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附 件 11: 全 国 细 菌 性 痢 疾 监 测 方 案 ( 试 行 ) 一 背 景 细 菌 性 痢 疾 ( 简 称 菌 痢 ) 是 由 志 贺 氏 菌 引 起 的 一 种 急 性 肠 道 传 染 病, 也 是 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 规 定 的 乙 类 传 染 病 该 病 不 但 发 病 率 高, 其 中 急 性 中 毒 型 菌 痢 容 易 误 诊, 危 及 生 命 病 人 和 带 菌 者 是 菌 痢 的 主 要 传 染 源, 传 播 途 径 主 要 为 粪 - 口 传 播, 人 群 对 菌 痢 普 遍 易 感, 病 后 免 疫 力 持 续 时 间 较 短, 不 同 型 别 菌 株 之 间 无 交 叉 免 疫, 短 时 间 内 也 可 能 再 次 发 生 感 染 全 球 每 年 志 贺 氏 菌 感 染 人 次 估 计 为 1.65 亿 发 达 国 家 发 病 率 约 为 1.8-6.5/10 万 我 国 目 前 菌 痢 的 发 病 率 仍 显 著 高 于 发 达 国 家,1994-2003 年 的 监 测 数 据 显 示 菌 痢 的 报 告 发 病 数 从 87.83 万 例 降 至 49.05 万 例, 全 国 发 病 率 从 75.2/10 万 降 至 39.4/10 万, 总 体 看 有 逐 年 下 降 的 趋 势 菌 痢 的 报 告 发 病 率 存 在 明 显 的 地 区 差 异, 高 发 病 率 地 区 主 要 是 西 藏 甘 肃 北 京 宁 夏 贵 州 天 津 云 南 新 疆 青 海 近 十 年 每 年 死 亡 病 例 数 在 144 例 -521 例 之 间 儿 童 和 农 民 发 病 人 数 较 多,0-10 岁 儿 童 占 总 发 病 数 的 40% 以 上, 水 和 食 物 污 染 引 起 的 暴 发 时 有 发 生 不 同 地 区 病 例 报 告 的 准 确 性 不 尽 相 同, 细 菌 耐 药 日 益 严 重 缺 少 较 系 统 的 病 原 监 测 工 作, 各 地 区 流 行 的 优 势 菌 株 的 变 化 情 况 不 清 楚, 对 引 起 暴 发 的 病 原 菌 缺 少 深 入 分 析 为 进 一 步 加 强 我 国 细 菌 性 痢 疾 的 监 测 工 作, 为 制 定 防 治 策 略 和 措 施 提 供 科 学 依 据 特 制 订 本 方 案 二 监 测 目 的 1. 及 时 掌 握 菌 痢 发 病 情 况, 了 解 发 病 的 主 要 特 征 ; 2. 收 集 菌 痢 暴 发 疫 情 资 料, 分 析 暴 发 流 行 的 主 要 特 征 ; 3. 开 展 病 原 学 监 测, 了 解 志 贺 氏 菌 血 清 型 别 和 耐 药 谱 的 变 化, 指 导 临 床 用 药 和 菌 苗 株 的 选 择 ; 4. 初 步 分 析 和 评 价 菌 痢 临 床 诊 断 的 准 确 性, 为 修 订 病 例 诊 断 标 准 提 供 参 考 依 据 241

三 监 测 定 义 ( 一 ) 病 例 定 义 1 腹 泻 病 例 大 便 每 日 3 次, 粪 便 的 性 状 异 常 者 2 疑 似 病 例 有 脓 血 便 或 粘 液 便 或 水 样 便 或 稀 便, 或 伴 有 里 急 后 重 症 状, 并 除 外 其 他 原 因 的 腹 泻 病 例 为 痢 疾 疑 似 病 例 3 临 床 诊 断 病 例 (1) 急 性 菌 痢 1) 急 性 发 作 之 腹 泻 ( 除 外 其 他 原 因 腹 泻 ), 伴 发 热 腹 痛 里 急 后 重 脓 血 便 或 粘 液 便 左 下 腹 有 压 痛 ; 2) 粪 便 镜 检 白 血 球 ( 脓 细 胞 ) 每 高 倍 (400 倍 ) 视 野 15 个 以 上, 可 以 看 到 少 量 红 血 球 ; (2) 急 性 中 毒 型 菌 痢 1) 发 病 急 高 热 呈 全 身 中 毒 为 主 的 症 状 ; 2) 中 枢 神 经 系 统 症 状 : 如 惊 厥 烦 燥 不 安 嗜 睡 或 昏 迷 ; 或 有 周 围 循 环 衰 竭 症 状, 如 面 色 苍 白 四 肢 厥 冷 脉 细 速 血 压 下 降 或 有 呼 吸 衰 竭 症 状 ; 3) 起 病 时 胃 肠 道 症 状 不 明 显, 但 用 灌 肠 或 肛 门 拭 子 采 便 检 查 可 发 现 白 血 球 ( 脓 细 胞 ); (3) 慢 性 菌 痢 过 去 有 菌 痢 病 史, 多 次 典 型 或 不 典 型 腹 泻 2 个 月 以 上 者 ; 或 有 粘 液 脓 性 粪 便 或 间 歇 发 生 粘 液 脓 性 粪 便 ; 4 确 诊 病 例 粪 便 细 菌 培 养 志 贺 氏 菌 属 阳 性 的 各 型 临 床 诊 断 病 例 ( 二 ) 暴 发 疫 情 定 义 在 局 部 地 区 或 单 位 ( 比 如 在 一 个 自 然 村 或 一 个 居 委 会 或 一 个 单 位 团 体 ), 一 周 内 发 生 20 例 或 以 上 痢 疾 病 例 四 监 测 内 容 和 方 法 ( 一 ) 全 国 常 规 监 测 1 常 规 疫 情 监 测 242

