课 程 名 称 微 生 物 学 和 微 生 物 学 检 验 授 课 题 目 上 海 交 通 大 学 医 学 院 教 案 支 原 体 螺 旋 体 衣 原 体 立 克 次 体 真 菌 学 授 课 日 期 2012 年 4 月 9 日 授 课 班 级 10 本 授 课 时 数 3 学 时 授 课 方 式 大 课 授 课 重 点 难 重 点 : 1. 掌 握 支 原 体 的 定 义, 肺 炎 支 原 体 溶 脲 脲 原 体 致 病 性 2. 掌 握 衣 原 体 的 定 义, 发 育 周 期 及 沙 眼 衣 原 体 沙 眼 亚 种 致 病 性 3. 掌 握 钩 端 螺 旋 体 的 致 病 性 检 查 方 法 及 防 治 原 则 苍 白 密 螺 旋 体 苍 白 亚 种 生 物 学 特 性 致 病 性 与 免 疫 性 ; 伯 氏 疏 螺 旋 体 的 形 态 致 病 性 4. 掌 握 与 人 类 疾 病 有 关 的 立 克 次 体 等 的 致 病 机 制 和 检 查 方 法 5. 真 菌 的 定 义, 形 态 结 构 和 培 养 特 性 难 点 : 1 支 原 体 的 形 态 结 构 培 养 特 性 2 梅 毒 螺 旋 体 的 形 态 染 色, 抵 抗 力 如 何 3 衣 原 体 的 繁 殖 周 期, 原 体 和 始 体 的 不 同 点 点 授 课 内 容 教 具 与 时 间 分 配 教 具 :CAI 授 课 内 容 : 支 原 体 螺 旋 体 衣 原 体 立 克 次 体 真 菌 支 原 体 一 概 述 1. 形 态 结 构 支 原 体 没 有 细 胞 壁, 具 有 高 度 多 形 性, 基 本 形 态 为 球 形 双 球 形 及 丝 状, 大 小 为 0.2~0.3μm 革 兰 染 色 阴 性, 但 不 易 着 色, 用 姬 姆 萨 染 料 着 色 较 好, 呈 淡 紫 色 2. 培 养 特 性 繁 殖 方 式 和 生 化 反 应 支 原 体 的 营 养 要 求 比 一 般 细 菌 高, 培 养 基 中 须 加 入 血 清 体, 以 二 分 裂 繁 殖 为 主, 繁 殖 缓 慢, 在 固 体 培 养 基 上 孵 育 2~3 天 ( 有 的 需 要 2 周 ) 后 形 成 荷 包 蛋 样 细 小 菌 落 ; 在 液 体 培 养 基 中 支 原 体 的 生 长 量 较 少, 且 个 体 小, 一 般 不 易 见 到 混 浊, 故 液 体 清 亮 支 原 体 可 根 据 是 否 能 利 用 葡 萄 糖 水 解 精 氨 酸 和 尿 素 来 进 行 鉴 别 意 义 3. 抗 原 构 造 细 胞 膜 上 的 抗 原 由 蛋 白 质 和 糖 脂 组 成, 特 异 性 强, 在 鉴 定 支 原 体 时 有 重 要 4. 抵 抗 力 支 原 体 因 无 细 胞 壁 对 理 化 因 素 的 影 响 比 细 菌 敏 感, 对 醋 酸 铊 结 晶 紫 的 抵 抗 力 大 于 细 菌, 培 养 基 中 加 入 一 定 量 醋 酸 铊 可 除 去 杂 菌 生 长 支 原 体 对 干 扰 细 胞 壁 合 成 的 抗 生 素 耐 药, 但 对 干 扰 蛋 白 质 合 成 的 抗 生 素 如 强 力 霉 素 氯 霉 素 红 霉 素 螺 旋 霉 素 链 霉 素 等 敏 感 5. 种 类 和 所 致 疾 病 对 人 致 病 的 主 要 有 肺 炎 支 原 体, 可 引 起 原 发 性 非 典 型 肺 炎, 溶 脲 脲 原 体 人 型 支 原 体 和 生 殖 器 支 原 体 在 一 定 条 件 下 也 能 引 起 泌 尿 生 殖 系 统 感 染 二 肺 炎 支 原 体 (M.pneumoniae) 1. 