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136 2012 年 增 刊 Ⅰ43) 卷 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 提 取 条 件 优 化 及 其 结 构 表 征 刘 新 华, 但 年 华, 胡 杨, 肖 世 维, 但 卫 华 1. 四 川 大 学 制 革 清 洁 技 术 国 家 工 程 实 验 室, 四 川 成 都 610065; 2. 四 川 大 学 生 物 医 学 工 程 技 术 研 究 中 心, 四 川 成 都 610065) 摘 要 : 以 牛 肌 腱 为 原 料, 通 过 酸 - 酶 结 合 法 提 取 胶 原 纤 维, 比 较 不 同 时 间 ph 值 酶 用 量 下 的 胶 原 纤 维 提 取 率 以 及 可 溶 性 胶 原 含 量, 从 而 得 到 提 取 胶 原 纤 维 最 优 工 艺, 并 用 SDS-PAGE 电 泳 DSC IR SEM AM 对 胶 原 纤 维 进 行 了 结 构 表 征 研 究 结 果 表 明, 在 4 下, 酸 - 酶 结 合 法 水 解 的 最 佳 条 件 为, 时 间 40h ph 值 为 2.5 酶 用 量 1.0% 该 条 件 下 所 得 胶 原 纤 维 提 取 率 较 高, 红 外 特 征 峰 明 显, 分 子 量 大 且 分 布 窄, 变 性 温 度 为 66.7 ;SEM 显 示 胶 原 纤 维 呈 现 孔 隙 均 匀 的 三 维 网 状 结 构, 孔 径 约 为 100~300μm;AM 观 察 到 胶 原 纤 维 以 单 根 原 纤 维 纤 维 束 等 形 式 存 在, 明 暗 相 间 的 横 纹 间 距 为 60.35nm 综 合 认 为 制 备 得 到 了 具 有 天 然 三 股 螺 旋 结 构 的 胶 原 纤 维 关 键 词 : 牛 腱 ; 胶 原 纤 维 ; 纤 维 束 中 图 分 类 号 : R318.08 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :1001-97312012) 增 刊 Ⅰ-0136-05 1 引 言 胶 原 纤 维 是 细 胞 外 基 质 的 主 要 骨 架 成 分, 广 泛 存 在 于 皮 肤 骨 肌 腱 等 中, 具 有 支 撑 和 保 护 作 用 胶 原 纤 维 是 原 胶 原 分 子 的 聚 集 体, 在 结 缔 组 织 中 排 列 成 束, 彼 此 交 织 原 胶 原 分 子 间 通 过 侧 向 共 价 交 联, 相 互 呈 阶 梯 式 有 序 排 列 聚 合 成 直 径 50~200nm 长 280nm 至 数 微 米 的 原 纤 维, 这 些 原 纤 维 组 成 胶 原 纤 维 相 比 胶 原 分 子, 除 拥 有 胶 原 的 四 级 结 构 外, 保 留 有 更 多 的 天 然 胶 原 空 间 结 构 特 征, 因 而 其 具 有 很 好 的 抗 张 强 度 韧 性 当 制 成 海 绵 时, 由 于 胶 原 纤 维 分 子 量 更 大, 空 间 结 构 更 复 杂, 遇 到 体 液 时, 不 易 流 失 变 形 和 降 解, 稳 定 性 更 高 胶 原 纤 维 作 为 生 物 材 料 前 景 广 阔, 目 前 已 应 用 于 临 床 的 有 组 织 工 程 支 架, 止 血 抑 菌 海 绵 等 多 年 来 提 取 胶 原 纤 维 的 方 法 比 较 少, 多 以 酸 溶 盐 析 提 取 1, 2 Hu 等 就 通 过 酸 溶 制 取 了 胶 原 纤 维, 纯 度 很 高 而 且 很 