细胞生物学杂志 Chinese Joumal of Cell Biology 2006, 28: 摘要昆虫的 NF-1CB 信号通路卢新民叶恭银 * ( 浙江大学应用昆虫研究所, 杭州 ) 昆虫 NF-K:B 信号通路由 ω11

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陆武谭
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1 细胞生物学杂志 Chinese Joumal of Cell Biology 2006, 28: 摘要昆虫的 NF-1CB 信号通路卢新民叶恭银 * ( 浙江大学应用昆虫研究所, 杭州 ) 昆虫 NF-K:B 信号通路由 ω11 和 imd 两条通路组成, 通过转录因子 NF-K:B 作用于靶标基因 K:B 位点, 而调节抗菌活性物质的表达大量实验表明它能够被细菌真菌和病毒的侵染所激活, 在昆虫体液免疫中发挥着主要作用现就昆虫的 NF-K:B 信号通路的主要信号元件等进行综述关键词 NF-KB; 昆虫 : 信号通路 : 信号元件昆虫免疫由细胞免疫和体液免疫组成体液免疫, 主要指昆虫受到病原菌感染时大量合成一些具抗菌活性阴离子短肤, 这些活性肤具有重要的医学研究价值目前己从果蝇基因组中发现了八类抗菌肤 : 愕蚕素 (attacin) 双翅抗菌肤 ( diptericin) 果蝇抗菌肤 (drosocin) 防卫素 (defensin) 天蚕素 (cecropin) 梅氏抗菌肤 (metchnikowin) 溶菌酶 (l ysozyme) 和果蝇防卫素 ( drosomycin) [1] 前四类具有抗细菌活性, 果蝇防卫素能够毒杀真菌, 其他同时能毒杀真菌和细菌 RellNF-K:B 信号通路在昆虫体液免疫中发挥重要作用, 它通过活化的 Rel 蛋白进入细胞核中与 d 因子结合, 从而调节靶标基因的表达它由 ω11 和 imd (immune deficient) 两条相互独立的信号通路组成, 其中 to11 Jm. 路主要调节对革兰氏阳性菌和真菌的免疫应答, 而 imd 通路主要调控抗革兰氏阴性菌物质的合成 [2, 3] 这使昆虫的体液免疫表现出特异性细菌的侵染易诱导防卫素愕蚕素双翅抗菌肤等基因的表达, 真菌的侵染是果蝇防卫素基因表达的最佳诱导因子, 梅氏抗菌肤基因的表达可由真菌或细菌诱导 [4.5] 0 1 ReVNF-1CB 信号通路 Rel/ NF-K:B 信号通路 ( 图 1Y 俑, 7] 在昆虫体液免疫中发挥着重要作用, 可被果蝇激活蛋白 1 activator protein 1, Ap1) 阻断 [8]0 (drosophila Toll 和 imd 两条通路虽共属于 Rel/ NF-K:B 信号通路, 但两者之间存在较大的差异首先, 它们分别调节对不同病原物的免疫应答果蝇中 to11 通路调节对真菌和革兰氏阳性菌的免疫应答, 而 imd 通路被革兰氏阴性菌和些阳性菌激活, 对病毒的免疫应答主要通过 to11 通路和其他非 imd 依赖性通路的调节 [2-4] 其次, 激活两者的信号分子不同 To11 通路为循环系统中的模式识别分子激活, 如肤聚糖识别蛋白 SA (peptidoglycan recognition protein SA, PGRP-SA) 革兰氏阴性菌结合蛋白 1 (gram-negative binding protein 1, GNBP-1) 等 [9] 这些模式识别分子不但有效地识别病原物, 而且能够通过蛋白酶级联反应放大信号, 具有显著的优越性 lmd 通路通过胞外信号蛋白 PGRP-LC[10] 转导信号胞外信号蛋白需通过附加元件的作用, 这应该是 imd 通路主要调节上皮组织中抗菌基因表达的原因再者, 两者功能有所不同 Toll 通路除参与体液免疫外, 尚调控昆虫的发育 imd 在昆虫发育中不起作用, 却可能参与细胞死亡的调节 [11] 1.1 Toll 通路最初, 人们在研究果蝇胚胎背腹极化时, 发现了 späetzle/toll/ cactus-rel 信号通路 [12] 直至 1996 细胞生物志细胞生物学年才发现此通路可调节果蝇防卫素的表达并对真菌的免疫应答有调节作用 [21, 确立了此通路在免疫中的地位当果蝇受到微生物的侵染时, 通过 PGRP-SA 和 GNBP-1 复合物与病原物相关形态分子结合而触发淋巴液中一系列酶解反应, 产生激活型 späetzleo 活化的 späetzle 结合 To11, 使得 to11 类似受体 (to11-1ike receptor, TLR) 的 toll/il-1r (TIR) 结构域与 MyD88 Tube Pe11e 三聚体作用, 引起胞内信号级联反应最终使 cactus 泛素化和磷酸化并降解, 释放转录因子 Rel 蛋白 [13] 激活的 Rel 蛋白进入细胞核, 与靶标基因的启动于或增强子中的国因子结合, 调节天收稿日期 : 接受川期 : * 通讯作者 Tel: , chu@zju.edu.cn 生物志细胞生物学杂志细

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2 562 Gram-positive bacterial Fungal Unknow_ cactus 臼 m D 叫二二二 ) Y PGRP-SA Gram-negative bacterial 之 ~imd /"4. d 飞立 τ 飞 \ 宁 ;; 岳武 Relis~ 三 ZU ~~ 图 1 昆虫的 NF-1CB 信号通路 [4,6, 7[ '-': PGRP domain; 川 : Transmenbrane domain; _: Kinase domain;.: Caspase proteclytic domain;!íj: Death domain; e: Myosin-like domain; 1iD: TIR; =: RHD; 已二 ANK domaino 蚕京果蝇防卫京愕蚕素防御素和梅氏抗菌肤等基因的表达死亡结构域 (death domain) 在此通路中具有重要作用, 衔接子蛋白 MyD88 和 Pelle 分别与 Tube 死亡结构域的两个结合位点结合而形成三聚体 MyD88 尚具有与 Toll 相似的 TIR 结构域, 可能参与结合 Tollo Pelle 具有丝氨酸 m 苏氨酸激酶功能域, 与哺乳动物的白介素 I 受体相关激酶 (interleukin-l receptor associated kinase, IRAK) 同源参与该通路的 Rel 家族蛋白有 Dif 和 Dorsal 两者于幼虫期均高效调节抗菌肤的合成, DIF 是成虫期免疫应答调节的关键因子, 其突变体对真菌高度敏感, 但对细菌侵染有免疫活性 [14J 1.2 imd 通路 lmd 基因编码分子量为 30kDa 具有死亡结构域的蛋白质 imd, 它与哺乳动物的受体相互作用蛋白 (receptor-interacting protein, RIP) 高度相似 l 门 ] Lemaitre 等 [3J 在对果蝇 imd 突变系的研究中发现了 imd 通路在病原菌 { 受染诱导 F, 原体相关形态分子结合, I PGRP-LC 与病 i 秀导 imd 基因表达产生活性受体, 引起胞内信号级联反应最终激活 Relish 综述. 与 NF-KB 转录因子作用, 调节靶标基因表达目前己知参与此通路有 imd 转化生长山子激活激酶 (transforming growth factor-activated kinase, dtak[) 果蝇具 fas 相关死亡域蛋白 (drosophila fas-associated protein with death domain, dfadd) DmlKKγ DmlKK ß 等参与 imd 信号转导通路的 Rel 蛋白是 Relish 0 Relish 不为 cactus 抑制, 而是自身竣革端 ANK 产生抑制作用与哺乳动物不同, 昆虫 Relish 前体的加工无蛋白酶体的参与, 叫能是由基因 dredd ird5 key 编码的蛋白质作用完成的 Relish 被剪切成 Rel- 68 和 Rel-49, 前者含有 