分 布 可 见 于 正 常 人 和 动 物 呼 吸 道 粘 膜 上 2. 所 致 疾 病 主 要 侵 犯 呼 吸 道, 一 般 通 过 飞 沫 传 播, 引 起 支 原 体 肺 炎, 其 病 理 变 化 以 间 质 性 肺 炎 为 主, 又 称 原 发 性 非 典 型 肺 炎 患 者 表 现 有 些 喘 息 性 哮 喘 支 气 管 炎 与 之 有 关 肺 外 并 发 症, 包 括 脑 膜 脑 炎 心 血 管 症 状 上 行 性 麻 痹 溶 血 性 贫 血 关 节 炎 和 皮 疹 与 其 有 关 3. 微 生 物 学 检 查 主 要 用 分 离 培 养 ; 也 可 用 血 清 学 检 查, 临 床 上 常 用 冷 凝 集 试 验, 但 此 试 验 是 非 特 异 性 反 应 三 泌 尿 生 殖 道 感 染 支 原 体 引 起 泌 尿 生 殖 道 感 染 的 支 原 体 主 要 有 溶 脲 脲 原 体 人 型 支 原 体 生 殖 器 支 原, 主 要 通 过 性 传
播, 引 起 非 淋 菌 性 尿 道 炎, 故 也 属 于 性 传 播 性 疾 病 除 外, 还 认 为 与 孕 妇 流 产 出 生 缺 陷 死 胎 及 不 育 症 有 关 螺 旋 体 苍 白 密 螺 旋 体 苍 白 亚 种 (T. pallidum subsp.pallidum) 属 密 螺 旋 体 属, 俗 称 梅 毒 螺 旋 体, 人 体 是 其 唯 一 宿 主 ( 一 ) 生 物 学 性 状 1. 形 态 全 长 5~15μm 有 8~14 个 致 密 而 规 则 的 小 螺 旋, 两 端 尖 直, 运 动 活 泼 常 用 镀 银 染 色 法 可 将 螺 旋 体 染 成 棕 褐 色, 用 暗 视 野 显 微 镜, 直 接 观 察 活 体 2. 培 养 特 性 不 能 在 无 活 细 胞 的 人 工 培 养 基 中 生 长 繁 殖 在 家 兔 上 皮 细 胞 培 养 中 能 有 限 生 长, 也 可 用 动 物 接 种 分 离 培 养 3. 抵 抗 力 抵 抗 力 极 弱, 对 温 度 和 干 燥 特 别 敏 感, 血 液 中 的 螺 旋 体, 在 4 置 3 天 后 可 死 亡, 对 青 霉 素 四 环 素 红 霉 素 或 砷 剂 均 敏 感 ( 二 ) 致 病 性 自 然 情 况 下, 苍 白 密 螺 旋 体 苍 白 亚 种 只 感 染 人 类, 人 是 梅 毒 的 唯 一 传 染 源 梅 毒 有 先 天 性 和 获 得 性 两 种 : 1. 先 天 性 梅 毒 由 母 体 通 过 胎 盘 传 染 胎 儿, 引 起 胎 儿 的 全 身 性 感 染, 导 致 流 产 早 产 或 死 胎 ; 或 出 生 梅 毒 儿, 呈 现 马 鞍 鼻 锯 齿 形 牙 间 质 性 角 膜 炎 先 天 性 耳 聋 等 特 殊 体 症 2. 获 得 性 梅 毒 主 要 经 性 接 触 传 播, 属 性 传 播 疾 病, 临 床 上 分 为 三 期 : (1) 一 期 梅 毒 : 也 称 硬 下 疳, 感 染 后 3 周 左 右 出 现, 外 生 殖 器 溃 疡, 有 渗 出 液, 含 大 量 螺 旋 体, 此 时 传 染 性 极 强,4~8 周 自 愈 (2) 二 期 梅 毒 : 全 身 梅 毒 疹, 全 身 皮 肤 粘 膜 出 现 梅 毒 疹, 全 身 淋 巴 结 肿 大, 可 累 及 骨 关 节 眼 等, 此 时 传 染 性 强 (3) 三 期 晚 期 梅 毒 : 感 染 2 年 后, 可 长 达 10~15 年, 病 变 可 波 及 全 身 组 织 器 官, 基 本 损 害 为 慢 性 肉 芽 肿, 局 部 动 脉 内 膜 炎 引 起 