288 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.4 表 1 华北驼绒藜种群样地区域特点 犜犪犫犾犲 1 犜犺犲犱犲狊犮狉犻狆狋犻狅狀狅犳犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狅犫狊犲狉狏犪狋犻狅狀狊犻狋犲狊 地点 种群代码 地理位置 海拔 年平均降水量 10 年积温 利

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1 第 20 卷 第 4 期 Vol.20,No.4 草业学报 ACTAPRATACULTURAESINICA 内蒙古野生华北驼绒藜种群遗传多样性和遗传分化研究 年 8 月 王普昶 1, 赵丽丽 2, 易津 3, 张锦华 1 (1. 贵州省草业研究所, 贵州贵阳 ;2. 贵州大学动物科学学院, 贵州贵阳 ; 3. 内蒙古农业大学生态环境学院, 内蒙古呼和浩特 ) 摘要 : 本研究利用 ISSR 分子标记技术对内蒙古 6 个群落野生华北驼绒藜种群的遗传多样性和遗传变异进行了分析, 结果表明, 内蒙古不同种群野生华北驼绒藜种水平遗传多样性较高, 多态位点百分率 (PPB) 达到 98.05%, Nei s 基因多样性指数 (h) 和 Shannon 多样性指数 (I) 分别为 和 ; 依据 PPB h 和 I 估计的各种群内平均遗传多样性的变化趋势一致, 依次为 PA>PB>PD>PC>PE>PF 华北驼绒藜遗传变异主要存在于种群内 种群间的基因流 (Nm) 为 , 大于 1 根据聚类分析, 大致可以将 6 个群落华北驼绒藜种群分为荒漠化草原种群和典型草原种群 生境片断化目前尚不足以导致华北驼绒藜特定基因丢失, 发生遗传漂变的可能性很小 关键词 : 华北驼绒藜 ; 野生种群 ; 遗传多样性 ; 遗传分化 ;ISSR 中图分类号 :S812.6;Q 文献标识码 :A 文章编号 : (2011) 华北驼绒藜 ( 犆犲狉犪狋狅犻犱犲狊犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 ) 属于藜科驼绒藜属旱生雌雄同株异花半灌木, 为中国特有植物种, 其营养丰富, 具有抗旱 抗寒 耐贫瘠等特性, 是干旱 半干旱地区优良饲草, 也是水土保持 防风固沙 国土整治的重要牧草 该种分布范围广泛, 在内蒙古草原区, 华北驼绒藜主要分布于从内蒙古中西部的荒漠化草原到中东部的典型草原 该区域内的华北驼绒藜群落类型复杂多样 : 在荒漠化草原区, 它常与小叶锦鸡儿 ( 犆犪狉犪犵犪狀犪犿犻犮狉狅狆犺狔犾 犾犪 ) 短花针茅 ( 犛狋犻狆犪犫狉犲狏犻犳犾狅狉犪 ) 构成群落 ; 在典型草原区, 它与大针茅 ( 犛. 犵狉犪狀犱犻狊 ) 冷蒿 ( 犃狉狋犲犿犻狊犻犪犳狉犻犵犻犱犪 ) 羊草 ( 犔犲狔犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊 ) 等共同建群 可见, 华北驼绒藜具有很广的生态幅和很强的适应能力 但近年来其种群严重退化和消失, 部分种群退化率高达 70% 以上 目前, 我国学者对驼绒藜从形态学 细胞学 孢粉学 胚胎学和 [1 3] 生殖生态学等方面进行了深入的研究, 并认为种子结实率低 胚胎发育过程营养失调 种子向幼苗转化率低等 [2] 是种群退化的主要原因, 而种群退化是否与遗传多样性和遗传分化有关还有待于进一步研究证实 [4] 据此, 本研究通过 ISSR(intersimplesequencerepeat, 简单序列重复区间扩增多态性 ) 技术, 在 DNA 水平上, 研究内蒙古中东部 6 个地理分布中心区的华北驼绒藜在不同群落类型中的遗传多样性和遗传分化, 初步探讨群落分布类型和遗传多样性的关系, 以期为华北驼绒藜种质资源保护 利用和遗传育种工作提供科学的理论依据 1 材料与方法 1.1 试验材料及来源 在对以往研究资料的分析和现有华北驼绒藜分布情况调查的基础上, 于 2008 年 8 月, 从内蒙古中东部地区华北驼绒藜的 6 个地理分布中心区采集试验材料 采样区位置和生境特点等见表 1 和 2 采样时, 在种群内根据种群大小沿途随机选取一定数量植株上的种子作为样本, 带回实验室后选取饱满种子, 温室育苗, 待幼苗生长 2 个月后, 每个种群随机选取 20 个单株, 总计 120 个单株进行研究 1.2 基因组 DNA 制备 [5] 采用改良的 CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide, 十六烷基三甲基溴化铵 ) 法分单株提取基因组 DNA 以 λdna 为分子量 Marker, 用 0.8% 琼脂糖凝胶电泳检查 DNA 的完整性, 估计 DNA 的浓度, 并用无菌水将 DNA 稀释至 20~30ng/ μ L,-20 保存备用 收稿日期 : ; 改回日期 : 基金项目 : 国家自然基金项目 ( ) 和贵州省农业攻关项目 ( 黔科合 NY 字 [2010]3045 号 ) 资助 作者简介 : 王普昶 (1981 ), 男, 内蒙古临河人, 助理研究员, 博士 E mail:wangpuchang@163.com 通讯作者

