水 产 学 报 卷 随着集约化养殖的发展 人为因素对养殖水体盐度的影响日益凸显 再加上一些不稳定的自然因素 致使鱼类经常遭受盐度突变的胁迫 造成机体生理机能紊乱 刺激机体产生过多的氧化自由基 氧化脂质和蛋白质 对细胞膜 遗传物质及其他细胞重要组分造成氧化伤害 抑制一些酶的活性 另外 盐度突变时 硬骨
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- 突列 田
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1 第 卷第 期 年 月 水 产 学 报 文章编号! #$% 不同维生素 水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较 张晨捷 张艳亮 彭士明 施兆鸿 高权新 中国水产科学研究院东海水产研究所 农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点试验室 上海 上海海洋大学水产与生命学院 上海 摘要 维生素 在鱼类繁殖 生长代谢 抗氧化能力和免疫机能等方面有至关重要的作用 为探究饲料 添加量对云纹石斑鱼低盐度胁迫下抗氧化和渗透压调节功能的作用 本实验设计 和 3 等 个 水平饵料添加量 依次为 '! 组 饲喂云纹石斑鱼幼鱼 1 然后进行 低盐度 胁迫实验 测试皮质醇 葡萄糖 2 乳酸! 等血清生化指标 超氧化物岐化酶! 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 2, 总抗氧化能力 和丙二醛! 等抗氧化指标 以及鳃 ( (, 酶 (, 酶活力等 结果显示 血清 含量最高为盐度胁迫后 - ) 最低为胁迫前 - ) 2 含量最高为盐度胁迫后 - 最低为养殖前 -! 含量最高为低盐度胁迫前 - 最低为胁迫后 组 - 说明 的添加可以增强云纹石斑鱼抗应激的能力 且在 3 '! 的添加范围 效果较好 血清!2, 活力 和! 含量与投喂饲料中 水平密切相关! 最高为胁迫前 - 最低为胁迫后 - 最高为养殖前 - 最低为胁迫后 - 2, 最高为胁迫前 - 最低为胁迫后 -! 最低为胁迫前! - ) 最高为胁迫后 - ) 饲料中添加 3 水平 对其抗氧化能力有增强作用 可增强 活力 当 添加量为 3 时 低盐度胁迫对 影响较小 而添加 3 水平 可增强云纹石斑鱼 (, 酶活力 研究表明 饲料中添加 3 范围的维生素 可以增强云纹石斑鱼的机体活力 抗应激及环境胁迫能力 关键词 云纹石斑鱼 维生素 盐度胁迫 抗氧化 渗透压调节中图分类号 文献标志码 云纹石斑鱼 隶属鲈形目,-.%$.-( 科 -.)1- 石斑鱼属 又叫电纹石斑鱼 真油斑 体侧有 条暗棕色斑带 为暖温性中下层鱼类 广泛分布 于东海 南海以及台湾沿海 由于其生长较快 肉质鲜美 且比点带石斑鱼 龙胆石斑鱼以及 一些杂交石斑鱼种类更耐低温 养殖前景看好 自 世纪末期开始 国内陆续对云纹石斑鱼进行了各项科学研究 主要集中于繁育技术 仔鱼发育 形态比较 核型研究 典型 疾病等方面 而在环境因子和抗应激方面研究不多 收稿日期 && 修回日期 && 资助项目 国家科技支撑计划 '!' 通信作者 施兆鸿 (()-/!#$%&'
2 水 产 学 报 卷 随着集约化养殖的发展 人为因素对养殖水体盐度的影响日益凸显 再加上一些不稳定的自然因素 致使鱼类经常遭受盐度突变的胁迫 造成机体生理机能紊乱 刺激机体产生过多的氧化自由基 氧化脂质和蛋白质 对细胞膜 遗传物质及其他细胞重要组分造成氧化伤害 抑制一些酶的活性 另外 盐度突变时 硬骨鱼类最直接反应即为渗透压调节 鳃的重要功能是离子调节 ( (, 酶 和 (, 酶是鳃部重要的离子调节酶类 2' 进行测定 实验饲料组分和测得的营养组成见表 表 实验饲料组成 #!$%',*'(.(''-.*(,.!+(. 营养组成水平 干重 饲料成分百分率 )/./) -- %)-)/ -.%-)/ %(/ 1. /-. 酪蛋白粗蛋白 %(-) %.1-./-) 玉米淀粉粗脂肪 %.) (/.% %.1-1 维生素 是细胞膜中主要的脂溶性抗氧化物 是细胞膜和亚细胞结构中重要的脂质断 鱼油 $( 粗灰分 %.1-( 链抗氧化剂与自由基清除剂 也与机体抗病功能密切相关 对特异和非特异性免疫系统的功能都有增强作用 还可有效地增强水产动物对密度和温度胁迫的抵抗能力 因此 在集约化养殖鱼类饲料中添加适量 是十分必要的 除 外 在鱼类抗氧化防御系统中还存在许多抗氧化酶类 超氧化物歧化酶! 