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饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 专 家 论 坛 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 近 些 年 来 袁 我 国 水 产 养 殖 业 一 直 保 持 持 续 尧 稳 定 的 发 展 态 势 遥 在 水 产 养 殖 业 快 速 发 展 的 同 时 袁 水 产 动 物 因 各 种 病 害 造 成 的 损 失 也 处 于 上 升 的 趋 势 遥 2006 年 对 全 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 检 测 的 结 果 显 示 袁 在 人 工 养 殖 的 80 种 左 右 的 水 产 养 殖 动 物 中 约 发 生 了 180 种 疾 病 袁 全 国 30% 以 上 的 水 产 养 殖 面 积 受 到 各 种 病 害 的 严 重 侵 扰 袁 由 病 害 造 成 的 直 接 经 济 损 失 达 140 亿 元 以 上 遥 本 文 回 顾 了 我 国 水 产 动 物 疾 病 学 研 究 的 主 要 成 就 袁 分 析 当 前 水 产 养 殖 业 中 病 害 防 治 方 面 存 在 的 主 要 问 题 袁 为 我 国 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 治 研 究 提 供 参 考 遥 1 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 1.1 关 于 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 我 国 对 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 虽 然 起 步 较 晚, 但 取 得 的 成 绩 却 是 非 常 显 著 的 遥 首 先 是 开 展 了 对 鱼 类 病 毒 病, 主 要 是 草 鱼 出 血 病 的 研 究 遥 从 20 世 纪 70 年 代 以 来, 先 后 在 草 鱼 出 血 病 的 病 原 学 尧 流 行 病 学 尧 病 理 学 尧 检 测 方 法 尧 病 毒 的 基 因 组 结 构 尧 免 疫 学 尧 细 胞 培 养 灭 活 疫 苗 尧 防 治 方 法 等 研 究 与 应 用 方 面 取 得 了 一 系 列 突 破 性 的 成 果 遥 首 先 是 系 统 地 研 究 草 鱼 出 血 病 病 毒 的 组 织 培 养 尧 分 类 鉴 定 袁 并 证 实 了 草 鱼 出 血 病 是 由 病 毒 引 起 的, 最 终 不 仅 分 离 尧 鉴 定 了 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 (Reovirus), 建 立 了 多 株 草 鱼 的 细 胞 系, 同 时 还 成 功 地 研 制 出 了 组 织 浆 灭 活 疫 苗 和 细 胞 灭 活 疫 苗, 研 制 出 病 毒 疫 苗 的 大 规 模 制 备 技 术, 从 技 术 上 解 决 了 草 鱼 出 血 病 的 防 治 问 题 遥 其 次, 有 关 单 位 对 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 基 因 组 和 多 肽 结 构 尧 病 毒 RNA 的 转 录 酶 活 性 尧 病 毒 糖 蛋 白 结 构 多 肽 的 抗 原 型 尧 病 毒 多 肽 及 基 因 组 的 体 外 翻 译 和 病 毒 基 因 组 的 体 内 转 录 尧 疾 病 与 环 境 的 关 系 等 也 进 行 了 研 究 遥 早 在 20 世 纪 60 年 代 后 期 袁 珠 江 水 产 科 学 研 究 所 将 研 制 灭 活 组 织 浆 疫 苗 注 射 尧 接 种 于 草 鱼 获 得 成 功 以 来 袁 相 关 单 位 还 开 展 了 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 病 原 体 免 疫 学 特 性 的 研 究 袁 研 制 出 了 灭 活 疫 苗 尧 弱 毒 疫 苗 尧 亚 单 位 苗 尧 基 因 工 程 疫 苗 尧 DNA 疫 苗 等 多 种 类 型 的 疫 苗 袁 并 进 行 了 生 产 性 防 病 试 验 袁 获 得 了 一 定 的 成 功 遥 除 研 制 开 发 疫 苗 外 袁 还 对 鱼 用 疫 苗 的 免 疫 接 种 途 径 尧 免 疫 刺 激 剂 尧 营 养 与 免 疫 的 关 系 尧 抗 病 毒 干 扰 素 的 诱 生 和 检 陈 昌 福, 华 中 农 业 大 学 水 产 学 院, 教 授,430070, 武 汉 收 稿 日 期 :20070402 陈 昌 福 2 测 等 方 面 开 展 了 研 究 遥 目 前 已 能 够 进 行 草 鱼 出 血 病 病 毒 灭 活 细 胞 疫 苗 和 减 毒 细 胞 疫 苗 的 工 厂 化 生 产 袁 免 疫 接 种 草 鱼 后 其 成 活 率 可 以 达 到 85% 以 上 袁 免 疫 能 力 保 持 13 个 月 以 上 袁 已 经 产 生 了 一 定 的 经 济 效 益 遥 此 外, 对 鲤 痘 疮 病 尧 传 染 性 胰 脏 坏 死 症 尧 传 染 性 造 血 器 官 坏 死 症 尧 淋 巴 囊 肿 病 尧 鳜 虹 彩 病 毒 病 尧 月 鳢 病 毒 病 尧 真 鲷 病 毒 病 等 也 进 行 了 研 究 遥 对 两 栖 类 和 爬 行 类 中 的 牛 蛙 病 毒 病 尧 乌 龟 病 毒 病 尧 中 华 鳖 病 毒 病 等 也 有 报 道 遥 我 国 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 主 要 集 中 在 对 疾 病 的 描 述 尧 病 原 的 分 离 和 初 步 鉴 定 尧 超 薄 切 片 电 镜 观 察 等 方 面 遥 对 于 甲 壳 类 病 毒 病 的 研 究 是 以 对 虾 疾 病 为 主 进 行 的 袁 也 是 水 产 无 脊 椎 动 物 的 病 害 研 究 中 进 展 最 快 的 遥 早 在 20 世 纪 80 年 代 中 期 研 究 者 就 发 现 了 对 虾 肝 胰 腺 细 小 病 毒 袁 直 到 1993 年 袁 对 虾 暴 发 流 行 性 疾 病 促 使 对 虾 病 毒 学 成 为 了 一 个 引 人 注 目 的 研 究 领 域 遥 目 前 在 我 国 已 报 道 的 对 虾 病 毒 约 5~6 种 袁 在 对 虾 皮 下 及 造 血 组 织 坏 死 杆 状 病 毒 渊 或 称 白 斑 综 合 症 病 毒 袁 WSSV 冤 及 肝 胰 腺 细 小 病 毒 渊 HPV 冤 的 研 究 方 面 处 于 国 际 先 进 水 平 遥 几 种 病 毒 的 基 因 组 得 到 了 部 分 克 隆 和 测 序 袁 有 力 地 促 进 了 疾 病 诊 断 和 病 毒 检 测 技 术 的 发 展 遥 与 国 际 上 甲 壳 类 病 毒 研 究 的 特 点 类 似 袁 我 国 对 虾 病 毒 的 研 究 也 主 要 集 中 在 组 织 病 理 学 尧 分 离 纯 化 尧 形 态 学 尧 核 酸 和 多 肽 特 性 尧 病 毒 的 流 行 病 学 尧 感 染 特 性 及 病 症 尧 环 境 因 子 对 发 病 的 影 响 等 方 面 袁 特 色 研 究 主 要 在 对 虾 病 毒 的 传 播 途 径 及 病 毒 生 态 学 方 面 袁 WSSV 的 基 因 组 测 序 的 研 究 进 展 也 较 为 显 著 袁 其 诊 断 和 检 测 技 术 与 国 际 发 展 水 平 同 步 遥 在 蟹 类 病 毒 研 究 方 面 袁 中 华 绒 螯 蟹 颤 抖 病 病 毒 渊 现 在 有 人 认 为 病 原 是 螺 原 体 冤 的 研 究 初 见 成 效 遥 与 鱼 类 或 昆 虫 类 的 病 毒 学 研 究 比 较 袁 由 于 缺 乏 甲 壳 类 传 代 细 胞 株 和 标 准 实 验 动 物 袁 其 病 毒 学 的 研 究 进 展 受 到 很 大 影 响 袁 研 究 层 次 和 深 度 也 显 得 相 对 较 低 遥 在 贝 类 病 毒 病 方 面 已 经 发 现 了 两 种 病 毒 院 三 角 帆 蚌 瘟 病 病 毒 和 皱 纹 盘 鲍 病 病 毒 袁 但 还 需 更 进 一 步 的 研 究 遥 免 疫 学 检 测 技 术 已 初 步 实 现 了 商 品 化 袁 已 经 对 草 鱼 出 血 病 病 毒 尧 对 虾 白 斑 综 合 症 病 毒 尧 肝 胰 腺 细 小 病 毒 等 进 行 了 单 克 隆 抗 体 研 制 袁 并 完 善 了 相 应 的 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 (ELISA) 和 乳 胶 凝 集 试 验 等 快 速 检 测 技 术 遥 对 虾 病 毒 WSSV 的 核 酸 探 针 检 测 技 术 及 PCR 检 测 技 术 已 经 有 了 商 品 化 的 检 测 试 剂 盒 遥

专 家 论 坛 陈 昌 福 : 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 1.2 关 于 水 产 动 物 细 菌 病 的 研 究 对 水 产 动 物 大 多 数 细 菌 性 疾 病 都 有 了 不 同 程 度 的 研 究 袁 其 中 对 主 要 淡 水 养 殖 鱼 类 的 细 菌 性 败 血 症 的 研 究 最 为 系 统 和 深 入 袁 已 经 在 病 原 尧 致 病 机 理 尧 流 行 规 律 尧 治 疗 药 物 尧 免 疫 尧 环 境 与 生 态 防 治 等 方 面 取 得 了 一 系 列 的 研 究 成 果 袁 发 现 了 嗜 水 气 单 胞 菌 尧 温 和 气 单 胞 菌 尧 产 碱 假 单 胞 菌 尧 鲁 克 氏 耶 尔 森 氏 菌 尧 河 弧 菌 生 物 变 种 III 尧 副 溶 血 弧 菌 尧 创 伤 弧 菌 等 多 种 革 兰 氏 阴 性 细 菌 病 原 遥 通 过 对 嗜 水 气 单 胞 菌 分 子 毒 素 的 结 构 和 致 病 机 理 袁 以 及 细 菌 性 疾 病 病 原 的 快 速 检 测 方 法 和 防 治 方 法 研 究 袁 成 功 地 研 制 出 了 嗜 水 气 单 胞 菌 的 灭 活 疫 苗 袁 建 立 了 鱼 类 出 血 性 败 血 症 细 菌 疫 苗 的 生 产 工 艺 流 程 袁 并 进 行 了 大 规 模 的 生 产 和 推 广 应 用 遥 建 立 了 疫 苗 防 治 技 术 及 综 合 预 防 措 施 袁 使 上 述 细 菌 性 疾 病 基 本 上 得 到 了 控 制 袁 也 对 鱼 类 细 菌 的 个 别 质 粒 的 提 取 尧 分 子 结 构 尧 抗 性 机 理 等 进 行 了 较 为 深 入 的 研 究 遥 在 细 菌 耐 药 性 方 面 从 鱼 类 病 原 菌 各 种 耐 药 性 的 发 生 尧 发 展 到 其 机 理 的 研 究 均 已 逐 步 深 入 袁 分 离 并 深 入 分 析 了 耐 药 性 的 遗 传 因 子 渊 抗 性 质 粒 的 基 因 结 构 尧 抗 性 谱 等 冤 遥 此 外 袁 细 菌 的 鉴 定 除 快 速 鉴 定 系 统 外 袁 还 在 16S rrna 尧 质 粒 等 方 面 开 展 了 一 系 列 分 子 生 物 学 鉴 定 技 术 的 研 究 遥 目 前 袁 利 用 现 代 生 物 学 技 术 检 测 细 菌 性 病 害 的 研 究 发 展 很 迅 速 袁 主 要 有 荧 光 抗 体 技 术 尧 免 疫 酶 技 术 尧 单 克 隆 抗 体 技 术 尧 核 酸 杂 交 技 术 尧 聚 合 酶 链 反 应 渊 PCR 冤 技 术 等 遥 由 于 上 述 检 测 技 术 具 有 灵 敏 度 高 尧 特 异 性 强 尧 实 用 性 好 等 特 点 袁 现 在 已 成 为 多 种 水 产 动 物 细 菌 性 病 害 的 常 规 诊 断 方 法 遥 利 用 鱼 类 和 虾 的 主 要 细 菌 性 病 原 的 相 应 免 疫 学 或 分 子 生 物 学 病 原 的 检 测 技 术 袁 已 经 部 分 地 开 发 了 商 品 化 的 试 剂 盒 遥 1.3 关 于 水 产 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 20 世 纪 50 年 代 开 始 袁 我 国 水 产 动 物 疾 病 学 的 研 究 内 容 主 要 是 针 对 各 类 寄 生 虫 病 展 开 的 遥 对 于 水 产 养 殖 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 袁 主 要 集 中 在 病 原 的 形 态 描 述 尧 分 类 地 位 确 定 尧 生 活 史 尧 流 行 病 学 以 及 防 治 方 法 等 方 面 遥 经 过 多 年 努 力 袁 我 国 水 产 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 水 平 已 处 于 世 界 前 列 袁 部 分 在 世 界 范 围 内 有 影 响 力 的 论 文 和 专 著 相 继 发 表 和 出 版 袁 为 我 国 水 产 动 物 寄 生 虫 病 学 的 研 究 处 于 世 界 领 先 地 位 奠 定 了 基 础 遥 利 用 现 代 分 子 生 物 学 技 术 研 究 水 产 动 物 寄 生 虫 病 学 也 正 在 逐 步 展 开 遥 对 小 瓜 虫 的 免 疫 研 究 尧 鱼 类 单 吸 虫 等 抗 原 及 基 因 组 的 分 子 生 物 学 研 究 等 均 比 较 深 入 袁 确 定 了 抗 原 蛋 白 及 其 定 位 袁 构 建 了 部 分 基 因 文 库 袁 研 究 了 PCR 和 核 酸 探 针 检 测 方 法 袁 为 检 测 尧 免 疫 尧 防 治 提 供 了 一 定 的 理 论 基 础 和 实 际 应 用 技 术 遥 3 2 存 在 的 问 题 与 不 足 由 于 我 国 水 产 养 殖 业 的 养 殖 方 式 从 粗 放 式 向 集 约 化 方 式 转 变, 导 致 水 产 养 殖 业 者 和 相 关 科 研 人 员 已 经 掌 握 的 水 产 养 殖 和 防 治 养 殖 动 物 疾 病 的 技 术 总 是 不 能 满 足 不 断 转 换 的 水 产 养 殖 方 式 的 需 要, 科 学 研 究 滞 后 于 水 产 养 殖 生 产 的 发 展 遥 同 时 袁 水 产 养 殖 动 物 预 防 知 识 的 科 学 普 及 工 作 不 到 位, 从 事 水 产 养 殖 的 人 员 缺 乏 必 要 的 相 关 知 识, 因 此 在 实 际 水 产 养 殖 生 产 中 存 在 很 多 问 题 遥 2.1 准 确 诊 断 病 原 菌 和 对 症 治 疗 困 难 国 外 对 鱼 类 病 毒 病 的 研 究 历 史 较 早 袁 也 非 常 深 入 袁 很 多 研 究 内 容 都 达 到 了 分 子 生 物 学 水 平 袁 如 在 病 原 结 构 的 分 子 生 物 学 尧 分 子 流 行 病 学 尧 分 子 毒 理 学 尧 分 子 免 疫 学 及 基 因 工 程 疫 苗 等 的 研 究 中 袁 均 已 经 取 得 了 丰 硕 的 成 果 遥 在 病 毒 分 子 生 物 学 方 面, 病 毒 基 因 组 的 研 究 已 深 入 到 了 各 基 因 片 段 编 码 的 蛋 白 鉴 定 尧 体 内 转 录 尧 糖 蛋 白 肽 以 及 不 同 病 毒 分 离 株 的 基 因 组 和 蛋 白 多 肽 的 差 异 袁 病 毒 各 基 因 组 片 段 的 克 隆 尧 测 序 和 表 达 袁 进 而 进 行 基 因 工 程 疫 苗 的 研 究 等 遥 在 疾 病 流 行 病 学 方 面 袁 通 过 对 全 国 范 围 内 鱼 类 种 群 中 病 毒 感 染 的 检 测 来 预 测 流 行 规 律 袁 从 而 制 定 当 年 的 控 制 对 策 曰 运 用 频 率 分 布 来 描 述 鱼 类 寄 生 虫 在 寄 主 种 群 中 的 分 布 袁 并 从 其 动 态 中 了 解 疾 病 发 生 的 可 能 遥 而 我 国 在 这 些 方 面 的 研 究 刚 刚 起 步 袁 与 国 外 相 比 还 存 在 明 显 的 差 距, 对 病 原 的 生 物 学 特 性 了 解 不 够 深 入 袁 且 由 于 水 产 动 物 疾 病 的 病 原 种 类 多 尧 发 病 规 律 复 杂 尧 流 行 趋 势 多 变, 对 疾 病 的 诊 断 不 够 及 时 袁 往 往 贻 误 了 有 效 防 治 疾 病 的 时 机 遥 2.2 高 效 的 适 用 于 水 产 动 物 的 兽 药 少 国 外 对 水 产 用 兽 药 的 毒 理 学 尧 药 理 学 的 研 究 均 比 较 细 致 深 入 袁 其 兽 药 的 毒 理 学 涉 及 各 个 研 究 范 畴 袁 药 理 学 的 深 入 研 究 为 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 科 学 使 用 奠 定 了 基 础 遥 而 我 国 在 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 研 究 方 面 存 在 许 多 问 题 院 水 产 动 物 专 用 兽 药 药 理 学 等 基 础 理 论 滞 后 袁 导 致 其 兽 药 的 使 用 徘 徊 在 一 个 非 常 低 的 水 平 曰 安 全 有 效 的 水 产 动 物 专 用 兽 药 及 其 剂 型 贫 乏 袁 制 剂 的 工 艺 水 平 很 低 曰 缺 少 水 产 动 物 专 用 兽 药 评 价 的 方 法 和 试 验 平 台 曰 安 全 尧 科 学 用 药 的 知 识 普 及 有 限 袁 在 水 产 养 殖 生 产 中 滥 用 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 现 象 仍 然 很 严 重 遥 目 前 袁 我 国 的 水 产 养 殖 动 物 专 用 药 物 的 种 类 比 较 少 袁 针 对 性 差 遥 对 水 产 养 殖 动 物 疾 病 的 防 治 主 要 依 靠 使 用 化 学 药 物 袁 如 人 药 尧 农 药 尧 兽 药 等 袁 用 药 效 果 差 遥 滥 用 药 物 的 事 件 在 水 产 养 殖 生 产 中 时 有 发 生 袁 致 使 养 殖 水 体 中 微 生 态 环 境 破 坏 严 重 袁 耐 药 菌 株 大 量 出 现 袁 不 仅 直 接 造 成 了 暴 发 性 流 行 病 的 不 断 出 现 袁 同 时 也 造 成 了 水 产 养 殖 动 物 的 食 品 安 全 问 题 遥 此 外 袁 供 水 产 养 殖