RHD, 转移入核内与 KB 样位点结合, 调节抗菌基因的表达 f [5 ) Imd 信号通路主要参与了昆虫对革戈氏阴性菌的免疫应答绝大多数受此通路调节的抗南基因, 其抗菌 i 普主要是革兰氏阴性雨, 如双翅抗菌肤黄猩猩抗菌肤天蚕素愕蚕素 Imd 通路除参与昆虫先天性免疫外, 还有其他功能首先, 它于 TAKl 下游出现分枝, 可经由 c 才 un 氨基端激酶 (C Jun-N-terminal kinase, JNK) 级联反应调控细胞 ' 骨架蛋白的表达 16J 其次, imd 基因的过表达诱导细胞程序化死亡 [llj 2 RellNF-KB 信号通路的组成元件目前已基本勾画出了 Rel/NF-KB 信号通路, 尚有一些环节存在疑问在大量实验的基础仁, 目前人们对参与此通路的模式识别分子 TLR 受体以及转录因子 Rel/NF-KB 进行了大量研究, 本文将对细胞生物志细胞生物学此加以介绍 2.1 模式识别分子通过种系编码的受体识别侵染微生物的保守分子是昆虫免疫的显著性特征 1li H 前于昆虫中发现的模式识别受体有肤聚糖识别蛋白 (PGRP) 脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 革兰氏阴性菌结合蛋 ~f (GNBP) 葡聚糖识别蛋白 (glucan recognition protein, GRP) C 型外源凝集素等可识别外源微生物的肤聚糖月旨多糖磷壁酸 ß-l, 3- 葡聚糖双链 RNA 未甲基化的 CpG 等成分其中参与 RelINF-KB 信号转导途径的主要有 PGRP 家族蛋白札 GRPs/ GNBP 家族蛋白 PGRP 肤聚糖 (PGN) 是细菌细胞壁的重要成分, 有二 - 氨基庆二酸型 (Dap 噜 type PGN) 平 [] L 赖氨酸型 (Lys-type PGN) 两种存在形式前者肤尾第生物志细胞生物学杂志细

卢新民等 : 昆虫的 NF-KB 信号通路 3 位上是内消旋氨基庆 - 酸 (m-oap), 存在于革兰氏阴性菌手 n 部分革芝氏阳性菌 l 扣后者肤尾第 3 位 t 是 L- 赖氧酸 (L-Lys), 存在于绝大多数革兰氏阳性菌中这与诱导昆虫的免疫应答 A 特征使其成为理想的的模式分子, 参昆虫体中对一问 N 具高效识别能力的蛋白质 PGRP,

3 卢新民等 : 昆虫的 NF-KB 信号通路 3 位上是内消旋氨基庆 - 酸 (m-oap), 存在于革兰氏阴性菌手 n 部分革芝氏阳性菌 l 扣后者肤尾第 3 位 t 是 L- 赖氧酸 (L-Lys), 存在于绝大多数革兰氏阳性菌中这与诱导昆虫的免疫应答 A 特征使其成为理想的的模式分子, 参昆虫体中对一问 N 具高效识别能力的蛋白质 PGRP, 根据基因产物结构可分为具较长转录本的长型 PGRP (PGRP-L) 和分 f 量较小的 kd a) 的短 :Jl~. PGRP (PGRP-S) 0 PGRP-L - 般为胞内或膜蛋白, 而 PGRP-S 通常为胞外蛋白果蝇中发现了由 13 个 PGRP 基因编码的 12 种 PGRP, 分别为 LA LB LC LO LE SA SB I SB 2, SCIA SCIB SC 2 和 SO [16]0 冈比亚按蚊 Anopheles gambiae 基因组中发现 7 个 PGRP 基因, 编码的 PGRP 有 SI S2 S3 平日 LAI LA 2 LB LC I LC 2 LC 3 L01 17 ] 性差昆虫 PGRP 竣基端序列高度保守, 氨基端保守 PGRP 蛋白竣基端均由 160 个氨基酸残基组成, 被称为 PGRP 结构域它具有多个结合位点, 与细菌 II 型 N-6 眈胞壁酷丙氨酸酷肢酶同源根据其结构上的保守性还可分为 I II III 三个亚结构域, 其问可能存在保守性较差的居问序列, 少数目间序列为跨 )1 更结构域该结构域可能具有寡聚化传 j 星信号和结合 imd 等功能昆虫的 PGRP 大多数在免疫器官或组织中表达 PGRP-S 歧少数 PGRP-L 存在于血浆及表皮中, 主要于脂肪体细胞合成, 少数在肠道上皮细胞或血细胞中合成, 