按 照 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 和 传 染 病 疫 情 和 突 发 公 共 卫 生 事 件 报 告 管 理 规 范, 各 级 各 类 医 疗 机 构 疾 病 预 防 控 制 机 构 卫 生 检 验 机 构 执 行 职 务 的 医 务 人 员 发 现 临 床 诊 断 或 确 诊 病 例 后, 城 镇 应 于 6 小 时, 农 村 应 于 12 小 时 内 填 写 报 告 卡, 通 过 传 染 病 疫 情 监 测 信 息 系 统 进 行 网 络 直 报 不 具 备 网 络 直 报 条 件 的 应 在 诊 断 后 24 小 时 内 向 相 应 单 位 送 ( 寄 ) 出 传 染 病 报 告 卡, 县 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 和 具 备 条 件 的 乡 镇 卫 生 院 收 到 传 染 病 报 告 卡 后 应 立 即 进 行 网 络 直 报 并 及 时 开 展 现 场 调 查 与 处 理 工 作 2 病 原 监 测 各 省 要 加 强 对 菌 痢 的 病 原 监 测 工 作, 每 年 将 本 省 菌 痢 病 例 菌 株 分 离 鉴 定 结 果 总 结 报 告 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 特 别 要 将 分 离 到 的 暴 发 中 的 代 表 菌 株 和 罕 见 型 别 的 散 发 菌 株 送 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 保 存 报 告 内 容 包 括 : 检 测 数 菌 株 分 离 数 菌 型 构 成 菌 株 来 源 信 息 ( 散 发 暴 发 10 岁 以 下 儿 童 城 市 农 村 ) 等 ( 二 ) 监 测 点 监 测 1 国 家 监 测 点 选 择 (1) 根 据 不 同 地 理 分 布 经 济 状 况, 以 及 近 五 年 发 病 水 平, 选 择 河 南 上 海 甘 肃 黑 龙 江 福 建 贵 州 青 海 安 徽 北 京 和 山 西 开 展 监 测 工 作 (2) 各 省 根 据 当 地 经 济 水 平 卫 生 状 况 和 自 然 特 点, 以 县 ( 区 ) 为 单 位 选 择 2 个 具 代 表 性 的 监 测 点, 其 中 农 村 点 和 城 市 点 各 1 个 (3) 监 测 点 具 有 一 定 的 痢 疾 工 作 基 础, 能 够 承 担 并 完 成 监 测 任 务 ; (4) 根 据 监 测 工 作 需 求 可 适 时 调 整 监 测 点 2 工 作 内 容 (1) 按 照 全 国 常 规 疫 情 监 测 工 作 要 求, 完 成 疫 情 监 测 和 报 告 (2) 暴 发 疫 情 监 测 按 照 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 和 传 染 病 疫 情 报 告 管 理 规 范, 各 监 测 省 辖 区 内 各 级 各 类 医 疗 机 构 疾 病 预 防 控 制 机 构 卫 生 检 验 机 构 执 行 职 务 的 医 务 人 员 发 现 暴 发 流 行 疫 情 时, 按 照 国 家 突 发 公 共 卫 生 事 件 应 急 预 案 规 定 级 别 的 要 求 进 行 报 告 暴 发 疫 情 发 生 时, 要 对 所 有 病 例 进 行 个 案 调 查, 并 将 细 菌 性 痢 疾 暴 发 疫 情 个 案 调 查 表 ( 见 附 表 1) 录 入 数 据 库, 在 上 报 疫 情 总 结 报 告 时, 一 并 上 报 数 据 库 并 将 暴 发 疫 情 分 离 的 有 代 表 性 的 菌 株 一 并 上 交 各 省 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 243

保 存, 根 据 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 的 工 作 需 求 上 送 至 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 暴 发 疫 情 处 理 结 束 后, 要 及 时 收 集 整 理 统 计 分 析 调 查 资 料, 写 出 详 细 的 报 告, 报 告 主 要 内 容 包 括 : 疫 情 概 况 首 发 病 例 或 指 示 病 例 的 描 述 流 行 基 本 特 征 暴 发 原 因 实 验 室 检 测 结 果 和 病 原 分 型 控 制 措 施 和 效 果 评 估 等 在 疫 情 控 制 工 作 结 束 后 7 天 内 完 成 结 案 报 告 暴 发 疫 情 调 查 和 处 理 步 骤 见 附 件 1 3 病 原 监 测 (1) 病 原 菌 分 离 鉴 定 各 监 测 点 疾 控 机 构 每 年 采 集 300 份 以 上 痢 疾 疑 似 病 例 的 标 本 ( 其 中 儿 童 病 例 至 少 占 50% 以 上 ), 低 发 季 节 每 月 至 少 采 集 10 份, 高 发 季 节 每 月 至 少 采 集 30 份 各 省 各 监 测 点 根 据 本 地 发 病 情 况 可 适 当 调 整 每 月 采 样 数 量, 注 意 保 证 样 品 采 集 的 时 间 均 衡 性 采 集 时 按 规 范 的 操 作 程 序, 在 抗 生 素 使 用 前 采 集 粪 便 标 本, 进 行 粪 便 常 规 检 查 病 原 菌 分 离 培 养 及 初 步 鉴 定 标 本 采 集 时 要 填 写 细 菌 性 痢 疾 粪 便 样 本 采 样 登 记 表 ( 见 附 表 2) 标 本 采 集, 分 离 培 养 和 鉴 定 方 法 见 附 件 2 各 监 测 点 每 月 总 结 采 样 分 离 结 果, 根 据 细 菌 性 痢 疾 粪 便 样 本 采 样 登 记 表 ( 见 附 表 2) 的 信 息, 及 时 填 报 细 菌 性 痢 疾 病 原 分 离 结 果 报 表 ( 见 附 表 3), 以 电 子 表 格 形 式, 每 月 10 日 前 逐 级 上 报 至 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 (2) 生 化 鉴 定 和 血 清 学 分 型 各 省 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 负 责 对 各 监 测 点 分 离 的 菌 株 做 进 一 步 生 化 鉴 定 和 血 清 学 分 型 并 将 结 果 填 入 细 菌 性 痢 疾 菌 株 鉴 定 表 ( 见 附 表 4) 报 告 方 式 同 上 (3) 耐 药 性 分 析 各 省 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 每 年 根 据 不 同 菌 株 来 源, 至 少 选 择 30% 的 上 送 菌 株 进 行 药 敏 试 验, 药 敏 试 验 按 K-B 琼 脂 法 进 行, 药 物 选 择 需 包 括 下 列 抗 生 素 : 氨 苄 西 林 (AMP), 阿 莫 西 林 / 克 拉 维 酸 (AMC), 头 孢 噻 吩 (CFT), 头 孢 噻 肟 (CTX), 庆 大 霉 素 (GEN), 萘 啶 酸 (NAL), 环 丙 沙 星 (CIP), 四 环 素 (TBT), 利 福 平 (RFA), 复 方 新 喏 明 (SMZ) 检 测 方 法 试 剂 及 结 果 判 断 详 见 附 件 3 各 监 测 点 检 测 结 果 填 写 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 记 录 表 ( 见 附 表 5) 在 每 季 度 第 一 个 月 10 244