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 2, 是其主要代表 本研究通过在饲料中添加 探讨不同维生素 水平饲喂云纹石斑鱼幼鱼后 血清生化 抗氧化指标和渗透压调节能力在低盐度胁迫下的变化情况 旨在为云纹石斑鱼抵抗外界环境应激与饲料 添加量提供理论基础和科学依据 材料与方法 实验用鱼及饲料制备云纹石斑鱼幼鱼由课题组 年在福建东山岛繁育获得 从养殖池中挑选平均体质量为 - 体表无伤 体色正常的云纹石斑鱼作为实验对象 饲料以 醋酸酯 罗氏公司提供 作为 添加源 设 个不同的 水平 '! 和 3 实测 有效含量依次为 '! 和 3 以微晶纤维素为填充剂 使各实验组饲料其他营养水平保持一致 所有饲料经过 目筛 且充分混匀后用颗粒机制作成直径为 的颗粒饲料 置于 冰箱保存备用 实验饲料中的粗蛋白 粗脂肪 粗灰分 水分含量分别采用 2' 2' 2' 大豆油 (5-) 复合维生素 / /) 5 复合矿物质 /)-. 5 羧甲基纤维钠 %.5-/ %-(-(1 纤维素 %-(- % 诱食剂 /.%/)/ % 注 复合维生素 5 复合矿物盐 % 诱食剂参照文献 推荐的石斑鱼复合维生素 复合矿物质和诱食剂 略作修改 复合维生素 混合物 ' ' 泛酸钙 烟酸 ' 叶酸 肌醇! 生物素 ' 加纤维素填充到 5 复合矿物盐 3 饲料 乳酸钙 磷酸二氢钠 硫酸镁 柠檬酸铁 氯化钴 硫酸锰 碘化钾 氯化铝 硫酸铜 氯化钾 氯化胆碱 硒酸钠 纤维素 % 诱食剂 饲料 天冬氨酸 苏氨酸 丝氨酸 谷氨酸 缬氨酸 蛋氨酸 异亮氨酸 亮氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸 赖氨酸 组氨酸 脯氨酸 丙氨酸 精氨酸 牛磺酸 甘氨酸 甜菜碱 /-( /) /.-5 )-./.-%/.%/)/(-.-(/ 1$-1 /-.-.$--1 $.%.-$-.-)%-.-%-)1-1 /) /.- /.- /) ' /) ' /) %% )//-)/-)%/)%%1 /) ' $% %1 )(/ /) /) /)! 5/) /) ' ).-1-)/(-.-1/-1 / %-(- / 5 )-./ /%%%//-, $-.%%/./- ) %)-%.1- (1 (--)/- %-(- %/.%/)/ 1-/(./%%1 /.-))-(-.)-/% %1 )--/))-(-%)--%)- /.()--)))-()-(/1)-.)- ))-.))-/.)-%)- 5-/)!#$%&'
3 期张晨捷 等 不同维生素 水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较 实验条件与设计实验在浙江省舟山市水产研究所养殖基地内进行 将 尾云纹石斑鱼幼鱼分别放入 个直径 深度 的网箱中 网箱置于 的圆形水泥池中 放养密度为 尾 网箱 每个 水平设 个重复 正式实验开始前进行 1 的适应性饲养 适应期间所有网箱中的云纹石斑鱼统一饲喂同一种等量市售石斑鱼饲料 预饲 1 后开始进行实验 实验周期为 1 实验期间对云纹石斑鱼经行饱食投喂 具体方法为饲养实验前 周每天按照鱼体总重的 * 投喂 后 周按 * 投喂 同时参照前一天情况调整投喂量 每天投喂 次 实验期间养殖用水为暗沉淀后沙滤处理的天然海水 盐度 不间断充气 水温为 - 为 - 溶氧量 换水量为 * 1 养殖实验开始前随机选取 尾鱼作为初始样品 ) 作为养殖前 组 养殖实验结束后 停止投喂饵料 后从每个网箱中随机捞取 尾作为盐度胁迫前样品 ) 低盐胁迫实验在玻璃纤维桶中进行 桶中海水体积为 用曝气后自来水配置 盐度海水 从每个网箱中随机捞取 尾云纹石斑鱼放入 盐度桶 ) 为验证网箱至纤维桶的环境转变是否影响实验结果 设置 盐度对照 每 组 个重复 每组随机取 尾分别放入 个桶内 ) 作为盐度胁迫对照样品 每个桶盐度胁迫起始时间控制在 ) 左右 以便与 后样品采集时胁迫时间一致 样品采集盐度胁迫前实验用鱼放入溶有丁香油 的海水中短暂麻醉 随即在准备好的冰盘上进行样品采集工作 盐度胁迫后为避免捞取应激 直接滴入丁香油至实验桶中进行短暂麻醉 用 无菌注射器尾静脉采血 置于无菌离心管中 静置.) 离心 ) 取其上清液 保存备用 取云纹石斑鱼幼鱼两侧第 鳃弓上的鳃丝放在有冰块的解剖盘上 用生理盐水润洗并用滤纸片吸干水分后 保存备用 用于 ( (, 和 (, 活性测定 血清生化指标测定皮质醇 采用! (./(( 试 剂盒 取血清 在华东电子!2 酶标仪上 ) 处测定! 根据制备的标准曲线 计算样本含量 单位为 ) 葡萄糖 2 采用菲林法 取样 加相应试剂 水浴 ) 蒸馏水调零 ) 波长 % 光径 % 内径比色皿测各管! 值 单位为 乳酸! 采用乳酸脱氢酶特异反应法 取血浆 加入酶工作液 染色剂 终止剂后混匀 ) % 光径 双蒸水调零 测各管吸光度值 单位为 血清抗氧化指标 鳃! > # 和! # 活力测定血清中的超氧化物歧化酶! 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 2, 活力 总抗氧化能力 以及丙二醛! 含量采用南京建成生物研究所的试剂盒测定! 