显微镜使用与维护100问

显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 1

目 录 1 问 显 微 镜 的 使 用 应 该 注 意 哪 些 事 项?... 1 2 问 : 荧 光 显 微 镜 的 汞 灯 应 该 怎 么 用?... 1 3 问 : 体 式 荧 光 的 汞 灯 怎 么 调 中 心?... 1 4 问 : 相 差 该 怎 么 调?... 2 5 问 : 目 镜 和 镜 头 该 怎 么 擦?... 2 6 问 : 光 阑 的 作 用 是 什 么?... 2 7 问 : 尼 康 显 微 镜 三 目 怎 么 不 能 照 相 呢?... 3 8 问 : 荧 光 照 明 不 均 匀 是 什 么 问 题?... 3 9 问 : 照 相 时 遇 到 的 问 题... 3 10 问 : 荧 光 灯 泡 的 寿 命 有 多 少?... 3 11 问 : 大 家 如 何 清 洁 显 微 镜 呢?... 4 12 问 : 如 何 用 脱 脂 棉... 6 13 问 : 怎 样 来 使 用 与 保 养 显 微 镜?... 6 14 问 : 成 茂 显 微 镜 操 作 器 漏 油 该 怎 么 办?... 9 15 问 : 荧 光 滤 色 块 脏 了 怎 么 办?... 9 16 问 : 擦 镜 头 大 家 是 用 棉 签? 还 是 用 镊 子 + 擦 镜 纸?... 9 17 问 : 如 何 解 决 摄 像 相 显 微 镜 未 检 测 到 图 象 卡 的 问 题? 急! 急!! 急!!!!!!!!!!... 9 18 问 : 那 里 有 质 量 好 的 吹 气 球 卖?... 9 19 问 : 照 相 总 有 脏 点, 判 断 不 出 来 倒 底 哪 里 脏... 10 20 问 : 我 的 多 色 荧 光 滤 色 块 效 果 不 好 了, 为 什 么?... 10 21 问 : X-cite 光 源 需 要 调 中 心 吗?... 11 22 问 : X-CITE 光 源 用 的 液 体 光 纤 是 消 耗 品 吗?... 11 23 问 :X-CITE 灯 泡 的 寿 命 是 多 少?... 11 24 问 : 显 微 镜 用 什 么 溶 液 擦 镜 油?... 11 25 问 : 倒 置 显 微 镜 微 分 干 涉 的 影 响 因 素... 11 26 问 : 体 视 镜 照 相 时 的 光 线 不 均 匀... 11 27 问 : 请 问,CCD 粘 上 灰 了 用 什 么 擦?... 12 28 问 : 显 微 镜 长 霉 了 怎 么 办?... 12 29 问 : 大 家 平 常 都 用 什 么 牌 子 的 显 微 镜 油?... 12 30 问 : 新 换 的 汞 灯, 好 象 不 够 亮, 什 么 问 题... 12 31 问 : 求 助,40 倍 物 镜 看 不 清 楚 了, 什 么 问 题... 12 32 问 : 如 何 解 决 失 焦 问 题... 12 33 问 : 目 镜 测 微 尺 怎 么 放 到 目 镜 里?... 13 34 问 : 倒 置 显 微 镜 配 高 倍 物 镜 后, 物 镜 撞 载 物 台 怎 么 办?... 13 35 问 : 显 微 操 作, 注 射 针 中 填 充 的 是 什 么 油 比 较 好? 既 能 做 到 稳 定 又 能 保 证 精 确... 13 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 2

36 问 : 显 微 镜 照 相 中 间 清 楚 边 缘 模 糊 怎 么 解 决?... 13 37 问 : 体 视 镜 的 透 射 底 座 有 哪 些 影 响 成 像 的 因 素?... 13 38 问 : 配 相 差 的 时 候 有 个 对 中 目 镜, 怎 么 用 的?... 14 39 问 : 显 微 镜 不 亮 灯 了? 什 么 问 题?... 14 40 问 : 如 何 清 洗 镜 头 上 树 脂?... 14 41 问 : 有 关 CX41 的 载 物 台 旋 钮... 14 42 扫 地 老 太 太 来 了... 14 43 问 : 倒 置 40 倍 看 荧 光 时 问 题... 15 44 显 微 镜 常 见 故 障 排 除... 15 45 问 : 怎 么 样 利 用 目 镜 测 微 尺 来 测 量 目 标 物 的 实 际 长 度, 没 有 分 析 软 件, 无 法 定 标?... 16 46 问 : 请 问 荧 光 衰 减 器 的 作 用... 16 47 问 : 物 镜 前 端 的 光 栏 是 干 什 么 用 的?... 17 48 问 : 我 的 倒 置 荧 光 的 亮 度 比 人 家 正 立 的 荧 光 亮 度 低,WHY?... 17 49 问 : 又 是 相 机 问 题, 这 次 是 关 于 白 平 衡 调 节... 17 50 问 : 荧 光 显 微 镜 的 汞 灯 中 心 如 何 调 节?... 18 51 问 : 金 相 显 微 镜 使 用 要 注 意 哪 些 事 项?... 19 52 问 : 盖 玻 片 一 般 的 折 射 系 数 是 多 大? 厚 度 是 多 少? 有 更 好 的 盖 玻 片 吗?... 21 53 问 : 聚 光 镜 脏 了 会 影 响 成 像 质 量 么?... 21 54 问 : 哪 些 光 学 部 件 脏 了 会 影 响 成 像 质 量?... 21 55 问 : 如 何 解 决 照 相 和 观 察 不 齐 焦 的 问 题?... 22 56 问 : 活 细 胞 长 时 间 观 察 时, 焦 点 漂 移 问 题, 大 家 是 怎 么 解 决 的?... 22 57 问 : 为 什 么 显 微 镜 在 10X 看 没 有 问 题,40X 看 的 时 候 看 到 一 边 有 黑 边?... 22 58 问 : 荧 光 显 微 镜 串 色 了, 紫 外 通 道 (DAPI) 能 看 到 CFP, 怎 么 办?... 22 59 问 : 不 同 公 司 物 镜 是 否 可 以 通 用?... 23 60 问 : 为 什 么 看 的 和 拍 出 来 的 图 像 不 一 样?... 23 61 问 : 视 野 发 黄 是 怎 么 回 事?... 23 62 问 : 显 微 镜 调 焦 钮 有 些 紧, 该 如 何 解 决?... 23 63 问 : 大 家 的 显 微 镜 多 久 擦 拭 一 次?... 23 64 问 : 镜 头 是 用 脱 脂 棉 擦 好, 还 是 用 擦 镜 纸 好?... 24 65 问 : 调 焦 机 构 滑 到 最 下 面 了, 没 办 法 调 上 去, 什 么 问 题?... 24 66 问 : 实 验 室 的 40 倍 物 镜 不 小 那 样 蹭 到 了 油, 怎 么 都 擦 不 干 净, 请 问 DX 们 怎 么 办?... 24 67 问 : 显 微 镜 使 用 中 容 易 坏 的 部 分 有 哪 些?... 24 68 问 : 汞 灯 爆 了, 怎 么 处 理?... 24 69 问 :ccd 开 了 一 小 时 左 右, 屏 幕 就 变 成 花 花 绿 绿 的 世 界 了... 25 70 问 : 我 们 配 了 一 个 ludle 的 电 动 载 物 台, 没 动 它, 但 是 照 相 时 发 现 它 会 自 己 动 慢 慢 地 漂, 是 不 是 出 毛 病 了?... 25 71 问 : 双 目 生 物 显 微 镜 看 起 来 头 晕, 是 什 么 原 因?... 25 72 问 : 显 微 镜 视 野 中 间 清 楚, 但 边 缘 模 糊 时 为 什 么?... 25 73 问 : 目 镜 测 微 尺 上 有 灰 尘, 该 怎 么 擦?... 25 74 问 : 荧 光 显 微 镜 目 镜 下 和 照 片 背 景 接 不 够 黑, 怎 么 办??... 26 76 问 : 荧 光 怎 么 这 样 弱?... 26 77 问 : 载 物 台 XY 移 动 特 别 松 是 什 么 故 障?... 27 78 问 : 普 通 12V100W 灯 泡 需 要 调 中 心 吗?... 27 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 3

79 问 : 怎 么 可 以 延 长 卤 素 灯 泡 的 使 用 寿 命?... 27 80 问 : 在 调 节 相 差 或 者 DIC 光 路 前 一 定 要 调 整 科 勒 照 明 吗?... 27 81 问 : 聚 光 镜 的 数 值 孔 径 该 如 何 调 节?... 27 82 问 : 显 微 镜 的 电 压 一 般 调 到 多 少 比 较 合 适?... 27 83 问 : 显 微 镜 的 使 用 环 境 有 什 么 要 求?... 28 84 问 : 荧 光 显 微 镜 的 光 阑 有 什 么 作 用?... 28 85 问 : 物 镜 前 端 的 光 栏 怎 么 用?... 28 86 问 : 什 么 是 显 微 镜 的 描 绘 器?... 28 88 问 : 怎 么 在 显 微 镜 上 接 照 相 机?... 28 89 问 :4 倍 物 镜 观 察 时, 视 野 有 严 重 的 黑 边, 怎 么 办?... 28 90 问 : 带 着 眼 镜 可 以 看 显 微 镜 吗?... 28 91 问 : 相 差 显 微 镜 上 有 个 绿 色 的 玻 璃 片 是 干 什 么 用 的?... 29 92 问 : 显 微 镜 上 配 置 的 灰 色 滤 色 片 上, 有 数 字 25 50 是 什 么 意 思? 干 什 么 用?... 29 93 问 : 我 们 实 验 室 的 荧 光 显 微 镜 看 明 视 野 时, 背 景 变 的 特 别 红?... 29 94 问 :CCD 拍 出 来 的 像 只 有 目 镜 观 察 里 的 30%, 怎 么 办?... 29 95 问 : 我 再 用 荧 光 显 微 镜 观 察 时 背 景 总 有 杂 光 干 扰, 怎 么 解 决?... 29 96 问 : 体 视 镜 看 胚 胎, 光 太 热 损 伤 了 样 品... 29 97 问 : 荧 光 显 微 镜 电 源 打 开 了, 但 没 有 光?... 29 98 问 : 看 显 微 镜 时 总 容 易 把 片 子 压 碎, 怎 么 办?... 29 99 问 : 显 微 镜 自 己 都 可 以 清 洁 哪 些 部 件... 29 100 问 : 有 关 镜 头 上 树 脂 的 清 洗... 29 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 4

显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 1 问 显 微 镜 的 使 用 应 该 注 意 哪 些 事 项? 答 : 显 微 镜 是 光 学 仪 器, 尤 其 科 研 实 验 室 使 用 的 进 口 显 微 镜 更 动 不 动 数 万 至 数 十 万 元, 也 有 公 司 的 销 售 人 员 宣 称 他 们 的 一 只 物 镜 比 一 1 辆 汽 车 还 要 值 钱 所 以 使 用 时 必 须 小 心, 有 以 下 一 些 方 面 尤 其 注 意 (1) 低 倍 镜 到 高 倍 镜 观 察 低 倍 镜 头 的 工 作 距 离 较 长, 确 定 好 视 野 后 转 动 到 高 倍 物 镜 镜 时, 一 定 要 从 侧 面 仔 细 察 看, 此 时 经 常 因 为 高 倍 镜 头 工 作 距 离 过 小 而 使 镜 头 与 载 物 台 或 载 玻 片 撞 上, 如 果 用 力 过 猛, 非 常 容 易 伤 害 到 镜 头 对 于 此 种 操 作, 可 以 先 降 低 载 物 台, 转 换 物 镜, 再 用 微 调 垂 直 调 整 焦 距 (2) 油 镜 观 察 油 镜 的 工 作 距 离 很 短, 一 般 在 0.2mm 以 内, 因 此 使 用 油 浸 物 镜 时 要 特 别 小 心, 一 定 要 使 用 微 调 调 焦, 否 则 非 常 容 易 一 个 不 小 心 将 载 玻 片 压 碎 将 片 子 压 碎 倒 是 没 有 什 么 大 问 题, 可 是 玻 璃 碴 损 害 到 物 镜 你 就 惨 了! (3) 非 油 镜 观 察 油 镜 因 为 在 设 计 上 考 虑 到 油, 所 以 密 封 都 比 较 严 密 ; 但 是 对 于 不 是 油 镜 的 物 镜 密 闭 程 度 就 没 那 么 好 了 所 以 使 用 完 油 镜, 改 用 其 它 物 镜 的 时 候, 物 镜 很 容 易 碰 到 玻 片 上 的 油, 尤 其 是 跟 油 镜 相 邻 的 高 倍 镜 头, 比 如 40 倍 物 镜 进 油 是 很 麻 烦 的, 几 乎 无 法 处 理 即 使 返 厂, 也 是 把 物 镜 整 个 拆 开, 重 新 清 洁 公 司 可 能 要 跟 你 收 一 只 新 物 镜 的 费 用 啊! (4) 清 洁 用 脱 脂 棉 签 蘸 乙 醚 酒 精 混 合 液 (7:3) 在 镜 头 圆 心 从 内 到 外 划 圈 注 意 : 棉 花 要 缠 好, 千 万 不 要 让 硬 的 签 儿 触 到 镜 头 表 面 ; 棉 花 用 过 一 次 就 换 新 的, 防 止 小 沙 粒 划 破 镜 头 表 面 镀 膜 ; 擦 镜 头 的 原 则 是 : 宁 可 擦 不 干 净, 也 不 要 擦 坏 ; 实 在 不 行 还 可 以 找 公 司 的 人 来 擦 嘛! 2 问 : 荧 光 显 微 镜 的 汞 灯 应 该 怎 么 用? 汞 灯 好 贵 呀, 好 几 千 块 钱 一 个, 才 能 用 200 小 时, 有 可 以 节 约 使 用 的 办 法 吗? 高 手 指 点 一 下 答 : 合 理 安 排 使 用 时 间, 尽 量 减 少 开 关 次 数 不 要 频 繁 开 关, 打 开 后 半 小 时 内 不 要 关, 关 闭 后 半 小 时 内 不 要 开 3 问 : 体 式 荧 光 的 汞 灯 怎 么 调 中 心? 体 式 荧 光 的 汞 灯 怎 么 调 中 心? 好 象 和 正 立 和 倒 立 显 微 镜 的 方 法 不 一 样, 调 的 半 天 调 不 好 啊, 郁 闷! 答 : 如 果 有 调 节 工 具 的 话 就 很 容 易 了 没 有 的 话 把 灯 箱 拆 上 来, 对 着 墙 会 看 到 两 个 灯 泡 的 影 子, 把 这 两 个 影 子 调 到 中 心 并 且 重 合 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 1

