目錄

目 錄 圖 目 錄 2 表 目 錄 4 摘 要 5 誌 謝 6 壹 前 言 7 貳 實 驗 步 驟 一 儀 器 15 二 藥 品 15 三 步 驟 15 ( 一 ) 萃 取 芸 香 苷 16 1. 水 萃 取 法 16 2. 鹼 萃 取 沈 澱 法 19 ( 二 ) 芸 香 苷 水 解 製 檞 皮 素 23 ( 三 )TLC 鑑 定 25 ( 四 ) 分 光 光 度 計 鑑 定 25 叁 結 果 與 討 論 26 肆 結 論 31 參 考 文 獻 32 1

圖 目 錄 圖 1 蕎 麥 中 芸 香 苷 的 化 學 結 構 及 其 經 酵 素 分 解 成 檞 皮 素 10 圖 2 黃 酮 構 造 式 11 圖 3 芸 香 苷 11 圖 4 葡 萄 糖 構 造 式 11 圖 5 鼠 李 糖 構 造 式 11 圖 6 檞 皮 素 構 造 式 11 圖 7 5- 乙 醯 化 檞 皮 素 構 造 式 12 圖 8 芸 香 苷 水 解 反 應 式 12 圖 9 檞 皮 素 乙 醯 化 反 應 式 12 圖 10 分 光 光 度 計 15 圖 11 回 流 裝 置 15 圖 12 槐 花 米 16 圖 13 由 水 萃 法 得 粗 製 芸 香 苷 16 圖 14 由 水 萃 法 得 精 製 芸 香 苷 18 圖 15 由 鹼 萃 法 得 粗 製 芸 香 苷 20 圖 16 由 鹼 萃 法 得 精 製 芸 香 苷 21 圖 17 精 製 檞 皮 素 23 圖 18 不 同 時 間 芸 香 苷 - 產 率 直 線 圖 26 圖 19 芸 香 苷 - 吸 收 度 曲 線 圖 27 圖 20 檞 皮 素 - 吸 收 度 曲 線 圖 28 圖 21 標 準 品 TLC 片 29 圖 22 芸 香 苷 鹼 萃 法 29 圖 23 芸 香 苷 水 萃 法 29 圖 24 檞 皮 素 鹼 萃 法 30 2

圖 25 檞 皮 素 水 萃 法 30 3

表 目 錄 表 1 水 萃 取 法 - 不 同 時 間 之 比 較 26 表 2 鹼 萃 取 法 - 不 同 時 間 之 比 較 26 表 3 芸 香 苷 - 以 不 同 濃 度 算 出 吸 收 度 的 大 小 27 表 4 檞 皮 素 - 以 不 同 濃 度 算 出 吸 收 度 的 大 小 28 4

摘 要 芸 香 苷 為 生 物 類 黃 酮 之 一, 在 臨 床 上 使 用 它 治 療 各 種 出 血 性 疾 病, 廣 泛 存 在 植 物 界 中 本 實 驗 以 槐 花 米 做 芸 香 苷 萃 取 之 研 究, 採 用 水 萃 取 法 以 及 鹼 萃 取 法, 經 實 驗 發 現 以 鹼 萃 取 法 的 產 量 多 於 水 萃 取 法 且 純 度 高, 以 及 時 間 的 掌 握 在 40 分 鐘 最 適 當, 以 及 萃 取 量 最 高 關 鍵 字 : 芸 香 苷 生 物 類 黃 酮 槐 花 米 水 萃 取 法 鹼 萃 取 法 5

誌 謝 本 研 究 要 感 謝 薛 公 邑 老 師 的 教 誨 與 細 心 指 導, 尤 其 在 暑 假 期 間 亦 陪 我 們 做 實 驗, 使 我 們 可 以 順 利 完 成 研 究 還 有 要 感 謝 夥 伴 們 的 互 助 合 作 以 及 團 隊 間 的 默 契 十 足, 合 作 無 間, 終 於 完 成 了 這 一 本 論 文, 俗 話 說 : 三 個 臭 皮 匠 勝 過 一 個 諸 葛 亮, 這 句 話 真 的 說 的 一 點 也 沒 錯, 實 驗 過 程 中 難 免 有 疑 問 或 遇 到 失 敗 與 難 題, 大 家 會 互 相 討 論 一 起 研 究 解 決 的 方 法, 一 次 又 一 次 的 去 試, 直 到 成 功 為 止 6

