遵义医学院微生物学实验教学大纲

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1 遵义医学院微生物学教研室 医学微生物学 实验教学大纲 ( 供五年制本科临床 麻醉 口腔 美容 法医 影像专业使用 ) Ⅰ 前言 本大纲适用于临床医学 口腔 法医 麻醉 检验 美容和影像本科专业学生使用 医学 微生物学实验课的教学目标是使学生通过实验来验证和巩固已学习的理论知识, 并通过实验课的 基本技术的操作, 基本技能的掌握培养学生认真观察, 独立思考和辩证分析问题的能力, 建立严 格的科学作风, 严肃的科学态度和严密的工作方法 并启发学生的创新能力 为今后有关的传染 病诊断与科学研究工作打下良好基础 现将大纲使用中有关问题说明如下 : 一为了使教师和学生更好地掌握实验内容, 大纲均由教学目的 教学要求和教学内容三部分组 成 教学目的注明教学目标, 教学要求分掌握 熟悉和了解, 教学内容与教学要求对应, 并统 一标示 ( 核心内容即知识点以下划实线, 重点内容以下划虚线, 一般内容不标示 ) 便于学生重 点学习 二教师在保证大纲核心内容的前提下, 可根据不同教学手段, 讲授重点内容和介绍一般内容 三总教学参考学时为 24 学时 四使用教材 : 医学微生物学实验教程, 第四军医大学出版, 周艳萌, 江吉富主编,2014 年 Ⅱ 正文 实验一微生物的形态检查法 一教学目的在学习细菌学基本理论知识的基础上, 通过实验了解细菌形态与结构检查法, 同时树立无菌 观念 二教学要求 ( 一 ) 掌握油镜的使用及保护 ; 细菌标本制备及革兰染色方法 ( 二 ) 熟悉细菌动力检查 ( 三 ) 了解细菌基本形态 特殊结构 三教学内容 ( 一 ) 介绍实验室规则 ( 二 ) 检查细菌动力 (1 份 / 人 ) 变形杆菌和葡萄球菌菌液制备压滴片, 高倍镜暗视野观察细菌的运动情况 ( 三 ) 细菌涂片制备及革兰染色法 (1 份 / 人 ) 模拟标本制备细菌涂片, 革兰染色, 油镜下观察 ( 四 ) 细菌基本形态 特殊结构 ( 示教 ) 基本形态 : 链球菌 葡萄球菌 大肠杆菌 创伤弧菌 淋球菌 ( 玻片标本 ); 特殊结构 : 肺炎双球菌的荚膜 ; 变形杆菌的鞭毛 ; 破伤风杆菌的芽胞 ; 炭疽杆菌的芽胞 ( 玻 片标本 ) ( 五 ) 显微镜的使用及维护 ( 讲解示教 ) 讲解操作示教显微镜尤其是油镜的使用方法 ( 六 ) 微生物学实验的基本操作技术 ( 录像 ) 1

2 实验二细菌分布与培养 一教学目的认识微生物的分布对周围环境的影响及其与医学的关系, 通过了解普通培养基的制备及细菌 体外培养技术, 学习细菌的分离培养及鉴定方法, 并学会观察细菌在不同培养基中的生长情况 二教学要求 ( 一 ) 掌握细菌分离培养的基本技术 ( 二 ) 熟悉细菌代谢产物的观察 ( 三 ) 了解微生物在人体及物品中的分布 ; 普通培养基制备的基本过程 三教学内容 ( 一 ) 人体 物品中细菌检查 (1 份 / 组 ) 检查头发 衣服 钱 手指等人体物品中的细菌, 培养基采用普通琼脂平板, 培养 小时后观察细菌菌落特点 ( 二 ) 飞沫 空气中细菌检查 (1 份 / 桌 ) 点 检查空气 飞沫中的细菌, 培养基采用血琼脂平板, 培养 小时后观察细菌菌落特 ( 三 ) 细菌培养接种法 (1 套 / 组 ) 普通琼脂平板分离培养 ; 液体培养 半固体 斜面培养基接种 ; 培养 小时后, 观察生长现象 ( 四 ) 细菌代谢产物观察 ( 讲解示教 ) 观察糖发酵试验 甲基红试验 吲哚试验 枸橼酸盐利用试验 尿素酶试验及硫化氢试验中 细菌的生化反应 ( 五 ) 细菌培养法 ( 录像 ) 实验三 外界因素对细菌的影响及细菌分离鉴定程序 一教学目的在认识细菌形态 结构的基础上, 学习外界理化因素对细菌的影响, 了解细菌分离鉴定的基 本程序 二教学要求 ( 一 ) 掌握 : 改良 K-B 纸片法抗菌药物敏感试验的原理 方法 结果判断及应用 ( 二 ) 熟悉 : 热力对微生物的作用 ; 紫外线杀菌作用机制 特点及应用 ( 三 ) 了解 : 高压蒸汽灭菌器的使用 ; 细菌分离鉴定程序及全自动微生物分析仪的应用 三教学内容 ( 一 ) 热力对繁殖体 芽胞的影响作用 (1 套 / 组 ) 芽胞菌 ( 枯草杆菌 ) 繁殖体 ( 葡萄球菌 ) 分别接种三支液体培养基, 分别在 分钟 分钟处理, 另一组不处理, 然后 37 培养 24 小时后观察生长现象 ( 二 ) 紫外线杀菌作用 (1 套 / 组 ) 金黄色葡萄球菌涂布普通琼脂平板, 一半用紫外线照射 30 分钟,37 培养 24 小时后, 观察生长现象 ( 三 ) 细菌对抗菌药物的敏感性实验 (1 份 / 组 ) 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别涂布普通琼脂平板, 分别均匀贴上青霉素 链霉素 复方新 诺明 左氧氟沙星标准抗菌纸片,37 培养 24 小时后, 观察生长现象, 测量抑菌环直径 ( 四 ) 耐药性变异 ( 示教 ) 2

