的潜在作用进行了广泛研究 6 6' 属于丝氨酸蛋白酶中的糜蛋白酶家!" # $ %&'!" # $ '# (##) "' %&' #" *+, # ' - (.' ' "' "!" # $ '# /00 %&'.&1 - (1 / /2 34# '5'1 1 族 6 6' 家族的第一个成员发现于 0 世纪 0 年代由于是胰腺中含量最高的蛋白酶因此根据胰腺的希腊语,#,' 将其命名为组织激肽释放酶,#, 此后的 2/0 年至 90 年代末期之间在 #,'. # )#$ 4' $" 以及 :$ 等人各自独立的研究下发现了特性最为明确的 6 6 即 6 6!. 随即又发现了丝氨酸蛋白酶 6 6 家族中另一个新成员即 6 6 又称为人腺体激肽释放酶 4 或 " 64 0 世纪 20 年代中期经过我们实验室和其他人员在前基因组时代末期的进一步研究最终鉴定了另外个新的丝氨酸蛋白酶基因的表征它们与此前被发现的 6 6 编码基因共同位于人类基因组染色体 2; 1 区域由于它们的结构和序列与 6 6 激肽释放酶 6 6 激肽释放酶相关肽酶和 6 6 激肽释放酶相关肽酶相似这些新的基因也被列入 6 6 基因家族 6 6 基因组具有许多相同的特征包括外显子内含子的组织外显子区域的数量和长度内含子相位保守翻译的起始位和停止位以及催化三元

2 体密码子这些基因表达为约 04 0, 的单链酶原目前成熟以及前 46 6/ 蛋白的晶体结构都已经被确定其结构非常相似 4/ 这些 6 6' 折叠成个疏水缔合相互作用的结构域即 /4 链 4 折叠和一个 4 螺旋催化三元体位于两个结构域的交界处根据最近完成的最为复杂的表达谱 6 6' 同时出现在很多生物体液和组织中其特异性各不相同 9 有趣的是在一些肿瘤和非肿瘤疾病中 6 6' 的转录和蛋白质水平会同时上调或下调表明它们具有共同的调节途径此外越来越多的证据表明激素协同调节 6 6 基因的转录提示有一种机制作用于单个或几个基因座控制区肿瘤和其他疾病与 6 6 基因的表达失调有关尤其是大量的临床研究都已将不同 6 6 基因的表达特征与其作为肿瘤生物标记物的潜在作用联系起来近年来由于 6 6' 组在多种癌症类型中出现协同失调人们一直致力于设计多参数生物标志物组合项目在这篇小型综述中我们的主要目的是总结 6 6' 作为肿瘤生物标志物的最新应用重点强调近至年所发表的研究以及多参数项目组合对 6 6 领域更广泛的综述包括生理学病理学基因组学和调控方面请参阅本综述网络版所附的补充数据中的表网址 " # "1 $ & # ' 0 其他有关 6 6' 用作肿瘤生物标志物的参考文献可查看在线补充数据中的图和表一泌尿和男性生殖系统肿瘤前列腺癌前列腺癌在北美男性中是最常见的肿瘤 8 根据美国癌症协会的最新报道从 220 以来这一肿瘤的死亡率稳定下降毫无疑问治疗方案的改进使得死亡率下降但是疾病的早期检测和对疾病更好的监测也发挥了作用 8 例如近年来随着直肠指检的开展!. 检测在很多国家已成为常规医疗体检项目 8 但是虽然!. 检测作为肿瘤筛查的生物学指标越来越普及而其临床作用还有待更详细的研究该检测的最大局限性在于其特异性相对较低尤其是当需要较高的灵敏度时例如用于筛查 8 由于已经有大量关于!. 用作肿瘤生物标志物的信息在这篇小型综述中我们就不再赘述为了提高!. 和其他前列腺癌生物标志物的临床准确性最近有很多研究者致力于寻找标志物的组合项目 6 6 家族的一些成员作为前列腺癌的临床指标大有希望例如基于 6 6 基因 4/