活力采用黄嘌呤氧化酶法 活力采用 反应比色法 2, 活力检测采用 2 浓度降低反应比色法 采用氧化反应吸光法! 采用硫代巴比妥酸缩合反应比色法 鳃 ( (, 酶 与 (, 酶活力测定, 酶分解, 生成!, 和无机磷 测定无机磷含量可判断, 酶活力高低 无机磷测定采用钼蓝法, 酶活力单位./ 每毫克组织蛋白中, 酶 分解, 产生 无机磷的量 同时 用考马斯亮蓝法测定鳃组织的蛋白质含量 以计算, 酶比活力 8 数据处理数据以平均值 - 标准差 -) -! 表示 采用, 软件对云纹石斑鱼幼鱼各项指标数据进行统计与分析 运用单因素方差分析 )-& 先进行方差齐性检验 不满足方差齐性时 对数据进行自然对数或平方根转换 采用!)%) 氏进行多重比较 用 检测检验盐度胁迫前后的变化 * 为存在显著性差异 用 %- 绘制图表 结果 血清皮质醇 水平低盐胁迫时 不同 水平饲料喂养的云纹石斑鱼幼鱼血清 含量变化情况如图 所示 实验中盐度胁迫后 组血清 含量最高为!#$%&'
4 ''' #)$ 水'产'学'报! 卷!$+* #&! # AM '! 盐 度 胁 迫 前, 组 血 清 的增加程度最大!B%%&# ) 低盐胁迫 ) H 后!& -$含 量 最 低 为 #%)! # AM ') -$ 组血清 '3含量出现显著上升!而 -(3(,组则出 含量随饲料 中.,添 加 量 增 加 而 呈 降 低 趋 势! 低 现显著下降!B %%& # % 此 时! &( 9组 显 著 高 于 盐胁迫前!&组显著 高 于 养 殖 前 (3 和,组%而 3(,组!B %%&# ) 盐度 胁 迫 后 & 组 显 著 高 于 -( 3(, 组! B %%&# ) 较于养 殖 前 组! 各 实 验 组 值 均 有 所 升 高!各.,组在低盐胁迫 ) H 后!血清 -$含量都 有所 上 升! 其 中 &(,组 胁 迫 前 后 存 在 显 著 差 异!B %%&# ) 图 '&低盐胁迫对云纹石斑鱼 幼鱼血清葡萄糖含量的影响 L '&5K 9 9P 3 1 J 91 K D A Q H 1 3+# 图 $&低盐胁迫对云纹石斑鱼 幼鱼血清皮质醇含量的影响 不同字母表示各组 间 存 在 显 著 差 异!B%%& #! 星 号 表 示 胁 迫前后存在显著差异!下同 L $&5K 9 9P 3 1 J 91 K D Q H 1 3+# 3 A AI MA AI / H / H AI!B %%&#! H H / /Y AM '%'&血清葡萄糖$ /8f% 水平 不同.,水 平 的 饲 料 饲 养 云 纹 石 斑 鱼 幼 鱼 &) I!血清 P'#含量在低盐胁迫 ) H 后变化情况参 见图 $) 盐度 胁 迫 后 & 组 血 清 P'# 含 量 最 高 为 #)*) %# / '!养 殖 前 组 含 量 最 低 为 图 (&低盐胁迫对云纹石斑鱼 幼鱼血清乳酸含量的影响 L (&5K 9 9P 3 1 J 91 K D 3 3 C Q H 1 3+# '%)&血清超氧化物歧化酶$ Rd!% 活力 +% %!*# / ') 在 &) I 不 同 水 平.,饲 云纹石斑鱼幼鱼血 清 *3活 力 在 &) I 不 同 养实验后!云纹石斑鱼幼鱼血 清 P'#含量变化 不 水平.,饲喂 以及 ) H 低盐 胁迫 后的 变化 情 况 如 明显!C% %&# %低盐胁迫 ) H 后!&(9和 -组血 图 * 所示) 盐度胁迫 前 -组 血 清 *3 活 力 最 高 清 P'#含量显著增加!B% %&#!三者含量随., 为#%&$ %+# # '!胁 迫 后 &组 含 量 最 低 添加 量 增 加 而 降 低! 且 三 者 间 存 在 显 著 差 异 为 ##$! $!% # # ') 在 不 同.,水 平 饲 料!B% %&#!而 3(,组变化不明显!C% %&# ) 饲喂 &) I 后!&组血清 *3活 力 出 现 显 著 下 降! '%(&血清乳酸$ 8!% 水平 -(3和,组出现显著增强!B %%& #!-(3和, 云纹石斑鱼幼鱼用不同.,水平饲 料饲 喂 &)! 组差异不大!三者显著强于 9组!9组 显 著 强 于 I!低盐度胁迫 ) H 后!血清 '3含量变化如图! 所 &组!B %%& # ) 盐 度 胁 迫 对 照 与 胁 迫 前 血 清 示) 低盐胁迫前 -组血清 '3含量最高为# * *3活力差异不 显 著!C %%& #! 低 盐 胁 迫 ) H %#&# / '!胁迫 后,组 含 量 最 低 为 #!% 后!-(3 和,组 活 力 略 有 下 降!但 变 化 不 显 著! %%)# / ') 在 不 同.,水 平 饲 料 饲 养 &) I C %%& #!而 &(9组 出 现 显 著 减 弱!B %%& #! 后!-和 3组血清 '3含量出现了显 著增 加!-组 各.,组活力差异情况与胁迫前类似),.$!///