2 288 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.4 表 1 华北驼绒藜种群样地区域特点 犜犪犫犾犲 1 犜犺犲犱犲狊犮狉犻狆狋犻狅狀狅犳犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狅犫狊犲狉狏犪狋犻狅狀狊犻狋犲狊 地点 种群代码 地理位置 海拔 年平均降水量 10 年积温 利用类型 Location Population Geographic Altitude Annualmean Accumulated Usetype code position (m) precipitation (mm) temperature( ) 四子王旗白音希勒 PA E , ~ ~3200 轻度放牧 Slightlygrazed BaiyinxileinSiziwangqi N 四子王旗白音希勒 PB E , ~ ~3200 轻度放牧 Slightlygrazed BaiyinxileinSiziwangqi N 锡林浩特南郊 PC E , ~ 围封 Enclosed SouthernsuburbsofXilinhaote N 锡林浩特西南郊 PD E , ~ 围封 Enclosed SouthwesternsuburbsofXilinhaote N 克什克腾旗经鹏 PE E , 围封 Enclosed JingpenginKeshiketeng N 翁牛特旗乌丹 PF E , ~2900 围封 Enclosed Wudanin Wengniuteqi N 表 2 植物群落类型及特征 犜犪犫犾犲 2 犆犺犪狉犪犮狋犲狉狅犳狆犾犪狀狋犮狅犿犿狌狀犻狋狔 种群 Populations 植物群落类型及特征 Charactersofplantcommunity 华北驼绒藜 + 小叶锦鸡儿 + 短花针茅 : 位于缓坡, 地表覆沙, 有放牧利用, 主要伴生种碱韭 糙隐子草 无芒隐子草和木地肤 土 PA 壤类型 : 淡栗钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犆. 犿犻犮狉狅狆犺狔犾犪 + 犛. 犫狉犲狏犻犳犾狅狉犪 :growsatdulerslope,withsandcoveringontheearth ssur face,usedforgrazing,mainlycompaniedwith 犃犾犻狌犿狆狅犾狔狉犺犻狕狌犿, 犆犾犲犻狊狋狅犵犲狀犲狊狊狇狌犪狉狉狅狊犪, 犆. 狊狅狀犵狅狉犻犮犪 and 犓狅犮犺犻犪狆狉狅狊狋狉犪狋犪. Thesoiltype:lightchestnutsoil 华北驼绒藜 + 短花针茅 + 无芒隐子草 : 位于缓丘下部, 地表轻微覆沙, 有轻度放牧利用, 主要伴生种为碱韭 冷蒿 寸草苔 猪毛菜 PB 等 土壤类型 : 淡栗钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犛. 犫狉犲狏犻犳犾狅狉犪 + 犆. 狊狅狀犵狅狉犻犮犪 :growsatthelowerpartofdulerslope,withfewsand coveringontheearth ssurface,slightlyusedforgrazing,mainlycompaniedwith 犃. 狆狅犾狔狉犺犻狕狌犿, 犃. 犳狉犻犵犻犱犪, 犆犪狉犲狓犱狌狉犻狌狊犮狌犾犪 and 犛犪犾狊狅犾犪犮狅犾犻狀犪 andsoon.thesoiltype:lightchestnutsoil 华北驼绒藜 + 大针茅 + 冷蒿 : 位于缓丘中下部, 有轻微放牧, 主要伴生种为狭叶锦鸡儿 茵陈蒿 星毛委陵菜 糙隐子草等, 土壤类 PC 型 : 栗钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犛. 犵狉犪狀犱犻狊 + 犃. 犳狉犻犵犻犱犪 :growsatthelowerpartofdulerslope,withoutgrazing,mainlycompanied with 犆. 狊狋犲狀狅狆犺狔犾犪, 犃. 