3 0 和 4 的转录和或蛋白质产物的模式不同有人提出可以考虑将它们作为疾病诊断和或预后的生物标志物 20 鉴于 6 6 基因和的表达与肿瘤组织活检的 #' 评分高度相关我们可把这些 6 6' 作为预测标志物 0 关于 6 6 最近发现它的个单核苷酸多态性 *!' 是前列腺癌的风险等位基因这些 *!' 位于 6 6 基因的内含子和外显子上其功能可能会影响 6 6 表达水平由于这些 *!' 与血清 6 6 浓度升高相关因此可以作为前列腺癌的补充生物标志物不但单独的 6 6' 成员可以用作生物标志物而且目前在多参数模型设计方面也取得了重大进展该模型可用以寻找潜在的更灵敏更特异的 6 6 生物标志物组合项目例如使用 6 6 与游离!.!. 比值和!. 与总!.!. 比值的 $' 回归模型对于!. 结果在灰区的患者可以提高其前列腺癌与良性前列腺增生鉴别诊断的特异性 # 同样还有人提出把!.!.! !.6 6!.!. 作为输入因子的人工神经元网络 # 此外当!. 浓度在 0 $ 时研究发现把!. 百分数 6 6 巨噬细胞抑制细胞因子 (4 和移动抑制因子结合起来可显著提高对前列腺癌与良性前列腺增生的鉴别能力 # 睾丸肿瘤睾丸肿瘤是年轻男性 0 岁最常见的肿瘤之一根据美国国家癌症研究所的数据自 0 世纪 /0 年代以来睾丸肿瘤在男性白种人中的发病率几乎翻了番虽然睾丸肿瘤的发病率在上升但人们并没有为此投入更多的努力去寻找新的生物标志物这一现状主要是由于

4 有症状的睾丸肿瘤患者存活率较高 2 < 所致虽然该疾病的死亡率较低但是出于治疗对生育能力的不良反应人们迫切需要找到其他生物标志物进行早期诊断因为睾丸肿瘤在无症状阶段是不需太多治疗的睾丸肿瘤的 6 6 基因表达谱仍有待充分研究确认初步的数据显示 6 6' 0 和在恶性肿瘤中可能会下调 / 6 6 基因的表达在临床上与低期肿瘤相关因而可能预示预后良好 0 最近的研究显示其他 6 6' 包括 6 6 和 6 6 产生于睾丸 9 因而具有作为睾丸肿瘤生物标志物的潜力肾细胞癌由于大多数肾细胞癌早期没有症状只能通过影像学进行检测 9 因此临床上对肾细胞癌的诊断和预后判断面临很多挑战目前大约 0< 的患者为晚期和有转移使用传统的化疗和放疗疗效不佳 9 新的证据强调以 *. 甲基化模式作为肾细胞癌预后指标的重要性 9 有趣的是人们发现在多个肿瘤类型中 6 6 家族中的一些酶经过甲基化后出现调节异常例如已有文献报道在乳腺癌和淋巴细胞白血病中 6 60 和 6 6/ 的 ( 岛高度甲基化 2 在肾细胞癌中 6 60 和 6 6/ 会一致下调 0 提示存在有公共调节机制同样地在恶性肿瘤中发现 6 6 下调 0 这些 6 6 基因的免疫组织化学表达结果与肿瘤的大小和肾细胞癌的组织学类型相关此外 6 6/ 的表达可能预示疾病预后不佳因为该表达与无瘤生存率呈负相关 8 二妇科肿瘤卵巢癌卵巢癌特别是其中最常见的上皮亚型难于检测使得这种类型的肿瘤常常在其晚期才能诊断出来因此预后不佳 2 有文献报道 6 6' 中的大多数如 6 6' 4 和 4 在卵巢癌中出现调节异常与细胞特异性基因表达一致在血清和渗出液中出现的大量 6 6 蛋白 80 和以及 6 6' /980 也都出现调节异常 0 0 由于 6 6/ 在临床上与疾病晚期高级别浆液型组织类型肿瘤残留无瘤存活率和化疗反应相关因此应该是最有希望的候选标志物与 6 6/ 相似 6 6' 0 和可以作为卵巢癌预后不佳的指标 0 而 6 6'8 和的作用相反它们可以作为卵巢癌预后良好的指标 0 除了具有潜在的预后判断价值这两个 6 6' 以及 6 6 都具有潜在的诊断价值 0 最后 6 6 的表达可以作为预测紫杉醇治疗是否耐药的标志物根据最新的对上述 6 6')94 以及卵巢癌组织活检中的肿瘤抗原 (. 