5 ## 期 张晨捷!等$不同维生素,水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较 #'' )! 胁迫对照与胁迫前血 清 -&K活 力 差 异 不 显 著! C %%&# ) 低 盐 胁 迫 ) H 后! 各.,组 血 清 -&K 活力都 出 现 了 显 著 下 降! 其 中 -( 3(,显 著 高 于 &(9组!B %%&# ) '%V&血清谷胱甘肽过氧化物酶$ /RT U*M% 活力 不同.,水平饲料喂养 &) I 以及 低盐 胁迫 ) H 后!云纹石斑鱼幼鱼血 清 P*+(D 活 力 变 化 情 况如图 ) 所示) 实验中!血清 P*+(D 活力 最高 图 )&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼 血清超氧化物歧化酶活力的影响 值为胁迫前,组$+$& &&!& # #!最 低 值 为 胁迫后 &组$ *+% #%)* # #) 以 不 同.,水 不同大写字母表示胁迫前后不同添加水平组间存 在 显 著 差 异 平饲喂云纹石 斑 鱼 幼 鱼 &) I 后!.,水 平 较 高 的!X%- #!不同 小 写 字 母 表 示 同 一 添 加 水 平 下 胁 迫 前 后 存 -(3(,组 血 清 P*+ (D 活 力 有 所 增 强! 其 中, 在显著差异!X%- #!下同 组增强显著!B %%& # %.,水 平 较 低 的 &(9组 L )&5K 9 9P 3 1 J 91 K D 血清 P*+ (D 活 力 则 有 显 著 减 弱!且 & 组 减 弱 Rd! 3 H J 9Q H 1 3+# 程度比 9组 更 显 著!B %%& # ) 各 组 胁 迫 对 照 3 ALL AI MA AI / A /Y H / H H!B %%& # 13 AI MA AI / H / H A H.,M /L!B %%&#! H H / /Y AM 与胁迫前血清 P*+(D 活 力 间 没 有 显 著 差 异! C %%&# ) 低盐胁迫 ) H 后!血 清 P*+(D 活 力 均有 所 下 降! 其 中 &( 9(, 组 下 降 显 著! B %%&#!此 时 -( 3(,组 显 著 高 于 9( & 组! B '%-&血清过氧化氢酶$ +#5% 活力 %%&# ) 不同.,水平的饲料饲养云纹石斑鱼幼鱼 &) I!以及低盐胁迫 ) H 后!血清 -&K活力变 化 情 况 参见图 &) 图 V&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼血清 谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响 L V&5K 9 9P 3 1 J 91 K D 图 -&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼 /RT U*M 3 H J 9Q H 1 3+# 血清过氧化氢酶活力的影响 L -&5K 9 9P 3 1 J 91 K D +#53 H J 9Q H 1 3+# '' 血 清 -&K最 高 值 为 养 殖 前 组$ *% %#+ # # '! 最 低 值 为 盐 度 胁 迫 后 & 组$ ') 不 同.,水 平 饲 喂 &) I %!& %#% # # 后!血清 -&K活力都有所下降!.,添加量较多的 -(3(,组 -&K活力下降较少!而.,水平较低的 &(9 组 下 降 较 显 著! -( 3 组 下 降 不 显 著!C %%&#!养殖前 组(,(9(& 组 依 次 递 减!且 相 互 之间存在显著差异!B %%&# ) 除 &组 外!盐 度 '%W&血清总抗氧化能力$ 5U#d+% 经过 &) I 不同水平.,饲喂以及 ) H 低盐度 胁迫后!云 纹石 斑鱼 幼鱼 血清 K(&-的变 化情 况参见图 +) 本实验血清 K(&-最高 值为 胁迫 '! 最 低 值 为 盐 度 胁 前,组$!+) %$! # # 迫后 &组$ %!% %#% # # ') 不 同.,水 平 饲喂 &) I 后!9(-(3(,组 血 清 K(&-都 出 现 了显著增强!而 &组则显 著减 弱!B %%& # ) 各 组胁迫 对 照 与 胁 迫 前 血 清 K(&-均 无 显 著 差 异! C %%& # ) 低 盐 胁 迫 ) H 后! 各 组 血 清 K(&-都出现了显 著 下 降! -( 3(,组 显 著 高 于,.$!///
