96 第 36 卷第 2 期水生态学杂志 2015 年 3 月 表 1 中华鳖饲料组成及营养成分含量 ( 干重 ) % Tab.1 Feedcompositionandnutrientcontentofthe basaldietoftrionyxsinensis(dryweight) 原料 配比 营

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1 第 36 卷第 2 期 2015 年 3 月 DOI: /j 水生态学杂志 JournalofHydroecology Vol.36,No.2 Mar 复合益生菌对中华鳖生长及血液生化指标的影响 桂琳 1, 王晓清 1,2, 康银 1, 曾丹 1, 蒋迪 1 1, 廖学敏 (1. 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙 ;2. 水产高效健康生产湖南协同创新中心, 常德 ) 摘要 : 为了探究饲料中添加复合益生菌对中华鳖 (Trionyssinensis) 生长及血液生化指标的影响, 在体重为 ( ±14.42)g 的中华鳖基础饲料中分别添加复合益生菌 0mg/kg( 对照组 Ⅰ) 500mg/kg( 试验组 Ⅱ) 1000mg/kg ( 试验组 Ⅲ) 和 2000mg/kg( 试验组 Ⅳ); 试验共分 4 组, 每组 3 个重复, 在 (30±2) 温室中进行, 投喂 140d 结果表明, 各试验组均能显著提高中华鳖增重率 特定生长率和存活率 (P<0.05), 降低饵料系数 (P<0.05), 且 Ⅲ 组增重率 特定生长率和存活率最高, 饵料系数最低, 增重率比 Ⅰ 组提高了 29.25%; 各试验组均能显著提高中华鳖脂肪酶 淀粉酶和胰蛋白酶活力 (P<0.05), 当添加量为 2000mg/kg 时, 淀粉酶活力有所下降 (P<0.05); 与对照组相比, 各试验组均能显著降低血清中总胆固醇 尿素氮水平和谷丙转氨酶活力 (P<0.05), 提高甘油三酯含量 (P<0.05), 而血清中总蛋白 球蛋白 白蛋白 血糖 丙二醛含量和谷草转氨酶活力差异不显著 (P>0.05); 各试验组均能显著提高血清中溶菌酶 谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活力 (P<0.05), 但过量添加 (2000mg/kg) 会降低其活力 (P>0.05) 在基础饲料中适量添加复合益生菌能促进中华鳖的生长 降低饵料系数 提高肠道消化酶活性, 同时还具有提高非特异性免疫和抗氧化功能, 最适添加量为 1000~2000mg/kg 关键词 : 中华鳖 ; 复合益生菌 ; 生长 ; 血液生化指标中图分类号 :Q592.1 文献标志码 :A 文章编号 : (2015) 中华鳖 (Trionyssinensis) 是我国重要的淡水特种养殖品种之一, 具有丰富的营养价值和较高的经济价值 ; 随着市场需求的不断扩大, 其工厂化养殖发展迅速, 各种疾病也随之增加 ; 各类抗生素等化学药物的滥用, 出现了细菌抗药性和药物残留等问题, 严重影响了中华鳖养殖产业的健康持续发展 微生态制剂是一种无毒 无抗药性 无残留的新型饲料添加剂, 具有产生抑菌化合物 竞争附着位点和营养素 增强消化酶活性和免疫应答等功能, 在一定程度上可代替抗生素 (Sahuetal,2008) 目前, 国内外研制微生态制剂所应用的微生物主要为乳酸杆菌类 酵母菌类和需氧芽孢杆菌类, 且趋向复合制剂 ( 华雪铭等,2005; 杜宣等,2006; 胡毅等,2008; 许国焕等,2008); 主要集中于家畜和家禽方面, 水产动物方面的研究较少 本试验通过在中华鳖基础饲料中分别添加不同剂量的复合益生菌, 研究不同添加量 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金项目 ( ); 湖南省教育厅科学研究重点项目 (11A051) 作者简介 : 桂琳,1990 年生, 女, 硕士研究生, 研究方向为水产动物营养与饲料 E mail: @qq.com 通信作者 : 王晓清,1964 年生, 男, 博士, 教授 E mail:wangxi