好 的 保 持 了 天 然 的 三 股 螺 旋 结 构, 可 作 为 生 物 医 学 材 料 ; 文 献 3,4 还 报 道 过 用 弹 性 蛋 白 酶 和 硼 氢 化 钠 进 行 前 处 理, 以 去 除 原 料 中 大 量 的 杂 质, 制 备 出 不 溶 性 胶 原 纤 维 现 行 的 方 法 最 大 的 缺 点 就 是 提 取 率 较 低 因 此 如 何 优 化 提 取 工 艺, 在 胶 原 纤 维 提 取 率 有 明 显 地 提 高 的 前 提 下, 还 要 保 证 其 制 品 的 纯 度 和 结 构 的 完 整, 是 目 前 研 究 的 重 点 本 文 以 牛 肌 腱 为 原 料, 利 用 酸 - 酶 结 合 浸 提 胶 原 纤 维, 实 验 采 用 正 交 设 计 法, 通 过 比 较 不 同 浸 提 时 的 时 间 酶 用 量 ph 值 下 产 物 的 提 取 率 及 可 溶 性 蛋 白 含 量, 从 而 获 得 最 佳 工 艺, 并 对 最 优 条 件 下 提 取 的 胶 原 纤 维 进 行 结 构 表 征 2 实 验 2.1 试 剂 与 仪 器 胃 蛋 白 酶 1 3000),Sgm 公 司 ; 冰 乙 酸 分 析 纯 ), 上 海 有 机 化 工 试 剂 研 究 所 ; 新 鲜 牛 肌 腱, 成 都 郭 家 桥 市 场 ; 高 速 离 心 机 LG10-24A, 北 京 医 用 离 心 机 厂 ; 冷 冻 干 燥 机 Zn6, 美 国 Lbn 公 司 ;SZ-2 自 动 双 重 纯 水 蒸 馏 器, 上 海 沪 西 分 析 仪 器 厂 ; 差 示 扫 描 量 热 仪,DSC2000PC, 德 国 耐 驰 公 司 ; 傅 里 叶 红 外 光 谱 仪 MAGNAIR560, 美 国 N 公 司 ; 原 子 力 显 微 镜, SPM9600, 日 本 V 公 司 ;JSM-5900 扫 描 电 镜,LV 日 本 电 子 株 式 会 社 2.2 胶 原 纤 维 的 制 取 2.2.1 牛 肌 腱 的 纯 化 将 新 鲜 牛 腱 洗 净, 剔 除 肉 质 血 管 及 边 缘 软 骨, 并 尽 量 除 去 表 面 筋 膜, 切 成 1mm 的 薄 片, 用 75% 的 乙 醇 浸 泡 24h, 用 双 蒸 水 多 次 漂 洗, 再 用 丙 酮 浸 泡 24h 脱 脂, 双 蒸 水 洗 净, 风 干 称 取 一 定 量 冷 冻 干 燥 后 的 牛 肌 腱, 加 入 一 定 量 的 双 蒸 水,4 恒 温 条 件 下 用 切 碎 机 打 碎 匀 浆, 每 次 匀 浆 时 间 为 30mn, 直 至 组 织 悬 浮 不 见 组 织 碎 片 为 止, 置 于 冰 柜 4 冷 却 2.2.2 酶 法 提 取 胶 原 纤 维 酶 法 水 解 的 影 响 因 素 主 要 有 酶 用 量 水 解 ph 值 水 解 时 间 以 及 水 解 温 度 根 据 前 期 研 究 的 成 果 5, 本 文 将 水 解 温 度 这 一 因 素 固 定, 即 酶 法 水 解 在 4 的 条 件 下 进 行 对 胃 蛋 白 酶 的 用 量 水 解 ph 值 以 及 水 解 时 间 3 个 因 素 进 行 优 化 实 验 采 用 正 交 设 计 法 6,7, 得 到 酶 法 水 解 的 正 交 试 验 因 素 水 平 表 和 酶 法 水 解 正 交 试 验 安 排 一 览 表, 如 表 1 2 所 示 以 提 取 率 和 可 溶 性 蛋 白 含 量 作 为 评 价 指 标 具 体 过 程 是 在 冷 却 后 的 组 织 悬 基 金 项 目 : 成 都 市 科 技 计 划 资 助 项 目 10GGYB345SW-023); 