陈 昌 福 : 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 专 家 论 坛 动 物 使 用 的 疫 苗 非 常 少 遥 2.3 养 殖 技 术 和 养 殖 模 式 不 相 适 应 目 前, 水 产 养 殖 技 术 与 集 约 化 尧 多 种 类 混 合 高 密 度 养 殖 模 式 不 相 适 应 袁 主 要 表 现 在 以 下 几 个 方 面 院 淤 水 产 养 殖 布 局 不 合 理 袁 部 分 地 区 出 现 过 度 尧 无 序 的 开 发 袁 造 成 资 源 浪 费 曰 于 不 断 增 加 养 殖 密 度 袁 使 养 殖 密 度 超 过 水 体 运 载 能 力 袁 破 坏 了 水 质 袁 使 水 体 富 营 养 化 曰 盂 迄 今 为 止 几 乎 所 有 的 水 产 养 殖 动 物 还 只 能 属 于 野 生 种 群 袁 而 生 长 速 度 快 尧 抗 病 能 力 强 的 优 良 抗 病 品 种 匮 乏 曰 榆 缺 乏 专 用 水 产 动 物 饲 料 尧 且 种 类 不 成 系 列 袁 饲 料 系 数 普 遍 偏 高 等 遥 2.4 关 于 水 产 养 殖 动 物 疾 病 研 究 的 试 验 模 型 数 量 极 少 试 验 模 型 对 于 学 科 和 技 术 的 发 展 极 为 重 要, 医 学 和 陆 生 动 植 物 已 建 立 了 包 括 动 物 试 验 尧 组 织 培 养 和 病 原 保 藏 中 心 等 在 内 的 数 百 种 标 准 试 验 模 型, 有 力 地 促 进 了 医 学 和 陆 生 动 植 物 病 害 研 究 的 发 展, 而 水 生 生 物 标 准 的 试 验 模 型 ( 包 括 组 织 培 养 模 型 尧 试 验 动 物 模 型 和 病 原 库 ) 相 对 来 说 数 量 极 少 遥 国 外 建 立 了 60 余 株 鱼 类 细 胞 系, 有 近 40 种 病 毒 采 用 细 胞 培 养 分 离 成 功, 多 数 水 生 生 物 的 病 原 细 菌 也 有 标 准 培 养 物 得 到 保 存 袁 已 有 近 交 50 代 以 上 的 纯 系 鱼 遥 在 甲 壳 类 方 面 袁 我 国 甲 壳 类 等 没 有 传 代 细 胞 系 或 标 准 试 验 模 式 动 物 的 建 立, 而 国 外 某 些 权 威 实 验 室 对 对 虾 病 毒 病 原 已 有 较 为 全 面 的 保 存 遥 总 之, 我 国 关 于 鱼 类 试 验 模 式 动 物 的 研 究 与 国 外 有 一 定 的 差 距, 研 究 工 作 刚 刚 起 步 遥 2.5 养 殖 管 理 不 够 科 学 尧 制 度 不 健 全 病 害 的 综 合 防 治 对 于 疾 病 控 制 极 为 重 要 遥 北 欧 的 鲑 尧 鳟 鱼 类 的 养 殖 历 史 较 早, 对 水 产 养 殖 动 物 的 疾 病 防 治 工 作 进 行 得 较 为 深 入, 他 们 从 苗 种 免 疫 等 角 度 加 强 鱼 体 的 抗 病 力 袁 从 养 殖 环 境 的 改 良 尧 水 质 调 控 尧 优 质 饵 料 尧 病 原 监 控 等 方 面 开 展 了 综 合 的 健 康 管 理 工 作 遥 泰 国 在 对 虾 的 病 害 方 面 进 行 的 综 合 防 治 也 颇 具 特 色, 形 成 了 一 套 围 绕 提 高 对 虾 健 康 状 况 尧 减 少 病 原 入 侵 机 会 尧 保 证 养 殖 环 境 清 洁 稳 定 等 的 健 康 管 理 技 术, 使 泰 国 的 对 虾 养 殖 未 受 到 病 毒 病 的 干 扰, 产 量 跃 居 世 界 首 位 遥 我 国 的 水 产 养 殖 管 理 不 够 科 学 袁 制 度 还 不 完 善 袁 特 别 是 病 害 预 防 尧 控 制 尧 治 理 方 面 缺 乏 应 急 机 制 与 保 障 措 施 曰 在 物 种 引 进 时 没 有 严 格 的 风 险 管 理 制 度 袁 对 疾 病 携 带 的 危 险 估 计 不 够 袁 控 制 措 施 不 力 遥 此 外 研 究 经 费 不 足 也 是 制 约 水 产 养 殖 业 发 展 的 一 个 方 面 遥 总 之 袁 我 国 整 体 的 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 治 研 究 力 量 还 相 对 薄 弱 袁 研 究 者 的 创 新 思 维 受 到 研 究 条 件 局 限 和 经 费 短 缺 的 约 束 袁 低 水 平 或 重 复 性 的 研 究 还 比 较 多 遥 此 外 袁 开 展 的 研 究 工 作 与 实 际 生 产 上 的 需 要 存 在 比 较 大 的 差 距 袁 致 使 一 些 研 究 成 果 在 水 产 养 殖 生 产 中 4 的 应 用 效 果 不 理 想 袁 与 国 外 相 比 袁 成 果 的 实 用 化 和 商 品 化 工 作 还 很 不 完 善 遥 3 对 近 期 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 控 对 策 的 几 点 建 议 3.1 尽 快 建 立 我 国 水 生 动 物 防 疫 体 系 建 立 水 产 养 殖 动 物 疫 病 的 风 险 评 估 和 预 警 机 制 袁 增 强 水 产 养 殖 动 物 的 疫 病 的 控 制 和 预 警 能 力 袁 为 有 效 控 制 水 产 养 殖 动 物 的 疾 病 构 建 和 整 合 社 会 资 源 平 台 遥 3.2 尽 快 开 展 水 产 养 殖 动 物 病 原 菌 耐 药 性 普 查 评 价 和 利 用 现 有 水 产 动 物 专 用 抗 生 素 类 兽 药 袁 为 开 发 新 一 代 药 物 提 供 依 据 袁 并 尽 快 制 订 安 全 尧 科 学 用 药 的 渔 民 培 训 计 划 袁 保 障 水 产 品 质 量 安 全 和 人 类 的 身 体 健 康 袁 促 进 水 产 养 殖 业 可 持 续 发 展 遥 3.3 加 快 疫 苗 的 研 制 和 产 业 化 进 程 在 鱼 用 疫 苗 方 面 采 取 野 用 好 现 有 的 尧 开 发 未 来 的 冶 思 路 遥 目 前 我 国 已 有 草 鱼 出 血 病 疫 苗 尧 淡 水 鱼 类 嗜 水 气 单 胞 菌 疫 苗 的 生 产 批 文 袁 但 是 袁 在 水 产 养 殖 生 产 中 推 广 使 用 尚 存 在 野 没 有 用 好 尧 没 有 用 足 冶 的 问 题 遥 对 此 袁 政 府 可 以 扶 持 企 业 或 组 织 生 产 袁 弥 补 市 场 的 空 缺 遥 另 外 袁 开 发 目 前 科 研 基 础 较 好 尧 较 成 熟 的 鱼 用 疫 苗 研 究 项 目 袁 对 于 鱼 病 病 原 分 离 尧 纯 化 尧 培 养 及 免 疫 研 究 较 好 的 项 目 袁 应 在 产 品 开 发 尧 设 备 投 入 尧 生 产 资 金 尧 推 广 使 用 上 给 予 支 持 尧 扶 持 遥 3.4 采 取 科 学 尧 缜 密 的 生 物 安 全 措 施 袁 严 格 控 制 外 来 病 原 生 物 入 侵 对 进 境 与 境 内 跨 区 域 的 活 体 动 物 及 其 加 工 品 在 移 动 中 可 能 携 带 的 疾 病 尧 疫 病 实 施 监 管 ; 对 生 物 污 染 尧 危 害 程 度 进 行 评 估 遥 建 立 健 全 危 害 程 度 报 告 与 定 期 发 布 制 度, 有 效 切 断 传 播 途 径, 对 重 大 疫 病 尧 新 发 现 和 突 发 性 的 病 害 实 施 扑 灭 措 施 遥 窑 作 者 简 介 窑 ( 编 辑 : 徐 世 良,fixu@163.com) 陈 昌 福,1975 年 毕 业 于 华 中 农 业 大 学 水 产 学 院,1997 年 获 得 日 本 爱 媛 大 学 博 士 学 位 现 为 华 中 农 业 大 学 教 授 ; 中 国 水 产 学 会 资 深 会 员 ; 中 国 水 产 学 会 鱼 病 研 究 会 委 员 ; 中 国 微 生 态 学 会 养 殖 分 会 理 事 ; 中 国 化 工 学 会 二 氧 化 氯 工 作 组 副 组 长 ; 全 国 化 工 标 准 物 质 委 员 会 二 氧 化 氯 专 业 委 员 会 副 主 任 委 员 ; 中 国 兽 药 典 第 三 四 届 委 员 会 委 员 ; 中 国 兽 药 审 评 委 员 ; 全 国 水 产 标 准 化 技 术 委 员 会 水 生 动 物 防 疫 标 准 化 技 术 工 作 组 成 员 主 持 湖 北 省 重 点 科 技 攻 关 项 目 : 草 鱼 细 菌 性 烂 鳃 病 免 疫 防 治 研 究 并 荣 获 1993 年 度 湖 北 省 科 技 进 步 一 等 奖 ; 主 持 湖 北 省 重 点 科 技 攻 关 项 目 草 鱼 细 菌 性 烂 鳃 和 肠 炎 病 二 联 菌 苗 的 研 究 并 荣 获 1998 年 度 湖 北 省 科 技 进 步 二 等 奖 先 后 主 持 3 项 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 : 脂 多 糖 (LPS) 对 鱼 类 免 疫 细 胞 的 免 疫 学 活 性 研 究 ( 批 准 号 :39470558) 鱼 类 种 内 遗 传 多 态 性 和 免 疫 应 答 关 系 的 研 究 ( 批 准 号 :39870598) 和 鱼 类 免 疫 细 胞 上 脂 多 糖 (LPS) 受 体 的 定 位 与 激 活 机 理 研 究 ( 批 准 号 :30271032) 发 表 专 业 文 章 80 多 篇, 编 撰 专 业 书 籍 4 本 指 导 研 究 生 30 多 名 先 后 讲 授 水 产 动 物 疾 病 学 鱼 类 免 疫 学 和 鱼 类 病 原 生 物 学 等 课 程

饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 的 增 重 试 验 李 耀 忠 李 爱 华 岳 思 君 韩 楠 楠 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 1.1.1 试 验 菌 种 黑 曲 霉 渊 Aspergullus niger 冤 尧 白 地 霉 渊 Geotrichum candidum 冤 尧 米 曲 霉 渊 Aspergillus ochraceus 冤 为 宁 夏 大 学 饲 料 工 程 中 心 保 藏 的 菌 种 遥 1.1.2 试 验 动 物 及 日 粮 组 成 将 40 只 体 重 15.0 耀 16.0 g 健 康 的 ICR 小 公 鼠 分 成 10 组 袁 每 组 4 只 袁 即 对 照 组 和 试 验 1 耀 9 组 袁 组 间 体 重 差 异 不 显 著 渊 P 跃 0.05 冤 袁 编 号 尧 分 笼 饲 养 遥 试 验 所 用 试 验 小 鼠 和 基 础 日 粮 均 由 宁 夏 医 学 院 试 验 动 物 中 心 提 供 袁 试 验 所 用 基 础 日 粮 组 成 见 表 1 遥 表 1 基 础 日 粮 组 成 ( 豫 ) 1.2.1 真 菌 添 加 剂 的 制 备 将 实 验 室 冰 箱 保 藏 的 白 地 霉 尧 黑 曲 霉 尧 米 曲 霉 菌 接 种 于 相 应 的 斜 面 培 养 基 上 活 化 后 分 别 制 成 含 1.0 伊 10 8 尧 3.1 伊 10 8 和 2.3 伊 10 8 个 /ml 孢 子 悬 液 袁 以 6.6% 尧 2.1% 和 2.8% 的 接 种 量 袁 在 28 益 尧 120 r/min 的 摇 床 上 液 体 培 养 72 h 袁 再 以 5% 的 接 种 量 接 种 到 由 小 鼠 基 础 日 粮 组 成 的 固 体 培 养 基 中 袁 28 益 发 酵 72 h 袁 风 干 后 制 成 真 菌 饲 料 添 加 剂 袁 并 按 % 的 比 例 加 入 小 鼠 基 础 日 粮 中 袁 制 成 饲 料 备 用 遥 1.2.2 试 验 设 计 用 不 同 比 例 的 黑 曲 霉 尧 白 地 霉 尧 米 曲 霉 发 酵 物 制 成 9 种 真 菌 饲 料 添 加 剂 袁 试 验 方 案 见 表 2 遥 表 2 真 菌 饲 料 添 加 剂 菌 种 组 成 及 比 例 (%) 1.1.3 培 养 基 李 耀 忠, 宁 夏 大 学 后 勤 处,750021, 宁 夏 银 川 李 爱 华 ( 通 讯 作 者 ) 岳 思 君 韩 楠 楠, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 绎 原 料 玉 米 面 面 粉 麸 皮 豆 粕 鱼 粉 奶 粉 鸡 蛋 骨 粉 复 合 维 生 素 鱼 肝 油 食 盐 微 量 元 素 组 成 收 稿 日 期 :20070312 国 家 863 计 划 项 目 ( 编 号 2005AA001330) 国 家 农 业 科 技 成 果 转 化 资 金 项 目 ( 编 号 2006GB2G300314) 宁 夏 科 技 攻 关 项 目 ( 编 号 20040499) 资 助 含 量 30.8.6 20.5 10.3 5.1 2.1 2.1 2.1 0.2 0.6 0.5 0.2 察 氏 培 养 基 : 硝 酸 钠 (NaNO 3 )3g 尧 磷 酸 氢 二 钾 1g 尧 硫 酸 镁 (MgSO 4 窑 7H 2 O)0.5g 尧 氯 化 钾 0.5g 尧 硫 酸 铁 0.01 g 尧 蔗 糖 30 g 尧 琼 脂 20 g 尧 水 1000 ml 袁 ph 值 6.8 耀 7 遥 麦 芽 汁 培 养 基 院 大 麦 芽 粉 50g 尧 水 150ml 尧 鸡 蛋 1 个, ph 值 6.8 耀 7 遥 马 铃 薯 培 养 基 院 马 铃 薯 块 200 耀 300 g 尧 葡 萄 糖 20 g 尧 琼 脂 20 g 尧 水 1000 ml 袁 ph 值 5.5 耀 5.7 遥 1.2 方 法 5 试 验 组 1 2 3 4 5 6 7 8 9 黑 曲 霉 发 酵 物 20 20 30 30 50 50 原 100 原 1.2.3 酶 活 的 测 定 米 曲 霉 发 酵 物 30 50 50 20 30 20 原 原 100 白 地 霉 发 酵 物 50 30 20 50 20 30 100 原 原 分 别 用 DNS 法 和 Folin 法 测 定 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 遥 C X 酶 酶 活 单 位 定 义 : 在 ph 值 4.6 尧 50 益 条 件 下, 1 min 内 从 羧 甲 基 纤 维 素 钠 盐 溶 液 中 降 解 释 放 1 mmol 还 原 糖 所 需 要 的 酶 量 为 一 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 单 位 定 义 院 1g 固 体 酶 粉 在 ph 值 3.0 尧 40 益 条 件 下 袁 1min 水 解 酪 素 产 生 1 滋 g 酪 氨 酸 所 需 要 的 酶 量 为 1 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 C X 酶 酶 活 渊 U/g 冤 越 葡 萄 糖 含 量 /5 伊 E W 曰 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 (U/g) 越 酪 氨 酸 含 量 伊 4 伊 n/1 伊 10 遥 式 中 院 葡 萄 糖 含 量 要 要 查 标 准 曲 线 得 出 渊 mmol 冤 曰 5 要 要 酶 与 底 物 作 用 的 时 间 渊 min 冤 曰 E W 要 要 1ml 酶 液 中 所 含 酶 量 渊 g 冤 曰 酪 氨 酸 含 量 要 要 查 标 准 曲 线 得 出 渊 滋 g 冤 曰 4 要 要 反 应 试 剂 体 积 渊 ml 冤 曰 n 要 要 样 品 稀 释 倍 数 渊 ml/g 冤 曰 1 要 要 参 与 反 应 的 酶 液 量 渊 ml 冤 曰 10 要 要 反 应 时 间 渊 min 冤 遥 1.2.4 饲 喂 与 称 重