日 前 将 上 季 度 结 果 填 写 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 汇 总 报 表 ( 见 附 表 6), 以 电 子 文 件 形 式 将 附 表 5 附 表 6 逐 级 上 报 至 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 (4) 分 子 生 物 学 检 测 分 析 每 年 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 腹 泻 病 室 组 织 各 监 测 省, 选 择 上 年 具 有 代 表 性 的 菌 株 按 照 PulseNet China 中 有 关 志 贺 氏 菌 的 脉 冲 场 凝 胶 电 泳 (PFGE) 方 法 的 标 准 进 行 分 析 和 毒 力 基 因 检 测 (5) 菌 株 的 管 理 依 据 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 中 国 医 学 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 办 法 及 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 管 理 条 例 的 规 定 与 要 求 对 分 离 到 的 菌 株 进 行 保 存 运 送 与 管 理 各 级 医 疗 机 构 实 验 室 分 离 到 的 菌 株, 应 送 交 当 地 疾 病 预 防 控 制 机 构 进 行 复 核, 复 核 菌 株 送 省 市 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 保 存 ; 省 级 疾 病 预 防 控 制 机 构 收 集 监 测 点 分 离 的 散 发 病 例 菌 株 和 全 省 暴 发 菌 株, 进 行 复 核 和 保 存, 并 做 好 登 记 各 疾 控 中 心 实 验 室 必 须 建 立 菌 株 管 理 制 度, 做 好 菌 株 登 记 ( 见 附 表 7 细 菌 性 痢 疾 监 测 菌 株 登 记 表 ) 各 省 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 按 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 要 求 上 送 菌 株, 同 时 应 提 供 菌 株 相 关 信 息 4 菌 痢 临 床 诊 断 病 例 准 确 性 分 析 各 监 测 点, 在 每 年 7 月, 在 农 村 点 选 择 一 所 乡 级 综 合 医 院, 在 城 市 点 选 择 区 级 综 合 医 院, 至 少 连 续 10 天 对 腹 泻 病 门 诊 就 诊 的 未 使 用 抗 生 素 治 疗 的 腹 泻 病 人 ( 其 中 儿 童 病 例 不 少 于 50%), 由 临 床 主 治 大 夫 详 细 登 记 临 床 表 现 记 录 医 生 诊 断 结 果, 填 写 细 菌 性 痢 疾 粪 便 样 本 采 样 登 记 表 ( 见 附 表 2), 并 及 时 采 集 腹 泻 病 人 粪 便 标 本 送 当 地 疾 控 机 构 进 行 病 原 分 离 当 地 疾 控 机 构 根 据 国 家 痢 疾 诊 断 标 准, 进 行 临 床 诊 断 病 例 的 准 确 性 分 析 每 年 总 结 检 测 结 果,10 月 10 日 前 以 电 子 文 件 形 式 逐 级 上 报 至 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 五 监 测 网 络 组 成 和 职 责 监 测 网 络 由 各 级 卫 生 行 政 部 门 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 及 各 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 监 测 点 所 在 地 医 疗 机 构 组 成 其 职 责 分 别 是 : ( 一 ) 卫 生 部 及 各 级 卫 生 行 政 部 门 卫 生 部 负 责 全 国 的 监 测 工 作, 各 级 卫 生 行 政 部 门 负 责 组 织 开 展 本 辖 区 内 监 测 工 作, 并 提 供 所 需 监 测 经 费, 保 证 监 测 工 作 顺 利 开 展 ( 二 ) 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 245

1 制 订 监 测 方 案, 组 织 考 察 确 定 全 国 监 测 点 的 布 局, 与 国 家 级 监 测 点 所 在 省 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 签 订 协 议, 明 确 具 体 任 务 和 目 标 组 织 对 国 家 监 测 点 的 专 业 技 术 人 员 的 培 训 为 国 家 级 监 测 点 提 供 一 定 监 测 经 费 补 助 2. 设 计 监 测 数 据 的 收 集 流 程 方 式, 负 责 全 国 监 测 数 据 的 收 集 整 理, 定 期 对 监 测 系 统 的 全 部 数 据 进 行 分 析 反 馈 对 上 送 菌 株 进 行 分 子 分 型 分 析, 每 年 对 全 国 监 测 点 进 行 年 度 工 作 总 结 3. 组 织 专 家 定 期 对 全 国 痢 疾 监 测 点 进 行 检 查 考 核 ( 三 ) 省 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 1. 协 助 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 确 定 本 省 国 家 级 监 测 点, 建 立 和 完 善 本 省 的 监 测 网 络 ; 承 担 本 省 国 家 级 监 测 点 的 管 理 业 务 指 导, 参 与 国 家 CDC 对 国 家 级 监 测 点 的 监 测 工 作 检 查 考 核 2. 负 责 本 省 监 测 专 业 技 术 人 员 培 训 工 作 ; 3. 完 成 监 测 方 案 中 要 求 的 菌 株 收 集 与 复 核 等 监 测 任 务 4. 对 全 省 监 测 资 料 进 行 收 集 汇 总 和 分 析, 按 方 案 要 求 的 时 限 上 报 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心, 并 进 行 反 馈 5. 对 监 测 点 的 监 测 工 作 进 行 质 量 控 制 6. 与 本 省 国 家 级 监 测 点 疾 病 预 防 控 制 机 构 签 订 协 议, 明 确 具 体 任 务 和 目 标, 按 其 工 作 内 容 确 定 监 测 经 费 补 助 数 额 ( 四 ) 市 县 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 按 监 测 方 案 要 求, 按 质 按 量 完 成 疫 情 监 测 与 报 告 实 验 室 检 测 暴 发 疫 情 调 查 病 例 标 本 的 采 集 检 测 上 送 等 工 作 ( 五 ) 监 测 点 所 在 地 医 疗 机 构 在 当 地 卫 生 行 政 部 门 的 统 一 领 导 下, 配 合 疾 病 预 防 控 制 部 门 开 展 各 项 监 测 工 作, 负 责 完 成 门 ( 就 ) 诊 病 例 的 登 记 标 本 采 集 和 检 测 工 作, 所 分 离 菌 株 及 其 背 景 资 料 移 交 当 地 疾 病 预 防 控 制 中 心 保 存 六 数 据 收 集 分 析 与 反 馈 ( 一 ) 数 据 收 集 内 容 1 病 原 分 离 月 报 表 2 痢 疾 个 案 调 查 表 和 个 案 数 据 库 3 采 样 登 记 表 4. 痢 疾 菌 株 鉴 定 表 246

5 暴 发 疫 情 调 查 报 告 ( 二 ) 监 测 点 监 测 数 据 收 集 流 程 监 测 点 实 施 监 测 内 容, 各 种 数 据 收 集 分 析 以 及 各 种 标 本 的 采 集 县 疾 病 预 防 控 制 中 心 市 疾 病 预 防 控 制 中 心 省 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 ( 三 ) 统 计 分 析 内 容 和 指 标 1. 发 病 情 况 : 发 病 数 死 亡 数 发 病 率 病 死 率 和 死 亡 率 2. 病 例 分 布 情 况 : 病 人 年 龄 性 别 职 业 和 时 间 地 理 分 布 等 3. 实 验 室 监 测 结 果 (1) 菌 株 血 清 型 别 构 成 和 变 迁 (2) 菌 株 敏 感 药 物 和 耐 药 情 况 (3) 分 子 生 物 学 特 征 4. 确 诊 病 例 的 临 床 表 现 分 析 5. 暴 发 疫 情 数 量 分 布 和 特 征 ( 四 ) 报 告 与 反 馈 各 种 监 测 工 作 报 告 内 容 和 方 式 见 监 测 内 容 和 方 法 一 节, 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 每 季 度 以 简 报 形 式 向 各 地 反 馈 监 测 结 果, 并 负 责 完 成 年 度 全 国 监 测 总 结 报 告 电 子 信 箱 地 址 :fuxiejiance@icdc.cn 传 真 :010-61739156 七 监 测 质 量 控 制 ( 一 ) 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 组 织 全 国 相 关 专 家 起 草 监 测 方 案, 并 广 泛 论 证 ( 二 ) 在 监 测 工 作 开 始 前, 由 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 组 织 统 一 培 训 人 员 培 训 合 格 率 100% ( 三 ) 监 测 结 果 报 告 及 时 率 和 反 馈 率 均 达 到 100% 247