犮犪狆犻犾犪狉犻狊, 犘狅狋犲狀狋犻犾犪犪犮犪狌犾犻狊 and 犆. 狊狇狌犪狉狉狅狊犪 andsoon.thesoiltype:chestnutsoil 华北驼绒藜 + 大针茅 : 位于丘坡下部围栏内, 地表覆沙, 且有较多的玄武岩砾石, 无放牧, 主要伴生种有羊草 沙蒿 冰草 细叶莺 PD 尾和二裂委陵菜等 土壤类型 : 栗钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犛. 犵狉犪狀犱犻狊 :growsintheenclosureatthelowerpartofhilockslope, withsandandlargenumberofbasaltcobblestonescoveringontheearth ssurface,withoutgrazing,mainlycompaniedwith 犔犲狔 犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊, 犃. 犻狀狋狉犪犿狅狀犵狅犾犻犮犪, 犃犵狉狅狆狔狉狅狀犮狉犻狊狋犪狋狌犿, 犐狊犻狊狋犲狀狌犻犳狅犾犻犪 and 犘. 犫犻犳狌狉犮犪 andsoon.thesoiltype:chestnutsoil 华北驼绒藜 + 大针茅 + 羊草 : 位于梁地有少量小砾石, 人工栽种山杏, 冰草, 扁蓄豆 草木樨状黄芪等为主要伴生种 土壤类型 : PE 暗栗钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犛. 犵狉犪狀犱犻狊 + 犔. 犮犺犻狀犲狀狊犻狊 :growsinmountainridgewithsmalamountofcobblestonescoveringonthe earth ssurface,mainlycompaniedwithman cultivated 犘狉狌狀狌狊犪狉犿犲狀犻犪犮犪, 犃. 犮狉犻狊狋犪狋狌犿, 犜狉犻犵狅狀犲犾犪狉狌狋犺犲狀犻犮犪, 犃狊狋狉犪犵犪犾狌狊犿犲 犾犻犾狅狋狅犻犱犲狊 andsoon.thesoiltype:chestnutsoil 华北驼绒藜 + 羊草 + 杂类草 : 位于缓坡下部围栏内, 地表少量小砾石且有放牧利用, 主要伴生种为冰草 糙隐子草 扁蓄豆 麻花 PF 头 寸草苔 黄囊苔等 土壤类型 : 棕钙土犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 + 犔. 犮犺犻狀犲狀狊犻狊 +mixedgrassspecies:growsintheenclosureatthelower partofhilockslope,withsmalamountofcobblestonescoveringontheearth ssurface,grazed,mainlycompaniedwith 犃. 犮狉犻狊 狋犪狋狌犿, 犆. 狊狇狌犪狉狉狅狊犪, 犜. 狉狌狋犺犲狀犻犮犪, 犛犲狉狉犪狋狌犾犪犮犲狀狋犪狌狉狅犻犱犲, 犆. 犱狌狉犻狌狊犮狌犾犪, 犆. 犽狅狉狊犺犻狀狊犽狔犻 andsoon.thesoiltype:brownsoil

3 第 20 卷第 4 期 草业学报 2011 年 PCR 扩增与检测扩增反应体系 20μL, 其中含 20~30ng 模板 DNA,175μmol/LdNTP,1 U TaqDNA 聚合酶,2 mmol/l MgCl 2,0.4μmol/LISSR 引物,2μL10 Bufer,ddH 2O 补至 20μL 扩增反应在 BiometraTgradient96PCR 仪上进行 反应程序为 94 预变性 3min;94 变性 30s,48~52 退火 45s,72 延伸 1.5min,35 个循环 ;72 延伸 10min; 最后 4 保温 PCR 扩增产物于 1.5% 琼脂糖凝胶 ( 含 GV) 电泳检测, 电极缓冲液为 0.5 TBE, 稳压 90V, 电泳时间 2h, 用 DL2000 作标准分子量对照 电泳结束后在紫外灯下观察 记录 拍照 1.4 数据分析将电泳图谱同一位置清晰出现的条带记为 1, 没有的条带记为 0, 将条带信息转换成 0 和 1 组成的原始矩阵 采用 Popgen32 分析软件, 在假定种群处于 Hardy Weinberg 平衡状态下, 计算 ISSR-PCR 扩增产物的多态位点数 多态位点百分率 (PPL) Nei s 基因多样性指数 (h) Shannon 多样性指数 (I) 遗传分化系数 (Gst) 及基因流 (Nm), 并利用 WINAMOVA1.55 程序对种群的遗传结构进行分子方差分析 (AMOVA),NTSYSpc2.1 软件进行 UPGMA 聚类分析和 PCO 主坐标分析 2 结果与分析 2.1 