缺 血, 组 织 坏 死, 侵 犯 神 经 和 血 管 时 可 危 及 生 命 ( 三 ) 免 疫 性 梅 毒 的 免 疫 是 感 染 性 免 疫, 细 胞 免 疫 比 体 液 免 疫 重 要 患 者 可 产 生 两 种 抗 体 : 特 异 性 抗 菌 体 多 肽 抗 体 和 非 特 异 性 抗 心 肌 磷 脂 抗 体, 即 反 应 素 (reagin) 但 起 免 疫 作 用 的 是 特 异 性 抗 体 ( 四 ) 检 查 方 法 常 用 直 接 镜 检 和 血 清 学 试 验 1. 直 接 镜 检 取 Ⅰ Ⅱ 期 梅 毒 疹 渗 出 液 或 局 部 淋 巴 结 抽 出 液 直 接 在 暗 视 野 显 微 镜 下 检 查 也 可 将 标 本 与 荧 光 标 记 的 苍 白 亚 种 螺 旋 体 抗 体 结 合 后, 在 荧 光 显 微 镜 下 观 察 ; 或 用 ELISA 法, 在 普 通 光 学 显 微 镜 下 检 查 2. 血 清 学 试 验 有 非 密 螺 旋 体 抗 原 试 验 和 密 螺 旋 体 抗 原 试 验 两 类 : (1) 非 密 螺 旋 体 抗 原 试 验 : 是 用 正 常 牛 心 肌 的 心 脂 质 (cardiolipin) 作 为 抗 原, 测 定 患 者 血 清 中 的 反 应 素 ( 抗 脂 质 抗 体 ) 最 常 用 的 有 VDRL 试 验 和 RPR 试 验 ( 均 为 间 接 凝 集 试 验 ), 因 是 非 特 异 性 抗 原 抗 体 反 应, 所 以 适 用 于 大 量 过 筛 时 使 用 (2) 密 螺 旋 体 抗 原 试 验 : 采 用 Nichols 株 螺 旋 体 作 为 抗 原, 测 定 血 清 中 的 螺 旋 体 特 异 抗 体, 特 异 性 强, 可 用 作 梅 毒 证 实 试 验 常 用 的 有 FTA-ABS 试 验 ( 间 接 荧 光 抗 体 法 ) 和 MHA-TP 试 验 ( 微 量 间 接 血 凝 试 验 ) 二 伯 氏 疏 螺 旋 体 (B. burgdorferi) 属 疏 螺 旋 体 属, 此 属 中 对 人 致 病 的 主 要 有 伯 氏 疏 螺 旋 体 回 归 热 螺 旋 体, 它 们 均 通 过 吸 血 昆 虫 媒 介 而 分 别 致 莱 姆 病 (Lyme disease) 和 回 归 热 ( 一 ) 生 物 学 特 性 疏 螺 旋 体, 两 端 稍 尖, 运 动 活 泼, 有 扭 转 翻 滚 抖 动 等 多 种 方 式 能 在 人 工 无 生 命 培 养 基 上 生 长, 营 养 要 求 高, 生 长 缓 慢, 一 般 需 培 养 2~3 周 始 可 观 察 到 生 长 情 况 ( 二 ) 致 病 性 致 病 物 质 有 粘 附 素 和 内 毒 素 等, 引 起 莱 姆 病, 至 少 有 11 个 种, 是 一 种 自 然 疫 源 性 传 染 病, 野 生 和 驯 养 的 哺 乳 动 物 是 主 要 储 存 宿 主, 传 染 源 是 啮 齿 类 动 物, 主 要 传 播 媒 介 是 硬 蜱
( 三 ) 微 生 物 学 检 查 主 要 依 靠 血 清 学 试 验 ( 免 疫 荧 光 法 和 ELISA) 和 分 子 生 物 学 技 术 来 诊 断 莱 姆 病 ( 四 ) 防 治 原 则 疫 区 工 作 人 员 要 加 强 个 人 保 护, 避 免 硬 蜱 叮 咬 治 疗 使 用 抗 菌 素 三 钩 端 螺 旋 体 (Leptospira) ( 一 ) 生 物 学 特 性 1. 