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2 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 饲 料 添 加 剂 陈 熠 贺 建 华 蛋 氨 酸 是 合 成 蛋 白 质 的 一 种 重 要 的 必 需 氨 基 酸 袁 它 主 要 存 在 于 动 物 性 蛋 白 中 袁 在 植 物 性 蛋 白 中 含 量 较 少 遥 它 在 体 内 不 能 直 接 合 成 或 合 成 速 度 不 能 满 足 动 物 的 需 要 袁 因 此 袁 只 能 靠 外 源 补 充 来 满 足 动 物 对 蛋 氨 酸 的 需 要 遥 蛋 氨 酸 是 家 禽 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 的 第 一 限 制 性 氨 基 酸 袁 也 是 以 玉 米 为 主 要 基 础 日 粮 的 高 产 奶 牛 机 体 中 乳 和 乳 蛋 白 合 成 的 第 一 限 制 性 氨 基 酸 袁 还 是 猪 的 第 二 限 制 性 氨 基 酸 遥 随 着 我 国 畜 牧 业 的 飞 速 发 展 袁 蛋 白 质 饲 料 越 来 越 缺 乏 袁 蛋 氨 酸 添 加 剂 的 生 产 虽 然 不 断 扩 大 袁 但 还 是 不 能 满 足 市 场 需 要 遥 由 于 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 渊 MHA 冤 可 在 动 物 体 内 转 化 为 蛋 氨 酸 而 发 挥 其 营 养 作 用 袁 且 因 其 良 好 的 过 瘤 胃 作 用 尧 酸 化 作 用 尧 抑 菌 作 用 等 而 备 受 关 注 袁 近 几 年 对 它 的 研 究 也 日 益 深 入 遥 动 物 的 体 液 免 疫 袁 主 要 表 现 在 对 抗 体 效 价 的 影 响 上 遥 张 英 杰 等 报 道 袁 蛋 氨 酸 水 平 为 0.063% 耀 0.413% 时 袁 随 着 日 粮 蛋 氨 酸 水 平 的 提 高 袁 鸡 血 清 中 的 抗 体 滴 度 尧 免 疫 球 蛋 白 和 淋 巴 细 胞 转 化 率 显 著 提 高 遥 Tsiagbe 研 究 表 明, 日 粮 中 添 加 0.25% 蛋 氨 酸 可 显 著 提 高 经 绵 羊 红 细 胞 腹 腔 注 射 后 的 肉 仔 鸡 抗 绵 羊 红 细 胞 血 清 抗 体 效 价 和 IgG 抗 体 效 价 遥 同 时 袁 日 粮 蛋 氨 酸 水 平 对 细 胞 免 疫 也 有 影 响 遥 Soder 等 研 究 表 明 袁 在 奶 牛 日 粮 中 添 加 瘤 胃 保 护 蛋 氨 酸 显 著 提 高 了 牛 血 液 中 T 淋 巴 细 胞 转 化 率 遥 Swain 等 在 含 蛋 氨 酸 0.36% 的 基 础 日 粮 中 添 加 0.15% 尧 0.30% 和 0.45% 的 蛋 氨 酸 显 著 提 高 了 新 城 疫 疫 苗 免 疫 后 第 21 d 肉 仔 鸡 的 淋 巴 细 胞 迁 移 抑 制 率 遥 发 挥 免 疫 作 用 的 蛋 氨 酸 需 由 饲 料 补 充 袁 而 不 能 由 胆 碱 和 1 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 对 动 物 的 主 要 作 用 半 胱 氨 酸 等 代 替 遥 1.1 发 挥 蛋 氨 酸 的 生 物 学 作 用 降 低 日 粮 粗 蛋 白 水 平 营 养 作 用 日 粮 中 蛋 氨 酸 水 平 的 高 低 将 影 响 其 它 氨 基 酸 的 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 可 以 在 动 物 体 内 转 化 为 L- 蛋 氨 酸 袁 发 挥 蛋 氨 酸 的 生 物 学 作 用 遥 蛋 氨 酸 在 动 物 体 内 作 为 必 需 氨 基 酸 合 成 机 体 蛋 白 袁 能 提 高 生 长 性 能 曰 可 转 化 为 胱 氨 酸 袁 发 挥 保 肝 解 毒 的 作 用 曰 可 为 机 体 提 供 活 性 甲 基 袁 参 与 甲 基 的 转 移 和 肾 上 腺 素 尧 肌 酸 尧 胆 碱 尧 角 质 素 和 核 酸 等 的 合 成 曰 还 能 提 供 活 性 羟 基 基 团 袁 补 充 胆 碱 或 维 生 素 B 12 的 部 分 作 用 曰 它 在 体 内 代 谢 生 成 聚 胺 袁 聚 胺 对 动 物 细 胞 增 殖 具 有 非 常 重 要 的 促 进 作 用 曰 同 时 它 还 参 与 精 胺 尧 半 精 胺 等 和 细 胞 分 裂 有 关 的 利 用 及 生 产 性 能 的 发 挥 遥 在 保 证 氨 基 酸 平 衡 的 前 提 下 袁 提 高 日 粮 蛋 氨 酸 水 平 可 降 低 日 粮 粗 蛋 白 水 平 袁 且 不 影 响 生 产 性 能 遥 杨 正 德 等 研 究 表 明 袁 低 蛋 白 日 粮 组 即 使 添 加 蛋 氨 酸 之 外 的 其 它 必 需 氨 基 酸 袁 肉 仔 鸡 的 增 重 和 饲 料 转 化 率 仍 然 显 著 低 于 高 蛋 白 日 粮 组 袁 进 一 步 添 加 蛋 氨 酸 可 消 除 这 种 差 异 遥 Jeroch 等 报 道 袁 若 日 粮 中 总 含 硫 氨 基 酸 满 足 需 要 袁 18.0% 耀 18.7% 的 粗 蛋 白 与 20.4% 耀 21.5% 的 粗 蛋 白 在 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 和 胴 体 脂 肪 沉 积 方 面 的 效 果 相 当 遥 化 合 物 的 