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馔偃王慎
5 years ago
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1 第卷第期年月西安交通大学学报医学版!"#$## %&'& & 哮喘毛细支气管炎患儿外周血和水平及意义张艳丽王秀芳雷瑞瑞栾斌刘莹宋丽郑州大学第三附属医院儿内科河南郑州 ## 摘要目的探讨哮喘毛细支气管炎简称毛支患儿髓系抑制细胞 $%&' 占外周单个核细胞比例血清白介素及白介素的水平及意义方法以正常健康儿童及肺炎组为对照应用流式细胞仪检测哮喘急性发作组缓解组及毛支组特应质组毛支组非特应质组外周血 $%&' 占外周单个核细胞的比例 $%&' 用 &( 法检测各组儿童血清水平结果哮喘发作组较哮喘缓解组肺炎组及正常对照组外周血 $%&' 血清升高降低 # 毛支组较毛支组肺炎组及正常对照组外周血 $%&' 升高降低 # 哮喘发作组与毛支组相比外周血 $%&' 无明显差异 # 相关性分析哮喘发作组及毛支组 $%&' 占外周血单核细胞的比例和血清水平存在正相关与血清水平呈负相关结论 $%&' 可能通过上调下调水平在毛细支气管炎发展为哮喘的过程中起重要作用有望成为毛支筛选为哮喘的指标关键词哮喘毛细支气管炎髓系抑制细胞白介素白介素儿童中图分类号 )#* 文献标志码 ( 文章编号 *+#,##!"##$!%#!&!#'"&#$!# ''!'""$"&!$'#!""#!"!! -.(/0 1(/0!2)!3!4(/5 4 12&6/0 %"37"89"3":3(".88 -"2;8!4 "3-"2;8!##' ()( ## """ #!$( ) *+") *+#",-#""" -##&.",# /##!$( -"###",#)#","-# # -# #,#"," #","#&##*+"*+",/"- 0+*$1& ##!$("*+#",#),# #","#"," # &#&,## *+#",#),#, #", " #", " # &#& ##!$("*+#",-#,# -# " # &#,##*+,#,#"-# -# " #&#& ##!$(*+"*+"",# "#-,#",#)"-#*&#&( ##!$(#",#)"-#*, #", ##*+- #",##*+&!$( 收稿日期 + 修回日期基金项目河南省卫生厅科技攻关项目 '&* $"- $#####'&* 作者简介张艳丽,* 女汉族硕士研究生主治医师 & 研究方向小儿呼吸系统疾病的基础与临床研究 &0#*,&# ////&"&# 网络出版时间 #, 网络出版地址,,,&#)&)#"*&,,&&#&,&&!"!

