高 效 液 相 色 谱 - 三 重 四 极 杆 质 谱 法 同 时 测 定 番 茄 中 的 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 李 腾 飞 1, 赵 风 年 1, 张 超 1, 江 泽 军 1, 刘 广 洋 1, 王 静 1, *, 刘 海 金 2, 许 平 金 茂 俊 1, 金 芬 1, 邵 华 1, 王 珊 珊 1, 郑 鹭 飞 1, 佘 永 新 (1. 中 国 农 业 科 学 院 农 业 质 量 标 准 与 检 测 技 术 研 究 所, 北 京 100081; 2. 西 藏 自 治 区 农 畜 产 品 质 量 安 全 检 验 检 测 中 心, 西 藏 拉 萨 850000) 摘 要 : 建 立 了 番 茄 中 植 物 激 素 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 检 测 方 法 样 品 经 乙 酸 - 乙 腈 提 取, 采 用 C 18 固 相 萃 取 柱 净 化,C 18 色 谱 柱 分 离,0.5% 甲 酸 水 溶 液 - 甲 醇 作 为 流 动 相 进 行 梯 度 洗 脱, 质 谱 采 用 电 喷 雾 负 离 子 (ESI - ) 模 式 电 离, 多 反 应 监 测 模 式 (MRM) 定 性, 基 质 标 准 曲 线 外 标 法 定 量 水 杨 酸 的 响 应 值 在 1.25-20.00 ng/ml 范 围 内 具 有 良 好 的 线 性 关 系, 相 关 系 数 (R 2 ) 为 0.9984; 赤 霉 酸 的 响 应 值 在 10-1000 ng/ml 范 围 内 具 有 呈 良 好 的 线 性 关 系, 相 关 系 数 (R 2 ) 为 0.9933, 在 三 个 加 标 浓 度 下, 水 杨 酸 (1.25, 2.5, 5 μg/kg) 赤 霉 酸 (10, 50, 100 μg/kg) 的 回 收 率 分 别 为 87.6%~95.3% 83.8%~96.5%, 相 对 标 准 偏 差 不 高 于 6.9%, 方 法 的 检 出 限 分 别 为 0.01 0.15 ng/ml 关 键 词 : 水 杨 酸 ; 赤 霉 酸 ; 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 法 ; 番 茄 Simultaneous Determination of Salicylic Acid and Gibberellic acid in Tomato by High Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry LI Tengfei 1, ZHAO Fengnian 1, ZHANG Chao 1, LIU Guangyang 1, WANG Jing 1,*, LIU Haijin 2, XU Ping 2, JIN Maojun 1, JIN Fen 1, SHAO Hua 1, WANG Shanshan 1, ZHENG Lufei 1, SHE Yongxin 1,* (1. Institute of Quality Standard and Testing Technology for Agro-Products, Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing 100081, China; 2. Tibet Testing Center of Quality and Safety for Agricultural and Animal husbandry Products, lhasa 850000, China) Abstract: A sensitive and selective liquid chromatography-positive mode electrospray ionization-tandem mass spectrometric (LC-MS/MS) method was developed for the determination of salicylic acid (SA) and gibberellic acid (GA 3 ) in tomato. The analyses were extracted by acetic acid and acetonitrile; the extract was purified with solid-phase extraction (SPE) octadecylsilane (C 18 ) column. Then SA and GA 3 in the extract was separated on a reversed phase C 18 column using a gradient elution program of 0.5% formic acid methanol. Qualitative analysis was performed with electrospray ionization in anion mode (ESI - ) under multiple reaction monitoring (MRM) mode. The matrix-matched calibrations were used to quantify the residue concentrations. The calibration curves showed good linearity in the certain concentration for SA and GA 3, with correlation coefficients (R 2 ) more than 0.9933. The average recoveries of SA and GA 3 in tomato were in the range of 87.6%~95.3% and 83.8%~96.5% at three spiked concentration levels, and relative standard deviations (RSD, n=3) were less than 6.9%. The limits of quantitation (LOQ) were 0.01 0.15ng/mL. The method could be used for the rapid and accurate detection of hormone in tomato. Key words: salicylic acid; gibberellic acid; liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS); tomato 中 图 分 类 号 :O657.6;S482.3 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : 植 物 內 源 激 素 是 植 物 体 内 合 成 的 一 系 列 结 构 不 同 的 小 分 子 有 机 化 合 物, 既 可 调 控 植 物 自 身 的 生 长 发 育, 又 可 通 过 与 植 物 所 生 存 的 外 部 环 境 相 互 作 用 调 节 其 对 环 境 的 适 应 [1-4] 由 于 植 物 內 源 激 素 在 植 物 生 命 活 动 中 发 挥 着 重 要 作 用, 对 其 定 量 检 测 已 引 起 了 广 泛 的 关 注 [5] 植 物 內 源 激 素 的 检 测 方 法 主 要 包 括 毛 细 管 电 泳 法 [6-7] 气 相 色 谱 法 [8] 高 效 液 相 色 谱 法 [9-10] 气 相 色 谱 - 质 谱 联 用 法 (GC-MS) [11-13] 液 相 色 谱 - 质 谱 联 用 法 [14-17] 等 然 而, 植 物 內 源 激 素 在 植 物 体 内 的 含 量 很 低 ( 通 常 在 μg/kg, 甚 至 ng/kg 水 平 上 ), 基 体 成 分 复 杂, 并 且 对 温 度 等 外 界 条 件 敏 感, 在 不 同 器 官 中 呈 现 动 态 分 布, 这 对 其 痕 量 高 灵 敏 度 精 确 定 量 检 测 提 出 了 1, * 2, 收 稿 日 期 :2015-09-07; 修 回 日 期 :2015-11-04 基 金 项 目 : 十 二 五 国 家 科 技 支 撑 计 划 (2014BAD13B05-05) 作 者 简 介 : 李 腾 飞 (1987 ), 男, 博 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 食 品 安 全 检 测 E-mail:litengfeibeyond@126.com * 通 信 作 者 : 王 静 (1963 ), 博 士, 教 授, 研 究 方 向 为 食 品 安 全 检 测 E-mail: w_jing2001@126.com 佘 永 新 (1972 ), 男, 研 究 员, 博 士 后, 研 究 方 向 为 食 品 安 全 检 测 E-mail: 0891syx@163.com 1
更 高 要 求 [18-19] 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 (LC-MS/MS) 具 有 很 强 的 定 性 定 量 能 力, 是 一 种 更 为 可 靠 的 分 析 植 物 激 素 的 方 法 [20-22] 水 杨 酸 (salicylic acid, SA) 是 一 种 小 分 子 酚 类 物 质, 能 够 诱 导 植 物 提 高 抗 病 性 [23-24] ; 赤 霉 酸 (gibberellic acid, GA 3 ) 是 一 种 四 环 二 萜 酸, 可 控 制 茎 的 伸 长 打 破 种 子 休 眠 控 制 开 花 和 性 别 表 达 等 [25-26] 目 前 对 番 茄 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 含 量 同 时 检 测 的 研 究 较 少, 本 文 建 立 了 一 种 高 效 液 相 色 谱 - 三 重 四 极 杆 质 谱 联 用 方 法 (LC-MS/MS), 对 不 同 生 长 阶 段 番 茄 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 