连接 HPLC 到 同位素比质谱仪... Thermo Scientific LC IsoLink 是世界上第一个连接 HPLC 的同位素比质谱仪, 可重复准确的进行 13 C / 12 C 同位素比的在线测定 从 HPLC 色谱柱上洗脱的所有有机化合物, 能在高色谱分辨率下进行测定, 开拓了同位素

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1 Thermo Scientific LC IsoLink 连接 HPLC 到同位素比质谱仪

2 连接 HPLC 到 同位素比质谱仪... Thermo Scientific LC IsoLink 是世界上第一个连接 HPLC 的同位素比质谱仪, 可重复准确的进行 13 C / 12 C 同位素比的在线测定 从 HPLC 色谱柱上洗脱的所有有机化合物, 能在高色谱分辨率下进行测定, 开拓了同位素比质谱崭新的应用领域 LC IsoLink 的特性 在线联接 HPLC 和同位素比质谱仪 同位素比数据与 HPLC 流出完全匹配 保证色谱分辨率的完整性 低至 nmole 级的样品分析 准确和重现的结果 参考物质直接进样 免维护操作 高通量 完全自动化 2

3 碳水化合物 - 糖类是生命体中最大和最常见的分子之一 它们作为能量源,DNA 和 RNA 的脊柱, 生物活性物的载体和植物中的结构材料 糖类能够携带它们的来源和处理的信息 如果同位素标记, 它们能够告诉我们它们的途径和用途 因为生产的医药品在不同的地方有不同的价格和不同的分子式, 对于生产者和消费者双方能够辨别原始和专属的出处是最基本的 阿司匹林和扑热息痛是典型的具有广泛出处和价格的大众型药品 蔗糖 葡萄糖半乳糖果糖 甘露醇 山梨 ( 糖 ) 醇 扑热息痛 阿司匹林, 乙酰水杨酸 糖在阳离子交换柱上 药物被包裹在反相 C18 柱上 广泛的应用 Thermo Scientific LC IsoLink 用于极性和热不稳定化合物的直接分析 大多数的这类化合物 ( 如氨基酸 肽类 糖类 核苷 醇类 有机酸 磺胺药等等许多 ) 可以在离子交换 空间排阻或反相 HPLC 色谱柱上使用无机缓冲盐的水相溶液, 从而被分离 LC IsoLink 能够在线高精度测定每一个分离组分的 13 C / 12 C 同位素比 代谢研究 - 氨基酸 脂类 醣类化合物的示踪实验 - DNA 合成率评价的核苷分析 食品和食品成分 - 蜂蜜和果汁的掺假控制 - 香料和营养物质的溯源 - 磷脂 糖类 氨基酸和维生素的分析 制药 - 药品的有效控制 - 药剂和添加剂的调查 兴奋剂控制 - 类固醇和激素的分析 生物地球化学 - 沉积物和土壤中生物分子的历史 3