合 成 遥 提 高 生 产 性 能 提 高 机 体 免 疫 力 蛋 氨 酸 有 提 高 机 体 免 疫 力 的 作 用 袁 其 机 理 目 前 还 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 可 促 进 肉 鸡 生 长 袁 提 高 日 增 重 袁 降 低 料 肉 比 曰 可 提 高 蛋 鸡 产 蛋 高 峰 期 和 产 蛋 周 期 不 很 清 楚 袁 目 前 的 研 究 水 平 大 多 停 留 在 表 观 免 疫 指 标 的 测 定 上 遥 一 些 研 究 表 明, 日 粮 中 蛋 氨 酸 水 平 可 影 响 的 产 蛋 量 尧 蛋 重 及 蛋 壳 质 量 遥 在 开 产 蛋 鸡 或 产 蛋 鸡 日 粮 中 添 加 大 于 0.6% 的 DL- 蛋 氨 酸 渊 DLM 冤 或 0.68% 的 MHA 还 可 酸 化 尿 袁 并 降 低 钙 引 发 的 肾 损 伤 袁 降 低 尿 结 石 的 发 生 率 遥 但 过 度 酸 化 会 影 响 钙 代 谢 从 而 影 响 产 蛋 陈 熠, 湖 南 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院,410128, 湖 南 长 沙 芙 蓉 区 湖 南 农 业 大 学 1879 信 箱 贺 建 华 ( 通 讯 作 者 ), 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 量 尧 蛋 壳 质 量 及 骨 质 矿 物 化 袁 引 发 代 谢 性 酸 中 毒 遥 添 加 瘤 胃 保 护 性 蛋 氨 酸 能 提 高 奶 牛 的 干 物 质 采 食 量 尧 促 进 增 重 尧 提 高 乳 产 量 尧 改 善 乳 成 分 遥 Rogers 等 证 实 袁 饲 喂 玉 米 蛋 白 粉 + 尿 素 日 粮 袁 添 加 瘤 胃 保 护 性 蛋 氨 酸 能 够 2

3 饲 料 添 加 剂 陈 熠 等 : 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 的 主 要 作 用 及 其 生 物 学 效 价 的 探 讨 提 高 产 奶 量 和 乳 蛋 白 量 遥 夏 中 生 等 报 道 袁 MHA 的 添 加 使 奶 水 牛 的 产 奶 量 和 乳 蛋 白 量 分 别 提 高 了 5.90% 尧 1.55% 遥 这 是 因 为 MHA 是 一 种 过 瘤 胃 蛋 氨 酸 袁 大 部 分 可 避 过 瘤 胃 的 降 解 安 全 到 达 小 肠 袁 蛋 氨 酸 被 小 肠 吸 收 后 即 转 化 为 蛋 白 质 以 满 足 奶 水 牛 泌 乳 的 需 要 遥 MHA 在 猪 生 产 上 的 研 究 较 少 袁 但 部 分 试 验 仍 证 明 了 其 具 有 提 高 猪 生 长 性 能 的 作 用 遥 浣 长 兴 等 研 究 表 明 袁 对 21 头 断 奶 仔 猪 进 行 的 为 期 32 d 的 试 验 袁 添 加 MHA 使 仔 猪 日 增 重 提 高 8.6% 袁 采 食 量 提 高 5.5% 袁 料 肉 比 降 低 3.25% 曰 同 时 还 能 减 少 仔 猪 腹 泻 次 数 和 降 低 单 位 增 重 的 饲 料 成 本 袁 从 而 提 高 养 猪 生 产 的 经 济 效 益 遥 仔 猪 消 化 道 功 能 发 育 不 完 全, 胃 酸 分 泌 不 足, 又 加 上 断 奶 应 激, 使 胃 肠 道 微 生 物 平 衡 遭 到 破 坏, 大 肠 杆 菌 迅 速 繁 殖, 最 终 导 致 仔 猪 腹 泻, 生 产 性 能 下 降 遥 酸 化 剂 可 通 过 降 低 胃 肠 道 的 ph 值, 提 高 消 化 酶 的 活 性, 改 变 有 害 菌 的 生 存 环 境 或 直 接 抑 制 杀 死 病 原 菌, 同 时 促 进 有 益 菌 的 繁 殖, 减 少 腹 泻 遥 冷 向 军 等 报 道, 日 粮 中 添 加 1.5% 的 柠 檬 酸 显 著 降 低 了 结 肠 大 肠 杆 菌 数 量 (P<0.05), 添 加 0.25% 的 复 合 酸 有 降 低 大 肠 杆 菌 数 量 尧 增 加 乳 酸 杆 菌 数 量 的 趋 势 遥 Piva 等 研 究 发 现 袁 酸 化 日 粮 对 腹 泻 的 预 防 作 用 与 添 加 抗 生 素 的 作 用 是 一 致 的 遥 与 抗 生 素 相 比 袁 酸 化 剂 具 有 安 全 尧 不 产 生 抗 药 性 等 优 势 遥 抗 生 素 1.2 MHA 是 经 济 高 效 的 反 刍 动 物 过 瘤 胃 蛋 白 源 游 离 氨 基 酸 在 瘤 胃 中 会 被 微 生 物 降 解 袁 发 生 脱 氨 会 杀 死 肠 道 内 所 有 的 微 生 物 袁 而 酸 化 剂 只 是 抑 制 或 杀 死 肠 道 病 原 微 生 物 袁 同 时 使 有 益 菌 群 在 肠 道 中 占 据 主 基 作 用 袁 因 此 添 加 结 晶 型 氨 基 酸 效 果 不 理 想 遥 使 用 保 护 性 氨 基 酸 或 氨 基 酸 类 似 物 袁 可 在 一 定 程 度 上 防 止 瘤 胃 微 生 物 的 降 解 袁 当 它 们 到 达 小 肠 时 释 放 出 来 并 被 机 体 吸 收 和 利 用 遥 游 离 氨 基 酸 经 包 被 处 理 后 过 瘤 胃 率 提 高 袁 但 使 用 效 果 受 包 被 情 况 及 后 续 加 工 工 艺 的 影 响 较 大 袁 且 成 本 较 高 遥 因 而 目 前 倾 向 于 选 择 效 果 好 且 成 本 相 对 较 低 的 MHA 遥 MHA 进 入 体 内 后 能 被 瘤 胃 微 生 物 降 解 并 转 化 为 蛋 氨 酸 袁 