含 量 进 行 了 分 析 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 试 剂 水 杨 酸 ( 纯 度 97.0%, 由 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 提 供 ), 赤 霉 酸 ( 纯 度 99.0%, 德 国 Dr. Ehrenstofer 公 司 ); 甲 醇 乙 腈 正 己 烷 ( 色 谱 纯, 美 国 MREDA 科 技 公 司 ), 甲 酸 ( 色 谱 纯, 迪 马 公 司 ), 氨 水 氯 化 钠 无 水 硫 酸 镁 ( 分 析 纯, 北 京 化 工 厂 ); 其 它 试 剂 均 为 分 析 纯 ; 实 验 用 水 为 Milli-Q 超 纯 水 1.2 仪 器 与 设 备 Agilent 1200 液 相 色 谱 仪 ( 美 国 Agilent Technologies 公 司 ),API 5000 三 重 四 极 杆 串 联 质 谱 仪 (ESI 源 )( 美 国 AB Sciex 质 谱 系 统 公 司 ), 高 速 匀 浆 机 ( 匈 牙 利 博 朗 电 器 ); 高 速 冷 冻 离 心 机 ( 美 国 Thermo 科 技 公 司 );Vortex-Genie 2 旋 涡 混 合 器 ( 美 国 Scientific Industries 公 司 ); 分 析 天 平 ( 赛 多 利 斯 科 学 仪 器 有 限 公 司 );MilliQ 纯 水 机 ( 法 国 MILLQ 公 司 );TTL-DC II 型 氮 吹 仪 ( 北 京 同 泰 联 科 技 发 展 有 限 公 司 );C 18 SPE 小 柱 (Sep-Pak Vac C18 cartridge 美 国 waters 公 司 ) 1.3 样 品 前 处 理 1.3.1 提 取 用 高 速 匀 浆 机 破 碎 番 茄 样 品 后, 称 取 10 g 试 样 ( 精 确 至 0.01 g), 于 50 ml 离 心 试 管 中, 加 入 10 ml 含 1% 乙 酸 的 乙 腈, 剧 烈 震 荡 1 min, 加 入 4 g 氯 化 钠 和 4 g 无 水 硫 酸 镁, 充 分 震 荡 涡 旋 1 min,5000 r/min 离 心 5 min 1.3.2 净 化 分 别 用 3 ml 甲 醇 和 水 活 化 C 18 固 相 萃 取 柱, 取 1 ml 用 氨 水 调 节 ph 为 8( 氨 水 含 量 约 5%) 的 上 清 液 上 样, 用 1 ml 正 己 烷 淋 洗,3 ml 含 5% 乙 酸 的 甲 醇 洗 脱 将 洗 脱 液 氮 吹 至 干,1 ml 甲 醇 复 溶, 过 0.22 μm 有 机 滤 膜, 上 机 测 定 1.4 方 法 1.4.1 色 谱 条 件 2016-01-12 色 谱 柱 :XTerra MS C18 柱 (2.1 mm 150 mm,5 μm); 柱 温 :30 ; 进 样 体 积 :5 μl; 流 动 相 :0.5% 甲 酸 水 溶 液 (A) 和 甲 醇 (B) 洗 脱 梯 度 见 表 1; 流 速 :300 μl/min 表 1 梯 度 洗 脱 程 序 Table 1 Setting up for gradient elution program 时 间 (min) 流 速 (μl/min) A% B% 0.00 300 80.0 20.0 2.00 300 80.0 20.0 3.00 300 10.0 90.0 6.50 300 80.0 20.0 8.00 300 80.0 20.0 1.4.2 质 谱 条 件 离 子 源 :ESI 源 ; 扫 描 方 式 : 负 离 子 模 式 ; 喷 雾 电 压 (EIS-):-4500 V; 离 子 源 温 度 (TEM):500 ; 气 帘 气 (CUR):20 psi; 碰 撞 气 压 力 (CAD):9 psi; 雾 化 气 (GS1):40 psi; 辅 助 气 (GS2):40 psi ; 射 入 电 压 (EP):-10 V; 碰 撞 室 出 口 电 压 (CXP):-17 V; 多 反 应 离 子 监 测 (MRM) 模 式 ; 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 定 性 离 子 对 和 定 量 离 子 对 的 去 簇 电 压 (Declustering potential, DP) 碰 撞 能 量 (Collision energy, CE) 见 表 2 表 2 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 母 离 子 子 离 子 去 簇 电 压 及 碰 撞 能 量 Table 2 Parent iron, product ion, declustering potential(dp), collision enegy(ce) parameters of SA and GA 3 分 析 物 母 离 子 子 离 子 去 簇 电 压 (V) 碰 撞 能 量 (V) 水 杨 酸 137.0 92.8* -23-35 65.0-40 赤 霉 酸 345.0 142.9* -146-21 2
2 结 果 与 分 析 *: 定 量 离 子 (Quantiative ion) 2.1 样 品 前 处 理 条 件 优 化 2.1.1 提 取 溶 剂 的 选 择 220.9-17 试 验 考 察 了 不 同 浓 度 (0.1%, 1%, 5%) 的 乙 酸 乙 腈 溶 液 对 番 茄 中 的 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 提 取 效 果, 结 果 表 明, 以 1% 乙 酸 乙 腈 作 为 提 取 剂 其 提 取 效 率 最 高, 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 回 收 率 均 可 达 83.8% 以 上, 而 单 纯 有 机 溶 剂 的 提 取 效 率 较 差 因 此, 本 方 法 选 用 1% 乙 酸 乙 腈 作 为 提 取 溶 剂 2.1.2 净 化 条 件 的 选 择 本 实 验 分 别 选 择 了 QuEChERS 方 法 SPE 方 法 (C 18 柱 和 MAX 混 合 阴 离 子 交 换 柱 ), 优 化 了 不 同 洗 脱 溶 剂 的 种 类 和 用 量, 以 基 质 效 应 定 量 表 示 净 化 效 果, 比 较 了 不 同 条 件 的 净 化 效 率 结 果 表 明, 三 种 方 法 的 净 化 效 率 从 高 到 低 依 次 是 C 18 柱 MAX 柱 和 QuEChERS 方 法 由 于 C 18 和 PSA 对 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 有 一 定 的 吸 附 作 用, 导 致 QuEChERS 方 法 的 回 收 率 较 低, 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 回 收 率 在 40~60% 之 间 ; 而 采 用 C 18 柱 的 SPE 方 法 回 收 率 最 高, 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 回 收 率 分 别 在 87.6~95.3% 83.8~96.5% 之 间 综 合 考 虑 净 化 效 率 和 成 本 (MAX 柱 成 本 较 高 ), 选 取 了 C 18 柱 作 为 番 茄 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 富 集 净 化 柱, 并 筛 选 和 优 化 了 上 样 活 化 淋 洗 和 洗 脱 溶 剂, 确 定 了 最 佳 净 化 程 序 本 实 验 采 用 5% 氨 水 碱 化 上 样, 甲 醇 和 水 活 化, 正 己 烷 淋 洗,3 ml5% 乙 酸 甲 醇 能 完 全 洗 脱 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 2.2 质 谱 条 件 的 优 化 根 据 目 标 物 的 性 质, 采 用 负 离 子 扫 描 模 式, 结 果 表 明 : 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 进 入 一 级 质 谱 后, 易 产 生 稳 定 的 [M-H] - 分 子 离 子 峰 水 杨 酸 的 母 离 子 为 m/z 137.0,[M-H] - 离 子 作 为 母 离 子 进 入 二 级 质 谱 后 发 生 断 裂 产 生 不 同 的 碎 片 离 子, 见 图 1 m/z 92.8 特 征 碎 片 是 由 母 体 脱 去 COOH 生 成, 其 响 应 值 高 且 稳 定, 因 此, 将 137.0>92.8 作 为 定 量 离 子 对 赤 霉 酸 的 母 离 子 为 345.2,[M-H] - 离 子 作 为 母 离 子 进 入 二 级 质 谱 后 发 生 断 裂 或 重 排 等 反 应 产 生 不 同 的 碎 片 离 子, 见 图 2 赤 霉 酸 二 级 质 谱 的 特 征 碎 片 m/z 为 142.9 220.9 和 239.2, 其 中 m/z142.9 的 响 应 值 高 且 稳 定, 因 此, 将 345.0>142.9 作 为 定 量 离 子 对 确 定 目 标 物 的 定 量 定 性 离 子 对 后, 对 其 质 谱 参 数 进 行 优 化, 优 化 结 果 见 1.4.2 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 总 离 子 流 图 和 提 取 离 子 流 图 详 见 图 3 -MS2 (137.10): 10 MCA scans from Sample 1 (TuneSampleID) of MT20150521103217.wif... Max. 5.6e7 cps. 5.5e7 92.8 5.0e7 4.5e7 4.0e7 3.5e7 Intensity, cps 3.0e7 2.5e7 2.0e7 1.5e7 137.0 1.0e7 5.0e6 65.0 75.0 79.9 119.0 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 120 125 130 135 140 145 150 m/z, amu 图 1 水 杨 酸 的 二 级 质 谱 图 Fig.1 Product ion spectra of SA 3