4 氨基酸和肽是组成蛋白质的基本单元 它们的结构和新陈代 谢是医学和生物学最感兴趣的 任一天然同位素发生差异或实 验标记都可以被用作洞察它们的途径 考古学的骨胶原 使用生物组织稳定同位素比值进行远古食物的重建是古代食物 研究的一个重要方面, 它提供了考古科学定量理解人们在过去 消耗了什么的依据 食物的同位素研究是基于 你吃什么就显示什么 的原理, 并且胶原质 - 很好地保存在骨骼上的蛋白质 - 绝大多数已经用于这些目的 不同的氨基酸的同位素信号可以不同并且互相差别很大 更多食物的信息在不同的氨基酸水 二肽, 缩二氨酸 平上是潜在的利用对象 多达 18 个氨基酸可以在一个 HPLC 柱上得到分离 色氨基酸 四肽 短肽和氨基酸被包裹在反相 C18 柱上 irm-lc/ms 考古学的骨胶原水解物的色谱图 全新的 HPLC 连接同位素质谱仪概念 今天以前, 有机样品 13 C / 12 C 同位素比分析仅限于在线的 GC 分离, 然后进行燃烧转化 ( 同位素比监测 GC/MS irm - GC/ MS ) 或在有机元素分析仪中整体样品燃烧转化 但生物或药物中的重要化合物大多数是不挥发或热不稳定的, 因此不能用气相色谱法分离, 在实际分析应用中 特别是测定复杂基质中化合物的 13 C / 12 C 同位素比, 既不可能又非常地费时费事 现在, 专利的 LC IsoLink* 已经克服了这个防止 LC / MS 同位素比成功检测的障碍, 该障碍是, 在祛除水相过程之前定量无分馏地将样品氧化转化成 CO 2 在 LC IsoLink 中, 水相不是在样品氧化前祛除而是样品被氧化时仍在水溶液中, 而且仅仅 CO 2 从液相中被分离出来进行同位 氧化试剂由两种溶液组成, 氧化剂和催化剂 两种溶液被分别用泵加入到 LC 流动相中 所有从 HPLC 柱上流脱的有机化合物单体和氧化剂混合, 并在一个加热反应器中被定量氧化成 CO 2 在后面的去气单元中, CO 2 被从液相中移走并进入氦气流中 氦气流中的单个 CO 2 峰随后被在线干燥器 (Naflon ) 干燥, 然后经过开口分流接口进入同位素比质谱仪 由于液相是完全不挥发的, 无机缓冲液如磷酸盐缓冲液在接口的工作中完全没有影响, 并且不会积累在系统的任何地方 这与其它类型的 LC / MS 接口形成鲜明对比, 并使 LC IsoLink 在本质上是免维护的 素分析 LC IsoLink 检测的这个过程是可定量和无分馏的 * GB B, US B2 4

5 RNA 核苷 : 基于探测 排序和类别鉴定的核糖体 RNA(rRNA) 和基因编码 (rdna) 的分子生物学方法可以进行天然微生物群落的描述而不用隔离和种群筛选 rrna 种群的碳 有机酸在植物的代谢中扮演一个重要的角色 它们包括代谢途径的各种合成代谢和分解代谢过程, 如柠檬酸 [ 三羟酸 ] 循环, 或克雷普斯循环 同位素特性可与碳源相关 m/z 44 (mv) 酒石酸 苹果酸, 羟基丁二酸 乳酸 柠檬酸 琥珀酸, 丁二酸 Time (s) 氢氧化钠碱水解 E. coli RNA, LB-grown 的 irm-lc/ms 分析 有机酸混合物的 irm-lc/ms 色谱图 (m/z 44 示踪 ) HPLC 连接同位素质谱仪的原理 液体自动进样器 进样口 HPLC 色谱柱 H 2 O+C n H x O y 双头泵 氧化反应器 C n H x O CO 2 T=99.9 He+H 2 O CO 2 分离单元 He+CO 2 He 废液 ( 流动相 ) 去水 参考气 泵 HPLC 氧化剂 酸 / 催化剂 He 同位素比质谱仪 开口分流 He+CO 2 5

6 天竺葵草精的分析 有机酸同位素信号的变化在植物的 苹果酸, 羟基丁二酸 个体进程中被研究 研究对于了解 植物代谢发展和估计环境因素的影 柠檬酸 响是非常重要的 在天竺葵草精中 占优势的有机酸是苹果酸和柠檬酸 苹果酸是同位素比较柠檬酸重的酸 有机酸的植物代谢研究 Isodat 软件套装 Irm-LC / MS 系统是完全由 Isodat 软件套装控制 Thermo Scientific Surveyor LC 是完全无缝结合的, 其它 HPLC 系统通过同步触发也可使用 LC IsoLink 和质谱仪是完全计算机控制, 因此分析结果没有使用者的干预 当连接上自动进样器, 系统可以无人操作完成样品高通量和重复的工作 除了添加试剂外,irm - LC/MS 在操作过程中无需手动干涉 Isodat 软件套装的数据评估和报告打印完全自动化 由于接口仅有很少变数, 如氧化剂流速和氦气流速, 方法的开发和操作也极为简单 无论是对 IRMS 部分还是 LC IsoLink 部分, 都有简单 快捷的方法编辑和程序设置 样品的准备和数据的采集所需的任何接口的功能都是全自动化控制的 自动峰检出和本底确认 同重异质分子离子 ( 比如 12 C 17 O 16 O 对 13 C 16 O 16 O) 的完全自动修正 所有原始数据和过程数据完全存取 解析后的数据可以以用户定义的格式输出到 Excel, 或其它电子数据表和数据库 (LIMS) 用户化的打印输出和数据输出 具有网络兼容性, 可以直接 快速地利用 Windows 的各项功能 完全使用 Isodat 软件套装的处理程序, 可以在几分钟以内完成 Isodat 软件系统的备份和重装基于独特的 即插即测 的新一代同位素比质谱仪概念 (Thermo Scientific DELTA V Advantage,Thermo Scientific DELTA Plus 和 MAT 253),LC IsoLink 是马上可以认识和操作的 6