李 耀 忠 等 : 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 的 增 重 试 验 饲 料 添 加 剂 试 验 开 始 和 3 周 时 各 组 小 鼠 空 腹 1d 逐 只 称 重 袁 分 别 作 为 初 重 和 末 重 袁 每 天 饲 喂 2 次 袁 各 组 饲 养 管 理 条 件 一 致 袁 同 时 每 周 空 腹 逐 只 称 重 1 次 以 观 察 其 生 长 情 况 并 记 录 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 的 影 响 渊 见 表 3 冤 组 别 对 照 1 2 3 4 5 6 7 8 9 表 3 初 重 渊 g/ 只 冤 15.4 15.3 15.6 15.3 15.5 15.4 15.3 15.5 15.3 15.6 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 影 响 末 重 渊 g/ 只 冤.7 26.2 28.5 27.9 27.2 26.4.9 28.3 27.2 27.7 均 增 重 渊 g/ 只 冤 10.3 10.9 12.9 12.6 11.7 11.0 10.6 12.8 11.9 12.1 相 对 增 重 率 渊 豫 冤 0 5.83.24 ** 22.33 * 13.59 * 6.8 2.91 24.27 ** 15.53 * 17.48 * 注 :* 表 示 差 异 显 著 (P 约 0.05) 袁 ** 表 示 差 异 极 显 著 (P 约 0.01) 遥 下 表 同 遥 从 表 3 可 见,9 个 试 验 组 对 小 鼠 均 有 增 重 效 果 袁 3 周 后 9 个 试 验 组 平 均 增 重 11.8 g/ 只, 比 对 照 组 提 高 14.89% 遥 不 同 菌 种 及 配 合 比 例 的 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 也 各 异 袁 其 中 2 组 ( 白 地 霉 黑 曲 霉 米 曲 霉 越 3 2 5) 增 重 率 (.24%) 最 好, 其 次 为 7 组 (100% 白 地 霉 ) 袁 增 重 率 (24.27%) 较 高, 均 达 到 极 显 著 的 水 平 渊 P 约 0.01 冤 曰 而 6 组 和 1 组 ( 白 地 霉 尧 黑 曲 霉 尧 米 曲 霉 以 3 5 2 和 5 2 3 的 比 例 ) 增 重 率 较 差, 分 别 为 2.91 豫 和 5.83% 遥 就 复 合 菌 种 组 成 的 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 来 看 袁 米 曲 霉 比 例 高 的 效 果 好, 黑 曲 霉 比 例 高 的 效 果 差 一 些 遥 单 菌 种 组 成 的 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 依 次 是 白 地 霉 > 米 曲 霉 > 黑 曲 霉 遥 2.2 酶 活 的 测 定 渊 见 表 4 冤 组 别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 C X 酶 酶 活 (U/g) 61.86 126.28 ** 64.41 76.33 93.36 97.33 52.78 157.78 ** 13.05 表 4 试 验 各 组 的 酶 活 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 (U/g) 64.00 57.68 60.62 70.10 72.82 75.98 67.60 97.00 ** 36.00 C X 酶 酶 活 / 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 0.97 1 2.2 1 1.06 1 1.09 1 1.28 1 1.28 1 0.78 1 1.63 1 0.36 1 由 表 4 可 见 袁 不 同 菌 种 及 其 配 合 比 例 制 成 的 真 菌 饲 料 添 加 剂 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 各 异 袁 其 中 8 组 渊 100% 黑 曲 霉 冤 和 2 组 渊 白 地 霉 黑 曲 霉 米 曲 霉 = 3 2 5 冤 的 C X 酶 酶 活 最 高 袁 分 别 高 达 157.78 U/g 和 126.28 U/g 袁 而 9 组 (100% 米 曲 霉 )C X 酶 酶 活 较 差 袁 为 6 13.05 U/g 遥 以 8 组 的 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 高 达 97.00 U/g, 而 以 9 组 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 低 遥 3 小 结 与 讨 论 试 验 结 果 表 明 袁 3 周 后 9 个 试 验 组 平 均 增 重 11.8g/ 只, 比 对 照 组 提 高 14.89%, 其 中 2 组 增 重 效 果 最 好, 增 重 率 较 对 照 组 提 高.24% 袁 差 异 极 显 著 渊 P 约 0.01 冤 遥 单 菌 株 添 加 剂 增 重 效 果 均 显 著 渊 P<0.01 尧 P<0.05 冤 曰 多 菌 株 饲 料 添 加 剂 中 有 2 尧 3 和 4 组 的 增 重 效 果 显 著 渊 P<0.01 尧 P<0.05 冤 袁 而 1 尧 5 和 6 组 的 增 重 效 果 不 显 著 袁 可 能 因 为 该 真 菌 添 加 剂 作 用 机 理 除 其 含 粗 酶 制 剂 及 菌 体 蛋 白 外 还 含 有 活 菌 袁 不 同 种 属 真 菌 进 入 动 物 肠 道 后 因 其 之 间 可 能 存 在 着 相 互 拮 抗 或 共 生 现 象 袁 表 明 在 研 制 多 种 真 菌 的 生 态 制 剂 或 微 生 物 添 加 剂 时 袁 应 注 意 菌 株 间 的 生 物 拮 抗 关 系 遥 各 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 不 同, 其 中 8 组 和 2 组 的 C X 酶 酶 活 最 高 袁 8 组 的 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 高, 而 100 豫 的 米 曲 霉 添 加 剂 组 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 低 遥 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 的 高 低 对 小 鼠 增 重 率 的 影 响 规 律 性 不 强, 但 有 C X 酶 酶 活 高 尧 C X 酶 酶 活 和 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 比 例 差 异 大 可 使 小 鼠 增 重 率 提 高 的 趋 势 袁 其 增 重 的 效 果 和 机 理 还 有 待 于 进 一 步 研 究 遥 近 年 来 随 着 我 国 动 物 微 生 态 学 研 究 的 崛 起 袁 微 生 态 制 剂 的 研 究 及 运 用 正 方 兴 未 艾 袁 它 不 仅 能 保 护 和 维 持 畜 禽 尧 鱼 类 等 动 物 肠 道 的 微 生 态 平 衡 袁 进 而 增 强 它 们 对 疾 病 的 防 治 能 力 袁 而 且 还 可 以 促 进 动 物 生 长 发 育 尧 增 重 育 肥 尧 提 高 蛋 白 产 量 及 饲 料 转 化 率 遥 霉 菌 大 量 存 在 于 土 壤 中 袁 不 是 动 物 肠 道 中 的 正 常 微 生 物 袁 但 近 年 来 袁 该 类 微 生 物 在 饲 料 工 业 中 作 为 高 品 质 的 饲 料 添 加 剂 被 广 泛 应 用 袁 以 提 高 家 禽 尧 家 畜 的 生 产 性 能 袁 尤 其 是 反 刍 动 物 遥 用 于 反 刍 动 物 微 生 物 饲 料 添 加 剂 生 产 的 菌 种 主 要 有 黑 曲 霉 和 米 曲 霉 遥 这 些 曲 霉 菌 都 能 产 生 纤 维 素 酶 袁 有 利 于 反 刍 动 物 对 纤 维 素 的 消 化 和 吸 收 利 用 遥 曲 霉 能 透 过 植 物 表 皮 角 质 层 屏 障 袁 破 坏 纤 维 素 的 结 构 完 整 性 袁 降 解 含 木 质 素 的 植 物 细 胞 壁 袁 使 其 能 被 动 物 更 有 效 的 消 化 袁 特 别 是 在 粗 饲 料 成 分 较 多 的 情 况 下 袁 曲 霉 更 显 出 其 重 要 作 用 遥 黑 曲 霉 还 能 产 生 淀 粉 酶 尧 蛋 白 酶 和 果 胶 酶 遥 米 曲 霉 能 产 生 植 酸 酶 袁 使 磷 从 植 酸 和 植 酸 盐 中 释 放 出 来 袁 被 动 物 充 分 吸 收 利 用 袁 提 高 钙 尧 镁 尧 锌 尧 铜 的 吸 收 遥 白 地 霉 可 作 为 饲 料 添 加 剂 袁 具 有 很 高 的 营 养 价 值 且 生 长 繁 殖 快 袁 对 培 养 基 要 求 不 高 遥 ( 编 辑 : 王 芳,xfang2005@163.com)

饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 赵 风 立 朱 连 勤 乔 彦 良 茁 防 御 素 作 为 抗 菌 肽 的 一 种 袁 是 一 类 富 含 精 氨 酸 的 阳 离 子 低 分 子 短 肽 袁 广 泛 分 布 于 动 物 尧 植 物 和 昆 虫 体 内 遥 体 外 抑 菌 试 验 表 明 袁 防 御 素 能 对 革 兰 氏 阳 性 和 最 先 从 鸡 嗜 中 性 粒 细 胞 中 分 离 提 取 的 袁 属 茁 防 御 素 遥 对 其 进 行 分 离 纯 化 袁 得 到 了 3 种 相 似 的 抗 菌 肽 :Gal1 尧 Gal1a 尧 Gal2 渊 Gallinacin 缩 写 为 Gal 冤 遥 阴 性 细 菌 尧 真 菌 尧 分 枝 杆 菌 尧 螺 旋 体 尧 披 膜 病 毒 等 病 原 微 生 物 产 生 较 强 的 杀 伤 作 用 袁 甚 至 对 支 原 体 尧 衣 原 体 尧 2 茁 防 御 素 的 结 构 茁 防 御 素 蛋 白 外 形 小 袁 每 一 种 茁 防 御 素 基 因 编 螺 旋 体 以 及 一 些 恶 性 细 胞 ( 如 肿 瘤 细 胞 ) 和 艾 滋 病 病 毒 也 具 有 杀 伤 作 用 遥 运 用 基 因 工 程 技 术 表 达 而 大 量 生 产 的 防 御 素 无 毒 副 作 用 袁 也 不 会 使 病 原 微 生 物 菌 株 变 异 而 产 生 抗 药 性 袁 且 具 有 广 泛 的 抗 性 谱 遥 自 然 界 中 各 类 生 物 都 具 备 内 在 的 防 御 系 统 遥 研 究 发 现 袁 许 多 生 物 体 内 存 在 一 类 具 有 抗 菌 作 用 的 短 链 多 肽 袁 统 称 为 抗 菌 肽 遥 生 物 有 机 体 合 成 的 内 源 性 抗 菌 肽 具 有 广 谱 尧 高 效 的 抗 微 生 物 活 性 袁 是 其 天 然 免 疫 系 统 的 重 要 组 成 成 分 遥 哺 乳 动 物 的 抗 菌 肽 主 要 分 为 两 大 类 院 防 御 素 (defensins) 和 cathelicidins 遥 前 者 含 有 6 个 保 守 的 半 胱 氨 酸 袁 形 成 3 个 分 子 内 二 硫 键 袁 而 后 者 含 有 保 守 的 cathelin 区 域 袁 形 成 结 构 各 异 的 抗 菌 肽 遥 防 御 素 包 括 由 潘 氏 细 胞 产 生 的 琢 防 御 素 和 由 肠 上 皮 细 胞 产 生 的 茁 防 御 素 遥 茁 防 御 素 为 具 有 广 谱 抗 微 生 物 活 性 的 阳 离 子 多 肽 袁 是 上 皮 细 胞 和 白 细 胞 的 产 物 遥 码 是 由 59 耀 80 个 氨 基 酸 组 成 的 前 蛋 白 袁 平 均 为 65 个 氨 基 酸 袁 再 通 过 尚 不 明 确 的 机 制 裂 解 成 成 熟 多 肽 袁 成 熟 多 肽 大 多 由 36 耀 47 个 氨 基 酸 组 成 袁 平 均 为 45 个 氨 基 酸 遥 防 御 素 蛋 白 最 大 的 特 点 是 具 有 6 个 半 胱 氨 酸 的 基 本 序 列 袁 6 个 半 胱 氨 酸 形 成 3 个 二 硫 键 遥 鸡 的 茁 防 御 素 蛋 白 的 3 个 二 硫 键 连 接 方 式 为 Cys1Cys6 尧 Cys2 Cys4 尧 Cys3Cys5 袁 构 成 稳 定 的 反 相 平 行 的 3 股 茁 片 层 结 构 袁 二 硫 键 可 以 使 小 分 子 防 御 素 紧 密 联 结 以 防 御 蛋 白 酶 水 解 袁 所 以 在 富 含 蛋 白 的 吞 噬 溶 酶 体 环 境 中 仍 能 保 持 其 特 性 袁 这 也 是 防 御 素 区 别 于 其 它 抗 微 生 物 肽 的 主 要 因 素 遥 茁 防 御 素 基 因 含 有 2 个 外 显 子 和 1 个 内 含 子, 第 1 外 显 子 编 码 5 爷 端 非 翻 译 序 列 及 信 号 肽 和 部 分 前 片 段, 第 2 个 外 显 子 编 码 剩 余 部 分 前 片 段 尧 成 熟 肽 和 3 爷 端 非 翻 译 序 列 袁 终 止 密 码 子 一 般 在 成 熟 肽 序 列 末 端 遥 茁 防 御 1 茁 防 御 素 的 分 布 素 的 表 达 既 有 组 成 型 的 袁 又 有 诱 导 型 的 遥 防 御 素 主 要 由 中 性 粒 细 胞 产 生 袁 但 在 其 它 细 胞 中 也 发 现 有 防 御 素 表 达 袁 茁 防 御 素 主 要 存 在 于 哺 乳 动 物 3 茁 防 御 素 的 生 物 活 性 内 源 性 抗 菌 肽 袁 尤 其 是 茁 防 御 素 袁 它 是 机 体 抗 感 的 有 关 组 织 和 细 胞 中 袁 广 泛 分 布 于 人 尧 鼠 尧 牛 尧 羊 尧 猪 的 多 种 器 官 的 上 皮 细 胞 内 袁 小 鼠 的 茁 防 御 素 主 要 分 布 于 肺 尧 气 管 和 肾 脏 曰 牛 的 茁 防 御 素 最 初 是 从 牛 的 气 管 染 中 第 一 道 防 线 要 粘 膜 的 关 键 因 子 遥 可 以 快 速 尧 非 特 异 地 杀 灭 侵 入 的 病 原 体 袁 如 细 菌 尧 真 菌 和 披 膜 病 毒 袁 对 螺 旋 体 尧 分 枝 杆 菌 尧 原 生 动 物 也 有 一 定 的 杀 灭 作 用 遥 粘 膜 上 皮 细 胞 中 发 现 的 曰 猪 的 茁 原 防 御 素 广 泛 分 布 于 消 化 道 尧 呼 吸 道 尧 淋 巴 器 官 尧 心 脏 尧 肝 脏 尧 肾 脏 尧 脑 尧 皮 3.1 抗 菌 作 用 尽 管 茁 防 御 素 抗 菌 素 谱 广, 但 不 同 防 御 素 的 杀 菌 肤 尧 肌 肉 尧 睾 丸 尧 脐 带 及 骨 髓 等 器 官 内 以 及 中 性 粒 细 胞 和 肺 泡 巨 噬 细 胞 内 遥 鸡 的 防 御 素 是 Havwing 等 渊 1994 冤 能 力 的 强 弱 和 抗 菌 谱 的 侧 重 点 仍 有 所 不 同, 天 然 分 离 的 hbd2 对 G 尧 Pseudomouczs aerugiuosa 尧 E. coli 渊 LD 90 10 g/ml 冤 和 Candida albicans 渊 LD 90 g/ml 冤 均 有 杀 伤 作 用 袁 但 对 G + 菌 和 Staphlococcus 杀 伤 力 不 强 遥 同 时 过 高 赵 风 立, 山 东 信 得 科 技, 研 发 工 程 师,266061, 青 岛 市 香 港 东 路 268 号 D338 朱 连 勤, 莱 阳 农 学 院 乔 彦 良, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 :20070223 的 盐 浓 度 渊 150 mmol/l 冤 会 导 致 防 御 素 活 性 水 平 急 剧 下 降 遥 Bals 也 报 道 袁 茁 防 御 素 在 高 盐 环 境 中 不 能 保 持 抗 G 菌 的 活 性 遥 另 外 袁 一 价 离 子 对 防 御 素 活 性 影 响 较 小 袁 二 价 离 子 ( 如 钙 尧 镁 离 子 ) 则 可 显 著 降 低 防 御 素 的 活 性 遥 茁 防 御 素 为 毫 摩 尔 浓 度 时 才 具 有 杀 伤 细 菌 的 能 力 袁 而 7

赵 风 立 等 : 茁 防 御 素 的 研 究 进 展 饲 料 添 加 剂 纳 摩 尔 浓 度 时 就 具 有 趋 化 活 性 遥 目 前 袁 对 防 御 素 的 抑 菌 机 理 尚 无 明 确 的 定 论 袁 普 3.2 抗 病 毒 作 用 茁 防 御 素 能 杀 灭 一 些 披 膜 病 毒 袁 如 HIV 尧 疱 疹 病 遍 认 为 由 于 茁 防 御 素 分 子 带 正 电 荷 袁 能 够 与 带 负 电 荷 尧 呈 阴 性 的 细 菌 表 面 结 合 袁 结 合 后 其 分 子 中 的 疏 水 毒 等 遥 QuinoncsMatcu 等 渊 2003 冤 第 一 次 研 究 表 明 了 HIV1 诱 导 茁 防 御 素 在 口 腔 上 皮 细 胞 中 的 表 达 袁 茁 防 御 素 通 过 调 变 CCR4 复 合 受 体 阻 滞 HIV1 复 制 遥 防 御 素 对 病 毒 的 抑 制 程 度 依 赖 于 防 御 素 的 浓 度 尧 分 子 内 二 硫 键 的 紧 密 程 度 遥 防 御 素 的 抗 病 毒 作 用 同 样 受 到 ph 值 和 离 子 强 度 的 影 响 袁 在 中 性 及 低 离 子 强 度 时 袁 防 御 素 具 有 强 的 抗 病 毒 功 效 遥 区 可 插 入 到 细 菌 的 胞 膜 曰 而 其 带 电 区 ( 带 正 点 荷 ) 则 与 细 菌 胞 膜 上 带 负 电 荷 的 磷 脂 头 部 和 水 分 子 相 互 作 用 袁 形 成 电 压 依 赖 的 离 子 渗 透 性 膜 通 道 袁 使 膜 具 有 通 透 性 遥 在 细 胞 膜 上 袁 多 个 茁 防 御 素 分 子 聚 集 形 成 孔 隙 或 通 道 袁 从 而 扰 乱 了 细 胞 膜 的 通 透 性 及 细 胞 能 量 状 态, 导 致 细 胞 膜 去 极 化 袁 呼 吸 作 用 受 到 抑 制 以 及 细 胞 ATP 含 量 下 降, 细 胞 必 需 的 代 谢 物 质 外 泄 袁 防 御 素 和 正 常 3.3 细 胞 毒 性 作 用 茁 防 御 素 还 具 有 细 胞 毒 性 作 用 袁 抑 制 某 些 肿 瘤 细 情 况 下 不 能 进 入 细 胞 的 物 质 ( 离 子 尧 酶 尧 及 某 些 抗 生 素 ) 内 渗 袁 最 终 导 致 不 可 逆 性 的 菌 体 死 亡 遥 高 等 动 物 的 细 胞 的 生 长 遥 在 体 外 试 验 研 究 中 观 察 纯 化 的 防 御 素 对 数 种 人 类 及 小 鼠 的 肿 瘤 细 胞 的 作 用 情 况 发 现 袁 防 御 素 对 白 血 病 细 胞 系 尧 淋 巴 瘤 细 胞 系 及 实 体 瘤 细 胞 系 具 有 毒 性 作 用 袁 并 且 这 种 抗 肿 瘤 功 效 与 其 作 用 时 间 和 剂 量 呈 正 相 关 遥 需 要 指 出 的 是 袁 防 御 素 的 这 种 细 胞 毒 活 性 是 非 肿 瘤 细 胞 特 异 的 袁 它 不 仅 对 肿 瘤 细 胞 具 有 毒 性 作 用 袁 而 且 对 自 身 细 胞 也 有 一 定 侵 害 作 用, 其 细 胞 毒 性 活 力 是 不 依 赖 氧 的 机 制 溶 解 靶 细 胞 的, 作 用 主 要 通 过 胞 则 由 于 细 胞 膜 中 负 电 荷 含 量 较 低 而 免 于 被 攻 击 遥 正 是 由 于 这 种 特 殊 的 作 用 机 理 袁 使 防 御 素 具 备 两 个 特 点 院 淤 抗 菌 谱 广 曰 于 目 的 微 生 物 难 以 对 防 御 素 产 生 抗 性 突 变 遥 防 御 素 的 抗 病 毒 作 用 则 是 通 过 与 病 毒 外 壳 蛋 白 结 合 而 导 致 病 毒 失 去 生 物 活 性 遥 防 御 素 对 没 有 包 膜 的 病 毒 缺 乏 抗 病 毒 活 性 袁 这 说 明 膜 的 相 互 作 用 对 防 御 素 的 抗 微 生 物 功 能 是 必 要 的 遥 抑 制 氧 化 酶 的 活 性, 并 部 分 依 赖 于 靶 细 胞 膜 的 脂 质 成 分, 与 过 氧 化 氢 酶 有 协 同 作 用 遥 Mizukawa 等 在 口 腔 鳞 5 茁 防 御 素 的 表 达 尧 基 因 克 隆 和 蛋 白 工 程 天 然 获 取 防 御 素 的 量 极 其 有 限, 合 成 或 从 机 体 中 状 细 胞 癌 病 人 唾 液 中 发 现 袁 hbd1 与 肿 瘤 组 织 相 比 邻 的 朗 氏 细 胞 内 也 发 现 了 防 御 素, 这 些 可 能 与 肿 瘤 有 关 遥 韩 献 萍 等 渊 1994 冤 报 道 袁 柞 蚕 抗 菌 肽 D 对 宫 颈 癌 细 胞 具 有 杀 伤 作 用 遥 提 取 的 由 于 其 分 子 含 有 3 对 二 硫 键, 多 肽 难 以 保 证 正 确 配 对, 影 响 其 生 物 活 性 袁 且 步 骤 复 杂 尧 产 率 低 尧 价 格 昂 贵 遥 防 御 素 基 因 工 程 研 究 由 于 受 到 人 们 的 广 泛 关 注, 发 展 十 分 迅 速, 各 种 先 进 的 生 物 学 技 术 也 为 它 的 发 3.4 连 接 先 天 性 免 疫 和 获 得 性 免 疫 Duit 等 研 究 表 明 袁 茁 防 御 素 可 能 是 不 成 熟 树 突 状 展 提 供 了 条 件 遥 迄 今 为 止, 关 于 防 御 素 基 因 工 程 的 研 究 己 取 得 很 大 的 成 果 遥 Jaynes 等 利 用 基 因 改 造 袁 获 得 了 细 胞 和 记 忆 T 细 胞 的 趋 化 因 子 遥 Yang 等 渊 1999 冤 对 茁 防 御 素 化 学 趋 化 活 性 进 行 研 究 袁 达 到 亚 微 摩 尔 浓 度 的 这 些 茁 防 御 素 即 可 以 吸 引 尚 未 成 熟 的 树 突 状 细 胞 和 记 忆 性 T 细 胞 袁 这 一 效 应 是 由 CC 类 趋 化 受 体 6 所 介 导 的 遥 hbd3 在 体 内 可 能 通 过 其 与 CCR6 的 相 互 作 用 而 招 募 未 成 熟 DC 与 记 忆 性 T 淋 巴 细 胞 向 微 生 物 入 侵 的 皮 下 或 粘 膜 部 位 积 聚 遥 因 此 袁 茁 防 御 素 一 方 面 直 接 杀 灭 病 原 体 曰 另 一 方 面 趋 化 树 突 状 细 胞 尧 T 细 胞 至 感 染 组 织 袁 提 高 了 机 体 抵 抗 微 生 物 感 染 的 获 得 性 免 疫 水 平 袁 成 为 先 天 免 疫 系 统 和 后 天 免 疫 系 统 连 接 的 桥 梁 遥 由 此 可 见 袁 茁 防 御 素 在 机 体 抗 微 生 物 入 侵 的 先 天 性 免 疫 和 获 得 性 免 疫 中 均 具 有 重 要 作 用 遥 比 天 然 提 取 的 肽 有 更 高 活 性 的 新 型 抗 菌 肽 袁 而 人 工 合 成 得 到 的 融 合 抗 菌 肽 有 可 能 表 现 出 了 比 其 它 任 何 一 个 供 体 抗 菌 肽 都 高 的 抗 菌 活 性 遥 蔡 绍 晖 等 渊 2003 冤 研 究 了 C 端 带 Myc 基 因 和 多 聚 组 氨 酸 双 标 记 的 重 组 人 防 御 素 2 在 COS7 细 胞 的 转 染 表 达 遥 吴 映 雅 等 将 柞 蚕 抗 菌 肽 D 基 因 连 接 在 牛 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 cdn 的 上 游 袁 在 酵 母 中 成 功 地 得 到 了 表 达 袁 表 达 产 物 具 有 抗 菌 活 性 和 牛 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 的 抗 原 性 遥 Zhang 等 选 择 RepA 蛋 白 的 序 列 作 为 抗 菌 肽 的 融 合 表 达 伴 侣 袁 并 插 入 Histag 等 序 列 作 为 纯 化 亲 和 位 点 袁 实 现 了 在 E.coli 中 的 融 合 表 达 遥 利 用 基 因 工 程 技 术 生 产 防 御 素 由 于 该 分 子 的 抗 菌 4 茁 防 御 素 的 作 用 机 理 活 性 袁 面 临 防 御 素 引 起 工 程 菌 野 自 杀 冶 的 难 题 袁 给 基 因 8

饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 赵 晓 芳 胆 汁 酸 是 胆 汁 的 主 要 成 分, 在 脂 肪 消 化 过 程 中 起 着 重 要 作 用 遥 集 约 化 养 殖 过 程 中 频 繁 的 应 激 无 形 中 加 大 了 动 物 肝 脏 的 压 力, 肝 脏 分 泌 胆 汁 的 功 能 受 到 抑 制 袁 脂 肪 的 消 化 率 随 之 降 低, 从 而 出 现 营 养 性 腹 泻 尧 脂 肪 肝 尧 肝 炎 等 病 症 遥 胆 汁 酸 作 为 一 种 饲 料 添 加 剂, 可 有 效 缓 解 上 述 问 题, 本 文 详 细 介 绍 胆 汁 酸 的 结 构 组 成 尧 生 理 功 能 以 及 在 畜 牧 业 中 的 使 用 效 果 和 存 在 问 题 遥 1 胆 汁 酸 的 组 成 及 合 成 1.1 胆 汁 酸 的 组 成 胆 汁 酸 是 胆 汁 的 主 要 成 分 袁 是 动 物 体 内 胆 固 醇 代 谢 过 程 中 所 产 生 的 一 系 列 固 醇 类 物 质 遥 胆 汁 酸 按 结 构 分 为 游 离 型 胆 汁 酸 和 结 合 型 胆 汁 酸 两 类 袁 前 者 包 括 胆 赵 晓 芳, 南 宁 市 广 东 温 氏 畜 禽 有 限 公 司,530200, 广 西 南 宁 市 邕 宁 区 蒲 庙 镇 龙 岗 村 张 宏 福, 中 国 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所 收 稿 日 期 :20070402 张 宏 福 酸 尧 鹅 脱 氧 胆 酸 尧 脱 氧 胆 酸 尧 石 胆 酸 和 微 量 熊 脱 氧 胆 酸 等 曰 后 者 是 游 离 胆 汁 酸 与 甘 氨 酸 或 牛 黄 酸 结 合 的 产 物 袁 主 要 包 括 甘 氨 胆 酸 尧 甘 氨 鹅 脱 氧 胆 酸 尧 牛 黄 胆 酸 及 牛 黄 鹅 脱 氧 胆 酸 等 遥 另 外, 不 同 动 物 的 胆 汁 酸 种 类 和 数 量 都 不 相 同, 起 作 用 的 成 分 也 有 较 大 差 别 遥 如 人 的 胆 汁 酸 是 以 胆 酸 尧 鹅 脱 氧 胆 酸 为 主 曰 奶 牛 胆 汁 酸 的 主 要 成 分 为 胆 酸 和 脱 氧 胆 酸 曰 鸡 体 内 脱 氧 胆 酸 含 量 很 少, 鹅 脱 氧 胆 酸 的 含 量 最 高 遥 因 此 袁 如 果 胆 汁 酸 要 有 效 发 挥 其 生 理 功 能, 必 须 根 据 动 物 种 类 的 不 同 选 择 适 宜 的 胆 汁 酸 产 品 遥 1.2 胆 汁 酸 的 合 成 及 代 谢 1.2.1 胆 汁 酸 的 合 成 胆 汁 酸 由 胆 固 醇 代 谢 过 程 中 转 变 而 来 袁 其 合 成 分 为 3 个 阶 段 院 淤 初 级 胆 汁 酸 的 合 成 遥 胆 固 醇 在 多 种 酶 的 作 用 下 袁 经 过 羟 化 尧 加 氢 及 侧 链 氧 化 断 裂 等 多 步 反 应 袁 最 终 形 成 初 级 胆 汁 酸 渊 胆 酸 和 鹅 脱 氧 胆 酸 等 冤 遥 于 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 的 合 成 遥 初 级 胆 汁 酸 与 甘 氨 酸 或 牛 黄 酸 结 合 袁 形 成 结 合 型 胆 汁 酸 袁 分 泌 入 胆 道 遥 盂 次 级 胆 工 程 表 达 带 来 了 一 定 困 难 遥 能 袁 对 提 高 免 疫 力 尧 预 防 肉 鸡 的 疾 病 有 较 好 效 果 遥 陈 晓 6 茁 防 御 素 的 研 究 应 用 情 况 防 御 素 由 于 分 子 小 并 具 有 稳 定 的 分 子 结 构 等 特 生 等 渊 2005 冤 在 鸭 日 粮 中 添 加 蚕 抗 菌 肽 AD 酵 母 液 体 制 剂 袁 结 果 发 现 抗 菌 肽 可 起 到 抗 菌 促 生 长 的 作 用 遥 点 袁 为 当 今 研 制 多 肽 类 新 药 提 供 了 理 想 的 分 子 骨 架 和 模 板 遥 防 御 素 的 医 用 价 值 己 引 起 研 究 者 的 关 注 袁 其 强 7 展 望 现 在 动 物 疾 病 越 来 越 趋 向 于 复 杂 化 袁 新 的 混 合 性 大 的 抑 菌 功 能 尧 独 特 的 作 用 机 制 袁 为 耐 药 病 原 微 生 物 感 染 的 治 疗 带 来 了 希 望 遥 由 于 防 御 素 之 间 和 防 御 素 与 抗 菌 剂 之 间 的 协 同 作 用 袁 故 联 合 应 用 几 种 防 御 素 和 抗 菌 剂 可 以 取 得 更 好 的 效 果 袁 或 者 利 用 其 诱 导 表 达 的 特 性 袁 设 计 药 物 来 特 异 地 诱 导 靶 器 官 的 防 御 素 表 达 袁 从 而 达 到 治 疗 目 的 遥 刘 温 发 等 渊 2005 冤 报 道 袁 蚕 抗 菌 肽 可 减 轻 断 奶 仔 猪 的 腹 泻 曰 蚕 抗 菌 肽 酵 母 制 剂 可 促 进 仔 鸡 生 长 袁 减 少 排 泄 物 氮 含 量 遥 目 前 袁 广 东 省 应 用 抗 菌 肽 基 感 染 不 断 出 现 袁 不 利 于 畜 牧 业 的 发 展 遥 而 抗 生 素 添 加 剂 的 使 用 严 重 破 坏 了 动 物 肠 道 的 微 生 物 平 衡 袁 并 易 在 动 物 体 内 残 留 袁 严 重 影 响 了 畜 产 品 的 品 质 和 人 类 健 康 遥 运 用 基 因 工 程 技 术 表 达 而 生 产 的 防 御 素 无 毒 副 作 用 袁 也 不 会 使 病 原 微 生 物 菌 株 变 异 而 产 生 抗 药 性 袁 且 具 有 广 泛 的 抗 性 谱 袁 可 以 减 少 化 学 抗 菌 剂 在 畜 牧 业 上 的 应 用 袁 降 低 有 毒 尧 有 害 物 质 在 生 物 体 内 的 残 留 袁 提 高 畜 产 品 的 安 全 袁 具 有 广 阔 的 开 发 应 用 前 景 遥 因 转 化 酵 母 进 行 高 效 表 达 袁 经 发 酵 条 件 优 化 袁 生 产 抗 菌 肽 酵 母 制 剂 袁 并 将 其 用 作 畜 禽 及 水 产 饲 料 添 加 剂 袁 代 替 抗 生 素 来 预 防 及 治 疗 仔 猪 白 痢 及 雏 鸡 白 痢 有 明 ( 参 考 文 献 41 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) 显 效 果 遥 从 柞 蚕 蛹 中 分 离 抗 菌 肽 能 促 进 肉 鸡 生 产 性 ( 编 辑 : 王 芳,xfang2005@163.com) 9

赵 晓 芳 等 : 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 饲 料 添 加 剂 汁 酸 的 合 成 遥 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 随 胆 汁 进 入 小 肠 参 与 脂 类 的 消 化 吸 收 后 袁 部 分 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 在 空 肠 尧 回 肠 及 结 肠 上 段 袁 在 细 菌 酶 的 催 化 下 袁 进 一 步 水 解 尧 结 合 及 脱 羟 生 成 脱 氧 胆 酸 尧 石 胆 酸 尧 熊 脱 氧 胆 酸 等 次 级 胆 汁 酸 遥 面 上 而 起 到 催 化 作 用 遥 脂 肪 酶 的 功 能 发 挥 的 最 佳 ph 值 范 围 为 8 耀 9, 而 在 小 肠 前 端 ph 值 为 6 耀 7 的 环 境 下, 脂 肪 酶 基 本 不 起 作 用 袁 但 是 当 脂 肪 酶 与 胆 汁 酸 形 成 一 种 复 合 物 时 袁 脂 肪 酶 的 性 质 发 生 了 改 变, 能 在 ph 值 为 6 耀 7 的 小 肠 中 发 挥 作 用 遥 并 且 在 脂 肪 的 吸 收 过 程 中, 胆 1.2.2 胆 汁 酸 的 代 谢 动 物 进 食 后 袁 胆 汁 酸 进 入 小 肠 袁 乳 化 脂 肪 遥 乳 化 的 汁 酸 可 以 被 肠 上 皮 细 胞 识 别, 从 而 使 脂 肪 酸 要 胆 汁 酸 复 合 物 进 入 小 肠 绒 毛 膜 内, 提 高 了 脂 肪 的 吸 收 率 遥 脂 肪 被 水 解 为 甘 油 与 脂 肪 酸 后 袁 胆 汁 酸 与 脂 肪 酸 形 成 脂 肪 酸 要 胆 汁 酸 复 合 物 袁 被 小 肠 绒 毛 膜 吸 收 袁 然 后 与 2.2 保 持 体 内 胆 固 醇 的 动 态 平 衡 胆 汁 酸 由 胆 固 醇 转 变 而 来 袁 这 也 是 体 内 胆 固 醇 排 脂 肪 酸 分 离 袁 经 门 静 脉 入 肝 袁 由 肝 细 胞 摄 取 袁 将 游 离 型 胆 汁 酸 再 合 成 结 合 型 胆 汁 酸 袁 并 同 重 吸 收 的 以 及 新 合 成 的 结 合 型 胆 汁 酸 一 起 排 入 肠 道 袁 这 一 过 程 成 为 胆 汁 酸 的 肝 肠 循 环 袁 肝 肠 循 环 使 有 限 的 胆 汁 酸 能 发 挥 最 大 限 度 的 乳 化 作 用 袁 以 保 证 脂 类 食 物 消 化 吸 收 的 正 常 进 行 遥 排 入 肠 道 的 胆 汁 酸 约 95 豫 以 上 被 重 吸 收 袁 其 余 随 泄 的 重 要 途 径 之 一 遥 人 类 每 天 大 约 有 500 mg 的 胆 固 醇 通 过 转 变 为 胆 汁 酸 得 以 清 除 袁 清 除 掉 多 余 的 胆 固 醇 对 于 所 有 动 物 来 说 都 非 常 重 要 袁 尤 其 是 在 胆 固 醇 摄 入 过 多 时 遥 近 年 来 研 究 发 现 袁 胆 汁 酸 还 作 为 一 种 激 素 袁 通 过 改 变 胆 固 醇 合 成 过 程 中 的 限 速 酶 的 转 录 来 参 与 胆 固 醇 的 代 谢 遥 粪 便 排 出 袁 所 以 胆 汁 酸 每 循 环 一 次 约 损 失 5% 遥 返 回 到 肝 的 胆 汁 酸 有 刺 激 肝 胆 汁 分 泌 的 作 用 袁 但 肝 脏 病 变 会 2.3 保 肝 利 胆 袁 维 护 动 物 健 康 随 着 抗 生 素 在 养 殖 业 中 的 大 量 使 用 袁 抗 生 素 杀 灭 降 低 肝 细 胞 摄 取 胆 汁 酸 盐 的 能 力 袁 导 致 肝 脏 分 泌 胆 汁 酸 的 能 力 下 降 袁 影 响 脂 类 的 消 化 吸 收 遥 细 菌 后 产 生 大 量 的 内 毒 素 严 重 影 响 动 物 健 康 袁 而 肝 脏 在 所 有 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 尧 有 毒 有 害 物 质 的 分 解 尧 2 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 解 毒 过 程 中 起 非 常 重 要 的 作 用 袁 肝 脏 病 变 随 之 引 起 一 2.1 促 进 脂 肪 和 脂 溶 性 物 质 的 消 化 吸 收 食 物 中 的 脂 肪 通 过 胆 汁 酸 的 作 用 先 被 乳 化 袁 而 后 系 列 消 化 吸 收 障 碍 袁 而 胆 汁 酸 可 减 少 动 物 体 内 细 菌 内 毒 素 吸 收 袁 如 果 动 物 摄 入 适 量 的 脱 氧 胆 汁 酸 袁 就 能 有 被 脂 肪 消 化 酶 所 消 化 袁 消 化 产 物 包 含 在 胆 汁 酸 的 微 粒 中 袁 被 小 肠 中 的 绒 毛 膜 吸 收 遥 在 整 个 脂 类 的 消 化 吸 收 过 程 中 袁 胆 汁 酸 具 有 重 要 的 生 理 功 能 遥 当 动 物 采 食 油 脂 含 量 高 的 食 物 时 袁 可 刺 激 十 二 指 肠 分 泌 胆 囊 收 缩 素 袁 促 使 胆 囊 收 缩 将 胆 汁 排 入 肠 道 袁 帮 助 脂 肪 消 化 遥 若 效 分 解 内 毒 素 袁 维 护 动 物 健 康 遥 脱 氧 胆 酸 和 熊 脱 氧 胆 酸 还 可 促 进 肝 细 胞 分 泌 大 量 稀 薄 的 胆 汁, 使 胆 道 畅 通, 消 除 胆 汁 淤 滞, 起 到 利 胆 作 用 遥 很 多 药 物 尧 重 金 属 尧 霉 菌 毒 素 和 其 它 有 害 物 质 亦 可 从 胆 汁 中 排 出, 从 而 维 护 动 物 健 康 遥 胆 汁 酸 分 泌 不 足 袁 过 量 的 脂 肪 会 产 生 腻 感 袁 严 重 抑 制 动 物 的 采 食 袁 从 而 降 低 动 物 的 生 长 性 能 遥 胆 汁 酸 促 进 2.4 消 炎 杀 菌 胆 汁 酸 还 是 一 种 有 效 的 杀 菌 剂 袁 在 动 物 的 大 肠 脂 肪 消 化 吸 收 的 机 理 如 下 院 淤 促 进 脂 肪 的 乳 化 胆 汁 酸 分 子 内 既 含 有 亲 水 性 的 羟 基 及 羧 基 袁 又 含 有 疏 水 性 烷 基 袁 两 类 性 质 不 同 的 基 团 位 于 环 戊 烷 多 氢 菲 核 的 两 侧 袁 使 胆 汁 酸 具 有 较 强 的 表 面 活 性 袁 能 降 低 油 水 两 相 间 的 表 面 张 力 袁 促 进 脂 类 乳 化 袁 并 形 成 可 以 悬 浮 在 水 中 的 脂 肪 酸 乳 糜 颗 粒 袁 扩 大 脂 肪 和 脂 肪 酶 的 接 触 面 袁 加 速 脂 类 的 消 化 遥 于 活 化 脂 肪 酶 袁 增 强 脂 肪 酶 的 活 性 胰 腺 分 泌 的 脂 肪 酶 原 在 小 肠 内 转 变 为 有 活 性 的 脂 肪 酶 才 能 发 挥 作 用, 它 的 激 活 必 须 有 胆 汁 酸 的 参 与, 而 且 胆 汁 酸 可 使 脂 肪 酶 结 合 到 甘 油 三 酯 的 脂 滴 的 表 中 袁 胆 汁 酸 能 够 抑 制 大 肠 杆 菌 尧 链 球 菌 及 其 它 有 害 细 垣 菌 的 增 殖 遥 鸡 胆 汁 酸 对 体 外 培 养 的 G 菌 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 有 明 显 的 抗 菌 作 用 遥 在 人 类 医 学 上 也 采 用 胆 汁 酸 作 消 炎 药 袁 用 于 治 疗 百 日 咳 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 感 染 等 遥 哈 斯 苏 荣 等 渊 2001 冤 对 鸡 胆 汁 的 有 效 成 分 牛 黄 酸 (Tau) 和 胆 酸 (CA) 进 行 了 抗 炎 作 用 及 抗 菌 作 用 研 究 袁 结 果 表 明 袁 Tau 和 CA 对 急 慢 性 炎 症 均 有 很 强 的 抑 制 作 用 袁 CA 还 对 体 外 培 养 的 革 兰 氏 阳 性 菌 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 有 明 显 的 抗 菌 作 用 遥 但 有 些 学 者 认 为 胆 汁 酸 没 有 抗 菌 基 团 袁 其 抗 菌 活 性 是 通 过 促 进 脂 肪 的 消 化 袁 避 免 了 肠 道 菌 群 的 失 衡 而 实 现 的 遥 10

