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港冉
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1 GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS50010 v.a GENMED 动物线粒体呼吸链复合物 IV 活性测定试剂盒产品说明书 ( 中文版 ) 主要用途 GENMED 动物线粒体呼吸链复合物 IV( 细胞色素 C- 氧化还原酶 ) 活性定量检测试剂是一种旨在通过测定纯化的可溶性完整线粒体样品中的细胞色素 C 氧化还原酶的活性, 即采用比色法测定受到细胞色素 C 氧化还原酶催化的氧化反应的权威而经典的技术方法该技术由大师级科学家精心研制成功实验证明的其适用于各种线粒体 ( 动物人体等 ) 呼吸链复合物 IV 的活性检测产品严格无菌, 即到即用, 活体检测, 操作简捷, 性能稳定技术背景线粒体呼吸链复合物 IV (Mitochondria Complex IV), 又称为细胞色素 C 氧化还原酶 (cytochrome c oxidoreductase) 或细胞色素 C 氧化酶 (Cytochrome c oxidase), 存在于真核生物的细胞线粒体上, 主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量呼吸链复合物 IV 是由 13 种不同的亚体构成的复合物, 其中含有 2 个血红素 (heme) 基团 (a 和 a3) 和 2 个铜原子, 作为辅基 (prosthetic groups) 呼吸链复合物 IV 的遗传变异导致氧化磷酸化类疾病, 包括阿茨罕默综合症和肿瘤等其作用机制和检测原理如下 : 产品内容 2+ + ComplexIV 3+ 4cytochromec 8H + O 2 4cytochromec + 2 reduce oxidiaed Abs550nm Abs550nm + 2H O + 4H + GENMED 缓冲液 (Reagent A) GENMED 反应液 (Reagent B) GENMED 稀释液 (Reagent C) GENMED 稳定液 (Reagent D) 产品说明书毫升毫升毫升微升 1 份保存方式 GENMED 缓冲液 (Reagent A) 和 GENMED 稀释液 (Reagent C) 保存在 4 冰箱里, 其余的保存在 -20 冰箱里 ;GENMED 反应液 (Reagent B) 避免光照 ; 有效保证 6 月用户自备 1.5 毫升离心管 : 用于反应液配制的容器石英比色杯 : 用于比色的容器分光光度仪 : 用于比色分析实验步骤实验开始前, 将 -20 冰箱里的试剂盒中的 GENMED 反应液 (Reagent B) 置入冰槽里融化, 然后移出 100 微升到新的 1.5 毫升离心管, 加入微升 GENMED 稳定液 (Reagent D), 轻柔混匀后, 室温下避光静置 1

2 15 分钟 ( 可见颜色变化 ), 置于冰槽里, 标记为 GENMED 反应工作液 ( 注意 : 见注意事项 4), 放在暗室里然后进行下列操作一测读准备 1. 准备好含有复合物 IV 的样品 ( 例如纯化的线粒体或细胞裂解液等 ), 置于冰槽里 2. 设定好分光光度仪 : 温度 25, 波长 550nm, 时延 5 秒, 间隔 10 秒, 测读 6 次 ( 共 60 秒 ), 并置零或设置 0 秒和 60 秒各测读 1 次二背景对照测定 3. 移取微升 GENMED 缓冲液 (Reagent A) 到新的 1 毫升比色杯 4. 加入微升 GENMED 稀释液 (Reagent C) 5. 放进分光光度仪, 置零 6. 取出比色杯, 加入微升含有 GENMED 反应液 (Reagent B) 和 GENMED 稳定液 (Reagent D) 的 GENMED 反应工作液 7. 上下倾倒数次, 混匀 8. 即刻放进分光光度仪检测, 此为背景空对照 (0 秒读数 -60 秒读数 ), 正常读数差值为至三样品测定 9. 移取微升 GENMED 缓冲液 (Reagent A) 到新的比色杯 10. 加入 100 微升待测样品 ( 注意 : 建议总量 2 微克线粒体蛋白 : 完整线粒体而非裂解形式 ; 参见注意事项 15 和 16) 11. 上下倾倒数次, 混匀 12. 放进分光光度仪, 置零 13. 取出比色杯, 加入微升含有 GENMED 反应液 (Reagent B) 和 GENMED 稳定液 (Reagent D) 的 GENMED 反应工作液 14. 即刻上下倾倒数次, 混匀 ( 限定在 3 秒之内 ) 15. 即刻放进分光光度仪检测, 此为样品读数 (0 秒读数 -60 秒读数 ), 通常活性读数差值为正数 16.( 选择步骤 ) 重复实验步骤 9 至 15, 测读新的样品四计算样品活性方法一 : 按照操作步骤规定 0.1ml 样品读数背景读数 ( 样本容量 ) 21.84( 摩尔吸光系数 ) = 样品活性单位单位 min ml 或微摩尔细胞色素 C min -1 ml 0.002mg 样品读数背景读数 ( 样本容量 ) 21.84( 摩尔吸光系数 ) = 样品活性单位单位 min mg 或微摩尔细胞色素 C min -1 mg 方法二 : 未知待测样品蛋白浓度 2