2 # 西安交通大学学报医学版第卷 -#- ##*+" ",##*+& #"#-# " & *+, -.) -# """#))#" 支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病严重危害儿童的身心健康其发病机制尚不十分清楚但细胞因子在该炎症中所起的重要作用已受到国内外学者越来越多的关注毛细支气管炎是主要由呼吸道合胞病毒 3"3833!)& 感染引起的以喘息为主要表现的下呼吸道疾病主要见于岁以下婴幼儿病毒感染后机体可出现一系列免疫激活和气道局部炎症反应这些反应可能影响气道的多种病理变化包括气道狭窄黏液分泌增加和支气管痉挛最终可能引起气道阻塞流行病学研究证实毛细支气管炎和哮喘存在密切关系但是毛细支气管炎后哮喘的发病机制尚不清楚且至今仍无确定指标用于将这些哮喘倾向的毛细支气管炎患儿筛选出来近年来白介素 "3"! 和白介素作为 : 辅助淋巴细胞分泌的重要细胞因子在哮喘发病中的作用越来越受到重视另外国外对哮喘动物模型的研究表明免疫细胞与哮喘相关但其机制尚不明确髓系抑制性细胞 7"8"3"! 3"83"$%&' 起源于骨髓具有 '%'% 标志的抑制性细胞在重症感染肿瘤急慢性炎症等疾病中明显增多并且负向调节机体的免疫功能关于 $%&' 与儿童哮喘及毛细支气管炎之间的关系国内外尚无报道本研究以正常健康儿童及肺炎组为对照通过检测哮喘发作组缓解组毛支组及毛支组患儿外周血 $%&' 占外周单个核细胞的比例和血清和的水平及其相关性探讨 $% &' 在哮喘及毛细支气管炎中的发病机制对象与方法研究对象选择年月至年 * 月就诊于郑州大学三附院儿内科门诊或住院治疗的急性发作期哮喘患儿例入选哮喘发作组男例女 # 例年龄, 个月岁平均年龄岁个月例哮喘缓解期患儿入选哮喘缓解组男例女例年龄个月岁平均年龄是岁个月发作组与缓解组哮喘患儿诊断均参照全球哮喘防治 # 创议中哮喘诊断标准毛细支气管炎患儿 #, 例男例女 + 例年龄 * 个月岁平均年龄岁, 个月患儿自身有变应性疾病包括湿疹变应性皮炎变应性鼻炎食物过敏或父母一方有哮喘病史者为特应质高危因素具有高危因素之一的患儿为毛支组 + 男 # 例女例而无高危因素的患儿为毛支组男 * 例女 # 例同期随机选取本院同年龄组外科患疝气肾结石等非感染性疾病术前患儿 # 例男例女 # 例年龄个月岁个月平均年龄岁个月同时选择 * 例同期在我院在门诊就诊或住院诊断为肺炎的患儿入选肺炎对照组其中男例女 * 例年龄, 个月岁个月平均岁 + 个月均无特应质高危因素入组儿童均为足月出生近周无感染疾病史无激素使用史及无其他免疫调节剂使用史各组年龄性别比较差异均无统计学意义 # 其家长均知情同意并征得医院伦理委员会同意主要试剂人人 &( 检测试剂盒美国 )<% 公司藻红蛋白 9 标记的 '% 藻蓝蛋白 (9' 标记的 '%5% 公司 / 方法 / 含量的检测抗人单抗包被于酶标板上标本标准品中的会与单抗结合游离的成分被洗去同时加入生物素化的抗人和辣根过氧化酶标记的亲和素生物素与亲和素特异性结合抗人抗体与结合在单抗上人结合形成免疫复合物游离成分被洗去加入显色剂若反应孔中有辣根过氧化酶会使无色的显色剂呈蓝色加终止液变黄在 # 7 处测值浓度与 # 值之间呈正比可通过绘制标准曲线求出的浓度 /$%&' 检测取抗凝血加入上机管中避光条件下分别加入 '%'% 抗体各震荡混匀管底部插入冰中避光孵育 7 然后取出加入红细胞裂解液 7 震荡后避光裂解 #7 #37 离心 #7 弃上清加入 95& 液 7 如此反复离心次后弃上清加入 2 多聚甲醛震荡混匀固定后上流式细胞仪检测 $%&' 在外周血中单个核细胞比例分析采用 ' =!" 软件用 >&'&&' 设门画出有核细胞群 ) 以去除死细胞及细胞碎片二维点图显示 ) 内细胞右上显示 '%'% 二维点图!"!

期张艳丽王秀芳雷瑞瑞等哮喘毛细支气管炎患儿外周血 $%&' 和水平及意义 ## 0 统计学处理采用 &9&& 统计软件完成数据以均数? 标准差?

作为显著性差异的检验水准结果 1 各组患儿外周血占单个核细胞的比例及血清含量的比较哮喘发作组毛支组与哮喘缓解组毛支组肺炎组正常组比较哮喘缓解组与毛支组肺炎组正常组比较

哮喘发作组患儿外周血 $%&' 与呈正相关 + 与呈负相关 @, 毛支组患儿外周血 $%&' 与呈正相关 + 与呈负相关 @ 而哮喘缓解组毛支组肺炎组正常组均无相关性图图

( 正常组 5 毛支组 ' 哮喘发作组 % 肺炎组毛支组 > 哮喘缓解组表各组外周血占单个核细胞比例血清含量的比较 :'8738 8"38838 8"3"388 $%&' 2"!"!"""3!

3 期张艳丽王秀芳雷瑞瑞等哮喘毛细支气管炎患儿外周血 $%&' 和水平及意义 ## 0 统计学处理采用 &9&& 统计软件完成数据以均数? 标准差? 表示各组数据均进行了正态性检验均符合正态性分布多组间的比较进行方差齐性检验后采用单因素方差分析两两比较进行 &% 检验相关分析采用 9"38 直线相关分析以 # 作为显著性差异的检验水准结果 1 各组患儿外周血占单个核细胞的比例及血清含量的比较哮喘发作组毛支组与哮喘缓解组毛支组肺炎组正常组比较哮喘缓解组与毛支组肺炎组正常组比较毛支组与肺炎组正常组比较外周血 $%&' 占单个核细胞的比例血清水平均显著增高血清水平均显著降低 # 图表 1 外周血占单个核细胞比例与血清含量的相关性分析哮喘发作组患儿外周血 $%&' 与呈正相关 + 与毛支组患儿外周血 $%&' 与呈正相关 + 与而哮喘缓解组毛支组肺炎组正常组均无相关性图图各组外周血的比例 >2:"!7!8 8"3"388 $%&' "238! ( 正常组 5 毛支组 ' 哮喘发作组 % 肺炎组毛支组 > 哮喘缓解组表各组外周血占单个核细胞比例血清含量的比较 :'8738 8" "3"388 $%&' 2"!"!"""3!7""? 组别例数 $%&' 哮喘发作组 +?, *#?,+ #?+# 哮喘缓解组? #,?* #+#?, 毛支组 +? ++?,?,* 毛支组 #?+ +#? ##?* 肺炎组 * #+?? #*,?* 正常组 +?# *?+ *?# 与哮喘缓解组毛支组肺炎组正常组比较 # 与毛支组肺炎组正常组比较 # 与肺炎组正常组比较 # 各组比较 $%&' 的值分别为 #+,,* 均 / 讨论 # 岁以下儿童哮喘的确诊很困难喘息症状普遍存在于非哮喘婴幼患儿流行病学资料已证实 )& 感染性毛支是婴幼儿发展成为支气管哮喘的高危因素毛细支气管炎后反复喘息特别具有特应性体质或哮喘鼻炎家族史的婴幼儿称为高危哮喘儿因此如何从毛细支气管炎开始防治其后哮喘的发生已成为世界范围的研究热点之一 $%&' 是一类具有免疫调节功能的免疫细胞亚!"!

