世界中医药年月第卷第期图从丹参或同属植物中获得的酚酸类化合物及转化产物

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酿闽安
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1 ＷＯＲＬＤＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥＪＶＮ丹参中酚酸类化合物的化学和药理研究进展王艳梅曹俊岭北京中医药大学东直门医院药学部北京摘要丹参是我国应用最广泛的中药之一临床上广泛应用于治疗心血管系统疾病近年来国内外研究者对丹参的研究取得了显著进展本文就丹参所含酚酸类化合物的结构及性质提取分离方法质量控制手段药理活性分别进行概述关键词丹参酚酸类化合物化学研究药理研究ＣｍＰｍＳＰＡＳＲＷＹｍＣＪＤｍＨＢＵＣＭＢＣＡＳＲｍｗＣｍＩｍＩｍｋｍＳＲＩｍｍｑｍＳＲｗｍｍＫＷＳＲＰＣｍＰｍ中图分类号Ｒ文献标识码Ａ丹参药材ＲＳＭ取自唇形得到丹酚酸ＨＩＪＫＬＬ鼠尾ＭＢ的干科鼠尾草属植物丹参Ｓ草香豆素Ｓｍ等化合物丹参中所含燥根及根茎是我国应用最广泛的中药之一丹参酚酸类化合物由于富含酚羟基在提取分离过程中始载于神农本草经居于上品据中国药典记易发生水解反应氧化反应等化学变化近年来随载丹参具有祛瘀止痛活血调经养心除烦等功用着高分辨质谱和制备液相的应用通过离子碎片的因此临床上广泛用于治疗心血管系统疾病具有良产生规律又陆续推导鉴别出多个酚酸的水解产好的药用价值随着近年来科研水平不断进步对物丹参的研究不断深入和透彻国内外研究者对丹参相应酚酸类化合物结构如下图所示这些酚的研究取得了显著进展本文现就丹参所含酚酸类酸化合物可以通聚合程度分为单体酚酸二聚体酚的化合物的结构及性质提取分离方法质量控制手酸三聚体酚酸四聚体酚酸如咖啡酸丹参素原段药理活性分别进行概述儿茶酸原儿茶醛等属于单体酚酸迷迭香酸丹酚酚酸类化合物结构及其性质酸Ｄ丹酚酸Ｆ等属于二聚体酚酸紫草酸丹酚酸丹参中所含的药用成分主要以水溶性的酚酸类化合物和脂溶性的醌类化合物为主除此之外还有Ａ丹酚酸Ｃ丹酚酸Ｈ等属于三聚体丹酚酸Ｂ和丹酚酸Ｅ等属于四聚体少量黄酮等其他种类化合物自上世纪年代以丹参中酚酸类化合物生成途径主要有种一来随着以Ｓ为代表的葡聚糖凝胶填料和以是由若干丹参素和若干咖啡酸发生缩合反应生成缩十八烷基硅烷键和硅胶为代表的反相填料的普及应合产物二是缩合产物通过氧化水解周环等反应用我国科研工作者先后从丹参中分得丹参素Ｄ生成的转化产物典型的生成过程如下图所示ＡＡＢＣ丹酚酸ＳＤＥＦＧ迷迭香酸紫草酸ＲｍＡＬｍＡ原紫草酸Ｐ一分子丹参素首先和一分子咖啡酸通过缩合反应生成迷迭香酸两分子迷迭香酸进一步通过周环反应生成丹酚酸Ｂ丹酚酸Ｂ再通过周环反应脱去一分ＬｍＡ等多种酚酸类化合物之后经过子丹参素生成丹酚酸Ａ丹酚酸Ａ最终通过氧化反各国科研工作者的共同努力又从丹参同属植物中应生成丹酚酸Ｄ基金项目国家科技支撑计划课题编号ＢＡＩＢ安全合理用药评价和干预技术研究与应用作者简介王艳梅女本科主管药师研究方向药品评价与合理用药Ｅｍｍｍ通信作者曹俊岭男中药学博士主任药师研究方向中药药理毒理中药安全性有效性评价医院药学管理Ｅｍｍ