饲 料 添 加 剂 赵 晓 芳 等 : 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 2.5 改 善 动 物 的 胴 体 质 量 胆 汁 酸 能 提 高 甲 状 腺 激 素 的 活 性 袁 促 使 多 余 的 脂 肪 野 燃 烧 冶 袁 可 有 效 防 止 动 物 生 长 后 期 脂 肪 的 过 多 沉 积 袁 从 而 改 善 胴 体 品 质 袁 增 加 动 物 的 可 食 比 例 遥 3 胆 汁 酸 的 在 畜 牧 业 上 的 应 用 3.1 胆 汁 酸 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 为 保 证 仔 猪 摄 食 饲 料 中 足 够 的 能 量 袁 需 要 在 饲 料 配 方 中 添 加 脂 肪 袁 然 而 袁 仔 猪 肝 功 能 还 不 健 全 袁 胆 汁 酸 分 泌 不 足 袁 对 脂 肪 的 消 化 吸 收 非 常 有 限 袁 未 消 化 脂 肪 易 引 起 仔 猪 腹 泻 袁 在 其 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 可 解 决 仔 猪 脂 肪 消 化 的 问 题 遥 美 国 俄 亥 俄 州 立 大 学 Reinhart 等 渊 1989 冤 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0 援 3 豫 的 胆 汁 酸 袁 显 著 提 高 了 体 增 重 和 采 食 量 袁 脂 肪 摄 入 量 和 脂 肪 表 观 吸 收 量 都 增 加 了 袁 氮 摄 入 量 和 氮 贮 留 量 也 显 著 地 增 加 渊 P 约 0 援 01 冤 遥 3.2 胆 汁 酸 对 家 禽 生 产 性 能 的 影 响 胆 汁 酸 还 能 有 效 提 高 家 禽 的 生 产 性 能 遥 Gomez 渊 1979 冤 报 道 袁 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 袁 使 白 洛 克 鸡 脂 肪 表 观 消 化 率 提 高 2 援 l 豫 遥 胆 汁 酸 还 能 提 高 肉 鸡 对 脂 肪 的 利 用 率 渊 Pullen 袁 l983 冤 遥 蛋 鸡 脂 肪 肝 是 产 蛋 鸡 常 见 的 一 种 营 养 代 谢 性 疾 病 袁 影 响 肝 脏 的 正 常 功 能 袁 严 重 的 引 起 肝 细 胞 破 裂 尧 肝 内 出 血 而 死 亡 遥 患 脂 肪 肝 的 鸡 群 很 难 出 现 产 蛋 高 峰 袁 给 养 殖 业 带 来 重 大 经 济 损 失 袁 饲 料 中 额 外 添 加 胆 汁 酸 袁 可 防 止 脂 肪 肝 带 来 的 一 系 列 问 题 袁 利 于 母 鸡 健 康 袁 延 长 产 蛋 高 峰 的 持 续 时 间 遥 3.3 胆 汁 酸 对 水 产 动 物 生 长 的 影 响 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 可 提 高 鲷 鱼 饲 料 的 营 养 价 值 袁 增 重 率 较 对 照 组 提 高 45 援 73 豫 耀 68 援 6 豫 袁 饲 料 利 用 率 提 高 10 援 86 豫 耀 21 援 88 豫 ( 弟 子 丸 修 袁 1981) 遥 林 仕 梅 等 (2003) 在 饲 料 中 添 加 100 mg/kg 的 可 利 康 渊 胆 汁 酸 产 品 冤 袁 异 育 银 鲫 的 生 长 速 度 提 高 了 5.1% 袁 饲 料 转 化 率 提 高 了 22.9% 袁 内 脏 比 例 降 低 袁 鱼 的 可 食 比 例 得 到 提 高 遥 石 原 秀 平 渊 1987 冤 还 发 现 袁 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 袁 能 改 善 真 鲷 的 体 色 袁 提 高 养 殖 鱼 类 的 商 品 价 值 遥 3.4 胆 汁 酸 对 动 物 的 外 观 皮 毛 质 量 的 影 响 由 于 胆 汁 酸 能 提 高 动 物 对 脂 肪 和 脂 溶 性 维 生 素 的 吸 收 率 袁 从 而 改 善 动 物 皮 毛 的 质 量 遥 4 有 待 于 研 究 的 问 题 淤 胆 汁 酸 能 提 高 甲 状 腺 激 素 活 性 袁 使 基 础 代 谢 加 快 袁 促 使 多 余 的 脂 肪 野 燃 烧 冶 袁 若 提 高 了 动 物 的 基 础 11 代 谢 袁 对 动 物 生 产 不 利 遥 胆 汁 酸 作 用 的 发 挥 是 提 高 了 基 础 代 谢 还 是 把 脂 肪 转 化 为 提 供 沉 积 肌 肉 所 需 要 的 能 量 袁 还 有 待 于 研 究 遥 于 胆 汁 酸 品 种 繁 多 袁 必 须 根 据 动 物 种 类 制 备 适 宜 的 胆 汁 酸 产 品 遥 但 是 每 一 种 胆 汁 酸 到 底 适 合 哪 些 品 种 的 动 物 使 用 还 有 待 于 研 究 遥 盂 外 源 添 加 胆 汁 酸 是 否 会 抑 制 动 物 自 身 的 分 泌 袁 胆 汁 酸 在 不 同 日 粮 中 适 宜 的 添 加 量 还 有 待 于 研 究 遥 E.Baue 渊 2005 冤 等 研 究 表 明 袁 低 浓 度 的 胆 汁 酸 盐 能 够 提 高 脂 肪 酶 的 活 性 袁 但 高 浓 度 的 胆 汁 酸 盐 却 抑 制 脂 肪 酶 的 活 性 袁 所 以 袁 胆 汁 酸 的 合 适 添 加 量 对 其 功 能 的 发 挥 非 常 重 要 遥 榆 胆 汁 酸 提 高 了 能 量 的 利 用 袁 同 时 改 变 了 饲 料 中 的 能 蛋 比 袁 是 否 会 导 致 配 方 中 各 营 养 素 的 不 平 衡 袁 从 而 导 致 动 物 的 生 长 和 生 产 性 能 下 降 袁 这 还 有 待 于 进 一 步 研 究 遥 虞 从 动 物 身 上 收 集 的 胆 囊 存 在 一 定 的 安 全 隐 患 袁 能 否 知 道 主 要 发 挥 作 用 的 胆 汁 酸 的 品 种 袁 采 用 化 工 合 成 将 更 安 全 尧 更 经 济 袁 还 需 要 进 一 步 研 究 遥 总 之 袁 胆 汁 酸 作 为 一 种 饲 料 添 加 剂 袁 可 有 效 缓 解 由 于 脂 肪 及 脂 溶 性 维 生 素 消 化 不 良 引 起 的 各 种 问 题 袁 但 若 想 在 畜 牧 生 产 中 更 有 效 尧 更 合 理 地 应 用 胆 汁 酸 袁 还 有 一 系 列 问 题 需 要 研 究 和 解 决 遥 参 考 文 献 1 曾 端, 李 力, 王 群 初, 等. 胆 汁 酸 在 动 物 营 养 研 究 中 的 应 用. 广 东 饲 料,2002,11(3):34 耀 35 2 关 江, 曹 金 山, 李 培 锋, 等. 鸡 胆 汁 有 效 成 分 Tau 和 CA 的 抗 炎 抗 菌 作 用 研 究 [J]. 中 兽 医 医 药 杂 志,2001(2):3 耀 6 3 林 仕 梅, 叶 元 土, 罗 莉. 胆 汁 酸 添 加 剂 对 异 育 银 鲫 生 长 的 影 响 [J]. 广 东 饲 料,2003,12(3):14 耀 15 4 E. Baue,et al. Asianaust JAnim. Sci.,2005,18(2):282 耀 295 5 周 根 来, 王 恬. 动 物 脂 肪 代 谢 营 养 调 控 [J]. 饲 料 工 业,2003,24(1): 42 耀 44 6 王 吉 峰, 李 海 贤. 胆 汁 酸 对 蛋 鸡 脂 肪 代 谢 的 影 响 [J]. 饲 料 广 角, 2006(13):16 耀 17 7 沈 同. 生 物 化 学 ( 第 二 版 )[M]. 高 等 教 育 出 版 社,2002 ( 编 辑 : 王 芳,xfang2005@163.com)

饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 酶 制 剂 本 栏 目 由 北 京 挑 战 生 物 技 术 有 限 公 司 协 办 摘 要 用 纤 维 素 酶 和 甘 露 聚 糖 酶 对 壳 聚 糖 进 行 交 替 降 解, 对 酶 的 降 解 产 物 用 Sephadex G100 凝 胶 色 谱 柱 进 行 分 离, 分 析 水 解 产 物 的 相 对 分 子 质 量 分 布 研 究 表 明, 先 用 纤 维 素 酶 水 解 24 h, 再 用 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h, 可 将 分 子 量 为 100 万 左 右 的 壳 聚 糖 部 分 完 全 降 解, 产 物 相 对 分 子 质 量 主 要 分 布 在 10 000 Da 以 下 关 键 词 壳 聚 糖 ; 甘 露 聚 糖 酶 ; 纤 维 素 酶 ; 凝 胶 色 谱 中 图 分 类 号 Q814.4 李 专 胡 远 亮 梁 运 祥 李 专, 华 中 农 业 大 学 农 业 微 生 物 学 国 家 重 点 实 验 室, 430070, 武 汉 市 洪 山 区 绎 壳 聚 糖 是 甲 壳 素 的 脱 乙 酰 化 产 物 袁 是 迄 今 发 现 的 唯 一 的 天 然 碱 性 多 糖 袁 能 溶 于 醋 酸 等 有 机 酸 袁 具 有 良 好 的 生 物 相 溶 性 袁 且 无 毒 袁 可 生 物 降 解 遥 壳 聚 糖 分 子 中 有 胺 基 和 羟 基 袁 容 易 进 行 化 学 改 性 和 修 饰 袁 因 此 在 医 药 尧 纺 织 尧 饲 料 尧 食 品 尧 化 工 尧 生 物 尧 农 业 等 众 多 领 域 具 有 重 要 的 应 用 价 值 [13] 遥 但 是 袁 由 甲 壳 素 脱 乙 酰 化 制 得 的 壳 聚 糖 分 子 量 大 袁 具 有 紧 密 的 晶 体 结 构 袁 不 溶 于 普 通 溶 剂 袁 只 能 在 某 些 酸 性 介 质 中 溶 解 袁 这 使 其 应 用 受 到 了 极 大 限 制 遥 此 外 袁 分 子 量 对 壳 聚 糖 性 质 也 有 很 大 影 响 袁 不 同 分 子 量 的 壳 聚 糖 性 质 差 异 很 大 袁 有 时 甚 至 表 现 出 截 然 相 反 的 特 性 袁 而 壳 聚 糖 的 许 多 独 特 功 能 只 有 在 分 子 量 降 低 到 一 定 程 度 才 表 现 出 来 遥 降 解 壳 聚 糖 的 方 法 主 要 有 物 理 尧 化 学 和 酶 降 解 法 遥 酶 降 解 法 通 常 优 于 其 它 方 法 袁 这 是 由 于 酶 法 降 解 可 特 异 性 地 尧 选 择 性 地 切 断 壳 聚 糖 的 茁 1 袁 4 糖 苷 键 袁 降 解 过 程 和 降 解 产 物 的 分 子 量 易 于 被 控 制 袁 且 条 件 温 和 遥 目 前 袁 国 内 研 究 多 用 单 一 酶 或 是 用 混 合 酶 直 接 降 解 壳 聚 糖 袁 用 多 酶 交 替 降 解 却 不 多 见 遥 本 试 验 用 甘 露 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 袁 再 用 凝 胶 渗 透 色 谱 直 接 测 定 壳 聚 糖 的 相 对 分 子 质 量 分 布 [4] 遥 1 材 料 与 试 剂 1.1 菌 种 里 氏 木 霉 渊 Trichoderma reesei 冤 FT0418 和 短 小 芽 孢 杆 菌 渊 Bacillus pumilus 冤 FB04 均 由 华 中 农 业 大 学 发 酵 工 程 研 究 室 保 藏 遥 胡 远 亮 梁 运 祥 ( 通 讯 作 者 ), 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 :20070305 浙 江 省 重 大 科 技 攻 关 项 目 (2004C12010) 1.2 仪 器 752 紫 外 光 栅 分 光 光 度 计 渊 由 上 海 精 密 科 学 仪 器 有 限 公 司 生 产 冤 尧 HH4 数 显 恒 温 水 浴 锅 渊 由 江 苏 金 坛 市 荣 华 仪 器 制 造 有 限 公 司 生 产 冤 尧 旋 转 蒸 发 仪 渊 由 上 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 生 产 冤 尧 超 声 波 破 碎 仪 渊 由 宁 波 海 曙 金 达 超 声 波 设 备 有 限 公 司 生 产 冤 尧 乌 氏 粘 度 计 ( 由 成 都 科 析 仪 器 成 套 有 限 公 司 生 产 ) 遥 1.3 试 剂 粉 状 壳 聚 糖 院 脱 乙 酰 逸 90 豫 袁 由 国 药 集 团 生 产 遥 壳 聚 糖 胶 体 溶 液 院 在 3g 壳 聚 糖 中 加 入 75 ml 的 1% 醋 酸 溶 液 袁 85 益 水 浴 中 放 置 10 h 至 完 全 溶 解 袁 再 用 1% 醋 酸 定 溶 至 100 ml 袁 4 益 冷 藏 遥 葡 聚 糖 分 子 量 标 样 院 Dextran T10 袁 Mw 渊 分 子 量 冤 = 10 000 曰 Dextran T40 袁 Mw=40 000 曰 Dextran T70 袁 Mw= 70 000 曰 Dextran T500 袁 Mw=500 000 遥 分 子 量 标 样 均 由 Pharmacia 公 司 提 供 遥 1.4 培 养 基 产 纤 维 素 酶 固 体 培 养 基 院 稻 草 60 g 尧 麸 皮 40 g 尧 KH 2 PO 4 0.05 g 尧 CaCl 2 0.05 g 尧 MgSO 4 0. g 尧 (NH 4 ) 2 SO 4 1.8 g 尧 NaCl 0.1 g 尧 V 水 V 物 料 =1 2.2 尧 吐 温 80 1% 袁 ph 值 自 然 遥 产 甘 露 聚 糖 酶 一 级 种 子 培 养 基 院 胰 蛋 白 胨 10 g/l 尧 酵 母 提 取 物 5g/l 尧 NaCl 5g/l 袁 加 入 2% 魔 芋 精 粉 袁 灭 菌 袁 ph 值 7.4 遥 产 甘 露 聚 糖 酶 二 级 种 子 培 养 基 院 胰 蛋 白 胨 10 g/l 尧 酵 母 提 取 物 5g/l 尧 NaCl 5g/l 袁 加 入 8% 诱 导 物 ( 诱 导 物 制 备 院 在 13% 魔 芋 溶 液 中 加 入 2% 的 甘 露 聚 糖 粗 酶 液 袁 46 益 水 解 1h, 用 无 水 乙 醇 将 其 沉 淀 袁 干 燥 袁 ph 值 7.4) 遥 刚 果 红 麦 芽 汁 CMC 培 养 基 院 麦 芽 提 取 物 30 ml 尧 琼 脂 粉 15g 尧 CMCNa5g 袁 用 蒸 馏 水 定 容 至 1L 袁 121 益 尧 30 min 灭 菌 袁 趁 热 加 入 1ml 刚 果 红 袁 ph 值 5.5 遥 2 试 验 方 法 12

酶 制 剂 李 专 等 : 多 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 及 其 酶 解 产 物 分 子 量 分 布 的 研 究 2.1 粘 均 分 子 量 测 定 壳 聚 糖 分 子 量 的 测 定 方 法 有 粘 度 法 尧 蒸 汽 压 渗 透 法 尧 端 基 分 析 法 和 凝 胶 色 谱 法 等 遥 其 中 袁 粘 度 法 是 测 定 高 聚 分 子 量 的 一 种 常 用 方 法 [5] 渊 粘 度 法 测 定 方 法 为 院 将 0.1 mol/l CH 3 COONa 垣 0.2 mol/l CH 3 COOH 缓 冲 液 用 乌 氏 粘 度 计 袁 于 益 时 测 定 降 解 之 前 壳 聚 糖 胶 体 的 分 子 量 袁 外 推 作 图 法 计 算 粘 均 分 子 量 M=106 万 Da) 遥 2.2 纤 维 素 酶 的 发 酵 通 过 用 紫 外 线 和 Co 60 酌 射 线 对 里 氏 木 霉 进 行 复 合 诱 变, 用 CMC 刚 果 红 作 筛 选 培 养 基 袁 筛 选 出 透 明 圈 直 径 与 菌 落 直 径 之 比 大 的 菌 株 袁 接 种 到 产 酶 培 养 基 中 作 进 一 步 复 筛, 选 育 出 纤 维 素 酶 酶 活 较 高 的 菌 株, 接 种 于 固 体 培 养 基 中,30 益 恒 温 培 养, 每 24 h 测 一 次 纤 维 素 酶 酶 活 遥 培 养 4d 时 所 测 得 的 酶 活 为 993.829 8U/g, 此 时 酶 活 最 高 遥 纤 维 素 酶 酶 活 的 测 定 方 法 参 照 NY/T912 要 2004 遥 2.3 甘 露 聚 糖 酶 的 发 酵 将 短 小 芽 孢 杆 菌 接 入 一 级 种 子 培 养 基 袁 37 益 尧 180 r/min 条 件 下 培 养 48 h, 得 到 甘 露 聚 糖 酶 的 粗 酶 液 遥 将 短 小 芽 孢 杆 菌 接 入 二 级 种 子 培 养 基 袁 34 益 尧 180 r/min 条 件 下 袁 每 12 h 测 一 次 甘 露 聚 糖 酶 酶 活 [6 袁 7], 48h 时 所 测 定 甘 露 聚 糖 酶 活 为 456U/ml, 此 时 酶 活 最 高 遥 2.4 用 不 同 酶 制 剂 降 解 壳 聚 糖 的 比 较 分 别 采 取 不 同 的 处 理 方 式 院 淤 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 1ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h( 玉 ) 曰 于 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 1ml 纤 维 素 酶 水 解 48 h( 域 ) 曰 盂 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 垣 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 48 h ( 芋 ) 曰 榆 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 先 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h 袁 再 加 入 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 24 h( 郁 ) 曰 虞 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 先 加 入 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 24 h 袁 再 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h( 吁 ) 遥 酶 解 温 度 为 50 益 遥 将 酶 解 后 的 产 物 用 超 声 波 处 理 袁 作 用 条 件 为 院 振 幅 39 豫 尧 脉 冲 5s 尧 暂 停 5s 尧 作 用 10 min 袁 6000 r/min 下 离 心 10 min 袁 取 上 清 液 袁 经 Sephadex G100 柱 分 离 遥 2.5 Sephadex G100 柱 对 酶 解 产 物 的 分 离 Sephadex G100 柱 (1 伊 100 cm) 的 分 离 条 件 院 上 样 量 为 1ml 曰 体 积 流 量 为 75 ml/h 尧 2.5 ml/ 管 曰 洗 脱 液 为 ph 值 4.6 的 醋 酸 原 醋 酸 钠 缓 冲 液 曰 Sephadex G100 柱 相 对 分 子 量 标 定 采 用 标 准 分 子 质 量 葡 聚 糖 Dextran10 尧 Dextran40 尧 Dextran70 尧 Dextran500 曰 糖 含 量 采 用 苯 酚 原 硫 酸 法 测 定 [8] 遥 3 结 果 与 讨 论 3.1 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 由 于 甘 露 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 对 壳 聚 糖 都 有 降 解 13 作 用 袁 试 验 中 在 相 同 条 件 下 加 入 总 量 相 等 的 酶 液 对 同 一 壳 聚 糖 体 系 进 行 反 应 袁 对 水 解 产 物 进 行 凝 胶 色 谱 柱 分 离 袁 洗 脱 液 分 步 收 集 袁 并 检 测 洗 脱 液 中 的 糖 含 量 袁 以 比 较 各 种 条 件 对 壳 聚 糖 的 降 解 程 度 遥 试 验 中 选 取 Sephadex G100 柱 凝 胶 介 质 进 行 分 离 袁 该 介 质 的 机 械 强 度 较 好 袁 且 可 分 离 5000 耀 1000 000 分 子 量 范 围 的 多 糖 袁 比 较 适 合 壳 聚 糖 的 分 离 要 求 遥 标 准 分 子 量 葡 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 分 离 曲 线 见 图 1 袁 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 见 图 2 袁 从 图 2 中 可 以 看 出 相 对 分 子 质 量 曲 线 的 线 性 良 好 遥 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 Mw500 000 Mw10 000 Mw40 000 Mw70 000 0 10 30 50 70 90 图 1 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 标 准 分 子 量 葡 聚 糖 洗 脱 曲 线 =0.045 1+6.958 7 R 2 =0.998 6 3.0 20 40 60 80 图 2 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 3.2 原 料 壳 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 相 对 分 子 量 分 布 渊 见 图 3 冤 0.20 0.15 0.10 0.05 0 10 20 30 40 50 图 3 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 原 料 壳 聚 糖 相 对 分 子 质 量 分 布 曲 线 由 图 3 中 原 料 壳 聚 糖 的 相 对 分 子 质 量 分 布 曲 线 可 以 看 出 袁 原 料 壳 聚 糖 有 3 个 主 要 的 分 子 量 分 布 峰 袁