ao8258@126.com 对其生长及血液生化指标的影响, 探讨复合益生菌在中华鳖饲料中的有效利用, 为其健康养殖提供理论依据 1 材料与方法 1.1 复合益生菌制备试验选用自制的复合益生菌 ( 已申请国家发明专利, 专利号 ), 包含枯草芽孢杆菌 纳豆芽孢杆菌 干酪乳杆菌和产朊假丝酵母菌 4 种菌种均由中国普通微生物菌种保藏管理中心提供, 菌种经扩大培养后, 分别以无菌麦麸为载体, 37 培养 36h, 烘干粉碎 (60 目 ) 制成菌粉, 按照一定比例配制成复合益生菌,4 保存备用 1.2 饲料配比与营养成分试验饲料以中华鳖商品料为参照, 配制出粉状基础饲料, 原料配比和营养成分比例见表 试验设计试验在湖南煌鑫水产有限公司温室养殖场进行, 水温 (30±2) 挑选初始平均体重为( ±14.42)g 健康中华鳖, 用 3% ~5% 的食盐溶液浸泡 3~5min 后放入试验池 (4.5m 10.0m 1.5m), 驯食 1 周后开始投喂试验

2 96 第 36 卷第 2 期水生态学杂志 2015 年 3 月 表 1 中华鳖饲料组成及营养成分含量 ( 干重 ) % Tab.1 Feedcompositionandnutrientcontentofthe basaldietoftrionyxsinensis(dryweight) 原料 配比 营养成分 比例 高筋面粉 22.5 粗蛋白 膨化大豆 7.0 粗脂肪 9.59 豆粕 粗灰分 米糠 4.2 钙 1.87 玉米蛋白粉 4.0 磷 1.76 进口鱼粉 43.0 鸡肉粉 7.0 磷酸二氢钙 2.0 沸石粉 1.0 豆油 1.2 鱼油 1.2 预混料 1.0 在中华鳖基础饲料中添加复合益生菌 0mg/kg ( 对照组 Ⅰ) 500mg/kg( 试验组 Ⅱ) 1000mg/kg ( 试验组 Ⅲ) 和 2000mg/kg( 试验组 Ⅳ) 的试验日 粮, 试验共分 4 组, 每组 3 个重复, 共 12 个池, 每池 放养 1200 只 试验期间每天投喂 3 次 ( , , ), 每池每 次投饵 1.5~2.0kg, 及时清理食物残饵并称重 每 天监测养殖区域的水温, 记录摄食量和死亡数, 并定 期对养殖池进行清理 试验持续 140d 1.4 样品采集与分析 生长指标 试验初始和结束时分别对各池 的中华鳖进行记数 称重 各生长指标计算公式如 下 : 增重率 (WG,%)=[(W t -W 0 )/W 0 ] 100 特定生长率 (SGR,% /d)=[(lnw t -lnw 0 )/t] 100 饵料系数 (FCR)=M/G 存活率 (SR,%) =(N t /N 0 ) 100 式中 :W t : 第 t 天后中华鳖平均体重 (g);w 0 : 初 始时中华鳖平均体重 (g);t: 饲养天数 (d);m: 总投 饲量 (g);g: 中华鳖总增重量 (g);n 0 : 池中的初始中 华鳖数 ;N t : 第 t 天后池中的中华鳖数 肠道消化酶 养殖试验结束后, 每个池随机 取 15 只中华鳖, 丁香油麻醉, 在冰盘上迅速解剖取 其前肠, 去除肠道内容物和附着物, 用冰双蒸水清洗 肠道, 滤纸吸干并称重, 剪碎后置于电动匀浆器中冰 水浴匀浆 4 高速低温冷冻离心机 6000r/min 离 心 15min, 取上清液待测, 于 24h 内分析完毕 胰 蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶均采用南京建成生物工程研 究所的试剂盒进行测定 胰蛋白酶活性单位定义为 : 在 ph 条件下, 每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分钟使吸光度变化 即为 1 个酶活力单位 脂肪酶活性单位定义 : 在 37 条件下, 每克组织蛋白在本反应体系中与底物反应 1min, 每消耗 1μmol 底物为 1 个酶活力单位 淀粉酶活性单位定义 : 组织中每毫克蛋白在 37 与底物作用 30min, 水解 10mg 淀粉定义为 1 个酶活力单位 肠道酶液蛋白含量以牛血清蛋白为标准, 用南京建成生物工程研究所的试剂盒, 考马斯亮蓝法进行测定 血液指标养殖试验结束后, 中华鳖饥饿 24h, 