4 问 : 相 差 该 怎 么 调? 我 的 细 胞 工 作 站, 相 差 的 效 果 总 不 是 太 好, 斑 竹 简 单 指 导 一 下 怎 么 调? 注 意 那 些 地 方? 答 : 基 本 部 件 : 相 差 物 镜 明 视 野 与 相 差 兼 用 的 多 用 途 聚 光 镜 对 中 望 远 镜 绿 色 滤 光 片 调 整 方 法 如 下 : a. 在 库 勒 照 明 系 统 调 整 好 的 基 础 上, 用 明 视 野 方 法 把 样 品 调 焦 清 晰 ; b. 把 聚 光 镜 转 到 Ph1 对 准 转 盘 刻 度 线 位 置, 选 用 10 相 差 物 镜, 换 上 待 观 察 的 透 明 样 品 ; c. 拔 掉 其 中 一 个 目 镜, 换 上 对 中 望 远 镜, 并 调 焦 于 视 野 中 的 两 个 相 差 环 上 ( 物 镜 的 黑 色 相 差 环 和 聚 光 镜 的 透 光 相 差 环 ); d. 视 野 中 的 两 个 相 差 环 不 一 定 重 合, 调 节 聚 光 镜 上 的 两 个 调 节 装 置 ( 调 整 相 差 环 左 右 位 置 的 调 节 杆 和 调 整 前 后 位 置 的 摩 擦 式 转 钮 ), 使 透 光 环 作 前 后 左 右 移 动 而 与 黑 环 重 合 ; e. 调 整 好 后, 换 回 观 察 用 目 镜, 将 绿 色 滤 光 片 按 入 光 路 中, 即 可 观 察 到 样 品 的 相 差 像 ; f. 有 20 和 40 物 镜 观 察 时, 聚 光 镜 应 设 在 Ph2 位 置 上, 用 100 物 镜 时, 聚 光 镜 应 设 在 Ph3 位 置 上 适 用 范 围 : 适 用 于 观 察 透 明 未 染 色 或 不 能 染 色 的 样 品, 如 各 种 细 胞 活 组 织 未 染 色 或 不 染 色 的 组 织 切 片 水 生 生 物 等 5 问 : 目 镜 和 镜 头 该 怎 么 擦? 我 用 擦 镜 纸 和 酒 精 和 乙 醚 的 混 合 溶 液 擦 目 镜 和 物 镜, 但 擦 的 效 果 不 理 想, 上 面 总 有 灰 尘 擦 不 掉, 是 不 是 我 擦 的 方 法 不 对? 那 位 DX 有 经 验 指 点 一 下! 答 : 应 该 是 用 擦 镜 纸 包 住 木 条, 蘸 上 上 面 说 的 混 合 溶 液 ( 酒 精 和 乙 醚 的 混 合 溶 液 ), 从 镜 头 的 中 间 开 始, 螺 旋 式 往 外 擦, 每 次 的 纸 只 能 用 一 次, 不 能 反 复 使 用, 具 体 看 图 1 和 2 : 6 问 : 光 阑 的 作 用 是 什 么? 请 教 斑 竹, 透 射 光 的 视 场 光 阑 聚 光 镜 的 孔 径 光 阑, 荧 光 的 视 场 光 阑 孔 径 光 阑 分 别 具 有 什 么 功 能, 对 观 察 的 效 果 有 什 么 影 响, 如 何 才 能 正 确 地 调 节 以 得 到 最 好 的 观 察 效 果? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 2

答 : 在 光 学 系 统 中, 不 论 是 限 制 成 像 光 束 的 光 孔, 或 者 是 限 制 成 像 范 围 的 光 孔 或 框, 都 统 称 为 光 阑 光 阑 属 于 光 学 仪 器 ( 光 具 组 ) 中 的 一 种 光 学 元 件 按 其 作 用 的 不 同, 分 为 孔 径 光 阑 和 视 场 光 阑 两 种 孔 径 光 阑 为 限 制 入 射 光 束 大 小 的 孔, 其 大 小 和 位 置 对 透 镜 所 成 像 的 清 晰 程 度 正 确 性 和 亮 度 都 有 决 定 性 的 作 用 如 照 相 机 镜 头 上 的 圆 形 光 阑 ( 俗 称 光 圈 ) 视 场 光 阑 是 限 制 成 像 景 物 的 面 积 大 小 ( 视 场 ) 所 用 的 孔 例 如 照 相 系 统 中 的 底 片 框 7 问 : 尼 康 显 微 镜 三 目 怎 么 不 能 照 相 呢? 我 们 实 验 室 有 一 台 NIKON diaphoto 2 的 三 目 显 微 镜, 观 察 切 片 没 有 问 题, 最 近 配 了 一 台 SPOT 数 码 CCD, 但 是 CCD 上 怎 么 检 测 不 到 图 像 呀 答 : 硬 件 上 : 光 路 转 换 是 否 已 经 正 确 转 换 到 摄 像 光 路, 一 般 是 拉 杆 或 转 轮 式 的 ; 软 件 上 :CCD 控 制 软 件 的 自 动 曝 光 是 否 打 开, 如 果 设 置 太 高 或 太 低 有 可 能 会 采 集 不 到 图 像 或 视 野 过 亮 掩 盖 住 图 像 ; 如 果 以 上 都 OK 还 有 可 能 是 齐 焦 的 问 题 就 是 CCD 成 像 与 观 察 时 的 Z 轴 位 置 不 一 样, 这 时 需 再 调 焦 8 问 : 荧 光 照 明 不 均 匀 是 什 么 问 题? 我 实 验 室 的 荧 光 显 微 镜, 视 野 图 象 左 边 总 是 不 如 右 的 亮? 不 知 道 是 什 么 原 因, 郁 闷 中 答 : 1) 汞 灯 没 调 好, 不 在 中 心, 也 有 可 能 孔 径 光 阑 不 在 中 心 2) 从 汞 灯 发 出 的 光 经 过 集 光 镜 ( 对 汞 灯 起 活 汇 集 作 用 ) 孔 径 光 阑 视 野 光 阑 荧 光 光 路 荧 光 滤 色 镜 组 物 镜 样 本 物 镜 目 镜 进 入 眼 睛, 需 要 调 节 所 有 这 些 部 件 的 光 轴 位 于 同 一 中 心, 一 般 需 要 使 用 者 调 节 的 只 是 使 灯 泡 及 灯 泡 组 件 9 问 : 照 相 时 遇 到 的 问 题 我 们 的 显 微 镜 观 察 时 一 切 正 常, 但 照 相 时 视 野 里 一 半 黑 一 半 亮, 不 知 道 什 么 原 因 请 厉 害 的 大 侠 指 教 答 : 原 因 是 因 为 整 个 光 路 系 统 中 某 个 可 移 动 的 部 件 没 有 到 位 包 含 照 相 转 换, 荧 光 防 护 屏, 聚 光 镜 转 盘, 中 灰 片 的 选 择 位 置 等 等, 沿 着 光 路 从 上 往 下 一 个 个 检 查 可 移 动 的 部 分 10 问 : 荧 光 灯 泡 的 寿 命 有 多 少? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 3

我 们 实 验 室 用 的 是 蔡 斯 的 共 聚 显 微 镜, 买 的 时 候 送 了 我 们 十 个 汞 灯 光 泡, 随 机 器 一 起 来 的 开 始 的 几 个 每 个 都 能 用 7 8 百 个 小 时, 公 司 的 人 说 理 论 寿 命 是 200 小 时, 可 是 后 面 的 几 个 最 多 只 能 用 300 多 小 时, 还 有 一 个 用 了 一 百 多 小 时 激 发 出 的 光 就 很 暗 了 这 是 怎 么 回 事? 答 : 汞 灯 使 用 注 意 事 项 目 前 通 常 使 用 的 为 50W 超 高 气 压 汞 灯, 灯 管 内 通 有 一 对 钨 电 极 和 液 态 汞 ( 室 温 下 附 在 管 壁 上 ), 未 点 燃 时, 管 内 气 压 很 低, 在 灯 管 的 两 电 极 间 施 加 电 压 角 发 点 燃 后, 汞 气 化 为 汞 蒸 气 形 成 汞 弧 而 产 生 强 光, 温 度 升 高, 管 内 气 压 迅 速 升 到 10 个 大 气 压 由 于 是 高 气 压 的 气 体 放 电, 必 须 了 解 其 特 性 才 能 安 全 地 使 用 汞 灯 以 下 来 自 百 度 搜 索 a. 汞 灯 接 通 电 源 后 需 要 10-15min 预 热 时 间, 汞 才 能 充 分 汽 化 并 形 成 汞 弧, 产 生 高 亮 度 而 稳 定 的 激 发 光 因 此, 观 察 前 要 提 早 通 电 ; b. 汞 灯 在 使 用 过 程 中, 不 要 随 意 开 关 汞 灯 的 电 源 ; c. 关 掉 汞 灯 电 源 后, 必 须 等 待 15-20min, 待 汞 灯 自 然 冷 却 后 才 可 再 次 接 通 电 源, 违 反 这 一 操 作 规 定 时, 将 会 造 成 严 重 后 果! 由 于 汞 灯 内 的 汞 蒸 气 未 完 全 液 化, 汞 蒸 气 内 阻 很 小, 一 旦 通 电 在 两 电 极 间 施 加 电 压, 汞 灯 内 形 成 强 大 的 电 流, 轻 则 烧 断 保 险 丝 或 烧 毁 汞 灯 电 源 中 的 扼 流 圈, 重 则 汞 灯 爆 炸, 汞 蒸 气 弥 漫 整 个 实 验 室, 造 成 工 作 人 员 中 毒, 不 仅 损 失 了 汞 灯, 还 会 炸 毁 灯 室 内 的 集 光 - 聚 光 部 件 d. 汞 灯 的 使 用 寿 命 一 般 只 有 300h, 使 用 得 当 可 达 600h, 使 用 寿 命 与 开 关 的 次 数 成 反 比, 应 集 中 一 批 样 品 作 2-3h 的 观 察 汞 灯 价 格 及 昂 贵, 应 珍 惜 使 用 e. 汞 灯 寿 命 终 结 的 标 志 是 点 燃 困 难, 灯 管 发 黑 11 问 : 大 家 如 何 清 洁 显 微 镜 呢? 答 : 光 学 器 件 清 洁 程 序 对 精 密 光 学 器 件 的 清 洁 有 可 能 降 低 器 件 的 性 能, 不 适 当 或 不 必 要 的 清 洁 容 易 破 坏 器 件 的 表 面 镀 膜 正 确 取 放 器 件 并 将 器 件 保 存 在 专 用 容 器 中, 将 最 大 限 度 地 减 少 清 洁 次 数 和 器 件 被 损 坏 的 可 能 A 推 荐 清 洁 材 料 聚 乙 烯 实 验 室 用 手 套 光 学 级 的 透 镜 清 洁 纸 脱 脂 长 绒 棉 根 据 环 境 按 比 例 调 配 酒 精 乙 醚 溶 液 进 行 光 学 零 件 表 面 清 洁 工 作 推 荐 比 例 如 下 : a 室 温 :18-24 时 乙 醇 :35% 乙 醚 :65% b 室 温 :12-18 时 乙 醇 :25% 乙 醚 :75% 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 4