李 专 等 : 多 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 及 其 酶 解 产 物 分 子 量 分 布 的 研 究 酶 制 剂 第 一 个 峰 的 相 对 分 子 量 分 布 大 于 8.8 伊 10 5 曰 第 二 个 峰 的 相 对 分 子 质 量 分 布 在 4.0 伊 10 5 耀 1.8 伊 10 5 之 间 曰 第 三 个 峰 的 相 对 分 子 质 量 分 布 在 1.1 伊 10 5 以 下 遥 第 一 个 峰 的 峰 面 积 最 大 袁 主 峰 位 置 在 洗 脱 体 积 22.5 ml 处 遥 3.3 酶 解 后 壳 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 相 对 分 子 量 分 布 渊 见 图 4 尧 5 尧 6 尧 7 尧 8 冤 0.8 0.6 0.4 图 8 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 40 60 80 100 120 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 纤 维 素 酶 先 水 解 24 h 后 甘 露 聚 糖 酶 再 水 解 24 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 吁 ) 0.2 0 40 60 80 100 120 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 4 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 玉 ) 0.4 0.3 0.2 0.1 0 20 40 60 80 100 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 5 纤 维 素 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 域 ) 0.4 0.3 0.2 0.1 0 40 80 100 120 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 6 甘 露 聚 糖 酶 垣 纤 维 素 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 芋 ) 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 图 7 0.0 60 80 100 120 140 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 甘 露 聚 糖 酶 先 水 解 24 h 后 纤 维 素 酶 再 水 解 24 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 郁 ) 14 由 图 4 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h 渊 玉 冤 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 遥 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 82.5 ml 处 遥 通 过 图 2 的 标 准 曲 线 可 计 算 出 相 对 分 子 质 量 分 布 为 1.7 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 96% 遥 由 图 5 可 以 看 出 袁 纤 维 素 酶 水 解 48 h 渊 域 冤 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 遥 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 62.5 ml 处 遥 在 洗 脱 体 积 52.5 ml 处 还 出 现 一 杂 峰 袁 说 明 此 时 壳 聚 糖 分 子 量 组 分 不 纯 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.4 伊 10 4 左 右 袁 降 解 得 率 为 87% 遥 由 图 6 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 垣 纤 维 素 酶 水 解 48 h ( 芋 ) 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 85 ml 处 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.3 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 92.6% 遥 由 图 7 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 先 水 解 24 h 后 袁 纤 维 素 酶 再 水 解 24 h( 郁 ) 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 97.5 ml 处 遥 但 在 洗 脱 体 积 为 90 ml 处 出 现 一 个 杂 峰 袁 说 明 此 时 的 壳 聚 糖 的 分 子 量 组 分 不 纯 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 4.2 伊 10 2 左 右 袁 降 解 得 率 为 91.9% 遥 由 图 8 可 以 看 出 袁 纤 维 素 酶 先 水 解 24 h 后 袁 甘 露 聚 糖 酶 再 水 解 24 h( 吁 ) 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 85 ml 处 袁 此 时 的 OD 值 最 高 袁 说 明 降 解 程 度 最 好 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.3 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 91.8% 遥 3.4 分 析 与 讨 论 由 图 4 至 图 8 可 以 看 出 袁 通 过 降 解 后 分 子 量 和 降 解 得 率 的 比 较 袁 可 以 看 出 甘 露 聚 糖 酶 的 降 解 能 力 比 纤 维 素 酶 的 降 解 能 力 要 强 遥 而 且 袁 先 用 纤 维 素 酶 水 解 后 袁 再 加 入 甘 露 聚 糖 酶 水 解 袁 降 解 效 果 最 好 遥 可 能 是 由 于 纤 维 素 酶 是 由 内 切 型 葡 聚 糖 酶 尧 外 切 型 葡 聚 糖 酶

酶 制 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 丁 斌 鹰 侯 永 清 徐 宁 郭 希 柱 张 晓 明 摘 要 试 验 选 用 360 只 21 日 龄 体 重 为 (1 130.83 依 2.07) g 的 樱 桃 谷 肉 鸭, 随 机 分 为 4 组, 每 组 3 个 重 复 ( 圈 ), 每 个 重 复 ( 圈 )30 只 鸭 分 为 正 负 对 照 组, 试 验 玉 组 和 试 验 域 组, 分 别 饲 喂 玉 米 豆 粕 型 日 粮 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 垣 300 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 和 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 垣 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂, 各 组 日 粮 营 养 水 平 一 致 进 行 了 为 期 14 d 的 饲 养 试 验, 在 试 验 后 期 进 行 了 消 化 试 验 试 验 结 果 表 明 : 在 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 肉 鸭 日 粮 中 添 加 300 和 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂, 与 正 对 照 组 和 负 对 照 组 相 比, 肉 鸭 平 均 日 增 重 提 高 4.45% 4.30 豫 和 6.01% 4.92 豫, 料 肉 比 降 低 8.14% 10.47 和 8.85 豫 11.15%(P<0.05); 与 负 对 照 组 相 比, 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 2.87% 和 2.20%, 总 磷 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 23.23% 和 13.89 豫 (P<0.05), 植 酸 磷 的 利 用 率 分 别 提 高 21.62% 和 30.42%(P< 0.01), 粗 纤 维 的 利 用 率 分 别 提 高 32.30% 和 92.68%(P<0.01) 关 键 词 稻 谷 专 用 酶 制 剂 ; 生 长 性 能 ; 营 养 物 质 表 观 利 用 率 ; 肉 鸭 中 图 分 类 号 A834 +.89 丁 斌 鹰, 武 汉 工 业 学 院 饲 料 科 学 系, 副 教 授,430023, 湖 北 武 汉 汉 口 常 青 花 园 特 一 号 侯 永 清 徐 宁 郭 希 柱 张 晓 明, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 :20070323 稻 谷 是 我 国 的 主 要 粮 食 作 物, 含 有 丰 富 的 营 养 物 质, 但 较 少 用 于 配 合 饲 料 生 产, 其 原 因 之 一 是 稻 谷 中 存 在 较 多 的 抗 营 养 因 子, 降 低 了 稻 谷 的 有 效 能 值, 阻 碍 了 其 它 营 养 物 质 的 吸 收 和 利 用, 大 大 限 制 了 稻 谷 在 饲 粮 和 纤 维 素 二 糖 酶 组 成 的 多 酶 体 系 袁 经 过 纤 维 素 酶 水 解 参 考 文 献 后 袁 其 内 切 型 葡 聚 糖 酶 使 壳 聚 糖 内 部 的 甘 露 聚 糖 酶 的 作 用 位 点 暴 露 袁 使 其 降 解 效 果 更 好 遥 1 刘 晓, 杜 昱 光, 白 血 芳. 壳 聚 糖 诱 导 小 麦 种 胚 细 胞 抗 脱 氧 化 雪 腐 镰 刀 菌 烯 醇 抑 制 的 效 应 [J]. 植 物 学 报,2001,43(4):370 耀 374 从 凝 胶 柱 测 得 的 底 物 分 子 量 比 粘 度 法 测 得 的 粘 2 严 淑 兰, 陆 大 年. 降 解 壳 聚 糖 用 于 棉 的 抗 皱 整 理 [J]. 染 整 技 术, 均 分 子 量 小 得 多 袁 粘 度 法 和 凝 胶 渗 透 色 谱 法 都 是 基 于 2001,23(3):13 耀 17 3 Chung YS, Lee K K,Kin JW. Durable Press and Antimicrobial 聚 合 物 的 流 体 力 学 体 积 袁 与 分 子 量 尧 链 的 柔 韧 性 及 与 Finshing of Cotton Fabrics with a Critric Acid and Chitosan 溶 剂 的 相 互 作 用 有 关 遥 此 外 袁 由 于 Sephadex G100 柱 Treatment[J]. Tex. Res.,1998,68(10):772 耀 775 的 分 子 量 标 准 曲 线 采 用 的 是 葡 聚 糖 分 子 袁 葡 聚 糖 分 子 结 构 与 壳 聚 糖 的 分 子 结 构 之 间 有 一 定 的 差 异 袁 虽 然 都 4 姚 汝 华. 微 生 物 工 程 工 艺 原 理 [M]. 广 州 : 华 南 理 工 大 学 出 版 社, 2003. 297 耀 309 5 唐 振 兴, 石 陆 娥, 易 喻. 壳 聚 糖 及 其 降 解 分 子 量 的 测 定 [J]. 化 工 技 术 是 无 规 律 的 线 性 分 子 袁 但 壳 聚 糖 是 2 氨 基 2 脱 氧 与 开 发,2004,33(6):38 耀 39 茁 D 葡 萄 糖 和 少 量 的 N 乙 酰 氨 基 2 脱 氧 茁 D 葡 6 姚 冬 生, 黄 小 葵, 刘 大 岭, 等.Armillariella tabescens EJLY2098 茁 甘 萄 糖 通 过 茁 1 袁 4 糖 苷 键 连 接 的 直 链 多 聚 糖 袁 葡 聚 糖 是 葡 萄 糖 通 过 琢 1 袁 4 糖 苷 键 连 接 的 直 链 多 糖 袁 两 者 与 露 聚 糖 酶 的 诱 导 纯 化 及 酶 学 性 质 分 析 [J]. 中 国 生 物 工 程 杂 志, 2006,26(7):57 耀 63 Sephadexe G100 柱 的 吸 引 力 不 同 遥 凝 胶 柱 测 得 的 水 解 产 物 分 子 量 分 布 袁 虽 然 不 能 真 实 地 反 映 相 对 分 子 质 量 7 李 剑 芳, 张 静 娟, 邬 敏 辰, 等. 酸 性 茁 甘 露 聚 糖 酶 固 态 发 酵 工 艺 与 粗 酶 性 质 [J]. 食 品 科 学,2006,27(5):143 耀 147 大 小 袁 但 它 们 之 间 的 相 互 比 较 能 说 明 酶 水 解 效 果 遥 8 张 志 军, 刘 建 华, 李 淑 芳, 等. 灵 芝 多 糖 含 量 的 苯 酚 硫 酸 法 检 测 研 究 [J]. 食 品 工 业 科 技,2006,27(2):193 耀 195 本 试 验 是 用 酶 法 阶 梯 降 解 壳 聚 糖 袁 与 单 纯 的 酶 法 降 解 相 比 有 一 定 的 创 新 袁 且 操 作 简 单 袁 易 于 控 制 袁 在 饲 料 尧 食 品 等 工 业 上 有 良 好 的 应 用 前 景 遥 ( 编 辑 : 高 雁,snowyan78@tom.com) 15

丁 斌 鹰 等 : 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 酶 制 剂 中 的 应 用 范 围 遥 随 着 酶 制 剂 的 研 究 与 应 用, 为 研 究 稻 谷 在 饲 粮 中 作 为 主 要 能 量 来 源 提 供 了 新 的 思 路 遥 因 此, 设 计 试 验 研 究 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 的 影 响 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 材 料 1.1.1 复 合 酶 制 剂 稻 谷 专 用 酶 制 剂 由 武 汉 工 业 学 院 饲 料 科 学 系 研 制 袁 其 中 含 有 纤 维 素 酶 尧 植 酸 酶 尧 木 聚 糖 酶 和 茁 原 葡 聚 糖 酶 遥 1.1.2 试 验 动 物 由 武 汉 纳 百 川 农 业 有 限 公 司 提 供 的 21 日 龄 尧 体 重 为 渊 1130.83 依 2.07 冤 g 的 樱 桃 谷 肉 鸭 360 只 遥 1.1.3 试 验 日 粮 试 验 日 粮 分 4 种 袁 均 配 制 成 粉 料 袁 基 础 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 表 1 原 料 渊 豫 冤 玉 米 稻 谷 大 豆 粕 米 糠 菜 籽 粕 棉 籽 粕 豆 油 石 粉 磷 酸 氢 钙 盐 蛋 氨 酸 防 霉 剂 预 混 料 正 负 对 照 组 基 础 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 正 对 照 组 62.49 0 19.51 5.81 5.00 3.00 0.14 1.21 1.17 0.39 0.13 0.15 1.00 负 对 照 组 22.13 40.00 19.51 5.80 5.00 3.00 0.71 1.30 0.92 0.39 0.09 0.15 1.00 营 养 水 平 代 谢 能 渊 MJ/kg 冤 粗 蛋 白 渊 % 冤 赖 氨 酸 渊 % 冤 蛋 氨 酸 渊 % 冤 钙 渊 % 冤 总 磷 渊 % 冤 10.78 17.35 0.80 0.38 0.80 0.65 注 院 1. 试 验 玉 尧 域 组 的 日 粮 在 负 对 照 组 的 基 础 上 分 别 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 300 g/t 和 600 g/t 遥 为 保 证 日 粮 水 平 袁 将 酶 制 剂 添 加 到 预 混 料 中 曰 2. 预 混 料 向 每 千 克 全 价 日 粮 提 供 院 VA 3000 IU 尧 VD 3 610 IU 尧 VE 20 IU 尧 VB 2 5mg 尧 VB 12 0.021 mg 尧 生 物 素 0.1 mg 尧 泛 酸 10 mg 尧 烟 酸 15 mg 尧 Fe 60 mg 尧 Cu 5mg 尧 Mn 10 mg 尧 Zn 80 mg 尧 I0.35 mg 尧 Se 0.15 mg 曰 3. 营 养 水 平 值 为 计 算 值 遥 1.2 试 验 方 法 1.2.1 饲 养 试 验 选 用 360 只 21 日 龄 尧 体 重 为 (1 130.83 依 2.07) g 的 樱 桃 谷 肉 鸭, 按 圈 体 重 一 致 的 原 则 随 机 分 为 4 组, 每 组 3 个 重 复 ( 圈 ), 每 个 重 复 ( 圈 )30 只 鸭 遥 分 为 正 对 照 组 尧 负 对 照 组 尧 试 验 玉 组 和 试 验 域 组, 分 别 饲 喂 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 尧 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 尧 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 垣 300 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 和 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 垣 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 遥 采 用 圈 内 网 上 平 养, 每 重 复 设 一 个 食 槽 和 一 个 水 槽, 湿 拌 料 袁 自 由 采 食 尧 饮 水, 每 日 早 上 8 点 清 洁 水 槽 一 次 遥 预 饲 期 7d, 正 试 期 14 d 遥 按 照 武 汉 纳 百 川 农 业 有 限 公 司 肉 鸭 养 殖 基 地 的 正 常 饲 养 管 理 和 防 疫 程 序 进 行 饲 养 管 理 遥 试 验 开 始 后, 记 录 鸭 群 的 健 康 状 况 和 每 日 饲 喂 量 曰 饲 养 试 验 结 束 时, 停 止 喂 料 12 h 袁 禁 水 4h 袁 称 重 遥 计 算 平 均 日 增 重 和 料 肉 比 遥 1.2.2 消 化 试 验 在 饲 养 试 验 结 束 前 7d, 每 圈 选 择 体 重 基 本 一 致 的 5 只 肉 鸭 袁 以 三 氧 化 二 铬 为 外 源 指 示 剂 进 行 消 化 试 验 遥 在 饲 粮 中 均 匀 地 拌 入 0.3% 三 氧 化 二 铬, 预 饲 期 7d 袁 收 粪 期 3d 遥 将 粪 样 用 10% 盐 酸 按 体 积 比 5 1 拌 匀 袁 于 原 4 益 下 密 封 保 存 袁 运 回 实 验 室 后 于 (65 依 2) 益 烘 箱 中 鼓 风 干 燥 袁 制 取 风 干 样 品 遥 最 后 将 3d 分 别 制 取 的 粪 样 混 合 均 匀 遥 根 据 试 验 饲 料 及 粪 样 中 指 示 剂 和 营 养 物 质 的 含 量 计 算 养 分 的 表 观 消 化 率 遥 1.3 数 据 统 计 与 分 析 数 据 采 用 SAS8.0 软 件 进 行 方 差 分 析 袁 LSD 法 渊 最 小 显 著 极 差 法 冤 对 数 据 进 行 多 重 比 较 袁 取 琢 越 0.05 遥 表 中 数 据 为 平 均 数 依 标 准 差 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 的 影 响 ( 见 表 2) 由 表 2 可 见 袁 试 验 玉 尧 域 组 与 正 对 照 组 相 比, 肉 鸭 平 均 日 增 重 分 别 提 高 5.54 豫 和 4.45% 曰 平 均 日 采 食 量 分 别 降 低 了 3.24% 和 6.31% 曰 料 肉 比 分 别 降 低 8.14% 和 10.47%(P<0.05) 遥 因 此 袁 本 试 验 条 件 下, 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 ( 含 40 豫 稻 谷 ) 中 添 加 复 合 酶 制 剂 对 肉 鸭 的 饲 养 效 果 优 于 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 遥 项 目 初 始 体 重 渊 g/ 只 冤 末 期 体 重 渊 g/ 只 冤 平 均 日 增 重 渊 g/ 只 冤 平 均 日 采 食 量 渊 g/ 只 冤 料 肉 比 表 2 正 对 照 组 11.56 依 3.64 2261.1 依 20.29 81.11 依 1.67 ab 209.3 依 2.53 a 2.58 依 0.02 a 注 院 表 中 同 行 数 据 肩 标 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 复 合 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 的 影 响 负 对 照 组 1132.22 依 2.94 2262.78 依 31.28 80.75 依 3.08 b 210.31 依 1.59 a 2.60 依 0.12 a 16 试 验 玉 组 1136.67 依 6.31 2335 依 33.34 85.60 依 3.02 a 202.51 依 2.81 ab 2.37 依 0.14 b 试 验 域 组 1124.44 依 7.47 2310.56 依 27.22 84.72 依 1.58 a 196.10 依 4.10 b 2.31 依 0.09 b