每池随机取 10 只, 用 2.0mL 无菌注射器颈静脉采血,4 静置过夜, 以 3500r/min 离心 15min, 取上层血清分装置于 -80 超低温冰箱保存备用 血清总蛋白 (TP) 总胆固醇 (CHO) 甘油三酯 (TG) 血糖 (GLU) 尿素氮 (UN) 球蛋白 (GLB) 白蛋白 (ALB) 溶菌酶 (LZM) 丙二醛 (MDA) 超氧化物歧化酶 (SOD) 谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX) 谷草转氨酶 (AST) 谷丙转氨酶 (ALT) 均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定 1.5 数据分析试验数据用 SPSS17.0 进行单因素方差分析 (One way ANOVA) 当各组差异显著时 (P<0.05), 用 Duncan 检验法进行多重比较 分析结果用平均值 ± 标准差 (Mean±SD) 表示 2 结果与分析 2.1 生长情况与饲料利用由表 2 可知,Ⅲ 组和 Ⅳ 组中华鳖的增重率 特定生长率显著高于 Ⅰ 组和 Ⅱ 组 (P<0.05), 饵料系数显著低于 Ⅰ 组和 Ⅱ 组 (P<0.05); 其中 Ⅲ 组的增重率比 Ⅰ 组提高了 29.25%;Ⅱ Ⅲ Ⅳ 组的存活率显著高于 Ⅰ 组 (P<0.05), 但过量添加 (Ⅳ 组 ) 会降低其存活率 (P>0.05) 2.2 肠道消化酶由表 3 可知, 复合益生菌对中华鳖肠道中脂肪酶 淀粉酶和胰蛋白酶活力均有增强作用 (P<0.05), 但过量添加 (Ⅳ 组 ) 会降低淀粉酶活力 (P<0.05)

3 2015 年第 2 期桂琳等, 复合益生菌对中华鳖生长及血液生化指标的影响 97 表 2 复合益生菌对中华鳖生长和饲料利用的影响 Tab.2 EfectsofcompoundprobioticsongrowthandfeedutilizationofTrionyxsinensis 指 标 试验分组 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 初始体重 /g ± ± ± ±14.11 末期体重 /g ±80.37 a ±29.37 a ±67.76 b ±65.51 b 增重率 /% ±41.11 a ±20.09 a ±21.74 b ±43.95 b 特定生长率 /% d ±0.10 a 0.74±0.05 a 0.85±0.05 b 0.83±0.10 b 饵料系数 2.00±0.39 a 1.89±0.13 a 1.54±0.19 b 1.63±0.26 b 存活率 /% 74.64±1.59 a 78.31±1.92 b 84.39±1.49 c 81.92±2.52 bc 注 : 同行数据不同字母表示差异显著 (P<0.05) Note:Datawithdiferentsuperscriptsinthesamerowaresignificantlydiferent(P<0.05). 表 3 复合益生菌对中华鳖肠道消化酶的影响 Tab.3 Efectsofcompoundprobioticsontheactivities ofdigestiveenzymesoftrionyxsinensis 试验分组 脂肪酶 / U g -1 淀粉酶 / U mg -1 胰蛋白酶 / U mg -1 Ⅰ 10.94±0.52 a 0.23±0.01 a 2.59±0.13 a Ⅱ 16.56±0.40 b 0.25±0.01 b 3.49±0.10 b Ⅲ 16.93±0.46 b 0.36±0.01 c 3.87±0.16 c Ⅳ 18.22±0.54 c 0.30±0.02 d 3.72±0.21 c 注 : 同列数据不同字母表示差异显著 (P<0.05) Note:Datawithdiferentsuperscriptsinthesamecolumnaresignifi cantlydiferent(p<0.05). 