4 CK20 可能在移性上皮表达, 取决于检测系统的灵敏度 5 CK7 在胃粘膜可能阳性 6 CK19 20 可以在一些内分泌细胞, 尤其是皮肤和口腔的 Merkel 细胞和味蕾上皮表达 7 CK7 在甲状腺滤泡阳性表达 8 CK7 可能会在血管内皮细胞, 尤其是小血管表达表中的 CK 家族未包括

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峥康
5 years ago
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1 细胞角蛋白细胞角蛋白 (Cytokeratin, CK) 是病理科免疫组化实验中最常用的一类分子标记物, 主要用于上皮组织以及上皮来源肿瘤的诊断与鉴别鉴别为此, 我们将 NordiQC 网站的相关资料翻译介绍给大家一细胞角蛋白的特性细胞角蛋白属于中间丝蛋白, 分子量分布在 40~68 kda, 根据等电点不同可将其分为 20 种不同的酸性细胞角蛋白 ( 又称 I 型细胞角蛋白 ) 和碱性细胞角蛋白 ( 又称 II 型细胞角蛋白 ) CK9~20 共有 12 个成员属于 I 型 CK,CK1~8 共有 8 个成员属于 II 型 CK 在组装中间丝过程中, 特定的 I 型 CK 通常与特定的 II 型 CK 配对出现, 形成异源二聚体配对的 II 型 CK 的分子量通常比 I 型 CK 的分子量大 7~9kDa 一种细胞中通常可包括 2~10 种不同的 CK 分子几乎所有的上皮都表达 CK 细胞角蛋白是上皮分化的基本分子标记物, 其组成可反映不同的细胞类型和不同的分化状态除 CK3 与 CK12 仅在角膜中表达外, 其它 CK 可表达在多种上皮细胞中在少数非上皮细胞 ( 如 : 肌成纤维细胞蛛网膜细胞平滑肌细胞小血管内皮细胞 ) 中也有 CK 表达多数 CK 阳性的细胞, 中间丝纤维蛋白疏松呈网状分布 ; 而复层鳞状上皮, 纤维排列成密集, 与桥粒相连表一. 角蛋白正常组织中的表达模式细胞类型碱性 (B, II): 酸性 (A, I): 复层鳞状角化上皮, 基底细胞层以上部分上皮非角化上皮中间和表层细胞基底细胞 (++)2 移行上表层细胞 ++ 皮基底和中间细胞 (+)3 ()3 (++)3 (+)4 间皮间皮细胞支气管乳腺涎腺和汗腺前复合上皮列腺子宫宫颈内膜 : 基底和肌上皮细胞腔细胞单层上皮胆管和胰管, 肺泡, 子宫内膜, 肾集合管胃 ( 小凹上皮 ), 小肠和大肠肝细胞, 胰腺泡, 近端肾小管内分泌腺, 神经内分泌细胞 ()6 (+)5 (++)7 ()6 非上皮细胞一些平滑肌细胞, 肌成纤维细胞, 蛛网膜, 一些内皮细胞 + (++)8 ++ : 强阳性表达 ; ++ : 中等强度阳性表达 ; + : 弱阳性表达 ; : 阴性 ; () : 分布限于特定的细胞类型. 注解 : 1 CK17 可能在掌拓增生触觉圆顶上皮和毛囊外根鞘中表达 2 CK19 在粘膜基底细胞表达 3 CK 主要在鳞状上皮的基底细胞层表达