所进行的多参数分析结果发现将 )94 与 (. 相结合比单独使用 (. 鉴别非病变组织和转移性肿瘤的效果要好得多表而且加上 6 6'8 0 和还能加强 (. 鉴别原发性卵巢肿瘤和非卵巢转移性肿瘤的能力在卵巢癌的腹水和胸腔积液中也报道了类似发现表此外用 6 6'/8 和组合以及 6 6/ 和 )94 组合都能更准确地预测年和年的疾病进展对于以上所提到的血清标志物组合我们还需要进一步的实验以验证其有效性子宫浆液性乳头状癌和宫颈癌子宫浆液性乳头状癌 %! ( 是子宫内膜癌的小亚型复发率极高因此常常对该疾病的治疗提出挑战 %! ( 患者血清中的 6 6/ 和 6 60 都会出现上调 0 据文献报道子宫内膜癌组织中 6 68 的表达无论是其转录水平还是蛋白质水平也都同样升高 0 6 6/ 尤其特殊它在 %! ( 患者与健康组织及其他子宫内膜癌亚型的表达有显著差异 0 目前正在研究这些 6 6' 用于 %! ( 诊断和疗效监测的可能性宫颈癌是全球女性第二种最为常见的癌症不发达国家的发病率很高 / 幸运的是自 0 世纪 0 年代以来随着! # 检测巴氏涂片的使用宫颈癌的发病率和死亡率已显著降低 / 但是我们仍然需要找到其他方法以克服巴氏涂片筛查在经济和文化方面的局限特别是在发展中国家 6 6 基因家族的表达谱提示某些 6 6' 可以作为宫颈癌的生物标志物 6 69 和 6 68 在肿瘤细胞和原发性肿瘤培养细胞中同时过表达而 6 60 可能会下调 0 9 有趣的是随着宫颈腺癌组织中 6 69 浓度的增加研究人员发现 6 69 的抑制物又称为抗白细胞蛋白酶或分泌性白细胞蛋白酶抑制剂.!! 的生成下降 8 这一发现提示对于影响 6 69 蛋白酶活性的肿瘤进展可能有其他的调节机制但是这些 6 6' 潜在的临床意义和病理生理作用还有待更全面的阐述三胃肠道癌大肠癌 00 年欧洲肿瘤标志物组织就大肠癌血清标志物的临床应用建立了新的导则重点是癌胚抗原 2 也提到了其他一些标志物包括胸苷酸合成酶 64' 和微卫星不稳定性但由于

5 / 他们缺乏特异性和灵敏度致使其应用受到限制 2 使用基因表达序列分析技术. 3 和癌症基因组解剖学计划 (. = 中的基因表达序列标签 3 数据库进行生物信息学分析结果显示 6 6 基因 /8 和 0 在大肠癌组织和细胞系中有不同表达 0 对肿瘤组织的进一步临床研究表明由于 6 6'/ 和 0 的失调模式与晚期疾病阶段相关因此具有成为大肠癌预后指标的潜在价值近来发现作为大肠癌一级结构蛋白的小窝蛋白 4 & #4 与结肠癌中的 6 6/ 异常表达有关其他 6 6' 作为生物标志物是否具有潜在的临床价值还需要进一步阐述食管癌胃癌和胰腺癌对于其他最为常见的胃肠道肿瘤如食管癌胃癌和胰腺癌中 6 6 基因表达的特点已经进行了研究 6 6/ 在这种胃肠道肿瘤中都出现上调并可作为胃癌预后不良的指征 0 同样 6 6 在食管癌和胃癌组织中也出现上调但是关于 6 60 的表达各文献报道中还存在争议根据最近用原位杂交法对胃癌组织的研究 6 60 