热中微生物的蛋白较易凝固 ;2 湿热的穿透力比干热大 ;3 水由气态变为液态可释放潜热, 能迅速提高被灭菌物体的温度多数无芽胞细菌对湿热敏感,55~60 作用 30~60min 后死亡,80 作用 5~10min 可杀死所有细菌的繁殖体和真菌细菌的芽胞对高温抵抗力强, 例如炭疽芽胞杆菌的芽胞,

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奚武奚
5 years ago
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1 第 7 章消毒灭菌与生物安全微生物易受外界条件的影响, 如果环境适宜, 可促进微生物的生长繁殖 ; 剧烈的环境变化则可使微生物生长受到抑制甚至死亡由于微生物广泛存在于自然界, 其中有些又是病原微生物, 因此, 从预防感染和避免实验室微生物污染的角度出发, 医务工作者及相关科研人员必须牢固树立无菌观念和严格执行无菌操作例如医疗器械手术室和无菌室等均需用适宜的方法进行消毒或灭菌为防止疾病传播, 对于传染病患者的排泄物以及实验室废弃的培养物也要进行消毒或灭菌处理消毒与灭菌是临床医学和微生物学中十分重要的基本操作技术, 采用的方法不同, 达到的效果也有差异以下是有关消毒灭菌的常用术语 1. 消毒 (disinfection) 指杀灭物体上或环境中病原微生物的方法, 但不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物, 如饮用水的消毒用于消毒的化学药品称为消毒剂 (disinfectant) 2. 灭菌 (sterilization) 指杀灭或清除物体上所有微生物的方法, 包括全部病原微生物和非病原微生物以及细菌芽胞如注射用生理盐水外科用敷料和培养基均需要灭菌后使用一般首选物理方法进行灭菌 3. 防腐 (antisepsis) 是指在体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法细菌一般不死亡, 如生物制剂中加入 0.01% 硫柳汞可防止杂菌生长同一种化学药品在高浓度时为消毒剂, 低浓度时可作为防腐剂抗生素可抑制细菌的生长繁殖称之为抑菌 (bacteriostasis), 这些抗生素被称作抑菌剂 (bacteriostat) 在体内抑制细菌的繁殖, 在体外可用于抑菌试验以检测细菌对抗生素的敏感性 4. 无菌 (asepsis) 及无菌操作 (aseptic technique) 无菌指不存在活的微生物, 为灭菌的结果防止微生物进入人体或污染物品的操作技术, 称为无菌操作如在进行外科手术时需要防止细菌进入创口, 微生物学实验操作中要注意防止微生物的污染和感染第一节物理消毒灭菌法消毒与灭菌方法一般分为物理方法与化学方法两大类用于消毒灭菌的物理因素主要有热力辐射滤过除菌超声波低温和干燥等方法一热力灭菌法高温对微生物有明显的致死作用, 其主要是通过变性蛋白质破坏细胞膜和降解核酸达到杀菌作用, 因而常用于消毒和灭菌热力灭菌法分为干热灭菌和湿热灭菌两大类, 在同一温度下, 湿热灭菌的效力优于干热灭菌, 这是因为 :1 湿