3 ( 样品读数背景读数 ) 样品稀释倍数 = 样品活性单位单位 min 0.1ml ( 样本容量 ) 21.84( 摩尔吸光系数 ) ml 或微摩尔细胞色素 C min -1 ml 样品活性单位 min ml 样品蛋白浓度 mg ml = 样品活性单位单位 min ml 或微摩尔细胞色素 C min -1 ml 注意事项 1. 本产品为操作, 包括背景对照 2. 操作时, 须戴手套 3. 线粒体样品中忌用 DTT 和巯基乙醇等处理 4. 每增加 1 个样品, 增加 GENMED 反应工作液为 :GENMED 反应液 (Reagent B)50 微升 +GENMED 稳定液 (Reagent D)1.5 微升, 以此类推配制反应工作液时, 须根据样本数量配制实际工作液容量 5. 系统操作过程中, 背景测定只需 1 次 6. 分光光度计波长严格设置在 550nm, 误差 10nm 将不产生信号 7. 加样后 3 秒内进行比色测定 8. 比色测定后, 比色杯须清洗彻底 9. 背景空对照 0 秒读数通常 0.2 至 0.8 为理想状态 10. 背景空对照的正常读数差值 (0 秒 -60 秒 ) 通常为至 0.005( 正负即可 ) 11. 样品 0 秒读数通常和背景空对照 0 秒读数一致 12. 样本测定 60 秒读数低于 0 秒读数表明具有酶活性 13. 样本酶活性单位通常在 0.4 至 40 毫单位 14. 线粒体呼吸链复合物 IV 酶活性单位浓度定义 : 在 25 室温下,pH 7.0 的情况下, 每单位酶在单位时间内 ( 每分钟 ) 氧化 1 微摩尔的细胞色素 C 15. 建议待测样本为线粒体, 则蛋白浓度为 2 微克 /100 微升 ; 如果样本酶活性过低或过高, 即 60 秒读数不变或为零, 则可以增加或降低样本量 ( 本公司提供 GENMED 线粒体溶解试剂盒 GMS10018 为后续的线粒体蛋白浓度测定的预处理试剂盒和 GENMED Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒 GMS ) 16. 如果使用细胞或组织裂解液, 则蛋白浓度为 50 微克 /100 微升 17. 本公司提供系列线粒体研究产品质量标准 1. 本产品经鉴定性能稳定 2. 本产品经鉴定检测敏感使用承诺杰美基因秉着信誉至上客户满意质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定, 保证说明书所述的使用效果在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题, 请立即以书面形式 ( 实验报告 ) 与本公司联系, 并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品如系使用者错误操作所致, 本公司不承担由此造成的损失友情提醒 3