也 能 在 瘤 胃 壁 被 吸 收 并 代 谢 袁 此 外 袁 MHA 还 能 随 食 糜 离 开 瘤 胃 袁 并 通 过 瓣 胃 和 小 肠 被 吸 收 遥 这 3 种 途 径 同 时 发 生 并 相 互 竞 争 袁 MHA 被 每 种 途 径 代 谢 的 程 度 直 接 影 响 其 有 效 性 遥 Koenig 研 究 表 明 袁 MHA 的 过 瘤 胃 率 与 添 加 量 无 关 袁 添 加 量 为 25 尧 50 g/d 时 差 异 不 显 著 袁 过 瘤 胃 率 平 均 导 地 位 遥 MHA 的 pka 值 为 3.6,pH 值 为 1 耀 2, 其 酸 的 结 构 与 乳 酸 相 似, 具 有 相 对 较 强 的 酸 性 作 用 遥 它 可 以 提 供 H +, 从 而 降 低 饲 料 的 系 酸 力 袁 添 加 得 越 多, 饲 料 的 系 酸 力 下 降 得 越 明 显 遥 MHA 发 挥 酸 化 剂 的 功 能 时, 能 缓 冲 日 粮 中 高 碱 成 分 对 胃 酸 的 中 和, 增 强 胃 肠 道 的 酸 性 环 境, 提 高 胃 蛋 白 酶 尧 十 二 指 肠 胰 蛋 白 酶 和 肠 道 有 益 微 生 物 的 活 性, 从 而 促 进 营 养 物 质 尤 其 是 蛋 白 质 的 消 化 吸 收, 因 而 可 减 少 仔 猪, 尤 其 是 早 期 断 奶 仔 猪 的 营 养 性 腹 泻, 促 进 其 生 长 遥 但 系 酸 力 的 改 变 应 适 宜, 当 系 酸 力 过 低 而 超 过 仔 猪 对 酸 碱 平 衡 的 调 节 能 力 时, 会 影 响 仔 猪 的 生 理 酸 碱 平 衡, 导 致 体 内 酸 过 多, 酸 碱 失 衡, 引 起 机 体 酸 中 毒, 影 响 仔 猪 生 产 性 能 遥 目 前 关 于 MHA 用 作 仔 猪 日 粮 酸 化 剂 的 研 究 较 少, 具 体 效 果 有 待 进 一 步 研 究 遥 为 41.8% 遥 结 合 以 前 的 研 究 袁 MHA 的 过 瘤 胃 率 范 围 为 41% 耀 50% 袁 平 均 为 44.3% 遥 当 MHA 用 量 高 时 袁 未 降 解 1.4 抑 菌 杀 菌 MHA 是 一 种 酸 性 较 强 的 有 机 酸 袁 它 可 通 过 直 接 率 高 袁 但 进 一 步 研 究 表 明 袁 食 糜 流 通 速 度 是 影 响 过 瘤 胃 率 的 主 要 因 素 遥 Vazquez 等 采 用 连 续 培 养 系 统 的 研 究 表 明 袁 MHA 的 利 用 率 受 食 糜 流 通 速 度 的 调 控 袁 食 糜 流 通 速 度 快 时 袁 MHA 的 利 用 率 高 遥 MHA 能 促 进 脂 蛋 白 和 细 菌 蛋 白 的 合 成 袁 改 善 纤 维 消 化 率 袁 提 高 瘤 胃 原 虫 数 量, 改 变 瘤 胃 挥 发 性 脂 肪 酸 的 发 酵 模 式 袁 促 进 瘤 胃 发 酵 袁 是 一 种 效 果 很 好 的 反 刍 动 物 蛋 氨 酸 源 遥 它 无 需 特 殊 的 包 被 和 处 理 就 能 避 免 被 瘤 胃 过 多 地 降 解 袁 与 其 它 各 种 过 瘤 胃 蛋 氨 酸 源 所 提 供 的 蛋 氨 酸 相 比 袁 是 最 经 济 的 反 刍 动 物 蛋 氨 酸 源 遥 另 外 袁 由 于 MHA 不 需 要 保 护 性 被 膜 袁 因 而 不 会 受 到 加 工 的 制 约 遥 这 意 味 着 可 对 MHA 进 行 高 温 蒸 汽 调 制 尧 混 合 尧 膨 化 或 制 粒 而 不 破 坏 其 活 性 遥 扩 散 进 入 细 胞 内 袁 降 低 细 胞 内 ph 值 袁 抑 制 蛋 白 质 尧 脂 类 尧 DNA 尧 RNA 等 大 分 子 细 胞 膜 的 组 成 成 分 的 代 谢 袁 破 坏 病 原 菌 细 胞 膜 的 完 整 性 袁 从 而 起 到 杀 菌 作 用 遥 Bosi 等 认 为 袁 对 易 于 在 胃 内 被 吸 收 的 酸 化 剂 应 采 取 有 效 方 法 使 其 在 后 段 肠 道 发 挥 作 用 袁 以 有 效 控 制 肠 道 大 肠 杆 菌 和 其 它 病 原 微 生 物 数 量 遥 MHA 主 要 在 小 肠 吸 收 袁 也 有 一 部 分 在 大 肠 吸 收 袁 这 种 吸 收 方 式 保 证 了 MHA 在 肠 道 内 能 有 效 地 发 挥 抑 菌 和 杀 菌 作 用 遥 饲 料 中 添 加 蛋 氨 酸 可 抑 制 各 种 霉 菌 毒 素 的 产 生 遥 王 冉 等 研 究 认 为 袁 蛋 氨 酸 可 与 饲 料 中 的 霉 菌 毒 素 相 结 合 袁 使 其 毒 性 降 低 遥 MHA 对 霉 菌 也 具 有 抑 制 和 杀 灭 作 用 袁 在 饲 料 中 添 加 后 袁 可 以 防 止 或 控 制 霉 菌 在 饲 料 中 的 繁 殖 袁 保 持 饲 料 的 新 鲜 度 袁 防 止 微 生 物 对 饲 料 营 养 1.3 用 作 仔 猪 日 粮 酸 化 剂 袁 降 低 饲 料 系 酸 力 物 质 的 分 解 袁 从 而 提 高 饲 料 的 适 口 性 和 营 养 物 质 的 利 3