2 热中微生物的蛋白较易凝固 ;2 湿热的穿透力比干热大 ;3 水由气态变为液态可释放潜热, 能迅速提高被灭菌物体的温度多数无芽胞细菌对湿热敏感,55~60 作用 30~60min 后死亡,80 作用 5~10min 可杀死所有细菌的繁殖体和真菌细菌的芽胞对高温抵抗力强, 例如炭疽芽胞杆菌的芽胞, 可耐受煮沸 5~10min, 肉毒梭菌芽胞则需煮沸 3~5h 才死亡 ( 一 ) 干热灭菌法干热 (dry heat) 的杀菌作用是利用火焰热空气及电磁波产热等方法, 使微生物脱水干燥, 细胞内化学成分氧化和大分子变性而达到灭菌目的 1. 焚烧和烧灼 (incineration and flaming) 是一种彻底的灭菌方法废弃的物品或有感染性的动物尸体等可以直接点燃或在焚烧炉内焚烧微生物学实验室用的接种环试管口瓶口等的灭菌用烧灼方法 2. 干烤 (hot air sterilization) 利用干烤箱灭菌, 一般加热至 160~170 经 2 h 适用于高温下不变质不损坏不蒸发的物品, 例如玻璃器皿瓷器玻璃注射器等的灭菌 3. 红外线 (infrared) 红外线是一种波长为 0.77~1000μm 的电磁波, 波长在 1~10μm 时的热效应最强红外线的杀菌作用与干热相似, 利用红外线烤箱灭菌所需的温度和时间亦同于干烤由于热效应只能在照射到的表面产生, 因此不能使物体均匀加热此法多用于医疗器械的灭菌 ( 二 ) 湿热灭菌法 1. 巴氏消毒法 (pasteurization) 用较低温度杀灭液体中的病原菌, 如结核分枝杆菌布鲁菌, 而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法此法由巴斯德创立方法是加热至 61.1~ min 或 71.7 加热 15~30s, 目前多采用后者主要用于牛乳的消毒 2. 煮沸法 (boiling water) 在 1 个大气压下, 水的煮沸温度为 100,5 min 可杀死一切细菌繁殖体, 而细菌的芽胞则需 1~2 h, 对个别细菌的芽胞则需 5 h 才能杀死若在水中加 2% 的碳酸钠, 可提高沸点温度达 105, 不仅可缩短煮沸时间, 还可防止金属器皿生锈煮沸法可用于餐具金属器皿的消毒, 时间至少应在 10min 以上煮沸法不适合在高海拔地区使用 3. 流动蒸气法 (free-flowing steam) 又称常压蒸汽消毒法, 在一个大气压下, 利用水煮沸时产生的水蒸汽进行消毒细菌繁殖体经 ~30 min 被杀死, 但不易杀死芽胞该法常用的器具是 Arnold 消毒器, 我国的蒸笼具有相同的原理可用于一般外科器械注射器食具和一些不耐高热物品的消毒 5. 间歇蒸气灭菌法 (fractional sterilization) 利用反复多次的流动蒸汽间歇加热, 以达到灭菌的目的方法是将需要灭菌的物品放入 Arnold 灭菌器或蒸笼中, 经 ~30min, 杀死其中的繁殖体, 取出后放 37 孵箱过夜, 使残存的芽胞发育成繁殖体, 次日再蒸一次, 如此连续三次以上, 可达到灭菌的效果此法适用于一些不耐高热的含糖牛奶等培养基