2.3 血液生化指标由表 4 可知, 复合益生菌显著提高了中华鳖血清中甘油三酯含量 (P<0.05), 但降低了总胆固醇和尿素氮含量 (P<0.05); 随着复合益生菌剂量的增加, 血清中的血糖呈先下降 后上升 再下降的趋势 (P<0.05); 复合益生菌能显著升高溶菌酶 超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力 (P<0.05), 过量 (2000mg/kg) 添加会部分降低其活力 (P>0.05); 复合益生菌能显著降低谷丙转氨酶活力 (P<0.05); 而对血清中总蛋白 球蛋白 白 表 4 复合益生菌对中华鳖血液生化指标的影响 Tab.4 EfectsofcompoundprobioticsonbloodbiochemicalindicesofTrionyxsinensis 指 标 试验分组 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 总蛋白 /g L ± ± ± ±1.77 总胆固醇 /mmol L ±0.27 a 5.57±0.36 b 5.48±0.19 b 5.46±0.28 b 甘油三酯 /mmol L ±0.02 a 0.41±0.04 b 0.47±0.02 c 0.49±0.02 c 血糖 /mmol L ±0.83 ab 7.62±0.65 a 8.47±0.61 b 8.25±0.55 ab 尿素氮 /mmol L ±0.04 a 2.18±0.07 b 1.29±0.03 c 1.80±0.05 d 球蛋白 /g L ±1.16 b 15.42±0.61 a 15.90±0.97 ab 15.45±0.77 a 白蛋白 /g L ± ± ± ±0.53 溶菌酶 /μg ml ±0.31 a 10.19±0.35 b 13.58±0.52 c 8.04±0.33 d 丙二醛 /nmol ml ± ± ± ±0.24 超氧化物歧化酶 /U ml ±6.86 a ±14.14 b ±11.14 c ±14.86 b 谷胱甘肽过氧化物酶 /μmol L ±17.61 a ±32.28 b ±31.95 b ±39.82 b 谷草转氨酶 /U L ± ± ± ±17.03 谷丙转氨酶 /U L ±0.52 a 8.32±0.23 b 8.09±0.51 b 8.36±0.41 b 注 : 同行数据不同字母表示差异显著 (P<0.05) Note:Datawithdiferentsuperscriptsinthesamerowaresignificantlydiferent(P<0.05). 蛋白 丙二醛 谷草转氨酶活力均无显著性影响面, 益生菌可产生维生素 氨基酸 促生长因子和多 (P>0.05) 种酶类 ( 杨蕙萍等,1998; 丁贤和李卓佳,2004), 参与机体的一些重要代谢反应, 有助于中华鳖对饲料 3 讨论的消化和吸收 ; 另一方面, 益生菌本身含有大量的营 3.1 复合益生菌对中华鳖生长和消化酶的影响养物质, 如蛋白质 矿物质和维生素等, 可为水产动本次研究表明, 饲料中添加复合益生菌能在一物生长提供所需营养, 从而促进中华鳖的生长 定程度上提高中华鳖生长和饲料利用率 ( 高凤祥当添加量为 2000mg/kg 时, 中华鳖生长指标等,2011; 江永明等,2011; 丁雪燕等,2012) 一方和饲料利用有所下降, 但差异不显著, 可能是因为过

4 98 第 36 卷第 2 期水生态学杂志 2015 年 3 月 量添加益生菌导致机体肠道菌群结构失衡或由于产生过多的酶抑制机体内源酶的活性, 降低内源酶对营养物质的吸收利用, 进而降低了动物生长性能 ( 付天玺等,2008), 这与管越强等 (2010) 的研究相似 从消化酶活性看, 复合益生菌对肠道脂肪酶 淀粉酶和蛋白酶活性均有所提高, 但提高幅度有限 (Gomezetal,2008; 丁雪燕等,2012), 这可能是因为长期食用益生菌能引起肠道消化酶分泌的改变 ; 另外, 益生菌自身也能分泌多种酶类如蛋白酶 淀粉酶和脂肪酶等 ( 高欣,2008), 从而使消化道正常生理机能平衡发生改变 3.2 复合益生菌对中华鳖蛋白和脂肪代谢的影响血液中的各种营养成分具有营养组织 调节器官活动和防御有害物质的作用 血液中尿素氮的水平能反映肝脏和肾脏功能, 其中各试验组的尿素氮含量低于对照组, 