B 推 荐 清 洁 步 骤 1 用 清 洁 空 气 吹 掉 表 面 浮 尘 如 果 不 能 吹 干 净, 取 两 张 镜 头 纸 裹 在 棉 签 上 或 将 镜 头 纸 折 叠 使 之 比 要 清 洁 的 面 积 稍 大 2 擦 拭 光 学 零 件 表 面 时, 首 先 应 用 石 油 醚 将 毛 砂 面 和 框 擦 干 净 3 擦 拭 圆 形 零 件 时, 棉 花 球 应 从 中 心 向 边 缘 作 螺 旋 线 移 动, 同 时 棉 花 球 本 身 也 应 转 动, 并 顺 势 将 棉 球 从 镜 片 表 面 移 出, 不 要 在 镜 片 边 缘 停 留, 以 免 留 下 印 迹, 如 果 利 用 回 转 器 擦 拭, 则 擦 拭 时, 棉 球 应 由 中 心 向 边 缘 作 直 线 移 动, 棉 球 本 身 同 时 转 动 ( 棉 球 的 自 转 量 应 略 小 于 一 周 为 宜 ) 4 擦 拭 棱 镜 时, 可 将 棉 球 横 放 于 被 擦 拭 的 表 面, 以 直 线 形 式 进 行 擦 拭 5 应 在 相 对 清 洁 的 房 间 内 擦 拭, 并 用 脱 脂 长 绒 棉 擦 拭, 棉 球 上 所 含 的 清 洗 液 不 宜 过 多, 擦 拭 时 应 在 分 划 板 刻 线 的 交 叉 方 向 移 动 擦 拭, 以 免 将 刻 线 内 的 填 料 层 擦 掉 6 在 擦 拭 胶 合 光 学 零 件 时, 棉 球 蘸 混 合 液 不 应 过 多, 以 免 溶 剂 侵 入 胶 合 层 引 起 脱 胶 7 镀 铝 加 保 护 膜 的 反 射 零 件, 如 果 保 护 膜 比 较 牢, 可 用 蘸 少 许 混 合 液 的 棉 球 或 仔 细 脱 脂 的 砂 布 擦 拭 8 棉 球 应 卷 好, 卷 棉 球 的 竹 棍 头 部 不 应 外 露, 以 免 划 伤 零 件 棉 球 的 大 小 和 形 状 应 随 零 件 的 大 小 和 种 类 不 同, 一 般 是 圆 形 零 件 用 圆 柱 形 棉 球, 平 面 零 件 用 扁 平 形 棉 球, 除 镀 膜 表 面 ( 特 别 是 反 射 镁 ) 用 松 软 的 棉 球 外, 其 余 情 况 下 应 把 棉 球 卷 紧 9 蘸 混 合 剂 的 棉 球 侵 入 溶 剂 内 时 请 不 要 超 过 三 分 之 一 的 棉 球 长 度 擦 拭 小 贴 士 : 擦 拭 前, 操 作 人 员 应 用 洗 涤 液 仔 细 清 洗 双 手, 并 用 脱 脂 过 的 毛 巾 擦 干 操 作 人 员 应 将 室 内 的 一 切 用 具 擦 拭 清 洁, 有 关 与 光 学 零 件 接 触 的 工 具 夹 具, 应 进 行 脱 脂 一 个 棉 球 只 能 用 来 擦 拭 一 遍, 用 过 的 棉 球, 请 不 要 蘸 溶 剂 重 复 使 用 清 洁 光 学 器 件 之 前, 请 去 掉 手 上 的 戒 指 及 其 他 饰 物, 仔 细 清 洗 手 部 并 戴 上 手 套 工 作 中, 如 手 出 汗 或 接 触 油 脂 后, 需 按 照 要 求 重 新 清 洗 双 手 擦 拭 光 学 零 件, 如 必 须 用 手 拿 光 学 零 件 的 抛 光 面, 请 对 戴 着 的 手 套 进 行 脱 脂 处 理 擦 拭 带 框 的 光 学 零 件 时, 应 注 意 不 使 污 垢 附 着 在 靠 框 的 周 围 或 框 上 挂 有 纤 维, 不 带 框 的 光 学 零 件 应 不 使 污 垢 附 着 在 毛 砂 面 上 图 一 : 清 洁 工 具 : 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 5

12 问 : 如 何 用 脱 脂 棉 答 : 卷 棉 杆 的 使 用 方 法 : 把 脱 脂 棉 拽 的 越 蓬 松 越 好, 然 后 使 卷 棉 杆 的 长 轴 与 棉 纤 维 方 向 平 行, 尖 端 插 入 棉 絮 中, 顺 势 卷 动 ( 卷 动 中 使 卷 棉 杆 与 棉 纤 维 垂 直 ), 棉 纤 维 就 卷 到 了 卷 棉 杆 上, 根 据 所 需 卷 成 棉 球 的 大 小 把 缠 绕 在 棉 杆 上 的 棉 花 拔 出 来 卷 成 棉 球 还 需 一 种 特 殊 工 具, 取 一 块 干 净 的 绸 布, 蒙 在 一 个 广 口 瓶 上, 四 周 用 绳 子 扎 紧 把 上 述 缠 有 棉 花 的 棉 杆 放 在 扎 紧 的 绸 布 上 转 动, 棉 花 就 会 缠 得 越 来 越 紧, 缠 到 适 合 的 松 紧 度, 棉 球 杆 就 做 好 了 棉 球 杆 蘸 取 清 洁 液 后, 还 可 以 在 绸 布 上 转 动, 以 挤 去 多 余 的 清 洁 液 13 问 : 怎 样 来 使 用 与 保 养 显 微 镜? 答 : 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 6

一 使 用 1. 观 察 前 的 准 备 (1) 置 显 微 镜 于 平 稳 的 实 验 台 上, 镜 座 距 实 验 台 边 沿 约 为 一 寸 左 右 镜 检 者 姿 势 要 端 正, 一 般 用 左 眼 观 察, 右 眼 便 于 绘 图 或 记 录, 两 眼 必 须 同 时 睁 开, 以 减 少 疲 劳, 亦 可 练 习 左 右 眼 均 能 观 察 显 微 镜 构 造 见 右 图 (2) 显 微 镜 是 光 学 精 密 仪 器, 在 使 用 时 要 特 别 小 心, 使 用 前 要 熟 悉 显 微 镜 的 结 构 和 性 能, 检 查 各 总 零 件 是 否 完 好 无 损 镜 身 有 无 灰 尘, 镜 头 是 否 清 洁, 做 好 必 要 的 清 洁 和 调 整 工 作 (3) 调 节 光 源 对 光 时 应 避 免 直 射 光 源, 因 直 射 光 源 影 响 物 像 的 清 晰, 损 坏 光 源 装 置 和 镜 头, 并 刺 激 眼 睛 晴 天 可 直 接 用 窗 外 的 散 射 光, 如 明 暗 天 气, 可 用 8-30W 日 光 灯 或 显 微 镜 灯 照 明 调 节 光 源 及 光 照 的 一 般 步 骤 : a 将 低 倍 物 镜 旋 至 镜 筒 下 方, 旋 转 粗 调 节 轮, 使 镜 头 和 载 物 台 距 离 约 为 0.5cm 左 右 b 上 升 聚 光 器, 使 与 载 物 台 表 面 同 样 高 否 则 使 用 油 镜 时 光 线 较 暗 c 左 眼 看 目 镜, 调 节 反 光 镜 镜 面 角 度 ( 反 光 镜 有 凹 平 两 面, 光 线 较 强 自 然 光 源, 宜 用 平 面 镜 ; 光 线 较 弱 的 天 然 光 源 或 人 工 光 源, 宜 用 凹 面 镜 ) 对 光 使 全 视 野 内 为 均 匀 的 明 亮 度 凡 检 查 染 色 标 本 时, 光 线 应 强 ; 检 查 未 染 色 标 本 时, 光 线 不 宜 太 强 可 通 过 扩 大 或 缩 小 光 圈 升 降 聚 光 器 旋 转 反 光 镜 调 节 光 线. 2. 低 倍 镜 观 察 检 查 的 标 本 须 先 用 低 信 镜 观 察, 因 为 低 倍 镜 视 野 较 大, 易 发 现 目 标 和 确 定 检 查 的 位 置 (1) 先 将 标 本 玻 片 置 于 载 物 台 上, 并 将 标 本 部 位 处 于 物 镜 的 正 下 方, 转 动 粗 调 节 轮, 下 降 物 镜 或 上 升 载 物 台 使 物 镜 至 标 本 0.5cm 处 (2) 左 眼 看 目 镜, 同 时 反 时 针 方 向 慢 慢 旋 转 粗 调 节 轮, 当 在 视 野 内 出 现 物 象 后, 改 用 细 调 节 轮, 上 下 微 微 转 动, 直 至 视 野 内 获 得 清 晰 的 物 象 然 后 认 真 观 察 标 本 各 部 位, 确 定 并 将 需 进 一 步 要 观 察 的 部 位 移 视 野 中 央, 准 备 用 高 倍 镜 观 察 3. 高 倍 镜 观 察 将 高 倍 镜 转 正 至 正 下 方, 在 转 换 接 物 镜 时, 需 用 眼 睛 在 侧 面 观 察, 避 免 镜 头 与 玻 片 相 撞 然 后 由 接 目 镜 观 察, 再 仔 细 调 节 光 圈 和 聚 光 镜, 使 光 线 的 明 亮 度 适 宜, 同 时 再 仔 细 正 反 两 方 向 微 转 动 细 调 节 轮, 直 至 获 得 清 晰 的 物 象 后 为 止, 找 到 最 适 宜 于 观 察 的 部 位 需 进 一 步 要 观 察 的 部 位 移 视 野 中 央, 准 备 用 油 镜 观 察 4. 油 镜 观 察 : (1) 上 升 聚 光 器, 全 开 虹 彩 光 圈 (2) 用 粗 调 节 轮 提 起 镜 筒 或 下 降 载 物 台, 转 动 转 换 器 将 油 镜 转 至 镜 筒 正 下 方 在 玻 片 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 7

标 本 的 镜 检 部 位 滴 上 一 滴 香 柏 油 右 手 顺 时 针 方 向 慢 慢 转 动 粗 调 节 轮 使 镜 筒 下 降 或 载 物 台 上 升, 与 此 同 时, 从 显 微 镜 的 侧 面 观 察 使 油 镜 浸 入 油 中, 直 到 几 乎 与 标 本 接 触 时 为 止 注 意 不 要 压 到 标 本, 以 免 压 碎 玻 片, 甚 至 损 坏 油 镜 头 (3) 从 接 目 镜 内 观 察, 进 一 步 调 节 光 线, 使 光 线 明 亮, 再 用 粗 调 节 轮 将 镜 筒 徐 徐 上 升 或 将 载 物 台 徐 徐 下 降, 直 到 视 野 内 出 现 物 像 为 止, 然 后 用 细 调 节 轮 校 正 焦 距 如 油 镜 已 离 开 油 面 而 仍 未 见 物 象, 必 须 再 从 侧 面 观 察, 将 油 镜 降 下, 重 复 操 作 至 物 象 看 清 为 止 5. 换 片 观 察 完 一 个 标 本 后, 如 果 想 要 再 观 察 另 一 标 本 时, 需 先 将 高 倍 物 镜 ( 或 油 竟 镜 ) 转 回 到 低 倍 物 镜, 取 出 标 本, 按 放 片 的 方 法 换 上 新 片, 即 可 观 察 千 万 不 可 在 高 倍 物 镜 ( 或 油 竟 镜 ) 下 换 片, 以 防 损 坏 镜 头 二 保 养 (1) 油 镜 使 用 完 毕, 先 用 擦 镜 纸 擦 去 镜 头 上 的 油, 再 取 一 张 擦 镜 纸, 滴 上 少 量 的 二 甲 苯 擦 拭, 然 后 再 取 另 一 张 新 擦 镜 纸 将 镜 头 上 残 留 的 二 甲 苯 擦 净 否 则 粘 固 透 镜 的 胶 质 会 被 二 甲 苯 溶 解, 日 久 镜 片 易 移 位 脱 落 (2) 下 降 聚 光 器, 打 开 虹 彩 光 圈, 使 反 光 镜 垂 直 于 镜 座, 以 免 积 聚 灰 尘 (3) 用 绸 布 将 镜 身 擦 拭 干 净 ( 切 不 可 用 手 擦 拭 ), 除 去 灰 尘 油 污 水 汽, 以 免 生 锈 长 霉 (4) 使 显 微 镜 的 各 部 件 恢 复 回 原 位, 下 降 镜 筒, 使 物 镜 呈 八 字 形 置 于 载 物 台 上, 然 后 将 显 微 镜 送 回 镜 箱 中 (5) 显 微 镜 应 存 放 在 干 燥 阴 凉 的 地 方, 不 要 放 在 强 烈 的 日 光 下 暴 晒, 霉 雨 季 节 应 在 显 微 镜 箱 内 放 置 干 燥 剂 ( 硅 胶 ), 如 长 时 间 不 用, 则 光 学 部 分 应 卸 下 放 在 干 燥 器 中, 以 免 受 潮 生 霉 (6) 显 微 镜 应 严 禁 与 挥 发 性 药 品 或 腐 蚀 性 药 品 放 在 一 起, 如 碘 片 盐 酸 硫 酸 等 药 品 三 注 意 事 项 1. 拿 取 显 微 镜 必 须 一 只 手 拿 着 镜 臂, 一 只 手 托 着 镜 座, 并 保 持 镜 身 的 上 下 垂 直, 应 避 免 震 动, 轻 放 台 上 切 不 可 一 只 手 提 起, 以 防 显 微 镜 反 光 镜 功 目 镜 坠 落 2. 使 用 前 应 将 镜 身 擦 拭 一 遍 用 擦 镜 纸 将 镜 头 擦 净 ( 切 不 可 用 手 指 擦 抹 ) 若 遇 到 镜 台 或 镜 头 上 有 干 香 柏 油, 可 用 擦 镜 纸 沾 取 少 量 二 甲 苯 将 其 擦 去 3. 使 用 时 如 发 现 显 微 镜 操 作 不 灵 活 或 有 损 坏, 不 要 擅 自 拆 卸 修 理, 应 立 即 报 告 指 导 教 师 处 理 4. 注 意 保 护 镜 头, 切 不 可 压 碎 标 本 被 片, 损 坏 镜 头 5. 显 微 镜 使 用 完 毕, 应 登 记 显 微 镜 使 用 卡 经 指 导 教 师 检 查 后 放 回 镜 箱 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 8