2 世界中医药年月第卷第期图从丹参或同属植物中获得的酚酸类化合物及转化产物

3 1128 WORLDCHINESEMEDICINE June.2016,Vol.11,No.6 图 2 部分酚酸类化合物的转化反应丹参中酚酸由于转化反应复杂, 吸引了大量研究者的深入研究在转化反应的研究中, 由于丹酚酸 B 在丹参中含量高且易大量制备, 对其反应的动 [19 20] 力学参数和转化产物的认识透彻深入张军等人考察了温度溶液 ph 溶液浓度溶液类型等多种因素对丹酚酸 B 的影响, 最终发现丹酚酸 B 和迷迭香酸在高温或碱性条件下不稳定, 易发生转化 [21] 毛声俊等人进一步证明了丹酚酸 B 发生水解反 [22] 应可以生成丹参素林青等人又进一步证明丹酚酸 B 在溶液中降解符合一级动力学 HyoungJae Lee [23] 等人对丹酚酸 B 的转化反应进行了深入彻底的研究, 透彻地理解了丹酚酸 B 的转换过程, 并得到了多个转化产物, 包括如图 1 中所示的 4,7,8 三羟基 1 甲基 2 苯并吡喃 3 羧酸 3 [3,4 二羟基 (3, 4 二羟基苯基 ) 苯乙基 ] 酯等 2 酚酸类化合物提取精制方法传统中药提取多采用水煎或者醇提的方法提取有效成分, 该方法具有简单易行用料环保的优点, 但是在后续浓缩回收溶剂过程中需要消耗大量能源为克服这一缺点, 近年来科研工作者开发了二氧化碳超临界流体提取法超临界流体法具有消耗能源少的优点, 同时又兼具环保和快速的优势提取出的总酚酸可以用水提醇沉的方法除去多糖蛋白质叶绿素等大量无用物质 [23] 对提取物进行进一步粗分和精制常需要使用柱层析, 不同柱填料对酚酸的分离效果和吸附情况不同丹参中的酚酸成分含有多个酚羟基, 在最常用的硅胶填料上有很大的吸附, 导致最终回收率不高 ; 而在葡聚糖凝胶和反相填料上吸附较少, 在实际应用时回收率高, 因此可将上述填料用于精制分离大孔吸附树脂是由苯乙烯和二苯乙烯发生聚合反应生成的高聚物, 具有吸附量大不需使用有机溶剂等优点, 常用来分离中药的有效成分 [24] 近年来随着多种大孔吸附树脂的普及, 其开始广泛地应用于丹参粗分精制过程 [25] 除以上提到的柱层析法外, 近年来新兴的超滤纳滤 [26] 高速逆流色谱等方法也可用于酚酸的粗分和精制, 最终可以得到总酚酸提取物或者某一单体 [27] 倪力军等人通过正交试验证明, 丹酚酸类成分使用水为溶媒提取率高, 丹参酮类成分用乙醇作为溶媒提取率高, 这一结论同丹酚酸的溶解度相吻 [28] 合苗建武等人考察了聚酰胺填料对丹参总酚酸的分离效果, 通过考察丹参总酚酸的吸附量以及洗脱率, 最终确定了使用聚酰胺分离丹参总酚酸的工艺条件初始上样液中所含丹酚酸的质量浓度为 3 5g/L, 采用梯度洗脱的方法, 首先使用 20% 乙醇洗脱杂质, 再用 40% 乙醇洗脱丹酚酸最终测定纯 [29] 化后固体中丹参总酚酸含量为 98 41% 王凤美等人通过比较 D101 D301 LSA 20 SIPI905 四种大孔吸附树脂对丹酚酸 B 的分离的效果, 发现 D101 树脂从经济性易得性便利性等方面均适合用于制备丹酚酸 B 通过正交试验最终确定分离丹酚酸 B 工艺条件为 : 药材切片筛去泥土, 加入 8 倍量水, 于 90 下提取 2 次,1h/ 次 ; 提取结束后过滤, 提取液离心后取上清液减压浓缩 ; 浓缩液用乙酸乙酯萃取, 萃取液减压蒸干用水溶解 ; 上述溶解液上 D101 大孔吸附树脂柱, 静止吸附 2h, 水洗除去未吸附杂质, 40% 乙醇洗脱丹酚酸 B; 洗脱液减压浓缩除去乙醇 [30] 冷冻干燥得丹酚酸 B 纯化物王凤美等人还尝试采用高速逆流色谱法制备高纯丹酚酸 B, 色谱法采用正己烷乙酸乙酯水甲醇 ( ) 的混

