3398 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 为中药最细粉的临床应用提供了科学依据 目前, 有关超微粉碎对于中药粉体的体外稳定性考察, 多集中于高温 高湿 光照等加速条件下对中药超微粉的粉体学性质 有效成分的量及体

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1 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 3397 和最细粉的稳定性研究 陈菲 1 2,, 艾国 3, 盛柳青 1, 王建美 1, 黄正明 1. 金华职业技术学院医学院, 浙江金华 解放军 32 医院, 北京 军事医学科学院放射与辐射医学研究所, 北京 摘要 : 目的考察 和最细粉的质量稳定性 方法采用常温留样实验考察, 连续追踪 12 个月, 比较不同时间的 3 种中药最细粉的形貌结构 粒径 比表面积 堆密度 休止角等粉体学特征以及有效成分的量和体外溶出曲线 结果经过 12 个月的常温留样实验, 和最细粉的粉体学特征没有发生显著性改变,3 种中药最细粉的有效成分的量基本保持不变, 体外溶出率曲线的差异性很小, 具有等价性 结论 和最细粉, 在 12 个月的常温留样实验考察期内, 质量稳定性良好 关键词 : 中药 ; ; ; ; 最细粉 ; 稳定性 ; 有效成分 ; 体外溶出率中图分类号 :R284.2 文献标志码 :A 文章编号 : (214) DOI: 1.751/j.issn Stbility of superfine powder of Fritillrie Thunbergii Bulbus, Gstrodie Rhizom, nd Rhodiole Crenulte Rdix et Rhizom CHEN Fei 1, AI Guo 2, 3, SHENG Liu-qing 1, WANG Jin-mei 1, HUANG Zheng-ming 2 1. Deprtment of Phrmcy, Jinhu College of Profession nd Technology, Jinhu 3217, Chin 2. Deprtment of Phrmcy, 32 Hospitl of PLA, Beijing 139, Chin 3. Institute of Rdition Medicine, Acdemy of Militry Medicl Sciences, Beijing 185, Chin Abstrct: Objective To investigte the stbility of superfine powder of Fritillrie Thunbergii Bulbus (FTB), Gstrodie Rdix (GR), nd Rhodiole Crenultee Rdix et Rhizom (RCRR). Methods The superfine powder of FTB, GR, nd RCRR ws prepred nd stored t room temperture for 12 months. We investigted the powder chrcteristics for the prticle size, powder morphology, specific surfce re, bulk density, nd ngle of repose. Furthermore, the content nd in vitro dissolution of effective ingredients were quntified to evlute the stbility of superfine powder of FTB, GR, nd RCRR. Results After storing t room temperture for 12 months, there were little differences between the superfine powder in physicochemicl chrcteristics. The effective ingredient content of superfine powder ws essentilly unchnged nd the in vitro dissolution rte curve remined the sme. Conclusion After storing t room temperture for 12 months, the stbility of FTB, GR, nd RCRR superfine powder is good, which provides the experimentl references for the further study of the superfine powder of Chinese mteri medic. Key words: Chinese mteri medic; Fritillrie Thunbergii Bulbus; Gstrodie Rdix; Rhodiole Crenultee Rdix et Rhizom; superfine powder; stbility; effective ingredient; dissolution rte 中药超微粉碎技术是指中药的细胞级粉碎, 它可使中药材细胞破壁率达 95% 以上, 微粉粒径在.1~75 μm 由于超微粉碎减少了细胞壁的屏障作用, 因而比表面积大幅提高, 能够显著提高药材有效成分的溶出速率和生物利用度, 改善口感, 减少 药材用量 [1-2] 本课题组在前期的研究中, 分别制备了 和的最细粉, 探讨经过超微粉碎后, 药材的粉体学性质和有效成分量的变化 [3] 此外, 本课题组建立了一系列动物模型, 证实了 3 种中药最细粉的药效学作用要强于普通中药粉 [4-6], 收稿日期 : 基金项目 : 四川省中药研究促进会重点合作项目作者简介 : 陈菲 (1971 ), 女, 硕士, 副教授, 研究方向为中药有效成分的提取与分离 E-mil: @qq.com 艾国 (1976 ), 男, 博士后, 研究方向为中药新药和药理 E-mil: guoir@163.com

