无精症患者血清、精浆中性激素水平结合生精细胞检测的研究

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1 无精症患者血清 精浆中性激素水平结合生精细胞检测的研究田英, 赵雅, 兰雅娴, 岳虹 (1. 西安市第一医院检验科西安 ) 摘要目的对无精症病人进行血清 精浆中性激素测定和生精细胞学分析 方法选择 60 例无精子症患者根据精液 PH 值分为 : 高 PH 值组 38 例 (ph 值 7.0~ 8.0) 低 ph 值组 22 例 (ph 值 <7.00); 另以 20 例正常男性作为对照组 采用电化学发光免疫法 (ECLI) 测定性激素水平, 将精液瑞 - 姬染色, 进行生精细胞学检测 结果高 PH 值组 38 例无精症组中血清 精浆睾酮 (T) 卵泡刺激素(FSH) 与对照组相比, 差异均有统计学意义 (P<0.05), 低 PH 值组 22 例精浆中 T FSH 与对照组相比差异均无统计学意义 (P >0.05) 两组中血中泌乳素(PRL) 与对照组相比差异无统计学意义 (P>0.05) 生精细胞形态学检查对照组 20 例男性镜下均可发现正常生精细胞及发育成熟精子 ; 高 ph 组 38 例患者中 33 例发现生精细胞, 主要停滞于次级精母细胞和精子细胞阶段, 低 PH 值组 22 例均未发现生精细胞 结论 1. 高 PH 值组 38 例无精症患者血清 精浆性激素与对照组间有统计学差异, 结合精液细胞学检查可以推测此组主要由于睾丸原发性病变引起激素分泌水平异常所致 2. 低 PH 值组 22 例血清 精浆 FSH T 水平与对照组间无统计学差异, 同时精液细胞学检查均未见生精细胞, 说明性腺功能正常, 这种无精子症患者主要是由于单纯性输精管阻塞而产生 无精子症患者要依据精液 PH 值 性激素的水平及生精细胞学检查等综合分析才能正确的诊断其产生无精子症的原因, 对指导临床治疗有重要意义 关键词无精子症, 性激素, 生精细胞 The Study on Between Sexual Hormone Detection in blood serum and Seminal Plasma and Spermatogenic Cells Test in Patients with Aspermia Zhao Ya,Lan Yaxian,Tian Ying,Ti Ling (Department of Laboratory Medicine,The First Hospital of Xi an,shanxi Xi an ,China) Abstract Objective to detect the sexual hormone in seminal plasma and blood serum and analyze the spermatogenic cells of the patients with aspermia. Method According to the account of PH of seminal plasma, 60 patients of aspermia were divided into high PH group adding up to 38 ones (PH ) and low PH group 22 ones (PH<7.0). Then 20 normal men were choosed as the control group.

2 Electrochemistry luminescence immunity(ecli)was used to detect sexual hormone in blood serum and seminal plasma. Wright-Giemsa stain was used to test the spermatogenic cells in 60 aspermia patients and men of control group. Result In high PH group, spermatogenic cell could be detected in 33 patients. And then there was statistic difference between high PH group and the control group in the follicle stimulating hormone (FSH) and testosterone(t) in blood serum and Seminal Plasma (P<0.05). spermatogenic cell can be not detected in all of 22 examples in low PH group. There was no statistic difference between low PH group and the control group in the FSH and T in seminal plasma (P>0.05). Conclusion comprehensive analysis of PH sexual hormone and spermatogenic cell test in aspermia can correctly diagnose the cause of aspermia and have important significance in commanding the clinical treatment. Key word aspermia, sexual hormone, spermatogenic cell 不育是一个世界性的问题. 据世界卫生组织 (WHO) 调查,15% 育龄夫妇存在不育问题, 按全球人口推算, 不育夫妇高达 8000 万对左右, 并以每年 200 万对的速度递增 [1] 在我国, 育龄夫妇不育发生率为 12.5% 见于此, 不育症的诊治已越来越受到世界各国的关注 男性生殖主要受下丘脑 - 垂体 - 性腺轴的调节与控制, 性腺轴分泌 FSH LH PRL 与 T 直接参与调节人体性功能与生殖功能, 以维持整个生育期的动态平衡 1 资料与方法 1.1 一般资料无精症组 60 例, 年龄 33±5 岁 (22-43 岁 ), 婚龄 2-13 年, 病人均经 2 次以上精液离心后镜检仍未发现精子而确诊 由于输精管的阻塞均可导致精液 PH 下降 [1], 进一步根据检测精浆 PH 值水平, 将无精症组又区分为高 PH 组 38 例 (PH 值 ); 低 PH 组 22 例 (PH 值 <7.0) 另取 20 例正常精液男性作正常对照组 1.2 精液收集和精液分析病人禁欲 3-5 天后用手淫法取出, 置 37 恒温水浴箱中进行精液分析, 检查精液的量 液化时间 PH 值 精子密度 精子活力测定 1.3 精液细胞学检查精液 3000 转 / 分钟离心 15 分钟, 离心后精浆置 4 冰箱保存待测激素 离心后沉渣涂片, 自然干燥后瑞 - 姬氏染色, 油镜镜检 (X1000)