而大多 PGRP-L 是在血细胞中合成如果蝇受感染后, PGRP-SB I SC 2 和 SO 在脂肪体高表达, PGRA-SA 多表达于表皮组织 [16] 0 PGRP 1'1: 昆虫先天性免疫中发挥着重要作用 PGRP-SA 与 GNBPl 结合识别革兰氏阳性菌 [ 闪, 激活 toll 信号通路, 但不能识别真菌果蝇 PGRP-SA 突变体的 J;,j~ 死蛋白氯基端剪切被抑制, 导致多种抗雨肤的诱导表达量降低 [18]0 PGRP 卢 LC 能够识别脂多糖和肤聚糖, 激活 imd 信号转导通路以及吞噬作用, 并与 PGRP-LE 协同作用 [10, 19]0 PGRP-SO 能够识别革兰氏阴性菌 [20J 自 -GRPs/GNBP 家族蛋白 β GRPs/GNBP 家族蛋白既口 Jli 真菌细胞壁成分札 1, 3- 葡聚糖结合, 义口 I 识别细菌细胞壁的脂多糖成分自家蚕 Bombyx mori 不日 ' 如 l 丰天峨 Manduca sexta 分离得到的 -GRP x.j ß-l, 3- 青 i 聚糖具高度的亲和性, 革兰氏阴性菌结合蛋白 (GNBP) 可与 LPS 结合自 -GRPsI 563 GNBP 家族蛋白援基端与细菌 -1, 3- 葡聚糖酶的相似, 被称为葡聚糖酶类似竣基端结构域, 此结构域的氨基端附近具有 4 个保守的半脱氨酸残基由于催化位点七主要氨基酸残基的替换, 不具有葡聚精酶活性该家族蛋白的氨基端含有一个特异性结构域, 这一结构域由约 300 个氨基酸残基组成, 可能对葡聚糖再高度的亲和性 ß-GRPs/GNBP 家族蛋白在品虫的先天性免疫中发挥重要作用自家蚕和 1 烟草夜峨分离得到的 ß-G 阳参与激活多酌氧化酶的蛋白水解! 酶级联反应 121, 22] 果蝇 GNBP-l 基因的过表达增强了 LPS 和口 -1, 3- 葡聚糖诱导的抗菌基因的表达 [23] 冈比亚按蚁在受剑寄生虫 Plasmodium berghei 但染时, 其中肠及整个虫体的 GNBP mrna 水平明显提高 [ 叫 2.2 TLR 人们分别在研究果蝇抗菌物质的表达调控和胚胎背腹极化时发现 Toll 受体可能在免疫中发挥作用研究 cecropina] 和 diptericin 基因启动子图谱时, 发现了与哺乳动物相似的 NF- l(b 结合位点 [ 巳 ] 研究胚胎背腹轴形成相关基因 H 才, 发现了 12 个 lj dorsal 具有相同或相反表现型的基因 [26.27] 年 Toll 基因首次被克隆, 表明它编码一种新型的 I 型跨膜受体蛋白 [28] TLR 属于 I 型跨膜受体蛋白, 广泛存在于昆虫中己从果蝇基因组中发现了 18w toll-3 至 toll- 8 toll 等 8 个 TLR 基因 [ 约 ]; 冈比亚按蚊基因组中发现了基因 toll-l 至 toll-ll[17]0 TLR 受体蛋白位于脂肪体细胞膜上, 其胞外区段 (extracellular domain) [ÍJ 富含亮氨酸的重复序列 (l eucine-rich repeats domain, 细胞生物志细胞生物学 LRR) 和半脱氢酸结所组成细胞内胞浆 1><: 段 (cytoplasmic domain) LH 3 个结构域组成, 分别为 to ll/illr (toll/il-l-receptor homology domain, TIR) 结构域 PEST 结构域竣基端抑制性结构 :I:.!'~(C-terminal inhibitory domain) 0 TIR 结构域与哺乳动物 IL-l 受体的胞浆区段同源, 调节 TLR 受体问杂合或纯合二聚体的形成, 以及 TLR _l j 含 TIR 结构域的接受蛋白的结合果蝇 TLR 家族成员的 TIR 结构域自度保守 l 约 l Toll-3 和 toll-4 具 79% 的相似性, toll-5 和 toll 以此 18w 和 toll-7 具 60% 的相似性, toll-6 与其他关系较远但除 toll-2 和 toll 的 TIR 结构域可激活转染细胞的抗菌肤启动子外, 其他均不可这表明两点, 首先 TIR 结构域具有特异性, 其次其他家族成员可能不参与抗菌肤的表达, 其原因目前尚不清楚生物志细胞生物学杂志细