2 3398 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 为中药最细粉的临床应用提供了科学依据 目前, 有关超微粉碎对于中药粉体的体外稳定性考察, 多集中于高温 高湿 光照等加速条件下对中药超微粉的粉体学性质 有效成分的量及体外溶出度的研究 [7-9], 长期稳定性考察还鲜有报道 本课题组将制备的 和的最细粉分别置于棕色玻璃瓶中, 采用常温留样实验考察的方法, 连续追踪 12 个月, 对其形貌结构 粒径 比表面积 堆密度和休止角等粉体学性质以及有效成分的量和体外溶出度进行考察, 为超微粉碎技术在中药制药中的科学应用提供理论支持 1 材料与仪器 WF 4 型万能粉碎机, 江阴亿丰机械设备有限公司 ;L5 B 型超细粉碎机, 四川金岁方药业有限公司 ;Wters 高效液相色谱仪, 含 6 泵, PDA996 二极管阵列监测器,Millennium 32 工作站, 美国 Wters 公司 ;AE163 天平, 瑞士 Mettler 公司 ; 生物显微镜, 日本 Olympus 公司 ; 激光粒度分析仪, 珠海欧美克仪器有限公司 ;Nov42e 比表面及孔隙度分析仪, 美国 Quntchrome 公司 ;S48 冷场发射扫描电子显微镜, 日本 Hitchi 公司 (Fritillrie Thunbergii Bulbus,FTB) (Gstrodie Rhizom,GR) 和 (Rhodiole Crenulte Rdix et Rhizom,RCRR) 的原产地分别为浙江 贵州和西藏, 均由四川金岁方药业有限公司提供, 经解放军 32 医院黄正明教授鉴定, 分别为百合科贝母属植物 Fritillri thunbergii Miq. 的干燥鳞茎, 兰科属植物 Gstrodi elt Blume 的干燥块茎, 景天科属大花 Rhodiol crenult (Hook. f. et Thoms.) H. Ohb 的干燥根和根茎, 按照企业拟定的工艺规程分别制 备 3 种中药的金岁方最细粉 贝母素甲 ( 批号 ) 贝母素乙( 批号 ) 素 ( 批号 ) 和苷 ( 批号 ) 对照品均购自中国食品药物检定研究院, 质量分数均 >95.% 乙腈 甲醇为色谱纯, 水为超纯水, 其他试剂均为分析纯 2 方法与结果 2.1 常温留样 12 个月的中药最细粉稳定性考察将制备得到的 和的最细粉分别置于棕色玻璃瓶中, 密封包装, 采用常温留样实验考察的方法, 在温度为 (25±2), 相对湿度为 (6±1)% 的条件下放置 连续追踪 12 个月, 分别在第 个月时, 取出适量最细粉, 对其形貌结构 粒径 比表面积 堆密度和休止角等粉体学特征以及有效成分的量和体外溶出率进行考察 2.2 中药最细粉的显微鉴别和形貌结构观察在不同的留样时间, 分别取 和最细粉适量, 采用直接观察法比较粉末的状态 色泽和触感 ; 用水合氯醛透化, 置显微镜下观察并拍摄照片 ( 图 1) 分别取中药最细粉适量, 铺于扫描电子显微镜样品台上, 喷金镀膜后置于载物容器内, 在加速电压 15 kv, 放射电流 85. ma 的条件下观察不同取样时间的最细粉的结构及表面形态, 结果见图 2 可以看到在 12 个月的留存时间内,3 个月 3 个月 6 个月 9 个月 12 个月 图 1 不同留样时间的 和最细粉的显微鉴别照片 Fig. 1 Microscopic photos of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time

3 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 3399 个月 3 个月 6 个月 9 个月 12 个月 图 2 不同留样时间的 和最细粉的扫描电镜照片 Fig. 2 Scnning electron microscopic photos of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time 种最细粉的显微特征和形貌结构, 均没有发生明显改变 2.3 中药最细粉的粉体学性质考察采用欧美克激光粒度分析仪, 湿法测定最细粉的粒径及其分布 [3], 和最细粉在 个月时的粒径分布见图 3 采用比表面积测定仪测定不同时间的 3 种中药最细粉的比表面积 堆密度和休止角 [3] 从表 1 可以看到, 不同留样时间的 和最细粉的粒径及粉体学性质均没有发生明显变化 2.4 中药最细粉有效成分的定量测定分别称取各个时间点的存放样品 2 g, 进行有效成分的定量测定 [3] 其中, 最细粉进行有效成分 ( 贝母素甲和贝母素乙 ) 的定量测定, 最细粉进行有效成分 ( 素 ) 的定量测定, 最细粉进行有效成分 ( 苷 ) 的定量测定 3 种中药最细粉在不同的留样时间的有效成分的定量测定结果见表 2 从表 2 可以看到, 在 12 个月的常温留样考察期内, 和最细粉的有效成分的量基本保持不变, 表明超微粉碎 个月 3 个月 6 个月 9 个月 12 个月 个月 3 个月 6 个月 9 个月 12 个月 个月 3 个月 6 个月 9 个月 12 个月 粒径 / μm 图 3 不同留样时间的 和最细粉的粒径分布图 Fig. 3 Prticle dimeter distribution of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time