四 川 大 学 创 新 创 业 计 划 资 助 项 目 20120724); 四 川 大 学 青 年 教 师 科 研 启 动 基 金 资 助 项 目 2011SCU11102) 收 到 初 稿 日 期 :2012-06-19 收 到 修 改 稿 日 期 :2012-08-13 通 讯 作 者 : 但 年 华 作 者 简 介 : 刘 新 华 1991-), 男, 山 西 朔 州 人, 在 读 本 科, 师 从 但 卫 华 教 授, 从 事 胶 原 基 生 物 医 用 材 料 的 研 究

刘 新 华 等 : 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 提 取 条 件 优 化 及 其 结 构 表 征 浮 溶 液 中 分 别 加 入 一 定 量 的 1m/L NC 溶 液 胃 蛋 白 酶, 调 整 溶 液 ph 值, 置 于 4 消 化, 实 验 参 数 详 见 表 2 表 1 酶 法 水 解 正 交 试 验 因 素 水 平 表 L93 3 )) T1Thvhdunymhydy hgnl93 3 )) ph 值 h) 酶 用 量 %) 1 2.0 20 0.5 2 2.5 30 1.0 3 0 40 1.5 表 2 酶 法 水 解 正 交 试 验 安 排 一 览 表 及 实 验 结 果 L9 3 3 )) T2 Thhdunymhydyhgnndhuhgn L93 3 )) ph 值 h) 酶 用 量 %) 提 取 率 %) 1 2.5 40 0.5 34.05 2 0 40 1.0 25.17 3 2.0 40 1.5 30.13 4 2.5 20 1.0 21.97 5 2.0 20 0.5 6.76 6 0 20 1.5 17.89 7 2.5 30 1.5 21.05 8 0 30 0.5 10.33 9 2.0 30 1.0 27.05 K1 694 45.70 51.10 K2 79.04 58.43 74.19 K3 539 89.35 69.07 k1 21.313 15.233 17.033 k2 26.357 19.477 24.730 k3 17.797 29.783 2023 R 8.560 14.243 7.697 2.2.3 胶 原 纤 维 分 离 将 初 提 物 在 10000/mn 离 心 30mn, 去 除 上 清 液 在 沉 淀 中 加 入 双 蒸 水, 匀 浆, 以 1m/L NOH 调 节 溶 液 的 ph 值 为 7.0 左 右,4 静 置 过 夜 10000/ mn 离 心 30mn, 去 除 上 清 液 在 沉 淀 中 加 入 一 定 量 的 10mm/L HC 溶 液, 摇 荡 后 4 放 置 过 夜 匀 浆, 加 入 1/10 体 积 的 0.2m/L N2HPO4 调 节 溶 液 的 ph 值 为 7.2,4 放 置 过 夜 10000/mn 离 心 30mn, 去 除 上 清 液, 以 双 蒸 水 洗 涤 沉 淀 后, 加 入 去 离 子 水, 充 分 匀 浆, 冷 冻 干 燥 8 2.2.4 可 溶 性 胶 原 蛋 白 含 量 与 水 分 含 量 测 定 称 取 一 定 量 的 胶 原 纤 维 样 品, 将 其 溶 于 ph 值 为 2.0 的 醋 酸 溶 液 中 制 成 凝 胶, 搅 拌 过 夜 次 日 低 温 离 心 30mn, 转 速 10000/mn, 取 上 层 清 液, 再 用 凯 氏 定 氮 法 测 定 溶 液 可 溶 性 胶 原 蛋 白 含 量 水 分 含 量 测 定 采 用 烘 箱 法, 准 确 称 取 一 定 量 的 胶 原 纤 维, 于 100~ 105 干 燥 