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1 全 国 兽 医 内 科 学 会 议 交 流 材 料 血 浆 Leptin 激 素 异 常 动 态 变 化 与 奶 牛 亚 临 床 酮 病 的 发 生 有 关 广 西 大 学 何 宝 祥 等 1

2 一 前 言 1 leptin 2 奶 牛 酮 病 3 本 研 究 的 必 要 性 2

3 二 材 料 与 方 法 试 验 牛 随 机 选 取 头 均 年 产 奶 量 近 6 吨 的 南 宁 市 某 奶 牛 场 的 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 作 为 试 验 对 象, 被 检 奶 牛 的 胎 次 均 为 第 2 胎 饲 养 方 式 相 同, 年 龄 预 产 期 相 近, 被 检 牛 平 均 体 况 5 分 制 评 分 约 占 为 3.0 3

4 二 材 料 与 方 法 血 样 采 集 于 产 前 10 天 及 产 后 天 早 上 空 腹 颈 静 脉 采 血, 加 入 盛 有 抑 肽 酶 和 EDTA 二 钠 的 试 管 中, 然 后 立 即 2000 转 /min 离 心 10min,, 分 离 血 浆, 避 免 溶 血 用 于 测 定 Leptin 的 血 浆 样 品 分 装 于 1.5mL 的 EP 管 中, 储 存 于 -20 待 检 ; 其 余 血 浆 样 品 立 即 送 实 验 室 待 检 4

5 二 材 料 与 方 法 检 测 项 目 测 定 被 检 奶 牛 血 浆 中 的 Leptin 酮 体 葡 萄 糖 和 脂 肪 含 量 Leptin 采 用 放 射 免 疫 法 ; 血 糖 测 定 采 用 邻 甲 苯 胺 法 ; 血 酮 测 定 采 用 水 杨 醛 比 色 法 ; 血 脂 测 定 采 用 香 草 醛 法 5

6 二 材 料 与 方 法 分 析 内 容 与 数 据 处 理 在 试 验 中, 其 中 一 头 牛 因 淘 汰 而 该 资 料 被 删 除 本 试 验 产 前 10 天 的 血 液 样 品 包 括 产 前 10-4 天 内 采 的 样 品 1 统 计 各 项 指 标 的 检 测 结 果 2 用 SAS 统 计 软 件 进 行 方 差 分 析 和 显 著 性 检 验 和 多 重 比 较 3 分 析 各 指 标 的 动 态 变 化 规 律 6

7 二 材 料 与 方 法 4 分 析 血 浆 Leptin 水 平 与 酮 体 葡 萄 糖 和 血 脂 含 量 间 的 相 关 性 5 按 照 奶 牛 酮 病 的 判 定 标 准, 划 分 亚 临 床 酮 病 组 和 酮 体 正 常 组, 分 析 各 指 标 在 亚 临 床 酮 病 牛 与 血 酮 正 常 牛 之 间 的 差 异 显 著 性 以 及 每 组 牛 各 指 标 的 变 化 特 点 7

8 三 结 果 与 分 析 3.1 分 娩 前 后 奶 牛 血 浆 中 Leptin 酮 体 葡 萄 糖 脂 肪 含 量 的 检 测 结 果 及 动 态 变 化 血 浆 Leptin 酮 体 葡 萄 糖 脂 肪 含 量 的 检 测 结 果 见 表 1,, 其 动 态 变 化 曲 线 见 图 1 8

9 三 结 果 与 分 析 Tale 1 The lood plasma concentration of leptin, ketone odies, glucose and lipids at differient stages etween 10 day efore to 56 days after parturition in 15 dairy cows Day post partum Leptin (ng/ml) Ketone odies(mg/dl mg/dl) Glucose (mmol/l) Total Lipids (g/l) ± ±0.55 aa 4.53± ± acdefg ± a 2.18± ± ± a cdefg ± ± ± ± acdefg ±0.91 a 2.49± ± ± acdefg ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± B 3.91± ± acdefg 0.55 acdefg 0.51 cdeg ± ± B 3.93± ±0.69 fg ± ± ± ±0.70 fg ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±

10 Chart 1 Dynamic changes of plasma levels of leptin(ng/ml) /ml),ketone(mg/dl), glucose(mmol/l)and lipids(g/l) in dairy cows around parturitions 三 结 果 与 分 析 concentrations Leptin Ketone Glucose lipids Day post partum 10