6 ''' #)* 水'产'学'报 9(&组!B %%&# )! 卷 胁迫 ) H!云纹石斑 鱼 幼 鱼 鳃 %N&活 力 变 化 如 图 所 示) 本 实 验 鳃 %N& 活 力 最 高 值 为 胁 迫 前, 组$ #&$+ #) # # M L /!最低值为胁迫后 &组$&!) %# # M L / ) 不同水平.,饲 料饲养 &) I 后!云 纹 石 斑 鱼 幼 鱼 鳃 %N& 活 力 随.,水平升 高 呈 逐 渐 升 高 的 变 化 趋 势! & 组 显 著 高于 养 殖 前 组! 而,组 显 著 高 于 & 组!B %%&# ) 盐度 胁 迫 对 照 组 %N& 活 力 变 化 情 况 与 胁迫 前 类 似! 且 各 组 二 者 差 异 均 不 显 著! C 图 W&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼 血清总抗氧化能力的影响 %%&# ) 低盐胁迫 ) H 后!各 组 鳃 %N& 活 力 均 有 所下降!除 -组 外! 其 余 各 组 活 力 有 显 著 减 弱! L W&5K 9 9P 3 1 J 91 K D B %%&# %此时 %N&活 力 呈 倒 #型 变 化!-组 显 5U#d+ 9Q H 1 3+# 著高 于 其 他 组! 而 & 组 显 著 低 于 其 他 组! B %%&# ) '%.&血清丙二醛$ S!#% 含量 不同., 水 平 饲 料 喂 养 云 纹 石 斑 鱼 幼 鱼 &) I!并在 低 盐 度 下 胁 迫 ) H! 血 清 J3& 含 量 变 化情况如图 所示) 实 验 血 清 J3&含 量 最 低 值 '!最高值 为胁迫前 3组$!!* $!*# A/ 为胁迫后 &组$#%#+ ++# A/ ') 血清 J3&含量 在 不 同.,水 平 饲 料 饲 喂 &) I 后!., 水平较低的 &(9组出现了显著上升!B %%& # %.,水平较高 的 -(,组 变 化 不 显 著!C %%& #! 而 3组显 著 下 降!B %%& # ) 各 组 胁 迫 对 照 与 胁 迫 前 血 清 J3& 含 量 差 异 均 不 显 著! C %%&# ) 低 盐 胁 迫 ) H 后! &( 9( - 和 3 组 血 清 图 a&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼 O ] U#5*酶活力的影响 鳃 3 ] b L a&5k 9 9P 3 1 J 91 KA O# 3 H J 9Q H 1 3+# J3&含量显著 增 加!B %%& #! 而,组 增 加 不 显著!C %%& #!其 中 以 &(9组 增 加 最 多!与 各 组均有显著差异!B %%&# ) '%$&鳃 +3 ' ] U#5*酶活力 以不同.,水平饲料饲养云纹石斑鱼幼鱼 &) $ I!并在低 盐 胁 迫 ) H! 云 纹 石 斑 鱼 幼 鱼 鳃 - ( &KD酶活力变化情况参见图 #%) 图.&低盐胁迫对云纹石斑鱼 幼鱼血清丙二醛含量的影响 L.&5K 9 9P 3 1 J 91 K D S!# 9Q H 1 3+# 图 $&低盐胁迫对云纹石斑鱼幼鱼 鳃 +3 ' ] U#5*酶活力的影响 L $&5K 9 9P 3 1 J 91 KA +3 ' ] U #5*3 3 H J 9Q H 1 3+# ] ] '%a&鳃 3 b O U#5*酶$ O#% 活力 经过 不 同.,水 平 饲 料 饲 养 &) I!以 及 低 盐,.$!/// $ ''实验中!鳃 - (&KD酶活力 最高 值为 盐胁
7 期张晨捷 等 不同维生素 水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较 对照! 组 -./ 最低值为胁迫后 组 -./ 以不同 水平饲料饲养云纹石斑鱼幼鱼 1 后 鳃 (, 酶活力随 水平升高呈倒 型变化 其中 组显著低于养殖前 组 ' 组显著高于养殖前 组 而! 组又显著高于 ' 组 * 盐度胁迫对照组 (, 酶活力变化则是 水平较低的 ' 组有所降低 而 水平较高的! 组有所增加 但各组与盐度胁迫前的差异均不显著 + 低盐胁迫 后 各组鳃 (, 酶活力均有显著下降 * 各组活力随 水平上升而增高 讨论盐度骤变会干扰鱼类的渗透压调节 引起多种生理应激反应 对机体造成氧化压力 饲料中的 能够影响鱼类体内脂类氧化物质的水平 保护器官免受脂类过氧化反应的伤害 在维护鱼类正常的生理功能与生长发育性能中具有重要作用 不同 C 水平饲喂与低盐胁迫对云纹石斑鱼血清生化指标的影响 不仅对应激反应和糖代谢有调控功能 对渗透压也有调节作用 能增加氯细胞数量和 活力 提高耐盐性 鱼类受到外界环境刺激 后 血液中 含量会明显升高 注射皮质醇后 无论淡水或海水培养的金头鲷 & 酶活力都显著提高 且海水金头鲷血浆渗透压和离子浓度也显著降低 饲料中 3 维生素 可有效降低团头鲂 $*+ + 血液 含量 增强抗应激能力 减轻应激对鱼体的伤害 2 是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物 也可以糖原形式贮存于肝脏 能促进肝脏的解毒功能 对肝脏有保护作用 其浓度与鱼类机体状态密切相关 并受皮质醇 肾上腺素等应激激素调控 诸如摄食 麻醉 胁迫等外界环境刺激会使血清 2 含量增高 & 新陈代谢和运动不断产生! 