3 5. 高压蒸气灭菌法 (autoclaving steralization) 是一种最有效最常用的灭菌方法其原理是用密闭灭菌器使压力上升至 103.4kPa 或 1.05kg/cm 2, 水的沸点达到 121.3, 保持 15~20min, 即可杀死包括细菌芽胞在内所有微生物常用于细菌培养基玻璃器皿生理盐水手术敷料等耐高温耐湿物品的灭菌二辐射杀菌法 ( 一 ) 紫外线 (ultraviolet radiation, UV) 紫外线的波长为 10~400nm, 波长在 240~280nm 的紫外线 ( 包括日光中的紫外线 ) 均具有杀菌作用, 其中以 265~266nm 杀菌作用最强, 这与 DNA 的吸收光谱范围一致紫外线的杀菌机理是作用于 DNA, 使一条 DNA 链上相邻两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体, 干扰 DNA 的转录复制, 进而影响蛋白质合成而引起微生物死亡紫外线穿透力较弱, 普通玻璃纸张尘埃水蒸汽等均能阻挡紫外线因此仅适用于空气物体表面的消毒灭菌, 如无菌室手术室烧伤病房传染病房细胞培养室的空气消毒及不耐热物品的表面消毒杀菌波长的紫外线对人体皮肤眼睛有损伤作用, 并可诱发皮肤癌, 应注意防护 ( 二 ) 电离辐射 (ionizing radiation) 电离辐射具有较高的能量和较强的穿透力, 包括 X 射线 γ 射线和高速电子等在足够剂量时, 对各种细菌均有致死作用其机制在于电离辐射可在瞬间产生大量的自由基, 能破坏 DNA, 损伤细胞膜电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品生物制品的消毒, 亦可用于食品的消毒, 而不破坏其营养成分 ( 三 ) 微波 (microwave) 微波是一种波长为 1mm~1m 的超高频电磁波, 其机理是利用高频电场产生高频电磁场造成分子剧烈运动而产生热量, 使微生物蛋白质变性凝固微波可穿透玻璃塑料薄膜与陶瓷等物质, 但不能穿透金属表面, 多用于检验室用品食品食具药杯等用品的消毒常用微波炉有 2 450MHz 和 915MHz 两种微波对人体有害, 应减少接近工作中微波炉的次数三滤过除菌法滤过除菌法 (filtration) 是用物理阻留的方法去除液体或空气中的细菌, 以达到无菌目的所用的器具是滤菌器 (filter), 滤菌器有许多微细的小孔, 只允许液体或气体通过, 而大于孔径的细菌等颗粒则被阻隔在筛板或滤膜的上面该方法主要用于不耐热的血清毒素抗生素细胞培养液的除菌以及超净工作台中空气的滤过除菌目前常用的有以下四种滤菌器 1. 玻璃滤菌器 (glass filter) 在玻璃漏斗嵌入玻璃砂筛板制成, 分 G1-G6 6 个型,G1-G 4 孔径大, 用于滤清液体,G5 和 G6 用于除菌 G6 除菌较 G5 彻底, 但支原体和 L 型细菌仍有通过的可能, 使用时应予注意 2. 石棉滤菌器 (asbestos filter) 亦称 Seitz 滤菌器由三部分组成, 上部为金属圆筒, 下部为金属托盘及漏斗, 上部的金属圆筒用以盛装需要过滤除菌的

4 液体, 下部的金属托盘及漏斗用以接受滤出的液体, 上下两部分中间放石棉滤板, 按石棉滤板孔径大小分为 K EK 和 EK-S 3 种 K 型滤孔最大, 供澄清液体用 ; EK 滤孔较小, 供滤过除菌 ;EK-S 滤孔更小, 可阻止一部分较大的病毒通过 3. 薄膜滤菌器 (membrane filter) 是将不同孔径的硝化纤维素薄膜固定在相应滤器的下部薄膜滤器有不同容量及不同孔径规格, 其中以微量针头滤器在实验室较常用, 主要用于小剂量液体的除菌 4. 