4 IF IT DOESN T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG 订购信息编号名称规格 GMS50010 GENMED 动物线粒体呼吸链复合物 IV 活性定量检测试剂盒 GMS50010A GENMED 缓冲液 (Reagent A) 100 毫升 GMS50010B GENMED 反应液 (Reagent B) 10 毫升 GMS50010C GENMED 稀释液 (Reagent C) 10 毫升 GMS50010D GENMED 稳定液 (Reagent D) 1 毫升 GMS GENMED Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒 100 次产品编号名称规格 GMS 动物细胞 / 组织线粒体粗提分离试剂盒 10/ GMS 动物细胞 / 组织活性线粒体分离试剂盒 10/ GMS 动物细胞 / 组织高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 动物硬组织线粒体粗提分离试剂盒 GMS 动物硬组织活性线粒体分离试剂盒 GMS 动物硬组织高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 纯化线粒体内膜功能 / 膜电位测定试剂盒 100 次 GMS 活体细胞线粒体内膜功能 / 膜电位测定试剂盒 GMS 完全线粒体内膜功能 / 膜电位测定试剂盒 GMS 活体组织线粒体内膜功能 / 膜电位测定试剂盒 10 次 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体内膜功能 / 膜电位测定试剂盒 GMS 线粒体外膜功能检测试剂盒 GMS 纯化线粒体细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒 GMS 细胞 / 组织悬液细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒 GMS 纯化细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒 GMS 真菌 / 酵母细胞悬液细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒 GMS 植物细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒 GMS10015 线粒体功能詹纳斯绿 B(JGB) 染色试剂盒 GMS 细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 100 次 GMS 活体组织氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 8/ GMS 活体组织氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 40/100 次 GMS 冰冻切片氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 冰冻切片氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 GMS 真菌 / 酵母细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 真菌 / 酵母细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 GMS 活体细胞氧化应激活性氧 (ROS) 染色试剂盒 100 次 GMS 冰冻切片氧化应激活性氧 (ROS) 染色试剂盒 100 次 GMS 活体细胞氧化应激活性氧 (ROS) 比色法定量检测试剂盒 100 次 4

5 GMS 细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 红色荧光测定试剂盒 GMS 冰冻切片氧化应激活性氧 (ROS) 红色荧光测定试剂盒 GMS GMS GMS GMS GMS GMS GMS GMS 动物细胞氧化应激活性氧 (ROS) 鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒精子细胞氧化应激活性氧 (ROS) 鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒真菌 / 酵母细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒动物细胞氧化应激活性氧 (ROS) 光泽精化学发光法定量检测试剂盒纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 光泽精化学发光法定量检测试剂盒精子细胞氧化应激活性氧 (ROS) 光泽精化学发光法定量检测试剂盒真菌 / 酵母细胞内氧化应激活性氧 (ROS) 光泽精化学发光法定量检测试剂盒 GMS 纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 GMS 膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 高质荧光测定试剂盒 GMS 膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 GMS 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧 (ROS) 初级荧光测定试剂盒 GMS 活体细胞线粒体损伤 / 氧化 (NAO) 荧光测定试剂盒 20/200 次 GMS 纯化线粒体损伤 / 氧化 (NAO) 荧光测定试剂盒 20/200 次 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体损伤 / 氧化 (NAO) 荧光测定试剂盒 20/200 次 GMS10018 纯化线粒体溶解试剂盒 GMS 活体细胞线粒体形态 / 活性荧光染色试剂盒 100/200 次 GMS 植物组织线粒体形态 / 活性荧光染色试剂盒 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体形态 / 活性荧光染色试剂盒 100 次 GMS 纯化线粒体形态 / 活性荧光染色试剂盒 100 次 GMS 活体细胞线粒体跟踪试剂盒 100 次 GMS 活体细胞线粒体长期跟踪试剂盒 GMS 全血线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ GMS 纯化线粒体 DNA 萃取试剂盒 GMS 细胞 / 组织线粒体 DNA 萃取试剂盒 GMS 细胞 / 组织基因组 / 线粒体 DNA 同步萃取试剂盒 10/ GMS 动物血小板线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ 5