4 陈 熠 等 : 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 的 主 要 作 用 及 其 生 物 学 效 价 的 探 讨 饲 料 添 加 剂 用 率 遥 饲 料 在 加 工 过 程 中 不 可 避 免 地 受 到 外 界 微 生 物 的 污 染 袁 添 加 MHA 后 袁 既 可 以 防 止 霉 菌 在 饲 料 中 的 繁 殖 袁 同 时 MHA 又 可 转 化 为 蛋 氨 酸 袁 增 强 机 体 对 霉 菌 毒 素 的 分 解 袁 从 而 使 生 产 性 能 得 以 充 分 发 挥 遥 生 物 学 效 价 为 65% 曰 另 一 种 观 点 认 为 二 者 的 使 用 效 果 无 显 著 差 异 袁 得 出 MHA 的 生 物 学 效 价 为 100% 遥 造 成 争 议 的 主 要 原 因 是 研 究 者 所 采 用 的 测 定 方 法 尧 试 验 日 粮 尧 试 验 设 计 和 统 计 方 法 等 不 同 遥 1.5 减 少 氮 的 排 泄 袁 保 护 环 境 添 加 MHA 能 降 低 日 粮 配 制 时 的 粗 蛋 白 含 量 袁 降 2.1 测 定 方 法 测 定 MHA 生 物 学 效 价 的 方 法 主 要 有 两 种 袁 一 种 低 血 浆 尿 素 氮 水 平 袁 从 而 减 少 氮 的 浪 费 和 排 泄 遥 根 据 生 物 化 学 原 理 袁 机 体 所 需 要 的 是 必 需 氨 基 酸 碳 架 袁 而 不 一 定 是 其 全 部 遥 只 要 有 了 必 需 氨 基 酸 的 碳 架 袁 机 体 就 可 能 在 转 氨 酶 的 作 用 下, 将 其 转 化 成 相 应 的 L- 氨 基 酸 遥 MHA 本 身 就 是 蛋 氨 酸 代 谢 的 中 间 产 物 袁 具 备 蛋 氨 酸 的 碳 架, 在 代 谢 中 的 作 用 与 蛋 氨 酸 相 同 遥 由 于 MHA 没 有 氨 基, 因 而 在 代 谢 中 不 会 发 生 脱 氨 基 作 用, 而 且 它 在 体 内 代 谢 形 成 蛋 氨 酸 时 会 利 用 血 中 的 游 离 氨, 增 加 体 内 氮 的 沉 积 袁 从 而 降 低 了 粪 中 氮 的 水 平, 减 少 了 氮 是 用 线 性 模 型 或 指 数 模 型 进 行 回 归 分 析 遥 这 种 方 法 需 要 运 用 纯 合 日 粮 或 半 纯 合 日 粮 设 计 出 缺 乏 蛋 氨 酸 的 基 础 日 粮 和 几 个 不 同 的 蛋 氨 酸 添 加 水 平 袁 其 结 果 很 大 程 度 上 取 决 于 蛋 氨 酸 的 缺 乏 程 度 和 测 定 的 性 能 指 标 不 同 曰 另 一 种 是 简 单 替 代 法 遥 这 种 方 法 需 要 配 制 一 种 缺 乏 含 硫 氨 基 酸 的 基 础 日 粮 袁 在 等 摩 尔 基 础 上 添 加 不 同 水 平 的 MHA 来 替 代 DLM, 比 较 动 物 生 长 性 能 袁 评 定 MHA 的 生 物 学 效 价 遥 该 方 法 比 较 简 单 袁 但 不 能 测 出 生 物 学 效 价 值 袁 只 能 得 出 一 个 一 般 生 物 当 量 值 遥 的 排 泄 遥 同 时 袁 MHA 还 能 降 低 日 粮 粗 蛋 白 水 平 袁 进 一 步 减 少 了 氮 的 排 泄 袁 减 轻 了 对 环 境 的 污 染 遥 Noftsger 等 2.2 试 验 日 粮 动 物 对 限 制 性 营 养 物 质 的 生 长 反 应 遵 循 报 酬 递 研 究 表 明 袁 低 蛋 白 氨 基 酸 平 衡 的 日 粮 可 显 著 降 低 奶 牛 向 环 境 排 出 的 氮 量 遥 低 蛋 白 尧 高 可 消 化 过 瘤 胃 蛋 白 尧 MHA 日 粮 和 低 蛋 白 尧 高 可 消 化 过 瘤 胃 蛋 白 日 粮 袁 总 氮 效 率 渊 乳 中 氮 含 量 / 采 食 氮 含 量 冤 分 别 为 35% 和 31.7% 袁 环 境 效 率 渊 排 出 氮 / 乳 中 氮 冤 分 别 为 1.89 和 2.19 袁 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 减 规 律 遥 添 加 蛋 氨 酸 可 改 善 动 物 的 生 产 性 能 袁 但 随 着 添 加 量 的 增 加 袁 改 善 的 幅 度 将 逐 渐 减 小 袁 直 到 蛋 氨 酸 满 足 动 物 维 持 和 生 产 的 需 要 量 时 袁 再 添 加 蛋 氨 酸 不 能 进 一 步 提 高 动 物 的 生 产 水 平 遥 测 定 MHA 的 生 物 学 效 价 时 袁 试 验 日 粮 必 须 缺 乏 蛋 氨 酸 袁 且 缺 乏 的 程 度 越 高 袁 可 设 计 的 添 加 水 平 就 越 多 袁 结 果 就 越 准 确 遥 因 此 袁 在 试 1.6 减 少 热 应 激 在 高 温 尧 高 湿 的 气 候 条 件 下 袁 由 于 MHA 不 含 氨 验 条 件 允 许 的 前 提 下 袁 应 尽 量 选 择 蛋 氨 酸 缺 乏 程 度 高 的 试 验 日 粮 遥 Summers 等 研 究 表 明 袁 玉 米 要 豆 粕 要 动 基 袁 氮 转 化 成 尿 酸 过 程 中 产 生 的 余 热 减 少 袁 因 而 可 减 缓 鸡 的 热 应 激 反 应 袁 提 高 采 食 量 和 生 长 速 度 遥 据 Dib 鄄 ner 等 报 道, 虽 然 热 应 激 状 态 下 所 有 的 鸡 都 表 现 出 生 产 性 能 下 降 袁 但 是 饲 喂 DLM 的 肉 鸡 和 饲 喂 MHA 的 肉 鸡 相 比 下 降 程 度 更 大 遥 MHA 与 DLM 的 吸 收 速 度 或 程 度 不 同 袁 MHA 的 吸 收 更 迅 速 尧 更 彻 底 遥 体 外 试 验 表 明 袁 当 鸡 处 于 热 应 激 时 袁 小 肠 DLM 的 转 运 减 弱 袁 而 MHA 的 转 运 则 加 强 遥 这 与 二 者 的 吸 收 机 制 不 同 有 关 院 MHA 在 整 个 消 化 道 经 不 耗 能 的 被 动 扩 散 途 径 吸 收, 而 DLM 在 小 肠 经 能 量 依 赖 型 途 径 吸 收,DLM 只 能 在 小 肠, 主 要 是 在 回 肠 中 被 吸 收, 