高效空气颗粒滤菌器 (high efficiency particulate air filter, HEPA filter) 为大型滤器, 是应用空气压缩机产生一定压力的空气气流, 通过一定孔径的滤板以除去空气中小于 0.3μm 的颗粒如医院的手术室烧伤病房无菌制剂室及超净工作台等的除菌四超声波杀菌法超声波 (ultrasonic vibration)20khz~100khz 的高频声波对病原微生物具有一定的杀灭作用其机制主要是高频声波通过液体时, 在应力薄弱区产生许多直径在 10μm 的小空腔, 小空腔逐渐增大, 最后爆裂而产生巨大压力, 爆裂时的压力可达到个大气压, 能破坏病原微生物的结构而引起微生物死亡超声波杀灭病原微生物不彻底, 但能明显减少病原微生物的数量, 可用于餐具消毒目前主要应用超声波粉碎细胞, 以提取细胞组分或制备抗原等五其他物理抑菌或杀菌方法低温高渗和干燥也具有一定的抑菌或杀菌作用 ( 一 ) 低温 (low temperature) 低温可减低病原微生物的新陈代谢, 抑制其生长繁殖不但不能杀死病原微生物, 还有利于病原微生物的长期存活, 故常利用低温保存病原微生物利用低温贮藏食物和药品不容易发生变质利用低温反复多次的冻融可明显减少细菌的数量, 因而有一定的消毒灭菌作用因为冷冻时细菌内部水分形成结晶, 能损伤细胞结构, 破坏细胞内胶质状态, 并可产生膨胀, 导致细菌崩解实验室常用此原理制备细菌的可溶性抗原 ( 二 ) 干燥 (desiccation) 干燥可使病原微生物脱水浓缩, 新陈代谢减慢, 甚至引起死亡不同病原体对干燥环境的耐受性不同, 如脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌苍白密螺旋体和流感病毒等对干燥敏感, 而结核分枝杆菌溶血性链球菌炭疽芽胞杆菌以及真菌乙型肝炎病毒等对干燥有一定抵抗力干燥法主要用于保存食物, 防止食物变质 ( 三 ) 冷冻真空干燥法 (lyophilization) 冷冻真空干燥法是在低温状态下真空抽去菌体内的水分, 既可以使病原微生物脱水新陈代谢减缓, 又可避免冷冻时菌体内水分结晶对细菌的损伤是目前保存菌种的最好方法, 一般可保存微生物数年至数十年第二节化学消毒灭菌法

5 许多化学药物具有杀灭病原微生物或抑制其生长繁殖的功能, 这类化学药物主要有消毒剂和防腐剂消毒防腐剂对病原微生物和人体组织细胞都有毒害作用, 故只能外用或用于物品环境的消毒 ( 一 ) 消毒剂的分类一消毒剂 1. 根据消毒剂的杀菌机制分类 (1) 促使微生物蛋白质变性或凝固 : 如高浓度的重金属盐类酚类, 醇类醛类及酸碱类等 (2) 干扰微生物的酶系统和代谢环节 : 如低浓度的重金属盐类及氧化剂这类消毒剂能与微生物某些酶分子上的 -SH 基结合而使其丧失酶活性 (3) 损伤微生物膜结构 : 某些阳离子表面活性剂如苯扎溴铵脂溶剂及低浓度的酚类等能降低微生物表面的张力, 使细菌细胞膜或病毒包膜通透性增强, 胞外液体内渗, 导致细菌细胞或病毒的裂解 2. 