酶 制 剂 丁 斌 鹰 等 : 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 试 验 玉 尧 域 组 与 不 添 加 复 合 酶 制 剂 的 负 对 照 组 相 比 袁 其 平 均 日 增 重 分 别 提 高 6.01% 和 4.92% 渊 P<0.05 冤 曰 平 均 日 采 食 量 分 别 降 低 了 3.71% 和 6.76% 曰 料 肉 比 分 别 降 低 8.85% 和 11.15% 渊 P<0.05 冤 遥 试 验 结 果 表 明 袁 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 可 以 改 善 采 食 稻 谷 型 日 粮 肉 鸭 的 生 长 性 能 袁 提 高 生 长 速 度 遥 试 验 玉 尧 域 组 的 试 验 数 据 表 明, 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 添 加 300 g/t 和 600 g/t 的 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 改 善 肉 鸭 的 饲 养 效 果 相 当 袁 在 统 计 学 上 差 异 不 显 著 袁 试 验 玉 组 和 试 验 域 组 都 可 以 获 得 较 好 的 经 济 效 益 遥 因 此 袁 考 虑 生 产 成 本 袁 本 试 验 条 件 下 的 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 只 需 要 添 加 300 g/t 的 稻 谷 专 用 酶 制 剂 就 能 达 到 较 好 的 促 生 长 效 果 遥 2.2 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 饲 料 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 饲 料 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 (%) 项 目 粗 蛋 白 表 观 利 用 率 总 磷 表 观 利 用 率 植 酸 磷 利 用 率 粗 纤 维 利 用 率 负 对 照 组 78.81 依 1.61 61.13 依 0.55 c 22.16 依 0.26 Bc 12.85 依 3.12 Cc 试 验 玉 组 81.07 依 1.57 75.33 依 0.81 a 26.95 依 0.59 Aa 17.00 依 2. Bb 试 验 域 组 80.54 依 1.69 69.62 依 0.48 b 28.90 依 0.26 Ab 24.76 依 1.39 Aa 注 院 表 中 同 行 数 据 肩 标 小 写 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 (P<0.05) 曰 大 写 字 母 不 同 表 示 差 异 极 显 著 (P<0.01) 遥 由 表 3 可 见 袁 试 验 玉 组 和 试 验 域 组 明 显 改 善 了 肉 鸭 对 稻 谷 的 利 用 能 力 遥 与 负 对 照 组 相 比 袁 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 2.87% 和 2.20% 曰 总 磷 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 23.23% 和 13.89(P<0.05) 曰 植 酸 磷 的 利 用 率 分 别 提 高 21.62% 和 30.42% 渊 P<0.01 冤 曰 粗 纤 维 的 利 用 率 分 别 提 高 32.30% 和 92.68% 渊 P<0.01 冤 遥 3 讨 论 稻 谷 与 玉 米 相 比 袁 具 有 潜 在 的 营 养 价 值 袁 但 其 饲 用 效 果 较 差 袁 究 其 原 因 是 稻 谷 中 的 抗 营 养 因 子 含 量 高 袁 尤 其 是 其 中 所 含 的 木 质 素 尧 纤 维 素 尧 果 胶 尧 阿 拉 伯 木 聚 糖 和 茁 原 葡 聚 糖 等 的 抗 营 养 作 用 极 大 地 限 制 了 稻 谷 的 饲 用 价 值 遥 Choct 渊 1990 冤 [1] 尧 李 明 荃 渊 1996) [2] 尧 陈 旭 东 (2001) [3] 的 报 道 表 明 袁 在 家 禽 日 粮 中 添 加 单 一 或 复 合 酶 制 剂 至 少 通 过 3 种 途 径 来 改 善 家 禽 小 肠 中 营 养 物 质 的 消 化 和 吸 收 袁 达 到 促 进 动 物 生 长 和 提 高 饲 料 转 化 率 的 目 的 院 淤 增 加 非 淀 粉 多 糖 的 降 解 速 度 而 降 低 小 肠 内 容 物 的 粘 度 曰 于 破 碎 细 胞 壁 尧 促 进 由 细 胞 壁 包 裹 着 的 蛋 白 质 和 脂 肪 的 释 放 袁 有 利 于 肠 道 内 的 消 化 酶 对 营 养 物 质 的 充 分 接 触 曰 盂 消 除 可 溶 性 非 淀 粉 多 糖 对 内 源 性 消 化 酶 的 抑 制 作 用 等 遥 本 试 验 结 果 再 次 证 实 了 上 述 结 果 袁 说 明 在 纤 维 含 量 较 高 的 日 粮 中 添 加 复 合 酶 制 剂 袁 17 有 助 于 提 高 肉 鸭 的 消 化 机 能 袁 改 善 其 生 长 性 能 遥 张 堂 田 等 (1999) [4] 报 道 袁 日 粮 中 添 加 0.5% 木 聚 糖 酶 尧 0.5% 纤 维 素 酶 和 0.1% 茁 原 葡 聚 糖 酶 袁 能 显 著 提 高 樱 桃 谷 肉 鸭 的 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 (P<0.05) 遥 高 树 冬 等 渊 2001 冤 [5] 在 稻 谷 日 粮 中 添 加 复 合 酶 制 剂 袁 肉 鸭 饲 料 转 化 率 提 高 2.26% 耀 4.53% 遥 上 述 报 道 与 本 试 验 研 究 结 果 基 本 一 致 遥 目 前 有 较 多 的 文 献 报 道 单 一 酶 和 2 种 或 3 种 酶 的 组 合 对 家 禽 采 食 麦 类 日 粮 的 效 果 袁 而 很 少 见 到 类 似 本 试 验 研 究 的 纤 维 素 酶 尧 植 酸 酶 尧 木 聚 糖 酶 和 葡 聚 糖 酶 4 种 酶 的 组 合 对 肉 鸭 采 食 稻 谷 型 日 粮 的 饲 喂 效 果 袁 因 此 袁 关 于 多 酶 的 复 合 效 应 还 需 要 进 一 步 有 针 对 性 的 研 究 和 探 讨 遥 4 小 结 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 肉 鸭 日 粮 ( 含 40% 稻 谷 ) 中 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 袁 可 显 著 提 高 肉 鸭 平 均 日 增 重, 降 低 料 肉 比 渊 P<0.05 冤 曰 可 提 高 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 袁 显 著 提 高 总 磷 表 观 利 用 率 渊 P<0.05 冤 尧 极 显 著 提 高 植 酸 磷 和 粗 纤 维 的 利 用 率 渊 P<0.01 冤 遥 参 考 文 献 1 Choct Mannison G. Antinutritiveactivity of wheat pentosans in broiler diets [J]. Brit. Poultry Sci., 1990(30):811 耀 812 2 李 明 荃 译. 肠 内 容 物 粘 度 和 肉 鸡 性 能 [J]. 国 外 畜 牧 学 猪 与 禽, 1996(4):4 耀 7 3 陈 旭 东. 非 淀 粉 多 糖 的 抗 营 养 作 用 [J]. 当 代 畜 牧,2001(6):40 4 张 堂 田, 孟 秀 丽, 王 时 昌. 酶 制 剂 对 樱 桃 谷 肉 鸭 生 产 性 能 的 影 响 [J]. 安 徽 农 业 科 学,1999,27(4):403 耀 404 5 高 树 冬, 马 健, 尤 佩 华, 等. 酶 制 剂 在 肉 鸭 日 粮 中 的 应 用 [J]. 兽 药 与 饲 料 添 加 剂,2001(6):8 耀 9 窑 信 息 采 撷 窑 ( 编 辑 : 高 雁,snowyan78@tom.com) 波 兰 发 现 胶 原 质 可 保 持 肉 类 营 养 波 兰 农 业 大 学 的 研 究 人 员 发 现, 往 肉 里 注 射 胶 原 质 可 保 持 肉 类 营 养, 抑 制 碘 和 维 生 素 B 1 的 流 失 肉 制 品 在 储 存 和 烹 饪 时, 可 能 失 去 一 定 量 的 碘 和 维 生 素 B 1 SCI 的 农 业 食 品 科 学 杂 志 报 道, 通 过 增 加 胶 原 纤 维 和 胶 原 质 水 解 产 物 可 以 使 肉 里 的 碘 化 钾 得 到 饱 和, 这 种 方 法 比 使 用 精 制 碘 盐 的 方 法 更 加 有 效 胶 原 质 能 使 鲜 肉 保 持 一 定 的 营 养, 它 也 适 合 冷 冻 储 存 的 肉 类 在 研 究 中, 胶 原 质 被 加 入 到 肉 球 里, 充 当 碘 盐 的 作 用 在 储 存 和 烹 饪 这 些 肉 球 的 时 候, 对 碘 和 维 生 素 B 1 的 含 量 水 平 进 行 测 量, 结 果 显 示, 它 们 都 被 保 存 在 肉 里

饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 酶 制 剂 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 明 建 华 酶 是 活 细 胞 产 生 的 具 有 特 殊 生 物 催 化 功 能 的 生 物 大 分 子 物 质 渊 蛋 白 质 或 RNA 冤 袁 它 广 泛 分 布 于 动 物 尧 植 物 和 微 生 物 体 内 袁 参 与 机 体 的 各 种 生 化 反 应 遥 酶 制 剂 是 一 种 以 酶 为 主 要 功 能 因 子 袁 通 过 特 定 生 产 工 艺 加 工 而 成 的 饲 料 添 加 剂 遥 目 前 袁 酶 制 剂 的 研 究 主 要 集 中 在 外 源 酶 在 畜 禽 饲 料 中 的 应 用 袁 大 部 分 是 关 于 酶 制 剂 作 用 效 果 的 研 究 遥 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 应 用 还 处 在 摸 索 阶 段 袁 本 文 就 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 合 理 应 用 进 行 了 综 述 遥 可 弥 补 内 源 性 蛋 白 酶 的 不 足 渊 特 别 是 幼 体 冤 袁 提 高 蛋 白 质 吸 收 率 10% 左 右 袁 可 起 到 节 约 蛋 白 质 的 目 的 遥 糖 类 物 质 是 廉 价 的 饲 料 原 料 袁 尽 管 水 产 动 物 对 淀 粉 的 消 化 吸 收 率 很 低 袁 但 为 了 保 证 其 安 全 性 和 降 低 成 本 袁 在 饲 料 中 的 添 加 量 仍 达 到 20%~50% 遥 加 入 淀 粉 酶 和 糖 化 酶 后 袁 可 以 补 充 水 产 动 物 严 重 缺 乏 的 淀 粉 酶 袁 将 淀 粉 的 消 化 吸 收 率 从 20%~40% 提 高 到 80% 以 上 袁 从 而 起 到 增 加 饲 料 能 量 尧 提 高 饲 料 利 用 率 尧 减 少 蛋 白 质 作 为 能 量 消 耗 的 作 用 袁 进 而 达 到 降 低 饲 料 成 本 的 目 的 遥 因 此 袁 1 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 应 用 外 源 性 消 化 酶 对 水 产 动 物 来 说 非 常 重 要 遥 外 源 性 消 化 1.1 直 接 分 解 营 养 底 物 袁 提 高 代 谢 水 平 袁 降 低 饵 料 系 酶 还 可 刺 激 水 产 动 物 内 源 性 消 化 酶 的 更 多 分 泌 袁 并 提 数 具 有 生 物 活 性 的 酶 制 剂 袁 能 有 效 地 将 饲 料 中 一 些 高 食 糜 中 内 源 性 消 化 酶 的 活 性 袁 加 速 营 养 物 质 的 消 化 和 吸 收 袁 从 而 提 高 饲 料 的 利 用 率 遥 乔 秀 亭 等 渊 2002 冤 研 大 分 子 多 聚 体 分 解 和 消 化 成 水 产 动 物 容 易 吸 收 的 营 养 物 质 或 分 解 成 小 片 段 营 养 物 质 袁 供 其 它 消 化 酶 进 一 步 消 化 袁 一 些 水 产 动 物 本 身 难 以 分 解 和 吸 收 的 大 分 子 物 质 袁 通 过 添 加 酶 制 剂 促 进 饲 料 中 营 养 物 质 的 分 解 和 消 化 袁 提 高 饲 料 的 利 用 率 遥 在 草 鱼 饲 料 中 添 加 0.1% 酶 制 剂 袁 试 验 组 草 鱼 的 生 长 速 度 比 对 照 组 提 高 了 6.6% 袁 饵 料 系 数 降 低 了 0.29 曰 试 验 组 的 鱼 体 粗 蛋 白 质 含 量 比 究 了 酶 制 剂 对 鲤 鱼 消 化 酶 活 性 的 影 响 袁 添 加 复 合 酶 制 剂 后 袁 各 试 验 组 肠 道 和 肝 胰 脏 的 蛋 白 酶 与 淀 粉 酶 活 性 均 比 对 照 组 有 所 提 高 袁 减 少 了 蛋 白 质 作 为 能 量 的 消 耗 袁 起 到 间 接 节 约 蛋 白 质 的 作 用 遥 仲 军 等 渊 1995 冤 关 于 对 虾 的 试 验 表 明 袁 外 源 酶 系 可 以 通 过 对 动 物 自 身 内 源 酶 原 的 激 活 袁 增 强 内 源 酶 的 作 用 袁 促 进 肝 胰 脏 的 消 化 作 用 袁 提 高 饲 料 的 总 消 化 率 和 蛋 白 质 消 化 率 遥 对 照 组 略 高 袁 而 粗 脂 肪 略 低 曰 试 验 组 的 每 千 克 鱼 饲 料 成 本 比 对 照 组 降 低 8.93% 遥 该 酶 制 剂 使 草 鱼 对 无 机 盐 1.3 消 除 饲 料 中 的 抗 营 养 因 子 袁 改 善 消 化 机 能 配 合 饲 料 中 含 有 的 植 物 性 原 料 常 存 在 一 些 非 淀 转 化 利 用 率 提 高 袁 对 各 种 营 养 物 质 的 吸 收 均 衡 有 效 袁 表 明 该 酶 制 剂 能 促 进 鱼 体 内 各 种 生 化 反 应 袁 提 高 鱼 体 内 蛋 白 质 转 化 率 遥 粉 多 糖 尧 果 胶 尧 纤 维 素 聚 合 物 袁 对 水 产 动 物 的 消 化 吸 收 存 在 一 定 的 抗 营 养 作 用 遥 它 们 在 肠 道 中 部 分 溶 解 袁 从 而 使 食 糜 粘 度 增 大 袁 导 致 养 分 溶 出 速 度 减 缓 袁 养 分 和 1.2 补 充 外 源 消 化 酶 袁 激 活 内 源 消 化 酶 分 泌 袁 提 高 饲 内 源 消 化 酶 扩 散 速 度 减 慢 袁 肠 道 机 械 混 合 食 糜 的 能 力 料 利 用 率 在 畜 禽 饲 料 中 添 加 外 源 酶 对 动 物 内 源 酶 活 性 影 响 的 研 究 较 多 遥 奚 刚 等 渊 1999 冤 在 猪 尧 鸡 饲 料 中 添 加 外 源 酶 的 试 验 结 果 表 明 袁 外 源 酶 能 促 进 内 源 消 化 酶 分 泌 袁 提 高 饲 料 利 用 率 遥 水 产 动 物 消 化 系 统 不 如 畜 禽 完 善 袁 内 源 酶 分 泌 不 如 畜 禽 完 全 遥 鱼 类 消 化 道 中 不 含 木 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 袁 而 淀 粉 酶 的 活 性 也 很 低 遥 尽 管 鱼 虾 对 蛋 白 质 有 较 高 的 消 化 吸 收 率 袁 但 内 源 蛋 白 酶 还 不 能 完 全 发 挥 作 用 袁 加 入 外 源 性 蛋 白 酶 后 袁 减 弱 袁 饲 料 消 化 率 降 低 遥 同 时 袁 可 溶 性 非 淀 粉 多 糖 还 可 使 肠 粘 膜 表 面 不 动 水 层 增 厚 袁 致 使 营 养 物 质 扩 散 受 阻 袁 影 响 水 产 动 物 对 有 效 营 养 成 分 的 消 化 和 吸 收 遥 此 外 袁 粪 便 排 出 量 因 未 消 化 物 质 的 增 多 而 增 加 袁 还 会 导 致 动 物 胃 肠 道 中 微 生 物 繁 殖 增 多 袁 并 对 水 产 品 品 质 造 成 不 良 影 响 遥 酶 制 剂 中 的 多 种 酶 袁 特 别 是 茁 葡 聚 糖 酶 尧 果 糖 酶 和 纤 维 素 酶 能 将 这 些 物 质 分 解 为 小 分 子 物 质 袁 从 而 降 低 消 化 道 中 物 质 的 粘 度 袁 促 进 动 物 肠 道 的 蠕 动 袁 有 效 地 消 除 这 些 抗 营 养 因 子 的 不 良 影 响 袁 改 善 水 产 动 物 的 消 化 机 能 遥 如 纤 维 素 酶 由 葡 聚 糖 外 切 酶 尧 葡 聚 糖 内 切 酶 以 及 茁 葡 聚 糖 苷 酶 3 种 具 有 高 度 协 同 作 明 建 华, 南 京 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院, 工 程 师,210095, 江 苏 省 南 京 卫 岗 1 号 收 稿 日 期 :20070312 用 的 酶 共 同 组 成 袁 它 能 将 菜 籽 饼 尧 棉 籽 粕 尧 豆 粕 中 的 植 物 纤 维 分 解 成 葡 萄 糖 袁 破 坏 植 物 细 胞 壁 袁 释 放 内 容 物 袁 从 而 综 合 提 高 饲 料 利 用 率 遥 余 丰 年 等 渊 2001 冤 在 以 豆 18