基因由于超甲基化而表达为转录浓度降低这一发现与此前报道的结果相反此前发现胃癌中该蛋白上调并认为该蛋白可作为预后不良指标产生这一明显差异的原因之一可能是由于该疾病的种群异质性这个问题还需要进一步澄清四其他肿瘤肺癌目前已有一些肺癌的生物标志物在风险评估早期检测治疗方案选择预后和监测复发方面具有潜在的应用价值但是由于它们的灵敏度和特异性较低因此目前还不推荐在临床常规中应用这些标志物有越来越多的证据表明 6 6' 可用作肺癌的诊断预后生物标志物已有报道 6 6 在神经内分泌肿瘤组织 ( 亚型中的转录出现上调这预示着预后较好的可能性下降同样 6 6 和 6 60 在肺癌的鳞状细胞癌亚型中的转录水平过表达此后的研究发现其他 6 6' 即 6 6'98 和 4 都有成为肺癌血清蛋白质标志物的可能特别是 6 6' 和它们与疾病分期呈正相关最后根据近期提出的多参数模型将 6 6' 8 和 04 组合到一起可以提高非小细胞肺癌检测的准确性表乳腺癌虽然还处于转化研究的早期阶段人们已经提出 6 6 家族的一些成员可用作乳腺癌的生物标志物 6 6' 和 4 在乳腺癌细胞和或乳腺癌患者的血清中表达异常 20 据报道 6 6' 9 和表现为生成加强并与预后不良相关 0 6 6' 2 和与之相反可以作为疾病预后良好的指标 0 此外对原发性乳腺癌进行胞浆!. 检测可用于预测哪些患者会对系统性它莫西芬治疗产生良好效果同样 6 60 可以作为一个独立的标志物预测它莫西芬治疗反应 0 虽然还不完全清楚但激素失调和基因外因素被认为在所发现的转录失调中发挥作用 2 如上文所述 6 60 基因的超甲基化与 6 60 转录产物的减少相关对乳腺组织进行原位杂交分析发现 6 60 在导管癌中显著下降同时约 2 < 的浸润性导管癌组织中 6 60 基因表达完全丢失 0 最后 6 6 在乳腺癌病理生物学中的重要作用近些年已经得到证实例如在雌激素受体阳性乳腺癌细胞系中 6 6 通过胰岛素样生长因子结合蛋白 )!4 的蛋白水解及随后其配体 4 生物利用率的提高诱导肿瘤发展 / 相反!. 和 6 60 被认为是乳腺癌的肿瘤抑制物!. 的肿瘤抑制作用被认为主要是通过转化生长因子的潜在模式活化而介导的唾液腺和鳞状上皮细胞癌由于不同肿瘤类型组织模式的重叠以及组织分类与其预后决定因素之间的差异 9 大小唾液腺肿瘤都存在重要的组织病理学局限性根据近期一个 6 6 基因在唾液腺肿瘤中的表达谱发现 6 6 在许多最常见的大小唾液腺肿瘤中高表达 8 有趣的是与非导管细胞相比导管上皮细胞和导管内层的 6 6 基因都高表达 8 与之相反 6 6/ 在唾液腺肿瘤组织中表现为下调 2 但是由于这些 6 6' 没有令人满意的肿瘤类型特异性从而限制了它们作为预后标志物的应用由于其他 6 6' 包括 6 6' 和 8 都产生于唾液腺 9 因此需要进一步检测它们潜在的临床应用价值同样头颈部肿瘤中鳞状上皮亚型的高度异质性对于相同风险组患者的治疗方案存在固有局限性 0 为了克服这一困难研究者一直致力于开发能够提示预后和治疗反应的临床指标 0 尽管这一研究还处于早期临床阶段但 6 60 在对具有最坏临床结果的疾病亚型进行预后判断方面大有希望 0 1 颅内肿瘤有越来越多的证据显示 6 6' 存在于神经和或大脑发育的不同过程中例如