按消毒剂的化学结构和性质分类 (1) 醇类 : 杀菌机制主要是能使菌体蛋白质变性并能溶解细菌细胞膜中的脂类乙醇是临床最常用的消毒剂, 70%~75% 浓度的乙醇杀菌力最强, 因更高浓度的醇类能使菌体表面蛋白迅速凝固而降低杀菌效力异丙醇杀菌作用较乙醇强, 且挥发性低, 但毒性较高两者主要用于皮肤消毒和浸泡体温计等 (2) 酚类 : 低浓度时破坏菌细胞膜, 改变膜的通透性 ; 高浓度时使菌体蛋白凝固变性 ; 也有抑制细菌脱氢酶氧化酶等作用常用的有石碳酸来苏洗必泰等酚类化合物 (3) 表面活性剂 : 又称去污剂, 能降低液体的表面张力, 使物品表面油脂乳化易于清除表面活性剂通过疏水性基团与细菌细胞膜的疏水区结合而破坏细胞膜表面活性剂分为阳离子阴离子和非离子三种类型阳离子表面活性剂常用消毒剂有新洁尔灭和杜灭芬因细菌多带负电荷, 易与阳离子表面活性剂结合, 因而杀菌效果最好 ; 阴离子表面活性剂有烷苯磺酸盐和十二烷基硫酸钠, 抑菌作用较差, 洗净功能较强肥皂主要成分为脂肪酸, 解离后带负电, 亦属于阴离子表面活性剂阳离子和阴离子表面活性剂不能同时使用, 否则易相互降低效果非离子型表面活性剂对细菌无毒性, 有些反而有利于细菌的生长, 如吐温 80 对结核分枝杆菌有刺激生长作用 (4) 氧化剂 : 氧化剂主要依靠其氧化能力杀菌, 其可与酶蛋白中的 -SH 基结合, 使其转变为 -SS- 二硫键而导致酶活性的丧失常用的有过氧化氢过氧乙酸和卤素等过氧乙酸氧化性强, 对细菌繁殖体芽胞真菌病毒等都有杀灭作用, 应用广泛, 但易分解, 并有刺激性与腐蚀性, 不适用于金属器具等的消毒用于消毒的卤素有碘和氯两种, 氯易与蛋白质结合, 使菌体蛋白变性氯溶于水后形成次氯酸和盐酸, 而次氯酸具有很强的杀菌作用氯多用于水的消毒碘对细菌繁殖体和芽胞都有强大的杀伤作用, 杀菌作用主要依靠使蛋白变性和强大的氧化能力常用消毒剂有碘酊和碘伏, 碘酊为碘的乙醇溶液, 常用于肌肉静脉注射及外科手术部位的皮肤消毒碘伏是碘与聚乙烯吡咯酮的不定型结合物, 可用于皮肤粘膜的消毒, 器械浸泡消毒 (5) 烷化剂 : 主要是通过对微生物蛋白质及核酸的烷化作用而杀菌, 其杀菌谱广, 杀菌力强常用的烷化剂有甲醛环氧乙烷和戊二醛等环氧乙烷对分

6 枝杆菌病毒真菌和细菌芽胞均有较强的杀伤作用缺点是对人体有一定毒性有些烷化剂, 如 β- 丙脂对动物有致癌作用, 因此人应该尽量减少对它的接触 (6) 重金属盐类 : 大多数重金属单独或以化合物的形式存在, 通过使微生物蛋白质变性与沉淀, 或灭活微生物酶类发挥杀菌作用常用的消毒剂有红汞硝酸银等 3. 按消毒剂杀菌的效力分类 (1) 高效消毒剂 (high-level disinfection): 可以杀灭包括细菌芽胞在内的一切微生物这类消毒剂有甲醛戊二醛环氧乙烷过氧乙酸等 (2) 中效消毒剂 (intermediate-level disinfection): 能够杀灭除细菌芽胞以外的微生物, 包括细菌的繁殖体多数病毒和真菌这类消毒剂有乙醇酚类含氯消毒剂及碘伏等 (3) 低效消毒剂 (low-level disinfection): 能杀死细菌的繁殖体及包膜病毒, 对真菌有一定作用, 不能杀灭细菌芽胞和无包膜病毒新洁尔灭及洗必泰等属于这类消毒剂 ( 二 ) 常用消毒剂的种类与应用消毒剂种类很多, 其性质杀菌效力和作用机制各异, 因此用途也就不同使用时要根据不同的消毒对象来选择消毒剂常用消毒剂的种类与应用见表 4-1 表 7-1 常用消毒剂的种类作用机制与用途类别作用机制常用消毒剂与剂量用途醇类蛋白质凝固与变性, 溶解细胞膜 70%~75% 乙醇皮肤体温计消毒 ; 酚类损伤细胞膜, 灭活酶类, 高浓度导致蛋白质凝固 3%~5% 