且 热 应 激 条 件 下,DLM 的 利 用 物 胶 型 日 粮 和 低 蛋 白 豆 粕 型 日 粮 对 蛋 氨 酸 添 加 剂 比 较 敏 感 遥 低 蛋 白 豆 粕 型 日 粮 成 本 较 低 袁 操 作 也 较 简 便 袁 最 适 合 用 于 对 蛋 氨 酸 添 加 剂 进 行 评 价 遥 理 论 上 讲 袁 试 验 日 粮 中 蛋 氨 酸 含 量 越 低 袁 添 加 MHA 的 效 果 和 添 加 DLM 的 相 比 就 越 差 袁 将 减 小 整 个 回 归 曲 线 的 斜 率 袁 使 MHA 的 相 对 生 物 学 效 价 降 低 遥 Thomas 等 报 道 袁 用 23% 的 豆 粕 和 21% 的 花 生 粕 做 饲 料 蛋 白 源 袁 与 只 用 豆 粕 做 蛋 白 源 的 两 种 日 粮 做 试 验 遥 比 较 MHA 相 对 于 DLM 的 生 物 学 效 价 袁 结 果 显 示 袁 豆 粕 花 生 粕 组 MHA 的 相 对 生 物 学 效 价 是 85%( 增 重 ) 和 79%( 饲 料 效 率 ) 袁 豆 粕 组 相 应 为 72% 和 73% 遥 率 小 于 MHA 遥 这 可 能 是 MHA 减 缓 热 应 激 的 机 理 遥 2.3 试 验 设 计 2 影 响 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物 的 生 物 学 效 价 因 素 自 从 MHA 诞 生 以 来 袁 其 生 物 学 效 价 的 问 题 一 直 试 验 在 基 础 日 粮 中 分 别 添 加 100 份 MHA 和 65 份 DLM 进 行 比 较 袁 结 果 动 物 生 产 性 能 差 异 不 显 著 袁 就 是 学 术 界 争 论 的 焦 点 遥 许 多 学 者 研 究 了 MHA 相 对 于 DLM 的 生 物 学 效 价 遥 研 究 结 果 差 别 较 大 袁 从 50% 到 100% 袁 甚 至 更 高 遥 目 前 对 MHA 的 生 物 学 效 价 主 要 存 在 两 种 观 点 袁 一 种 观 点 认 为 65% 的 DLM 与 100% 的 MHA 在 增 重 尧 料 重 比 等 方 面 差 异 不 显 著 袁 从 而 得 出 其 认 为 MHA 的 相 对 生 物 学 效 价 是 65% 遥 这 样 的 试 验 在 设 计 上 存 在 缺 陷 袁 受 部 分 试 验 结 果 的 影 响 袁 研 究 者 先 入 为 主 地 认 为 MHA 的 生 物 学 效 价 是 65% 袁 缺 乏 客 观 性 遥 按 照 科 学 的 设 计 方 法 袁 要 测 定 MHA 的 生 物 学 效 价 袁 首 先 要 配 制 一 个 仅 缺 乏 蛋 氨 酸 的 试 验 日 粮 袁 再 在 4

5 饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 丁 酸 钠 及 其 配 伍 在 断 奶 仔 猪 中 的 应 用 效 果 丁 斌 鹰 韩 祥 东 胡 麟 摘 要 为 研 究 丁 酸 钠 及 其 配 伍 对 断 奶 仔 猪 生 长 性 能 的 影 响, 本 试 验 选 用 (21 依 1) 日 龄 断 奶 (7.28 依 0.15)kg 健 康 杜 伊 长 伊 大 杂 交 仔 猪 150 头, 随 机 分 为 5 个 处 理 组, 每 个 处 理 组 3 个 重 复 ( 栏 ), 每 个 重 复 10 头 仔 猪, 公 母 各 半 试 验 日 粮 是 在 基 础 日 粮 基 础 上 分 别 添 加 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 600 mg/kg( 对 照 组 ) 0.1% 丁 酸 钠 ( 试 验 玉 组 ) 0.2% 丁 酸 钠 ( 试 验 域 组 ) 0.1% 丁 酸 钠 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 200 mg/kg ( 试 验 芋 组 ) 和 0.1% 丁 酸 钠 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 400 mg/kg( 试 验 郁 组 ) 试 验 期 为 14 d 试 验 结 果 表 明, 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 丁 酸 钠 及 其 与 硫 酸 抗 敌 素 配 伍 均 显 著 降 低 断 奶 仔 猪 腹 泻 发 生 率 (P<0.05), 并 有 提 高 断 奶 仔 猪 的 平 均 日 增 重 和 采 食 量 降 低 料 重 比 的 趋 势 (P<0.05) 且 0.1% 丁 酸 钠 与 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 400 mg/kg 配 伍 使 用 对 仔 猪 抗 腹 泻 促 生 长 的 效 果 最 好 关 键 词 断 奶 仔 猪 ; 丁 酸 钠 ; 硫 酸 抗 敌 素 ; 腹 泻 率 中 图 分 类 号 S828 抗 生 素 作 为 饲 料 添 加 剂 使 用 日 益 受 到 限 制 袁 在 欧 盟 尧 美 国 等 一 些 国 家 已 经 禁 止 了 大 部 分 抗 生 素 在 饲 料 中 使 用 遥 为 了 保 证 畜 禽 的 健 康 袁 生 产 安 全 绿 色 饲 料 袁 世 丁 斌 鹰, 武 汉 工 业 学 院 饲 料 科 学 系, 副 教 授,430023, 湖 北 武 汉 汉 口 常 青 花 园 特 一 号 韩 祥 东, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 