4 #* 西安交通大学学报医学版第卷图外周血占单个核细胞比例与血清水平的相关性 >2'833"8 8" "3"388 $%&' 2"!"!""3!7"" 群近期研究证实 $%&' 通过高表达 ()0 和 /6& 耗竭精氨酸最终抑制 : 细胞同时耗竭精氨酸产生的 /6 能抑制 $.' 的表达和介导 : * 细胞凋亡产生的 /6 可以扩张血管促进炎症细胞渗出及炎症介质释放研究发现 /6 血浆浓度与哮喘严重程度呈正相关 $%&' 营造低精氨酸浓度的内环境使 /6& 转以合成活性氧族分子 )6& 而 )6& 可集聚和激活免疫效应细胞促使释放各种细胞因子导致呼吸道平滑肌痉挛收缩引起哮 + 喘发作 %&.(/ 等通过对致敏小鼠的研究证实 $%&' 通过产生氧自由基对肺部炎症和气道高反应性起重要的介导作用因此提示 $%&' 从不同路径参与哮喘的发病本研究结果显示哮喘发作组哮喘缓解组较肺炎组正常组 $%&' 在外周单个核细胞比例显著升高提示 $%&' 参与哮喘炎症反应本研究还发现毛支组较肺炎组正常组 $% &' 在外周单个核细胞比例显著升高提示 $%&' 参与以 )& 感染为主的毛细支气管炎发病研究已证实在多种微生物为致病菌的败血症中 $%&' 比例显著增加并引起 : 细胞功能抑制产生 : 为主, 的免疫应答倾向造成免疫应答能力低下这与哮喘毛细支气管炎的发病机制相似本研究将毛支患儿分为特应质高危因素组毛支组非特应质高危因素组毛支组特应质是预测哮喘的一项重要指标推测具有特应质毛细支气管炎患儿与哮喘发病机制相似本研究发现特应质毛支组 $%&' 升高与哮喘发作期无明显差异提示外周血 $%&' 水平升高是哮喘及毛支组特异性的因此可以推测毛细支气管炎患儿外周血中 $%&' 比例较高患儿可能发展为哮喘的可能性大目前哮喘发作时的表达情况存在争议国内李敏等研究发现哮喘发作期低表达而骆亚丽等的研究结果则相反国外学者 0)&& 等研究表明病毒感染诱发的哮喘呈高表达状态推测在哮喘中的表达水平可能与诱发哮喘的病因不同相关一般病毒感染诱发的哮喘发作呈高表达状态而 /(0()(A 等的研究表明能抑制 : 细胞因子的产生和嗜酸性粒细胞的浸润从而抑 # 制哮喘发作 /(5 等研究发现在哮喘发 * 病中起免疫抑制作用 6&9B/C6( 等研究!"!

5 期张艳丽王秀芳雷瑞瑞等哮喘毛细支气管炎患儿外周血 $%&' 和水平及意义 # 表明水平下降和 >/ 水平升高导致了重症哮喘的发作本研究中毛支组及哮喘发作组较其他各组血清水平均升高这可能与各组病原学检测多为呼吸道合胞病毒感染诱发相关提示水平在毛支炎症后哮喘发病中起重要作用在哮喘发病中亦起重要作用并且其基因多态 + 性与哮喘发病的危险指数相关周洋等研究发现动态测定水平是判断支气管哮喘病情变化的有益指标本研究结果显示哮喘发作组毛支组较其他各组血清水平相比显著降低提示在毛支炎症后哮喘发生中起重要作用 C6, &(C(( 等研究表明细胞因子在 $%&' 的产生和调节方面起重要作用能够诱导 $%&' 产生活性氧簇 )6& )6& 由 /(%9. 氧化酶催化产生 )6& 介导 $%&' 对 : 细胞的抑制作用研究已经证实 $%&' 能够通过 : 细胞向 :. 反应偏离而干扰肿瘤患者体内的免疫反应主要通过下调巨噬细胞产生 :. 细胞因子而产生 :. 细胞因子而巨噬细胞通过促进 $%&' 产生放大上述效应同时 $%&' 能分泌参与炎症反应而且 (32 轴参与肺部 $%&' 对 : 细胞的抑制作用 C(6 等发现 $%&' 通过下调巨噬细胞分泌的水平发挥抑制作用因此 $%&' 是通过相互作用发挥炎症反应本研究发现哮喘毛支组中升高较正常组肺炎组下降且哮喘发作组及毛支组 $%&' 在外周血单核细胞中的比例与血清水平呈正相关与血清水平呈负相关哮喘发作组毛支组肺炎对照组及正常对照组 $%&' 与均无相关性因此推测 $% &' 和巨噬细胞的相互作用引起的的升高和降低促进毛细支气管炎后哮喘炎症反应和气道重塑参与哮喘慢性炎症的发展综上对于毛细支气管炎患儿干预治疗存在困难具有特应质的毛细支气管炎患儿体内炎症变化与哮喘相似因此具有向哮喘转化的趋势本研究为早期干预提供了新的思路 $%&' 可能成为哮喘治疗的新靶点但 $%&' 在毛细支气管炎哮喘发病过程中更确切的机制及治疗应用尚待进一步研究参考文献 233'0' 0+!*'0'!11$$*+1!& #-## &0,*+& +*0'455 6&#)#"# " #-##" #-)"#- )#-",7## )&# +#*,& $(30 '.!10!& "" "&1 **#,#,& $*'1(+0!0'$%27'$2&()-, """#" #-," &*,,,+& ## 岁以下儿童哮喘诊断和管理全球策略全球哮喘防治创议, 年版 & 实用儿科临床杂志 #*+++& *417*+3%*( *'1411$&! """ # &'*,,*& 罗春玲邹晨容 & 哮喘患者血浆一氧化氮变化的临床意义 & 中国医学创新,#*& +0$1'08!*0.$2*.+0&5" #"# """ # # "", &$#!#*###+ &,(0'( '3!20++6$(!*1 2!& 1"# """# "&!!" +,& 3+4$*(2+1' 73$(3 1&# ##1# " &1"*,#& 李敏宋丽张建波等 & 哮喘患儿 ( (# 调节性细胞及 *+ 和 45 的变化 & 中国当代儿科杂志, +,+& 骆亚丽季伟季正华等 & 人偏肺病毒与呼吸道合胞病毒感染患儿外周血细胞因子变化及意义 & 江苏医药 & 4*$$0++%3.0++$150' &* )#"#"&1 ((!"#,& '1411$$(! 14(3 *&!# ##"#"- """#& *+***& #'170*203 13$ & "#")"#"- ( #, " & 0#*#*& *3$0+'*23%1 23'*$(0%1 1*!18*'1 $1&0"# ),-#&8!)-0 "*-#& (0' +*1'4.413+&1# #" ) *+1"7, ( &* ***& + 周洋张涵马经平等 & 哮喘患者血清和支气管肺泡灌洗液中白细胞介素水平检测及意义 & 临床荟萃 *,,,& 下转第 ## 页!"!