石碳酸 2% 来苏 0.01%~0.05% 洗必泰地面器具表面的消毒 ; 皮肤消毒 ; 术前洗手阴道冲洗等 ; 表面活性剂损伤细胞膜, 灭活氧化 0.05%~0.1% 新洁尔灭粘膜和皮肤消毒 ; 术前洗手 ; 酶活性, 蛋白质变性 0.05%~0.1% 杜灭芬浸泡器械 ; 氧化剂氧化作用, 蛋白质沉淀 0.1% 高锰酸钾皮肤尿道蔬菜水果消毒 ; 3% 过氧化氢深部创伤及外耳道消毒 ; 0.2%~0.3% 过氧乙酸塑料玻璃和人造纤维 ; 2.0%~2.5% 碘酒皮肤消毒 ; 0.2ppm~0.5ppm 氯饮水及游泳池消毒 ; 10%~20% 漂白粉地面厕所与排泄物消毒 ; 0.2%~0.5% 氯胺室内空气及物体表面消毒, 0.1%~1.2% 浸泡衣服 ; 0.5%~1.5% 漂粉精饮水消毒 ; 1% 碘伏皮肤粘膜消毒 ;

7 重金属盐类氧化作用, 蛋白质变性 0.05%~0.1% 升汞非金属器皿的消毒 ; 与沉淀, 灭活酶类 2% 红汞皮肤粘膜小创伤消毒 ; 0.1% 硫柳汞皮肤消毒手术部位消毒 ; 1% 硝酸银新生儿滴眼预防淋病奈瑟 1%~5% 蛋白银菌感染烷化剂菌体蛋白质及核酸烷基 10% 甲醛物品表面消毒, 空气消毒 ; 化 50mg/L 环氧乙烷手术器械敷料等消毒 ; 2% 戊二醛精密仪器内窥镜等消毒 ; 染料抑制细菌繁殖, 干扰氧 2%~4% 龙胆紫浅表创伤消毒化过程酸碱类破坏细胞膜和细胞壁, 蛋白质凝固 5~10ml/m 3 醋酸加等量水蒸发生石灰 ( 按 1 4~1 8 比例加水配成糊状 ) 空气消毒 ; 地面排泄物消毒 ; 二防腐剂防腐剂主要用于生物制剂制药食品饮品等的防腐医药上所使用的防腐剂多采用低浓度的消毒剂, 以抑制细菌的生长, 延长保存时限常用的防腐剂有叠氮钠氯仿硫柳汞甲醛石碳酸尼泊金山梨醇和苯甲酸钠等, 后二种多用于食品与饮品的防腐三影响消毒灭菌效果的因素一般而言, 消毒灭菌的效果与消毒剂自身的性质浓度环境以及微生物的种类数量等多种因素有关, 在使用消毒剂时应予以注意 ( 一 ) 消毒剂的化学性质浓度与作用时间各种消毒剂的理化性质不同, 对微生物的作用效果也有差异例如阳离子表面活性剂对革兰阳性菌的杀灭效果比对革兰阴性菌好, 龙胆紫对葡萄球菌作用较强同一种消毒剂浓度增加, 则杀菌作用增强, 但乙醇例外降低消毒剂的浓度, 只能起到抑菌防腐作用一定浓度的消毒剂, 作用时间愈长, 杀菌效果越愈好 ( 二 ) 微生物的种类与数量微生物的种类和结构特点不同对消毒剂的敏感性不同, 例如细菌的芽胞及结核分枝杆菌对消毒剂的抵抗力较一般细菌的繁殖体强, 有包膜的病毒对脂溶性消毒剂比无包膜病毒敏感因此, 要根据消毒对象选择合适的消毒剂此外, 被消毒的物品中微生物含量多时, 应增加消毒剂浓度和延长消毒时间 ( 三 ) 环境温度与酸碱度消毒剂的灭菌效果可随温度提高而增强, 如使用 2% 戊二醛杀灭 10 4 /ml 的炭疽芽胞杆菌,20 时需 15min, 而 56 时仅需 1min 酸碱度也直接影响消毒剂的杀菌效果, 如新洁而灭和戊二醛在碱性条件下杀