必需的维生素和供氧不足时! 处理不畅 造成堆积 从而影响细胞顺利吸收营养和氧气 削弱细胞的正常功能 这 种血清生化组分作为多种鱼类的受胁迫程度指标已被广泛应用 本实验中 血清 含量随饲料中 添加 量增加而呈降低趋势 而在低盐胁迫后各组血清 含量都有所增加 其中 组增加显著 说明 的添加量在 3 '! 可以增强云纹石斑鱼抗应激的能力 血清 2 含量在饲喂实验中各组差距不大 而在低盐度胁迫后 ' 显著增高 且 含量越低其增高越显著 也部分验证了血清 的结果 并说明在一定范围中 添加量越多越好 在饲喂实验中! 组血清! 含量增高 低盐度胁迫后 ' 组! 含量上升 而! 组下降 推测二者增高原因不同! 组可能为添加 后机体新陈代谢加快 并增强胁迫抵抗力 ' 组则是代谢不畅导致的! 积累 根据本实验结果可推测出 增加可刺激 2 增高 而 2 代谢不畅又会导致! 积累并对机体健康造成危害 不同 C 水平饲喂与低盐胁迫对云纹石斑鱼抗氧化功能的影响 鱼类抗氧化系统分为酶促与非酶促两大部分! 和 2, 是抗氧化酶类的重要成员! 与 能有效清除体内的超氧阴离子自由基 游离氧 羟自由基 和 等活性氧物质 点篮子鱼 &** 各组织中 活力随盐度降低而增强 鳃! 活力在盐度降到 时显著增强 而 2, 能催化 2 与有害物质结合 降低其毒性 对各种外源 如重金属 和内源性的物质 如活性氧 对细胞的损害都有保护作用 低盐胁迫会使条石鲷,*. 肝脏 2, 活力减弱 则包含了组织或体液中非酶和酶促反应所产生的总抗氧化水平! 是机体脂质过氧化作用产物 当生物体内氧化自由基与多不饱和脂肪酸等抗氧化脂类反应时 会引发脂质过氧化 并最终降解产生! 盐度升高或降低都会使管海马 % - 组织! 含量显著增加 抗氧化酶活性! 含量和总抗氧化能力的变化可以反映机体内自由基的代谢 过氧化压力情况 本实验中! 和 2, 活力与投喂饲料中 水平密切相关 无论是否存在低盐胁迫 ' 组活力都显著低于! 组 并且除了 组 活力! 组 种酶活力差异都!#$%&'
8 水 产 学 报 卷 不显著 而在低盐胁迫后 种酶的活力出现下降 除 外 另 种酶活力下降不显著 且! 组依然显著高于 ' 组 说明饲料中添加 3 水平 对云纹石斑鱼的抗氧化酶活性有增强作用 '! 组 在饲喂实验后都有显著上升 而 组显著下降 低盐胁迫后各组 均显著下降 其中 ' 组下降程度最大 并低于养殖前 组 说明 3 ' 添加量虽能提高抗氧化能力 但面对低盐胁迫略显不足 各取样点! 含量 ' 组显著高于! 组 饲喂实验后 ' 组! 含量显著增加 而! 组显著减少 低盐胁迫使除 组外各组! 含量均显著增加 从盐度胁迫前后指标变化情况看 各组抗氧化指标在受到盐度胁迫后有所下降 而氧化产物! 则有所增加! 组抗氧化能力下降后依然处于较高水平 而 低添加量 ' 组抗氧化能力下降显著 而! 的积累在 组已到了很高程度 对机体损害程度将增加 因此饲料中添加 对云纹石斑鱼的养殖有重要意义 不同 C 水平饲喂与低盐胁迫对云纹石斑鱼鳃 和! # 酶活力的影响 硬骨鱼类具有高效的渗透压调节能力以维持体内水分及液体动态平衡 离子调节酶 和 (, 酶在渗透压调节中具有重要作用 条石鲷 活力在盐度 和 时都高于盐度 大底 #-*- 幼鱼鳃 基因表达最高点出现在盐度 最低点为盐度 ( 等认为 ( 对维持渗透压调节的离子流和细胞离子浓度有重要影响 因此 盐度突变对鱼类离子调节酶的活性有显著影响 调节功能随酶活性增加而增强 本实验中 在饲喂不同水平 后 云纹石斑鱼鳃 活力随 增高而增强 说明 可增强 活力 低盐胁迫后 各组 活力减弱 呈倒 型排列 低盐胁迫对 组 3 影响较小 (, 酶在饲喂实验后 呈倒 型排列 而低盐胁迫后 则随 增加而增强 说明饲料中添加 3 水平 可增强云纹石斑鱼 (, 酶活力 鱼类渗透压调节时需要消耗机体能量和物质储备 而 和 (, 酶活力与鱼体 渗透压调节的活跃度有关 添加 可增强鱼体抗氧化和免疫力 使鱼体保持良好状态 使鱼体的渗透压调节功能处于活跃状态 因此高添加组酶活力能维持较高水平 并在盐度胁迫渗透压调节活动增强一段时间后仍维持较高水平 以维持体液平衡 结论根据本实验云纹石斑鱼幼鱼生化指标 抗氧化以及离子调节功能对低盐胁迫的响应情况 判断饲料中添加 可以增强云纹石斑鱼的机体活力 抗氧化及盐度胁迫能力 饲料中 的添加量在 3! 时 效果最为明显 可有效提高其代谢和抗氧化能力 减少代谢产物! 和氧化产物! 的积累 维持离子调节酶活性 保护机体健康 参考文献 9! 9) -) + (-($(/ )- '-#)%-)%-,.-(( 朱元鼎 张春霖 成庆泰 东海鱼类志 北京 科学出版社 ) 98-) $-%/($()/ )1 ) /--5.)