壹 前 言 現 今 人 類 由 於 生 活 富 裕 三 餐 大 魚 大 肉, 以 及 不 當 飲 食 至 於 導 致 肥 胖 血 壓 過 高 以 及 心 血 管 疾 病 等 問 題 越 來 越 嚴 重 芸 香 苷 屬 多 酚 類 物 質, 其 作 用 是 擴 張 毛 血 管, 具 有 降 低 血 管 的 異 常 通 透 性 和 脆 性 的 作 用, 可 以 保 持 及 恢 復 毛 細 血 管 的 彈 性 主 要 用 於 防 治 高 血 壓 腦 溢 血 的 治 療, 糖 尿 病 及 視 網 膜 出 血 和 出 血 性 紫 癜 等 也 可 以 用 於 食 品 抗 氧 化 劑 和 色 素 等 1 槐 花 米 是 具 有 涼 血 藥 作 用, 因 此 臨 床 上 使 用 它 治 療 各 種 出 血 性 疾 病, 特 別 是 痔 瘡 出 血 許 多 的 研 究 已 指 出 槐 花 含 有 芸 香 9(quercetin), 芸 香 苷 是 血 管 補 強 劑, 能 保 持 毛 細 血 管 正 常 的 抵 抗 力, 減 少 血 管 透 過 性, 可 使 因 脆 性 增 加 而 出 血 的 毛 細 血 管 恢 復 正 常 的 彈 性, 用 於 高 血 壓 腦 溢 血 血 壓 異 常 亢 進 及 出 血 症 的 治 療 及 預 防 2 在 Earl Mindell 博 士 ( 美 國 政 府 特 許 草 藥 師 ) 著 抗 老 化 聖 典 有 這 麼 一 段 描 述 : 有 些 生 物 類 黃 酮 是 強 力 抗 氧 化 劑... 生 物 類 黃 酮 與 維 他 命 C 合 併 使 用, 也 能 維 護 結 締 組 織 的 健 康 它 們 會 改 善 小 血 管 的 強 韌 度 生 物 類 黃 酮 --- 芸 香 苷, 一 直 都 被 用 來 治 療 牙 齦 出 血, 頗 具 成 效 自 然 療 理 師 慣 常 以 生 物 類 黃 酮 來 治 療 過 敏 症 及 喘 又 說 : 最 7

近 的 研 究 指 出, 某 些 生 物 類 黃 酮 可 以 抑 制 致 癌 物 發 生 作 用 其 實 黃 豆 也 富 含 黃 酮 物 質 3 苷 偉 松 授 教 著 台 灣 藥 用 植 物 誌 主 要 陳 述 為 : 芸 香 苷 能 減 低 毛 細 血 管 脆 弱 性 及 高 血 壓, 故 可 防 止 中 風 ; 亦 治 糖 尿 病 視 網 膜 炎 肺 出 血 毛 細 管 脆 弱 而 引 起 之 出 血 由 一 切 化 學 原 質 之 有 效 放 射 性 能 而 引 起 的 血 管 硬 化, 破 裂 而 出 血 者 有 效 4 芸 香 苷 和 檞 皮 素 (quercetin), 銀 杏 葉 的 萃 取 物 被 認 為 有 抗 氧 化 傷 害 和 抗 血 小 板 凝 集 的 作 用, 已 被 廣 泛 的 用 來 治 療 痴 呆 症 或 腦 血 管 意 外 (cerebrovascular accident) 銀 杏 葉 的 主 要 成 分 黃 酮 苷 類 (flavone glycosides) 的 物 質 有 芸 香 苷 (quercetin), 有 研 究 發 現 銀 杏 葉 的 萃 取 物 具 有 抗 氧 化 傷 害 和 抗 血 小 板 凝 集 的 作 用, 對 心 臟 和 神 經 細 胞 具 有 保 護 作 用, 已 被 廣 泛 使 用 於 腦 痴 呆 和 腦 中 風 的 預 防 和 治 療 4 中 醫 典 籍 和 一 些 研 究 認 為 槐 花 米 有 涼 血 作 用, 能 被 用 來 治 療 痔 瘡 出 血, 最 近 研 究 發 現 槐 花 和 銀 杏 葉 一 樣 含 有 芸 香 苷 (quercetin) 成 分, 槐 花 是 傳 統 中 藥 的 一 種, 它 被 認 為 有 涼 血 藥 作 用, 因 此 臨 床 上 使 用 它 治 療 各 種 出 血 性 疾 病, 特 別 是 痔 瘡 出 血 許 多 的 研 究 已 知 槐 花 米 含 有 芸 香 苷 (quercetin) 一 些 研 究 報 告 指 出 芸 香 苷 具 有 降 低 膽 固 醇 8