可能是复合益生菌增加了蛋白质沉积率, 降低了尿素在组织中的沉积 ; 尿素氮含量低于对照组也反映了复合益生菌对中华鳖的肝脏和肾脏有保护作用, 其他学者的研究也得到了相似的结果 ( 管越强等,2010) 总胆固醇和甘油三酯是血液脂肪的重要组成部分, 其含量的高低反映了脂类的代谢和吸收状况, 高含量的胆固醇往往会引发各种疾病或并发症 复合益生菌显著降低了中华鳖血清中的总胆固醇, 这可能是因为益生菌能产生多种寡糖, 功能性的寡糖能加强对总胆固醇代谢 中华鳖血清中甘油三酯显著提高是因为复合益生菌分泌的酶类能促进肠道对甘油三酯的吸收, 从而增加血清甘油三酯的含量 ; 此外, 血清中葡萄糖 总蛋白 白蛋白和球蛋白等指标差异不显著, 这可能是由于基础饲料营养全面 恒定的试验环境适宜中华鳖生长 没有感染病害所导致 谷草转氨酶和谷丙转氨酶主要参与体内转氨基作用, 其中谷丙转氨酶是广泛存在于动物组织细胞线粒体内的重要氨基转移酶, 在机体蛋白质代谢中起着重要作用 正常情况下, 以动物的心肌细胞和肝脏中含量最高, 血清中这 2 种酶活力较低 当组织细胞受损或通透性增大时, 大量的谷草转氨酶和谷丙转氨酶进入血液, 使血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活力增高 本试验结果显示, 复合益生菌降低了谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力, 说明添加复合益生菌有利于肝脏代谢, 对中华鳖的肝脏有一定保护作用 ( 管越强等,2010; 周环和管越强,2010) 3.3 复合益生菌对中华鳖免疫和抗氧化的影响益生菌可作为水产动物的免疫刺激剂和免疫佐 剂, 通过非特异性免疫调节因子激发机体免疫功能, 增强机体免疫力和抗病性 ( 李海兵等,2008; 刘君等,2009); 而鱼类免疫防御主要是由抗氧化系统 溶菌酶 补体系统等所组成的非特异性免疫 ( 李亚南等,1995;Tangetal,2002; 艾庆辉和麦康森, 2007) 超氧化物歧化酶是机体中清除自由基的主要酶之一, 能清除多余的活性氧和过氧化物, 减少自由基对正常细胞的损伤, 从而提高机体的抗氧化功能和防病抗病能力 (Koetal,2004) 谷胱甘肽过氧化物酶是机体内广泛存在的一种重要的过氧化氢分解酶, 起到保护细胞膜结构和功能完整的作用 丙二醛是脂质过氧化反应的终产物, 含量的高低能间接反映细胞受损程度 本试验中, 适量的复合益生菌能显著提高中华鳖的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力, 可能是因为该复合益生菌中的乳酸菌具有清除机体羟自由基和过氧化氢的能力 (Ttoetal,2003), 通过产生超氧化物歧化酶和谷胱甘肽来抵抗机体的氧化 ( 孟凡伦等,1998); 但血清中的丙二醛含量无显著差异, 可能是复合益生菌主要通过提升超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性来增强中华鳖的抗氧化能力, 进而使机体内脂质过氧化反应的程度未改变, 与沈文英等 (2009) 的研究结果一致 溶菌酶是水产动物体内一种重要的非特异性防御因子, 特别是对革兰氏阳性菌有着强烈的杀灭作用 ( 郭文婷等,2006) 本试验结果显示, 各试验组溶菌酶活力显著高于对照组, 原因可能是试验所用的复合益生菌菌株均为革兰氏阳性菌株, 细胞壁中粘多糖含量较高, 能诱导吞噬细胞合成和释放更多的溶菌酶 (Olivier,1985), 从而担负起机体防御的机能 4 结论中华鳖基础饲料中添加复合益生菌, 能提高其增重率 降低饵料系数 增强肠道消化酶活力 提高消化效率 促进生长 ; 同时, 复合益生菌能提高中华鳖的非特异性免疫和抗氧化功能, 增强其抗胁迫能力 综合各项指标, 基础饲料中复合益生菌最适添加量为 1000~2000mg/kg 参考文献艾庆辉, 麦康森 鱼类营养免疫研究进展 [J]. 水生生物学报,31(3): 丁贤, 李卓佳 芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长和消化酶活性的影响 [J]. 中国水产科学,11(6):6-11.

