Microsoft PowerPoint - 4. Embryology_20 August 14_FINAL_Chinese

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鹄故温
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1 主题 : 胚胎胚胎技术和延时成胚胎技术和延时成像主题 : 胚胎胚胎技术和延时成像胚胎技术和延时成像形态学辅以自动延时分析对于不同的胚胎学家选择具有高发展潜力的胚胎是非常有益的 (Diamond) 专家小组监视下的人类植入前胚胎延时术语和定义的共识指南 (Aguilar) 以人类卵泡液中游离的 DNA 水平作为体外受精结果的非侵入性生物标记物 (Scalici) 可以高精度和高重现性地从囊泡废弃培养基中获得分泌的 mirna: 一种新的非侵入性胚胎选择的潜在生物标志物 (Capalbo) IVF = 体外受精 ;mirna = 微小 RNA;NEBD = 核膜破裂

2 P-115 形态学辅以自动延时分析对于不同的胚胎学家选择具有高发展潜力的胚胎是非常有益的 MP Diamond Poster 研究背景与目的背景由于许多转移的形态好的胚胎不能植入, 能够鉴定具有较高的发展潜力的胚胎的技术是有益的一个集成的延时和自动分析系统, 该系统已被证明对三个非常有经验的胚胎学家小组选择胚胎是有益处的该系统可自动测量细胞分裂 P2 期 ( 第一和第二有丝分裂的时间 ) 和 P3 期 ( 第二和第三有丝分裂的时间 ), 并将胚胎归类到不同的发展潜力的胚胎组目标检查辅以形态学检查的延时测试结果是否对五个有不同临床经验的胚胎学家小组是有益的 *Eeva Diamond P. Poster. P-115

3 研究材料和方法前瞻性多中心研究 (2011 年 6 月年 4 月 ) 54 例接受囊胚移植周期的患者同意使用 Eeva System 给胚胎拍照 5 个来自从不同的临床实践实验室训练, 以及地理区域的胚胎学家只用第 3 天的形态以及形态学后进行的延时测试结果进行囊胚形成的预测为了评估形态检查后进行延时测试的效果, 可以计算优势比 (OR) 和诊断性能的测定优势比 >1 表明形态后进行延时测试对于囊胚预测是有益的 Diamond P. Poster. P-115 延时测试结果可以帮助胚胎学家选择高几率形成囊胚的胚胎只使用形态学观察形态学后进行延时测试所有胚胎 : OR= % CI: OR= % CI: 好 / 一般胚胎 : OR= % CI: OR= % CI: 使用延时测试结果辅助传统的形态学, 能够帮助胚胎学家预测所有的胚胎中能够形成囊胚 ( 图中绿色部分 ) 的和好 / 一般的胚胎 ( 图中蓝色部分 ) Tsorva DS. Poster. P-149

4 与仅用形态学方法相比, 单一胚胎学家采用辅助预测方法时, 每个胚胎学家的优势比增加到 > 只使用形态学观察形态学后进行的延时测试结果优势比胚胎学家这些结果表明, 延时测试结果能够一直帮助胚胎学家选择高囊胚形成几率的胚胎 Diamond P. Poster. P-115 结论和临床意义结论这些结果表明, 使用集成延时测试的自动分析系统 *, 并辅以形态学, 可提供信息来帮助有不同经验水平的胚胎学家选择有高发育潜力的胚胎临床意义相对于卵裂期胚胎, 成功发展到囊胚阶段是表现有高植入潜能的重要的里程碑因此, 这些结果表明, 使用集成延时测试的自动分析系统可提高过去使用传统形态学选择胚胎的整体成功率 *Eeva Diamond P. Poster. P-115

5 P 人类胚胎植入前的专家小组延时监测的术语和定义的一致性共识 J Aguilar Poster 研究背景与目的背景与体外胚胎发育有关的研究质量的增加已经证明 : 形态动力学数据对于胚胎选择有附加的临床价值有几篇文章已经确定了类似胚胎选择或取消选择的变量, 但其术语是不同的对于静态胚分级和选择有一个以证据为基础的共识文件, 但是, 目前尚没有关于延时方法论或动态胚胎分级及选择的以证据为基础的参考文件目的为提高该新方法的利用和影响, 要一致定义植入前胚胎发育动态监测的方法和术语 Aguilar J.Poster. P-150