8 菌效果好, 而酚类碘则在酸性条件下杀菌作用好 ( 四 ) 有机物环境中有机物的存在, 如痰脓汁和排泄物中的蛋白质等, 与消毒剂结合, 不仅消耗药品, 还可阻碍消毒剂与病原菌的接触而降低杀菌效果因此医疗器具在消毒灭菌前应先清除其表面的污物, 再进行消毒灭菌处理第三节生物安全生物安全 (biosafty) 指防范处理危险生物因子对人体危害的综合性措施能引起生物危害的生物因子主要包括病原微生物及其代谢产物生物危害是指由于人为操作或人类活动, 导致生物体或其产物对人类健康和生态环境引起现实损害或存在潜在风险生物危害主要来自生物实验室及生物恐怖活动一实验室生物安全实验室的生物安全不仅指保护实验室工作人员, 而且还涉及要保护整个单位的员工及社会群体的安全实验室人员对生物安全的正确认识严格遵守实验室行为准则和实验操作规范的科学作风, 是提高实验室生物安全的最重要基础和保证此外, 微生物的危害性以及实验室的防护设施也是影响实验室生物安全的重要因素 ( 一 ) 病原微生物危害程度的分级国务院 2004 年 11 月颁布的病原微生物实验室生物安全管理条例中, 根据病原微生物传染性感染后对个体或群体的危害, 将病原微生物分为四类 : 第一类是指能够引起人类或动物非常严重疾病的微生物, 以及我国尚未发现或已经宣布消灭的微生物第二类是指能够引起人类或动物严重疾病, 比较容易直接或间接在人与人动物与人动物与动物间传播的微生物第三类是指能够引起人类或动物疾病, 但一般情况下对人动物或环境不构成严重危害, 传播风险有限, 实验室感染后很少引起严重疾病, 且具备有效治疗和预防措施的微生物第四类是指在通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物其中第一类和第二类病原微生物属高致病性病原微生物具体每种微生物属于哪一类及应具备何种实验室生物安全防护水平, 可参照 2006 年 1 月 11 日卫生部颁布并实施的人间传染的病原微生物名录 ( 二 ) 实验室的生物安全防护设施根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平 (biosafetylevel,bsl) 及实验室生物安全标准的规定, 实验室分为 BSL-1 BSL-2 BSL-3 和 BSL-4 四个级别其中,BSL-4 的防护级别最高 BSL-1 BSI-2 实验室为普通建筑结构实验室, 一般要求墙面地面应可以清

9 洗消毒, 有室内洗手池 ;BSL-2 应配备高压灭菌设备及生物安全柜等设施 BSL-3 实验室应在建筑物内自成隔离区, 实验室内分清洁区半污染区和污染区, 各区之间设缓冲间, 半污染区设有可自动关闭的安全门, 有独立的负压保护通风系统要求实验室内保持负压, 排出空气经高效滤材过滤且不得循环使用 BSL-4 实验室设施与 BSL-3 实验室基本相同, 但选址应远离人口密集地区, 周围有封闭的安全隔离带, 有单独的供气和排气系统, 污染区和半污染区之间有化学消毒喷淋装置, 排风装置必须双重过滤等通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物, 采用 BSL-1; 如果病原体致病性不强, 不形成气溶胶, 可采用 BSL-2; 如果病原体致病性强, 且能通过气溶胶传播, 或在操作时可能发生大量接触的, 均应采用 BSL-3 对于致病性极强并可通过气溶胶传播的病原体, 采用 BSL-4 实验室工作人员应牢固掌握实验室技术规范生物安全防护知识, 能熟练进行实际操作, 严格遵守操作规程实验室应有科学严格的管理制度, 