形 态 染 色 螺 旋 细 密 规 则, 形 似 细 小 珍 珠 排 列 的 细 链 一 端 或 两 端 呈 钩 状 运 动 活 泼, 常 使 菌 体 呈 C S 或 8 字 形 常 用 Fontana 镀 银 染 色 法, 钩 端 螺 旋 体 被 染 成 棕 褐 色 2. 培 养 特 性 营 养 要 求 复 杂, 常 用 Korthof 培 养 基, 生 长 温 度 为 28~30, 钩 端 螺 旋 体 在 人 工 培 养 基 中 生 长 缓 慢,28 孵 育 1~2 周, 液 体 培 养 基 呈 半 透 明 云 雾 状 生 长 ; 在 固 体 培 养 基 上, 经 1~3 周, 孵 育 可 形 成 透 明 不 规 则 直 径 <2mm 的 扁 平 细 小 菌 落 3. 抵 抗 力 : 钩 端 螺 旋 体 对 热 抵 抗 力 弱,60 1 分 钟 即 死 亡 对 青 霉 素 敏 感 在 湿 土 或 水 中 可 存 活 数 月, 这 在 传 播 上 有 重 要 意 义 ( 二 ) 致 病 物 质 与 所 致 疾 病 1. 传 染 源 和 传 播 途 径 钩 端 螺 旋 体 病 是 一 种 人 畜 共 患 传 染 病, 鼠 类 和 猪 等 为 传 染 源, 其 排 泄 物 污 染 水 源 等, 人 类 与 污 染 的 水 或 土 壤 接 触 而 受 感 染 2. 致 病 性 与 免 疫 性 3. 微 生 物 学 检 查 包 括 病 原 体 检 测 和 血 清 学 诊 断, 病 原 体 检 测 在 发 病 10 天 内 取 血 液 ;1 周 后 取 尿 液, 有 脑 膜 刺 激 者 取 脑 脊 液 标 本, 做 直 接 镜 检 和 分 离 培 养, 也 可 接 种 豚 鼠 等 动 物 或 用 分 子 生 物 学 方 法 作 诊 断 ; 血 清 学 诊 断 主 要 包 括 显 微 镜 凝 集 试 验 和 间 接 凝 集 试 验 4. 防 治 原 则 钩 端 螺 旋 体 病 是 一 种 人 畜 共 患 病, 要 做 好 防 鼠 灭 鼠 工 作, 以 及 加 强 对 带 菌 家 畜 的 管 理, 预 防 可 用 疫 苗, 治 疗 用 抗 菌 素 四 其 他 ( 一 ) 回 归 热 疏 螺 旋 体 (B.recurrentis) 引 起 回 归 热, 是 一 种 急 性 传 染 病 根 据 传 播 媒 介 昆 虫 的 不 同, 分 为 虱 传 回 归 热 ( 流 行 性 回 归 热 ); 为 蜱 传 回 归 热 ( 地 方 性 回 归 热 ) ( 二 ) 奋 森 疏 螺 旋 体 (B.vincentii) 正 常 情 况 下 与 梭 形 梭 杆 菌 寄 居 于 人 类 口 腔 牙 龈 部 当 机 体 免 疫 功 能 下 降, 则 这 两 种 菌 大 量 繁 殖, 协 同 引 起 奋 森 咽 峡 炎 牙 龈 炎 口 腔 坏 疽 等 普 氏 立 克 次 体 (R.prowaxekii) 与 斑 疹 伤 寒 立 克 次 体 (R.typhii) ( 一 ) 生 物 学 特 性 1. 形 态 染 色 呈 多 形 态 性, 以 短 杆 形 为 革 兰 染 色 阴 性, 着 色 较 淡 常 用 Giménez 法 染 色 呈 鲜 红 色, 姬 姆 萨 法 染 色 呈 紫 色 或 蓝 色 ;Macchiavello 法 染 色 呈 红 色 2. 培 养 特 性 普 氏 立 克 次 体 和 绝 大 多 数 立 克 次 体 为 专 性 活 细 胞 内 寄 生, 可 用 动 物 接 种 鸡 胚 接 种 和 细 胞 培 养 方 法 培 养, 采 用 豚 鼠 和 小 鼠 接 种 是 最 常 用 的 方 法 3. 抗 原 构 造 : ( 二 ) 致 病 性 为 自 染 疫 源 性 疾 病, 节 肢 动 物 作 为 媒 介, 主 要 包 括 : 疾 病 病 原 体 传 染 源 传 播 媒 介 流 行 性 斑 疹 伤 寒 普 氏 立 克 次 体 病 人 人 虱 地 方 性 斑 疹 伤 寒 莫 氏 立 克 次 体 鼠 鼠 蚤 鼠 虱 ( 三 ) 微 生 物 学 检 查 包 括 分 离 培 养 和 血 清 学 诊 断, 分 离 培 养 比 较 困 难, 临 床 上 常 用 外 斐 反 应 和 补 体 结 合 试 验 作 立 克 次 体 病 的 诊 断 ( 四 ) 防 治 原 则 预 防 措 施 主 要 是 要 改 善 居 住 条 件, 讲 究 个 人 卫 生, 灭 虱 灭 蚤 和 灭 鼠 特 异 性 预 防 用 可 接 种 疫 苗, 氯 霉 素 和 四 环 素 类 抗 生 素 对 普 氏 立 克 次 体 和 其 它 立 克 次 体 均 有 效 三 恙 虫 病 东 方 体 (O.tsutsugamushi)
引 起 恙 虫 病, 是 一 种 自 然 疫 源 性 疾 病, 四 贝 纳 柯 克 斯 体 (C.burnetii) 引 起 Q 热, 蜱 既 是 寄 生 宿 主 和 储 存 宿 主, 又 是 动 物 间 的 传 播 媒 介, 受 感 染 家 畜 是 主 要 传 染 原, 其 乳 汁 尿 粪 中 可 长 期 带 有 病 原 体, 由 消 化 道 或 呼 吸 道 接 触 感 染 人, 临 床 表 现 类 似 流 感 或 原 发 性 非 典 型 肺 炎, 发 病 突 然, 高 热 寒 战, 常 有 剧 烈 头 痛 肌 肉 疼 痛 和 食 欲 减 退 五 汉 赛 巴 通 体 (B.henselae) 是 猫 抓 病 的 主 要 病 原 体, 传 染 源 主 要 为 猫 和 狗, 尤 其 是 幼 猫, 人 通 过 与 它 们 接 触 而 感 染 衣 原 体 一 生 物 学 特 性 1. 形 态 染 色 衣 原 体 在 宿 主 细 胞 内 繁 殖, 具 有 独 特 的 发 育 周 期, 呈 现 两 种 不 同 的 形 态 结 构, 分 别 称 为 原 体 和 始 体 (1) 原 体 : 小 球 形, 有 胞 壁, 是 发 育 成 熟 的 衣 原 体, 有 高 度 的 感 染 性 姬 姆 萨 染 色 紫 色 ; (2) 始 体 : 大 球 形, 无 胞 壁, 无 感 染 性, 是 其 繁 殖 型 姬 姆 萨 和 Macchiavello 染 色 均 呈 蓝 色 2. 发 育 周 期 原 体 吸 附 细 胞 进 入 始 体 繁 殖 包 涵 体 原 体 释 放 吸 附 细 胞 3 培 养 特 性 : 衣 原 体 营 专 性 细 胞 内 寄 生, 可 用 接 种 动 物 接 种 和 细 胞 培 养 三 大 方 法 来 培 养 4. 抵 抗 力 : 衣 原 体 对 热 敏 感, 在 60 仅 能 存 活 5~10 分 钟 而 耐 冷, 常 用 消 毒 剂 也 能 迅 速 杀 灭 衣 原 体, 红 霉 素 强 力 霉 素 和 四 环 素 等 有 抑 制 衣 原 体 繁 殖 的 作 用 三 主 要 致 病 性 衣 原 体 1. 沙 眼 衣 原 体 (C. trachomatis) 三 个 亚 种, 即 沙 眼 生 物 亚 种 (Biovar trachoma) 性 病 淋 巴 肉 芽 肿 亚 种 (Biovar lympogranuloma venereum, LGV) 和 鼠 亚 种 (Biovar mouse) (1) 沙 眼 亚 种 : 引 起 沙 眼 ( 主 要 通 过 眼 - 眼 或 眼 - 手 - 眼 的 途 径 传 播 ) 包 涵 体 结 膜 炎 ( 婴 儿 通 过 产 道 时 受 染, 成 人 