( 四 ) 病 原 学 检 测 鉴 定 的 准 确 率 各 省 对 上 送 菌 株 进 行 复 核 鉴 定, 鉴 定 符 合 率 不 低 于 90% 中 国 疾 病 预 防 控 制 中 心 传 染 病 预 防 控 制 所 应 对 省 级 疾 病 预 防 控 制 中 心 送 交 的 分 离 菌 株 抽 样 30% 进 行 菌 型 鉴 定 鉴 定 符 合 率 不 低 于 95% ( 五 ) 技 术 资 料 档 案 管 理, 原 始 记 录, 工 作 总 结 等 技 术 资 料 归 档 率 和 完 整 率 等 八 附 件 附 表 1 年 细 菌 性 痢 疾 暴 发 疫 情 个 案 调 查 表 附 表 2 年 细 菌 性 痢 疾 粪 便 样 本 采 样 登 记 表 附 表 3 年 月 细 菌 性 痢 疾 病 原 分 离 结 果 报 表 附 表 4 年 细 菌 性 痢 疾 菌 株 鉴 定 表 附 表 5 年 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 记 录 表 附 表 6 年 季 度 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 汇 总 报 表 附 表 7 年 细 菌 性 痢 疾 监 测 菌 株 登 记 表 附 件 1 痢 疾 暴 发 疫 情 调 查 附 件 2 实 验 室 检 测 技 术 指 南 附 件 3 药 敏 试 验 附 件 4 菌 种 管 理 248

附 表 1 年 细 菌 性 痢 疾 暴 发 疫 情 个 案 调 查 表 地 区 国 标 编 码 病 例 编 码 - 1. 一 般 情 况 1.1 姓 名, 若 为 14 岁 以 下 儿 童, 家 长 姓 名 1.2 性 别 ⑴ 男 ⑵ 女 1.3 年 龄 ( 岁 月 ) 1.4 职 业 ⑴ 幼 托 儿 童 ⑵ 散 居 儿 童 ⑶ 学 生 ⑷ 教 师 ⑸ 保 育 员 ⑹ 餐 饮 食 品 人 员 ⑺ 公 共 场 所 服 务 员 ⑻ 商 务 人 员 ⑼ 医 务 人 员 ⑽ 工 人 ⑾ 民 工 ⑿ 农 民 ⒀ 牧 民 ⒁ 渔 ( 船 ) 民 (15) 海 员 及 长 途 驾 驶 员 (16) 公 务 人 员 及 职 员 ⒄ 离 退 人 员 (18) 家 政 家 务 及 待 业 (19) 不 详 (20) 其 他 1.5 文 化 程 度 ⑴ 学 龄 前 儿 童 ⑵ 文 盲 ⑶ 小 学 ⑷ 初 中 ⑸ 高 中 ⑹ 大 学 及 以 上 ⑺ 不 详 1.6 现 住 址 户 口 地 1.7 工 作 ( 学 习 ) 单 位 1.8 联 系 人 联 系 电 话 ( 办 ) ( 宅 ) ( 手 机 ) 2. 发 病 情 况 2.1 发 病 日 期 年 月 日 时 2.2 发 病 地 点 2.3 首 诊 时 间 年 月 日 时 2.4 首 诊 单 位 2.5 诊 断 医 院 2.6 报 告 时 间 年 月 日 时 2.7 住 院 时 间 年 月 日 时 2.8 出 院 时 间 年 月 日 时 3. 临 床 资 料 3.1 临 床 症 状 3.1.1 腹 泻 ⑴ 有 ⑵ 无 每 天 最 多 腹 泻 次 数 3.1.2 粪 便 性 状 ⑴ 水 样 ⑵ 粘 液 血 便 ⑶ 脓 血 便 ⑷ 其 他 3.1.3 里 急 后 重 :⑴ 有 ⑵ 无 3.1.4 恶 心 ⑴ 有 ⑵ 无 3.1.5 呕 吐 ⑴ 有 ⑵ 无 3.1.6 发 热 ⑴ 有 ⑵ 无 249

最 高 体 温. 3.1.7 嗜 睡 :⑴ 有 ⑵ 无 3.1.8 昏 迷 :⑴ 有 ⑵ 无 3.1.9 抽 风 :⑴ 有 ⑵ 无 3.1.10 其 他 症 状 : 3.2 诊 断 依 据 3.2.1 诊 断 依 据 ⑴ 临 床 ⑵ 病 原 学 ⑶ 临 床 + 病 原 学 3.2.2 检 验 结 果 日 期 镜 检 培 养 红 细 胞 白 细 胞 志 贺 氏 福 氏 鲍 氏 宋 内 氏 3.2.3 病 人 转 归 ⑴ 痊 愈 ⑵ 带 菌 ⑶ 死 亡 4. 流 行 病 学 调 查 ( 病 前 1 周 内 ) 4.1 接 触 过 同 样 病 人 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.1 接 触 时 间 年 月 日 时 4.1.2 接 触 地 点 4.1.3 接 触 方 式 4.1.3.1 同 吃 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.3.2 同 住 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.3.3 同 玩 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.3.4 同 工 作 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.3.5 护 理 ⑴ 有 ⑵ 无 4.1.3.6 其 他 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2 饮 食 情 况 4.2.1 饮 生 水 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2.1.1 水 源 类 型 ⑴ 井 水 ⑵ 河 水 ⑶ 塘 水 ⑷ 自 来 水 ⑸ 其 他 4.2.2 吃 生 冷 食 品 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2.2.1 生 冷 食 品 名 称 购 买 地 点 4.2.3 熟 食 冷 吃 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2.3.1 熟 食 品 名 称 购 买 地 点 4.2.4 其 他 可 疑 食 品 名 称 购 买 地 点 4.2.5 在 外 就 餐 史 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2.5.1 就 餐 地 点 ⑴ 排 档 ⑵ 个 体 餐 馆 ⑶ 宾 馆 餐 厅 ⑷ 其 他 就 餐 地 点 名 称 4.2.6 同 餐 者 ⑴ 有 ⑵ 无 4.2.6.1 同 餐 人 数 250