3 1.4 精浆性激素的测定采用罗氏电化学免疫发光仪 Elecsys-2010 测定精浆中的性激素 由仪器本身所带的质控物进行批内和批间质控 1.5 统计学处理各组数据以 ( x ±s) 表示, 数据用 SPSS13.0 软件进行 t 检验,α= 结果 2.1 血清 精浆性激素测定和生精细胞学检查表中结果显示, 高 PH 组 38 例患者 T FSH 与正常对照组有统计学差异,P<0.05, PRL 与正常对照组无统计学差异,P>0.05 精液细胞学检查 33 例可见生精细胞, 生精细胞主要停滞于初级精母细胞和精子细胞阶段 2.2 低 PH 组 22 例患者精浆 T FSH 及 PRL 与正常对照组无统计学差异,P>0.05, 精液细胞学检查均未见生精细胞 表 1 3 组血清性激素测定结果 项目例数 T(ng/ml) FSH(mIU/ml) LH (miu/ml) PRL(uIU/ml) 对照组 ± ± ± ±8.58 低 PH 组 ± ± ± ±6.39 高 PH 组 ±1.33 * 13.0±0.89 * 8.35±0.34 * ±7.99 * 注 : 与对照组相比较表示 P < 表 2 3 组精浆性激素水平比较 项目例数 T(ng/ml) FSH(mIU/ml) PRL(uIU/ml) 对照组 ± ± ±13.54 高 ph 组 ±0.33 * 1.30±0.70 * ±9.86 低 ph 组 ± ± ±17.70 * 注 : 与对照组相比较表示 P < 0. 05

4 图 1 初级精母细胞油镜 (X1000) 图 2 次级精母细胞油镜 (X1000) 图 3 精子细胞油镜 (X1000) 图 4 精原细胞油镜 (X1000) 3 讨论 WHO 男性不育病因诊断分类标准将无精子症的病因分为梗阻性和非梗阻 性 ( 原发性 ) [2] 对于睾丸梗阻性和非梗阻性无精子症的鉴别诊断最终须依靠操作 过程复杂的睾丸活检 ( 分为睾丸切开活检 穿刺组织活检 针吸细胞活检 ) 不 论何种形式的活检, 对睾丸均造成不同程度的损伤且易发生并发症 [3] 所以, 能否 通过相关的实验室检查来替代睾丸活检对无精症的临床分型作出诊断, 达到无创 伤性诊断的目的? [4] 黄宇烽等用精液生精细胞学与睾丸活检比较, 研究表明,87 % 的无精子精液 中查见生精细胞, 两者所反映的细胞发育水平符合率达 91% 本文 38 例患者精液 ph 值 7.0~8.0 中有 33 例查见生精细胞, 生精细胞的发育停滞于各级生精细胞阶 段, 但以精子细胞和次级精母细胞阶段多见,5 例 PH 在正常范围但未检测到生精 细胞, 可认为是睾丸原因引起的生精功能障碍 其余 22 例患者精液 ph 值 7.0,