11 3.2 血 浆 Leptin 等 指 标 的 动 态 相 关 性 三 结 果 与 分 析 分 析 本 研 究 获 得 的 180 组 血 浆 中 Leptin 血 酮 血 糖 血 脂 含 量 数 据, 其 相 关 性 结 果 见 表 10,, 可 以 看 出 Leptin 与 血 脂 的 相 关 系 数 为 0.276,, 呈 极 显 著 的 正 相 关 P<0.001), 血 酮 与 血 糖 相 关 系 数 为 ,, 呈 极 显 著 的 负 相 关 (P<0.001), 其 余 各 指 标 间 相 关 性 差 异 不 显 著 (P<0.05) 11

12 三 结 果 与 分 析 Tale2 Correlations of plasma leptin, ketone odies, glucose, lipids in cows around parturition Item Correlationship Leptin Ketone odies Glucose Sample numer(n (n) Ketone odies Glucose Lipids Corr.. coefficient (r) t value Corr.. coefficient (r) t value Corr.. coefficient (r) t value * *

13 三 结 果 与 分 析 3.3 病 牛 和 正 常 牛 之 间 leptin 等 指 标 的 变 化 特 点 3.3 在 本 研 究 的 被 检 牛 中, 按 照 亚 临 床 酮 病 的 判 定 标 准 共 检 出 亚 临 床 酮 病 牛 3 头, 其 余 12 头 为 血 酮 正 常 牛, 未 检 出 临 床 型 酮 病 牛 依 据 试 验 设 计 分 成 两 组 亚 临 床 酮 病 组 的 血 浆 leptin 血 糖 血 酮 血 脂 的 动 态 变 化 曲 线 见 图 2,, 血 酮 正 常 组 的 见 图 3 13

14 Charter 2 Dynamic changes of plasma concentrations of 三 结 果 与 分 析 leptin(ng/ml) /ml),ketone(mg/dl), glucose(mmol/l)and lipid(g/l) in cows with suclinical ketosis around parturitions Concentration Day post partum Leptin Ketone Glucose Lipids 图 注 : 产 后 天 的 血 酮 含 量 分 别 为 :10.84: 和 8.46mg/dl 14

15 Chart 3 Dynamic changes of plasma concentrations of 三 结 果 与 分 析 leptin(ng/ml) /ml), ketone(mg/dl) /dl),glucose(mmol/l)and lipid(g/l) in healthy dairy cows around parturitions Concentrations Leptin Ketone Glucose Lipids Day post partum 15

16 三 结 果 与 分 析 两 组 各 指 标 动 态 变 化 比 较 Concentration Day post partum Leptin Ketone Glucose Lipids levels Day post partum Leptin Ketone Glucose Lipids 16

17 四 结 论 我 们 首 次 发 现 亚 临 床 酮 病 组 奶 牛 的 Leptin 血 酮 血 糖 含 量 的 低 频 率 和 血 脂 含 量 的 高 频 率 波 动 变 化, 是 此 期 奶 牛 机 体 对 正 常 能 量 代 谢 调 控 出 现 失 常 的 反 映 产 后 8 周 内 血 浆 Leptin 水 平 动 态 变 化 呈 单 峰 出 现 与 奶 牛 酮 病 的 发 生 有 关 17

18 奶 牛 产 后 肝 功 能 异 常 出 现 在 血 酮 升 高 之 前 广 西 大 学 何 宝 祥 等 18

19 1 目 的 了 解 荷 斯 坦 奶 牛 分 娩 前 后 酮 体 等 部 分 血 液 生 化 指 标 以 及 肝 功 酶 等 指 标 的 动 态 变 化 特 征 以 及 各 指 标 间 的 动 态 相 关 性, 为 认 识 酮 病 发 病 机 理 积 累 资 料 19

20 结 果 表 1 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 产 前 10 天 至 产 后 42 天 内 血 酮 血 糖 各 种 蛋 白 含 量 分 娩 ( 天 ) 血 酮 (KET)(mg/ mg/dl) ± ±0.75 a 血 糖 (GLU)(mg/ mg/dl) 总 蛋 白 (TP) (g/l) 80.98± a 67.32± ± a 75.33±11.82 a ± a 77.07±9.33 a 60.65±3.95 a 白 蛋 白 (ALB) (g/l) 球 蛋 白 (GLO) (g/l) 32.99± ±7.77 a 32.79± ± a 31.47± ±4.98 a ±0.82 a 75.12±8.64 a 64.26± a 33.36± ±6.16 a ±1.74 a 79.20±6.30 a 63.11±4.45 a 32.03± ± a ± a 76.60±14.20 a 66.75± ± a ±3.96 a 69.90± a 67.94± ± ±10.58 a ± a 67.52± ± ±2.37 a 68.66± ±14.37 a 31.46± ± ± ± ± ± ± ± ± ±