胡 麟, 武 汉 神 舟 化 工 有 限 公 司 收 稿 日 期 : 界 各 国 都 在 积 极 地 寻 找 可 以 替 代 抗 生 素 的 促 生 长 物 质 遥 目 前 最 具 潜 力 的 物 质 之 一 是 短 链 脂 肪 酸 及 其 化 合 [1] 物 袁 如 丁 酸 钠 遥 据 报 道 袁 丁 酸 钠 可 作 为 肠 粘 膜 营 养 剂 尧 电 解 质 平 衡 调 节 剂 尧 胃 肠 道 微 生 态 调 节 剂 尧 复 合 酸 化 剂 尧 香 味 剂 尧 诱 食 剂 等 的 成 分 而 发 挥 其 独 特 的 作 用 袁 但 有 关 其 作 为 减 少 抗 生 素 或 与 抗 生 素 配 伍 的 应 用 研 究 报 道 却 相 对 很 少 遥 因 此 袁 本 试 验 以 断 奶 仔 猪 为 研 究 对 象 袁 探 讨 丁 酸 钠 及 其 药 物 组 合 的 应 用 效 果 袁 为 仔 猪 生 产 中 应 用 丁 酸 钠 提 供 一 定 的 参 考 遥 1 材 料 与 方 法 等 摩 尔 基 础 上 添 加 不 同 水 平 的 蛋 氨 酸 羟 基 类 似 物, 这 样 才 能 得 出 客 观 的 结 论 遥 2.4 统 计 方 法 方 差 分 析 和 回 归 分 析 是 分 析 试 验 数 据 时 常 用 的 方 法 遥 方 差 分 析 的 灵 敏 度 较 差 袁 只 适 用 于 定 性 的 尧 未 严 格 设 计 的 试 验 袁 多 重 比 较 一 次 只 能 比 较 两 个 试 验 处 理 袁 无 法 看 出 试 验 中 各 处 理 的 总 趋 势 遥 方 差 分 析 是 采 用 一 种 静 态 的 观 点 来 分 析 试 验 数 据 袁 得 出 的 结 论 具 有 片 面 性 袁 不 适 用 于 按 梯 度 添 加 方 案 设 计 的 试 验 遥 回 归 分 析 常 用 于 梯 度 添 加 试 验 袁 试 验 结 果 中 各 处 理 间 差 异 显 著 与 否 视 试 验 条 件 而 定 遥 处 理 数 越 多 袁 处 理 间 差 异 越 小 袁 试 验 结 果 的 准 确 性 就 越 高 遥 在 认 为 MHA 的 生 物 学 效 价 与 DLM 无 显 著 差 异 的 试 验 中 袁 研 究 者 仅 采 用 方 差 分 析 对 试 验 数 据 进 行 处 理 袁 差 异 不 显 著 袁 就 认 为 二 者 效 价 没 有 差 异 遥 而 在 认 为 MHA 效 价 较 低 的 研 究 中 袁 研 究 者 除 采 用 方 差 分 析 对 试 验 数 据 进 行 处 理 外 袁 还 采 用 了 回 归 分 析 来 处 理 数 据 遥 回 归 模 型 的 选 择 影 响 对 MHA 生 物 学 效 价 的 评 定 遥 据 王 冉 等 报 道 袁 采 用 线 性 回 归 分 析 DLM 和 MHA 的 生 物 学 效 价 时 袁 结 果 分 别 为 100% 和 96% 遥 同 一 试 验 采 用 5 非 线 性 ( 指 数 ) 回 归 分 析 袁 结 果 分 别 为 100% 和 58% 遥 所 以 方 法 不 同 袁 结 果 也 不 同 遥 此 外 袁 动 物 的 年 龄 尧 生 长 阶 段 尧 生 理 状 况 袁 蛋 氨 酸 添 加 剂 的 物 理 状 态 尧 添 加 形 式 袁 饲 料 的 能 量 水 平 等 对 MHA 生 物 学 效 价 的 评 定 都 有 影 响 遥 3 小 结 蛋 氨 酸 对 动 物 的 生 长 尧 繁 殖 和 生 产 等 有 重 要 作 用 袁 是 一 种 重 要 的 必 需 氨 基 酸 遥 MHA 在 动 物 体 内 可 转 化 为 蛋 氨 酸 并 发 挥 其 营 养 作 用 袁 提 高 动 物 免 疫 力 尧 降 低 日 粮 粗 蛋 白 水 平 尧 提 高 生 产 性 能 遥 此 外 袁 它 还 能 抑 菌 杀 菌 尧 减 少 热 应 激, 并 可 用 作 反 刍 动 物 的 过 瘤 胃 蛋 白 和 仔 猪 日 粮 的 酸 化 剂 遥 同 时 袁 添 加 MHA 可 以 减 少 氮 的 排 泄 袁 保 护 环 境 遥 目 前 袁 对 鸡 和 牛 的 日 粮 中 添 加 MHA 的 研 究 较 多, 对 猪 的 研 究 较 少 遥 此 外 袁 MHA 在 不 同 动 物 尧 不 同 阶 段 的 适 宜 添 加 量 仍 不 清 楚 袁 在 早 期 断 奶 仔 猪 中 的 应 用 效 果 也 有 待 进 一 步 验 证 袁 并 且 许 多 研 究 都 还 未 从 分 子 水 平 阐 明 其 作 用 机 制 袁 这 些 都 是 今 后 研 究 的 重 点 遥 ( 参 考 文 献 28 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

6 丁 斌 鹰 等 : 丁 酸 钠 及 其 配 伍 在 断 奶 仔 猪 中 的 应 用 效 果 饲 料 添 加 剂 1.1 试 验 材 料 丁 酸 钠 院 由 武 汉 神 舟 化 工 有 限 公 司 提 供 袁 含 量 为 99% 遥 硫 酸 抗 敌 素 院 市 售 袁 日 本 旭 化 成 工 业 株 式 会 社 生 产 的 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 遥 1.2 试 验 动 物 选 择 渊 21 依 1 冤 日 龄 断 奶 尧 渊 7.28 依 0.15 冤 kg 体 重 的 健 康 野 杜 伊 长 伊 大 冶 杂 交 仔 猪 150 头 袁 随 机 分 为 5 个 处 理 组 袁 每 个 处 理 组 3 个 重 复 渊 栏 冤 袁 每 个 重 复 10 头 仔 猪 袁 公 母 各 半 遥 1.3 试 