定期对实验室设备材料等进行检查维护和更新二对生物恐怖活动的防范生物恐怖活动是利用强致病力的细菌病毒等微生物攻击人群, 对社会公众及环境造成严重危害的一种活动 ( 一 ) 生物恐怖威胁的分级对此尚无统一的标准目前各国参照较多的是美国疾病预防控制中心 (CDC) 的三级分类, 即 A 级 ( 最大危害 ),B 级 ( 中等危害 ) 和 C 级 ( 最低危害 ) ( 二 ) 可用做生物战剂的病原微生物属于生物恐怖 A 级的病原微生物主要有炭疽芽胞杆菌鼠疫耶氏菌土拉弗朗西斯菌出血热病毒 ( 埃博拉出血热病毒马尔堡出血热病毒和流行性出血热病毒等 ) 天花病毒 ( 三 ) 生物战剂的传播方式及特点生物恐怖活动中所使用的病原体制剂常为分散的细小颗粒状, 易以气溶胶形式在空气中传播, 人可经呼吸道眼部及皮肤感染另一种方式是利用媒介生物携带细菌病毒立克次体及生物毒素, 通过媒介生物叮咬人或污染环境, 经皮肤消化道呼吸道侵入人体, 引起传播常利用的媒介生物有蚊子苍蝇蜚蠊臭虫虱子跳蚤等昆虫以及鼠类这些生物战剂具有传染性强, 毒力强, 传染面积广, 危害时间长, 施放手段隐蔽不容易被发现等特点 ( 四 ) 防范措施生物恐怖活动发生具有隐蔽性突发性致病性强, 传播速度快等与经典的传染病不同的独特特点为防范处理生物恐怖活动发生, 应采取以下措施 1. 特异性预防加强生物恐怖病原的相关基础和医学防治研究, 研制有效疫苗和治疗药物 2. 对生物恐怖袭击做好应急准备卫生部门应储备所需的疫苗抗毒素和抗生素, 以便及时正确救治患者, 减少继发性传播, 有效控制和消灭疫情

10 3. 开展早期诊断技术和诊断试剂对突发生物恐怖活动事件, 应根据现场信息的判定分析及病原检测结果, 快速而准确的做出诊断 4. 加强防范有害媒介生物传播疾病的措施开展群众性的卫生运动, 消灭有害媒介生物, 建立科学高效的监控系统网, 及时掌握各种媒介生物及其传染病的动态 5. 应急措施一旦生物恐怖发生, 根据病原的不同采取不同措施主要是要注意个人及集体防护, 如带防护口罩手套 ; 保护食物及水源 ; 对被污染环境物品进行消毒灭菌处理 ; 对患者及时应用抗生素或抗病毒药物, 并根据病情进行对症治疗 ( 卢颖 )

(3) 残留消毒剂的去除 1. 实验室试验 1 残留消毒剂的去除的目的 2 去除残留消毒剂的原则 3 常用残留消毒剂的去除方法 (4) 中和剂鉴定试验 1 细菌杀灭试验用中和剂的鉴定方法 2 常用消毒剂的中和剂 (5) 细菌定量杀灭试验 1 悬液定量杀菌试验和载体浸泡定量杀菌试验方法, 杀灭率的计算

(3) 残留消毒剂的去除 1. 实验室试验 1 残留消毒剂的去除的目的 2 去除残留消毒剂的原则 3 常用残留消毒剂的去除方法 (4) 中和剂鉴定试验 1 细菌杀灭试验用中和剂的鉴定方法 2 常用消毒剂的中和剂 (5) 细菌定量杀灭试验 1 悬液定量杀菌试验和载体浸泡定量杀菌试验方法, 杀灭率的计算一卫生检验综合知识二消毒学总论三消毒学实验室基本技术 1. 我国计量法对检验工作的有关规定 2. 国际单位制及我国选定的非国际单位制 3. 产品质量检验机构计量认证及检验规范 4. 卫生标准与检验的关系 5. 检测检验方法标准化的重要性 6. 标准方法制定的原则 1. 消毒学的定义研究对象与目标 2. 消毒学有关名词概念 3. 消毒方法的选择 4. 影响消毒效果因素 5. 消毒试验方法