2 4 CK20 可能在移性上皮表达, 取决于检测系统的灵敏度 5 CK7 在胃粘膜可能阳性 6 CK19 20 可以在一些内分泌细胞, 尤其是皮肤和口腔的 Merkel 细胞和味蕾上皮表达 7 CK7 在甲状腺滤泡阳性表达 8 CK7 可能会在血管内皮细胞, 尤其是小血管表达表中的 CK 家族未包括 CK2 CK11 和 CK9( 只存在于手掌和脚掌的角化鳞状上皮 ) CK3 和 CK12( 角膜 ) CK15( 复合上皮复层鳞状上皮的基底层 ),CK6 和 CK16( 主要是非角质化复层鳞状上皮, 毛囊的外根鞘, 病变表皮 ) 1 正常组织 1) 单层上皮 : 所有单层上皮细胞都表达 CK8(52.kDa) 和 CK18(45kDa) 低分子量 CK 仅在肝细胞胰腺细胞大多数内分泌细胞和肾近曲小管细胞表达,CK19(40kDa) 在胃肠道上皮表达,CK7(54kDa) 表达在胰胆管肺泡子宫内膜和肾集合管细胞甲状腺滤泡细胞 CK7 阳性, 但 CK19 阴性 CK20(46 kda) 表达组织谱较窄, 只在肠道和胃小凹上皮表达, 以及皮肤分泌 Merkel 细胞中也有表达 2) 复层上皮 CK 表达主要在有基底细胞或肌上皮细胞的上皮, 如 : 肺泡乳腺唾液腺汗腺与前列腺基底细胞与肌上皮细胞通常表达 CK5(58kDa) CK14(50kDa) 和 CK17(46kDa), 而内分泌性上皮细胞主要表达 CK8 CK18 CK19 和 CK7 胎盘滋养层细胞表达 CK8 和 CK18, 局部也表达复层上皮的 CK 3) 间皮细胞与复层上皮类似, 间皮细胞即可表达 CK8 CK18 CK19 和 CK7, 也可表达 CK5 CK14 和 CK17( 偶见 ) 4) 移行上皮尿路上皮表达独特的 CK 类型, 所有细胞层表达 CK8 CK18 CK19 和 CK7, 在表层伞状细胞 ( 和部分中间细胞 ) 还会特异性的表达 CK20 CK5 和 CK13(54kDa) 可表达在基底层和中间层细胞 5) 鳞状上皮鳞状上皮的基底层细胞主要表达 CK5 和 CK14( 组成 HMWCK 分子 ), 此外, 除皮肤外的基底层细胞可以表达表达 CK19 非角化粘膜上皮的中间层和表层细胞表达 CK4(59kDa) 和 CK13, 而角化鳞状上皮细胞则表达 CK1(68kDa) 和 CK10 (56.5kDa) 在皮肤的某些区域( 如 : 掌趾部皮肤 ) 会表达 CK2e(e : 表皮 65.5 kda) 和 CK9(64kDa), 上颚部表达 CK2p CK6(56kDa) 和 CK16(48kDa) 可在正常非角化鳞状上皮和增生性上皮中表达胸腺中的网状上皮既表达几种鳞状上皮 CK, 也表达单层上皮 CK 6) 非上皮细胞 CK8 和 18 在少部分间叶细胞如某些平滑肌细胞 ( 尤其是血管壁和子宫肌层 ) 肌成纤维细胞蛛网膜细胞淋巴结成纤维网状细胞极少部分内皮细胞以及脐带和胎儿心肌表达某些内皮细胞也可表达 CK7 7)CK 与其它中间丝蛋白共表达一些正常细胞会有 CK 与其它中间丝蛋白共表达的现象, 如 CK 与 vimentin 可共表达在多种中胚层来源的上皮 ( 肾女性生殖道间皮 ) 和甲状腺上皮 ;CK 与 GFAP 可在一些肌上皮细胞共表达 ( 唾液腺汗腺乳腺 );CK 与神经源性中间丝蛋白可在某些神经内分泌性肿瘤中共表达, 但正常的神经内分泌细胞阴性 ;CK 和 Desmin 在某些平滑肌细胞中共表达 8) 非肿瘤性损伤上皮细胞各种类型损伤的上皮细胞有些可出现类似于肿瘤细胞的表达 ( 见下 ) 这种改变可能暗示细胞不成熟的 CK 表达模式,( 例如肝病中肝细胞过度表达 CK7), 有时甚至观察不到形态学的改变 2 肿瘤组织一般而言, 癌组织会表达或者至少部分表达其来源细胞的 CK, 因此 CK 的表达谱特征可反映出上皮来源及其分化状态, 辅助肿瘤的诊断腺癌通常表达 CK8 CK18 CK19 和 CK7( 经常也会出现 ), 在结直肠部位的腺癌表达 CK20,CK7 阴性尿路上皮癌和 Merkel 细胞癌保留了各自正常细胞的 CK 表达特征鳞癌以 CK5 CK6 CK14 CK16 和 CK17 的表达为主通常癌细胞会丢失其来源组织的一种或多种 CK 的表达, 如 : 鳞癌有时 CK13 阴性某些类型的癌转而表达特定的 CK, 如 : 甲状腺癌表达 CK19; 某些会重新表达胚胎期的表型, 如 : 肝细胞癌表达 CK19, 以及鳞癌表达 CK5 还增加表达 CK8 CK18 CK17 和 CK19 所以说 CK 表达复杂性增加是癌组织的特征, 类似变化也发生在增生不良性组织中值得注意的是