感 染 可 因 性 接 触 经 手 传 染 至 眼, 亦 可 因 污 染 的 游 泳 池 水 而 感 染 ) 泌 尿 生 殖 道 感 染 ( 经 性 接 触 传 播 引 起 的 非 淋 菌 性 泌 尿 生 殖 道 感 染 ) 沙 眼 衣 原 体 肺 炎 ( 由 D-K 血 清 型 引 起 婴 儿 沙 眼 衣 原 体 肺 炎 )( 血 清 型 ) (2) 性 病 淋 巴 肉 芽 肿 亚 种 通 过 性 接 触 在 人 类 传 播, 引 起 化 脓 性 淋 巴 结 炎 和 慢 性 淋 巴 肉 芽 肿 ; 鼠 亚 种 不 感 染 人 类 (3) 微 生 物 学 检 查 : 包 括 标 本 直 接 涂 片 镜 检, 检 查 上 皮 细 胞 内 有 无 包 涵 体 ; 分 离 培 养 和 用 血 清 学 方 法 检 测 抗 原 或 抗 体 2. 肺 炎 衣 原 体 (C. pneumoniae) 通 过 呼 吸 道 分 泌 物 传 播, 引 起 儿 童 后 期 青 少 年 和 成 人 急 性 呼 吸 道 感 染 ( 肺 炎 等 ) 3. 鹦 鹉 热 衣 原 体 (C. psittaci) 引 起 鹦 鹉 热, 是 一 种 动 物 源 性 疾 病, 人 通 常 由 接 触 感 染 的 鸟 类 而 引 起 感 染 真 菌 (fungus) 是 一 类 真 核 细 胞 型 生 物, 具 有 细 胞 核 和 完 善 的 细 胞 器, 但 不 含 叶 绿 素 仅 少 数 可 引 起 真 菌 病 (mycosis) 真 菌 细 胞 壁 中 不 含 肽 聚 糖, 其 主 要 成 分 为 几 丁 质 和 葡 聚 糖 另 外, 真 菌 细 胞 膜 中 主 要 含 麦 角 固 醇, 不 同 于 人 类 细 胞 膜 中 的 胆 固 醇 一 生 物 学 性 状 ( 一 ) 形 态 与 结 构 1. 单 细 胞 真 菌 ( 酵 母 yeast) 呈 圆 形 或 卵 圆 形 2. 多 细 胞 真 菌 ( 霉 菌 mold): 由 菌 丝 (hypha) 和 孢 子 (spore) 组 成 (1) 菌 丝 : (2) 孢 子 : 真 菌 孢 子 可 分 为 有 性 孢 子 和 无 性 孢 子 ( 二 ) 培 养 特 性 大 多 数 真 菌 是 需 氧 菌, 少 数 属 兼 性 厌 氧 菌 对 营 养 要 求 不 高, 在 一 般 培 养 基 上 均 能 生 长 实 验 室 常 用 含 有 蛋 白 胨 葡 萄 糖 和 琼 脂 的 沙 保 (Sabouraud) 培 养 基 最 适 酸 碱 度 为 ph4.0~5.0), 培 养 浅 部 真 菌 的 最 适 温 度 为 22 ~28, 但 某 些 深 部 真 菌 在 37 生 长 最 好 真 菌 的 菌 落 有 三 种 类 型 : 1. 酵 母 型 菌 落 (yeast type colony) 多 数 单 细 胞 真 菌 的 菌 落 特 征, 类 似 细 菌 菌 落, 但 菌 落 体 积 较 大 一 般 为 光 滑 湿 润 柔 软 边 缘 整 齐 不 透 明 乳 白 色 的 圆 形 菌 落
2. 类 酵 母 型 菌 落 (yeast-like type colony) 类 似 酵 母 型 菌 落, 但 有 假 菌 丝 伸 入 培 养 基 中 3. 