564 LRRs 结构不如 TIR 保守, 但其两侧分布有特征性的富含半脱氨酸的模体这些模体的分布在哺乳动物和果蝇之间在在差异, 哺乳动物的分布于竣基端近膜部位, 而果蝇的竣基端和氨基端均有分布与哺乳动物的 TLR 受体不同, 昆虫的 Toll 受体不能直接与模式分子作用, 而是通过配体 späetzle 激活 Späetzle 的前体不具有生物活性, 结构上与哺

4 564 LRRs 结构不如 TIR 保守, 但其两侧分布有特征性的富含半脱氨酸的模体这些模体的分布在哺乳动物和果蝇之间在在差异, 哺乳动物的分布于竣基端近膜部位, 而果蝇的竣基端和氨基端均有分布与哺乳动物的 TLR 受体不同, 昆虫的 Toll 受体不能直接与模式分子作用, 而是通过配体 späetzle 激活 Späetzle 的前体不具有生物活性, 结构上与哺乳动物的神经营养蛋白相似经基因 gastrulation defective snake easter 编码的丝氨酸蛋白酶级联反应作用, 剪切得到分子量为 12kDa 的竣基端多肤片段 CI06. 即成熟的 späetzle 蛋白 [3 叭对果蝇 necroti 丰 fj persephone 基因的研究表明, 尚有其他丝氨酸蛋白酶参与了 späetzle 的加工 [31 J 0 成熟的 späetzle 以二聚体形式与两个 Toll 受体的细胞外区段结合, 激活 Toll 受体及其介导的信号 JI!i 路 [32) 0 除 Toll 受体自身外, 一部分其他 TLR 受体也参与了免疫反应的调节果蝇的 18w (toll-2) 基因表达被做生物侵染诱导, 其缺失体的抗菌基因表达量减少, 同时 Dif 的核定位受到抑制 (3 3)0 Toll-9 与 Toll 可能通过同 - 信号通路调节多种抗菌肤的表达 [34] 而其他 TLR 受体既不参与抗菌基因的激活又不与 DmMyD 88 作用与哺乳动物 TLR 受体表达不同, 绝大多数昆虫 TLR 受体基因的表达具有时间和空间上的顺序性, 表明它们可能在发育和变态过程中发挥作用 2.3 转录因子 Rel/NF- x:b 家族蛋白 NF-KB 即核际 l 子 1 也是一类能与 DNA 启动子或增强子序列 5'-GGGRNNYYCC-3' (R 代表嘿岭.Y 代表唔盹 ) 特异性结合的蛋白质, 是调控先天性和获得性免疫反应相关基因表达的转录因子昆虫抗菌肤具有 ÎxB 相似序列, 天蚕素免疫应答因子 (cecropia immuno-responsive factor, CIF) 具有类似哺乳动物 NF-KB 因子相似活性, 能够结合 KB 位点并调节抗菌肤基因表达 [35) 目前, 在己知的昆虫抗菌基因的启动子或增强子中均发现了 d 类似序列, 并且序列高度保守现已克隆了多个 Rel 蛋白的基因, 有果蝇的 dorsal d 矿 (dorsal-related immunity factor) 和 relish, 麻蝇的 59 kda xb 结合蛋白和冈比亚按蚊的 gambifl 以及家蚕的 BmRelA 和 BmRelA 等 [ 凹, 25, 3 39] 昆虫 Rel/NF-KB 家族蛋白都含有 Rel 同源性结构域 (rel homology domain, RHD). 该结构域由约 300 个氨基酸残基组成, 具二聚化 DNA 结合以及导向细胞核的功能 Relish 和 59 kda xb 结合蛋白为 - 综述复合蛋白, 除具有 RHD 外, 它的竣基端为锚蛋白重复序列 (ankyrin repeat, ANK) 具自我押制作用 3 Relish 结构上与哺乳动物的 P 105, P 1 川相似, 但它的剪切不为蛋白酶体抑制剂阻断, 同时其段基端继续存在于胞浆内而不被分解昆虫 Rel/NF-xB 家族蛋白的活性是通过化学修饰 ( 如磷酸化 ) 以及家族成员之间相句而作用调节的 c 己发现的 Rel 蛋白均以同源或杂合工聚体的形式存在, 不同的组合与 xb 