-MS2 (345.20): 30 MCA scans from Sample 1 (TuneSampleID) of MT20150901171138.wiff (Turbo Spray) Max. 5.0e5 cps. 5.0e5 142.9 4.8e5 4.6e5 4.4e5 4.2e5 4.0e5 3.8e5 3.6e5 3.4e5 3.2e5 3.0e5 Intensity, cps 2.8e5 2.6e5 2.4e5 2.2e5 2.0e5 1.8e5 1.6e5 1.4e5 220.9 227.0 345.0 1.2e5 1.0e5 8.0e4 6.0e4 4.0e4 2.0e4 239.2 238.4 270.8 201.1 343.9 160.5 213.0 256.9 283.2 197.1 145.1 193.0 300.9 265.0 326.5 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 m/z, amu 图 2 赤 霉 酸 的 二 级 质 谱 图 Fig.2 Product ion spectra of GA 3 TIC of -MRM (4 pairs): from Sample 6 (sys5ppb+cms50ppb) of 20151118shuiyangsuan-chimeisuan.wiff (Turb... 2.8e5 2.0e5 SA 6.00 Max. 2.8e5 cps. Inte... 1.0e5 GA 3 5.57 1.27 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 Time, min XIC of -MRM (4 pairs): 345.2/143.1 amu from Sample 6 (sys5ppb+cms50ppb) of 20151118shuiyangsuan-chime... Max. 4.1e4 cps. GA 3 5.57 4.0e4 Inte... 2.0e4 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 Time, min XIC of -MRM (4 pairs): 137.0/93.0 amu from Sample 6 (sys5ppb+cms50ppb) of 20151118shuiyangsuan-chimeis... Max. 2.5e5 cps. SA 2.5e5 6.00 2.0e5 Inte... 1.0e5 0.0 1.27 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 Time, min 图 3 赤 霉 酸 和 水 杨 酸 的 总 离 子 流 和 提 取 离 子 流 图 Fig.3 Total ion chromatogram and extract ion chromatogram of GA 3 (50ng/mL) and SA (5ng/mL) 2.3 线 性 范 围 与 检 出 限 以 甲 醇 作 为 溶 剂, 分 别 配 制 不 同 浓 度 梯 度 的 两 种 工 作 液, 使 水 杨 酸 浓 度 为 1.25, 2.5, 5,10, 20 μg/kg 和 赤 霉 酸 的 浓 度 为 10, 20, 50,100, 200, 1000 μg/kg 将 不 同 浓 度 的 标 准 溶 液 在 上 述 选 定 的 液 相 - 质 谱 条 件 下 分 别 进 行 测 定, 通 过 液 - 质 数 据 处 理 软 件 绘 制 标 准 曲 线 和 计 算 回 归 方 程 及 其 相 关 系 数 结 果 表 明 : 两 种 物 质 在 以 上 质 量 浓 度 范 围 内, 浓 度 与 其 峰 面 积 呈 良 好 的 线 性 关 系, 其 线 性 回 归 方 程 水 杨 酸 为 y=1.27 10 5 x+4.98 10 5 R 2 = 0.9984; 赤 霉 酸 线 性 回 归 方 程 为 y=4.34 10 3 x+4.66 10 4 R 2 =0.9933 取 信 噪 比 (S/N) 等 于 3 所 对 应 的 待 测 物 浓 度 作 为 检 出 限, 该 方 法 水 杨 酸 赤 霉 酸 的 检 出 限 分 别 为 0.01 ng/ml 0.15 ng/ml 2.4 方 法 回 收 率 和 精 密 度 为 评 价 方 法 的 准 确 性, 分 别 测 定 了 番 茄 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 加 标 回 收 率 选 择 新 采 集 的 番 茄 作 为 基 质 样 品, 分 别 添 加 三 个 水 平 ( 低 中 高 ) 的 上 述 两 种 物 质 标 准 溶 液, 平 行 测 定 3 次, 以 基 质 加 标 为 基 准, 计 算 平 均 回 收 率 结 果 显 示, 水 杨 酸 添 加 浓 度 为 1.25 2.5 5 μg/kg 的 回 收 率 在 87.6~95.3% 之 间, 相 对 4