6 被认为参与大脑的长期增益它对于海马体相关的记忆形成是必需的 2 同样 6 6/ 通过对少突胶质细胞中髓鞘形成的维护在中枢神经系统发育过程中发挥至关重要的作用 2 既然它们在中枢神经系统的正常生理活动中发挥作用人们推测在颅内肿瘤中 6 6 的表达也许会出现失调因此 6 6' 可以用作脑部肿瘤的生物标志物最近发现肿瘤组织中 6 69 转录的表达升高与临床上总体生存期缩短相关 6 69 是否能用于临床脑部恶性肿瘤的预后判断还有待进一步确定虽然 6 68 的生理作用已经非常明确了但在颅内活检标本中肿瘤和健康组织 6 68 的表达并没有差异 1 急性淋巴细胞白血病尽管对 6 6' 在白血病中所起作用的转化研究还处于婴儿期但 6 60 表达与急性淋巴细胞白血病之间相关性的初步研究结果令人鼓舞据文献报道 6 60 基因在急性淋巴细胞白血病中表达下降由于 6 60 的启动子 > 非翻译区和编码区内 ( 岛高度甲基化使得外源基因沉默才得以发现 6 60 低表达此外 6 60 基因的甲基化与预后不良和复发几率升高相关用多参数分析 6 60 基因和其他个基因的甲基化模式包括金属肽酶含血小板反应蛋白基元金属肽酶含血小板反应蛋白基元聚蛋白多糖酶 4.!. 凋亡肽酶激活因子和 (6*( 期依赖性激酶抑制因子 ( 96 也称作! 9 发现约有 9/< 的急性淋巴细胞白血病患者有个以上甲基化的基因此外有文献报道缺少甲基化与预后良好相关这提示有可能将甲基化谱用于急性淋巴细胞白血病的风险评估结论分泌型丝氨酸蛋白酶 6 6 家族包含了很多非常有希望用于多种恶性肿瘤的备选生物标志物虽然大多数研究仍处于临床试验的初级阶段但多个相关性研究已表明 6 6 基因在不同类型肿瘤中表达异常根据它们通常的协同失调模式当前我们努力的方向主要在于开发多参数 6 6 项目组合它们作为生物标志物应用效果更好尽管我们对 6 6 家族在临床应用上的了解取得了实质性进展但对于它们在肿瘤病理生理学方面所起作用的了解才刚刚开始作为细胞外蛋白酶人们认为 6 6' 家族是通过肿瘤微环境的重构或通过影响肿瘤生长血管生成侵袭和转移更详尽的综述请参见文献 2 和参与肿瘤的发生和或进展随着基因组学的发展以及最近蛋白质组学和生物信息学的发展可为我们提供一个多方法组成的矩阵得以深入发现这个重要的蛋白酶家族的功能作用和临床应用在经过未来的确认和双盲随机对照试验之后 6 6' 可能会为肿瘤早期诊断和改善肿瘤存活前景提供全新的临床工具作者贡献!" # $%# &" # "# '' % " # # &" # #' # " $ ' & % # # "# # '' % '"& # 潜在利益冲突的声明 " # $' # # 赞助商的作用 " '$ " $ # # ' % ' ' ' '' % "# ' 科翻译黄春梅崔巍中国医学科学院北京协和医院检验审校史红中华医学会杂志社参考文献 ),' ':,$ 1),' ' $ ' ' # +,1(#!" # " 00/ ?.? +# 6-1 "' & '4 ' $1)@% A ' '3!1 "+" ',#, $ # ' ' ''13?& ) $ (. '3!1 "$$ #' " ',#,' 1*?&( 00 89/ 4201 # '! $ # ""*? #1(" ' ' "10 ' "B " " ',#, 91! *#. % /08/ 421 / # $! $ #? ""* ) :1 # '' "B " " ',#, 1@ #) # "+@ '3!1' ",#,' ' ' # $# # '1(#(" ? 6 #. 1! ' '$ $ '' $ * '3!1 *+ '$"' " # "'' ## # ' ",#,4# ' # 1 #- # 009 / !# ' ) $ ( ' 3!1 ',#,' ", # 1( /4921

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