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1 第 33 卷第 8 期 2016 年 8 月 新乡医学院学报 JournalofXinxiangMedicalUniversity Vol.33 No.8 Aug 欁欁 本文引用 : 付丹丹, 胡华, 孙敏, 等.Runx3 对银屑病患者 Th1/Th2 细胞平衡的影响及其作用机制 [J]. 新乡医学 院学报,2016,33(8): DOI: /xxyxyxb Runx3 对银屑病患者 Th1/Th2 细胞平衡的影响及其作用机制 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 临床研究 付丹丹, 胡华, 孙敏, 李占国, 田中伟 ( 新乡医学院第一附属医院皮肤性病科, 河南卫辉 ) 摘要 : 目的检测 Runx3 在银屑病患者和健康人外周血 CD4 + T 细胞中转录水平的表达, 分析其对 Th1/Th2 细胞平衡的影响及在银屑病发病中可能的作用机制 方法选取 40 例银屑病患者 ( 银屑病组 ) 和 35 例健康人 ( 健康对照组 ), 应用密度梯度离心法分离其外周血 CD4 + T 细胞, 采用实时荧光定量聚合酶链反应 (qrt PCR) 检测 Runx3 转录水平的表达 将体外培养的银屑病患者的 CD4 + T 细胞随机分为空白对照组 ( 未经任何处理组 ) 阴性对照组 ( 对照 sirna 转染组 ) 和 Runx3siRNA 组 (Runx3siRNA 转染组 ) 采用 Westernblot 检测沉默效果, 流式细胞仪分析 Th1 Th2 细胞数目, 酶联免疫吸附试验检测 Th1 和 Th2 细胞相关特异性分泌因子的表达水平, 同时采用 qrt PCR 和 Western blot 检测 Runx3 对 Th1/Th2 细胞转录因子表达的影响 结果银屑病组患者 CD4 + T 细胞 Runx3mRNA 的表达水平显著高于健康对照组 (P<0.01) 与阴性对照组比较,Runx3siRNA 组银屑病患者 CD4 + T 细胞中 Runx3 蛋白表达水平下降 (P<0.01), 同时 Th1 细胞数目下降 (P<0.05), 而 Th2 细胞数目上调 (P<0.05), 且 Th1/Th2 细胞比值显著降低 (P<0.05); 白细胞介素 2(IL 2) 干扰素 γ(ifn γ) 表达水平显著下降 (P<0.01),IL 4 IL 10 表达水平显著升高 (P<0.05);Th1 型特异性转录因子 T bet 的表达显著降低 (0 73±0.06vs0.96±0.17)(P<0.01), 同时 Th2 型特异性转录因子 GATA3 的表达显著升高 (1.27±0.11vs1.01±0.14)(P<0 05) 结论 Runx3 在银屑病患者外周血 CD4 + T 细胞中表达上调, 并且可能通过调控 Th1/Th2 细胞相关特异性转录因子的表达引发 Th 细胞失衡, 从而参与银屑病的病理发病进程 关键词 : 银屑病 ;Runx3;CD4 + T 细胞 ;Th1/Th2 细胞平衡 ;RNA 干扰 ;GATA3 转录因子 ; 白细胞介素类 ; 干扰素 γ 中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : (2016) EfectofRunx3onthebalanceofTh1/Th2celsinpsoriasisandinvestigationonitsmechanism FUDan dan,huhua,sunmin,lizhan guo,tianzhong wei (DepartmentofDermatology,theFirstAfiliatedHospitalofXinxiangMedicalUniversity,Weihui453100,HenanProvince,Chi na) Abstract: Objective ToanalyzetheexpresionofRunx3inCD4 + Tcelsisolatedfromnormalpeopleandpsoriasis patients,aswelasitsefectandthepotentialmechanismonthebalanceofth1/th2celsinthepathologicalprocesofpsoria sis.methods Fortypatientswithpsoriasisvulgaris(psoriasisgroup)and35healthypeople(healthycontrolgroup)wereen roledinthestudy.thecd4 + Tcelsinperipheralbloodwereisolatedbydensitygradientcentrifugation.Theexpresionlevel ofrunx3incd4 + Tcelswasanalyzedbyquantitativereal timepolymerasechainreaction(qrt PCR).Theisolatedcelswere dividedintothreegroups:blankcontrolgroup(withoutanytreatment),negativecontrolgroup(treatedwithsirna control transfection)andrunx3sirnagroup(transfectedwithrunx3sirna).thetransfectioneficiencywasevaluatedbywestern bloting.flowcytometrywasperformedtoanalyzethenumberofth1andth2cels.thespecificcytokinelevelsofth1and Th2weredetectedbyenzyme linkedimmunosorbentasay.furthermore,theefectofrunx3sirnaonth1/th2celtran scriptionfactorexpresionwasalsoexploredbyqrt PCRandWesternblot.Results Comparedwithhealthycontrolgroup, Runx3proteinexpresioninCD4 + Tcelsinpsoriasisgroupincreasedsignificantly(P<0.01).Comparedwithnegativecontrol group,theexpresionofrunx3proteinincd4 + TcelsofpsoriasispatientsinRunx3siRNAgroupdecreasedsignificantly, whichresultedinthedecreasingofthenumberofth1andincreasingofthenumberofth2,aswelastheratioofth1/th2de creasedsignificantly(p<0.05);moreover,theexpresionsofinterleukin 2(IL 2)andinterferon γ(ifn γ)decreasedsignifi cantlywhiletheexpresionsofil 4andIL 10increasedsignificantlyinRunx3siRNAgroup(P<0.05);theexpresionlevel DOI: /xxyxyxb 收稿日期 : 基金项目 : 河南省医学科技攻关计划项目 ( 编号 : ); 新乡市科技发展计划项目 ( 编号 :15SF26); 河南省卫生科技创新人才工程项目 ( 编号 : ) 作者简介 : 付丹丹 (1979-), 女, 河南新乡人, 硕士, 主治医师, 讲师, 研究方向 : 银屑病发病机制免疫学研究 通信作者 : 田中伟 (1971-), 男, 河南上蔡人, 博士, 主任医师, 教授, 研究方向 : 皮肤肿瘤及银屑病发病机制研究 ; zhonwt@163.com

2 676 新乡医学院学报 htp:// 年第 33 卷 ofth1 specifictranscriptionfactort betdecreasedsignificantlywhiletheexpresionlevelofth2 specifictranscriptionfactor GATA3increasedsignificantlyinRunx3siRNAgroup(P<0.05).Conclusion Runx3isup regulatedinperipheralblood CD4 + Tcelsfrompsoriasispatients.Importantly,Runx2canadjusttheimbalanceofTh1/Th2celsviaregulatingtheirspe cifictranscriptionfactors,indicatingacriticalroleinthepathologicalprocesofpsoriasis. Keywords: psoriasis;runx3;cd4 + Tcel;Th1/Th2balance;RNAinterference;GATA3transcriptionfactor;interleu kins;interferon γ 银屑病以表皮细胞过度增殖为特点, 