4.2.6.2 同 餐 日 期 年 月 日 时 4.2.6.3 同 餐 者 发 病 :⑴ 有 ⑵ 无 同 餐 发 病 人 数 : 4.2.7 饭 前 洗 手 : ⑴ 洗 ⑵ 不 洗 4.2.8 便 后 洗 手 : ⑴ 洗 ⑵ 不 洗 4.3.1 小 儿 喂 养 方 式 : ⑴ 母 乳 喂 养 ⑵ 人 工 喂 养 ⑶ 混 合 喂 养 4.3.2 母 亲 卫 生 习 惯 :⑴ 良 好 ⑵ 一 般 ⑶ 不 好 5. 控 制 措 施 5.1 病 人 隔 离 ⑴ 是 ⑵ 否 5.2 隔 离 地 点 ⑴ 住 院 ⑵ 家 庭 ⑶ 其 他 5.3 家 庭 隔 离 期 间 的 消 毒 与 治 疗 5.3.1 病 人 的 饮 食 用 具 ⑴ 分 开 ⑵ 未 分 5.3.2 饮 食 用 具 消 毒 方 法 ⑴ 煮 沸 ⑵ 清 洗 ⑶ 消 毒 液 名 称 5.3.3 排 泄 物 ⑴ 未 处 理 ⑵ 处 理 处 理 方 法 5.3.4 治 疗 情 况 ⑴ 连 续 服 药 ⑵ 间 歇 服 药 ⑶ 未 服 5.4 患 病 期 间 暂 时 调 离 工 作 岗 位 ⑴ 是 ⑵ 否 5.5 密 切 接 触 者 登 记 : 姓 名 性 别 年 龄 与 患 者 关 系 接 触 方 式 发 病 日 期 6. 小 结 调 查 者 单 位 : 调 查 者 : 审 查 者 : 调 查 日 期 : 填 表 说 明 : 病 例 编 码 第 一 二 位 填 年 号, 后 四 位 填 流 水 号 251

附 表 2 年 细 菌 性 痢 疾 粪 便 样 本 采 样 登 记 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 国 家 监 测 点 : 是, 否 病 人 编 号 姓 名 性 别 年 龄 家 庭 住 址 临 床 症 状 发 热 ( ) 粪 便 性 状 粪 便 镜 检 临 床 诊 断 发 病 日 期 采 样 日 期 病 原 分 离 及 血 清 型 鉴 定 结 果 A B C D 未 检 出 备 注 注 :1 粪 便 性 状 :1. 鲜 血 样 便 2. 血 便 相 混 3. 脓 血 便 4. 黑 便 5. 粘 液 便 6. 米 泔 水 样 便 7. 水 样 便 8. 稀 便 2 临 床 症 状 ( 可 多 选 ):1 腹 泻 2 腹 痛 3 左 下 腹 部 压 痛 4 呕 吐 5 里 急 后 重 6 脑 水 肿 表 现, 如 烦 燥 不 安 惊 厥 7 有 感 染 性 休 克 症, 如 面 色 苍 白 四 肢 厥 冷 脉 细 速 8 突 然 高 热 3 发 热 体 温 填 写 病 程 中 最 高 一 次 体 温 4 粪 便 镜 检 参 考 国 家 诊 断 标 准, 填 写 阴 性 或 阳 性 填 表 单 位 : 填 表 日 期 : 252

附 表 3 年 月 细 菌 性 痢 疾 病 原 分 离 结 果 报 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 国 家 监 测 点 : 是, 否 监 测 点 采 样 数 痢 疾 临 床 诊 断 病 例 ( 粪 便 镜 检 阳 性 ) 实 验 室 确 诊 病 例 痢 疾 疑 似 病 例 未 检 出 其 他 腹 泻 病 例 ( 粪 便 镜 检 阴 性 ) 实 验 室 确 诊 病 例 未 检 出 病 原 分 离 及 血 清 型 鉴 定 结 果 A B C D 填 表 单 位 : 填 表 日 期 : 253

附 表 4 年 细 菌 性 痢 疾 菌 株 鉴 定 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 国 家 监 测 点 : 是, 否 标 本 编 号 患 者 姓 名 SS 平 刚 果 红 板 菌 平 板 菌 落 形 落 颜 色 态 HE 平 板 菌 KIA 落 形 态 K/A 产 气 生 化 试 验 MIU 动 H2S 力 靛 基 质 四 种 多 价 尿 素 痢 疾 志 贺 菌 群 多 价 福 氏 鲍 氏 志 贺 菌 志 贺 菌 宋 内 志 贺 菌 血 清 学 分 型 型 抗 群 抗 原 原 3 4 6 7 分 型 结 果 检 测 日 期 备 注 检 测 单 位 : 检 测 者 : 填 表 单 位 : 填 表 日 期 : 254

附 表 5 年 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 记 录 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 菌 株 号 样 品 名 称 血 清 型 菌 株 分 离 日 期 药 敏 试 验 日 期 抑 菌 环 药 敏 结 果 AMP AMC CFT CTX GEN NAL CIP TBT RFA SMZ 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 结 果 抑 菌 环 耐 药 性 抑 菌 环 耐 药 性 抑 菌 环 耐 药 性 耐 药 数 中 介 数 敏 感 数 说 明 : 1. 每 批 药 敏 试 验 必 须 同 时 做 参 比 菌 株 大 肠 埃 希 菌 ATCC 25922, 并 将 结 果 记 录 在 本 表 格 内 2. 样 品 名 称 尽 量 详 细, 如 腹 泻 者 粪 便, 病 人 血 液, 生 牡 蛎, 熟 猪 肉 等 3. 抗 生 素 需 给 出 中 英 文 全 名 及 英 文 缩 写, 表 格 中 使 用 英 文 缩 写 氨 苄 西 林 (AMP) 阿 莫 西 林 (AMC) 头 孢 噻 吩 (CFT) 头 孢 噻 肟 (CTX) 庆 大 霉 素 (GEN) 萘 啶 酸 (NAL) 环 丙 沙 星 (CIR) 四 环 素 (TBT) 利 福 平 (RFA) 复 方 新 诺 明 (SMZ) 药 敏 结 果 判 定 标 准 :NCCLs 手 册 2005 版 抑 菌 环 记 录 单 位 mm 药 敏 结 果 记 录 :S( 敏 感 ) R( 耐 药 ) I( 中 介 ) 检 测 单 位 : 检 测 者 : 填 表 单 位 : 填 表 日 期 : 255

附 表 6 年 季 度 细 菌 性 痢 疾 菌 株 药 敏 结 果 汇 总 报 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 国 家 监 测 点 : 是, 否 抗 菌 素 名 称 检 测 菌 株 数 耐 药 菌 株 数 耐 药 率 (%) 敏 感 菌 株 数 敏 感 率 (%) 备 注 氨 苄 西 林 (AMP) 阿 莫 西 林 (AMC) 头 孢 噻 吩 (CFT) 头 孢 噻 肟 (CTX) 庆 大 霉 素 (GEN) 萘 啶 酸 (NAL) 环 丙 沙 星 (CIR) 四 环 素 (TBT) 利 福 平 (RFA) 复 方 新 诺 明 (SMZ) 检 测 单 位 : 检 测 者 : 填 表 单 位 : 填 表 日 期 : 256