和 抗 發 炎 腫 脹 的 作 用, 而 芸 香 苷 有 抗 氧 化 自 由 基 和 抗 血 小 板 凝 集 的 作 用 另 外, 有 研 究 認 為 芸 香 苷 能 用 來 治 療 腦 功 能 不 全 的 症 狀 如 注 意 力 不 易 集 中 記 憶 力 不 佳 憂 慮, 情 緒 低 落 和 活 動 力 減 退 5 蕎 麥 已 知 含 有 多 種 藥 用 保 健 的 重 要 成 分, 例 如 維 他 命 B1 B2 維 他 命 E 膽 鹼 素 泛 酸 及 菸 鹼 酸 ; 另 含 有 令 人 注 目 的 水 楊 酸 (salicylic acid) N- 水 楊 酸 叉 替 水 楊 酸 胺 (N-salicylidene-salicylamine) 4- 羥 基 苯 甲 胺 (4-hydroxybenzylamine) 芸 香 苷 (quercetin) 等 皆 是 蕎 麥 未 來 以 健 康 食 品 為 號 召, 成 為 具 競 爭 能 力 作 物 的 條 件 芸 香 苷 (quercetin), 它 屬 於 植 物 體 中 二 次 代 謝 產 物 類 黃 素 (flavonoids) 之 一 種 芸 香 苷 在 醫 學 上 已 被 確 定 對 視 網 膜 出 血 (retinal hemorrhage) 毛 細 管 性 中 風 (capillary apoplexy) 及 冠 狀 動 脈 阻 塞 (coronary occlussion) 等 疾 病 有 顯 著 的 療 效 同 時 發 現 外 殼 中 亦 含 有 芸 香 苷 與 其 他 類 黃 素 (flavonoids) 衍 生 之 抗 氧 化 物 質 如 兒 茶 酸 (catechin) 9

圖 1 蕎 麥 中 芸 香 苷 的 化 學 結 構 及 其 經 酵 素 分 解 成 檞 皮 素 芸 香 苷, 發 現 它 對 脆 弱 性 微 血 管 導 致 之 高 血 壓 具 有 療 效 芸 香 苷 可 抑 制 hyaluronidase( 一 種 可 增 加 組 織 滲 透 性 的 酵 素 ) 酵 素 活 性, 尤 其 與 抗 壞 血 酸 之 Vitamine C 結 合 時, 作 用 更 大 目 前 市 售 用 以 治 療 高 血 壓, 增 強 血 管 彈 性 的 芸 香 苷 藥 劑 (rutinin), 有 效 成 分 即 包 括 ( 維 他 命 )Vitamine C 在 中 國, 數 世 紀 前 就 曾 經 使 用 槐 樹 的 花 芽 在 許 多 與 現 在 醫 學 應 用 芸 香 苷 相 同 之 目 的 上 如 今, 醫 學 上 已 確 定 芸 香 苷 對 視 網 膜 出 (retinalhemorrhage) 毛 細 管 性 中 風 (capillary apoplexy) 冠 狀 動 脈 阻 塞 (coronary occlussion) 等 疾 病 有 顯 著 的 療 效 6 芸 香 苷 (quercetin) 是 一 種 廣 泛 存 在 於 植 物 中 的 黃 酮 苷 類, 存 在 於 芸 香 苷 煙 草 橙 皮 番 茄 等 而 以 槐 花 米 內 含 量 最 為 豐 富, 本 實 驗 採 取 從 槐 花 米 中 萃 取 芸 香 苷, 再 進 行 水 解 與 乙 醯 化 反 應 7 10

芸 香 苷 是 生 物 類 黃 酮, 生 物 黃 酮 芸 香 苷 檞 皮 素 及 5- 乙 醯 化 檞 皮 素 構 造 式 如 下 : 圖 2 黃 酮 構 造 式 HO O OR O 圖 3 芸 香 苷 構 造 式 (R=- 葡 萄 糖 - 鼠 李 糖 ) 圖 4 葡 萄 糖 構 造 式 圖 5 鼠 李 糖 構 造 式 HO O O 圖 6 檞 皮 素 構 造 式 11

圖 7 5- 乙 醯 化 檞 皮 素 構 造 式 芸 香 苷 水 解 反 應 式 如 下 : HO O O O Glucose- rhamnose H +,H2O 芸 香 苷 酸 水 解 HO O 芸 香 苷 圖 8 芸 香 苷 水 解 反 應 式 O 檞 皮 素 檞 皮 素 乙 醯 化 反 應 如 下 : HO O O 檞 皮 素 圖 9 檞 皮 素 乙 醯 化 反 應 式 5- 乙 醯 化 檞 皮 素 12

芸 香 苷 的 特 性 芸 香 苷 (Rutionside): 針 狀 結 晶,mp174~178, 無 水 物 為 188~190 溶 解 度 : 冷 水 中 1:8000, 熱 水 中 1:200, 冷 乙 醇 中 1:300, 熱 乙 醇 中 1:30, 冷 吡 啶 中 1:12, 微 溶 於 丙 酮 乙 酸 乙 酯, 不 溶 於 苯 氯 仿 石 油 醚 等 溶 劑 易 溶 於 鹼 液, 呈 黃 色, 酸 化 後 又 析 出, 可 溶 於 硫 酸 和 鹽 酸, 呈 棕 黃 色, 加 水 稀 釋 又 析 出 UV Et max 359 5 nm:259,299sh, 檞 皮 素 的 特 性 檞 皮 素 (quercetin): C15H10O7 2H2O, 黃 色 結 晶,mp313~314, 無 水 物 為 316 溶 解 度 : 冷 乙 醇 中 1:290, 沸 乙 醇 中 1:23, 可 溶 於 甲 醇, 乙 酸 乙 酯 吡 啶 丙 酮 等 溶 劑, 不 溶 於 水 乙 醚 苯 氯 仿 石 油 醚 UV Et max nm:255,269sh,301sh,370 8 本 實 驗 是 要 從 槐 花 米 中 利 用 水 萃 取 法 及 鹼 萃 取 法, 並 控 制 時 間 以 及 找 出 最 高 產 率 之 方 法, 實 驗 萃 取 方 法 如 下 : ( 一 ) 水 萃 取 法 原 理 : 利 用 水 加 熱 法, 把 物 質 溶 於 水 中 達 到 萃 取 效 果 芸 香 苷 的 溶 解 度 為 : 冷 水 中 1:8000 熱 水 中 1:200 8 13

( 二 ) 鹼 萃 取 法 原 理 : 芸 香 苷 分 子 中 具 有 酚 羥 基, 顯 弱 酸 性, 在 鹼 水 中 成 鹽 增 大 溶 解 能 力, 用 鹼 水 為 溶 劑 煮 沸 提 取, 提 取 液 加 酸, 酸 化 後 又 成 為 游 離 的 芸 香 苷 而 析 出 14

貳 實 驗 步 驟 一 儀 器 漏 斗, 燒 杯, 滴 管, 錐 形 瓶, 量 筒, 抽 濾 瓶, 藥 缽, 布 氏 漏 斗, 精 密 天 帄, 廣 用 試 紙, 抽 濾 裝 置, 烘 箱, TLC 片, 封 膜, 紗 布 圖 10 分 光 光 度 計 圖 11 回 流 裝 置 廠 牌 :ThermoSpectronic 型 號 :GENESYS 20 二 藥 品 甲 醇, 乙 醇, 硫 酸, 乙 酸 乙 酯, 醋 酸 酐, 石 灰 乳, 冰 醋 酸, 鹽 酸, 濃 硫 酸, 冰, 槐 花 米 15

三 步 驟 ( 一 ) 萃 取 芸 香 苷 1. 水 萃 取 步 驟 (1) 芸 香 苷 粗 製 稱 取 槐 花 米 約 20 克 ( 把 每 顆 種 子 搗 碎 ), 加 入 300ml 的 沸 水 中, 煮 20min( 或 30min;40min) 後, 用 雙 層 紗 布 趁 熱 過 濾, 過 濾 完 後, 再 將 殘 渣 以 同 樣 步 驟 操 作 一 次, 將 兩 次 取 得 的 濾 液 合 併 在 一 起, 等 待 冷 卻 後, 放 入 冰 浴 中 等 待 結 晶 析 出, 全 部 析 出 後, 進 行 抽 濾, 用 少 量 蒸 餾 水 將 芸 香 苷 結 晶 洗 滌, 抽 乾 後, 放 入 烘 箱 中 乾 燥, 乾 燥 後, 取 得 粗 製 芸 香 苷 ( 顏 色 為 淡 黃 色 ), 稱 重 記 錄 圖 12 槐 花 米 圖 13 由 水 萃 法 得 粗 製 芸 香 苷 16

水 萃 取 - 芸 香 苷 粗 製 流 程 圖 取 槐 花 米 20 克 煮 20min( 或 30min;40min) 加 入 300ml 的 沸 水 中 趁 熱 過 濾, 再 將 殘 渣 以 同 樣 步 驟 操 作 作 一 次 放 入 冰 浴 中 等 待 結 晶 析 出 等 待 冷 卻 後 將 兩 次 取 得 的 濾 液 合 併 抽 濾 用 少 量 蒸 餾 水 洗 滌 結 晶 放 入 烘 箱 乾 燥 稱 重 記 錄 取 得 粗 製 芸 香 苷 17

(2) 芸 香 苷 精 製 稱 取 粗 製 芸 香 苷 約 2 克, 加 蒸 餾 水 400ml, 煮 沸 至 芸 香 苷 溶 解, 趁 熱 抽 濾, 放 入 冰 浴 冷 卻, 冷 卻 後, 就 有 結 晶 析 出, 抽 濾, 抽 乾 後, 即 可 取 得 精 製 芸 香 苷 ( 顏 色 為 淺 黃 色 ) 圖 14 由 水 萃 法 得 精 製 芸 香 苷 水 萃 取 - 芸 香 苷 精 製 流 程 圖 取 粗 製 芸 香 苷 約 2 克 加 蒸 餾 水 400ml 煮 沸 至 芸 香 苷 溶 解 抽 濾 18

取 得 精 製 芸 香 苷 放 入 冰 浴 冷 卻 抽 濾 檢 測 TLC 鑑 定 和 分 光 光 度 計 檢 測 法 2. 鹼 萃 取 酸 沉 澱 步 驟 (1) 芸 香 苷 粗 製 於 1000ml 燒 杯 中 加 入 500ml 蒸 餾 水, 煮 沸, 稱 取 20g 槐 花 米 ( 把 每 顆 種 子 搗 碎 ), 加 入 沸 水 中, 加 熱 煮 沸 約 5min, 在 攪 拌 下 小 心 加 入 石 灰 乳 調 至 ph 8-9, 加 熱 微 沸 30min 後, 注 意 添 加 水, 保 持 原 體 積 並 維 持 ph8-9, 趁 熱 過 濾, 濾 渣 再 加 入 200ml 水, 加 石 灰 乳 調 ph8-9, 煮 10min, 趁 熱 過 濾, 合 併 兩 次 濾 液, 稍 冷 (60 ~70 ), 用 濃 HCl 調 至 ph4-5, 放 置 後 析 出 沉 澱, 抽 濾, 用 水 洗 3 ~ 4 次, 乾 燥 得 淡 黃 色 粗 製 芸 香 苷 19

圖 15 由 鹼 萃 法 得 粗 製 芸 香 苷 鹼 萃 取 - 芸 香 苷 粗 製 流 程 圖 取 槐 花 米 20 克 加 入 石 灰 乳 至 ph8~9 加 入 500ml 的 沸 水 中 煮 5min 後 作 一 次 將 殘 渣 加 入 200 ml 水 煮 10min 趁 熱 過 濾 加 熱 微 沸 30min (ph 維 持 8-9) 加 入 石 灰 乳 至 ph8-9 趁 熱 過 濾 稍 冷 後, 加 入 HCL 至 ph4-5 20

乾 燥 後 的 粗 製 芸 香 苷 用 水 洗 滌 放 置 析 出 沉 澱 後 進 行 抽 濾 (2) 芸 香 苷 精 製 將 粗 製 芸 香 苷 2g 置 500ml 燒 杯 中, 加 100ml 蒸 餾 水, 再 用 石 灰 水 調 至 ph8-9 加 熱 煮 沸 數 分 鐘, 使 充 分 溶 解 趁 熱 抽 濾, 濾 液 滴 加 3mol/L HCl 調 至 ph7, 放 置 18 小 時 以 上, 即 析 出 沉 澱 減 壓 過 濾, 用 少 量 蒸 餾 水 洗 滌 沉 澱 2 ~ 3 次 然 後 用 少 量 乙 醇 洗 1 次 抽 乾, 於 60 乾 燥, 即 得 精 製 芸 香 苷 稱 重, 計 算 產 率 圖 16 由 鹼 萃 法 得 精 製 芸 香 苷 21

鹼 萃 取 - 芸 香 苷 精 製 流 程 圖 取 粗 製 芸 香 苷 加 入 石 灰 乳 至 ph8~9 加 入 100ml 的 蒸 餾 水 作 一 次 濾 液 滴 加 3mol HCL 至 ph7 趁 熱 過 濾 加 熱 煮 沸 (ph 維 持 8~9) 放 置 18 小 時 以 上 抽 濾 用 蒸 餾 水 洗 滌 2~3 次 用 乙 醇 再 洗 一 次 於 60 乾 燥 得 精 製 芸 香 苷 檢 測 TLC 鑑 定 和 分 光 光 度 計 檢 測 法 22

( 二 ) 芸 香 苷 水 解 製 檞 皮 素 稱 取 精 製 芸 香 苷 約 1 克, 置 入 於 50ml 圓 底 燒 瓶 中, 加 入 2 % 硫 酸 80ml, 加 熱 沸 騰 後, 回 流 30min, 溶 液 從 混 濁 變 為 澄 清 的 棕 黃 色 液 體, 最 終 生 成 為 鮮 黃 色 液 體, 底 部 有 稍 微 沉 澱 等 待 完 全 沉 澱 冷 卻, 抽 氣 過 濾, 沉 澱 物 品 為 檞 皮 素, 用 少 量 蒸 餾 水 洗 滌, 洗 至 中 性, 抽 乾 水 分, 放 入 烘 箱 烘 乾 後, 秤 重, 此 時 得 到 粗 製 檞 皮 素, 再 用 乙 醇 重 結 晶 得 到 精 製 檞 皮 素 圖 17 精 製 檞 皮 素 23

芸 香 苷 水 解 製 檞 皮 素 流 程 圖 取 精 製 芸 香 苷 約 1 克 加 入 2 % 硫 酸 80ml 置 入 於 50ml 圓 底 燒 瓶 作 一 次 用 少 量 蒸 餾 水 洗 滌 至 中 性 冷 卻 後, 抽 氣 過 濾 加 熱 煮 沸 後 回 流 30min 烘 乾 後, 得 粗 製 檞 皮 素 用 乙 醇 再 結 晶 得 到 精 製 檞 皮 素 檢 測 TLC 鑑 定 和 分 光 光 度 計 檢 測 法 24

( 三 )TLC 鑑 定 芸 香 苷 和 檞 皮 素 的 TLC 色 譜 鑑 定 層 析 材 料 : 層 析 TLC 片 樣 品 : 萃 取 的 芸 香 苷 及 槲 皮 素 的 甲 醇 溶 液 (1%) 和 對 照 品 的 甲 醇 溶 液 (1%) 展 開 劑 : 乙 酸 乙 酯 : 甲 醇 (9:1) 混 合 液 5mL, 再 加 2 滴 冰 醋 酸 觀 察 記 錄 : 記 錄 圖 譜 及 斑 點 顏 色, 算 R 值 f ( 四 ) 分 光 光 度 計 鑑 定 以 甲 醇 調 至 最 大 波 長, 再 用 蒸 餾 水 歸 零 以 不 同 濃 度 檢 測 吸 收 度 25

產 率 (%) 叁 結 果 與 討 論 一 水 萃 取 法 : 表 1 不 同 時 間 萃 取 率 之 比 較 時 間 (min) 槐 花 米 (g) 產 量 (g) 萃 取 率 (%) 20 20.11 0.64 3.18 30 20.10 1.65 8.21 40 20.00 2.7 13.5 二 鹼 萃 取 法 : 表 2 不 同 時 間 萃 取 率 之 比 較 時 間 (min) 槐 花 米 (g) 產 量 (g) 萃 取 率 (%) 20 20.07 2.01 10.01 30 20.01 2.99 14.94 40 20.25 3.72 18.55 芸 香 苷 20 15 10 5 0 10.01 3.18 14.94 8.21 18.55 13.5 水 萃 取 法 鹼 萃 取 法 20 30 40 時 間 (min) 圖 18 不 同 時 間 芸 香 苷 - 產 率 直 線 圖 26

由 表 1 和 表 2 來 看, 結 果 證 明 煮 沸 時 間 40min 的 產 率 是 最 高 的 由 圖 18 產 率 直 線 圖 來 看, 結 果 證 明 用 鹼 萃 取 法 所 獲 得 的 產 率 比 用 水 萃 取 法 來 得 高 三 分 光 光 度 計 檢 測 法 表 3 不 同 濃 度 芸 香 苷 分 光 光 度 計 吸 收 度 的 比 較 芸 香 苷 濃 度 (ppm) 吸 收 度 500 400 300 200 100 50 25 標 準 品 1.232 1.060 0.878 0.688 0.383 0.222 0.131 水 萃 取 法 1.080 0.953 0.779 0.604 0.338 0.198 0.092 鹼 萃 取 法 1.175 1.024 0.837 0.653 0.412 0.236 0.125 純 度 換 算 以 500ppm 為 例 : 標 準 品 y=0.002x+0.135 R 2 =0.982 水 萃 取 法 1.080=0.002x+0.135 x=472.5 (472.5/548.5)*100%=86.1% 鹼 萃 取 法 1.175=0.002x+0.135 x=520 (520/548.5)*100%=94.8% 圖 19 芸 香 苷 - 吸 收 度 曲 線 圖 27

表 4 不 同 濃 度 檞 皮 素 吸 收 度 的 比 較 檞 皮 素 濃 度 (ppm) 吸 收 度 500 400 300 200 100 50 25 標 準 品 2.243 1.875 1.467 1.042 0.548 0.388 0.284 檞 皮 素 1.915 1.648 1.286 0.865 0.354 0.187 0.113 純 度 換 算 以 500ppm 為 例 : 標 準 品 y=0.004x+0.174 R 2 =0.998 檞 皮 素 1.915=0.004x+0.174 x=435.25 (423.25/517.25)*100=81.82% 圖 20 檞 皮 素 - 吸 收 度 曲 線 圖 28

四 TLC 片 鑑 定 圖 21 標 準 品 TLC 片 左 - 芸 香 苷 右 - 檞 皮 素 圖 22 芸 香 苷 鹼 萃 法 左 - 標 準 芸 相 苷 Rf=0.1126 圖 23 芸 香 苷 水 萃 法 左 - 標 準 芸 相 苷 Rf=0.1126 右 - 芸 香 苷 ( 鹼 萃 ) Rf=0.1126 29 右 - 芸 香 苷 ( 水 萃 ) Rf=0.1126

圖 24 檞 皮 素 鹼 萃 法 左 - 標 準 檞 皮 素 Rf=0.7820 圖 25 檞 皮 素 水 萃 法 左 - 標 準 檞 皮 素 Rf=0.7820 右 - 檞 皮 素 ( 鹼 萃 ) Rf=0.7820 右 - 檞 皮 素 ( 水 萃 ) Rf=0.7820 由 TLC 片 可 以 看 的 出 來 標 準 品 與 做 出 來 的 樣 品 相 較 之 下,Rf 值 都 一 樣, 表 示 做 出 來 的 樣 品 很 標 準, 只 有 ( 圖 23) 水 萃 法 樣 品 中 含 有 稍 微 的 檞 皮 素 30

肆 結 論 本 研 究 設 定 的 時 間 數 據 差 異 發 現, 無 論 是 水 萃 取 法 或 鹼 萃 取 酸 沈 澱 法, 再 40 分 鐘 的 產 率 顯 然 都 是 比 較 多 的, 至 於 兩 種 萃 取 方 法 相 較 之 下, 鹼 提 取 酸 沈 澱 法 的 產 率 大 約 多 出 5%, 是 最 佳 的 萃 取 方 法 芸 香 苷 可 降 低 出 血 性 疾 病 和 高 血 壓 導 致 的 微 血 管 脆 弱 性, 並 具 有 強 化 血 管, 預 防 腦 中 風 等 作 用, 值 得 探 討 與 深 入 的 研 究 ; 本 實 驗 的 鹼 萃 取 法 採 用 石 灰 乳, 沒 有 使 用 其 他 鹼 液 萃 取, 例 如 碳 酸 鈉 氫 氧 化 鈉 等, 希 望 在 未 來 能 給 予 後 人 參 考 之 研 究, 或 許 會 有 不 一 樣 的 成 果 31

參 考 資 料 及 文 獻 1 艾 爾 敏 德 爾 譯 者 : 賴 翠 玲 營 養 補 充 品 聖 典 笛 藤 1999 年 01 月 23 日 P.211 2 姥 芝 瑞 博 士 論 文 丹 參 與 槐 花 對 大 鼠 腦 缺 血 - 再 灌 流 損 傷 引 發 之 腦 梗 塞 的 效 用 2005 3 EARL MINDELL R.Ph. Ph.D 譯 者 : 賴 翠 玲 特 選 100 種 天 然 食 物 的 藥 效 笛 藤 1995 年 12 月 19 日 4 ( 明 ) 李 時 珍 新 訂 本 草 綱 目 ( 全 套 ) 世 一 2005 年 10 月 13 日 5 唐 娜 櫻 錢 添 發 李 采 娟 江 素 瑛 李 珮 端 林 昭 庚 及 謝 慶 良 槐 花 對 Ibotanic acid 誘 發 大 白 鼠 學 習 記 憶 障 礙 效 用 之 研 究 JChin Med 15(2): 99-108, 2004 6 張 隆 仁 蕎 麥 的 二 次 代 謝 產 物 芸 香 苷 1 臺 中 區 農 業 改 良 場 研 究 彙 報 64:41-56 (1999) 7 http://big5.enet.com.cn/gate/big5/www.enet.com.cn/life 8 芸 香 甙 的 提 取 分 離 和 鑒 定 http://3odmte1mdc0z3mxbhnlywnzcgrwb3mdnqrjb2xva3rwmgr2dg 32