引物筛选根据加拿大哥伦比亚大学 (UniversityofBritishColumbia,SetNo.9,No ) 公布的引物序列设计 50 个 ISSR 引物 ( [6], 并交由上海生物工程有限公司合成 从 50 个引物中筛选出 13 个扩增条带较多 信号强 背景清晰的引物用于扩增反应,13 个引物分别为 UBC807 UBC808 UBC810 UBC812 UBC817 UBC818 UBC820 UBC825 UBC827 UBC840 UBC856 UBC857 和 UBC866, 图 1 为引物 UBC812 对 PA 种群 20 个单株种子苗 DNA 的扩增结果 图 1 犐犛犛犚引物犝犅犆 812 对种群犘犃的扩增结果 犉犻犵.1 犇犖犃犳狉犪犵犿犲狀狋狊犪犿狆犾犻犳犻犲犱犫狔狋犺犲犐犛犛犚狆狉犻犿犲狉犝犅犆 812 狅狀狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀犘犃 M: 标准分子量 Marker 2.2 种群遗传多样性将 6 个华北驼绒藜种群的遗传多样性进行统计分析, 结果表明 ( 表 3),ISSR 检测出 6 个华北驼绒藜种群的多态位点 151 个, 各种群多态位点平均为 124 个 华北驼绒藜种水平上多态性位点百分率高达 98.05%, 种群间的平均值 80.62% 种群 PA 和 PB 的多态性位点百分率较高, 高于 6 个种群的平均值 种水平的 Nei s 基因多样性指数 (h) 和 Shannon 多样性指数 (I) 分别为 和 , 两指标种群间的平均值分别为 和 多态位点百分率 Nei s 指数和 Shannon 多样性指数估计的各种群内平均遗传多样性的变化趋势一致, 依次为 PA>PB>PD>PC>PE>PF 2.3 种群遗传分化程度基于 Nei s 指数估算出华北驼绒藜 6 个种群总基因多样性为 , 种群内基因多样性为 , 遗传分化系数 (Gst) 为 , 种群间的基因流 (Nm) 为 ( 表 4), 说明华北驼绒藜种群遗传变异主要存在于种群内 分子方差分析 (analysisofmolecularvariance,amova) 可直接对 RAPD(randomamplifiedpolymorphic DNA, 随机扩增多态性 DNA) 和 ISSR 等显性标记的表型数据进行分析, 剖析居群表型变异时, 不依赖于各种假

4 290 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.4 [7 9] 设条件 利用 WINAMOVA1.55 软件对华北驼绒藜种群内和种群间的分子变异分析表明, 华北驼绒藜种群间和种群内的变异均达到极显著水平 ( 犘 <0.001), 其中, 种群间变异占 13.21%, 种群内变异占 86.79%( 表 5) 表 3 华北驼绒藜基于犐犛犛犚的遗传多样性 犜犪犫犾犲 3 犌犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔狑犻狋犺犻狀犪狀犱犪犿狅狀犵狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚 种群 多态位点数 多态位点百分率 (PPL) Nei s 基因多样性指数 Shannon 多样性指数 Populations No.ofpolymorphicloci Percentofpolymorphicloci(%) Nei sgeneticdiversity(h) Shannonindex (I) PA PB PC PD PE PF 平均 Average 种水平 Specieslevel 表 4 华北驼绒藜 6 个种群间的遗传分化 犜犪犫犾犲 4 犌犲狀犲狋犻犮犱犻犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狊犪犿狅狀犵犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊 计算依据 总基因多样性 种群内基因多样性 种群间分化系数 基因流 Computation Totalgenediversity Genediversitywithin Geneticdiferentiationamong Geneflow basis (Ht) populations(hs) population(gst) (Nm) Nei s 指数 Nei sindex 表 5 华北驼绒藜 6 个种群间遗传变异的犃犕犗犞犃分析 犜犪犫犾犲 4 犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犿狅犾犲犮狌犾犪狉狏犪狉犻犪狀犮犲 ( 犃犕犗犞犃 ) 犳狅狉 6 狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊狅犳犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊 变异来源 自由度 方差 均方 方差分量 方差分量比率 固定指数 显著性 Sourceofvariation 犱. 