验 日 粮 基 础 日 粮 为 玉 米 要 鱼 粉 要 豆 粕 型 日 粮 袁 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 试 验 设 计 见 表 2 袁 为 保 证 日 粮 营 养 水 平 基 本 一 致 袁 将 上 述 添 加 剂 和 药 物 配 制 到 预 混 料 中 遥 试 验 料 为 粉 料 遥 原 料 名 称 玉 米 豆 粕 乳 清 粉 进 口 鱼 粉 植 物 油 磷 酸 氢 钙 次 粉 石 粉 食 盐 赖 氨 酸 防 霉 剂 酸 化 剂 预 混 料 表 1 基 础 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 含 量 渊 % 冤 营 养 水 平 消 化 能 渊 MJ/kg 冤 蛋 白 质 渊 % 冤 钙 渊 % 冤 磷 渊 % 冤 赖 氨 酸 渊 % 冤 蛋 氨 酸 + 胱 氨 酸 渊 % 冤 注 院 预 混 料 可 为 每 千 克 全 价 料 提 供 维 生 素 A8500 IU 尧 维 生 素 D 1300 IU 尧 维 生 素 E12 IU 尧 维 生 素 K2.0 mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B mg 尧 泛 酸 钙 10.0 mg 尧 胆 碱 600 mg 尧 烟 酸 16.0 mg 尧 叶 酸 0.3 mg 尧 生 物 素 0.06 mg 尧 铜 220 mg 尧 铁 100 mg 尧 锰 60 mg 尧 锌 120 mg 尧 硒 0.3 mg 尧 碘 0.3 mg 遥 项 目 对 照 组 试 验 玉 组 试 验 域 组 试 验 芋 组 试 验 郁 组 1.4 试 验 管 理 表 2 试 验 设 计 饲 粮 组 成 基 础 日 粮 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 600 mg/kg 基 础 日 粮 垣 0.1% 丁 酸 钠 基 础 日 粮 垣 0.2% 丁 酸 钠 基 础 日 粮 垣 0.1% 丁 酸 钠 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 200 mg/kg 基 础 日 粮 垣 0.1% 丁 酸 钠 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 400 mg/kg 试 验 在 同 一 幢 保 育 舍 内 进 行 袁 所 有 栏 舍 均 为 条 缝 式 钢 筋 水 泥 地 板 遥 按 猪 场 的 常 规 管 理 进 行 饲 养 管 理 袁 试 验 猪 自 由 采 食 尧 饮 水 遥 试 验 在 湖 北 团 风 猪 场 进 行 遥 试 验 仔 猪 断 奶 后 袁 饲 喂 人 工 乳 7d 袁 然 后 用 试 验 日 粮 过 渡 3d 袁 正 式 试 验 为 14 d 遥 1.5 测 定 指 标 在 试 验 前 后 对 试 验 猪 进 行 空 腹 称 重 袁 以 栏 为 单 位 记 录 试 验 猪 体 重 尧 耗 料 量 及 腹 泻 头 次 遥 计 算 平 均 日 增 重 尧 料 重 比 及 腹 泻 率 遥 1.6 统 计 分 析 试 验 数 据 采 用 SAS6.12 统 计 软 件 进 行 单 因 素 方 差 分 析 和 最 小 显 著 性 检 验 遥 所 有 数 据 均 表 示 为 野 平 均 数 依 标 准 差 冶 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 断 奶 仔 猪 生 长 性 能 渊 见 表 3 冤 表 3 结 果 表 明, 试 验 玉 尧 域 尧 芋 尧 郁 组 与 对 照 组 相 比, 在 平 均 日 增 重 方 面, 分 别 提 高 了 4.26% 尧 4.61% 尧 8.65% 尧 13.00% 渊 P 跃 0.05 冤 曰 在 平 均 日 采 食 量 方 面 袁 分 别 提 高 了 2.26% 尧 2.26% 尧 3.28% 尧 6.43% 渊 P 跃 0.05 冤 曰 而 在 料 重 比 方 面, 分 别 降 低 了 1.86%(P 跃 0.05) 尧 2.48%(P 跃 0.05) 尧 4.97% 渊 P 跃 0.05 冤 尧 6.21% 渊 P 约 0.05 冤 袁 即 日 粮 中 添 加 0.1% 丁 酸 钠 垣 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 400 mg/kg 具 有 明 显 改 善 断 奶 仔 猪 对 饲 料 利 用 率 的 作 用 遥 项 目 始 重 渊 kg 冤 末 重 渊 kg 冤 平 均 日 增 重 渊 g/d 冤 平 均 日 采 食 量 渊 g/d 冤 料 重 比 表 3 对 照 组 7.29 依 依 依 依 依 0.10 a 试 验 期 间 断 奶 仔 猪 的 生 长 性 能 试 验 玉 组 7.29 依 依 依 依 依 0.13 ab 试 验 域 组 7.27 依 依 依 依 依 0.16 ab 试 验 芋 组 7.28 依 依 依 依 依 0.12 ab 注 院 同 一 行 数 据 肩 标 相 同 字 母 者 表 示 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤, 不 同 字 母 者 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 下 表 同 遥 试 验 郁 组 7.27 依 依 依 依 依 0.09 b 2.2 腹 泻 率 渊 见 表 4 冤 项 目 1 耀 7d 8 耀 14 d 1 