14 问 : 成 茂 显 微 镜 操 作 器 漏 油 该 怎 么 办? 成 茂 显 微 镜 操 作 器 用 了 3 年, 可 是 最 近 发 现 有 点 漏 油 了, 怎 么 解 决 呢? 答 : 漏 油 很 难 处 理, 一 般 是 需 要 换 整 个 油 路 系 统 15 问 : 荧 光 滤 色 块 脏 了 怎 么 办? 换 滤 色 块 的 时 候 不 小 心 把 滤 光 片 上 印 上 手 印 了, 怎 么 办 啊? 答 : 1. 首 先 使 用 一 股 干 燥 的 气 流 将 滤 色 片 表 面 的 异 物 吹 掉 2. 再 用 不 含 棉 绒 纸 (lint-free cloth, 我 个 人 理 解 为 擦 镜 纸 或 长 纤 维 脱 脂 棉 ) 轻 轻 地 擦 拭 表 面 3. 最 后 用 不 含 棉 绒 纸 沾 少 许 无 水 酒 精 擦 拭 这 样 可 以 达 到 一 个 干 净 的 效 果, 并 对 光 学 部 件 没 有 损 害 16 问 : 擦 镜 头 大 家 是 用 棉 签? 还 是 用 镊 子 + 擦 镜 纸? 擦 镜 头 大 家 是 用 棉 签? 还 是 用 镊 子 + 擦 镜 纸? 另 外 问 一 下 哪 里 有 好 用 的 镊 子 卖? 答 : 镊 子 太 危 险, 如 果 你 没 有 接 受 到 专 业 培 训, 建 议 你 用 棉 签. 17 问 : 如 何 解 决 摄 像 相 显 微 镜 未 检 测 到 图 象 卡 的 问 题? 急! 急!! 急!!!!!!!!!! 请 各 位 指 教. 当 我 使 用 可 射 相 显 微 镜 时, 打 开 与 其 相 连 的 电 脑 上 的 显 微 分 析, 然 后 确 定 进 入 时, 界 面 显 示 为 - 未 检 测 到 图 象 卡! - 即 不 能 进 行 射 相 了. 请 问 各 位 这 是 什 么 原 因, 如 何 解 决, 谢 谢 了! 答 : 首 先 到 电 脑 的 硬 件 管 理 器 去 查 一 查, 一 般 可 以 找 到, 看 看 是 不 是 驱 动 程 序 没 装 好 如 果 没 有 就 把 电 脑 打 开 ( 电 源 关 掉 ). 把 PCI 卡 拔 出 来 重 装. ( 注 意 重 装 是 最 后 的 选 择 ) 如 果 是 1394 卡 也 一 样, 不 过 1394 卡 要 特 别 注 意, 有 的 1394 卡 是 不 能 用 的 18 问 : 那 里 有 质 量 好 的 吹 气 球 卖? 国 产 的 吹 气 球 质 量 好 差 呀, 那 里 有 质 量 好 的 进 口 吹 气 球 卖? 答 : 捷 特 火 箭 形 吹 气 球 效 果 非 常 好 不 过 价 格 也 不 便 宜,40-50 元 一 个 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 9

( 不 晓 得 是 不 是 广 告 哎 :) 19 问 : 照 相 总 有 脏 点, 判 断 不 出 来 倒 底 哪 里 脏 答 : 答 案 1 用 排 除 法 : 如 果 老 是 有 脏 的 东 西 的 话, 我 想 不 会 是 在 载 玻 片 上 的 ; 如 果 脏 的 东 西 视 野 里 和 照 片 中 是 同 一 处, 说 明 相 机 是 干 净 的, 一 定 是 显 微 镜 上 有 脏 东 西 但 肯 定 不 是 目 镜 脏 了, 因 为 CCD 照 相 是 不 通 过 目 镜 的 ; 如 果 是 物 镜 脏 了 的 话, 通 过 换 不 同 倍 数 的 物 镜 可 以 检 测 是 否 是 物 镜 脏 了 ; 如 果 不 是 物 镜 脏 了 的 话, 那 就 检 查 一 下 中 间 变 倍, 检 查 方 法 和 物 镜 一 样, 更 换 不 同 倍 数 再 看 一 下 ; 如 果 没 解 决 再 看 一 下 观 察 筒 里 面 有 没 有 灰 ; 如 果 还 没 解 决, 直 接 拨 打 客 服 找 厂 家, 教 给 他 们 解 决 了! 答 案 2 三 步 搞 定 : 1 空 载 时 转 换 物 镜 看 视 野 脏 点 是 否 依 然 存 在? 2 旋 转 CCD 接 口 连 接 处 与 显 微 镜 转 一 定 角 度 观 察 图 像 脏 点 是 否 位 移? 3 拆 除 所 有 物 镜 至 摄 像 接 口 间 光 路 中 的 所 有 滤 色 片 偏 振 片 等 20 问 : 我 的 多 色 荧 光 滤 色 块 效 果 不 好 了, 为 什 么? 我 用 多 色 荧 光 滤 色 块 同 时 看 三 种 颜 色 的 荧 光, 现 在 发 现 效 果 没 有 以 前 好, 换 了 汞 灯 后 效 果 还 是 改 善 不 大, 大 家 说 这 东 西 有 寿 命, 第 一 回 听 说 这 么 东 西 还 有 寿 命. 请 教 高 手 真 是 这 么 回 事 吗? 答 : 软 镀 膜 的 都 有 寿 命. 一 年 左 右 就 要 OVER. 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 10

21 问 : X-cite 光 源 需 要 调 中 心 吗? X-cite 光 源 需 要 调 中 心 吗? 答 : 不 用, 每 台 X-CITE 都 在 显 微 镜 适 配 器 的 位 置 作 了 中 心 校 准 22 问 : X-CITE 光 源 用 的 液 体 光 纤 是 消 耗 品 吗? 答 : 是 消 耗 品, 寿 命 大 概 是 1 年 左 右 23 问 :X-CITE 灯 泡 的 寿 命 是 多 少? 答 : 2000 小 时, 灯 泡 有 记 忆 功 能, 可 以 准 确 记 录 使 用 时 间 24 问 : 显 微 镜 用 什 么 溶 液 擦 镜 油? 答 : 一 般 用 酒 精 和 乙 醚 的 混 合 溶 液, 酒 精 : 乙 醚 3:7, 要 分 析 纯 的, 然 后 用 擦 镜 纸 轻 轻 擦 拭, 纸 不 可 反 复 使 用. 25 问 : 倒 置 显 微 镜 微 分 干 涉 的 影 响 因 素 我 们 的 倒 置 显 微 镜 在 看 微 分 干 涉 时, 总 是 调 不 好 效 果, 请 问 斑 竹 有 什 么 可 以 影 响 效 果? 答 : 1 一 般 的 DIC 都 只 适 用 于 玻 璃 介 质, 如 果 你 用 的 是 塑 料 的 multi-well plate, 基 本 上 得 到 的 图 像 不 会 很 理 想 2 是 玻 璃 介 质 的 话, 需 要 用 的 也 是 0.14-0.17mm 的 盖 玻 片 朝 向 镜 头 如 果 镜 头 是 有 correction ring 的 话, 调 到 合 适 的 位 置 也 比 较 重 要 3 DIC 开 始 之 前 校 准 起 偏 器 和 检 偏 器 需 要 正 交 ;Condenser turret 上 选 的 应 该 是 对 应 物 镜 的 位 置, 比 如 "DIC 40x"; 物 镜 下 的 "DIC prism" 需 要 调 节 到 一 个 DIC 效 果 最 好 的 位 置, 一 般 来 说, 跳 到 一 个 位 置 后, 整 个 图 像 会 比 较 黑, 有 点 "dark field" 的 效 果, 然 后 在 这 个 位 置 稍 微 朝 一 个 方 向 调 一 下 就 可 以 了 4 当 然, 之 前 科 勒 照 明 (Koeller Illumination) 一 定 要 做 好 26 问 : 体 视 镜 照 相 时 的 光 线 不 均 匀 通 常 在 体 视 镜 照 相 时 为 了 降 低 成 本, 会 选 择 民 用 数 码 相 机 拍 照 但 是 在 透 射 光 拍 照 时, 由 于 低 倍 时 视 野 较 大, 相 机 的 lcd 显 示 屏 会 看 到 中 间 很 亮, 周 围 稍 暗 的 情 况, 照 明 不 均 匀 不 知 道 应 该 如 何 解 决 或 避 免 这 个 问 题? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 11

答 : 找 个 软 件 做 shading 校 正 27 问 : 请 问,CCD 粘 上 灰 了 用 什 么 擦? CCD 粘 上 灰 了 用 什 么 擦? 吹 气 球 吹 不 干 净 的 时 候 答 : 呵 呵, 这 个 问 题 有 意 思, 我 以 前 遇 到 过, 所 以 有 如 下 经 验 : 1. 首 先 辨 别 CCD 类 型, 如 果 属 于 无 防 尘 玻 璃 的 那 种 工 业 CCD, 不 好 意 思, 你 最 好 只 是 用 干 净 的 吹 气 球 吹 就 好 了 否 则 无 论 多 轻 柔 的 清 洗 都 有 可 能 留 下 划 痕 2. 如 果 芯 片 外 面 有 一 层 防 尘 玻 璃,ok, 你 尽 量 请 专 业 认 识 清 洁 毕 竟 离 成 像 面 很 近, 如 果 处 理 不 好, 会 严 重 影 响 成 像 质 量 28 问 : 显 微 镜 长 霉 了 怎 么 办? 实 验 室 搬 家 的 时 候, 发 现 有 一 台 显 微 镜 长 霉 了, 不 知 道 应 该 用 什 么 擦? 答 : 如 果 没 钱 买 个 新 的, 还 是 想 法 擦 一 下 嘛 虽 然 会 对 成 像 产 生 影 响, 但 不 会 太 明 显 的 如 果 找 厂 家 来 擦, 也 得 花 不 少 钱 我 是 自 己 擦 的 反 正 是 旧 显 微 镜, 擦 坏 了 也 不 心 疼 至 于 具 体 方 法, 你 们 作 梦 也 想 不 到 的 : 用 棉 球 蘸 蒸 馏 水 浸 湿 后 去 擦! 轻 轻 一 下 就 掉 了! 如 果 用 酒 精 或 乙 醚 之 类 有 机 溶 剂 反 而 一 点 用 也 没 有 当 然, 镜 筒 内 的 表 面 往 往 会 有 镀 膜, 一 般 情 况 下 即 使 是 轻 轻 一 下 也 会 损 坏 这 层 镀 膜 的 这 种 损 坏 对 成 像 的 影 响 不 会 太 大, 至 少 拍 摄 的 照 片 用 眼 睛 看 是 看 不 出 什 么 影 响 的 最 倒 霉 的 情 况 是 霉 菌 丝 长 到 两 个 复 合 镜 片 的 接 缝 里 了, 这 就 一 点 招 也 没 有 了 29 问 : 大 家 平 常 都 用 什 么 牌 子 的 显 微 镜 油? 大 家 平 常 都 用 什 么 牌 子 的 显 微 镜 油? 国 产 还 是 进 口? 答 : 美 国 Cargille, 显 微 镜 厂 家 提 供 的 精 油 都 是 从 这 个 公 司 贴 牌 的 30 问 : 新 换 的 汞 灯, 好 象 不 够 亮, 什 么 问 题 答 : 汞 灯 装 上 去 是 要 调 节 位 置 的, 否 则 效 果 会 很 差, 结 果 就 是 不 够 亮. 31 问 : 求 助,40 倍 物 镜 看 不 清 楚 了, 什 么 问 题 答 : 在 用 100 倍 油 镜 后, 要 小 心, 如 果 不 注 意 的 话, 在 换 到 40 倍 观 察 时, 镜 油 会 沾 到 40 物 镜, 如 果 这 样 就 非 常 影 响 40X 的 效 果 了. 不 要 紧, 擦 一 下 就 好 了. 32 问 : 如 何 解 决 失 焦 问 题 我 要 在 镜 下 进 行 长 期 观 察, 在 软 上 上 设 置 每 隔 半 小 时 照 一 张 相, 可 是 不 等 半 小 时 到 镜 下 图 像 就 跑 了, 如 何 解 决 这 个 问 题? 答 : 1)Nikon 和 Olympus 的 产 品 有 一 个 装 置 叫 做 失 焦 补 偿, 通 过 一 个 补 偿 装 置 可 将 下 滑 的 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 12