4 34 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 表 1 不同留样时间的 和最细粉的粒径及粉体学性质 Tble 1 Comprion on prticle dimeter nd powder chrcteristics of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time 样品 时间 / 月 D 1 / μm D 5 / μm D 9 / μm 比表面积 / (m 2 g 1 ) 堆密度 / (g cm 3 ) 休止角 / ( ) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±.28.82± ± ±.36.88± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±1.18 表 2 不同留样时间的 和最细粉的 有效成分量比较 (x ±s,n=3) Tble 2 Effective ingredient content of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time ( x ±s, n=3) 时间 / 月 有效成分 / % b c.127±.7.43±.5.72± ±.3.41±.3.73± ±.8.41±.4.72± ±.4.43±.6.74± ±.6.44±.2.73±.4 贝母素甲和贝母素乙的总量, b 素的量, c 苷的量 content of peimine nd peiminine, b content of gstrodin, c content of slidroside 对其主要有效成分贝母素甲和贝母素乙 素以及苷的稳定性基本没有影响 2.5 中药最细粉的体外溶出度测定分别采用桨法测定 和 3 种中药最细粉在留样 6 12 个月时的体外溶出度 量取 25 ml 经脱气处理的蒸馏水, 注入溶出杯内, 加热使溶剂温度保持在 (37±.5), 调整转速使其稳定在 1 r/min 最细粉准确称取 3 份, 每份 1 g, 分别投入 3 个溶出杯中, 将桨伸入溶出杯中, 立 即开始计时, 分别于 min 定时定点取样 2 ml, 同时补加同温等量的蒸馏水, 样品用.45 μm 微孔滤膜滤过, 取续滤液, 按照 2.4 项各中药最细粉的有效成分的定量测定方法进行测定 [2], 绘制累积溶出率曲线 采用差异因子 (f 1 ) 法, 比较留样 6 12 个月时 3 种中药最细粉的体外溶出率曲线的差异性 [9] f 1 计算公式如下 : n f 1 = t 1 n R t t 1 (R t -T t ) / R t 为参照制剂在 t 时间的溶出率,T t 为实验制剂 t 时间的溶出率,n 为时间点个数对于认为相似的曲线,f 1 值应接近于, 一般情况下,f 1 值在 ~15 时 2 条曲线可确认为等价性 [1] 图 4 是 3 种中药最细粉在常温留存 6 12 个月后的溶出率曲线, 均无显著性差异 通过 f 1 的计算, 也表明 和最细粉在常温留样 12 个月的时间内, 体外溶出率曲线的差异性很小, 具有等价性 3 讨论超微粉碎是利用机械或流体动力的方法克服固体内部凝聚力使之破碎 与传统粉碎相比, 超微粉碎可使中药材细胞破壁率达 95% 以上并且能打碎细胞, 使细胞内外的有效成分充分暴露出来, 提高溶

5 中草药 Chinese Trditionl nd Herbl Drugs 第 45 卷第 23 期 214 年 12 月 个月 6 个月 个月 t / min 图 4 不同留样时间的 和最细粉的的体外溶出率曲线 Fig. 4 In vitro dissolution curves of effective ingredient of FTB, GR, nd RCRR superfine powder smpled in different time 出率 中药超微粉粒径一般在 75 μm 以下, 明显提高粉末的均匀性, 从而使制剂的质量得到改善, 更 [11] 有利于有效成分的释放或溶出, 增加疗效 蔡光先采用留样观察法和加速试验法, 按照超微饮片质量标准的规定对 4 余种超微饮片进行了稳定性研究, 结果表明, 各项指标均符合质量标准的规定, 保存期定为 2 年 本研究中, 选取了常用中药 和, 对其最细粉进行了 12 个月的常温留样实验, 从实验数据可以看到,3 种中药最细粉的稳定性良好, 形貌结构 粒径 比表面积 堆密度和休止角等粉体学特征没有发生显著性改变,3 种中药最细粉的有效成分的量基本保持不变, 体外溶出率曲线的差异性很小, 具有等价性, 为超微粉碎技术在中药制药中的科学应用提供了理论支持 参考文献 [1] 金毅. 中药超微粉碎研究进展 [J]. 山东中医杂志, 211, 3(9): 677. [2] 罗刚, 陈立庭, 周晶. 超微粉碎技术在中药研究中的应用 [J]. 现代药物与临床, 211, 26(2): [3] 化玮, 刘洋, 艾国, 等. 3 种中药最细粉的制备 及理化性质考察 [J]. 中草药, 213, 44(23): [4] 陈冰璞, 艾国, 黄正明. 粒径对粉体溶出度和药效学的影响 [J]. 中华中医药学刊, 214, 32(8): [5] 陈慧, 艾国, 黄正明. 最细粉和普通粉对帕金森病大鼠神经行为学 氧化应激反应和神经炎症反应的对比研究 [J]. 中国实验方剂学杂志, 214, 2(3): [6] 杨宏山, 艾国, 黄正明. 最细粉对糖尿病肾病大鼠的保护作用 [J]. 国际中医中药杂志, 214, 36(2): [7] 朱兰, 宋英, 黄东萍. 平均粒径变化对肉桂超细粉中挥发油稳定性的影响 [J]. 中华中医药学刊, 28, 26(1): [8] 胡鹏翼, 龚莹莹, 郑琴, 等. 不同粒径的复方丹参粉末的稳定性考察 [J]. 中国实验方剂学杂志, 214, 2(13): 1-7. [9] 王春柳, 赵国巍, 廖正根, 等. 超微粉碎对七厘散稳定性的影响 [J]. 中国实验方剂学杂志, 213, 19(9): 1-5. [1] 中国药典 [S]. 一部. 21. [11] 蔡光先. 超微中药的研究与应用及前景展望 [J]. 世界中医药, 211, 6(1):

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