6 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ GMS 通用型植物线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ GMS 高多糖 / 酚植物线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ GMS 动物硬组织线粒体 DNA 萃取试剂盒 10/ GMS10047 非突触体脑组织线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 植物线粒体粗提分离试剂盒 10 次 GMS 植物活性线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 植物高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体粗提分离试剂盒 10 次 GMS 真菌 / 酵母细胞活性线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 真菌 / 酵母细胞高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 细胞 ATP 生物发光法定量检测试剂盒 GMS 组织 ATP 生物发光法定量检测试剂盒 GMS10059 纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒 GMS 动物血小板线粒体粗提分离试剂盒 10 次 GMS 动物血小板活性线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 动物血小板高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 动物全血线粒体粗提分离试剂盒 10 次 GMS 动物全血活性线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 动物全血高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS50001 超氧化物歧化酶 (SOD) 活性检测试剂盒 GMS 线粒体超氧化物歧化酶 (Mn/Fe SOD) 分离试剂盒 GMS50004 超氧化物歧化酶 (SOD) 标准曲线测定试剂盒 5 次 GMS 纯化线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS 细胞 / 组织线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS 真菌 / 酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS 植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS 全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS 动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 GMS50005 NADH 活性定量检测试剂盒 20/80 次 GMS50006 乳酸脱氢酶 (LDH) 总活性定量检测试剂盒 20/80 次 GMS50007 动物线粒体呼吸链复合物 I(NADH- 辅酶 Q 还原酶 ) 活性定量检测试剂盒 GMS50008 动物线粒体呼吸链复合物 II( 琥珀酸 - 辅酶 Q 还原酶 ) 活性定量检测试剂盒 GMS50009 动物线粒体呼吸链复合物 III( 辅酶 Q- 细胞色素 C 还原酶 ) 活性定量检测试剂盒 GMS50010 动物线粒体呼吸链复合物 IV( 正铁细胞色素 C- 氧化还原酶 ) 活性定量检测试剂盒 GMS50083 动物线粒体呼吸链复合物 V(F0F1-ATP 酶 /ATP 合成酶 ) 活性定量检测试剂盒 GMS 海洋动物 ( 虾贝类 ) 线粒体粗提分离试剂盒 10/ GMS 海洋动物 ( 虾贝类 ) 活性线粒体分离试剂盒 10/ 6

7 GMS 海洋动物 ( 虾贝类 ) 高质纯化线粒体分离试剂盒 10 次 GMS 活体细胞线粒体膜通道孔 (MPTP) 荧光检测试剂盒 GMS 纯化线粒体膜通道孔 (MPTP) 荧光检测试剂盒 GMS 纯化线粒体膜通道孔 (MPTP) 比色法检测试剂盒 GMS12198 纯化线粒体冻存液 50 毫升 GMS50067 NADPH 活性定量检测试剂盒 20/80 次 GMS 纯化线粒体 L-3 羟酰基 -CoA 脱氢酶 II 型 /β 淀粉样蛋白结合的乙醇脱氢酶 (HADHII/ABAD) 活性定量检测试剂盒 GMS 细胞 L-3 羟酰基 -CoA 脱氢酶 II 型 /β 淀粉样蛋白结合的乙醇脱氢酶 (HADHII/ABAD) 活性定量检测试剂盒 GMS 组织 L-3 羟酰基 -CoA 脱氢酶 II 型 /β 淀粉样蛋白结合的乙醇脱氢酶 (HADHII/ABAD) 活性定量检测试剂盒 GMS 纯化线粒体 NADH 氧化酶活性定量检测试剂盒 GMS 细胞线粒体 NADH 氧化酶活性定量检测试剂盒 GMS 组织线粒体 NADH 氧化酶活性定量检测试剂盒 GMS 细胞 NADPH 氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒 GMS 组织 NADPH 氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒 GMS 细胞 NADPH 氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 GMS 组织 NADPH 氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 GMS10090 NADP 活性定量检测试剂盒 GMS10097 纯化线粒体呼吸控制率 (RCR) 定量检测试剂盒 GMS10098 纯化线粒体磷氧比 (ADP/O) 定量检测试剂盒 GMS10101 纯化线粒体肿胀比色法测定试剂盒 GMS10102 活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒 GMS 细胞琥珀酸脱氢酶 (SDH) 活性比色法定量检测试剂盒 GMS 组织琥珀酸脱氢酶 (SDH) 活性比色法定量检测试剂盒 GMS 细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒 GMS 组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒 GMS 细胞镁离子浓度比色法定量检测试剂盒 GMS 组织镁离子浓度比色法定量检测试剂盒联系我们关于订购详情或技术支持, 欢迎来电来函传真或电邮 GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A 大中华区上海分公司上海杰美基因医药科技有限公司上海市浦东新区张江高科技园区哈雷路 1011 号 301 室邮编 : 技术部电话 :+86(021) X 101;

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Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度未知 0 ng

Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna