刘恕, 等 抗乳腺癌新药 palbociclib 65 氧化反应 格氏试剂甲基溴化镁存在 引发剂过氧化二苯甲酰 B 作用下与 - 溴代丁 还原反应 Mn 4甲基吗啉 二酰亚胺 B 发生溴代反应 随后在氧杂吖丙啶 下的亲核加成反应以及 --氧化物 M 作用下发生氧化反应生成亚砜 与化合物 /四丙基高钌

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1 64 RGRE I ARMACEUTICAL CIECE 05,9 (8): 世界上市新药 WRLD EW DRUG ARVAL 抗乳腺癌新药 palbociclib 刘恕, 徐军, 崔毅, 宿央央 ( 药渡经纬信息科技 ( 北京 ) 有限公司, 北京 00085) [ 摘要 ] albociclib 是 05 年 月 日获美国食品药品监督管理局加速批准的乳腺癌新药, 联合来曲唑作为以内分泌治疗为基础的初始方案, 用于治疗绝经期女性雌激素受体阳性 (ER ) 人表皮生长因子受体 阴性 (ER - ) 的绝经期女性晚期乳腺癌 albociclib 是首个口服 靶向性 CDK4/6 抑制剂, 阻止细胞周期从生长期 (G 期 ) 到 DA 复制期 ( 期 ) 的转变, 从而抑制肿瘤增殖, 其上市为晚期乳腺癌患者提供了新的治疗选择 介绍 palbociclib 的化学合成 临床前药理学研究 临床研究及专利保护情况等, 为抗乳腺癌新药研发提供参考 [ 关键词 ] palbociclib; 细胞周期蛋白依赖性激酶 4/6 抑制剂 ; 乳腺癌 [ 中图分类号 ] R979. [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] (05) albociclib a ew Drug Approved for Advanced east Cancer LIU hu, XU Jun, CUI Yi, U Yangyang (harmacodia(beijing) Co., Ltd, Beijing 00085, China) [Abstract] albociclib was approved by the U.. ood and Drug Administration (DA) on eburary rd, 05 in combination with letrozole for the treatment of postmenopausal women with estrogen receptor positive (ER ), human epidermal growth factor receptor negative (ER - ) advanced breast cancers as initial endocrine-based therapy. albociclib is an oral CDK4/6 inhibitor which block sprogression of the cell from growth period (G phase) into the DA replication period ( phase) of the cell cycle and thus inhibits the proliferation of tumor cells. Its marketing provides a new treatment option for patients with advanced breastcancer. The chemical synthesis, preclinical pharmacology, clinical trialsand patent portfolio of palbociclib were introduced in this article, so as to provide references for research and development of new breast cancer drugs. [Key words] palbociclib; CDK4/6 inhibitor; breast cancer albociclib( 商品名为 Ibrance,) 是由辉瑞公司 (fizer) 研发的治疗乳腺癌新药, 于 05 年 月 日获美国食品药品监督管理局 (DA) 加速批准上市 albociclib 为全球首个细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 4/6 抑制剂, 与来曲唑联合作为以内分泌治疗为基础的一线疗法, 用于治疗未曾接受过系统治疗的雌激素受体阳性 (ER ) 人表皮生长因子受体 阴性 (ER - ) 的绝经期女性晚期乳腺癌 [] albociclib 的英文名为 6-acetyl-8-cyclopentyl- 5-methyl--{[5-(piperazin--yl)pyridin-yl]amino} pyrido[,-d]pyrimidin-7(8)-one; 分子式为 C ; CA 登记号为 albociclib 为胶囊剂 (75 mg 00 mg 或 5 mg), 推荐起始剂量为 5 mg(qd,po), 与食物同服, 服用 d 后停药 7 d 建议根据个体安全性和耐受性中断和 / 或剂量减低给药 合成方法. 方法 以 4- 氯 -- 甲硫基嘧啶 -5- 甲酸乙酯 () 和环戊胺 () 为原料, 经碱性条件下的胺化反应 LiAl 4 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o 年 8 月第 9 卷第 8 期

2 刘恕, 等 抗乳腺癌新药 palbociclib 65 氧化反应 格氏试剂甲基溴化镁存在 引发剂过氧化二苯甲酰 B 作用下与 - 溴代丁 还原反应 Mn 4甲基吗啉 二酰亚胺 B 发生溴代反应 随后在氧杂吖丙啶 下的亲核加成反应以及 --氧化物 M 作用下发生氧化反应生成亚砜 与化合物 /四丙基高钌酸铵 TA 氧化反应 5 步反应以 5% 中甲酸乙酯到甲基酮的转变 4 发生胺化反应后再与锡试剂 6 发生 till 反应 最 的收率实现了化合物 8 后 在酸性条件脱除保护基 即以 8.4% 的总收率得到 生成了中间体 在 a 的作用下先与膦酰 8 中间体 [-] 三 乙 的盐酸盐 见图 Witting-orner 反 应 再 经 palbociclib 基 乙 酸 酯 9 发 生 在 0 0 分子内环化反应以 9% 的收率得到中间体, 四氢呋喃, 四氢呋喃 LiAl Mn, C 三乙胺 4 室温, 8%,00% 室温 室温, 00% C TA, MeMg, 四氢呋喃 M, 四氢呋喃, 4 至回流, 4 a,, 90% 9% 70% B, B, 4, - 二甲 C, 基甲酰胺, 回流 甲苯 室温 4, 66% 8% nbu nbu 5 6 ( ), C 气 nbu d(h)nbu, 回流 nbu 4, 甲苯 nbu nbu 室温, 9% nbu 78% nbu nbu nbu nbu nbu nbunbu nbu 7 图 albociclib 的合成方法 igure albociclib synthesis: route 的收率得到中间体 在异丙基溴化镁作用下与化合. 方法 以 5- 溴 -,4- 二氯嘧啶 8 和环戊胺 为起始 物 4 发生胺化反应 随之与化合物 经 eck 反应得 原料 经碱性条件下的胺化反应 eck 反应 醋酸酐条 到中间体 4 酸性条件下脱除 4 中的保护基 最终 件下的分子内环化反应以及 B 溴代反应 4 步以 5% 以 5% 7% 的总收率得到 palbociclib 见图 [4-5] 05 年 8 月 第 9 卷 第8期 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o. 8

3 66 刘恕, 等 抗乳腺癌新药 palbociclib 0 5 ) 甲磺酸,, 丙酮, 40 ~ 55 ), 0 ~ 5 5% 氢氧化钠水溶液 98% 5 60 ~ 65 9% 6 96% 临床前药理学研究 抑制剂 通过抑制 CDK4/6 对成视网膜母细胞瘤蛋白 - retinoblastomaprotein Rb 的磷酸化作用 从而阻止 肿瘤细胞进入细胞周期循环 抑制肿瘤细胞的增殖或 [6-7] 见图 albociclib 的体外 诱导肿瘤细胞的凋亡 药效学 体内和体外药代动力学参数 药物相互作用 [8] 及安全性评价数据见表 图 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o. 8 4 albociclib 的作用机制 igure Acting mechanism of palbociclib 5% d/c,, 乙酸乙酯, 4 ~ 47 7 图 albociclib 的合成方法 igure albociclib synthesis: route CDK4/6 激酶是细胞周期的关键调节因子 可触发 细胞周期从生长期 G 期 到 DA 复制期 期 的 乳腺癌中 CDK4/6 转变 在雌激素受体阳性 ER - 激酶处于过度活跃状态 albociclib 为选择性 CDK4/6 - 三乙胺, Li, 二甲亚矾 4 ) pd(ac), 三乙胺, - 甲基吡咯烷酮 65 B, 乙二酸 (M), C C, 60,, 5 乙醇 三乙胺 65 ) Ac,M, 8% 75% 84% 8 9 d(ac), 双 (- 二苯基膦 ) 苯醚,, 4, i-rmg, 四氢呋喃, - 二异丙基乙胺 0 ~ 60 n-bu, % ~ 80% 9% 05 年 8 月 第 9 卷 第8期

4 刘恕, 等 : 抗乳腺癌新药 palbociclib 67 表 albociclib 的临床前药理学数据 Table reclinical pharmacology data of palbociclib 评价参数 数值 靶点抑制常数 (K i ) nmol L - (CDK4/cyclin D) nmol L - (CDK4/cyclin D) 体外药效学 与其他靶点结合的 K i 90 nmol L - ( 大鼠神经烟碱受体 ) 细胞增殖抑制 (IC 50 ) 达峰时间 (T max ) 4 nmol L - (MDA-MB-75) nmol L - (MDA-MB-74) 6 h 体内药代动力学 (5 mg,qd,po) 达峰浓度 (C max ) 4. ng ml - 消除半衰期 (T / ).4 h 药时曲线下面积 (AUC) 88 ng h ml - 生物利用度 () 体外肝细胞 ( 肝微粒体 ) 代谢 渗透系数 (Caco- 细胞 ) A 在肝细胞中可代谢成多种代谢物 A 体外药代动力学 血浆蛋白结合率 (B) 8.9% ~ 86.% 药物相互作用 安全性评价 注 :A 表示未提供 外排比 (ER) 是否是 -gp 的底物 CYA CYA CYD6 CYC9 CYC9 Q-T 间期影响 (QTc) 鼠伤寒沙门菌回复突变试验 (AME) 微核试验 (MICR) A 是无抑制时间 - 依赖性抑制剂无抑制无抑制无抑制无变化 (5 mg,qd,po) 阴性阳性 临床研究 albociclib 的获批是基于一项随机开放的多中心 Ⅱ 期临床试验结果 [8], 这项研究共纳入 65 名未接受其他治疗的 ER /ER - 晚期乳腺癌患者, 主要比较了 palbociclib 联合来曲唑治疗或来曲唑单独治疗的疗效与安全性, 无进展生存期 (progression-free survival, ) 作为首要终点指标 (= ) 结果显示, palbociclib 来曲唑联合治疗组患者 (n=84) 的中位 为 0. 个月 (95% CI 为.8~7.5 个月 ), 而来曲唑单独治疗组 (n=8) 患者的中位 仅为 0. 个月 (95% CI 为 5.7~.6 个月 ), 两组比较的风险比为 (95% CI 为 0.9~0.748) 研究显示, 在安全性方面, palbociclib 来曲唑联合治疗组常见的不良反应为中性粒细胞减少, 其中有 48% 的患者出现了 度中性粒细胞减少 ; 其他常见的不良反应还包括白细胞减少 贫血和疲劳等 ALMA- 是首项关于 CDK4/6 抑制剂 palbociclib 治疗 R / ER - 晚期乳腺癌的随机 双盲 多中心 Ⅲ 期临床研究, 该研究入组了 5 例转移性乳腺癌患者, 随机分为 氟维司群 安慰剂组 ( 对照组 ) 或 氟维司群 palbociclib( 治疗组 ), 因研究提前达到主要研究终点 期而被提前终止 [9] 结果显示, 治疗组和对照组的 期分别为 9..8 个月 (< ); 临床获益率分别为 4% 和 9%(= ), 随访中死亡 05 年 8 月第 9 卷第 8 期 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o. 8

5 68 刘恕, 等 : 抗乳腺癌新药 palbociclib 病例仅 8 例, 未达总生存 () 分析事件数 该研究值得关注的是治疗组的血液学副反应, 表现为中性粒细胞减少 ( 发生率达 79%), 其中 4 级毒性反应发生率分别为 5% 和 9%; 贫血和血小板减少症发生率分别为 6% 和 9%, 显著高于对照组 因此, 治疗组方案推迟或剂量降低率分别 % 和 %, 而对照组分别仅 % 和 %, 但中断治疗比例两组相似 (.6% 和.7%) 4 专利布局 4. Ibrance 化合物专利的全球布局 Ibrance 作为辉瑞公司首个上市的 CDK4/6 抗癌新药, 早在 00 年就以 CT 申请对其化合物专利进行了战略市场保护 ( 公开号 W0066A), 并陆续在欧州 (E) 美国(U) 日本(J) 中国(C) 等药品主流市场获得专利授权 ( 见表 ) 表 Ibrance 化合物专利的全球布局 Table Worldwide patent portfolio of compound in Irbance 国家 / 组织代码 公开 / 公告号 申请日 授权公告日 专利失效日 W W0066A / / U U6966B U U708489B U U745668B E E4704B J J49696B C C090604B C C09564B C C000857B Ibrance 外围专利的全球布局在研发过程中, 辉瑞公司陆续申请了 Ibrance 的外围专利 ( 见表, 以专利族统计 ) 从申请日来看, 从 00 年开始布局化合物专利到 004 年申请药用盐类及晶型专利, 至 005 年进行适应证保护, 基本为 Ibrance 上市扫清了障碍 值得注意的是,04 年, 辉瑞公司对 Ibrance 的原料药 (AI) 形式进行了晶型保护 ( 公开号 W048588A) 另外, 尚未出现制剂专利申请, 是否为 Ibrance 的市场保护产生实质性效果, 尚有待观察 表 Ibrance 外围专利的全球布局 Table Worldwide surrounding patent portfolio of Ibrance 公开号 申请日 公开日 技术分类 W0066A 结构通式 W A 盐类 / 晶型 W A 适应证 / 联合用药 W A 适应证 W008057A 制备方法 W048588A 晶型 4. Ibrance 在中国的专利申请情况辉瑞公司选择性地将上述专利申请引进中国 ( 见表 4), 其中化合物专利已获得授权, 具有对该药 的绝对保护 具体来说, 辉瑞公司通过放弃较大保护范围先使得 Ibrance 的结构式获得授权 ( 公告号 C000857B), 再采用分案方式对其结构母核 ( 结 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o 年 8 月第 9 卷第 8 期

6 刘恕, 等 : 抗乳腺癌新药 palbociclib 69 构通式 ) 进行了保护, 以实现专利对产品保护的最大覆盖 另外, 对其磺酸盐及晶型亦有专利保护 值得注意的是, 基于 AI 为非盐形式 (free base), 而作为 CT 申请的针对于 AI 的申请尚未丧失进入中国的权利 ( 公开号 W048588A), 需继续跟踪以评估其潜在风险 表 4 Ibrance 在中国的专利保护情况 Table 4 atent protection of Ibrance in China 公开号 公告号 法律状态 申请日 公告日 技术分类 C000857A C000857B 授权 结构式 C090604A C090604B 授权 结构通式 C09564A C09564B 授权 结构通式 C8595A C8595B 授权 盐类 / 晶型 C0589A / 无权 / 制备方法 5 albociclib 同靶点药物目前, 有多个 CDK4/6 抑制剂处于不同研发阶段 ( 见表 5) [0-] 其中, 个药物处于 Ⅲ 期临床,4 个药物处于 Ⅱ 期临床, 个药物处于 Ⅰ 期临床, 个药物在 Ⅰ 或 Ⅱ 期临床停止研究 表 5 处于不同研发阶段的 CDK4/6 抑制剂 Table 5 CDK 4/6 inhibitors in different development stages 药物名称 / 代码 研发公司 研发阶段 albociclib() 辉瑞已上市 LEE0(8) 诺华 Ⅲ 期临床 Abemaciclib(9) 礼来 Ⅲ 期临床 BAY00094(0) 拜耳 Ⅱ 期临床 Dinaciclib() 默克 Ⅱ 期临床 AT759() Astex/ 诺华 Ⅱ 期临床 iramal Ⅱ 期临床 GT8- G Therapeutics Ⅰ 期临床 lavopiridol CI Ⅱ 期临床停止研究 446A-05 iramal Ⅰ 期临床停止研究 AG-04() 辉瑞 Ⅰ 期临床停止研究 LEE0 诺华与 Astex 公司合作开发的 LEE0(ribociclib) [], 目前正开展全球 Ⅲ 期临床研究 首个 Ⅲ 期临床试验 MALEEA ALEEA- 始于 0 年 月, 评估 LEE0 来曲唑相比安慰剂 来曲唑用于 ER 阳性 ER 阴性的晚期或转移性乳腺癌绝经期女性患者的疗效 第二项 Ⅲ 期试验 MALEEA ALEEA-7 始于 04 年 月, 评估 LEE0 与他莫昔芬和戈舍瑞林或与非甾体芳香酶抑制剂和戈舍瑞林联用, 用于 ER 阳性 ER 阴性的晚期乳腺癌绝经前女性患者的疗效 预计 06 年诺华将向监管机构提交 LEE0 用于 ER 阳性 ER 阴性绝经期女性乳腺癌患者的上市申请,08 年提交其用于绝经前女性乳腺癌患者的上市申请 - 05 年 8 月第 9 卷第 8 期 rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o. 8

7 640 刘恕, 等 : 抗乳腺癌新药 palbociclib 5. Abemaciclib 礼来公司的 abemaciclib [] 目前正处在 Ⅲ 期临床研究阶段 该 Ⅲ 期临床试验始于 04 年 8 月, 以评估 abemaciclib 联合氟维司群对未接受过化疗的 绝经期乳腺癌女性患者的治疗效果 Abemaciclib 的 Ⅰ 期数据显示, 其联合用药对肿瘤的疾病控制率可达 7.%, 肿瘤病灶面积缩小 0%, 且没有患者因不良反应中途退出 礼来公司指出, 由于其他 CDK4/6 类药物的毒性作用只能间歇给药, 而 abemaciclib 可持续给药, 这是 abemaciclib 的竞争优势 6 结语 albociclib 是一种口服的高选择性的 CDK4/6 抑制剂, 通过抑制细胞周期从 G 期进展到 期从而阻断细胞 DA 合成 albociclib 作为 05 年第一个获得美国 DA 加速批准的抗乳腺癌新药, 与来曲唑联合用药可显著改善 ER /ER - 女性绝经后乳腺癌患者的无进展生存期, 为晚期乳腺癌患者提供了新的治疗选择 [ 参考文献 ] [] fizer Inc. IBRACE (palbociclib): U prescribing informa- [8] inn R, Crown J, Lang I, et al. The cyclin-dependent kinase 4/6 tion.05[eb/l]. ( 05-0-)[ ]. inhibitor palbociclib in combination with letrozole versus letrozole alone fda.gov. as first-line treatment of oestrogen receptor-positive, ER-negative, [] Barvian M, Booth R J, Quin III J, et al. -(pyridine--ylamino)-pyrido advanced breast cancer (ALMA-/TRI-8): a randomised phase [,d]pyrimidin-7-ones: W0066A [] study[j]. Lancet ncol, 05, 6(): 5-5. [] harpless E, Roberts J, Wong K, et al. Cyclin dependent kinase [9] Turner C, Ro J, André, et al. albociclib in hormone-receptor- inhibitors and methods of use: W0075A [] positive advanced breast cancer[j]. Engl J Med, 05, 7(): 09- [4] Chekal B, Ide D. olid forms of a selective CDK4/6 inhibitor: 9. W048588A [] [0] ánchez-martínez C, Gelbert L M, Lallena M J, et al. Cyclin dependent [5] Beylin V G, Blackburn A C, Erdman D T, et al. Isethionate salt of a kinase (CDK) inhibitors as anticancer drugs[j]. Bioorg Med Chem Lett, selective CDK4 inhibitor: W [] , 5(7): [6] inn R, Dering J, Conklin D, et al. D 099, a selective cyclin [] Vidula, Rugo. Cyclin-dependent kinase 4/6 inhibitors for the D kinase 4/6 inhibitor, preferentially inhibits proliferation of luminal treatment of breast cancer: a review of preclinical and clinical data [J]. estrogen receptor-positive human breast cancer cell lines in vitro [J]. in east Cancer, 05 Jul 6. doi: 0.06/j.clbc [Epub east Cancer Res, 009, (5): R77. ahead of print]. [7] ry D W, arvey J, Keller R, et al. pecific inhibition of cyclin- [] Dukelow T, Kishan D, Khasraw M, et al. CDK4/6 inhibitors in breast dependent kinase 4/6 by D 099 and associated antitumoractivity in cancer[j]. Anticancer Drugs, 05, 6(8): human tumor xenografts[j]. Mol Cancer Ther, 004, (): rog harm ci Aug. 05 Vol. 9 o 年 8 月第 9 卷第 8 期

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