焦 距 拉 回 来 2) 徕 卡 和 蔡 司 说 他 们 的 调 焦 结 构 不 存 在 机 械 性 失 焦 3) 对 于 热 失 焦 现 在 还 没 有 很 好 的 解 决 办 法, 除 非 你 花 很 多 的 钱 安 装 一 个 恒 温 箱 4) 失 焦 问 题 比 较 复 杂, 有 显 微 镜 受 重 力 作 用 导 致 的 失 焦 也 有 样 品 水 分 流 失 导 致 的, 还 有 室 内 温 度 变 化 导 致 的, 还 发 现 有 由 于 物 镜 进 油 导 致 的, 所 以 要 一 一 排 除 才 对. 短 时 间 发 生 失 焦 的 一 般 可 以 怀 疑 是 显 微 镜 的 问 题, 长 时 间 的 问 题 就 要 仔 细 看 了... 33 问 : 目 镜 测 微 尺 怎 么 放 到 目 镜 里? 请 教 高 手, 目 镜 测 微 尺 怎 么 放 到 目 镜 里? 答 : 目 镜 后 端 一 般 有 个 塑 料 的 套 筒, 把 它 旋 下 来, 然 后 把 目 镜 测 微 尺 放 进 去, 再 把 套 筒 装 上 去, 就 OK 了 34 问 : 倒 置 显 微 镜 配 高 倍 物 镜 后, 物 镜 撞 载 物 台 怎 么 办? 答 : 高 倍 物 镜 一 般 都 有 弹 簧 保 护, 把 握 住 物 镜 前 端 把 弹 簧 摁 回, 再 转 一 下, 可 以 将 物 镜 收 回 一 部 分, 这 样 工 作 距 离 就 没 有 那 么 长 了, 就 不 会 磕 到 物 镜 等 到 什 么 时 候 用 了, 再 把 弹 簧 放 开 就 行 了 35 问 : 显 微 操 作, 注 射 针 中 填 充 的 是 什 么 油 比 较 好? 既 能 做 到 稳 定 又 能 保 证 精 确 答 :sigma M8410 mineral oil 36 问 : 显 微 镜 照 相 中 间 清 楚 边 缘 模 糊 怎 么 解 决? 我 用 奥 林 巴 斯 数 码 相 机 接 在 显 微 镜 的 上 面 拍 玻 片 的 图 像 照 出 来 的 图 像 中 心 很 清 楚, 但 是 周 围 就 比 较 模 糊 越 靠 外 越 模 糊 请 问 要 怎 么 解 决 这 个 问 题 是 要 怎 么 调 呢? 答 : 这 个 问 题 需 要 分 析 : 1. 是 否 目 镜 观 察 图 像 的 时 候 已 经 是 这 个 样 子 了, 如 果 目 镜 下 观 察 已 经 出 现 严 重 场 曲, 那 么 再 好 的 相 机 也 没 有 办 法 挽 救 2. 如 果 目 镜 下 观 察 图 像 没 有 问 题, 平 场 性 很 好, 那 么 就 要 看 您 是 否 正 确 的 安 装 了 数 码 相 机, 通 常 数 码 相 机 和 显 微 镜 连 接 拍 摄 需 要 转 接 口 和 照 相 目 镜, 如 果 没 有 使 用 这 些 东 西, 直 接 拍, 恐 怕 有 问 题 37 问 : 体 视 镜 的 透 射 底 座 有 哪 些 影 响 成 像 的 因 素? 答 : 透 射 底 座 无 非 就 这 么 几 个 功 能, 1 直 接 透 射 没 调 节,2 反 光 镜 调 解 透 射 光 的 角 度, 可 以 避 免 直 接 照 射 太 亮,3 有 的 还 带 狭 缝 照 明, 通 过 调 解 狭 缝 的 大 小 控 制 透 过 光 的 强 度 和 以 提 高 成 像 的 衬 度 仔 细 看 看 说 明 说, 就 能 调 好 了 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 13

38 问 : 配 相 差 的 时 候 有 个 对 中 目 镜, 怎 么 用 的? 答 : 对 中 目 镜 是 在 调 节 相 差 效 果 时 用 得 首 先 拔 掉 一 个 目 镜, 把 对 中 目 镜 装 上 调 到 相 差 位 置 就 可 以 看 到 一 个 亮 环 ( 环 状 光 阑 ) 和 一 个 暗 环 ( 物 镜 后 焦 平 面 的 相 位 板 ) 通 过 调 节 聚 光 镜 相 差 环 状 光 阑 的 位 置 ( 亮 环 的 位 置 ), 将 两 个 环 重 合 即 可 再 把 目 镜 换 上 就 ok 了 39 问 : 显 微 镜 不 亮 灯 了? 什 么 问 题? 答 : 先 看 灯 泡, 再 查 保 险, 常 见 是 这 里 出 了 问 题 40 问 : 如 何 清 洗 镜 头 上 树 脂? 我 们 实 验 室 有 一 台 倒 置 显 微 镜, 在 观 看 切 片 的 时 候 有 树 脂 或 者 指 甲 油 将 40 倍 的 镜 头 污 染 了, 请 问 一 下 这 还 可 以 清 洗 干 净 吗? 如 果 可 以 的 话 用 什 么 溶 液 呢? 酒 精 试 过 了, 不 行 答 : 酒 精 乙 醚 肯 定 不 行 的! 用 氯 仿 吧, 三 氯 甲 烷, 最 好 在 通 风 橱 内 操 作, 要 有 耐 心, 不 要 太 用 力,10-15min 可 清 理 干 净 注 意, 最 好 用 竹 签 之 类 的 软 棒 缠 脱 脂 棉, 41 问 : 有 关 CX41 的 载 物 台 旋 钮 调 节 载 物 台 的 旋 钮 不 灵 敏 了, 有 种 卡 的 感 觉, 怎 么 处 理, 谢 谢 各 位 强 人 指 点 答 : 在 手 柄 的 最 下 面 是 一 个 可 以 调 节 松 紧 的 旋 钮, 试 一 下 看 看 如 果 还 是 不 行 估 计 是 齿 轮 有 磨 损 了, 需 要 换 零 件 了 这 是 我 的 推 测 有 可 能 是 手 柄 的 齿 轮 和 载 物 台 的 齿 条 咬 合 不 正 常 又 有 可 能 是 载 物 台 的 滚 珠 导 轨 进 了 异 物 导 致 不 平 顺 42 扫 地 老 太 太 来 了 据 说 在 每 一 个 实 验 室 时, 都 有 一 个 扫 地 的 老 太 太 很 偶 然 地, 经 过 显 微 镜 室 看 到 烟 酒 生 们 正 在 看 荧 光 样 品, 怎 么 也 看 不 到 镜 下 的 荧 光 图 片, 急 得 直 冒 汗 老 太 太 扫 了 一 眼 显 微 镜, 悄 悄 地 提 醒 那 个 烟 酒 生 :shutter 还 没 打 开 呢 据 说 在 每 一 个 实 验 室 时, 都 有 一 个 扫 地 的 老 太 太 很 偶 然 地, 经 过 显 微 镜 室 看 到 烟 酒 生 们 正 在 看 切 片 样 品, 显 示 屏 上 的 样 品 图 片 一 半 黑 一 半 亮, 不 知 咋 回 事, 急 得 直 冒 汗 老 太 太 扫 了 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 14

一 眼 显 微 镜, 悄 悄 地 提 醒 那 个 烟 酒 生 : 把 光 路 切 换 的 拉 杆 给 推 到 头, 现 在 还 差 一 点 呢 未 完 待 续 43 问 : 倒 置 40 倍 看 荧 光 时 问 题 我 在 看 倒 置 显 微 镜 40 倍 荧 光 时, 视 场 外 侧 总 是 有 一 圈 光 晕, 是 什 么 状 况? 求 助! 答 : 1) 看 看 是 不 是 碰 到 光 路 上 什 么 配 件 了, 如 果 不 是, 那 还 是 找 厂 家 工 程 师 解 决 吧! 2) 看 普 通 相 差 时, 如 果 细 胞 比 较 厚, 细 胞 的 周 围 有 光 晕 是 正 常 的, 用 DIC 方 法 可 以 消 除, 相 差 物 镜 看 荧 光 可 能 比 较 弱 也 是 正 常 的, 有 光 晕 是 不 正 常 的 现 象. 44 显 微 镜 常 见 故 障 排 除 答 :1 镜 头 成 像 质 量 低 由 于 镜 片 膜 层 损 坏, 或 者 是 镜 片 表 面 生 雾 生 霉, 致 使 成 像 质 量 下 降 对 于 生 霉 的 镜 头 宜 分 别 用 水 杨 酸 甲 脂 等 化 学 药 品 熏 蒸 杀 死 霉 菌 的 孢 子, 并 擦 净 之 对 膜 层 破 坏 的 镜 头 需 更 换 2 视 场 中 的 光 线 不 均 匀 首 先 检 查 物 镜 目 镜 聚 光 镜 等 光 学 面 是 否 受 污 受 损, 若 受 污, 可 用 擦 镜 纸 擦 净, 若 受 损, 则 按 前 面 所 述 修 理 然 后 检 查 物 镜 是 否 正 在 光 路 中, 视 场 光 阑 是 否 聚 中 是 否 太 小 故 障 原 因 确 定 后 一 般 经 调 整 便 可 解 决 3 图 像 模 糊 不 清 如 不 是 因 镜 头 等 元 件 损 坏 造 成 的, 则 检 查 物 镜 是 否 在 正 确 位 置, 各 个 光 学 面 是 否 变 脏, 根 据 情 况 按 前 面 所 述 处 置 若 使 用 浸 液 物 镜, 则 有 可 能 浸 液 使 用 不 当 或 浸 液 中 混 有 气 泡 或 杂 质 4 调 焦 后 自 动 下 滑 调 焦 后 自 动 下 滑 的 原 因 多 数 是 夹 在 手 轮 与 齿 杆 套 端 面 之 间 的 垫 圈 因 长 期 使 用 而 磨 损, 引 起 端 面 静 摩 擦 力 减 小 所 致 修 理 时 可 根 据 不 同 结 构 形 式 采 取 相 应 方 法 排 除 对 于 有 粗 调 钮 张 力 调 节 环 的 显 微 镜, 有 可 能 是 由 于 张 力 调 节 环 过 松 引 起 的, 可 调 节 张 力 大 小 来 排 除 5 定 位 不 稳 定 这 种 故 障 多 半 是 由 于 定 位 槽 磨 损 或 钢 珠 松 动 所 致 也 有 因 长 期 使 用 后 转 轴 配 合 松 弛 引 起, 若 要 彻 底 修 复 必 须 换 用 新 的 零 部 件 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 15

以 上 是 作 者 对 显 微 镜 维 护 保 养 及 常 见 故 障 排 除 方 面 的 若 干 体 会 长 期 使 用 显 微 镜 的 经 验 告 诉 我 只 有 科 学 正 确 地 使 用 显 微 镜, 才 能 发 挥 它 的 功 能, 并 延 长 其 使 用 寿 命 45 问 : 怎 么 样 利 用 目 镜 测 微 尺 来 测 量 目 标 物 的 实 际 长 度, 没 有 分 析 软 件, 无 法 定 标? 答 :1) 一 般 目 镜 测 微 尺 上 会 标 有 一 小 格 的 实 际 大 小, 你 数 格 数 来 算 就 好, 不 过 这 是 粗 略 的 方 法 ; 不 知 道 你 有 没 有 台 尺, 如 果 有, 应 该 拿 台 尺 来 校 正 目 镜 测 微 尺, 以 求 更 加 准 确 2)0.01MM 物 镜 测 微 尺 与 10X 分 划 目 镜 的 用 法 a 概 念 : 0.01MM 物 镜 测 微 尺 为 格 值 0.01MM 的 玻 璃 尺 10X 分 划 目 镜 ( 即 目 镜 测 微 尺 ) 是 在 10X 目 镜 上 加 上 格 值 为 0.1MM 的 分 划 板 目 镜 b 物 镜 实 际 放 大 倍 数 的 测 量 及 样 品 的 测 量 根 据 国 家 标 准, 显 微 镜 的 物 镜 放 大 倍 数 允 许 有 5% 的 误 差, 因 此 在 进 行 精 确 测 量 时, 需 要 对 物 镜 的 倍 数 进 行 校 准 : 在 载 物 台 上 放 置 0.01MM 的 物 镜 测 微 尺, 把 需 要 校 测 的 物 镜 旋 如 并 调 焦 使 成 像 清 晰 用 10X 分 划 目 镜 观 察 例 如 :40X, 镜 0.01MM 的 格 值 放 大 后 在 目 镜 刻 尺 上 度 量, 若 真 好 放 大 成 0.4MM, 则 正 好 是 40X, 实 际 测 量 并 不 是 1 小 格 (0.01MM) 为 一 量 度 单 位, 而 应 以 5 格 或 10 格 ( 低 倍 时 甚 至 50 格 ) 为 一 度 量 单 位, 以 消 除 测 量 误 差 如 10X 物 镜 经 50 个 0.01MM 格 值 放 大 成 49 个 0.1MM 格 值 后, 实 际 放 大 倍 数 为 49X0.1/(50X0.1)=9.8 然 后 取 下 物 镜 测 微 尺, 放 上 切 片, 读 出 被 观 察 区 域 在 目 镜 的 数 值, 假 设 为 5 个 格 值, 即 0.5MM, 除 以 实 际 放 大 倍 数 9.8, 得 出 被 观 察 区 域 的 实 际 大 小 为 0.5/9.8=0.051MM 计 算 公 式 : 被 观 察 区 域 的 大 小 = 被 观 察 区 域 在 分 划 目 镜 上 的 读 数 / 物 镜 的 实 际 倍 数 如 果 不 用 物 镜 测 微 尺 校 准 物 镜 实 际 倍 数, 就 好 似 默 认 物 镜 表 面 所 刻 的 放 大 倍 数 为 实 际 倍 数 46 问 : 请 问 荧 光 衰 减 器 的 作 用 荧 光 衰 减 器 具 体 干 嘛 用 啊? 不 是 太 明 白, 如 果 荧 光 非 常 微 弱 的 时 候 需 要 加 荧 光 衰 减 器 吗? 跟 强 人 学 习 啦 答 : 荧 光 衰 减 器 是 一 个 必 备 的 配 件, 特 别 是 对 于 临 床 检 验 的 用 户 一 般 用 户 配 备 的 荧 光 显 微 镜 汞 灯 亮 度 不 能 调 节, 因 此 对 于 某 些 荧 光 检 测 的 结 果 的 真 实 性 需 要 衰 减 器 来 调 节 来 辨 别 真 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 16