%1---)/)1. %// $3-5((,..-(( ) (-. %-)%-( 宋振鑫 陈超 吴雷明 等 盐度与 对云纹石斑鱼胚胎发育和仔鱼活力的影响 渔业科学进展 ) 98 -) 9 5.)% 1---)/)1.% %.%/-.(/%( $. # -)- )1 ) 3-5((,..-(() (-. %-)%-( 宋振鑫 陈超 翟介明 等 云纹石斑鱼胚胎发育及仔 稚 幼鱼形态观察 渔业科学进展 ) + -) 5.)%)1.%1---)/).# -)-) (/-($ 5..) $ (-. %-)%-($) 李炎璐 王清印 陈超 等 云纹石斑鱼 七带石斑鱼 杂交子一代胚胎发育及仔稚幼鱼形态学观察 中国水产科学 -) /1-() /-$--1) 5-. )1.% 1---)/( $!#$%&'
9 期张晨捷 等 不同维生素 水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较 ) )/(/-( %-)-/) )% 陆丽君 陈超 马爱军 等 云纹石斑鱼 早期发育阶段的摄食与生长特性 海洋与湖沼 2 ) + /1 ) /- 3./- $.)- %-)%-( 郭丰 王军 苏永全 等 云纹石斑鱼染色体核型研究 海洋科学 9) /. (/.%/. (//%(/1 ) %(/($3-5(( %-)-/) )% 张永嘉 郭青 吴泽阳 云纹石斑鱼淋巴囊肿病病变过程的超微研究 海洋与湖沼 ),),-) $-%/($()/ ) /- %// $ )/1)/-)-( ) -.( $ # -)-,*..)-(-.-( 孙鹏 尹飞 彭士明 等 盐度对条石鲷幼鱼肝脏抗氧化酶活力的影响 海洋渔业 ) ) $-%/($ 1-/. /) (--)//) ) )/1)/ -)-%//-() ) ')- -(-1 / %/- ()/ %)-( %/.- 5,-$)%/))/-) $/-/--(/ % %-($.(/ (.) -%)-!./-'%-(/. )1,(,./ -%. )/-./-,( 55) 2-) $-%/($ 1-/. (--) )1 /) ) )-.-()(- )1 5%51.-/-.($5.-.(.-.-1 )1-./-. )-/..-/(/.-((%)1/)( )/-.)/).)$'-/-. ) $-%/$1-/. /) )1! --()./ )1 $--1 )1 1$-.-)//) $. -)- ) 1$-.-)/(/%3) 1-)(/.)$).%/.)-.(/ 王桂芹 牛小天 卢洪梅 等 饲料中添加 和! 对不同养殖密度建鲤生长 摄食和分化的影响 吉林农业大学学报 + $-%/($ ( ) %//-( $./-%/) -)-(! )1 2,8 ) -./((-$$+.)$(-. %-)%-($) 鲁双庆 刘少军 刘红玉 等 ( 对黄鳝肝脏保护酶!2, 活性的影响 中国水产科学 ) $-%/($1-/. 5-)1 $$( / %.) )./ )1 )) (-%$% )-.-()(-( $.-. + %/.- /./) ) ),,-) $-%/($ ()/ (/.-(() /-)/1)/-)-%//-() # -)- *-.)1 /-,(-%//-() /()1 31)- )-(-.)$-1 % 尹飞 孙鹏 彭士明 等 低盐度胁迫对银鲳幼鱼肝脏抗氧化酶 鳃和肾脏, 酶活力的影响 应用生态学报 2 ( (3$-%/($1-/. 1-1 $( / /) (--)//) )./ -.$.)%- )1.-1%/) $ 1 -.1/) ) /((-()1 51 $.-1 (-5.- * %/.- )%-..A)./) 1-, (.-/. %/) $, 2 )1 %./() /-/-1 (-5.- & 2-)-.)1./-)1%.) ) 9) $-%/($) (/.-(() /- ( (,(-%.(/.%/.- )1 (-(-. (%5%-%)1%-( $# -)- 5%3 %. $*-.)$(-.-($) 胡毅 黄云 钟蕾 等 氨氮胁迫对青鱼幼鱼鳃丝 ( (, 酶 组织结构及血清部分生理生化指标的影响 水产学报 + )1%.)-.)- 1#(/-)/ -%)( $ (/%,.-((.- ) --(/ (-.-(%-)%- 马慧 柳淑芳 马骞 等 硬骨鱼类渗透压的内分泌激素调节机制 水产科学 9 '2-8,$-%/($ /) ) (-. 5%-% )1--( )1 )/1)/ %%/ $$*+ + )1-.%/- /--./.-(/.-(()1.-% -..)$!#$%&'