犳. Sumofsquares Mean Variance Percentageof Fixtionindex 犘 value squares components variation (%) (Fst) 种群间 Amongpopulations < 种群内 Withinpopulations < 总体 Total 聚类分析和主坐标分析以种群间遗传距离为基础, 按 UPGMA 法进行聚类, 获得不同种群间的遗传关系 ( 图 2), 与利用 NTSYSpc 2.1 软件进行主坐标分析的结果 ( 图 3) 相吻合 6 个不同群落华北驼绒藜种群分为两大组, 即荒漠化草原种群组 (PA PB) 和典型草原种群组 (PB PC PD 和 PE) 第 1 组为种群 PA 和 PB,2 个种群均处于以华北驼绒藜 短花针茅为建群种的群落中, 是所有种群中亲缘关系最近的, 最先聚为一支 ; 第 2 组中 4 个种群的相聚顺序存在差异, 种群 PC( 华北驼绒藜 + 大针茅 + 冷蒿 ) 和 PD( 华北驼绒藜 + 大针茅 ) 亲缘关系较近, 二者相聚为一支后与种群 PE ( 华北驼绒藜 + 大针茅 + 羊草群落 ) 相聚, 最后三者与种群 PF( 华北驼绒藜 + 羊草 + 杂类草 ) 相聚 结合图 2,3 不难看出, 聚类分析 主坐标分析结果与种群所处群落类型及空间分布具有较强的相关性 3 讨论 3.1 华北驼绒藜的遗传多样性 Hamrick 和 Loveless [10,11] 指出一个物种遗传多样性的高低与它的生活史特征和生态特征分不开, 认为稀有

5 第 20 卷第 4 期 草业学报 2011 年 291 图 2 华北驼绒藜种群的犐犛犛犚标记聚类图犉犻犵.2 犇犲狀犱狉狅犵狉犪犿犳狅狉犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚犿犪狉犽犲狉狊犫狔犝犘犌犕犃犿犲狋犺狅犱 图 3 华北驼绒藜种群依据犐犛犛犚分析的三维主坐标犉犻犵.3 犜犺犲狊犮犪狋犲狉犪狀犱狋犺狉犲犲犱犻犿犲狀狊犻狅狀犪犾狆犾狅狋狅犳狆狉犻狀犮犻狆犪犾犮狅狅狉犱犻狀犪狋犲狊犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚犪狀犪犾狔狊犻狊 种或特有种以及分布范围狭窄的物种, 遗传多样性水平较低, 广布 异交 动物传播种子都会使物种具有较高的遗传多样性 华北驼绒藜种水平上具有较高的遗传多样性, 可能与其生物学特性 生活史及生境特点等有关 首先, 从传粉特性来看, 华北驼绒藜属于风媒传粉, 相对于虫媒传粉, 其花粉更易于扩散 ; 花为单性, 雌雄同株, 可进 [12] 行同株和异株授粉, 但同株授粉常造成结实率降低, 并影响种子寿命, 是种子易于裂变的原因之一 这样的传粉和繁育方式有利于维持其较高的遗传多样性 其次, 华北驼绒藜在长期进化过程中形成了兼具 r 对策和 k 对策的双重对策来维护种群的稳定和更新 华北驼绒藜这种复杂的生殖对策维系着种群的发展, 所以华北驼绒藜虽具有胚胎发育过程营养失调 种子向幼苗的转化率低等生殖特性缺陷, 种群动态为衰退型, 但仍表现出广域分 [13] 布 另外, 物种的遗传多样性水平在一定程度上体现着这个物种适应环境的能力, 制约着物种适应性进化的水 [14 16] 平, 同时为其资源现状和保护价值的评估提供非常重要的信息 基于 PPB h 和 I 得出 PA 和 PB 种群内的遗传差异和多态性较高,PF 种群内的遗传差异和多态性较低, 野外调查也发现华北驼绒藜在荒漠 半荒漠草原分布最广, 长势最好, 表明了荒漠 半荒漠草原可能最适合于华北驼绒藜的生长 所以在开发利用时, 应更加注意对种群 PF 进行保护, 因为其出现种质退化的风险较其他种群大 3.2 华北驼绒藜的遗传分化近年来, 因为草地过度利用, 草地上的华北驼绒藜大种群被破坏成小种群, 出现了种群片段化 而许多研究表明, 种群大小是决定种群遗传变异的重要因素, 小种群常由于建立者效应 近交或遗传漂变而导致遗传多样性的降低, 遗传分化增加, 基因流减小 华北驼绒藜为异花授粉植物 一般认为异交传粉植物的遗传分化系数平均为 0.20, 而自交物种为 0.51 [17,18] Bussel [18] 用 RAPD 方法分析 35 