附 表 7 年 细 菌 性 痢 疾 监 测 菌 株 登 记 表 监 测 地 区 : 省 ( 自 治 区 直 辖 市 ) 市 ( 区 县 ) 乡 ( 镇 ) 序 号 菌 种 号 发 病 日 期 采 样 日 期 分 离 日 期 保 存 日 期 暴 发 散 发 来 源 来 源 菌 株 来 源 患 者 其 他 ( 环 境 食 品 等 ) 暴 发 散 发 姓 名 / 年 龄 家 庭 地 址 名 称 来 源 来 源 血 清 学 分 型 保 存 基 质 和 温 度 基 质 温 度 备 注 上 送 单 位 : 上 送 者 : 上 送 时 间 : 接 受 单 位 : 接 受 者 : 接 收 时 间 : 257

附 件 1 痢 疾 暴 发 疫 情 调 查 1 调 查 准 备 通 过 上 报 信 息 电 话 交 流 对 此 次 暴 发 的 基 本 情 况 和 分 布 特 征 做 一 般 性 了 解, 确 定 调 查 组 人 员, 明 确 调 查 任 务 内 容 与 方 法, 准 备 使 用 的 调 查 表 格, 相 应 的 检 验 试 剂 和 仪 器 个 人 防 护 与 消 杀 设 备 赶 赴 现 场 2 核 实 诊 断 到 达 现 场 后 首 先 通 过 访 视 病 人 医 生 和 能 提 供 病 人 患 病 信 息 的 人, 检 查 实 验 室 检 测 结 果, 对 临 床 标 本 或 获 得 的 分 离 菌 株 应 送 平 行 的 或 上 一 级 检 验 实 验 室 重 复 检 测, 以 进 行 诊 断 的 核 实 3 调 查 暴 发 的 基 本 情 况 (1) 暴 发 开 始 的 时 间, 首 发 病 例 起 始 及 发 展 过 程 (2) 波 及 范 围, 病 例 数 及 三 间 分 布 (3) 发 病 地 近 期 人 群 的 生 活 和 活 动 等 情 况 ( 饮 食 水 源, 集 会 外 出 交 往 活 动 等 ), 有 无 与 本 次 暴 发 发 生 的 因 素 4 确 定 暴 发, 形 成 发 病 原 因 假 设 经 初 步 调 查 分 析 明 确 诊 断, 掌 握 病 例 的 数 量 和 分 布 及 可 能 的 原 因 判 定 是 否 为 暴 发 及 严 重 程 度, 形 成 暴 发 原 因 假 设 5 确 定 暴 发 病 例 (1) 确 定 病 例 与 密 切 接 触 者 定 义 : 根 据 已 知 暴 发 病 例 的 主 要 症 状 有 无 接 触 史 体 征 和 实 验 室 检 测, 结 合 本 次 暴 发 的 时 间 地 点, 参 考 痢 疾 的 诊 断 标 准 确 定 疑 似 病 例 诊 断 病 例 密 切 接 触 者 的 定 义 (2) 对 发 现 的 病 例 进 行 甄 别, 确 定 是 否 为 痢 疾 病 例, 是 否 为 此 次 暴 发 的 病 例 6 初 步 分 析 (1) 流 行 特 征 分 析 三 间 分 布 分 析 (2) 传 播 方 式 分 析 找 出 共 同 的 暴 露 因 素 及 其 他 传 播 方 式 (3) 暴 发 原 因 分 析 围 绕 病 人 感 染 时 间 前 后, 追 查 并 对 比 感 染 和 未 感 染 人 群 的 生 活 生 产 及 活 动 情 况, 找 出 与 感 染 有 关 的 因 素, 推 断 出 主 要 的 传 播 因 素 及 传 染 源 7 采 取 防 治 措 施 针 对 控 制 传 染 源 与 切 断 传 播 途 径, 采 取 综 合 性 防 治 措 施, 做 好 三 管 一 灭 ( 管 水 管 粪 258

管 饮 食 消 灭 苍 蝇 ), 对 疫 点 进 行 消 毒, 对 健 康 人 群 开 展 针 对 性 的 健 康 教 育 8 补 充 调 查 随 调 查 的 深 入 假 设 的 提 出 和 验 证 的 需 求 以 及 控 制 和 预 防 工 作 的 展 开, 根 据 需 要 及 时 开 展 补 充 调 查, 包 括 流 行 病 学 调 查 和 实 验 室 检 测 确 定 暴 发 的 来 源 传 播 因 素, 以 及 采 取 措 施 后 的 发 病 特 点, 验 证 有 关 暴 发 原 因 假 设 9 调 查 报 告 报 告 内 容 包 括 : 疫 情 概 况 首 发 病 例 或 指 示 病 例 的 描 述 流 行 基 本 特 征 临 床 特 征 传 播 因 素 传 播 链 和 流 行 趋 势 分 析 菌 株 的 实 验 室 检 测 项 目 和 结 果 感 染 谱 的 分 析 控 制 措 施 和 效 果 评 估 等 259

附 件 2 实 验 室 检 测 技 术 指 南 一 标 本 采 集 运 送 包 装 保 存 接 收 可 采 用 便 盒 留 便 肛 拭 或 采 便 管 采 便 便 盒 留 便 : 留 取 粪 便 时 应 采 集 新 鲜 粪 便 的 脓 血 部 分 粘 液 部 分 水 样 便 或 稀 便 便 量 1~5g 集 体 腹 泻 或 食 源 性 暴 发 患 者 粪 便 采 集 的 数 额, 应 根 据 患 者 人 数 的 多 少, 决 定 采 取 标 本 的 数 量 当 怀 疑 患 者 为 菌 血 症 时, 应 以 无 菌 操 作, 从 静 脉 血 管 采 取 10~15 ml 血 液, 放 入 加 有 EDTA 抗 凝 剂 瓶 中 送 检 所 采 取 的 粪 便 标 本 应 尽 快 送 检, 不 得 超 过 2 h 送 到 化 验 室, 否 则 标 本 应 放 入 Cary-Blair 运 送 培 养 基 中, 运 送 时 间 超 过 2h 者, 应 在 冰 浴 条 件 下 送 检 送 交 分 型 分 析 菌 株 的 接 收 要 求 :1) 经 过 分 纯 的 没 有 污 染 的 菌 株 ; 2) 分 离 菌 株 应 该 用 甘 油 半 固 体 保 存 ;3) 与 分 离 菌 株 相 对 应 的 患 者 的 临 床 症 状 和 流 行 病 学 资 料 ;4) 经 血 清 和 生 化 证 实 为 志 贺 菌 二 粪 便 标 本 志 贺 菌 的 分 离 方 法 1 分 离 方 法 (1) 用 接 种 环 多 点 沾 取 标 本 病 变 部 分, 直 接 划 线 分 离 于 SS EMB( 或 HE 麦 康 凯 ) 琼 脂 平 板 37 培 养 24 h (2) 血 液 培 养 将 采 取 的 抗 凝 血 液 标 本, 放 入 葡 萄 糖 肉 汤,37 培 养, 逐 日 观 察 结 果 一 般 1~3 d 内 阳 性 较 高 为 提 高 阳 性 检 出 率, 可 以 在 标 本 中 加 入 0.5 ml OP 乳 化 剂 ( 聚 乙 二 醇 辛 基 苯 基 醚 ), 使 血 球 溶 解, 以 提 高 阳 性 检 出 率 (3) 挑 选 可 疑 菌 落 从 37 培 养 16~24 h 的 分 离 培 养 基 上, 观 察 挑 选 可 疑 菌 落, 其 形 态 为 无 色, 半 透 明, 圆 形, 湿 润 光 滑 突 起, 大 小 为 1~2mm; 挑 选 可 疑 菌 落, 接 种 TSI 和 葡 萄 糖 半 固 体 或 综 合 培 养 基, 先 划 线 后 穿 刺, 做 好 标 记, 放 37 培 养 16 h 以 上, 观 察 结 果 2 初 步 生 化 反 应 志 贺 菌 属 在 TSI 上 的 生 化 反 应 为 : 斜 面 红 色, 底 层 产 酸 黄 色, 不 产 气 在 葡 萄 糖 半 固 体 管 内 产 酸 为 黄 色, 不 产 气, 无 动 力 在 综 合 培 养 基 上 为 : 斜 面 红 色 中 立 段 产 酸 黄 色, 底 层 绿 色, 无 动 力, 福 氏 志 贺 菌 6 型 在 上 述 三 种 培 养 基 中, 有 时 可 产 生 少 量 气 体 3 生 化 学 鉴 定 260

(1) 凡 属 志 贺 氏 菌 属 的 培 养 物, 应 符 合 表 Al 所 列 的 生 化 特 性 (2) 志 贺 菌 属 分 为 四 个 生 化 群 血 清 学 分 型 与 生 化 反 应 不 一 致 者, 均 为 非 志 贺 菌 (3) 生 化 反 应 或 血 清 学 反 应 可 疑 的 培 养 物, 均 应 做 革 兰 氏 染 色 镜 检, 并 加 做 V.P 苯 丙 氨 酸 西 蒙 氏 柠 檬 酸 盐 赖 氨 酸 和 葡 萄 糖 n 铵 试 验, 与 有 关 的 细 菌 相 鉴 别 表 Al 志 贺 氏 菌 属 系 统 生 化 反 应 项 目 A B C D 项 目 A B C D 靛 基 质 d d (-) - 水 扬 素 - - - - 甲 基 红 + + + + D- 侧 金 盏 花 - - - - 醇 V.P. - - - + 肌 醇 - - - - Simmon s 柠 檬 酸 盐 - - - - D- 山 梨 醇 d d d - 硫 化 氢 - - - - L- 阿 拉 伯 糖 d d + + 尿 素 - - - - 棉 子 糖 - d - - 苯 丙 氨 酸 - - - - L- 鼠 李 糖 d - - (+) 赖 氨 酸 - - - - 麦 牙 糖 (-) d (-) (+) 精 氨 酸 - - (-) - D- 木 胶 糖 - - (-) - 鸟 氨 酸 - - - - 覃 糖 (+) d (+) + 动 力 - - - - 纤 维 二 糖 - - - - 明 胶 - - - - α- 甲 基 -D- 葡 - - - - 萄 糖 苷 KCN - - - - 七 叶 灵 - - - - 丙 二 酸 盐 - - - - 密 二 糖 - d (-) (-) D- 葡 萄 糖 产 酸 + + + + D- 阿 拉 伯 糖 - - - - D- 葡 萄 糖 产 气 - - - - ONPG d - - + 乳 糖 - - - (d) D- 苷 露 糖 + + + + 蔗 糖 - - - - D- 苷 露 醇 - + + + 卫 矛 醇 - - - - 注 : 十, 90%~100% 阳 性 ;(+),76%~89% 阳 性 ; d, 26/~75% 阴 性 ; (d), 迟 缓 阳 性,72 h 以 上 -,0~10% 阴 性 ; (-),11%~25% 阴 性 ; 261

附 件 3 药 敏 试 验 药 敏 试 验 根 据 美 国 临 床 标 准 委 员 会 (NCCLS) 推 荐 的 K-B 琼 脂 法 进 行, 药 敏 纸 片 选 择 中 国 生 物 制 品 鉴 定 所 药 敏 纸 片, 试 验 所 选 择 药 物 必 须 包 括 下 列 抗 生 素 : 氨 苄 西 林 (AMP), 阿 莫 西 林 / 克 拉 维 酸 (AMC), 头 孢 噻 吩 (CFT), 头 孢 噻 肟 (CTX), 庆 大 霉 素 (GEN), 萘 啶 酸 (NAL), 诺 氟 沙 星 (NOR), 四 环 素 (TBT), 利 福 平 (RFA), 复 方 新 喏 明 (SMZ) 1 操 作 方 法 : (1) 将 待 检 菌 接 种 于 普 通 营 养 琼 脂 平 板,37 培 养 16~18 小 时, 然 后 挑 取 普 通 营 养 琼 脂 平 板 上 的 纯 培 养 菌 落, 悬 于 3ml 生 理 盐 水 中, 混 匀 后 与 菌 液 比 浊 管 比 浊 以 有 黑 字 的 白 纸 为 背 景, 调 整 浊 度 与 比 浊 管 (0.5 麦 氏 单 位 ) 相 同 (2) 用 无 菌 棉 拭 子 蘸 取 菌 液, 在 管 壁 上 挤 压 去 掉 多 余 菌 液 用 棉 拭 子 涂 布 整 个 M-H 培 养 基 表 面, 反 复 几 次, 每 次 将 平 板 旋 转 60 度, 最 后 沿 周 边 绕 两 圈, 保 证 涂 均 匀 (3) 待 平 板 上 的 水 分 被 琼 脂 完 全 吸 收 后 再 贴 纸 片 用 无 菌 镊 子 取 药 敏 纸 片 贴 在 平 板 表 面, 纸 片 一 贴 就 不 可 再 拿 起 每 个 平 板 贴 5 张 纸 片, 每 张 纸 片 间 距 不 少 于 24mm, 纸 片 中 心 距 平 皿 边 缘 不 少 于 15mm 在 菌 接 种 后 15 分 钟 内 贴 完 纸 片 (4) 将 平 板 反 转, 孵 育 18~24 小 时 后 取 出, 用 游 标 卡 尺 测 量 抑 菌 圈 直 径, 从 平 板 背 面 测 量 最 接 近 的 整 数 毫 米 数 并 记 录 ( 附 表 5) 抑 菌 环 的 边 缘 以 肉 眼 见 不 到 细 菌 明 显 生 长 为 限 有 的 菌 株 可 出 现 蔓 延 生 长, 进 入 抑 菌 环, 磺 胺 药 在 抑 菌 环 内 出 现 轻 微 生 长, 这 些 都 不 作 为 抑 菌 环 的 边 缘 结 果 判 断 依 据 鉴 定 所 药 敏 纸 片 判 定 标 准 (5) 每 次 药 敏 试 验 必 须 用 ATCC 25922 大 肠 杆 菌 做 质 控 只 有 当 质 控 菌 株 的 抑 菌 圈 直 径 在 允 许 范 围 内 测 试 菌 株 的 结 果 才 可 以 报 告 0.5 麦 氏 比 浊 管 配 制 方 法 : 0.048M BaCL 2 (1.17% W/V BaCL 2. 2H 2 O) 0.5ml 0.36N H 2 SO4 (1%, V/V) 99.5ml 将 二 液 混 合, 置 螺 口 试 管 中, 放 室 温 暗 处 保 存 用 前 混 匀 有 效 期 为 6 个 月 2 注 意 事 项 : (1) 制 备 MH 琼 脂 平 板 应 用 直 径 90mm 平 皿, 在 水 平 的 实 验 台 上 倾 注 琼 脂 厚 为 4±0.5mm( 约 25-30ml 培 养 基 ), 琼 脂 凝 固 后 塑 料 包 装 放 4 保 存, 在 5 日 262