至 恒 重, 计 算 水 分 含 量 7 2.3 胶 原 结 构 表 征 对 优 化 条 件 下 提 取 的 胶 原 纤 维 进 行 结 构 表 征, 应 用 SDS-PAGE 电 泳 检 测 样 品 的 分 子 量 及 分 布, 用 DSC 分 析 样 品 的 纯 度 及 热 稳 定 性, 通 过 T-IR 分 析 表 征 样 品 的 三 股 螺 旋 结 构, 应 用 SEM TEM 分 析 胶 原 纤 维 的 空 间 结 构 及 组 成 等 3 结 果 与 讨 论 1 胶 原 纤 维 提 取 的 正 交 试 验 结 果 以 产 率 为 评 价 指 标, 对 正 交 试 验 结 果 进 行 分 析 评 价, 结 果 如 表 1 所 示 从 表 1 可 见, 各 因 素 对 提 取 率 影 响 次 序 依 次 为 时 间 ph 值 酶 用 量 由 于 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 编 织 的 比 较 紧 实, 时 间 太 短 使 得 酶 对 胶 原 纤 维 凝 胶 水 解 不 充 分, 不 足 以 将 端 肽 链 段 去 除, 也 不 能 将 一 些 交 联 键 打 断, 使 得 后 续 的 中 和 不 能 使 胶 原 纤 维 析 出 溶 液 ph 值 过 低, 使 胶 原 过 度 水 解 生 成 较 多 的 多 肽, 在 操 作 过 程 中 易 损 失 掉, 使 得 产 率 降 低 ; 同 时 ph 值 太 低, 酶 的 活 力 受 到 抑 制, 影 响 酶 的 作 用 而 当 ph 值 较 高 时 酶 的 活 性 稍 低, 胃 蛋 白 酶 不 能 发 挥 最 大 水 解 能 力, 产 率 也 受 到 抑 制 适 量 的 胃 蛋 白 酶 可 以 使 酶 促 反 应 朝 正 反 应 方 向 移 动, 酶 用 量 过 低, 则 不 足 以 使 底 物 深 入 反 应, 就 不 能 充 分 地 作 用, 使 得 在 离 心 中 牛 肌 腱 以 不 溶 物 被 滤 去, 提 取 率 下 降 ; 而 当 酶 浓 度 较 高 时, 反 应 液 中 水 解 出 的 胶 原 蛋 白 的 量 非 胶 原 蛋 白 的 量 随 着 反 应 的 进 行 等 逐 渐 增 多, 导 致 提 取 率 下 降 因 为 胃 蛋 白 酶 活 性 很 高, 在 适 宜 条 件 下, 只 需 较 少 的 量 就 能 发 挥 很 大 的 作 用, 故 酶 用 量 影 响 最 小 以 可 溶 性 蛋 白 为 评 价 指 标, 实 验 利 用 凯 氏 定 氮 法 反 复 测 定 可 溶 性 蛋 白 含 量, 结 果 均 为 零, 说 明 胶 原 纤 维 不 含 可 溶 性 蛋 白, 提 取 过 程 基 本 没 有 小 分 子 产 物, 纯 度 较 高 烘 箱 法 测 定 含 水 量 为 25.70%, 说 明 冷 冻 干 燥 后 的 胶 原 纤 维 还 含 有 一 定 量 的 水 分, 估 计 这 部 分 水 与 胶 原 纤 维 发 生 化 学 结 合, 较 难 除 去 从 图 1 不 难 看 出, 就 提 取 率 和 可 溶 性 蛋 白 含 量 来 讲, 在 温 度 4, 提 取 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 最 佳 工 艺 为 : 胃 蛋 白 酶 用 量 1.0%,pH 值 为 2.5, 时 间 40h, 提 取 率 最 高 2 胶 原 纤 维 分 子 量 大 小 及 分 布 从 图 2 中 可 以 明 显 看 出 电 泳 图 含 有 4 个 谱 带, 分 别 是 胶 原 的 α2 