种植物的遗传分化系数, 发现 29 个异交物种的平均遗传分化系数为 , 另外 6 个自交物种为 华北驼绒藜种群的遗传分化系数介于 0.05~ [19] 0.15, 属于中等分化, 且分化水平小于异交传粉植物的平均值 种群间的基因流 Nm 为 , 大于 1, 高于异交植物的平均值 3.5 [20], 说明种群间有基因交流, 阻止或减少了遗传漂变发生的可能 华北驼绒藜 6 个种群的遗传多样性相对较高, 遗传分化系数较小, 基因流相对较大, 表明受人类活动干扰和原有植被破坏所导致的生境片断化目前尚不足以导致其特定的基因丢失, 发生遗传漂变的可能性很小 UPGMA 聚类分析和主坐标分析, 均将 6 个种群分为两大组, 即荒漠化草原种群和典型草原种群, 这与种群所处群落类型及空间分布大致吻合, 即种群间所处的群落环境越相近, 其遗传距离也相对较小

6 292 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.4 参考文献 : [1] 易津, 王学敏, 乌仁其木格, 等. 驼绒藜属牧草种子生理学特性的研究 [J]. 种子,2004,23(4):3 9. [2] 韩智龙, 易津. 华北驼绒藜种子发育过程中内源激素变化动态的研究 [J]. 种子,2008,29(7):3 9. [3] 卢立娜, 李青丰, 贺晓, 等. 华北驼绒藜开花生物学特性研究 [J]. 西北植物学报,2009,29(6): [4] 解新明, 卢小良.SSR 和 ISSR 标记及其在牧草遗传与育种研究中的应用前景 [J]. 草业科学,2005,22(2): [5] AdamsRP,SchwarzbachA E,PandeyR N.Theconcordanceofterpenoid,ISSRandRAPD markers,anditssequencedata setsamonggenotypes:anexamplefromjuniperus[j].biochemicalsystematicsandecology,2003,31: [6] 花? 斌. 银杏群体遗传多样性的 RAPD 和 ISSR 分析 [D]. 南京 : 南京林业大学,2007. [7] ExcofierL,SmousePE,OuatroJM, 犲狋犪犾.Analysisofmolecularvarianceinferredfrom metricdistancesamongdnahap lotypes:applicationtohumanmitochondrialdnarestrictionsites[j].genetics,1992,131: [8] HapkeA D,ZinnerH,Zischler.MitochondrialDNAvariationinEritreanhamadryasbaboons ( 犘犪狆犻狅犺犪犿犪犱狉狔犪狊犺犪犿犪犱狉 狔犪狊 ):lifehistoryinfluencespopulationgeneticstructure[j].behavioralecologyandsociobiology,2001,50: [9] 刘忠辉, 刘国道, 黄必志, 等. 云南猪屎豆属遗传多样性的 ISSR 分析 [J]. 草业学报,2009,18(5): [10] HamrickJL,LovelessM D.Thegeneticstructureoftropicaltreepopulations:Associationswithreproductivebiology[A]. In:BockJU,LinhartYB.PlantEvolutionaryEcology[M].Boulder:WestviewPress,1989. [11] HamrickJL,LovelessM D.Factorsinfluencinglevelsofgeneticdiversityinwoodyplantspecies[J].NewForests,1992,6: [12] 刘锦, 贾睿芬, 贺晓, 等. 华北驼绒藜花粉萌发特性及不同授粉方式对其结实率的影响 [J]. 种子,2007,26(9):5 9. [13] 王普昶, 易津, 赵丽丽. 华北驼绒藜种群数量动态与生殖特性的相关性 [J]. 生态学杂志,2010,29(6): [14] 范彦, 曾兵, 张新全, 等. 中国野生鸭茅遗传多样性的 ISSR 研究 [J]. 草业学报,2006,15(5): [15] HogbinP M,PeakalR.Evaluationofthecontributionofgeneticresearchtothemanagementoftheendangered 犣犻犲狉犻犪狆狉狅狊 狋狉犪狋 [J].ConservationBiology,1999,13: [16] 刘伟, 张新全, 李芳, 等. 