样位点的亲和力不同在静息状态下 NF-KB 以和 KB 押制因子 (inhibitor of KB, IKB) 整合的惰性形式在在于细胞质中, 当受到病原物侵染时. IKB 激酶 (IK 副作用于 IKB 使其裂解, 释政 NFxB 并转入核内与 DNA 结合. =f 转 i 习毛水平上调节目标基因的表达此家族蛋白的胞浆定位是通过 NF KB 核质运动而实现的, 这一过程是边过 IxB 的核输出信号 (nuclear export signal, NES) 手 IJ NF-xB 的核定位信号 (nudear location signal, NLS) 共 IriJ 调节的目前于昆虫中发现的 IKB 只有 cactus. 具有若干个锚蛋白重复序列 (ANK)o IKK 蛋白有 DmIKK ß 和 D mikky. 分别由基因 ird5 和 key 编码只作用于 imd 通路 [4ω1) 歪于 IxB 蛋白是如何抑制 Rel 家族蛋白 ( 除 Relish) 的活性目前尚无确切的说法, 可能是通过铀蛋白重复序列和 Rel 蛋白二聚体的 RHD 作用, 包埋二聚体的 NLS 序列而实现的 [42] 昆虫的 Rel 蛋白与 KB 样位点的结合表现出特异性 Dif 和 Dorsal 的 RHD 与天蚕素和现翅抗菌肤的 xb 样位点的结合能力不同 (43). Dorsal 育 dorsal 和 dorsal B[44] 两种不同的存在形式, 埃及伊蚊 (Aedes 细胞生物志细胞生物学 aegypti) 的 Relish 基因有 3 个不同的剪切形式 (45) 据此可以推测不同的 Rel 二聚体与不同的抗菌肤基因的国样位点结合, 诱导不同产物的合成, 从而实现免疫的高效性 3 与哺乳动物信号通路的比较昆虫的 Rel/NF-KB 信号转导途径由 toll 和 imd 两条相互独立的通路组成, 它们分别与哺乳动物的 TLR 和 TNFR (tumor necrosis factor receptor) 通路同源它们的相似之处有以下几点首先, 它们都是通过 Rel 转录因子与 KB 作用来调节门标其网的表达其次, 组成上存在同源性的信号元件 Toll 和 TLR 通路同源的信号元件有 : MyD88 DmIKK ß 和 DmIKKy 等. Pelle 与哺乳动物的 IRAK 同源但昆虫的 DmIKK ß 和 DmIKKγ' 在 toll 通路中没有发挥生物志细胞生物学杂志细

5 卢新民句 : 昆虫的 NF-KB 信号通路作用 Imd 通路中的 FADD TAKl IKKß 和 IKKy 分别与哺乳动物的同名蛋白同源, dredd 与 caspase- 8 同源, imd lj RIP 有同源的死亡结构域两者之间义存在明显的区别昆虫 Rel/NF-KB 信号途径中的受体分子并 11: 直接参与识别外源物, 而是通过专一的配体与之作用来激活信号转导的, 而动物的受体分子直接参与外源物的识别 4 展望在过去的几卡年中, 人们对昆虫的 Rel/NF-KB 信号转导途径有了深入的了解通过一系列突变体的研究, 比较食面地阐述了此通路的全过程, 虽则其中有盹环节尚需进一步的研究但对此通路的特异性机制及其本身的调节机制了解甚少, 有待探讨首先, 目前对特异性机制研究尚处初始阶段昆虫的模式识别分子能够特异性与微生物模式分子结合, 从而激活不同的通路目前人们发现肤聚糖肤尾第 3 位上的氧基酸在识别过程中发挥了重要作用, 但其他模式分子是如何作用的呢? 其次, 对昆虫 Rel/NF-KB 信号转导通路的调节机制了解甚少目前发现 J 些外囚, 如病原微生物的侵染交配等能够激沾此通路但其自身是如何调节的呢? 研究表明基因 Sickie Dnr-l 和 WntD 对此通路有负调节作用 [ Sickie 能够抑制 dredd 对 relish 的活化, Dnr-l ;fij WntD 是 imd 通路的反馈抑制产物是否还有在其他调节物质呢? 它们是如何调节的呢? 