组 分 约 1 10 5 g/m) α1 组 分 约 1.16 10 5 g/m) β 组 分 约 2.05 10 5 g/m) 及 γ 组 分 约 2.95 10 5 g/m) 其 中 β 组 分 为 α 肽 链 的 二 聚 体,γ 组 分 为 α 肽 链 的 三 聚 体, 这 与 相 关 报 道 基 本 文 献 3 符 合 图 2 中 未 见 其 它 谱 带, 说 明 样 品 胶 原 纤 维 纯 度 较 高 137 3 胶 原 纤 维 红 外 光 谱 分 析 胶 原 纤 维 的 特 征 吸 收 峰 明 显, 主 要 有 酰 胺 Ⅰ Ⅱ 带 和 Ⅲ 带 等 3 处 从 图 3 可 见, 样 品 在 1656.16m -1 处 出 现 较 强 的 吸 收, 是 酰 胺 Ⅰ 带 的 υc=o 伸 缩 振 动 强 峰, 说 明 样 品 中 都 存 在 形 成 三 股 螺 旋 内 氢 键 的 C O; 1560m -1 处 是 酰 胺 Ⅱ 带 的 υn-h 弯 曲 振 动 吸 收 峰 ;

138 1239. 97m 处为酰胺 Ⅲ 带的υN-H 的变形峰 ;根据 P p 等 10 的 分 析,在 1235~1450m-1 范 围 存 在 吸 9-1 2012 年增刊 Ⅰ 43)卷 泳所得结果,可 以 认 为 样 品 很 好 的 保 持 了 天 然 的 三 股 螺旋结构 收,表明构建胶 原 基 础 键 基 本 没 有 被 破 坏 再 结 合 电 图 1 酶法水解正交试验效应曲线图 v n hyd hgn g1thu ym y 图 2 优化方案的胶原纤维 SDS -PAGE 图 -PAGE gn x dbyp g2sds m np g m 图 4 胶原纤维 DSC 曲线 v gn g4dscu 扫描电镜分析 5 由图 5 可见,胶 原 纤 维 经 冷 冻 干 燥 后 形 成 具 有 一 定孔径的三维网状结构,孔径约为 100~300μm 同时 还可以 清 晰 地 看 到 较 多 的 胶 原 纤 维 束,其 直 径 大 约 100~200nm 不等 图 3 胶原纤维红外光谱 gn g3ir 4 胶原纤维差示扫描量热分析 热变性温度是 其 天 然 生 物 材 料 的 一 项 重 要 指 标, 不同的物质它们的特征峰也不同 当环境温度超过其 变性温度,胶原纤维的天然螺旋结构被破坏,其生物学 性能也随之消 失 或 受 到 破 坏 由 图 4 可 见,样 品 中 共 有两个峰,分别出现在66. 7 和90 附近 第1 个峰为 胶原 纤 维 的 热 变 形 温 度,与 文 献 11比 较 的 胶 原 纤 维 峰温要稍高一点,峰形也较为尖陡,由文献 5可知,试 样的纯度越 高, DSC 曲 线 的 熔 融 峰 就 越 尖 陡,峰 温 也 越高 可见,样品纯度较高 第 2 个峰为水峰,说明胶 原 纤 维 内 含 有 水 分,胶 原 纤 维 与 水 结 合 的 相 当 牢 固 同时也因为结合 水 的 存 在,胶 原 纤 维 与 水 形 成 较 多 的 氢键,胶原纤维结构更加稳定,热变形温度也就相对较 高 图 5 胶原纤维的 SEM 图 gn g5semmg 6 胶原纤维 AM 观察 胶原 纤 维 是 胶 原 分 子 的 聚 集 体,根 据 Shm 等 提出,胶原分子不 仅 侧 向 聚 集,而 且 轴 向 延 伸,侧 向 聚