5 2015 年第 2 期桂琳等, 复合益生菌对中华鳖生长及血液生化指标的影响 99 丁雪燕, 周凡, 黄富勇, 等 饲料中添加复合芽孢杆菌对三疣梭子蟹生长性能和消化酶活性的影响 [J]. 宁波大学学报,25(1):1-5. 杜宣, 周国勤, 茆健强 种微生态的氨基酸组成及鲤鱼消化酶活性的影响 [J]. 云南农业大学学报,21(3): 付天玺, 许国焕, 吴月嫦, 等 凝结芽孢杆菌对奥尼罗非鱼消化酶活性 消化率及生长性能的影响 [J]. 淡水渔业,38(4): 高凤祥, 郭文, 潘雷, 等 几种益生菌对大菱鲆幼鱼生长及消化酶活性的影响 [J]. 海洋科学,35(1): 高欣 芽孢杆菌对西伯利亚幼鱼摄食生长及肠道菌群的影响 [D]. 石家庄 : 河北师范大学. 管越强, 周环, 张磊, 等 枯草芽孢杆菌对中华鳖生长性能 消化酶活性和血液生化指标的影响 [J]. 动物营养学报,22(1): 胡毅, 谭北平, 麦康森 饲料中益生菌对凡纳滨对虾生长肠道菌及部分免疫指标的影响 [J]. 中国水产科学, 15(2): 华雪铭, 周洪琪, 张宇峰, 等 饲料中添加壳聚糖和益生菌对暗纹东方 幼鱼生长及部分消化酶活性的影响 [J]. 水生生物学报,29(3): 江永明, 付天玺, 张丽, 等 微生物制剂对奥尼罗非鱼生长及消化酶活性的影响 [J]. 水生生物学报,36(6): 李海兵, 宋晓玲, 李, 等 水产动物益生菌研究进展 [J]. 动物医学进展,29(5): 李亚南, 陈全震, 邵健忠, 等 鱼类免疫学研究进展 [J]. 动物学研究,16(1): 刘君, 宋晓玲, 陈惠鑫 益生菌对水产动物的作用研究进展 [J]. 动物医学进展,30(9): 孟凡伦, 马桂荣, 孔健 益生菌制剂在中国对虾养殖中的应用研究 [J]. 山东大学学报,33(1): 沈文英, 余东游, 李卫芬, 等 地衣芽孢杆菌对三角帆蚌消化酶活性 免疫指标和抗氧化指标的影响 [J]. 动物营养学报,21(1): 许国焕, 吴月嫦, 付天玺, 等 微生物制剂对奥尼罗非鱼生长及饲料表观消化率的影响 [J]. 中国饲料,(21): 杨蕙萍, 童圣英, 王子臣 国内外关于水产动物消化酶研究的概况 [J]. 大连水产学院学报,13(3): 周环, 管越强 枯草芽孢杆菌与低聚木糖组合对中华鳖生长 消化酶及血液生化指标的影响 [J]. 水产科学, 29(10): 郭文婷, 李健, 王群, 等 微生态制剂对牙鲆非特异性免疫因子影响的研究 [J]. 海洋科学进展,24(1): GomezR,GeovannyD,MaS.2008.Influenceofprobioticson thegrowthanddigestiveenzymeactivityofwhitepacific shrimp(litopenaeusvannamei)[j].oceanicandcoastal SeaResearch,7: KoYH,YangHY,JangIS.2004.Efectofconjugatedlino leicacidonintestinalandhepaticantioxidantenzymeactiv ityandlipidperoxidationinbroiler[j].asian Australia JouralofAnimalScience,17: SahuM K,SwarnakumarNS,SivakumarK,etal.2008.Pro bioticsinaquaculture:importanceandfutureperspectives [J].IndianJournalofMicrobiology,48: TangM,MaGZ,XuJ.2002.Advancesinresearchoffishim munology[j].journalofimmunology,18(3): TtoM,OhishiK,YoshidaY.2003.Antioxidativeefectsof lacticacidbacteriaonthecolonicmucosaofiron overloa dedmice[j].agriculturefoodchemistry,51(15): OlivierG,EvelynTPT,LalierR.1985.ImmunitytoAero monassalmonicidaincohosalmon(oncorhynchuskisutch) inducedbymodifiedfreund scompleteadjuvant:itsnon specificnatureandtheprobableroleofmacrophagesinthe phenomenon[j].developmentalandcomparativeimmu nology,9: ( 责任编辑万月华 )

6 100 第 36 卷第 2 期水生态学杂志 2015 年 3 月 EfectsofCompoundProbioticsontheGrowthandBlood BiochemistryofTrionyxsinensis GUILin 1,WANGXiao qing 1,2,KANGYin 1,ZENGDan 1,JIANGDi 1,LIAOXue min 1 (1.ColegeofAnimalTechnology,HunanAgricultureUniversity,Changsha ,P.R.China; 2.ColaborativeInnovationcenterforEficientandHealthProductionof FisheriesinHunanProvince,Changde ,P.R.China) Abstract:IndustrialaquacultureofTrionyssinensishasdevelopedrapidlyduetothehighnutrientcontentandeco nomicvalueofthespecies,butithasalsoledtoahigherincidenceofdisease.theabuseofantibioticsontrionys sinensiscreatesproblems,suchasbacterialresistanceanddrugresidues,thatnegativelyafectthehealthydevelop