伪 我 认 识 的 一 个 大 夫 是 做 风 湿 病 检 测 的, 没 有 衰 减 器 以 前, 检 测 结 果 的 阳 性 率 特 别 高, 加 了 衰 减 器, 才 和 她 临 床 确 诊 的 病 例 相 吻 合 不 知 道 我 说 明 白 没 有 47 问 : 物 镜 前 端 的 光 栏 是 干 什 么 用 的? 看 到 有 的 物 镜 前 面 带 可 调 光 栏, 不 知 到 是 做 什 么 用 的? 斑 竹 给 指 点 一 下, 谢 谢! 答 : 光 阑 就 是 一 个 直 径 可 变 的 小 孔, 普 遍 存 在 于 显 微 镜 部 件 中 物 镜 中 的 光 阑 也 是 起 着 调 节 透 过 物 镜 光 线 多 少 的 作 用 如 下 图, 物 镜 的 光 阑 就 是 调 节 物 镜 孔 径 角 的 大 小, 目 的 是 在 暗 视 野 观 察 时, 将 光 阑 放 小, 提 高 背 景 和 样 品 的 反 差, 使 得 背 景 更 接 近 纯 黑, 把 样 品 体 现 得 对 比 度 更 强 同 时 放 小 光 阑 还 可 以 提 高 所 关 产 样 品 的 景 深, 达 到 更 立 体 的 观 察 效 果 48 问 : 我 的 倒 置 荧 光 的 亮 度 比 人 家 正 立 的 荧 光 亮 度 低,WHY? 我 的 倒 置 荧 光 显 微 镜 看 荧 光 标 本, 亮 度 比 隔 壁 正 立 的 荧 光 亮 度 低, WHY? 都 是 100W 荧 光 啊. 郁 闷. 答 : 如 果 不 考 虑 软 七 八 糟 的 因 素, 只 考 虑 显 微 镜 本 身 光 学 效 果 的 话, 正 直 比 倒 置 效 果 好, 因 为 正 置 的 光 路 短, 光 损 失 少 49 问 : 又 是 相 机 问 题, 这 次 是 关 于 白 平 衡 调 节 客 户 反 映, 相 机 的 白 平 衡 调 完 之 后 有 点 黄, 于 是 又 调 了 次, 然 后 背 底 就 蓝 了, 再 调 颜 色 是 不 蓝 了, 但 是 样 品 的 色 彩 就 开 始 偏 了 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 17

有 哪 位 大 侠 指 导 下 白 平 衡 的 正 确 调 节 方 法, 多 谢 多 谢!! 答 : 调 整 曝 光 时 间, 使 得 背 景 亮 度 达 到 230, 再 调 白 平 衡 拍 摄 时 控 制 背 景 亮 度 在 230, 平 时 很 多 人 控 制 的 亮 度 都 低 于 这 个 值 照 片 色 彩 就 不 易 调 整 正 确 此 时 白 色 背 景 实 际 上 是 灰 色 的, 而 灰 色 看 上 去 常 常 会 感 觉 到 有 色 彩 所 以 会 难 于 调 整 50 问 : 荧 光 显 微 镜 的 汞 灯 中 心 如 何 调 节? 答 : 要 想 调 节 好 荧 光 汞 灯 的 中 心, 首 先 大 家 先 了 解 下 荧 光 显 微 镜 灯 箱 的 基 本 结 构 1 灯 箱 结 构 灯 箱 (Lamphouse Frame): 固 定 荧 光 灯 箱 内 部 结 构 的 机 械 支 架 结 构, 具 有 很 好 的 散 热 效 果 灯 泡 (Mercury Arc Lamp): 高 压 短 弧 汞 灯, 产 生 连 续 波 谱 的 灯 管, 为 荧 光 试 验 提 供 照 明 反 光 镜 (Mirror): 类 似 一 个 碗 口 向 着 汞 灯 的 镜 面 结 构 因 为 汞 灯 灯 泡 发 出 的 光 是 四 散 方 向 的, 所 以 为 了 保 证 更 好 的 照 明 效 率, 增 加 了 这 个 收 集 光 线 的 装 置, 来 收 集 汞 灯 发 出 的 与 照 明 方 向 相 反 的 光 集 光 镜 (collector lens): 目 的 是 将 汞 灯 和 反 光 镜 获 得 的 光 线 进 行 汇 集, 形 成 高 效 率 的 一 束 平 行 光, 提 供 给 荧 光 照 明 系 统 了 解 了 光 源 的 结 构, 下 面 来 讲 解 如 何 调 节 汞 灯 2 如 何 调 节 汞 灯 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 18

1] 保 证 光 源 已 启 动 2) 有 调 节 附 件 的 用 附 件 调, 没 有 的 可 以 将 一 张 平 坦 的 白 纸 放 到 样 品 夹 上 对 焦 3) 调 节 collector focus knob 将 本 像 和 镜 像 调 节 清 晰 ( 下 图 ), 此 时 会 发 现 有 两 个 像, 但 它 们 的 位 置 是 一 上 一 下 或 一 左 一 右 4) 调 节 汞 灯 位 置 调 节 钮, 将 两 个 像 调 节 至 ( 下 左 图 ), 将 其 两 像 重 合 ( 下 右 图 ) 5) 此 时 中 心 已 经 调 节 完 毕, 可 以 拿 样 品 进 行 观 察 如 果 视 野 下 亮 度 不 均 匀, 可 微 调 节 调 焦 旋 钮 51 问 : 金 相 显 微 镜 使 用 要 注 意 哪 些 事 项? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 19

答 :1) 条 件 许 可 情 况 下, 建 议 您 的 试 验 室 应 具 备 三 防 条 件 : 防 震 ( 远 离 震 源 ) 防 潮 ( 使 用 空 调 干 燥 器 ) 防 尘 ( 地 面 铺 上 地 板 ); 电 源 :220V±10%,50HZ; 温 度 :0 C 40 C 2) 调 焦 时 注 意 不 要 使 物 镜 碰 到 试 样, 以 免 划 伤 物 镜 3) 当 载 物 台 垫 片 圆 孔 中 心 的 位 置 远 离 物 镜 中 心 位 置 时 不 要 切 换 物 镜, 以 免 划 伤 物 镜 4) 强 度 调 整 切 忌 忽 大 忽 小, 也 不 要 过 亮, 影 响 灯 泡 的 使 用 寿 命, 同 时 也 有 损 视 力 5) 所 有 ( 功 能 ) 切 换, 动 作 要 轻, 要 到 位 6) 关 机 时 要 将 亮 度 调 到 最 小 7) 非 专 业 人 员 不 要 调 整 照 明 系 统 ( 灯 丝 位 置 灯 ), 以 免 影 响 成 像 质 量 8) 更 换 卤 素 灯 时 要 注 意 高 温, 以 免 灼 伤 ; 注 意 不 要 用 手 直 接 接 触 卤 素 灯 的 玻 璃 体 9) 关 机 不 使 用 时, 将 物 镜 通 过 调 焦 机 构 调 整 到 最 低 状 态 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 20

10) 关 机 不 使 用 时, 不 要 立 即 该 盖 防 尘 罩, 待 冷 却 后 再 盖, 注 意 防 火 以 上 几 点 仅 是 一 些 应 特 别 注 意 的 地 方 希 望 大 家 在 使 用 过 程 中 应 小 心 加 细 心, 如 确 实 在 使 用 显 微 镜 时 有 遇 到 难 题 自 己 无 法 解 决 时, 可 立 即 电 话 联 系 显 微 镜 商 家 寻 找 解 决 方 法 52 问 : 盖 玻 片 一 般 的 折 射 系 数 是 多 大? 厚 度 是 多 少? 有 更 好 的 盖 玻 片 吗? 答 : 图 片 : RI= 1.51, 017mm 找 你 们 那 的 公 司 买 几 个 这 种 东 西 然 后 直 接 买 25mm 的 coverslip 养 细 胞, 看 的 时 侯 把 coverslip 挖 出 来, 然 后 放 进 去 看 这 个 是 oko lab 的, invitrogen 有 卖 的,LCI 也 有 卖 的, 买 几 个 这 个, 接 下 来 买 coverslip 就 行 了, 长 期 用 省 钱 53 问 : 聚 光 镜 脏 了 会 影 响 成 像 质 量 么? 我 在 一 台 很 就 没 用 过 的 显 微 镜 上 看 切 片, 一 开 始 调 焦 清 楚 时 镜 下 非 常 模 糊, 以 为 是 显 微 镜 没 调 好, 但 检 查 了 一 遍, 设 置 没 有 问 题, 然 后 我 检 查 了 光 学 部 分, 发 现 聚 光 镜 上 一 层 的 土, 擦 了 之 后 镜 下 的 效 果 很 好 聚 光 镜 脏 了 对 成 像 质 量 有 很 大 影 响 么? 答 : 如 果 是 你 严 格 调 整 的 科 勒 照 明, 聚 光 镜 上 的 土 对 你 的 成 像 影 响 不 是 很 大, 因 为 他 成 像 和 标 本 成 像 不 在 一 个 平 面 上, 但 是 如 果 你 观 察 标 本 的 时 候 有 调 节 聚 光 镜 高 度 的 习 惯 或 者 需 要, 那 么 你 就 必 须 的 清 理 了, 因 为 离 开 了 科 勒 照 明 要 求 的 焦 平 面, 聚 光 镜 上 的 土 成 像 会 越 来 越 接 近 标 本 成 像 的 面, 甚 至 可 能 达 到 一 个 平 面 不 过 话 说 回 来, 不 管 有 没 有 大 的 影 响, 还 是 要 清 理 下, 爱 清 洁 讲 卫 生 嘛 54 问 : 哪 些 光 学 部 件 脏 了 会 影 响 成 像 质 量? 答 : 显 微 镜 是 精 密 的 光 学 仪 器, 光 学 部 件 脏 了 一 定 会 影 响 成 像 质 量 主 要 有 以 下 光 学 部 分 : 1. 物 镜 的 表 面 透 镜 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 21

2. 相 机 芯 片 和 前 保 护 镜 片 3. 盖 玻 片 4. 载 玻 片 5. 相 机 适 配 器 的 光 学 透 镜 6. 聚 光 镜 的 顶 透 镜 7. 目 镜 8. 光 源 透 镜 表 面 9. 其 它 光 路 中 的 光 学 部 件 表 面 : 灯 泡 表 面 荧 光 滤 色 块 集 光 镜 滤 光 片 的 表 面 等 等 55 问 : 如 何 解 决 照 相 和 观 察 不 齐 焦 的 问 题? 我 们 办 公 室 的 显 微 镜 使 用 的 时 候, 每 次 在 目 镜 下 调 好 焦 平 面, 转 换 到 CCD 的 时 候 总 不 齐 焦, 还 需 要 看 着 电 脑 屏 幕 调 节, 但 是 没 有 在 目 镜 里 看 得 清 楚, 所 以 经 常 不 能 调 好, 请 问 此 问 题 如 何 解 决? 答 : 在 目 镜 观 察 清 楚 时, 换 到 CCD 下, 将 相 机 专 用 的 C 口 拧 松 一 些, 因 为 通 用 的 照 相 C 口 是 螺 口 的, 拧 松 是 为 了 让 CCD 升 高 一 点, 可 能 会 达 到 齐 焦 的 效 果! 56 问 : 活 细 胞 长 时 间 观 察 时, 焦 点 漂 移 问 题, 大 家 是 怎 么 解 决 的? 用 的 是 氙 灯 光 源, 可 以 time-lapse 观 察 活 细 胞 的 显 微 镜, 但 是 先 恒 温 到 37 度, 拍 摄 1 小 时 的 活 细 胞 图, 焦 点 就 漂 移 得 不 知 去 向 了 图 片 都 模 糊 了 请 问 怎 么 尽 量 解 决 这 个 问 题? 答 : 其 实 长 时 间 观 察 跑 焦 是 在 所 难 免 的, 所 以 有 的 公 司 就 出 了 防 止 焦 点 漂 移 的 系 统, 是 用 近 红 外 或 者 别 的 办 法 来 探 测 标 本 位 置, 去 接 近 实 时 的 补 偿 这 种 漂 移, 要 求 Z 轴 是 电 动 的, 不 过 有 点 小 贵 的 装 置 啊, 做 长 时 间 观 察 配 上 还 是 相 当 必 要 的, 否 则 老 得 盯 着 57 问 : 为 什 么 显 微 镜 在 10X 看 没 有 问 题,40X 看 的 时 候 看 到 一 边 有 黑 边? 答 : 光 轴 不 在 一 条 线 上 或 有 遮 挡 物, 先 旋 转 一 下 物 镜 看 看, 排 除 物 镜 有 杂 物 再 看 聚 光 镜 是 不 是 篇 了? 这 些 都 没 有 问 题 就 是 棱 镜 上 有 杂 物 的 问 题 了 还 有 物 镜 转 换 器 不 到 位 或 松 动 也 有 这 种 情 况 发 生 58 问 : 荧 光 显 微 镜 串 色 了, 紫 外 通 道 (DAPI) 能 看 到 CFP, 怎 么 办? 紫 外 (DAPI) 下 能 看 到 很 强 的 CFP 荧 光, 比 CFP 通 道 只 低 一 点 点 换 过 激 发 发 射 滤 片 组 了 没 用, 工 程 师 也 没 辙 了 答 : 确 定 是 filter 的 问 题 么? 以 前 用 这 套 filter 同 时 看 过 DAPI 和 CFP 么? 以 前 没 有 这 个 问 题 么? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 22