21 图 1 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 分 娩 前 后 血 浆 酮 体 葡 萄 糖 蛋 白 和 酶 含 量 的 动 态 变 化 曲 线 Concentrations Day around parturition KET (mg/dl) GLU(10 mg/dl) TP(10 g/l) ALB(10 g/l) GLO(10 g/l) 21

22 结 果 表 1 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 产 前 10 天 至 产 后 42 天 内 血 酮 血 糖 各 种 蛋 白 含 量 分 娩 ( 天 ) 血 酮 (KET)(mg/ mg/dl) ± ±0.75 a 血 糖 (GLU)(mg/ mg/dl) 总 蛋 白 (TP) (g/l) 80.98± a 67.32± ± a 75.33±11.82 a ± a 77.07±9.33 a 60.65±3.95 a 白 蛋 白 (ALB) (g/l) 球 蛋 白 (GLO) (g/l) 32.99± ±7.77 a 32.79± ± a 31.47± ±4.98 a ±0.82 a 75.12±8.64 a 64.26± a 33.36± ±6.16 a ±1.74 a 79.20±6.30 a 63.11±4.45 a 32.03± ± a ± a 76.60±14.20 a 66.75± ± a ±3.96 a 69.90± a 67.94± ± ±10.58 a ± a 67.52± ± ±2.37 a 68.66± ±14.37 a 31.46± ± ± ± ± ± ± ± ± ±

23 表 2 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 产 前 和 产 后 42 天 内 血 浆 GGT AST AST ALT OCT 活 性 检 测 结 果 分 娩 ( 天 ) GGT(U/L) AST(U/L) ALT*(U/L) OCT(U/L/min) ± ±10.54 a 30.99±10.00 a 7.65± a 14.48± ±15.31 a 24.35±1.46 a 10.78±6.02 a 15.97± ±16.61 a 21.96± ±4.71 a 14.74± ±14.08 a 20.96± ± a 19.51± a 74.44±17.85 a 21.12± ±3.28 a 24.91± a 78.63±11.77 a 25.19± a 14.88± ± a 70.45±18.04 a 22.05± ± ± ±12.13 a 22.74±10.46 a 11.51±6.57 a 14.54± ±11.51 a 21.12± ±4.61 a 13.99± ± ± ±4.61 a 23

24 图 2 16 头 荷 斯 坦 奶 牛 分 娩 前 后 血 酮 血 糖 GGT GGT AST ALT OCT 活 性 的 动 态 变 化 曲 线 Concentrations Day around parturition KET (mg /dl) GLU(10 mg/dl) GGT(10 U/L) AST(10 U/L) ALT(10 U/L) OCT(U/L/ min) 24

25 Tale3 Dynamic relation within plasma ketone and other eight parameters for 16 dairy cows in 10 stages 项 目 OCT ALT AST GGT GLO ALB TP GLU 样 本 数 KET ** ** GLU ** GLU ** TP * ** * * ALB ** ** GLO ** GGT ** AST ALT

26 结 论 综 合 上 述 结 果, 血 浆 AST GGT GGT OCT ALT 在 产 后 14 天 活 性 异 常 增 高, 在 产 后 21 天 以 后 血 浆 球 蛋 白 相 对 升 高 和 白 蛋 白 降 低 都 出 现 在 酮 体 升 高 之 前, 表 明 肝 脏 功 能 先 出 现 病 理 性 改 变, 然 后 出 现 血 浆 酮 体 升 高, 首 次 揭 示 了 肝 脏 功 能 损 伤 在 前 发 生 酮 病 在 后 的 时 序 特 征, 反 映 了 肝 脏 功 能 与 酮 病 发 病 机 理 之 间 的 联 系 26

27 隐 性 酮 病 组 和 酮 体 正 常 组 牛 比 较 Concentrations Day around parturition 血 酮 (mg/dl) 血 糖 (10 mg/dl) GGT(10U/ L) AST(10 U/L) ALT(10 U/L) OCT(U/L/ min) Concentrations Day around parturition 血 酮 (mg/dl) 血 糖 (10 mg/dl) GGT(10 U/L) AST(10 U/L) ALT(10 U/L) OCT(U/L/m in) 27

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