西南区野生狗牙根遗传多样性的 ISSR 标记与地理来源分析 [J]. 草业学报,2007,16(3): [17] ChuangM G.Alozymediversityintheendangeredshrub 犃犫犲犾犻狅狆犺狔犾狌犿犱犻狊狋犻犮犺狌犿 ( 犗犾犲犪犮犲犪犲 ):amonotypickoreangenus[j].inter nationaljournalofplantscience,1999,160: [18] BusselJD.Thedistributionofrandom amplifiedpolymorphicdna(rapd)diversityamongstpopulationsof 犐狊狅狋狅犿犪狆犲狋狉犪犲犪 (Lobeliaceae)[J].MolecularEcology,1999,8: [19] 张道远,TakamizoT. 剪股颖属植物遗传分化及系统关系的分子标记研究 [J]. 草业学报,2006,15(3): [20] 陈小勇. 植物基因流及其在濒危植物保护中的作用 [J]. 生物多样性,1996,4(2): 犌犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔犪狀犱犵犲狀犲狋犻犮狏犪狉犻犪狋犻狅狀狅犳犆犲狉犪狋狅犻犱犲狊犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊狑犻犾犱狆狅狆狌犾犪狋犻狅狀狊犻狀犐狀狀犲狉犕狅狀犵狅犾犻犪 WANGPu chang 1,ZHAOLi li 2,YIJin 3,ZHANGJin hua 1 (1.GuizhouPractacultureResearchInstitute,Guiyang550006,China;2.ColegeofAnimalScience, GuizhouUniversity,Guiyang550025,China;3.ColegeofEcologyandEnvironmental Science,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010019,China) 犃犫狊狋狉犪犮狋 :Byusinginter simplesequencerepeat(issr)markerstechnique,thispaperstudiedthegeneticdiver sityandvariationofsixwildpopulationsof 犆犲狉犪狋狅犻犱犲狊犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊.Theresultsshowedthatatspecieslevelthe percentageofpolymorphicbank (PPB)was98.05%,Nei sgenediversity (h)andshannon sindex (I)were and0.4557,respectively.AccordingtoPPB,handI,estimatedthetrendlineoftheaveragegenetic diversitywithineachpopulationwassimilar,theorderwaspa>pb>pd>pc>pe>pf.thereweremorege neticvariationswithinthepopulationthanamongpopulations.thegeneflowis4.3332amongpopulations, weregreaterthan1.theclusteranalysissuggestedthatthesixpopulationsof 犆. 犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 couldbedivided intotwogroups,i.e.desertgrasslandgroupandtypicalgrasslandgroup.thehabitatfragmentationwasstil notenoughtocausethelossofspecificgene,geneticdriftoccuredveryunlikely. 犓犲狔狑狅狉犱狊 : 犆犲狉犪狋狅犻犱犲狊犪狉犫狅狉犲狊犮犲狀狊 ;wildpopulations;geneticdiversity;geneticvariation;issr

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