我 觉 得 问 题 是 出 在 emission filter, 而 不 是 excitation filter, 当 然 排 除 一 下 也 行,, 不 过 405 的 diode, 本 身 出 来 就 只 有 一 个 光 谱 啊,, 又 不 是 multi argon,, 难 道 你 们 用 的 是 白 光? DAPI 和 CFP 本 身 光 谱 就 有 很 大 重 合, 一 般 情 况, 我 是 不 会 推 荐 这 边 的 学 生 用 这 种 染 料 组 合 的,, 因 为 基 本 上 是 自 找 麻 烦 建 议 :1. 换 染 料 组 合. 2. 换 emission filter( 比 前 面 要 贵 吧 )3. 找 一 台 光 谱 显 微 镜, 做 spectral scan 然 后 做 spectral unmixing... 59 问 : 不 同 公 司 物 镜 是 否 可 以 通 用? 答 :OLYMPUS 和 ZEISS 是 采 用 国 际 标 准 的, 物 镜 可 以 通 用 不 过 都 有 些 很 特 别 的 物 镜, 螺 纹 口 不 是 采 用 国 际 标 准 的, 需 要 特 殊 接 口, 那 就 不 可 以 通 用 了 LEICA 和 NIKON 都 是 自 己 的 标 准, 所 以 螺 口 不 一 样, 不 能 互 换 60 问 : 为 什 么 看 的 和 拍 出 来 的 图 像 不 一 样? 我 的 实 验 室 有 一 台 stemi 2000, 拿 来 拍 小 虫 子, 为 什 么 在 镜 下 看 的 比 较 好, 但 是 拍 出 来 后 就 模 糊 了? 是 什 么 原 因 呢? 答 :2 个 原 因 一 个 是 ls 各 位 说 的 不 同 步 的 原 因, 这 个 解 决 有 2 个 办 法, 一 是 你 把 你 的 接 口 螺 纹 拧 松 点, 看 是 否 能 同 步, 不 行 的 话 请 用 第 二 个 方 法 : 先 把 成 像 调 节 到 最 好 的 焦 平 面, 然 后 调 节 目 镜 上 的 屈 光 度 调 节 另 外 一 个 原 因 不 是 不 同 步 : 人 的 眼 睛 是 有 很 大 的 景 深 的, 但 是 我 们 的 成 像 设 备 没 有, 所 以 你 在 观 察 的 时 候, 物 镜 有 多 少 景 深 你 都 可 以 看 清 楚, 但 是 成 像 设 备 不 一 定 可 以 全 部 看 清 楚, 你 如 果 要 解 决 这 个, 考 虑 买 个 带 扩 展 景 深 功 能 的 软 件 做 后 期 处 理 61 问 : 视 野 发 黄 是 怎 么 回 事? 我 们 实 验 室 有 一 台 老 OLYMPUS, 效 果 不 错, 只 是 观 察 的 时 候 镜 下 很 黄, 是 怎 么 回 事? 答 : 视 野 发 黄 有 这 样 几 种 可 能 :1. 灯 泡 不 行 了 换 新 的,2. 没 有 加 白 光 片 或 者 蓝 光 片,3. 是 否 有 其 他 有 色 滤 色 片 再 光 路 里 特 别 留 意 荧 光 滤 色 块 是 否 在 光 路 里 面 62 问 : 显 微 镜 调 焦 钮 有 些 紧, 该 如 何 解 决? 答 : 日 系 调 焦 机 构 是 靠 摩 擦 力 的, 如 果 紧 固 环 太 紧, 会 引 起 调 焦 紧, 特 别 是 粗 调. 如 果 是 年 代 很 久 的 显 微 镜, 而 且 不 是 经 常 使 用 的 情 况, 有 可 能 是 调 焦 机 构 的 油 不 行 了, 要 更 换 润 滑 油 63 问 : 大 家 的 显 微 镜 多 久 擦 拭 一 次? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 23

大 家 使 用 的 显 微 镜, 多 久 擦 拭 一 次 呢 ( 包 括 镜 头 ), 是 每 次 工 作 完 毕 马 上 擦 拭, 还 是 有 个 周 期, 如 一 周 擦 拭 一 次? 答 : 每 次 工 作 完 简 单 擦 拭 容 易 接 触 到 的 地 方, 像 载 物 台, 收 拾 桌 面 ; 物 镜, 镜 架 看 情 况, 看 你 室 内 环 境 和 使 用 人 爱 护 情 况, 不 定 期 清 理 ~~~ 64 问 : 镜 头 是 用 脱 脂 棉 擦 好, 还 是 用 擦 镜 纸 好? 答 : 两 者 都 可 以, 不 过 要 选 好 的 擦 镜 纸 和 长 丝 的 脱 脂 棉 65 问 : 调 焦 机 构 滑 到 最 下 面 了, 没 办 法 调 上 去, 什 么 问 题? 答 : 如 果 是 NIKON 或 者 OLYPMPUS 可 能 是 右 手 的 张 力 环 被 松 到 头 了, 应 该 紧 一 下 就 好, 也 可 能 是 齿 轮 坏 了, 需 要 换 件 了. 66 问 : 实 验 室 的 40 倍 物 镜 不 小 那 样 蹭 到 了 油, 怎 么 都 擦 不 干 净, 请 问 DX 们 怎 么 办? 答 : 确 定 是 物 镜 进 油 了 吗? 如 果 真 的 这 样 的 话 就 没 法 用 了 如 果 只 是 污 染 了 表 面, 用 酒 精 和 乙 醚 1:3 擦 洗 去 污 效 果 最 好 如 果 还 看 不 清 楚 图 象 就 是 真 的 进 油 拉 67 问 : 显 微 镜 使 用 中 容 易 坏 的 部 分 有 哪 些? 答 : 这 个, 坏 倒 一 般 不 至 于, 可 能 也 就 物 镜 目 镜 聚 光 镜 容 易 划 伤, 粗 调 张 力 调 节 钮, 粗 调 限 位 钮 等 等, 使 用 不 当, 就 跟 坏 了 一 样, 要 工 程 师 帮 忙 坏, 汞 灯 卤 素 灯 大 家 都 用, 有 的 时 间 长, 有 的 用 得 时 间 很 短, 虽 是 耗 材 乱, 就 很 杯 具 了, 好 奇 心 啊, 比 如 聚 光 镜 上 的 对 中 旋 钮, 相 差 DIC RC 偏 光 荧 光 等 等 的 调 整 旋 钮, 碰 了, 就 出 不 来 最 佳 效 果 了, 轻 则 图 片 质 量 不 高, 重 则 看 不 到 标 本 68 问 : 汞 灯 爆 了, 怎 么 处 理? 刚 装 上 新 的 汞 灯, 开 了 电 源 后, 听 到 一 些 电 流 声, 然 后 不 到 几 秒 钟 就 发 出 一 声 很 大 的 声 音, 我 赶 紧 跑 了 出 去 现 在 都 不 敢 进 去 弄 了 谁 知 道 怎 么 处 理? 里 面 的 汞 泄 露 出 来 了, 怎 么 除 去? 答 : 汞 在 常 温 下 应 该 是 液 态 的, 所 以 汞 灯 真 的 爆 了 也 没 什 么, 打 开 灯 箱, 检 查 一 下, 灯 箱 里 面 棱 镜 是 否 有 损 坏, 如 果 有 损 坏, 那 只 有 换 灯 箱 了, 如 果 棱 镜 没 有 坏, 清 扫 一 下 灯 箱 就 ok 了 不 过 如 果 能 知 道 汞 灯 爆 的 原 因 最 好, 一 般 来 说 汞 灯 是 不 会 爆 的, 劣 质 的 之 前 有 损 伤 的 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 24

或 者 安 装 的 时 候 手 直 接 接 触 了 其 间 玻 璃 部 分 的, 都 可 能 会 导 致 汞 灯 爆 裂 所 以 安 装 的 时 候 稍 微 小 心 点, 不 是 太 难 的 事 情, 麻 烦 的 是 安 装 之 后 的 中 心 调 节 工 作 69 问 :ccd 开 了 一 小 时 左 右, 屏 幕 就 变 成 花 花 绿 绿 的 世 界 了 答 : 目 前 想 到 的 原 因 有 2 个, 一 个 是 CCD 坏 了, 第 二 个 是 噪 音 你 把 机 器 关 了, 休 息 休 息 再 开, 如 果 还 是 这 个 状 况, 那 多 半 是 摄 像 头, 或 者 匹 配 的 软 件 有 问 题, 这 个 直 接 找 厂 家 的 人 给 您 处 理 就 完 了, 如 果 再 开 机, 好 了, 那 就 是 噪 音 的 问 题 了 CCD 在 工 作 过 程 中, 由 于 其 工 作 原 理, 会 因 为 暗 电 流 产 生 噪 音 ( 花 花 绿 绿 的 雪 花 点 ), 累 计 曝 光 时 间 越 长, 那 么 噪 音 越 多 芯 片 的 好 坏 基 本 就 决 定 了 其 暗 电 流 的 大 小, 但 是 温 度 的 降 低 可 以 减 少 暗 电 流 噪 音, 所 以 CCD 有 制 冷 一 说 一 般 好 点 的 相 机, 在 参 数 说 明 中 会 有 暗 电 流 或 者 读 出 噪 音 这 类 的 参 数, 但 是 目 前 国 内 显 微 镜 行 业 用 的 CCD, 大 部 分 都 没 有 标 这 些 参 数, 一 般 都 会 标 像 素 几 百 万 一 千 多 万 来 吸 引 客 户 的 眼 球, 真 正 与 CCD 品 质 相 关 的 重 要 参 数 却 不 写, 唉! 70 问 : 我 们 配 了 一 个 ludle 的 电 动 载 物 台, 没 动 它, 但 是 照 相 时 发 现 它 会 自 己 动 慢 慢 地 漂, 是 不 是 出 毛 病 了? 答 : 装 的 可 能 会 有 些 漂 移, 等 过 几 天 会 稳 定 2 如 果 2 周 后 还 漂 移, 可 能 时 候 故 障 了 71 问 : 双 目 生 物 显 微 镜 看 起 来 头 晕, 是 什 么 原 因? 答 : 原 因 1 最 可 能 的 原 因 是 两 个 目 镜 出 来 的 想 不 重 合, 会 导 致 头 晕 恶 心 2 两 个 目 镜 的 的 屈 光 度 需 要 调 整 3 物 镜 的 平 常 性 不 好, 长 期 观 察 也 会 头 晕 72 问 : 显 微 镜 视 野 中 间 清 楚, 但 边 缘 模 糊 时 为 什 么? 答 : 是 物 镜 的 问 题, 一 般 消 色 差 物 镜 的 平 场 性 不 好, 视 野 中 心 60-80% 一 般 是 清 楚, 但 周 围 会 模 糊 解 决 办 法 是 更 换 成 平 场 消 色 差 物 镜 73 问 : 目 镜 测 微 尺 上 有 灰 尘, 该 怎 么 擦? 答 : 可 以 从 后 面 取 出 来, 然 后 擦 干 净, 不 过 测 微 尺 正 好 处 在 成 像 的 位 置, 有 一 个 灰 尘 就 会 看 的 很 清 楚, 要 擦 的 一 尘 不 染 需 要 功 夫 呀, 最 好 到 超 净 工 作 台 里 去 装 呵 呵 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 25