6 研究材料和方法来自七个不同欧洲中心的的延时技术使用专家于 2011 年 9 月和 2013 年 6 月间举行了一系列的共识会议该会议达成了一项关于延时变量的一般确定共识该准则将在以后公布 Aguilar J.Poster. P-150 共识指导方针中将包含的延时技术专题何时和如何注解孵化囊胚的第一次分裂及后续分裂事件细胞质波二极体挤压原核的外观和衰落原核评分细胞周期时间和同步致密化囊胚形成和折叠多核化的发生率片段化程度正向和反向分裂事件细胞均匀度在胚胎发育和细胞质带存在气泡和异常 Aguilar J.Poster. P-150

7 结论和临床意义结论尽管尚未发布, 这些指导方针将代表经验丰富的临床科学家首次达成的关于延时成像技术的共识对目前的证据和理论进行系统评估, 以针对延时成像及其在 IVF 中临床应用的方法论和术语达成共识临床意义统一术语和形态动力学延时变量的定义可以改进那些对患者有积极影响的数据的理解和共享 Aguilar J.Poster. P-150 O 在人卵泡液中游离 DNA 水平可以作为体外受精结果的非侵入性生物标记 E Scalici 第 27 课, 胚胎生物标记 - 是否离我们越来越近了?

8 研究背景与目的背景炎症细胞凋亡或坏死而导致的 DNA 片段存在于血液循环中目前其量化用于妇科和妊娠疾病的检测此外, 构成的卵母细胞微环境的卵泡液 (FF) 中, 含有血浆成分和颗粒细胞的分泌因子 FF 中存在的游离 DNA 从来没有被研究过, 也没有对其作为 IVF 结果的生物标记的潜力做过研究目的检查排卵前单独的滤泡 FF 中是否有任何游离 DNA, 如有, 要评估是否和 IVF 结果相关 Scalici E, 第 27 课,O-097 研究材料和方法从 44 例接受传统 IVF(n=26) 或 ICSI(n=18) 治疗的患者中前瞻性收集了 100 个单独的 FF 样本单独吸取排卵前卵泡计算卵泡大小从 IVF 或 ICSI 中分离每个相应的卵丘卵母细胞复合物使用 qpcr 进行游离 DNA 的定量结果与妊娠结果相关 qpcr = 定量聚合酶链反应 Scalici E, 第 27 课,O-097

9 FF 中的游离 DNA 水平与卵泡大小相关 4 卵泡总数 (n=100) 4 具有卵母细胞的卵泡 (n=76) 游离的 DNA(ng/µl) *p=0.024 * 游离的 DNA(ng/µl) *p=0.007 * mm 13-18mm 卵泡大小 >18mm mm 13-18mm 卵泡大小 >18mm 观察到游离 DNA 和卵泡大小之间有显著的负相关 Scalici E, 第 27 课,O-097 FF 样品中高水平的游离 DNA 和第 3 天低质量胚胎显著相关 5 * 4 *p=0.02 游离的 DNA(ng/µl) 级 ( 第 3 天 ): 6-8 细胞常规尺寸片段的 25% 级胚胎质量 3-4 级 FF 样品中低水平的游离 DNA 和低质量胚胎显著相关 (p= 0.02) Scalici E, 第 27 课,O-097

10 FF 样品中高水平的游离 DNA 和胚胎延迟发育有关游离的 DNA(ng/µl) *p=0.04 * 游离的 DNA(ng/µl) *p=0.02 * 0 <6 细胞 6-8 细胞 >8 细胞卵裂球数 0 25% 碎裂率 >25% FF 样品中高水平的游离 DNA 还和第 3 天的高碎裂率有关 (>25%) Scalici E, 第 27 课,O-097 结论和临床意义结论人类 FF 中可检测出游离的 DNA, 且其水平显著取决于卵泡的大小 FF 样品中游离 DNA 的水平和接受 IVF 治疗的患者的胚胎质量显著相关临床意义卵泡中的大量游离的 DNA 可能对卵母细胞有负面影响, 因此胚胎健康也会受到影响卵泡中游离 DNA 很容易测定, 因此可用作预测 IVF 治疗的胚胎质量的补充非侵入性工具将进行一项更大的研究以研究游离 DNA 水平是否和胚胎移植及妊娠率相关 Scalici E, 第 27 课,O-097