6 ## 西安交通大学学报医学版第卷癌临床诊断的一个指标当然肺癌的发生发展是多种因素介导的复杂过程涉及多种细胞因子的共同参与其确切机制尚有待进一步研究参考文献 07$ $06!1( %+*!1' $!&+## &'0!"+#,*+& 0*8 80'4$&" # ) #", " #### & *,##& +0'*42 8*!!0!1''.30'(21$(& +#/ ", # "## & #**+& 樊素珍苑中甫 & 宫颈癌组织中 11 和 2* 蛋白的表达 & 郑州大学学报医学版 #++& #0$3$*3*0'80+ (1*71*0(0!& #("## ###&*+#**+#& *.*+0'80$ 41*+&*## -"####"# #, ) (# &1 #*& 1%0$!$13 71*++6!&# " #- &0!73*#,+*+*& +81'4 8*681'4&0 **### &( 3#####&,613 81'4 8*13 8&*"# #"##,""##" ##"# &+ (#,*# +& 杨谨程婷婷王丽娜等 & 肾透明细胞癌中 1** 的表达及其临床意义 & 细胞与分子免疫学杂志 +#,*& 2*$'0$(!1'' $*%0+60&(# ##" #"# #,** "" & 7(+##+##& %1'430'03442*21&5# ( #%#"%* # $ # & 0!73++& $0!3% 1!30'3!3'*((0'23 1&! #"$"# #,**"##" &7(#+++&!1*.1*$!1'!$+31'0 75&(## # 7** &7#-1##& #+* 91' 81 2&$-# " ###,#&,#,& *160$ '$ *3*($ '&-# -# " # " +-#)1#$,, ####& 编辑卓选鹏上接第 # 页!0!1 '$1*3!$.1 &,23$121$1!1(*7 01$*!1!&*+ """##" ##)"#" ##-!"!### "#, &* &+)#7++#*& - *++& 131!30$+3*$$72 '6 1( 21'050$80$80'!*0$*12& ""!./$0&+! ++"#"(- # #)3$" 45+ "# '3"###," ## &!#*,##"&3# & +,,*& (0*$0'$0*'$& 76$+70$(*' 110$4&# """## &( #"##- 3#,& ## #" "##"" 编辑卓选鹏 #&*#*,#*&!"!