酶 制 剂 明 建 华 : 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 饼 尧 菜 籽 饼 为 主 的 饲 料 中 添 加 2400 U/kg 纤 维 素 酶 饲 喂 团 头 鲂 袁 提 高 了 鱼 体 对 饲 料 营 养 物 质 的 利 用 率 遥 周 小 秋 等 渊 2001 冤 在 含 豆 粕 尧 菜 粕 尧 棉 仁 粕 为 主 的 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 袁 提 高 了 饲 料 利 用 率 袁 降 低 了 鲤 鱼 消 化 道 食 糜 的 粘 度 袁 有 利 于 营 养 物 质 的 吸 收 利 用 遥 另 外 袁 豆 粕 等 饼 粕 类 饲 料 中 含 有 多 种 抗 营 养 因 子 袁 如 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 尧 植 物 凝 集 素 和 琢 半 乳 糖 苷 等 遥 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 和 小 肠 液 中 胰 蛋 白 酶 结 合 袁 生 成 无 活 性 的 复 合 物 袁 降 低 胰 蛋 白 酶 的 活 性 袁 导 致 饲 料 蛋 白 质 消 化 率 下 降 遥 同 时 袁 由 于 和 胰 蛋 白 酶 结 合 袁 动 物 体 内 蛋 白 质 内 源 性 消 耗 袁 造 成 体 内 含 硫 氨 基 酸 丢 失 袁 加 剧 了 由 于 豆 粕 中 含 硫 氨 基 酸 短 缺 引 起 的 动 物 体 内 代 谢 紊 乱 袁 导 致 生 长 受 阻 或 停 滞 遥 杨 丽 杰 等 渊 2000 冤 报 道 袁 外 源 蛋 白 酶 可 在 常 温 下 使 大 豆 中 的 抗 营 养 因 子 失 活 袁 提 高 其 利 用 率 遥 在 豆 科 饲 料 中 添 加 琢 半 乳 糖 苷 酶 袁 可 增 加 豆 科 饲 料 中 低 聚 糖 的 消 化, 减 轻 或 消 除 消 化 紊 乱 遥 究 袁 无 胃 鱼 对 植 酸 磷 的 平 均 消 化 率 为 8% 袁 有 胃 鱼 稍 高 袁 如 虹 鳟 为 19% 遥 因 此 袁 有 大 量 的 植 酸 磷 被 浪 费 袁 不 仅 使 吸 收 的 磷 不 足 袁 而 且 需 补 充 无 机 磷 袁 从 而 造 成 水 环 境 污 染 遥 近 年 来 袁 许 多 研 究 表 明, 在 水 产 动 物 饲 料 中 添 加 植 酸 酶 可 大 大 降 低 排 泄 物 中 磷 和 其 它 营 养 素 的 浓 度 袁 减 少 对 水 体 的 污 染 袁 改 善 饲 养 环 境 遥 一 般 认 为 袁 添 加 植 酸 酶 可 使 磷 的 利 用 率 提 高 20%~ 50% 遥 Riche 等 渊 1996 冤 在 虹 鳟 饲 料 中 添 加 1000 U/kg 的 植 酸 酶 袁 结 果 可 使 豆 粕 中 磷 的 利 用 率 从 % 增 加 到 57% 袁 提 高 了 128% 遥 Sugiura SH 等 渊 2001 冤 报 道 院 在 以 大 豆 粉 为 基 础 原 料 的 虹 鳟 饲 料 中 添 加 植 酸 酶 袁 鱼 类 消 耗 1kg 饲 料 袁 在 其 粪 便 中 磷 的 排 泄 量 为 0 援 32 g 袁 比 投 喂 商 品 鱼 饲 料 磷 的 排 泄 量 减 少 了 95 豫 ~98 豫 遥 曾 虹 等 渊 2001 冤 在 饼 粕 质 量 分 数 为 5.0% 的 鲤 鱼 饲 料 中 添 加 1000 U/g 的 中 性 植 酸 磷 袁 可 以 将 鲤 鱼 对 饲 料 的 磷 利 用 率 提 高 41%~59.4% 袁 单 位 增 重 的 磷 排 泄 降 低 32.0% 遥 在 实 践 中 袁 可 以 预 先 用 植 酸 酶 处 理 饲 料 遥 余 丰 年 等 渊 2000 冤 先 1.4 提 高 免 疫 抵 抗 力 袁 增 进 水 产 动 物 健 康 在 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 可 促 使 机 体 内 多 种 激 素 水 在 体 外 将 豆 粕 用 植 酸 酶 进 行 处 理 袁 再 加 入 到 其 余 的 饲 料 原 料 中 袁 充 分 混 合 后 进 行 分 析 袁 结 果 表 明 袁 在 异 育 银 平 升 高, 从 而 影 响 淋 巴 细 胞 和 巨 噬 细 胞 的 作 用 机 能 遥 酶 制 剂 还 可 使 饲 料 中 的 多 糖 降 解 产 生 寡 聚 糖 及 其 衍 生 物 遥 有 的 寡 糖 袁 如 甘 露 寡 糖 袁 除 具 有 防 止 致 病 菌 在 肠 道 鲫 体 外 袁 植 酸 磷 就 已 经 在 植 酸 酶 的 作 用 下 发 生 了 有 效 的 降 解 袁 添 加 植 酸 酶 促 进 了 异 育 银 鲫 对 饲 料 中 营 养 物 质 的 吸 收 袁 提 高 了 增 重 率 遥 上 聚 集 尧 减 轻 病 原 菌 对 机 体 的 毒 害 作 用 外 袁 还 参 与 免 2 水 产 动 物 饲 料 中 应 用 酶 制 剂 的 研 究 疫 调 节 袁 提 高 免 疫 能 力 遥 另 外, 营 养 物 质 是 动 物 机 体 产 生 免 疫 的 决 定 因 素 之 一 袁 营 养 对 细 胞 免 疫 尧 体 液 免 疫 尧 2.1 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 研 制 目 前 袁 国 内 外 对 植 酸 酶 的 研 究 报 道 袁 在 畜 禽 方 面 补 体 功 能 和 白 细 胞 吞 噬 作 用 都 产 生 极 大 影 响 遥 添 加 酶 制 剂 可 使 更 多 的 养 分 释 放 出 来, 从 而 加 强 机 体 免 疫 力 遥 刘 文 斌 等 渊 1997 冤 对 中 华 鳖 做 了 添 加 酶 制 剂 的 试 验 袁 3 个 试 验 组 的 酶 制 剂 含 量 分 别 为 0.1% 尧 0.2% 和 0.3% 曰 结 果 表 明 袁 3 个 试 验 组 均 比 对 照 组 成 活 率 高 袁 且 随 酶 制 剂 添 加 量 的 增 加 而 升 高 袁 说 明 酶 制 剂 可 增 强 鳖 体 质 袁 提 高 抗 病 力 遥 分 析 原 因 可 能 是 酶 制 剂 中 含 有 酶 类 和 其 它 活 性 物 质 袁 能 分 解 动 物 体 内 的 有 害 物 质 袁 催 化 有 害 物 质 变 为 无 害 物 质, 从 而 增 强 体 质, 提 高 成 活 率 遥 周 嗣 泉 等 渊 2000 冤 在 鳖 饲 料 中 添 加 了 酶 制 剂 袁 结 果 提 高 了 鳖 的 成 活 率 袁 尤 其 是 幼 鳖 最 为 明 显 袁 说 明 酶 制 剂 有 增 强 鳖 抗 病 力 的 作 用 遥 较 多 袁 也 比 较 深 入 袁 生 产 的 植 酸 酶 多 为 适 应 畜 禽 消 化 道 特 点 的 尧 最 适 ph 值 在 酸 性 范 围 的 植 酸 酶 遥 因 此 袁 畜 禽 饲 料 中 添 加 的 酶 制 剂 应 以 木 聚 糖 酶 尧 茁 葡 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 尧 淀 粉 酶 作 为 主 要 酶 系 袁 而 以 酸 性 蛋 白 酶 尧 脂 肪 酶 等 作 为 小 酶 系 遥 水 产 动 物 消 化 系 统 不 如 畜 禽 完 善 袁 大 部 分 养 殖 鱼 类 无 胃 袁 只 有 消 化 道 袁 并 且 消 化 道 相 对 于 畜 禽 很 短 袁 ph 值 一 般 呈 中 性 或 微 碱 性 袁 因 此 袁 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 应 以 中 性 或 碱 性 蛋 白 酶 尧 淀 粉 酶 尧 糖 化 酶 为 主 袁 酸 性 蛋 白 酶 尧 脂 肪 酶 尧 木 聚 糖 酶 尧 茁 葡 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 为 辅 的 复 合 酶 制 剂 遥 另 外 袁 根 据 水 产 动 物 品 种 尧 年 龄 尧 食 性 尧 生 理 消 化 特 点 和 饲 料 特 异 性 等 具 体 条 件 研 制 与 之 相 适 应 的 专 用 复 合 酶 制 剂 遥 不 同 食 性 的 1.5 促 进 植 酸 磷 的 消 化 吸 收 袁 减 轻 环 境 污 染 在 含 有 豆 饼 尧 菜 籽 粕 等 植 物 性 原 料 的 水 产 动 物 饲 鱼 类 其 消 化 道 内 消 化 酶 的 组 成 也 不 同 袁 内 源 性 消 化 酶 中 淀 粉 酶 的 活 性 由 高 到 低 的 顺 序 是 草 食 性 尧 杂 食 性 尧 料 中 袁 植 酸 盐 的 含 量 约 占 3% 左 右 袁 其 中 植 酸 磷 约 占 饲 料 总 磷 量 的 60%~80% 遥 特 别 是 植 酸 (phytate) 的 存 在 袁 不 仅 使 植 酸 磷 无 法 利 用 袁 而 且 还 能 与 钙 尧 镁 尧 氨 基 酸 和 淀 粉 等 形 成 稳 定 的 络 合 物 袁 难 于 消 化 遥 另 外 袁 鱼 类 的 消 化 道 短 袁 食 物 在 其 中 的 停 留 时 间 也 短 袁 消 化 不 完 全 遥 据 研 肉 食 性 鱼 类 遥 不 同 的 生 长 阶 段 袁 对 于 饲 用 酶 的 需 求 也 存 在 一 定 的 差 异 袁 幼 体 消 化 系 统 发 育 不 完 善 袁 内 源 性 消 化 酶 分 泌 不 足 袁 在 饲 料 中 添 加 外 源 性 消 化 酶 袁 可 以 促 进 水 产 动 物 对 食 物 中 蛋 白 质 尧 脂 肪 和 淀 粉 的 消 化 袁 提 高 生 长 率 遥 19

明 建 华 : 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 酶 制 剂 2.2 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 定 量 研 究 相 对 畜 禽 饲 用 酶 制 剂 来 说 袁 酶 制 剂 在 水 产 动 物 中 多 数 精 酶 产 品 为 胞 外 酶 袁 储 存 时 间 不 超 过 1 年 袁 1 年 后 酶 活 不 足 20% 遥 的 应 用 研 究 不 多 袁 且 大 部 分 停 留 在 定 性 方 面 袁 即 添 加 酶 制 剂 对 水 产 动 物 有 无 促 生 长 作 用 袁 能 否 提 高 饲 料 利 2.3.3 水 中 稳 定 性 酶 制 剂 应 能 在 水 中 保 持 较 长 时 间 而 不 溶 失 遥 用 率 袁 降 低 饵 料 系 数 袁 减 少 磷 排 出 袁 而 对 酶 制 剂 的 定 量 研 究 较 少 遥 定 量 研 究 很 重 要 袁 所 有 酶 制 剂 都 有 一 定 适 2.4 注 重 酶 制 剂 作 用 机 理 研 究 袁 提 高 酶 活 目 前 对 酶 制 剂 的 作 用 机 理 还 不 是 特 别 清 楚 袁 应 该 宜 添 加 范 围 袁 只 有 在 其 适 宜 添 加 范 围 内 才 能 使 生 长 达 到 最 佳 状 态 袁 过 低 过 高 效 果 都 不 好 遥 刘 文 斌 等 (1997) 报 道 袁 在 幼 鳖 饲 料 中 分 别 添 加 0.1% 尧 0.2% 尧 0.3% 的 国 产 复 合 酶 制 剂 袁 观 测 其 生 长 效 果 遥 试 验 结 果 表 明 院 添 加 量 为 0.1% 袁 其 养 殖 效 果 最 好 袁 增 重 率 比 对 照 组 提 高 75% 袁 饵 料 系 数 降 低 14.5% 曰 其 次 为 添 加 量 为 0.2% 袁 增 重 率 比 对 照 组 提 高 20% 袁 饵 料 系 数 降 低 5.9% 曰 添 加 量 0.3% 袁 其 养 殖 效 果 还 不 如 对 照 组 遥 这 与 刘 文 斌 等 (1999) 对 异 育 银 鲫 的 试 验 结 果 一 致 袁 0.75% 的 酶 制 剂 添 加 量 比 0.5% 和 1% 的 添 加 效 果 均 好 遥 分 析 其 原 因 可 能 是 院 淤 外 源 酶 添 加 量 过 高, 可 能 会 抑 制 内 源 酶 分 泌 袁 内 源 酶 分 泌 深 入 研 究 酶 制 剂 对 水 产 动 物 生 理 和 内 分 泌 的 影 响 遥 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 袁 与 一 般 酶 的 应 用 方 法 不 同 遥 因 酶 反 应 与 水 产 动 物 体 内 存 在 的 酶 系 有 关 袁 反 应 极 为 复 杂 袁 添 加 哪 种 酶 袁 加 入 多 少 袁 随 不 同 的 水 产 动 物 尧 不 同 的 原 料 种 类 及 其 配 比 而 有 不 同 的 要 求 遥 因 此 袁 应 重 视 应 用 试 验 袁 通 过 试 验 来 决 定 添 加 酶 的 品 种 和 酶 活 数 量 遥 相 对 国 外 酶 制 剂 的 活 性 来 说 袁 国 产 酶 制 剂 的 活 性 还 很 低 遥 酶 制 剂 活 性 的 提 高 袁 关 键 靠 技 术 进 步 袁 要 提 高 发 酵 工 艺 袁 通 过 基 因 工 程 选 择 合 适 菌 种 遥 酶 产 品 活 性 的 大 幅 度 提 高 袁 必 将 会 降 低 成 本 袁 从 而 促 进 酶 制 剂 在 我 国 大 规 模 的 推 广 与 应 用 遥 量 减 少, 影 响 对 饲 料 营 养 成 分 的 消 化 吸 收 率 曰 于 外 源 酶 添 加 量 过 高, 降 低 食 糜 的 粘 度, 缩 短 食 糜 在 肠 道 中 的 滞 2.5 规 范 酶 活 定 义 和 统 一 酶 制 剂 测 定 标 准 酶 制 剂 活 性 测 定 是 评 价 酶 作 用 的 一 个 重 要 指 标 袁 留 时 间, 加 快 营 养 成 分 的 流 失, 减 少 动 物 对 营 养 物 质 的 消 化 吸 收, 使 其 生 产 性 能 下 降 遥 周 小 秋 等 (2001) 在 鲤 鱼 饵 料 中 添 加 酶 制 剂, 结 果 表 明, 在 日 粮 中 添 加 500 g/t 的 酶 制 剂 可 显 著 提 高 鲤 鱼 生 长 速 度 和 饵 料 利 用 率, 但 添 加 量 超 过 700 g/t 时 袁 鲤 鱼 的 生 长 速 度 和 饵 料 利 用 率 显 著 下 降 遥 韩 庆 等 (2002) 对 黄 颡 鱼 的 试 验 表 明, 在 日 粮 中 添 加 0.15% 酶 制 剂 的 效 果 好 于 添 加 0.1% 和 0.% 的 遥 但 目 前 大 部 分 酶 制 剂 的 检 测 都 没 有 统 一 的 国 家 标 准 遥 酶 活 定 义 混 乱 袁 各 个 生 产 厂 家 提 出 的 酶 活 定 义 都 有 差 异 袁 有 的 释 放 底 物 以 纳 克 计 袁 有 的 以 微 克 计 袁 同 样 效 率 的 酶 制 剂 可 能 标 识 相 差 几 百 倍 袁 在 实 际 应 用 中 难 以 辨 别 酶 制 剂 的 优 劣 遥 酶 制 剂 活 性 测 定 没 有 统 一 的 标 准 袁 不 利 于 学 术 交 流 和 开 展 研 究 袁 限 制 了 酶 制 剂 的 开 发 与 应 用 遥 另 外 袁 在 体 外 酶 活 性 的 测 定 不 能 完 全 反 映 水 产 2.3 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 稳 定 性 研 究 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 稳 定 性 主 要 包 括 3 方 面 袁 动 物 体 内 酶 的 真 实 活 性 袁 因 为 影 响 酶 制 剂 活 性 因 素 很 多 袁 诸 如 反 应 的 底 物 尧 温 度 尧 ph 值 等 遥 因 此 袁 规 范 酶 活 定 即 热 稳 定 性 尧 储 存 稳 定 性 和 水 中 稳 定 性 遥 义 和 统 一 酶 制 剂 测 定 标 准 对 于 开 发 饲 用 酶 制 剂 是 相 2.3.1 热 稳 定 性 渊 即 耐 高 温 冤 当 重 要 的 遥 酶 是 一 种 具 有 生 物 活 性 的 蛋 白 质, 和 其 它 蛋 白 质 一 样 对 温 度 很 敏 感 遥 一 般 饲 用 酶 的 适 宜 温 度 为 35~40 益 遥 3 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 发 展 前 景 随 着 水 产 饲 料 业 的 发 展 袁 目 前 以 抗 生 素 尧 化 学 合 在 水 产 动 物 饲 料 的 制 粒 过 程 中 袁 温 度 在 90 益 左 右 袁 尤 其 在 膨 化 饲 料 中 袁 温 度 能 达 到 140 益 袁 同 时 在 高 压 尧 高 湿 的 条 件 下 制 粒 袁 酶 的 活 性 受 到 很 大 的 损 失 袁 甚 至 有 些 酶 活 性 已 近 完 全 丧 失 遥 目 前 解 决 此 矛 盾 有 两 种 办 法 院 淤 用 饲 用 酶 制 剂 对 饲 料 原 料 进 行 制 粒 前 预 处 理 曰 于 待 饲 料 颗 粒 出 模 后, 冷 却 到 安 全 温 度 时 把 液 态 饲 用 酶 制 剂 喷 洒 到 颗 粒 表 面 遥 另 外, 国 外 一 些 著 名 的 酶 制 剂 制 造 公 司 在 20 世 纪 90 年 代 成 功 研 制 出 包 埋 型 或 基 因 修 饰 型 饲 用 酶 制 剂 遥 目 前 某 些 国 产 酶 制 剂 也 可 耐 受 80~85 益 的 高 温 制 粒, 但 这 还 不 适 用 于 水 产 动 物 饲 料 遥 成 抗 菌 剂 等 为 主 的 饲 料 添 加 剂 袁 由 于 极 易 造 成 药 物 在 水 产 动 物 体 内 残 留 袁 进 而 危 害 到 人 类 健 康 袁 必 将 会 退 出 市 场 遥 而 酶 制 剂 作 为 无 药 物 残 留 尧 无 毒 副 作 用 尧 不 污 染 环 境 的 环 保 型 绿 色 饲 料 添 加 剂 一 定 会 越 来 越 受 到 人 们 的 重 视 袁 饲 用 酶 制 剂 目 前 被 认 为 是 使 用 最 安 全 的 一 种 饲 料 添 加 剂 遥 随 着 技 术 的 进 步 袁 国 产 酶 制 剂 在 酶 活 性 和 生 产 工 艺 及 稳 定 化 技 术 上 的 提 高 袁 生 产 成 本 的 降 低 袁 饲 用 酶 制 剂 将 在 解 决 水 产 动 物 饲 料 资 源 短 缺 尧 提 高 饲 料 利 用 率 尧 减 少 环 境 污 染 尧 提 高 经 济 效 益 上 得 到 广 泛 的 应 用 遥 2.3.2 储 存 稳 定 性 ( 参 考 文 献 18 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) 目 前 国 产 酶 制 剂 在 常 温 存 放 中 也 有 失 活 问 题 袁 大 ( 编 辑 : 高 雁,snowyan78@tom.com) 20