丝 状 菌 落 (filamentous type colony) 为 多 细 胞 真 菌 的 菌 落 特 征 菌 落 较 大, 由 疏 松 的 菌 丝 体 构 成 菌 落 可 呈 棉 絮 状 绒 毛 状 或 粉 末 状 等 丝 状 菌 落 的 形 态 结 构 和 颜 色 在 鉴 定 真 菌 时 有 重 要 参 考 价 值 ( 三 ) 真 菌 的 抵 抗 力 二 真 菌 的 致 病 性 ( 一 ) 致 病 性 真 菌 感 染 主 要 是 外 源 性 侵 袭 机 体 而 致 病, 包 括 皮 肤 皮 下 组 织 真 菌 感 染 和 全 身 或 深 部 真 菌 感 染 ( 二 ) 条 件 致 病 性 真 菌 感 染 主 要 是 一 些 内 源 性 真 菌 引 起, 多 发 生 在 机 体 免 疫 力 降 低 时 ( 三 ) 真 菌 中 毒 症 某 些 真 菌 可 产 生 真 菌 毒 素 (mycotoxins), 动 物 和 人 摄 入 后 可 引 起 急 性 或 慢 性 中 毒, 称 为 真 菌 中 毒 症 (mycotoxicosis) ( 四 ) 真 菌 毒 素 与 肿 瘤 已 证 实 某 些 动 物 和 人 类 肿 瘤 与 真 菌 毒 素 有 关, 如 黄 曲 霉 毒 素 (AF),AF 能 诱 导 p53 抑 癌 基 因 突 变, 导 致 p53 蛋 白 缺 失, 使 肝 细 胞 生 长 失 控, 引 发 肝 癌 ( 五 ) 真 菌 超 敏 反 应 性 疾 病 三 抗 真 菌 感 染 免 疫 ( 一 ) 天 然 免 疫 完 整 的 皮 肤 粘 膜 屏 障 可 有 效 阻 挡 真 菌 及 其 孢 子 的 侵 入 皮 脂 腺 分 泌 的 脂 肪 酸 有 杀 真 菌 的 作 用 正 常 菌 群 也 有 拮 抗 真 菌 的 作 用 中 性 粒 细 胞 具 有 吞 噬 和 杀 灭 真 菌 的 作 用 巨 噬 细 胞 在 抗 真 菌 感 染 中 也 有 一 定 作 用, 但 不 如 中 性 粒 细 胞 ( 二 ) 获 得 性 免 疫 真 菌 感 染 可 诱 导 机 体 产 生 特 异 性 细 胞 免 疫 和 体 液 免 疫, 其 中 又 以 细 胞 免 疫 为 主 特 异 性 细 胞 免 疫 中 CD4 + T 细 胞 产 生 并 释 放 IFN-γ 和 IL-2 等 细 胞 因 子, 激 活 巨 噬 细 胞 NK 细 胞 和 CTL 等, 参 与 对 真 菌 的 杀 灭 第 页
授 课 内 容 教 具 与 时 间 分 配 四 真 菌 感 染 的 微 生 物 学 检 查 ( 一 ) 标 本 的 采 集 浅 部 感 染 真 菌 的 检 查 可 取 皮 屑 毛 发 指 ( 趾 ) 甲 屑 等 标 本 深 部 感 染 真 菌 的 检 查 可 根 据 病 情 取 痰, 血 液 脑 脊 液 淋 巴 结 穿 刺 液 等 标 本 ( 二 ) 直 接 显 微 镜 检 查 将 皮 屑 毛 发 指 ( 趾 ) 甲 屑 等 标 本 置 载 玻 片 上, 滴 加 10%KOH 少 许, 然 后 在 低 倍 或 高 倍 镜 下 检 查 菌 丝 和 孢 子 ( 三 ) 分 离 培 养 接 种 于 含 放 线 菌 酮 ( 抑 制 腐 生 真 菌 生 长 ) 和 氯 霉 素 ( 抑 制 细 菌 生 长 ) 的 沙 保 培 养 基 ( 隐 球 菌 对 这 两 种 药 物 敏 感, 应 避 免 使 用 ) 培 养 时 放 置 25~28 温 箱 数 日 至 数 周, 然 后 观 察 菌 落 特 征 为 观 察 自 然 状 态 下 真 菌 的 形 态 结 构, 必 要 时 可 做 玻 片 小 培 养 ( 四 ) 真 菌 抗 原 和 抗 体 的 检 测 深 部 感 染 真 菌 的 辅 助 诊 断 ( 五 ) 核 酸 检 测 ( 六 ) 真 菌 毒 素 检 测 五 真 菌 感 染 的 防 治 原 则 真 菌 感 染 目 前 尚 缺 乏 特 异 性 预 防 方 法 主 要 注 意 清 洁 卫 生, 避 免 与 患 者 及 污 染 的 