刘新华 等:牛肌腱胶原纤维提取条件优化及其结构表征 集的平行排列的 胶 原 分 子 并 不 是 齐 头 齐 尾,而 是 相 互 前后错开一定的 距 离,交 错 距 离 就 是 周 期 性 明 暗 横 纹 的间距,大约为 67nm,这 种 特 殊 的 横 纹 是 区 分 胶 原 跟 139 这与 SEM 的 结 果 是 一 致 的 结 合 IR SDS -PAGE SEM 和 AM 等 结 果,认 为 所 得 胶 原 纤 维,保 持 有 良 好的三维结构 胶原纤维最有 力 的 证 据 胶 原 分 子 构 成 原 纤 维,原 纤 维有特殊的明暗 相 接 的 横 带,相 邻 原 纤 维 之 间 紧 密 排 列,明暗横纹相互 对 应;原 纤 维 又 构 成 基 础 纤 维,胶 原 纤维缠绕编织形 成 纤 维 束,纤 维 束 的 次 级 结 构 是 基 础 纤维 基础纤维 表 面 存 在 有 由 原 纤 构 成 的 束 带,其 断 面不太规则,但曲面 较 为 光 滑 12 实 验 通 过 原 子 力 显 微镜观察胶原纤维存在的结构,如图 6~9 所示 图 9 胶原纤维明暗相间横纹 ndhd n w hh n g9 Th gh n gn g 表 3 横纹间距分析结果 Tb 3Thn u h n g np y ng 图 6 胶原纤维空间网状编织结构 w kp w v u u gn g6thn 1 1 2 2 3 3 均值 4 结 论 长 nm) 58. 95 6 16 58. 95 60. 35 高 nm) 7. 41 0. 46 6. 30 4. 72 角度 ) 7. 16 0. 42 6. 10 4. 56 1) 在 4 下,酶 法 提 取 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 的 最 优 条件为:胃蛋白酶 1: 3000)用量 1. 0%,pH 值 2. 5,水 解时间 40h 2) 提取率较文献报道的有所提高,所得胶原纤 维纯度高,分子量大且分布窄,红外特征峰明显 图 7 胶原纤维束 gn bund g7c 3) SEM 观察 到 胶 原 纤 维 形 成 了 孔 径 约 为 100 ~300μm 的三维网 状 结 构;AM 观 察 到 胶 原 纤 维 存 在明暗相间横 纹,间 距 大 约 为 60. 35nm 胶 原 纤 维 以 原纤维 纤维束等结构都存在 4) 综合 认 为 制 备 得 到 了 具 有 天 然 三 股 螺 旋 结 构的胶原纤维 参考文献: 1 蒋 挺 大.胶 原 与 胶 原 蛋 白 M.北 京:化 学 工 业 出 版 社, 图 8 胶原纤维束与胶原纤维 gn bund nd gn g8c 由 图 6~9 可 见,所 得 胶 原 纤 维 以 多 种 状 态 存 在, 包括单根纤维图 8 9) 纤 维 束 图 7)和 网 状 编 织 图 ) 单根纤维可 以 见 到 相 似 明 暗 相 间 的 横 纹 结 构,横 6 纹间距大约 60. 35nm图 9 表 3) 纤维断面形状不太 规则,但曲面较为 光 滑,以 椭 圆 较 为 多 见,而 且 编 织 紧 密,相互重叠图 8) 这 些 纤 维 在 一 定 时 间 温 度 等 条 件下,发 生 自 聚 集 作 用,最 后 形 成 网 状 编 织 结 构 11 2006. 98 102., 2 Hu A n,gu mn,.p p p n gn n n ng n m p p n n ub gn j nd gnhv ngh hn n nd h gh m m b nd h by P.USP:5331092, 1994 yb 07 19. 程海明, 王 睿,王英梅,等.猪 皮 酸 松 弛 胶 原 纤 维 的 制 备 3 及性能 表 征 J.四 川 大 学 学 报 工 程 科 学 版 ), 2007,39 03): 78 81. 4 On ni, h D,O vj,.thp p n h d n ub gn J.JAm L hchm gh ypu A,1970,65 9):440 450.