3 金黄色葡萄球菌敏感株和耐药株含青霉素平板和不含青霉素平板培养物观察 ( 五 ) 鞭毛变异 ( 示教 ) 变形杆菌含石碳酸与不含石碳酸平板 ( 迁徙现象 ) 培养物观察 ( 六 ) 高压灭菌器的使用 ( 讲解示教 ) 实物示教, 讲解高压灭菌器的使用方法 注意事项及适用范围 ( 七 ) 细菌分离鉴定程序及全自动微生物分析仪的应用 ( 讲解示教 ) 实验四 病原性细菌 一教学目的在熟悉细菌形态 结构及细菌人工培养基础上, 学习血清学诊断及抗酸染色法在细菌感染性疾病诊断中的应用, 认识重要厌氧菌形态及培养特性 二教学要求 ( 一 ) 掌握肥达试验的原理 方法 结果分析及临床意义 ; 结核病人痰标本抗酸染色法的原理 方法 结果及意义 ( 二 ) 熟悉炭疽杆菌 破伤风杆菌 产气荚膜杆菌的基本形态及培养特征 ( 三 ) 了解厌氧培养法 三教学内容 ( 一 ) 肥达反应 (1 套 / 组 ) 4 个同学一组, 用倍比稀释法分别测定模拟标本的 O H 甲副 H 乙副 H 抗原的效价 ( 二 ) 结核痰标本抗酸染色 (1 份 / 人 ) 模拟痰标本制备细菌涂片, 抗酸染色, 油镜下观察 ( 三 ) 厌氧培养 ( 操作示教 ) 厌氧罐 厌氧培养箱操作示教 ( 四 ) 观察炭疽杆菌形态 ( 讲解示教 ) 炭疽杆菌的玻片标本 ( 五 ) 观察破伤风杆菌 产气荚膜杆菌形态及培养特性 ( 示教 ) 破伤风杆菌 产气荚膜杆菌的玻片标本 ; 高层琼脂培养物 紫牛乳培养物及疱肉培养物 实验五 真菌及其他微生物试验 一教学目的 在熟悉细菌微生物学检查法的基础上, 了解临床标本的采集及微生物学检查法, 学习真菌的培养特性及皮肤癣菌检查法 ; 认识螺旋体的形态特征 二教学要求 ( 一 ) 掌握皮肤癣菌检查法原理 方法 结果及意义 ( 二 ) 熟悉真菌形态及培养特性 ; 螺旋体形态及革兰染色法 ( 三 ) 了解性传播疾病的种类及防治 三教学内容 ( 一 ) 真菌检查法 (1 份 / 人 ) 脚皮屑等,10%KOH 透明法, 显微镜观察菌丝和孢子 ( 二 ) 检查牙垢中螺旋体 (1 份 / 人 ) 3