物 品 直 接 接 触 保 持 鞋 袜 干 燥, 防 止 真 菌 孳 生 引 起 深 部 感 染 的 真 菌 多 为 条 件 致 病 菌, 故 预 防 措 施 主 要 是 提 高 机 体 抵 抗 力, 应 避 免 滥 用 抗 生 素 激 素 和 免 疫 抑 制 剂 抗 真 菌 药 物 主 要 有 : 多 烯 类 药 物, 两 性 霉 素 B 和 制 霉 菌 素 ; 吡 咯 类 药 物, 如 酮 康 唑 克 霉 唑 等 ; 核 苷 类 药 物, 如 5- 氟 胞 嘧 啶 等 小 结 复 习 思 考 题 参 考 书 支 原 体 (mycoplasma) 是 一 类 没 有 细 胞 壁, 细 胞 膜 含 固 醇, 能 通 过 0.45 m 滤 菌 器, 含 DNA 与 RNA, 呈 二 分 裂 繁 殖 的 能 在 无 生 命 培 养 基 中 繁 殖 的 最 小 微 生 物 螺 旋 体 是 一 类 细 长 柔 软 螺 旋 状 运 动 活 泼 的 细 菌 在 自 然 界 和 动 物 体 内 广 泛 存 在, 种 类 很 多 能 引 起 人 类 有 关 疾 病 的 螺 旋 体 主 要 分 布 在 螺 旋 体 科 的 密 螺 旋 体 属 疏 螺 旋 体 属 和 钩 端 螺 旋 体 科 的 钩 端 螺 旋 体 属 立 克 次 体 (Rickettsia) 东 方 体 (Orientia) 柯 克 斯 体 (Coxiella) 埃 立 克 体 (Ehrlichia) 和 巴 通 体 (Bartonella) 是 一 类 与 节 肢 动 物 有 密 切 关 系 的 严 格 细 胞 内 寄 生 的 细 菌, 是 引 起 斑 疹 伤 寒 恙 虫 病 Q 热 等 传 染 病 的 病 原 体, 其 共 同 特 点 是 :1 大 多 数 是 人 畜 共 患 病 的 病 原 体 ;2 以 节 肢 动 物 为 宿 主 和 传 播 媒 介, 引 起 人 类 发 热 出 疹 性 疾 病 ;3 体 积 介 于 细 菌 与 病 毒 之 间, 用 光 学 显 微 镜 可 见, 形 态 以 球 杆 状 或 杆 状 为 主, 革 兰 染 色 阴 性 ;4 专 性 细 胞 内 寄 生, 因 酶 系 统 不 够 完 善 又 缺 乏 细 胞 器, 故 不 能 独 立 生 活 ;5 以 二 分 裂 方 式 繁 殖 ;6 含 有 DNA 和 RNA 两 种 核 酸 ;7 对 多 种 抗 生 素 敏 感 衣 原 体 (Chlamydia) 是 一 类 严 格 在 真 核 细 胞 内 寄 生, 有 独 特 的 发 育 周 期, 能 通 过 0.45 m 滤 菌 器 的 细 菌 共 同 特 性 有 :1 革 兰 阴 性, 圆 形 或 椭 圆 形 体, 大 小 为 0.2~0.5μm;2 具 有 由 细 胞 壁, 与 革 兰 阴 性 菌 相 似 ;3 以 二 分 裂 方 式 繁 殖, 并 有 独 特 的 发 育 周 期 ;4 同 时 含 有 DNA 和 RNA 两 种 核 酸 ;5 有 核 糖 体 和 一 定 数 目 的 酶, 在 宿 主 细 胞 提 供 能 量 的 情 况 下 能 进 行 多 种 代 谢 ; 6 对 多 种 抗 生 素 敏 感 思 考 题 : 1. 支 原 体 有 什 么 特 点? 与 L 型 细 菌 有 何 异 同 点? 2. 梅 毒 螺 旋 体 和 钩 端 螺 旋 体 是 如 何 传 播 的? 3. 何 谓 外 斐 反 应? 有 什 么 用 途? 4. 简 述 沙 眼 衣 原 体 的 传 播 途 径 和 所 致 疾 病 5. 参 考 书 : 洪 秀 华 临 床 微 生 物 学 检 验 上 课 教 师 李 惠 第 页