mentofthisaquaculturesector.probiotics,asanewdietarysupplementthatarenon toxic,don tleadtoresistance andleavenoresiduecould,tosomeextent,replaceantibiotics.theaim ofthisinvestigationwastoevaluatethe efectsofcompoundprobioticdoseonthegrowthrateandbloodbiochemistryoftrionyssinensissoastousecom poundprobioticsmoreefectivelyandprovideatheoreticalbasisforthehealthyculturingoftrionyssinensis.the probioticsusedwerecompoundedinourlaboratoryandwehaveappliedforapatent(number ). Theprobioticcomponentsincludebacilussubtilis,bacilusnato,LactobaciluscaseiandCandidautilis.Testani malsofmeaninitialweight(227.47±14.42)gwereselectedforthe140dexperimentandfedasoft sheledturtle dietthreetimesadaysupplementedwithdiferentlevelsofcompoundprobiotics(groupi:0mg/kg;group I: 500mg/kg;Group I:1000mg/kg;GroupIV:2000mg/kg).Eachgroupconsistedof1200individualsand eachgroupwastestedintriplicate.thewatertemperature,foodconsumptionandmortalitywererecordedeach day.afterthetrialwascomplete,15individualsfromeachgroupwereselectedrandomlytoevaluatedigestiveen zymeactivityintheintestineand10individualsforeachgroupwereselectedandfasted24htomeasurebloodbio chemicalindicesincludingtotalprotein(tp),totalcholesterol(cho),triglyceride(tg),glucose(glu), bloodureanitrogen(bun),globulin(glb),albumin(alb),lysozyme(lzm),methanedicarboxylicaldehyde (MDA),superoxidedismutase(SOD),glutathioneperoxidase(GSH PX),glutamicoxalacetictransaminase (AST)andalaninetransaminase(ALT).Resultsindicatethatweightgainrate(WGR),specificgrowthrate (SGR)andsurvivalrateincreasedsignificantlyandthebaitcoeficientdecreasedsignificantlycomparedtothecon trolgroup(p<0.05).thehighestweightgain(29.25%),specificgrowthrateandsurvivalrateaswelasthe lowestbaitcoeficientwasdisplayedbygroup I.Theactivitiesoflipase,amylase,tryptaseincreasedsignificantly withtheadditionofcompoundprobiotics(p<0.05),buttheactivityofamylasesignificantlydecreasedingroup IVwitha2000mg/kgcompoundprobioticsupplement.ThecontentsofCHO,BUNandtheactivityofALTinser umsignificantlydecreased(p<0.05),andtheleveloftgsignificantlyincreased(p<0.05),whilethecontent oftp,glb,alb,glu,mdaandtheactivityofastinserumamongalexperimentalgroupsshowednosignifi cantdiference(p>0.05).theactivitiesoflzm,gsh PXandSODinserumsignificantlyincreased(P<0.05) ingroupⅡ andgroupⅢ,butactivitiesdeclinedingroupiv(p>0.05).basedonthesefindings,weconclude thatproperlycompoundedprobioticsupplementationtothebasaldietoftrionyxsinensiscanimprovegrowth,in creasedigestiveenzymeactivity,enhancenonspecificimmunityandantioxidantcapacityanddecreasethebaitcoef ficient.theappropriatelevelofcompoundprobioticsaddedinthebasaldietis mg/kg. Keywords:Trionyxsinensis;compoundprobiotics;growth;bloodbiochemicalindices

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