标 准 偏 差 不 大 于 6.9%; 赤 霉 酸 添 加 浓 度 为 10 50 100 μg/kg 的 回 收 率 在 83.8~96.5% 之 间, 相 对 标 准 偏 差 不 大 于 6.7% 本 方 法 准 确 快 速 灵 敏 度 高, 可 用 于 番 茄 中 植 物 內 源 激 素 的 测 定 表 3 番 茄 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 平 均 回 收 率 及 相 对 标 准 偏 差 Table 3 Average recoveries of different spiked levels and relative standard deviation (RSD) for SA and GA3 in tomato 样 品 分 析 物 添 加 水 平 (μg/kg) 回 收 率 /% RSD/% (n=3) 1.25 95.3 6.0 水 杨 酸 2.50 95.1 6.9 5.00 87.6 4.6 番 茄 10.0 83.8 6.7 赤 霉 酸 50.0 96.5 6.5 100.0 88.2 6.3 2.5 实 际 样 品 分 析 为 验 证 该 方 法 在 实 际 样 品 中 的 检 测 能 力, 采 用 上 述 方 法 对 不 同 生 长 阶 段 (0, 3, 7, 14, 21, 28d) 的 番 茄 样 品 进 行 了 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 含 量 测 定, 每 个 样 品 重 复 测 定 3 次, 结 果 见 表 4 实 验 表 明, 本 方 法 的 灵 敏 度 检 出 限 和 精 密 度 能 够 满 足 番 茄 中 内 源 植 物 激 素 的 测 定 表 4 不 同 番 茄 样 品 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 含 量 (μg/kg) Table 4 Content of SA and GA 3 in different tomato samples 样 品 编 号 水 杨 酸 (SA) 赤 霉 酸 (GA 3 ) 含 量 /(μg/kg) RSD/% 含 量 /(μg/kg) RSD/% Sample-0d 86.63 10.9 71.33 14.2 Sample-3d 79.70 6.79 148.0 3.76 Sample-7d 69.07 5.80 184.3 11.3 Sample-14d 74.93 2.70 69.53 5.60 Sample-21d 81.10 5.18 44.73 3.48 Sample-28d 92.10 4.68 102.6 6.91 3 结 论 本 研 究 通 过 对 样 品 前 处 理 方 法 和 色 谱 质 谱 条 件 的 筛 选 和 优 化, 建 立 了 番 茄 样 品 中 内 源 性 植 物 激 素 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 检 测 方 法, 并 应 用 于 实 际 样 品 的 分 析 该 方 法 分 析 时 间 短 检 出 限 低 线 性 范 围 宽 回 收 率 高, 可 适 用 于 番 茄 等 样 品 中 水 杨 酸 和 赤 霉 酸 的 测 定 分 析 参 考 文 献 : [1] COLEBROOK E H, THOMAS S G, PHILLIPS A L, et al. The role of gibberellin signalling in plant responses to abiotic stress[j]. Journal of Experimental Biology, 2014, 217(1): 67-75. doi: 10.1242/jeb.089938 [2] IQBAL N, UMAR S, KHAN NA, et al. A new perspective of phytohormones in salinity tolerance: Regulation of proline metabolism[j]. Environmental and Experimental Botany, 2014, 100: 34-42 [3] TANK J G, PANDYA R V, THAKER V S. Phytohormones in regulation of the cell division and endoreduplication process in the plant cell cycle[j]. RSC Advances, 2014, 49(24): 12605-12613. [4] 许 智 宏, 李 家 洋. 中 国 植 物 激 素 研 究 : 过 去 现 在 和 未 来 [J]. 植 物 学 通 报, 2006, 23(5): 433-442. 5
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