3 起源于复层上皮的腺癌 ( 如 : 乳腺癌 ), 可以不表达基底细胞和肌上皮细胞特有的 CK, 而表达肌上皮去分化的表型肿瘤放化疗后,CK 表达模式的变化更为显著非上皮性肿瘤通常 CK 阴性不过一部分间叶源性肿瘤会有 CK 弱或局限阳性表达, 主要是 CK8 CK18 和 CK19, 例如 : 平滑肌瘤横纹肌肉瘤恶黑神经鞘瘤尤文氏肉瘤小细胞癌部分恶性淋巴瘤 ( 大细胞淋巴瘤 ) 上皮样肉瘤脊索瘤和釉质瘤强表达 CK8 CK18 CK19 滑模肉瘤与恶性间皮瘤常表达 CK8 和 18, 在上皮分化区还可能表达高分子量 CK 二细胞角蛋白的应用 CK 是低分化或表型不典型肿瘤分型的不可或缺的标记物 CK 广谱抗体如 AE1/AE3 或 KL1 是鉴别癌与非上皮细胞来源肿瘤的基本指标 CK 广谱抗体在显示微小转移灶或散在的浸润癌细胞尤其有用, 例如 : 在淋巴结和骨髓中判断转移灶 ; 在小细胞癌的诊断, 淋巴上皮和鼻咽癌以及播散性上皮肿瘤 ( 弥漫型胃癌浸润性小叶癌 ) 的鉴别在生殖细胞肿瘤中, 精原细胞瘤和未分化胚胎癌通常不表达 CK, 其它类型 CK 阳性原发性颅内肿瘤中,CK 在脉络丛乳头状瘤 / 癌和一些脑膜瘤 ( 分泌型 ) 中有表达, 神经胶质瘤和原始神经外胚叶肿瘤阴性高分子量 CK5 和 CK13 的表达提示鳞状上皮分化, 可用于低分化非角化鳞状细胞癌的鉴别诊断 CK8 CK18 和 CK19 可在腺癌和鳞癌 ( 鳞癌表达程度不等 ) 表达, 若 CK5 表达而 CK7 不表达或弱表达提示为鳞癌 CK5( 和 CK14) 可在胰胆管腺癌卵巢浆液性癌子宫内膜癌腺鳞癌, 基底样型乳腺癌或者腺肌上皮肿瘤恶性间皮瘤表达肺与乳腺极少表达 CK5, 胃肠腺癌 CK5 阴性 CK5 在基底细胞 / 肌上皮细胞表达, 因此可与 p63 联合使用, 判断乳腺和前列腺病变中的良恶性在尿路上皮癌中,CK13 和 CK20 CK7 共表达是非常有用的特点, 可在原发部位不明时用于尿路上皮癌与前列腺癌非角化性鳞癌的鉴别 CK14 在尿路上皮癌的表达提示鳞状细胞分化预后不良在乳头状尿路上皮肿瘤中,CK20 腔面表达提示肿瘤不易复发, 可用来区分侵润性和非侵润性尿路肿瘤 CK7 阳性 CK20 阴性 : 见于肺腺癌乳腺癌子宫内膜癌甲状腺癌非粘液性卵巢癌恶性间皮瘤 CK7 阴性 CK20 阳性 : 见于结直肠癌 (80%) Merkel 细胞癌 CK7 阳性 CK20 阳性 : 见于尿路上皮癌卵巢粘液性癌胃癌胆管和胰腺癌, 高级别结直肠癌偶见 CK7 阴性 CK20 阴性 : 见于肝细胞癌前列腺癌肾上腺皮质癌肾细胞癌肺小细胞癌和鳞癌但会有表达例外, 如肝癌中出现 CK7 和局部 CK20 的表达 ; 肾上腺皮质癌肺小细胞癌肾细胞癌偶见表达 CK8 和 CK18; 位于核旁点状 CK 染色可在神经分泌性肿瘤如 Merkel 细胞癌类癌垂体腺瘤卵巢颗粒细胞瘤中出现在 Merkel 细胞癌中,CK20 出现核旁点状表达, 可与肺小细胞癌转移灶 (CK20 阴性 ) 鉴别诊断三常用 CK 抗体由于 CK 是病理诊断用基本指标, 实验室应常规备有广谱 CK 和低分子量 CK 常规推荐碱性缓冲液热修复 1 CK 广谱抗体常用的广谱 CK, 主要克隆是 : AE1/AE3(AE1:CK 和 19,AE3:CK18 结合,MNF116 (CK ) 和 KL1(CK ) 按照最佳指南( 采用抗原热修复, 不用酶消化 ) 几个抗体的染色情况几乎一样, 但存在微小差异 : 1)KL1 克隆因对高分子 CK 亲和力相对较低, 对尿路上皮与鳞状上皮来源的肿瘤染色稍浅 ;AE1/AE3 可能因对低分子 CK 亲和力较低, 腺癌染色较弱 2) 若切片采用酶消化,AE1/AE3 对高分子量 CK 染色会较弱,CK8 表达会丢失在固定时间较长的脑组织采用酶消化会与 GFAP 交叉反应 3)MNF116 只有酶消化阳性表达好, 酶消化视组织与固定时间不同而不同, 与 KL1 和 AE1/AE3 相比无优势 2 CK 多亚型抗体克隆 34BE12(CK 以及一个未知的 CK): 通常被用来检测高分子量 CK 由于会与一个未知的 CK 结合, 该抗体也会表达在一些单层上皮 ( 乳腺结肠胆道肾 ) 克隆 D5/16 B4(CK5 6): 临床意义同 CK5 克隆 CAM 5.2 (CK8 7): 酶消化染色结果更佳, 需针对组织及固定时间进行调整热修复会引起敏感性降低同时易出现交叉反应 Cam 5.2 与 CK8/18 的抗体相比无优势

前者在冰冻切片中会与 CK10 液态细胞基质结合, 在 FFPE 组织切片中如果抗体过浓会与淋巴细胞反应 CK14: 克隆 LL002, 通常比 CK5 和 CK5/6 的表达稍弱 CK17: 克隆 E3 国际特设专家委员会推荐常用 CK 的阳性对照 : PanCK A 阑尾: 几乎所有的柱状上皮细胞必须呈现中到强度胞质阳性 ( 可见典型的胞膜堆积型 ) B 肝脏:

4 3 CK 分型特异性抗体低分子量 CK: CK8/18: 克隆 C51 针对 CK8, 克隆 DC10 针对 CK18, 常用于检测腺上皮 CK7: 常用克隆 OVTL 12/30 CK19: 克隆 A53B/A2.26, b170 和 BA17 表现较好, 克隆 RCK108 灵敏度稍欠缺 CK20: 克隆 Ks20.8, 酶修复后在胆道和间皮中会有假阳性染色高分子量 (HMW CKs)CK: CK4: 与克隆 6B10 相比, 克隆 215B8 会与鳞状上皮基底层上的细胞角化细胞反应, 可能因为与一种变性的 CK 交叉反应 CK10: 克隆 DEK10 CK13: 克隆 DEK13 和 KS1A3. 前者在冰冻切片中会与 CK10 液态细胞基质结合, 在 FFPE 组织切片中如果抗体过浓会与淋巴细胞反应 CK14: 克隆 LL002, 通常比 CK5 和 CK5/6 的表达稍弱 CK17: 克隆 E3 国际特设专家委员会推荐常用 CK 的阳性对照 : PanCK A 阑尾: 几乎所有的柱状上皮细胞必须呈现中到强度胞质阳性 ( 可见典型的胞膜堆积型 ) B 肝脏: 绝大多数肝细胞至少显示弱到中等强度胞质阳性且呈胞膜堆积型 (LLOD) C 扁桃体: 所有鳞状上皮细胞必须呈现中至强度胞质阳性,CK+ 的间质网状细胞呈弱到中度胞质阳性 (LLOD) CK8 and/or CK18 低分子量细胞角蛋白 A 阑尾: 所有的柱状上皮细胞必须呈现中到强度胞质阳性 ( 可见典型的胞膜堆积型 ) B 肝脏: 绝大多数肝细胞至少显示弱到中度胞质阳性且呈胞膜堆积型 (LLOD) C 扁桃体: 散在的鳞状上皮细胞呈现中到强度胞质阳性 ( 不同扁桃体的阳性鳞状上皮细胞数量有所不同 ), CK+ 的间质网状细胞呈弱到中度胞质阳性 (LLOD)