其皮损部位存在大量 CD4 + 和 CD8 + T 细胞的激活, 从而促使角质形成细胞过度增殖和分化 [1] 银屑病患者体内常检测有大量 CD4 + Th1 细胞存在, 并高表达 Th1 型细胞因子 [2 3], 导致患者体内 Th1/Th2 细胞比例出现严重失衡 因此, 恢复银屑病患者体内 Th1/ Th2 细胞平衡成为银屑病防治的重要方向 Runx3 广泛表达于外周血 T 细胞等多种细胞中 [4], 其可通过与 T bet 结合调控 Th1 细胞分化 [5], 从而影响 Th1/Th2 细胞的平衡 [6] 研究证实,Runx3 基因突变与银屑病关节炎的发生相关, 且在银屑病患者中表达具有特异性 [7 8] 本研究旨在分析 Runx3 在银屑病患者外周血 CD4 + T 细胞中的水平及其对 Th1/ Th2 细胞平衡的影响, 从而为银屑病防治提供新的靶标 1 资料与方法 1.1 一般资料选择新乡医学院第一附属医院皮肤科 2011 年 11 月至 2013 年 7 月收治的银屑病患者 40 例 ( 银屑病组 ), 男 22 例, 女 18 例, 年龄 20~ 50 岁, 平均 (34.74±4.21) 岁, 均排除其他病毒感染及自身免疫性疾病 肿瘤等疾病 健康对照组 35 例, 选自本院同期健康献血者, 男 18 例, 女 17 例, 年龄 20~50 岁, 平均 (36.57±5.36) 岁 2 组年龄 性别比较差异无统计学意义 (P>0 05), 具有可比性 患者对本研究知情, 且已签署知情同意书, 本研究经本院伦理委员会批准 1.2 主要试剂 RoseteSep 富集人 CD4 + T 细胞抗体 人淋巴细胞分离液 ( 加拿大 StemCel 公司 ); 胎牛血清 ( 浙江天杭生物科技有限公司 );TRIzol Lipo fectamine2000( 美国 Invitrogen 公司 );cdna 合成试剂盒 ( 德国 Fermantas 公司 );SYBR Master 混合物 ( 北京厚生博泰科技有限公司 );Runx3siRNA( 上海吉玛制药技术有限公司 ); 异硫氰酸荧光素 (fluores ceinisothiocyanate,fitc) CD4 藻红蛋白 (polyethy lene,pe) 白细胞介素 4(interleukin 4,IL 4)(PE IL 4) PE CD4 别藻蓝蛋白 (alophycocyanin,apc) 干扰素 γ(interferon γ,ifn γ)(apc IFN γ) 均来自美国 ebioscience 公司 ; 人 IFN γ IL 2 IL 4 及 IL 10ELISA 试剂盒 ( 上海恒远生物科技有限公司 );T bet GATA3 抗体 ( 美国 CelSignalTechnology 公司 ) 1.3 方法 标本采集银屑病组患者和健康对照组采集空腹肘静脉血 10mL, 肝素抗凝 向血样中加入 500μLRoseteSep 富集人 CD4 + T 细胞抗体混合物, 充分混匀, 室温孵育 20min 用等体积含体积分数 2% 胎牛血清 (fetalbovineserum,fbs) 的磷酸盐缓冲液 (phosphate buferedsaline,pbs) 稀释血液 按稀释血液 淋巴细胞分离液 =2 1 的比例向 10mL 淋巴细胞分离液的上面缓慢加入稀释血液样品, 室温 2184r min -1 离心 20min 收集位于淋巴细胞分离液与血浆界面之间的灰色细胞层 加入 5 倍体积含体积分数 2% FBS 的 PBS 混匀,2184r min -1 离心 10min, 弃上清液, 重复上述步骤 1 次 流式细胞仪检测 CD4 + T 细胞纯度均达 90% 以上 实时荧光定量聚合酶链反应 (quantitative real timepolymerasechainreaction,qrt PCR) 检测 Runx3 T bet GATA3mRNA 水平按照美国 Invitrogen 公司的 TRIzol 试剂说明书进行操作, 提取总 RNA 将 1μgRNA 加入 PCR 管中, 同时加入 ol igo(dt)18primer(1μl) 5 反应缓冲液 (4μL) 10nmol L -1 dntp(2μl) 和反转录酶 (M MuLV) ( U L -1 )(1μL), 加二乙基焦碳酸盐 (di ethylpyrocarbonate,depc) 处理的水至 20μL 总反应体积, 具体操作按照 RevertAid TM FirstStrandcDNA Synthesis 试剂盒 ( 美国 Fermentas 公司 ) 说明书进行 反应条件 :42 60min,70 10min 灭活反转录酶, 得到 cdna 产物 以 β actin 基因为内参, qrt PCR 检测 mrna 的表达水平 所用引物序列 : Runx3 上游引物 :5 GATGGCAGGCAATGACGA 3, 下游引物 :5 TGCTGAAGTGGCTTGTGGT 3 ;T bet 上游引物 :5 GTTCCCATTCCTGTCATTTACT 3, 下游引物 :5 TCTCCGTCGTTCACCTCAA 3 ;IFN γ 上游引物 :5 TATTCGGTAACTGACTTG 3, 下游引物 : 5 AATCACAGCCTTGC 3 ;β actin 上游引物 :5 CACGAAACTACCTTCAACTCC 3, 下游引物 :5 CATACTCCTGCTTGCTGATC 3 PCR 循环参数为 : 94 预变性 5min,1 个循环,94 30s,62 30s,

3 第 8 期 付丹丹, 等 :Runx3 对银屑病患者 Th1/Th2 细胞平衡的影响及其作用机制 s,35 个循环扩增, 最后 72 5min 采用 2 - Ct 方法来分析和计算结果 细胞分组及处理将获得的银屑病源性的 CD4 + T 细胞 r min -1 离心 5min, 将细胞浓度调整为 L -1, 置于 12 孔培养板, 体积分数 5%CO 2 37 的细胞培养箱中培养 24h 将细胞随机分为 3 组 : 空白对照组 ( 未进行任何处理 ) 阴性对照组 ( 对照 sirna 转染组 ) 和 Runx3siRNA 组 (Runx3siRNA 转染组 ) RUNX3siRNA 序列如下 : 5 GATCCGCCACTTGATTCTGGAGGATTCAAGAGA TCCTCCAGAATCAAGTGGCGGTTTTTTGGAAA 3 ;5 AGCTTTTCCAAAAAACCGCCACTTGATTCTGGAGGA TCTCTTGAATCCTCCAGAATCAAGTGGCG 3 按照 LipofectamineRNAiMA reagent( 美国 Invitrogen 公司 ) 使用说明书转染细胞 Westernblot 检测 Runx3 T bet 和 GATA3 蛋白的表达 CD4 + T 细胞转染 48h 后, 将细胞用 0.5g L -1 胰蛋白酶进行消化, 用预冷的 PBS 洗涤细胞 3 次 ; 加入 200μL 行预冷的裂解液裂解细胞, 冰上放置 20min,4 离心机 2675r min -1 离心 10min, 取上清液 取 20μL 蛋白样品, 进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (sodium dodecylsul fate polyacrylamidegelelectrophoresis,sds PAGE) 蛋白电泳, 采用半干转法将目的蛋白转移到聚偏二氟乙烯膜上 加入 50g L -1 脱脂奶粉封闭 1h, 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 + 吐温 (Tris buferedsaline containing0.5g L -1 Tween20,TBST) 洗涤 3 次, 按照常规的方法加入抗人 Runx3 T bet 和 GATA3 的一抗和 HRP 标记的二抗 TBST 洗涤 3 次后, 加入电化学发光底物反应 1~3min, 暗室曝光显影 流式细胞仪检测 Th1 Th2 细胞用预冷的 PBS 洗涤各组细胞,2675r min -1 离心 5min, 收集细胞 ; 分别加入抗 PE CD4 和抗 FITC CD4 各 20μL, 室温避光孵育 15min;PBS 洗 2 次后加入 300μL 固定液 4 避光孵育 15min, 离心弃上清液 ; 加入 1mL 固定 / 破膜液, 离心弃上清液 ;PBS 洗涤后加入 20μL PE IL 4 10μLAPC IFN γ, 室温避光孵育 30min; 离心后用 300μLPBS 重悬细胞, 进行流式细胞仪检测 酶联免疫吸附试验测定细胞因子 IFN γ IL 2 IL 4 IL 10 水平分别取 50μL 稀释后的待测样本于 24 孔培养板中, 加入 50μL 生物素标记的抗体,37 孵育 1h 用 PBC 洗涤后, 每孔加 80μL 的亲和链霉素 辣根过氧化物酶, 轻轻振荡混匀, 37 孵育 30min 加入( 包括空白孔 ) 底物 A B 各 50μL,37 避光显色 10min 加 50μL 终止液, 采用酶标仪测量各孔 450nm 波长处的吸光度值 根据标准品的浓度及对应的吸光度值计算出样品的浓 度 1.4 统计学处理应用 SPSS13.0 软件进行数据分析, 计量资料以均数 ± 标准差 ( x±s) 珋表示, 方差齐性资料组间比较采用两独立样本 t 检验, 多组间比较采用单因素方差分析 (2 组间比较采用 LSD t 法 ); 方差不齐资料比较采用秩和检验 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 银屑病组患者和健康对照组外周血 CD4 + T 细胞 Runx3mRNA 的表达比较与健康对照组 (0.62±0.16) 比较, 银屑病组患者 CD4 + T 细胞 Runx3mRNA 的表达 (1.39±0.19) 显著增加, 约是健康对照组的 2.24±0.31 倍, 差异有统计学意义 (t=3 07,P<0.01) 2.2 空白对照组 阴性对照组 Runx3siRNA 组 Runx3 表达水平比较空白对照组 阴性对照组 Runx3siRNA 组 Runx3 蛋白表达水平分别为 0.96± ±0.07 和 0.28± 组间比较差异有统计学意义 (F=88.73,P<0.00) 与空白对照组和阴性对照组比较,Runx3siRNA 组 Runx3 蛋白表达水平显著降低 (P<0.01), 而空白对照组和阴性对照组 Runx3 蛋白表达水平比较差异无统计学意义 (P>0.05)( 图 1) 1: 空白对照组 ;2: 阴性对照组 ;3:Runx3siRNA 组 图 1 各组 Runx3 的蛋白水平 Westernblot 结果 Fig.1 WesternblotresultofRunx3proteinlevelinthe groups 2.3 阴性对照组 Runx3siRNA 组 Th1 Th2 细胞 水平及 Th1/Th2 比值比较 结果见表 1 图 2 与 阴性对照组比较,Runx3siRNA 组 Th1 细胞水平显 著下降, 而 Th2 细胞水平显著上升, 同时 Th1/Th2 细胞比值显著下降, 差异均有统计学意义 (P< 0 05) 表 1 阴性对照组和 Runx3siRNA 组 Th1 Th2 细胞水平及 Th1/Th2 比较 Tab.1 ComparisonofTh1,Th2cellevelsandTh1/Th2in negativecontrolgroupandrunx3sirnagroup ( x±s) 珔 组别 Th1 细胞 /% Th2 细胞 /% Th1/Th2 阴性对照组 30.61± ± ±1.01 Runx3siRNA 组 15.23± ± ±1.45 t P

4 78 新乡医学院学报 h p www b m 年 第 卷 4 空 白 对 照 组 阴 性 对 照 组 Ru 细胞培养上清液中 细胞因子的表达 结 果 见 表 与 空 白 对 照 组 和 阴 性 对 照 组 比 较 Ru 细胞培养上 清 液 中 型 细 胞 特 异性分泌因子 型细 γ水平显著降低 胞特异性分泌因子 4 水平水平显著升高 5 与阴性对照组比较 Ru P 4 γ水平显著下降 P 5 而 表达显著上调 P 5 5 空白对照组 阴性对照组及 Ru b 和 GATA的 mrna和蛋白 细胞转录因子 T A 阴性对照组 NF NF 4 γ B Ru γ C 阴性对照组 D Ru 4 图 流式细胞术检测阴性对照组和 Ru 表达水平 结果见表 图 空白对照组和阴性 b 和 GATA表达水平比较差异均 对照组之间 T 细胞变化 无统计学意义 P 5 与空白对照组和阴性 F Ch f d T b 表 达 水 平 显 著 对照组比较 Ru up dru RNA upd dbf w m 5 下降 而 GATA表达水平显著升高 P 表 组细胞培养上清液中 细胞因子表达水平比较 T b C mp f k up f u u m h h up 组别 空白对照组 阴性对照组 Ru F P 778 7± 8 8 ±5 44 54± 5b 5 4 γ 8 ± 8 8 4 7±4 8 ± 4 b 5 4 55 5±4 7 ± 7± 5b 5 4 珔± L 49 7±8 9 59 77± 85 ±4 7b 9 9 5 注 与空白对照组比较 P 5 与阴性对照组比较 bp 5 表 组细胞转录因子 T b 和 GATA的 mrna和蛋白 表达水平比较 T b C mp f hmrna dp f p f T b d GATA m h h 珔± up 组别 空白对照组 阴性对照组 Ru F P T bmrna GATAmRNA ± 9 ± 98± 7 4± 7± b 5± 8b 44 9 577 4 4 T b蛋白 98± 9± 7 7± b 44 4 GATA蛋白 99± 8 ± 4 7± b 5 74 4 注 与空白对照组比较 P 5 与阴性对照组比较 bp 5 讨论 银屑病是一种慢性复发性炎症性疾病 患者表 皮中常浸润大量粒细胞 单核细胞及持续活化的 T 细胞 调查显示 58 8 的患者公共场所感到不 自在 同时对患者日常生活 工作学习和社交等均造 成影响 9 近年来有关银屑病的研究取得了一定 进展 其中免疫学异常是银屑病发生机制中的中心 环节 而 T细胞介导的免疫紊乱在该进程中扮演重 要角色 银屑病发病属 模式 分泌的细 胞因 子 在 银 屑 病 血 清 和 皮 损 中 高 表 γ 达 银屑病患者体内 细胞比例出现 细胞平衡成为银屑病一个 严重失衡 恢复 重要的治疗方向 Ru 基因是一种肿瘤抑制基因 属于 Ru 转 录因子家族成员 Ru 对 T细胞的成熟和分化也 具有重要的调控作用 最新研究发现 Ru 是银 图 W b 检测 组细胞转录因子 T b 和 GATA 可能通过 屑病的一个易感性基因 7 推测 Ru 蛋白表达 影响 细胞的平衡 参与了银屑病的发生 F E p fp f p f T 本研究检测银屑病患者外周血 CD4 T细胞 Ru b dgata f h h upd dbw b 的水平 结果显示与健康对照组相比 银屑病患者

5 第 8 期 付丹丹, 等 :Runx3 对银屑病患者 Th1/Th2 细胞平衡的影响及其作用机制 679 Runx3mRNA 的表达显著增加, 提示 Runx3 与银屑病的发生存在一定联系 [13] AUSTIN 等分离出银屑病患者皮损处 T 细胞, 通过流式细胞仪分析发现, 绝大部分 CD4 + 和 CD8 + T 细胞分泌 IL 2 IFN γ 及 TNF α, 而 <11% 的 T 细胞表达 IL 4 或 IL 10 本研究采用 RNAi 技术使银屑病患者外周血 CD4 + T 细胞中 Runx3 表达沉默, 酶联免疫吸附试验检测 Th1 细胞中细胞因子 IFN γ IL 2 及 Th2 细胞中细胞因子 IL 4 IL 10 的表达水平 结果显示,Runx3siRNA 组 Th1 细胞因子的表达水平较空白对照组及阴性对照组明显降低, Th2 细胞因子的表达水平较空白对照组及阴性对照组明显升高 提示 Runx3 表达沉默可抑制银屑病患者 Th1 细胞因子的分泌, 促进 Th2 细胞因子的分泌 Runx3 是 CD4 + T 细胞分化过程中重要的转录因子, 可以调节 Th 细胞的分化 [14 16] 有研究表明, 在 Th1 细胞分化过程中,Runx3 的表达与 T bet 有关 [16], 同时 Runx3 还可与 GATA3 相互影响 [16] 本研究结果发现, 银屑病患者外周血 CD4 + T 细胞中 Runx3 表达沉默后,T bet 水平明显下降, 而 GATA3 的表达明显上调, 表明 Runx3 可通过调控 Th1 Th2 细胞特异性转录因子水平来调节 Th 细胞的分化 [17] 这与 BRENNER 等在 Runx3 基因敲除小鼠中的研究结果一致 本研究表明,Runx3 表达沉默可抑制银屑病患者 Th1 细胞因子的分泌, 促进 Th2 细胞因子的分泌, 影响银屑病患者外周血 Th1 Th2 细胞水平, 从而使 Th1/Th2 细胞失平衡得到改善 Runx3 调节银屑病患者外周血 Th 细胞分化的作用机制可能是通过直接调节转录因子 T bet GATA3 的表达水平来实现的 但 Runx3 是否还通过其他途径影响银屑病患者外周血 Th1/Th2 细胞的平衡还有待进一步研究 因此, 本研究表明,Runx3 可通过调节银屑病患者外周血 Th1/Th2 细胞的平衡来参与其病理进程的调控, 可能为银屑病的治疗提供了一个新的研究方向 参考文献 : [1] DIANIM,ALTOMAREG,REALIE.Tcelresponsesinpsoriasis andpsoriaticarthritis[j].autoimmunrev,2015,14(4): [2] 张平, 陈宏翔, 段逸群, 等. 红皮病型银屑病 Th1/Th2 反应模式的分析 [J]. 华中科技大学学报,2014,34(4): [3] CAMPANATIA,ORCIANIM,CONSALESV,etal.Characteriza tionandprofilingofimmunomodulatorygenesinresidentmesen chymalstemcelsreflecttheth1 Th17/Th2imbalanceofpsoriasis [J].ArchDermatolRes,2014,306(10): [4] REISBS,HOYTEMAVANKONIJNENBURGDP,GRIVENNIK OVSI,etal.TranscriptionfactorT betregulatesintraepithelial lymphocytefunctionalmaturation[j].immunity,2014,41(2): [5] DJURETICIM,LEVANOND,NEGREANUV,etal.Transcription factorst betandrunx3cooperatetoactivateifngandsilenceil4 inthelpertype1cels[j].natimmunol,2007,8(2): [6] FUD,YUW,LIM,etal.microRNA 138regulatesthebalanceof Th1/Th2viatargetingRUNX3inpsoriasis[J].ImmunolLet, 2015,166(1): [7] APELM,UEBES,BOWESJ,etal.VariantsinRUNX3contribute tosusceptibilitytopsoriaticarthritis,exhibitingfurthercommon groundwithankylosingspondylitis[j].arthritisrheum,2013,65 (5): [8] HARDENJL,KRUEGERJG,BOWCOCKAM.Theimmunoge neticsofpsoriasis:acomprehensivereview[j].jautoimmun, 2015,64: [9] DALALDS,LINYC,BRENNANDM,etal.Quantifyingharmful efectsofpsoriaticdiseasesonqualityoflife:cardio metabolicout comesinpsoriaticarthritisstudy(compass)[j].seminarthritis Rheum,2015,44(6): [10] 郑敏, 满孝勇. 银屑病 : 希望与挑战 [J]. 中华皮肤科杂志, 2016,49(4): [11] 魏明, 梁颖红, 涂玲, 等.miRNA 146a 对寻常性银屑病患者外周血 CD4 + T 细胞的调控研究 [J]. 中华皮肤科杂志,2016,49 (4): [12] ROHNK,HANSH,YOUNHJ,etal.Tisueandseruminflam matorycytokinelevelsinkoreanpsoriasispatients:acomparison betweenplaqueandgutatepsoriasis[j].anndermatol,2015,27 (6): [13] AUSTINLM,OZAWAM,KIKUCHIT,etal.Themajorityofepi dermaltcelsinpsoriasisvulgarislesionscanproducetype1cy tokineinterferon gamma,interleukin 2,andtumornecrosisfactor alpha,definingtcl(cytotoxictlymphocyte)andth1efector populations:atype1diferentiationbiasisalsomeasuredincircu latingbloodtcelsinpsoriaticpatients[j].jinvestdermatol, 1999,113(5): [14] FUD,SONGX,HUH,etal.DownregulationofRUNX3moder atesthefrequencyofth17andth22celsinpatientswithpsoria sis[j].molmedrep,2016,13(6): [15] NOWYHEDHN,HUYNHTR,BLATCHLEYA,etal.Thenu clearreceptornr4a1controlscd8tceldevelopmentthrough transcriptionalsuppresionofrunx3[j].scirep,2015,5:9059. [16] KOHUK,OHMORIH,WONGW F,etal.TheRunx3transcrip tionfactoraugmentsth1anddown modulatesth2phenotypesby interactingwithandatenuatinggata3[j].jimmunol,2009, 183(12): [17] BRENNERO,LEVANOND,NEGREANUV,etal.LosofRunx3 functioninleukocytesisasociatedwithspontaneouslydeveloped colitisandgastricmucosalhyperplasia[j].procnatlacadsci USA,2004,101(45): ( 本文编辑 : 王燕英文编辑 : 王燕 )

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