74 问 : 荧 光 显 微 镜 目 镜 下 和 照 片 背 景 接 不 够 黑, 怎 么 办?? 答 : 荧 光 拍 照 时 可 以 把 透 射 光 的 聚 光 镜 摇 出 来, 不 然 看 荧 光 时 会 有 一 个 反 射 像 还 有 一 个 方 法, 如 果 荧 光 够 强, 适 当 调 节 荧 光 的 孔 径 光 阑, 可 以 稍 微 去 一 下 背 景 另 外 软 件 里 面 有 一 个 黑 平 衡 选 项, 可 以 将 背 景 变 得 黑 一 点 如 果 都 不 行, 就 把 样 品 制 备 好 一 些 吧 75 问 : 荧 光 显 微 镜 荧 光 范 围 变 小,40 倍 物 镜 看 不 清 楚? 我 们 有 一 台 nikon 2000u, 昨 天 发 现 看 荧 光 的 时 候, 亮 的 地 方 变 小 了 好 多, 而 且 感 觉 不 是 圆 形 的, 怎 么 回 事? 而 且 我 换 40 倍 看 的 时 候 怎 么 调 焦 都 看 不 清 楚! 哪 位 帮 忙 给 点 办 法 啊, 谢 谢 了! 答 : 你 说 的 第 一 个 症 状 可 能 性 有 很 多, 比 如 : 1 中 灰 滤 色 片 没 有 完 全 到 位, 这 个 时 候 你 看 到 得 会 是 一 部 分 亮 一 部 分 不 亮, 亮 的 部 分 和 不 亮 的 部 分 大 抵 是 一 个 圆 弧 的 界 限 ; 2 光 阑 关 小 了, 这 个 时 候 你 看 到 得 应 该 是 中 间 亮 边 缘 暗 或 者 没 有 荧 光 了 ; 如 果 伴 随 光 阑 中 心 不 正, 哪 就 不 是 中 间 亮 了, 可 能 是 某 一 块 地 方 亮 ; 这 个 时 候 你 看 到 得 亮 的 部 分 大 抵 是 一 个 正 多 边 形 ; 3 汞 灯 中 心 不 正 : 可 能 是 更 换 新 灯 泡 之 后 没 有 调 节 好 中 心 或 者 是 好 奇 的 研 究 生 动 了 灯 箱 上 的 调 节 杆, 这 个 时 候 看 到 得 部 分 亮 的 形 状 就 不 好 形 容 了, 各 种 情 况 都 可 能 有, 但 是 基 本 不 会 和 1 2 的 形 状 雷 同, 前 2 者 你 基 本 可 以 看 到 比 较 规 则 清 晰 地 界 限, 这 种 情 况 下 基 本 看 不 到 规 则 的 清 晰 地 界 限 ; 4 激 发 块 转 盘 没 有 转 到 位 或 者 分 光 棱 镜 没 有 拉 到 位 : 这 种 可 能 性 比 较 小, 产 生 的 图 像 偏 差 和 情 况 1 类 似 ; 关 于 您 问 的 第 二 个 问 题, 不 大 赞 同 二 楼 师 兄 的 说 法 : 2000U 是 倒 置 显 微 镜, 倒 置 显 微 镜 很 少 配 置 油 镜, 所 以 沾 上 油 的 几 率 很 小, 不 过 不 排 除 您 培 养 器 皿 中 液 体 滴 到 镜 头 上 造 成 污 染, 可 以 先 做 一 下 清 洁 有 一 个 比 较 常 见 的 情 况 : 40X 的 物 镜 大 多 数 情 况 会 带 有 校 正 环 ( 只 要 是 好 点 的 的 物 镜 ), 您 可 以 再 40X 下 先 调 节 到 最 接 近 清 楚 地 焦 平 面, 然 后 调 节 物 镜 上 的 校 正 环, 基 本 可 以 解 决 看 不 清 楚 地 问 题 76 问 : 荧 光 怎 么 这 样 弱? 我 们 单 位 一 台 OLYMPUS BX51 荧 光 显 微 镜, 观 察 的 时 候 荧 光 特 别 弱, 斑 竹 有 什 么 解 决 办 法? 答 :BX51 的 效 果 应 该 还 是 可 以 的, 可 能 的 原 因 : 1 荧 光 染 料 和 显 微 镜 的 荧 光 块 可 能 不 是 很 配 合 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 26

2 汞 灯 的 中 心 没 有 调 节 好, 或 者 汞 灯 的 寿 命 到 了, 3 样 本 的 制 作 是 否 可 以 更 好, 4 是 否 用 用 了 合 适 的 物 镜 77 问 : 载 物 台 XY 移 动 特 别 松 是 什 么 故 障? 答 :1 可 能 是 齿 轮 已 经 磨 损 需 要 换 新 的 2 载 物 台 调 节 杆 的 最 下 端 有 一 个 松 紧 交 接 扭, 可 以 调 松 紧 78 问 : 普 通 12V100W 灯 泡 需 要 调 中 心 吗? 答 :80 年 代 前 的 显 微 镜 有 的 需 要 调 中 心, 目 前 销 售 的 显 微 镜 都 是 预 定 心 的, 不 要 调 节 79 问 : 怎 么 可 以 延 长 卤 素 灯 泡 的 使 用 寿 命? 答 : 开 光 灯 泡 前, 把 电 压 调 到 最 近, 可 以 延 长 灯 泡 寿 命 80 问 : 在 调 节 相 差 或 者 DIC 光 路 前 一 定 要 调 整 科 勒 照 明 吗? 答 : 科 勒 照 明 调 节 是 基 础 交 接, 是 必 须 要 调 成 的 ( 一 些 低 档 显 微 镜 没 有 科 勒 照 明 的, 则 不 需 要 ) 81 问 : 聚 光 镜 的 数 值 孔 径 该 如 何 调 节? 答 : 物 镜 数 值 孔 径 和 孔 径 光 阑 大 小 的 比 例 在 照 相 时 理 论 值 为 :NA*0.6~0.8, *(o]/ z 一 般 是 按 这 个 比 例 调 节 有 时 你 的 样 品 做 的 比 较 厚, 那 么 你 用 高 倍 物 镜 时 只 能 看 到 很 薄 的 一 层, 这 时 关 小 孔 径 光 阑 显 得 清 楚 一 些, 那 是 因 为 景 深 也 增 加 了, 样 品 不 同 层 面 的 细 节 被 观 察 到 了 但 实 际 上 分 辨 率 是 降 低 了 实 际 上 还 是 应 该 根 据 自 己 的 样 品 来 调 节 这 两 项 另 外 100 倍 物 镜 观 察, 孔 径 光 阑 也 没 必 要 开 到 最 大, 应 该 在 0.7-0.9 之 间 就 好 如 果 发 灰 的 话, 可 以 将 视 场 光 阑 (F) 关 小 到 与 视 野 一 致 的 大 小, 来 挡 一 挡 没 有 意 义 的 光 线, 效 果 会 好 一 点 82 问 : 显 微 镜 的 电 压 一 般 调 到 多 少 比 较 合 适? 答 : 如 果 是 12 电 压 的, 一 般 调 到 9-10 伏 左 右, 配 上 减 光 片 和 色 温 片, 这 样 可 以 保 证 背 景 是 白 色 的 且 不 刺 眼 如 果 是 低 电 压 的 就 要 根 据 自 己 的 要 求 了 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 27

83 问 : 显 微 镜 的 使 用 环 境 有 什 么 要 求? 答 : 主 要 是 防 尘 和 防 湿, 如 果 是 是 荧 光 显 微 镜, 需 要 有 窗 帘, 保 证 暗 室 最 好 84 问 : 荧 光 显 微 镜 的 光 阑 有 什 么 作 用? 答 : 其 实 荧 光 光 阑 的 作 用 等 同 于 透 射 光 阑 的 作 用, 荧 光 部 分 的 孔 径 光 阑 一 样 起 到 调 节 分 辨 率 和 焦 深 的 作 用, 视 场 光 阑 控 制 这 荧 光 照 明 部 分 光 路 的 直 径, 防 止 过 多 的 杂 散 光 进 入 观 察 成 像 光 路 还 有 很 多 厂 家 设 计 了 方 形 的 视 场 光 阑, 防 止 过 多 不 必 要 的 激 发 损 失 85 问 : 物 镜 前 端 的 光 栏 怎 么 用? 看 到 有 的 物 镜 前 面 带 可 调 光 栏, 不 知 到 是 做 什 么 用 的? 斑 竹 给 指 点 一 下, 谢 谢! 答 : 光 阑 就 是 一 个 直 径 可 变 的 小 孔, 普 遍 存 在 于 显 微 镜 部 件 中 物 镜 中 的 光 阑 也 是 起 着 调 节 透 过 物 镜 光 线 多 少 的 作 用 物 镜 的 光 阑 就 是 调 节 物 镜 孔 径 角 的 大 小, 目 的 是 在 暗 视 野 观 察 时, 将 光 阑 放 小, 提 高 背 景 和 样 品 的 反 差, 使 得 背 景 更 接 近 纯 黑, 把 样 品 体 现 得 对 比 度 更 强 86 问 : 什 么 是 显 微 镜 的 描 绘 器? 答 : 描 绘 器 和 显 微 镜 同 时 使 用, 这 样 目 镜 下 能 同 时 看 到 显 微 镜 下 的 物 象 和 显 微 镜 旁 边 的 绘 图 纸 和 铅 笔, 可 依 所 见 物 象 绘 下 草 图 应 用 : 在 形 态 学 和 分 类 学 研 究 时, 有 时 文 字 所 不 能 或 不 易 说 明 的, 绘 图 可 以 表 达 出 来, 科 学 论 文, 专 著, 报 告 和 教 材 有 恰 当 的 插 图 配 合, 将 更 具 说 服 力, 为 文 章 添 色 增 辉 87 问 : 怎 么 用 描 绘 器? 答 : 描 绘 器 由 两 个 直 角 棱 镜 合 成 的 立 方 体 和 一 个 反 光 镜, 在 两 个 棱 镜 的 胶 合 斜 面 上 涂 有 银 镜, 镜 之 中 央 为 透 光 孔 使 用 时, 把 棱 镜 的 部 分 装 在 接 目 镜 上, 反 光 镜 放 在 右 方 装 成 45 角, 从 棱 镜 上 可 以 同 时 看 到 由 透 光 孔 射 来 的 显 微 镜 下 的 物 象 以 及 通 过 反 光 镜 与 棱 镜 的 反 射 面 反 射 过 来 的 放 在 显 微 镜 右 边 的 绘 图 纸 和 铅 笔 88 问 : 怎 么 在 显 微 镜 上 接 照 相 机? 答 :1 三 目 显 微 镜 专 门 的 摄 像 接 口, 通 过 接 口 链 接 2 直 接 把 目 镜 拔 下 来 通 过 接 口 也 可 以 接 相 机, 不 过 效 果 没 有 第 一 种 效 果 好 89 问 :4 倍 物 镜 观 察 时, 视 野 有 严 重 的 黑 边, 怎 么 办? 答 : 需 要 把 聚 光 镜 的 顶 透 镜 摇 出 就 可 以 了 使 用 10 物 镜 时, 再 把 顶 透 镜 摇 入 90 问 : 带 着 眼 镜 可 以 看 显 微 镜 吗? 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 28

答 : 新 型 显 微 镜 的 目 镜 都 是 高 眼 点 目 镜, 戴 着 眼 镜 看 没 有 问 题 50-60 年 代 的 显 微 镜 可 能 是 低 眼 点 目 镜, 戴 眼 镜 不 能 看 91 问 : 相 差 显 微 镜 上 有 个 绿 色 的 玻 璃 片 是 干 什 么 用 的? 答 : 绿 色 的 滤 色 片 可 以 使 人 眼 观 察 图 像 时 舒 适, 而 且 相 差 观 察 时 加 入 滤 色 片 可 以 提 高 图 像 的 衬 度, 适 于 观 察 92 问 : 显 微 镜 上 配 置 的 灰 色 滤 色 片 上, 有 数 字 25 50 是 什 么 意 思? 干 什 么 用? 答 : 应 该 是 中 灰 滤 色 片, 用 于 衰 减 光 的 亮 度 用 的,25 是 指 25% 的 光 透 过 用 这 种 滤 色 片 衰 减 光, 不 会 使 视 野 背 景 变 红, 如 果 通 过 降 低 电 压 来 减 弱 光 的 的 话, 视 野 背 景 会 变 红 色 93 问 : 我 们 实 验 室 的 荧 光 显 微 镜 看 明 视 野 时, 背 景 变 的 特 别 红? 答 : 是 绿 激 发 块 在 光 路 里, 请 把 荧 光 激 发 块 转 盘 转 到 空 孔 位 置 94 问 :CCD 拍 出 来 的 像 只 有 目 镜 观 察 里 的 30%, 怎 么 办? 答 : 请 把 摄 影 C 接 口 换 成 0.5 倍 或 者 0.4 倍, 可 以 扩 大 照 相 范 围 95 问 : 我 再 用 荧 光 显 微 镜 观 察 时 背 景 总 有 杂 光 干 扰, 怎 么 解 决? 答 :1 把 屋 里 的 灯 关 闭,2 拉 上 窗 帘 3 在 聚 光 镜 上 放 一 张 名 片 挡 住 反 射 光 96 问 : 体 视 镜 看 胚 胎, 光 太 热 损 伤 了 样 品 答 : 请 换 成 冷 光 源 照 明 97 问 : 荧 光 显 微 镜 电 源 打 开 了, 但 没 有 光? 答 : 请 检 查 荧 光 光 闸 是 否 打 开 98 问 : 看 显 微 镜 时 总 容 易 把 片 子 压 碎, 怎 么 办? 答 : 在 左 手 调 焦 手 轮 处 有 一 个 调 焦 显 微 环 可 以 扳 动, 在 10 倍 物 镜 找 到 像 后 请 用 限 位 环 锁 住 粗 调 这 样 就 不 会 压 碎 片 子 了 99 问 : 显 微 镜 自 己 都 可 以 清 洁 哪 些 部 件 答 : 为 了 防 止 调 乱 光 路, 一 般 建 议 只 擦 目 镜 和 物 镜 如 果 会 调 科 勒 照 明 的 话, 也 可 以 擦 拭 聚 光 镜 ( 注 意 清 洁 聚 光 镜 后 要 调 科 勒 照 明 ) 100 问 : 有 关 镜 头 上 树 脂 的 清 洗 我 们 实 验 室 有 一 台 倒 置 显 微 镜, 在 观 看 切 片 的 时 候 有 树 脂 或 者 指 甲 油 将 40 倍 的 镜 头 污 染 了, 请 问 一 下 这 还 可 以 清 洗 干 净 吗? 如 果 可 以 的 话 用 什 么 溶 液 呢? 酒 精 试 过 了, 不 行 答 : 酒 精 乙 醚 肯 定 不 行 的! 用 氯 仿 吧, 三 氯 甲 烷, 最 好 在 通 风 橱 内 操 作, 要 有 耐 心, 不 要 太 用 力,10-15min 可 清 理 干 净 注 意, 最 好 用 竹 签 之 类 的 软 棒 缠 脱 脂 棉, 祝 好 运 ~~~ 显 微 镜 使 用 与 维 护 常 见 问 题 100 问 ( 系 列 之 一 ) 29

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