内 用 完, 使 用 前 应 在 37 培 养 箱 烤 干 平 皿 表 面 水 滴 倾 注 平 皿 前 应 用 ph 计 测 ph 值 是 否 正 确 (ph 应 为 7.3) ph 过 低 会 导 致 氨 基 糖 苷 类, 大 环 内 酯 类 失 效, 而 青 霉 素 活 力 增 强 (2) 药 敏 纸 片 长 期 储 存 应 于 -20, 日 常 使 用 的 小 量 纸 片 可 放 在 4, 但 应 至 于 含 干 燥 剂 的 密 封 容 器 内 使 用 时 从 低 温 取 出 后, 放 置 平 衡 到 室 温 后 才 可 打 开, 用 完 后 应 立 即 将 纸 片 放 回 冰 箱 内 的 密 封 容 器 内 过 期 纸 片 不 能 使 用, 应 弃 去 (3) 不 稳 定 药 物 如 亚 胺 培 南, 头 孢 克 洛, 克 拉 维 酸 复 合 药 等, 应 冷 冻 保 存, 最 好 在 -40 以 下 (4) 保 证 质 控 菌 株 不 变 异 的 简 便 方 法, 将 新 得 到 的 冻 干 菌 株 接 种 含 血 的 M-H 平 板 复 活 然 后 每 株 细 菌 接 种 10 支 高 层 琼 脂 管, 放 置 冰 箱 保 存 每 月 取 出 一 支, 传 出 细 菌 供 常 规 用 待 用 剩 至 最 后 一 支, 可 传 种 在 M-H 平 板 上, 再 接 种 一 批 高 层 琼 脂 管 备 用 如 此 可 保 证 原 始 菌 种 永 不 接 触 抗 菌 素 3 质 量 控 制 : (1) 质 量 控 制 方 法 是 用 与 常 规 实 验 相 同 的 操 作 方 法, 测 定 质 控 菌 株 的 抑 菌 环 应 使 用 新 鲜 传 代 的 菌 种 接 种 菌 液 的 涂 布 方 法 等 均 同 常 规 操 作, 测 定 的 抗 菌 素 种 类 也 应 与 常 规 测 定 的 种 类 相 同 按 表 2 所 列 的 数 据 测 定 相 应 菌 株 的 抑 菌 环, 并 记 录 结 果 (2) 质 控 试 验 频 率 用 新 一 批 MH 琼 脂 或 新 抗 生 素 纸 片 时 做 质 控 每 日 试 验 时, 同 时 做 质 控 监 测 系 统 整 体 质 量 在 每 日 合 格 的 基 础 上, 可 改 为 每 周 做 一 个 药 物 / 细 菌 组 合 连 续 30 天 的 抑 菌 圈 直 径 结 果 中, 超 出 准 确 质 控 范 围 的 不 多 于 3 个, 如 符 合 要 求, 每 一 质 控 菌 株 可 以 每 周 进 行 质 控 而 不 必 每 日 进 行 (3) 失 控 一 旦 发 现 失 控, 应 从 培 养 基 纸 片 接 种 菌 液 等 方 面 去 查 找 原 因, 并 及 时 纠 正 无 明 显 错 误 而 出 现 失 控 结 果 时 要 恢 复 每 天 质 控, 直 至 找 到 错 误 原 因 并 提 出 解 决 办 法 为 止 ; 用 合 适 质 控 菌 株 连 续 测 试 5 天, 所 有 5 个 抑 菌 圈 直 径 都 在 允 许 范 围 内 ; 恢 复 每 周 作 之 前, 应 有 30 个 试 验 日 有 满 意 结 果 263

附 件 4 菌 种 管 理 1. 菌 株 保 存 与 移 交 每 分 离 出 一 株 细 菌, 即 建 立 菌 株 保 存 档 案 ( 附 表 4), 详 细 记 录 菌 株 的 来 源 分 离 的 时 间 和 地 点 及 取 材 病 人 的 基 本 信 息 和 流 行 病 学 基 本 特 征 ; 同 时 准 备 2 支 半 固 体, 每 管 加 3.5ml 半 固 体, 用 接 种 针 挑 取 菌 落 接 种 半 固 体,37 培 养 18 小 时 管 内 加 入 石 蜡 使 隔 绝 空 气, 室 温 或 4 避 光 保 存 一 管 保 存 在 当 地 实 验 室, 另 一 管 附 菌 株 档 案 送 到 省 疾 病 预 防 控 制 中 心, 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 经 过 复 核 鉴 定 后 按 国 家 疾 病 预 防 控 制 中 心 的 工 作 要 求 上 送 菌 株, 每 次 移 交 均 填 写 交 接 记 录 2. 菌 种 复 核 监 测 点 所 有 的 菌 种 逐 级 送 至 辖 区 疾 病 预 防 控 制 中 心 复 核 3. 室 内 质 量 控 制 实 验 室 应 定 期 进 行 室 内 质 控 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 实 验 室 督 导 员 每 年 3 月 份 发 放 一 组 考 核 菌 株, 检 查 检 验 人 员 的 水 平 考 核 菌 株 可 随 机 从 下 列 标 准 菌 种 中 挑 选 : 痢 疾 菌 其 它 沙 门 菌 和 肠 杆 菌 科 其 它 菌 属 考 核 结 果 记 录 保 存 如 果 出 现 问 题, 课 题 督 导 员 组 织 检 验 人 员 有 针 对 性 地 进 行 讨 论 分 析, 查 找 其 错 误 结 果 的 原 因, 并 提 出 改 进 意 见 264