11 O-099 可以高精度和高重现性地从囊泡废弃培养基中获得分泌的 mirna: 一种新的非侵入性胚胎选择的潜在生物标志物 A Capalbo 第 27 课, 胚胎生物标记 - 是否离我们越来越近了? 研究背景与目的背景在过去的十年中, 我们一直假设微小 RNA(miRNA 的 ) 可能在细胞外稳定得到的证据是, 通过供体细胞分泌的 mirna 可以被受体细胞利用, 并对它们产生基因调节作用因此, 作为囊胚 - 子宫内膜对话的一部分, 人类胚胎会分泌特异性 mirnas, 以增加移植成功率在易收集的废弃培养基中获取 mirna 的名单谱具有鉴定胚胎质量的非侵入性生物标记的能力目的评估人类胚胎是否在细胞外环境中分泌 mirna, 如果分泌, 则检查这些 mirna 是否可以从扩大人类囊胚的废弃培养基中获取 Capalbo A., 第 27 课,O-099

12 研究材料和方法利用经验证的方法, 对 2013 年 1 月和 10 月内为研究捐赠的 10 个优质扩展人类囊胚进行了内细胞团 (ICM) 的分离滋养外胚层 (TE) 样品 ( 无 ICM 细胞 ) 及其相关的废弃培养基 (25 微升, 在受精后 120 小时 ) 被单独进行 mirna 分析使用含有 736 个人类 mirna 序列的引物组合的 TLDA MicroRNA 卡 * 对微小 RNA 的表达进行评估进行结果分析 * 应用生物系统 CapalboA, 第 27 课,O-099 分泌 mirna 描述具有准确性和重现性在囊胚废弃培养基中平均检测到 48 个不同的 mirna 用 TE 样本进行比较分析显示, 至少一种介质中的 98.8%(79/80) 的 mirna 也在 TE 中表达功能性生物信息学分析表明, 一介质中发现的某些 mirna 已经被证实为循环 mirna, 包括与此相关的 : 子宫内膜容受性血管生成胎盘功能干细胞调控 CapalboA, 第 27 课,O-099

一些 mirna 在整倍体植入囊胚的条件废弃培养基中显著更充足植入囊胚中的 mirna 下降植入囊胚中的 mirna 上升调整 P 值的 Log10 相对定量的 Log10 基于整倍体囊胚的单胚胎移植的 17 个植入和 18 个未植入胚胎的火山图分析多个 mirna 被发现具有独特的表达或在植入囊胚的条件培养基中更充足 CapalboA, 第 27 课,O-099

13 一些 mirna 在整倍体植入囊胚的条件废弃培养基中显著更充足植入囊胚中的 mirna 下降植入囊胚中的 mirna 上升调整 P 值的 Log10 相对定量的 Log10 基于整倍体囊胚的单胚胎移植的 17 个植入和 18 个未植入胚胎的火山图分析多个 mirna 被发现具有独特的表达或在植入囊胚的条件培养基中更充足 CapalboA, 第 27 课,O-099 结论和临床意义结论人类囊胚在培养基中分泌的适当浓度的 mirna 的描述应高度准确和重现多个 mirna 被发现具有独特的表达或在植入囊胚的条件培养基中更充足临床意义要充分开发这些发现的临床平移的相关性, 进行进一步的前瞻性研究, 以确定能够基于废弃培养基中分泌 mirnas 量化用于预测植入前胚胎的发育能力的关键分泌 mirnas CapalboA, 第 27 课,O-099

14 总结总结 : 胚胎胚胎技术和延时成像胚胎技术和延时成像 Mizuno 等 : 使用集成延时测试的自动分析系统, 当辅以形态学时, 对帮助有不同经验水平的胚胎学家潜在高发展潜力胚胎是有帮助的 Aguilar 等人 : 为了提高该新技术的利用和影响, 共识指导方针已发展到为延时监视统一定义方法和术语的阶段 Scalici 等人 : 卵泡中的高水平的游离 DNA 可能对卵母细胞有负面影响, 进而影响胚胎健康卵泡中游离 DNA 可以轻易被测定, 因此可能被用作预测胚胎质量的补充非侵入性工具 Capalbo 等人 : 人类囊胚在培养基中分泌的 mirnas 浓度对于高精度和高重现性描述是充足的多个 mirna 被发现具有独特的表达或在植入囊胚的条件培养基中更充足