CK5 and/or CK14 高分子量细胞角蛋白 A 扁桃体: 几乎全层的所有鳞状上皮细胞必须呈现中至强度胞质阳性 B 胰腺:

大多数底层陷窝上皮细胞至少呈现弱的胞质阳性 (LLOD) B 肝脏: 必须阴性 C 扁桃体: 必须阴性 CK7 A 肝脏: 几乎所有胆管上皮细胞必须呈现中到强度胞质阳性 B

(CK5 和 / 或 CK14) 和腺上皮 (CK8 和 / 或 CK18) 必须检测食道和肝脏的组合是最佳组合, 非角化鳞状上皮全层都必须强阳性表达,

5 CK5 and/or CK14 高分子量细胞角蛋白 A 扁桃体: 几乎全层的所有鳞状上皮细胞必须呈现中至强度胞质阳性 B 胰腺: 闰管内分散的柱状上皮细胞必须呈现弱到中度胞膜优势型染色 (LLOD) C 肝脏: 必须阴性 CK20 A 阑尾 : 几乎所有表面上皮细胞必须呈中到强度胞质阳性, 大多数底层陷窝上皮细胞至少呈现弱的胞质阳性 (LLOD) B 肝脏: 必须阴性 C 扁桃体: 必须阴性 CK7 A 肝脏: 几乎所有胆管上皮细胞必须呈现中到强度胞质阳性 B 胰腺: 几乎所有闰管上皮细胞必须呈现弱到中度胞质阳性 (LLOD) C 阑尾: 一般均为阴性, 散在的柱状上皮细胞和内皮细胞可呈现弱到中度胞质阳性广谱 CK: 鳞状上皮 (CK5 和 / 或 CK14) 和腺上皮 (CK8 和 / 或 CK18) 必须检测食道和肝脏的组合是最佳组合, 非角化鳞状上皮全层都必须强阳性表达, 而大部分的肝细胞至少中等强度膜堆积型染色 LMW CKs(CK8 和 / 或 CK18): 首选组织肝脏, 大多数肝细胞应至少中等强度膜染色 HMW CK(CK5 和 / 或 CK14): 首选组织食道, 鳞状上皮全层强阳性表达

6 CK7: 首选组织肝脏和胰腺, 肝脏的胆管细胞必须强阳性表达, 同时肝细胞阴性 ; 胰腺的闰管强阳性表达, 腺泡细胞阴性 CK20: 首选组织阑尾 / 结肠 / 直肠, 大多数超过 50% 的的陷窝肠上皮细胞必须强阳性 CK19: 首选组织阑尾 / 结肠 / 直肠, 几乎所有腔面的腺上皮细胞胞质强阳性表达, 陷窝底层细胞弱至中等强度阳性表达

NordiQC 小册子0122

NordiQC 小册子0122 ALK 具有 ALK 重排的肺腺癌, 阑尾可以作为有价值的补充性阳性照组织 AMACR/P504S ZM-0248 推荐经 FISH 检测具有 ALK 重排的非小细胞肺癌和阑尾作为阳性照, 推荐经 FISH 检测不具有 ALK 重排的非小细胞肺癌和作为阴性照肺腺癌由于 ALK 重排的蛋白表达水平较低呈现弱至中等强度的细胞质染色 ; 阑尾的神经节细胞必须呈现弱至强的细胞质颗粒状染色阴性鼠单抗 OTI1A4