4 世界中医药 2016 年 6 月第 11 卷第 6 期 1129 合物作为分离递质, 混合物的上相做固定相, 下相做流动相每次将粗提物 80mg 进样, 最终可制备得到 63 4mg 纯度为 98 6% 的丹酚酸 B 3 酚酸类化合物的分析方法及质量控制丹参质量控制的研究经历了相当长的时间起初质控多采用单一成分控制的策略如对于酚酸类成分, 只关注其中含量较高的原儿茶醛或丹酚酸 B 等某一成分的含量 [31] 该策略简单易操作, 但是忽略了其他有效成分, 易造成质量控制的不全面性随着对丹参不断的深入了解, 仅控制其中 1 种成分的含量已经远远无法达到质控的要求近年来, 对丹参及其提取物的分析已经向多成分微量化指纹图谱几方面飞速发展, 为丹参的质量控制奠定了良好的基础中药的功效往往是其中多种成分联合作用的结果, 因此只关注其中 1 种物质往往是不够的近年来对丹参的质量控制开始关注其中多个组分含量的 [32] 综合分析张英丰等人建立了丹参提取物中丹酚酸 A 丹酚酸 B 紫草酸丹参素及丹参酮 IA 同时测定的新方法该方法采用高效液相色谱法, 以 Kromasil C18 为固定相, 乙腈 0 1% 甲酸水为流动相梯度洗脱, 检测波长 285nm 待测化合物在进样范围线性关系良好, 仪器精密度和稳定性等各项指标 [33] 均符合要求, 可以用于含量测定虞科等人采用高效液相色谱法为对照建立了近红外光谱测定丹参滴丸中 3 种酚酸类含量的方法使用最小二乘法建立 3 种成分的 NIR 光谱分析值与 HPLC 分析值之间的多元校正模型, 校正模型相关系数均大于 0 99, 表明 NIR 光谱法和 HPLC 法测定值无统计学意义证明 NIR 法操作简便快速无损, 可用于中药及其复方制剂有效成分的快速检测在研究中药的化学成分时需对其含有的每种物质进行定性研究, 常采用 NMR 方法进行鉴定但有些成分往往含量较低, 无法采用富集后进行 NMR 检测的方法进行研究在这种情况下, 采用质谱联用的技术往往可以收到事半功倍的效果 Liu Mei [34] 等采用 HPLC DAD MS 联用技术检测了 13 个丹参样品和 21 批次制剂中的共有峰, 并根据质谱鉴定出了其中 20 多个成分虽然丹参中多种成分结构已经明确, 但这只占其所有化学成分的小部分针对这种情况, 指纹图谱技术适合用来对丹参进行质量控制指纹图谱强调复杂体系的模糊性和整体性, 主要考察体系的整体相似性而不是某几个组分的相似性唐旭 [35] 利等人采用高效液相色谱法测定了 18 批丹参药材的图谱, 同时进行了聚类分析最终根据聚类分析结果, 建立了丹参水溶性成分指纹图谱图谱共显示了 12 个共有峰, 从共有峰中指认了丹参素钠 [36] 丹酚酸 B 等特征峰丰加涛等不仅建立了指纹图谱, 并且对指纹图谱进行了方法学研究, 最终可以利用指纹图谱测定其中原儿茶醛迷迭香酸的含量, 从而提高了丹参的质量标准, 使丹参的质控向着完善化全面化发展 4 酚酸类化合物的药理活性丹酚酸类化合物和丹参酮类化合物是丹参中主要的药理活性成分丹酚酸类化合物的结构中富含酚羟基研究表明, 该类化合物具有显著的抗氧化作用对脑缺血损伤和内皮细胞的保护作用抑制糖性白内障等活性诸多体外实验证明, 丹酚酸类化合物具有清除氧自由基抑制脂质体过氧化等多种抗氧化作用 Wu 等人认为丹酚酸 A 对神经细胞及肝脏细胞过氧化应激损伤等的保护作用机制主要来源于其抗氧化作用 [37] 张亚杰等人考察了丹参多酚酸盐对大鼠心脏缺血再灌注损伤的影响, 发现用丹参多酚酸预给药的试验组大鼠心肌梗死面积明显低于对照组, 证明丹参多酚酸盐对损伤有保护作用 [38] 除此之外, 丹参多酚酸还可以改善冠脉慢血流现象 [39], 改善慢性心力衰竭患者心功能 [40], 有着丰富的治疗心血管疾病的作用在治疗脑缺血方面, 丹酚酸类化合物也有丰富 [41] 的药理活性杜冠华用脑缺血再灌注损伤造成小鼠学习记忆功能障碍模型, 通过跳台实验和避暗实验研究了丹酚酸 A 对记忆获得功能障碍的作用, 结果表明丹酚酸 A 可以明显改善小鼠学习记忆功 [42] 能障碍状态任德成等人也发现总丹酚酸可以明显改善缺血再灌注引起的学习记忆障碍, 其机制与总丹酚酸抗氧化作用有关在保护血管内皮细胞 [43] 方面, 陈敏等观察丹参多酚酸盐对术后危重症患者血管内皮细胞功能的作用, 发现丹参多酚酸盐可以改善一氧化氮白细胞介素内皮素水平, 降低患者 APACHE I 评分, 降低 MODs 发生率表明丹参多酚酸盐对血管内皮细胞有保护作用 5 结语丹参中含有酚酸类丹参酮类等多种化学成分, 这些化学成分有丰富的药理作用虽然研究者们对丹参的化学成分和药理作用研究逐年深入, 但是丹参有效成分的作用机理研究和应用研究并不充分完备因此对于丹参有效成分的药理和临床作用, 还