7 合成睾丸激素的确认合成睾丸激素的管理是用 GC / MS 测定尿液中的睾丸激素 / 表睾 ( 甾 ) 酮比实现的 而确认由 irm - GC / MS 实行 合成睾丸激素的 13 C / 12 C 比与内源的睾丸激素的 13 C / 12 C 比不同 LC IsoLink 的应用范围由于高温 HPLC 而得到扩展 在高温下, 水的性质象弱极性的有机溶剂 因此, 它有分离中极性甚至非极性分析物的能力 类固醇可以在 100% 水 溶剂 本胆烷醇酮, 还原尿睾酮雄甾酮 相条件下分离, 选择性可通过温度调节 尿中类固醇的分析 (LC 部分 ), 高温 HPLC 连接同位素质谱仪 7

8 全球化服务和支持的实验室解决方案 我们专家的服务会伴随您的仪器由始至终 作为分析仪器行业中的先锋,Thermo Scientific 在全球领域开展技术支持工作相应的工程师均为实验室内的技术和应用专家, 并受过 Thermo Scientific 的专业培训和认证 我们的专家团队可以为您提供各种服务, 包括安装 培训和技术支持以完善您的资源调配并提供法规制度的咨询 通过我们的产品技术支持服务为您提高效率同时降低仪器消耗 在降低由于不可控的计划外维护和维修所造成的消耗费用同时, 保证仪器有最长的运行时间 在系统需要升级时, Thermo Scientific 会根据您的应用需要为您提供认证部件及系列的配件和消耗品 若想了解更多的产品及综合服务信息, 请访问我们的网站 : 验收指标 仪器安装以后,LC IsoLink 的性能将通过直接定量管进样显示, δ 13 C(n=5) 的外精度 < 0.3 需要无有机相污染的 HPLC 泵 安装要求 顶视图, 尺寸为 mm 电源 230 V 单相,8 A 气体 He, 好于 % CO2, 好于 % 消耗品 水 (HPLC 级 ) 氧化试剂 催化剂推荐 Thermo Scientific SurveyorHPLC 系统包括 MS 泵 使用 Thermo Fisher Scientific 色谱柱 文献 1)R.J. Caimi and J.T. Brenna,1993, Anal. Chem., 65, )W.A. Brand and P. Dobberstein,1996, Isotopes Environ. HealthStud. 1996, 32, )B.L. Osborne and F. P. Abramson, 43rd ASMS Conference, Atlanta, USA, 1991, , 875 Analytical data is available in the Finnigan LC IsoLink Application Notes. 赛默飞官方微信 赛默飞官方网站 赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司 上海 ( 中国总部 ) 上海浦东新金桥路 27 号 7 号楼 北京北京市安定门东大街 28 号雍和大厦西楼 7 层 广州广州东风中路 号时代地产中心 , 成都成都市武侯区临江西路 1 号锦江国际大厦 1406 沈阳沈阳市沈河区惠工街 10 号卓越大厦 3109 室 香港香港新界沙田, 沙田乡事会路 138 号新城市中央广场第一座九楼 室 武汉武汉东湖高新技术开发区高新大道 858 号 A7 楼 全国服务热线 : ( 支持手机用户 ) BR31024CN1407YX_TCPrecisio

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