这些问题有待回答参考文献 (Reference) [11 lmler JL et al. Curr Opin Microbio1, 2000, 3: 16 [2] Lemaitre B et a1. Cell, 1996, 86: 973 Abstract The NF-KB Signal Pathway of Insects Xin-Min Lu, Gong-Yin Ye* 565 [3] Lemaitre B et al. Proc Nat1 Acad Sci USA, 1995, 92: 9465 [4] Lemaitre B et al. Proc Natl Acad Sci USA, 1997, 94: [5] Levashina EA et al. J Mo1 Biol, 1998, 278: 515 [6] Boutros M et a1. Dev Cell, 2002, 3: 711 [7] Khusl RS et a1. Science, 2002, 296: 273 [8] Kim T et al. Nat lmmuno1, 2005, 6: 211 [9] Gobert V et a1. Science, 2003, 302: 2126 [10] Choe KW et al. Proc Nat1 Acad Sci USA, 2005, 102: 1122 [11] George1 P et a1. Dev Cell, 2001, 1: 503 [12] Anderson KV et al. Cell, 1985, 42: 791 [13] Wu LP et a1. Nature, 1998, 31)2: 93 [14] Rutschmann S et al. Immunity, 2000, 12: 569 [15] Stoven S et al. EMBO Rep, 2000,1: 347 [16] Werner T et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2000, 97: [17] Christophides GK et a1. Science, 2002, 298: 159 [18] Pelte N et al. lnsect Biochem Mol Biol, 2006, 36: 37 [19] Tanaka H et al. Biochim Biophys Acta, 2005, 1730: 10 [20] Bischoff V et a1. Nat lmmunol, 2004, 5: 1175 [21] Jiang H et a1. lnsect Biochem Mo1 Bio1, 2004, 34: 89 口 2] Lee WJ et a1. Proc Natl Acad Sci USA, 1996, 93: 7888 口 3] Kim YS et a1. J Biol Chem, 2000, 275: [24] Richaman AD et a1. EMBO J, 1997, 16: 6114 [25] Engstrom Y. Dev Comp Immuno1, 1999, 23: 345 [26] St Johnston DS et a1. Cell, 1992, 68: 201 [27] Morisato AD et al. Annu Re ν Genet, 1995, 29: 371 [28] Hashimoto C et a1. Cell, 1988, 52: 269 [29] Tauszig S et al. Proc Nat1 Acad Sci USA, 2000, 97: [30] LeMosy EK et a1. Trens Cell Biol, 1999, 9: 102 [31] Ligoxygakis P et a1. Science, 2002, 297: 114 口 2] Weber AN et al. Nat lmmuno1, 2003, 4: 794 口 3] Williams MJ et al. EMBO J, 1997, 16: 6120 [34] Bettencourt R et al. J Endotoxin Res, 2004, 10: 261 [35] Sun