10 水 产 学 报 卷 (-.-($) 周明 刘波 戈贤平 等 不同水平维生素 对高温应激及常温恢复后团头鲂血清生化指标 肠道抗氧化能力的影响 水产学报 1-)1.1-) 1--)--(2 )$-)%-$1-/((--)/-1 / /)()1 )..%! ** 51.-/-.(./-'%-(/. )1,(,./ -%. )/-./-,( A )%- -2%(-/-.)%-) $( (/-1 $--1) /-./)/!,( '-. 9). --$%% $/-($ (-.)/)1 -/(%/-()- )-(/-/%( )1 /-.-$-%/) %(---() %) %. # -)-( %/.- )3 2!) 9. $-%/($$( (- ) /-.-()(- $ )/1)/ ((/-( $, $ ) -/ -(.-( ( ( )1 5%-(/. ) 9), 9) 9 $-%/($ ()/ ) (../ )1 )/1)/1-$-)(- ((/- $&**.)$(-.-( $) 王妤 庄平 章龙珍 等 盐度对点篮子鱼的存活 生长及抗氧化防御系统的影响 水产学报 ) 2 9 $-%/($1 ) -/%2 -/5( ).) $ 9-#) )-.(/.%/.- $- %-)%-( 惠天朝 王家刚 朱荫湄 镉对罗非鱼肝组织中 2 代谢的影响 浙江大学学报 农业与生命科学版 ) +),-) $-%/($/.-- /%($)1-( 2 %// )1! %)/-)/) -./((-$, % )1 ).)-)/%-)%-( 王奇 范灿鹏 陈锟慈 等 三种磺胺类药物对罗非鱼肝脏组织中谷胱甘肽转移酶 2 和丙二醛! 的影响 生态环境学报 -) + ', $-%/($!() -/%!! )1 2) 9-5.$(.)$1 %-)%-)1 '/-%) 聂芳红 孔庆波 刘连平 等 两种二 英类化合物对斑马鱼肝脏!! 和 2 的影响 食品与生物技术学报 8 ) '$-%/$ ()/ (/.-(( ) /-./ 51 %(/) )1 -)-%//-($ # -)- % - %-) -/ ))% 徐永健 孙彬 盐度胁迫对大海马 % - 幼体生长 组分及酶活力的影响 海洋与湖沼./)-.-( ) )/1)/ 1-$-)(-() $( '/% )1 5/% $%/.( --() ( ' )1 (-.-(,,-) ) $-%/($()/ ) %// $ ( (,(-) # -)-,*..)$(-.-($) 孙鹏 彭士明 尹飞 等 盐度对条石鲷幼鱼 ( (, 酶活力的影响 水产学报,/-.() '1) ) $-%/( $ ()/ -1 )./ %)1/) )1 ) /.)(./-. -.-(() ) # -)- 2$ 3$( #-*-./-'%-(/. )1,(,./ -%. )/-./-,( ( ),,$-%/( $ -/ -. /)) )1 %%%)-() %./5-($/- /%)1..% %-()1 ( /3-) /,+.- -.) $ -.-)/ '!#$%&'
11 期张晨捷 等 不同维生素 水平饲料对云纹石斑鱼幼鱼低盐胁迫前后抗氧化和渗透压调节功能的比较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
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
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第 第 卷 海 欺 环 洋 科 境 学 月 年 铜 锌 镐 汞 锰 铬 对 斑 节 对 虾仔虾 急性 致毒 的研 究 高淑 英 邹栋梁 厦 门 大学 海洋 系 厦 门 摘 仔虾 的 急 性 致 毒 效 应 土 本文在恒温 要 结果 表 明 值 分别 为 充 气条 件下 研 究 了 值分 别为 十 对斑节对虾 对 斑 节对 虾 仔 虾 值分 别 为 值 分别 为 六 种重 金 属 的 毒性 顺 序 为
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- 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 做 四 个 全 面 的 宣 传 者 实 践 者 - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - 创 新 调 处 新 机 制 构 筑 稳 定 防 火 墙 - 21 - - 22 - - 23
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小 麦 净 多 持 仓 增 加, 豆 油 豆 粕 净 多 持 仓 减 少 美 国 CFTC 持 仓 报 告 部 门 : 市 场 研 究 与 开 发 部 类 型 : 量 化 策 略 周 报 日 期 :212 年 5 月 7 日 电 话 :592-5678753 网 址 :www.jinyouqh.com 主 要 内 容 : 根 据 美 国 CFTC 公 布 的 数 据, 本 报 告 中 的 11 个
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