140 2012 年 增 刊 Ⅰ43) 卷 5 叶 易 春, 但 卫 华, 曾 睿, 等. 酶 法 提 取 牛 腱 胶 原 的 研 究 9 周 文 常, 但 卫 华, 廖 隆 理, 等. 猪 皮 胶 原 的 提 取 及 其 结 构 表 J. 中 国 皮 革,2005,347):4-7. 6 胡 杨, 蒋 远 干, 但 卫 华. 胃 蛋 白 酶 提 取 猪 皮 胶 原 的 研 究 J. 中 国 皮 革,2010,3923):11-15. 7 林 海, 但 卫 华, 曾 睿, 等. 胃 蛋 白 酶 提 取 猪 皮 胶 原 蛋 白 的 工 艺 优 化 及 其 过 程 模 拟 J. 中 国 皮 革,2006,355): 19-22. 8 王 秋 卓. 牛 跟 腱 制 造 海 绵 状 胶 原 蛋 白 纤 维 的 技 术 研 究 J. 中 国 医 药 生 物 技 术,2011,64):305-306. 征 J. 中 国 皮 革,2004,3313):36-38. 10 PpA M D G,GG,D-GupD K.D nd pyhn nnnd nv gnj.pymengs,1996,36):2932-2938. 11 琚 海 燕, 陈 晓 威, 苏 德 强, 等. 牛 肌 腱 胶 原 纤 维 凝 胶 的 特 性 表 征 J. 皮 革 科 学 与 工 程,2008,1801):14-17. 12 詹 怀 宇, 李 自 强, 蔡 再 生. 纤 维 化 学 与 物 理 M. 北 京 : 化 学 出 版 社,2005.380-388. Thpmnbvnndngnxnndnnd uuhngn LIU Xn-hu,DAN Nn-hu,HU Yng,XIAOSh-w,DAN W-hu 1.NnEngnngLbyCnThngyLhMnuu, ShunUnvy,Chngdu610065,Chn; 2.ThCnBmdnEngnngShunUnvy,Chngdu610065,Chn) Ab:Cgnwxdbydwnḡppndgn mhdm bvnndn.cm- pdwhhxnhgnndhnnugnnhgnun- dhndndnm,ph,hnymdg,hpmum pjwvd.thngnwhdbysds-page,irp,dnnnngm DSC)ndm mp AM),nnngn mp SEM).Thuhwhhpmdndnw40h,pH2.5,1.0% ppn.rvygnbhhdhghxnndhghmuwgh.thdscvdhhdnumpugnw66.7.thp gnwbu100-300μmbysem.whhamvd,wdwnunhh gggngnwmpxnudngngndbunduu.sem nmhnunam.anqun,hgnbungnphxuu. Kywd:bvnndn;gn;bund 17 WngH,XJ,Zhng,.Inndunnun- 上 接 第 139 页 ) dpdsnp2o7 nmdmpu J.Sd 15 TmA,NmkY,NgM,.Rm-mpuhydgnndnnIn 3+ -dpdsnp2o7 pnndu J.Ehm S,2007,154: B1265-B1269. 16 Wng H,LuJ,Wng W,.Inmdmpun ndun n Sn1-xGxP2O7 J. Pw Su,2010,195:5596-5600. SIn,2010,181:1521-1524. 18 GunJ,DSE,Bhdn U,.Tnp ppbc0.95y0.05o3-δ mxdnduhȳ dgnpnj.sdsin,1997,100:45-52. 19 Shmu T,Ek K,Mum H,.Pn ndunnrh-dpdazo3a=b,sndc)j. SdSIn,2002,149:237-246. InmdmpuppSn0.97S0.03P2O7 ZHUJn- 1,WANG Hnḡ 2,MA Gu-n 2 1.HunCgInmnThngy,Hun223003,Chn; 2.CgChmy,ChmEngnngndMSn,Shw Unvy,Suhu215123,Chn) Ab:Sn0.97S0.03P2O7 wynhdbyd-n mhd,ndhndunhvw nvgdbymhmmhdnudngacmpdnppy,gnnnn hmpung50-250.thhghnduvywvd1.51 10-2 S/mundwH2 mph175.thuwvpnnnnddhhmphhxn xdnndunundwh2mphndmnypnndunundwo2mph.th H2/uungSn0.97S0.03P2O7nygndhmxmumpwdny11.16mW/m 2 150. Kywd:Sn0.97S0.03P2O7;ACmpdn;nduvy;u