4 牙垢标本制备涂片, 革兰染色, 油镜下观察 ( 三 ) 真菌大小培养的观察 ( 示教 ) 酵母菌 新生隐球菌压片标本, 丝状菌 假丝酵母菌革兰染色标本, 丝状菌 酵母菌 假丝酵 母菌小培养标本的观察 ( 四 ) 观察梅毒螺旋体形态 ( 示教 ) 梅毒螺旋体银染玻片标本 ( 五 ) 性病防治 ( 录像 ) 一教学目的 实验六病毒培养 在了解病毒基本特性的基础上, 学习病毒分离培养法及病毒微生物学检查法 二教学要求 ( 一 ) 掌握血凝试验的原理 方法 结果判断及应用 ( 二 ) 熟悉鸡胚的结构及可供接种的部位 ( 三 ) 了解病毒组织培养法 三教学内容 ( 一 ) 血凝试验 (1 份 / 人 ) 模拟病毒标本用倍比法稀释, 加入鸡红细胞悬液, 室温静置 45 分钟, 观察凝集情况 ( 二 ) 鸡胚形态结构观察及其病毒鸡胚接种方法 ( 讲解示教 ) 鸡胚尿囊腔接种 ( 三 ) 病毒的细胞培养及 CPE( 讲解示教 ) ( 四 ) 病毒组织培养法 ( 录像 ) ( 五 ) 实验总结 Ⅲ 教学组织与方法 一实施机构 : 由基础医学院微生物学教研室执行 二组织内容 : 教案讲义多媒体课件审核 集体教学备课 教学方法研究 教学手段应用 三教学方法 : 1 实验教学 : 采用启发式 讨论式 互动式课堂教学方式及实验考试, 辅助现代教育技术和传 统教学手段 重点内容以学生自做为主, 一般内容以示教为主 以 2 人为 1 组, 学生独立操 作 2 教学点 : 在微生物学与免疫学实验室教学, 任课教师由微生物学教研室委派 3 辅导形式 : 课堂巡视和指导 课堂答疑 讨论 复习等结合 四考核办法 : 实验考核占总评成绩的 30%; 实验报告 实验操作占 20%; 平时成绩占 5%; 实 验考试占 5% 实验考核不合格者不能参加理论课考试 4

5 Ⅳ 教学时数分配表 实验内容教学学时实验类型 1. 介绍实验室规则 2. 检查细菌动力 (1 份 / 人 ) 3. 细菌涂片的制备及革兰染色法 (1 份 / 人 ) 4. 细菌特殊结构 ( 示教 ) 5. 显微镜的使用及维护 ( 讲解示教 ) 6. 微生物实验的基本操作技术 ( 录像 ) 1. 人体 物品中的细菌检查 (1 份 / 组 ) 2. 飞沫 空气中的细菌检查 (1 份 / 桌 ) 3. 细菌培养接种法 (1 套 / 组 ) 4. 细菌代谢产物的观察 ( 讲解示教 ) 5. 细菌培养法 ( 录像 ) 1. 热力对繁殖体 芽孢的影响作用 (1 套 / 组 ) 2. 紫外线杀菌作用 (1 套 / 组 ) 3. 细菌对抗菌药物的敏感性实验 (1 份 / 组 ) 4. 耐药性变异 ( 示教 ) 5. 鞭毛变异 ( 示教 ) 6. 高压灭菌器的使用 ( 讲解示教 ) 7. 细菌分离鉴定程序及全自动微生物分析仪的使用 ( 讲解示教 ) 8. 细菌分离鉴定 ( 录像 ) 1. 肥达试验 (1 套 / 组 ) 2. 结核痰标本抗酸染色 (1 份 / 人 ) 3. 厌氧培养及厌氧培养箱的使用 ( 操作示教 ) 4. 观察炭疽杆菌形态 ( 示教 ) 5. 观察破伤风梭菌 产气荚膜杆菌形态及培养物 ( 示教 ) 4 验证型 4 验证型 4 综合型综合型 4 1. 真菌检查法 (1 份 / 人 ) 2. 牙垢中螺旋体检查 (1 份 / 人 )3. 真菌大小培养的观察 ( 示教 )4. 观察梅毒螺旋体形态 ( 示教 )5. 性病防治 ( 录像 ) 1. 血凝试验 (1 份 / 人 ) 2. 鸡胚形态结构观察 ( 示教 ) 3. 鸡胚接种 ( 示教 ) 4. 病毒的细胞培养及 CPE ( 示教 ) 5. 病毒组织培养法 ( 录像 ) 6. 实验总结 7. 实验考核 4 综合型 4 综合型 5

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