5 精液生精细胞学检查均未发现生精细胞可能为阻塞性无精子症 由此, 通过生精 细胞学检查, 了解其睾丸的生精功能以确定治疗原则和判断治疗效果. [5] 王国洪 等曾报道精浆性激素水平与血浆性激素水平具有正相 关性, 而且精浆性激素水平更能直接反映精子生长微环境的激素水平 变化 本实验对 38 例高 PH 值无精症患者血清 精浆 FSH 检测结果进行统计学 分析, 发现这组不育症患者血清 精浆 FSH 水平均高于对照组 提示精子发生异 常可能影响了支持细胞的功能, 导致抑制素下降, FSH 升高 睾丸支持细胞功能 异常也可能是高 PH 值无精症患者生精障碍的原因之一 支持细胞功能减退, 由于 刺激间质细胞产生甾体激素的物质的分泌减少, 导致 LH 的分泌相应增加 于是, FSH 水平可作为预测睾丸生精功能的可靠标志 研究发现, 高 PH 值无精症组血清 LH 水平均高于对照组, 提示这组患者可能存在间质细胞功能异常 无精症患者 血清 精浆 T 水平的变化, 各家报道不一 [ 6 ] 一些研究发现少精和无精男子的血 清 T 浓度降低 [ 7], 而另一些报告未发现差异性改变 [ 8] 在睾丸间质细胞功能损伤 程度较轻时, 单独 LH 及 T 的测定可保持正常范围 [9] 上述研究结果表明, 高 PH 值无精症患者, 除睾丸生精功能障碍外, 还存在间质细胞功能的损害, 在间质细 胞功能损伤程度较轻时, 单独 LH 或 T 的测定可保持正常范围 FSH 升高说明睾 丸支持细胞功能也受到损害 同时结合精液细胞学检查提示, 精液中生殖细胞均 处于生精细胞阶段, 可以推测高 PH 值组主要由于睾丸原发性病变引起激素分泌 水平异常所致 梗阻性无精症主要由于输精管道的阻塞, 生殖细胞不能随精液排出所致 低 PH 组 22 例精浆 血清 FSH T 水平与正常对照组间无统计学差异, 同时精液细 胞学检查均未见生精细胞, 说明性腺功能正常, 这种无精子症病人主要是由于单 纯性输精管阻塞而产生 研究认为,PRL 能在前列腺中增加雄激素的吸收和 5α- 还原酶的活性, 并促 进 T 在精囊腺中的作用 本研究发现, 无精症患者精浆中 PRL 的含量与正常组 相比差异无明显性, 说明 PRL 没有对无精子症患者前列腺和精囊腺的功能产生 直接影响

6 因此, 无精症患者通过电化学发光免疫标记测定 (ECLI) 精浆或血清中性激素结合生精细胞学检查可以有效地替代睾丸活检, 对临床上诊断是否为单纯性输精管阻塞还是睾丸生精功能障碍, 以及采取何种治疗措施都具有重要意义 对于精浆中性激素水平下降到何种程度就可影响精子的发育 ; 精浆中性激素与血液中性激素水平保持怎样的线性关系或比例关系 ; 还有待进一步的研究和观察 [1] Patrick JR. WHO manual for the standardized investigation and diagnosis of the infertile couple[m]. London: Cambridge University Press; 1993: [2] 郭应禄, 胡礼泉主编. 男科学 [M]. 北京 : 人民卫生出版社 ; 2004,3: [3] 高长杰. 精液生精细胞检查鉴别诊断无精子症 [J]. 中华男科学,2000; 6(3): [4] 刑俊平, 刘文善. 逐步判别分析在无精子症分类和病理类型间鉴别诊断中的应用 [J]. 男性学杂志,1995,9: [5] 王国洪, 许瑞吉, 张中书, 等 少精症患者血清和精浆性激素水平的测定及其意义 [J]. 标记免疫与临床医学,2005; 12(2): [6] Lass AR, Vigersky RA. Leydig cell function in idiopathic oligospermia[j]. Fertil Steril, 1980;34(2) [7] Pierrepoint CG, John BM, Groom GV, et al. Prolactin and testosterone levels in the plasma of fertile and infertile men. Endocrinol, 1978; 76(1): [8] Corker CS, Davidson DW, Edmond P. Plasma testosterone levels in men attending a sub-fertility clinic[j]. Steroid Biochem, 1978; 9(4): [9] 陆寄坤, 王益鑫, 钱宪明, 等. 生殖激素检测在男性不育症诊断中的意义 [J]. 男性学杂志, 1995; 9(2)

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