5 ＷＯＲＬＤＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥＪＶＮ需要大量研究工作从而可以充分发掘丹参这一中药的潜力造福人类参考文献陈政雄顾文华黄慧珠丹参中水溶性酚酸成分的研究药学通报ＺＨＪＬＬＮＳＡＩＡＮｗｄｍｓＰＭＬＬＮＺＨＪＳＪｍｓＰｍＬＹＦＬＲｍｍｓＰｍＤｋＡＢｋｔａｌＧＰＩｍＴｍＪＮＰＹＬＬＹＦＳＬｍｓＴＬＳＺＷＬＹＪＣｍＳＬｍＰＵＳＬＮＬＲＴＷＭＣＳＡＡＮｗｄｍｒＳｍＰＭＺＨＪＬＬＮＳＡＨＡＮｗｄｍＳＶＳｍＣＣｍＬ沈建芳王强汪红南丹参化学成分研究中国野生植物资源ＡＣＢＬＬＮＳＳＡＢＩ毛声俊侯世祥唐昌炯等丹参素在加温加速条件下的含量中国中药杂志变化规律研究林青黄琳肖晓丽等丹参水提液中丹酚酸Ｂ湿热降解动力中国现代中药学研究顾娟罗海燕安莲英等丹参酚酸水提取工艺的研究天然产物研究与开发刘峰群肖小河史成和等大孔吸附树脂在药物分离中的研究应用中国医院药学杂志陈世敏胡盛李效宽等丹酚酸Ｂ提取工艺的研究中药材周锦珂黄裕葛发欢等纳滤技术在丹酚酸Ｂ提取液浓缩的今日药学应用研究倪力军史晓浩高秀蛟等提取时间溶剂对丹参提取物质量中成药的影响研究苗建武陈绍民王超等聚酰胺树脂分离纯化丹参总酚酸的中国实验方剂学杂志研究王凤美陈军辉李磊高纯度丹酚酸Ｂ的制备工艺研究时珍国医国药王凤美陈军辉李磊等高速逆流色谱法分离制备丹酚酸Ｂ天然产物研究与开发张启伟张颖李计萍等高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸Ｂ中国中药杂志张英丰朱黎霞梁东辉ＨＰＬＣ同时检测丹参提取物中种水溶性和脂溶性成分含量中国实验方剂学杂志虞科胡楚楚程翼宇近红外光谱法测定复方丹参滴丸中的种有效成分中国药学杂志ＬＭＬＹＧＺＦＣｍＤＳｍＲＲｍＪＮＳＡＣｍｓｍｍｑｍｗＰＨＰＬＣＤＡＤｍｍ姚俊严丹参中有效成分原儿茶醛的分离鉴定南京药学院学报ＡＣＢＬＬＳＡＤＥｗｎｗｄｍｒＳｍＰＭＥＳＩＭＳＪＳＳ唐旭利刘静李国强等丹参药材水溶性成分ＨＰＬＣ化学指纹图谱研究中成药丰加涛金郁王金成等基于定量指纹图谱技术的中药质量控制色谱ＡＣＬＬＳｍＷＺＭＷＴＴＹＦＥＦｍｗｋＡＣＣｍＬＬＡＨＧＨＹＭＤＤｍｑＢＣＰｍＴ张亚杰王旭丹参多酚酸盐对大鼠心脏缺血再灌注损伤的影中国老年学杂志响ｍｗ季俭卢英民姚能才等丹参多酚酸盐对冠状动脉慢血流现ｍｍＪＣｍＡ临床心血管病杂志象的影响周长新罗厚蔚丹羽正武丹参水溶性化学成分的研究中国药科大学学报吴世蓉不同产地丹参其主要化学成分的分离和测定基层中药杂志ＬＨＪＣＪＹＭＪＨＣｍＢｑＦ张军王凤云詹丽玲等丹参药材提取液中丹酚酸Ｂ稳定性影响因素的考察中国中药杂志张慧杰任晓亮崔明磊注射用丹参多酚酸中主要成分的降解动力学分析中国实验方剂学杂志邱雅慧薛凌高夏青丹参多酚酸盐对慢性心力衰竭患者心功能及炎症因子的影响中国实验方剂学杂志杜冠华张均田丹酚酸Ａ对小鼠脑缺血再灌注致学习记忆功能障碍的改善作用及作用机制药学学报任德成杜冠华张均田总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护作用中国药理学通报陈敏丹参多酚酸盐对术后危重症患者血管内皮细胞的保护作用中国老年学杂志收稿责任编辑王明

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世界中医药 年 月第 卷第 期 图 从丹参或同属植物中获得的酚酸类化合物及转化产物

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