SC et al. Eur J Biochem, 1992, 204: 885 [36] Dushay MS et al. Proc Natl Acad Sci USA, 1996, 93: [37] Baril1as-Mury C et a1. EMBO J, 1996, 15: 4691 [38] Steward R. Science, 1987, 238: 692 [39] lp YT et al. Cell, 1993, 75: 753 [40] Lu Y et a1. Genes Dev, 2001, 15: 104 [41] Rutschmann S et al. Nat Immuno1, 2000, 1: 342 [42] No1an GP et al. Cell, 1991, 而 4: 961 [43] Cross 1 et al. Nucleic Acids Res, 1996, 24: 1238 [44] Gross 1 et al. Gene, 1999, 2:~8: 233 [45] Shin SW et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99: 9978 [46] Fo1ey E et a1. PLoS Biol, 2004, 2: E203 [47] Gordon MD et al. Nature, 2005, 437: 746 细胞生物志细胞生物学 (Institute 01 Applied Entomology, Zhejiang Univers 仰, Hangzhou , China) In insects, the NF-KB signal pathway, being composed of to11 path and imd path, regulates the expression of antimicrobial genes as NF-KB factors binding KB sequence of targeted genes. Evidences have proved that this pathway plays a vital role in insect innate immunity, and can be triggered by proinflammatory microbes and viruses. In this article, the signal elements of this signal pathway in insects are reviewed mainly. Key words NF-KB; insects; signal pathway; silgnal elements Received: July 18, 2005 Accepted: Apri1 6, 2006 *Corresponding author. Te1: , E-mai1: chu@zju.edu.cn 生物志细胞生物学杂志细

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材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析生物技术通报黄艳燕黄靖华卢福芝孙靓彭立新周兴黄日波利用的方法从鼠李糖乳杆菌基因组中扩增到乳酸脱氢酶基因并连接到载体上构建表达质粒将重组质粒转化大肠杆菌重组菌株经诱导表达电泳分析表明在大肠杆菌中实现了表达表达产物的分子量约为同时采用紫外分光光度法测定乳酸脱氢酶的酶活测得重组菌株的乳酸脱氢酶活力为最适反应温度为最适乳酸脱氢酶克隆表达鼠李糖乳杆菌

细胞生物学杂志 Chinese Joumal of Cell Biology 2006, 28: 摘要 昆虫的 NF-1CB 信号通路 卢新民叶恭银 * ( 浙江大学应用昆虫研究所, 杭州 ) 昆虫 NF-K:B 信号通路由 ω11

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