耀 14 d 表 4 试 验 期 间 断 奶 仔 猪 腹 泻 率 ( 豫 ) 对 照 组 8.83 依 2.48 a 3.20 依 0.60 a 6.02 依 1.01 a 试 验 玉 组 5.15 依 2.32 ab 2.81 依 1.49 a 3.98 依 1.90 ab 试 验 域 组 2.38 依 2.18 bc 0.48 依 0.82 b 1.43 依 1.04 bc 试 验 芋 组 0.91 依 0.79 d 0 c 0.45 依 0.39 d 试 验 郁 组 0.95 依 0.82 d 0 c 0.47 依 0.41 d 由 表 4 可 见 袁 在 试 验 前 7d 袁 与 对 照 组 相 比 袁 试 验 玉 尧 域 尧 芋 尧 郁 组 腹 泻 率 降 低 41.68% 渊 P 跃 0.05 冤 尧 73.05% 渊 P 约 0.05 冤 尧 89.69% 渊 P 约 0.05 冤 尧 89.24% 渊 P 约 0.05 冤 遥 试 验 玉 组 与 试 验 域 组 尧 试 验 芋 组 与 试 验 郁 组 之 间 差 异 不 显 著 渊 P 跃 0.05 冤 遥 本 次 试 验 结 果 表 明 袁 丁 酸 钠 及 其 与 硫 酸 抗 6

7 饲 料 添 加 剂 丁 斌 鹰 等 : 丁 酸 钠 及 其 配 伍 在 断 奶 仔 猪 中 的 应 用 效 果 敌 素 的 配 伍 使 用 在 试 验 前 期 就 有 较 好 的 防 止 断 奶 仔 猪 腹 泻 的 效 果 遥 在 试 验 的 第 8 耀 14 d 袁 与 对 照 组 相 比 袁 试 验 玉 尧 域 组 腹 泻 率 降 低 12.19% 渊 P 跃 0.05 冤 尧 85% 渊 P 约 0.05 冤 遥 试 验 芋 尧 郁 组 的 腹 泻 率 为 0 袁 表 明 丁 酸 钠 与 硫 酸 抗 敌 素 的 配 伍 对 降 低 腹 泻 的 效 果 非 常 明 显 渊 P 约 0.05 冤 遥 综 观 试 验 全 程 (1 耀 14 d), 与 对 照 组 相 比, 试 验 玉 组 腹 泻 率 降 低 33.89%(P 跃 0.05); 试 验 域 组 腹 泻 率 降 低 76.25% (P 约 0.05), 但 与 试 验 玉 组 相 比 差 异 不 显 著 (P 跃 0.05); 试 验 芋 组 腹 泻 率 降 低 92.52%(P 约 0.05), 与 试 验 玉 尧 域 组 相 比 差 异 显 著 (P 约 0.05); 试 验 郁 组 腹 泻 率 降 低 92.19%(P 约 0.05), 与 试 验 芋 组 相 比 差 异 不 显 著 (P 跃 0.05) 遥 因 此 袁 丁 酸 钠 尧 硫 酸 抗 敌 素 及 其 配 伍 都 能 有 效 地 降 低 断 奶 仔 猪 的 腹 泻 率 袁 尤 其 是 两 者 配 伍 使 用 效 果 更 好 遥 报 道 不 多 袁 目 前 已 有 的 相 关 报 道 主 要 集 中 在 免 疫 和 肠 [6] 道 功 能 方 面 遥 王 继 凤 渊 2005 冤 研 究 了 丁 酸 钠 尧 盐 霉 素 及 它 们 之 间 复 合 效 应 对 断 奶 仔 猪 肠 道 粘 膜 结 构 与 免 疫 的 影 响 袁 结 果 显 示 两 者 的 复 合 物 效 果 最 好 袁 其 次 是 丁 [7] 酸 钠 遥 李 芙 燕 等 渊 2006 冤 报 道 了 丁 酸 钠 与 硫 酸 抗 敌 素 对 肉 仔 鸡 肥 大 细 胞 数 量 的 影 响 袁 结 果 表 明 袁 添 加 0.05% 丁 酸 钠 优 于 添 加 100 mg/kg 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 遥 本 次 试 验 以 断 奶 仔 猪 为 研 究 对 象 袁 研 究 了 丁 酸 钠 与 硫 酸 抗 敌 素 的 复 配 效 果 对 仔 猪 生 长 性 能 尧 腹 泻 发 生 率 的 影 响 袁 结 果 显 示 袁 丁 酸 钠 与 硫 酸 抗 敌 素 的 配 伍 有 较 好 的 效 果 袁 尤 其 在 抗 腹 泻 方 面 遥 其 原 因 可 能 是 丁 [2] 酸 钠 具 有 抑 制 大 肠 杆 菌 滋 生 的 作 用 袁 同 时 袁 硫 酸 抗 敌 素 也 是 一 种 较 强 的 抗 大 肠 杆 菌 的 药 物 袁 因 此 袁 两 者 的 配 伍 使 用 在 本 次 试 验 中 表 现 出 加 强 效 应 遥 3 讨 论 4 小 结 断 奶 仔 猪 腹 泻 是 目 前 最 严 重 的 仔 猪 疾 病 之 一, 也 4.1 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 丁 酸 钠 及 其 与 硫 酸 抗 敌 是 引 起 仔 猪 死 亡 的 重 要 原 因, 其 病 因 十 分 复 杂, 其 中 袁 以 致 病 性 大 肠 杆 菌 引 起 的 哺 乳 仔 猪 腹 泻 最 为 常 见 遥 因 此 袁 在 配 制 断 奶 仔 猪 日 粮 时 经 常 添 加 防 治 大 肠 杆 菌 病 素 两 者 配 伍 使 用 均 显 著 降 低 断 奶 仔 猪 腹 泻 发 生 率 (P<0.05) 袁 并 能 提 高 断 奶 仔 猪 的 平 均 日 增 重 和 采 食 量 趋 势 袁 降 低 料 重 比 渊 P<0.05 冤 遥 的 药 物 袁 如 硫 酸 抗 敌 素 等 遥 但 随 着 人 们 对 肉 食 品 中 药 % 丁 酸 钠 与 10% 硫 酸 抗 敌 素 预 混 剂 400 mg/kg 物 残 留 要 求 越 来 越 严 格 袁 因 此 寻 找 抗 生 素 的 替 代 品 就 成 为 行 业 研 究 的 热 点 遥 配 伍 使 用 对 仔 猪 抗 腹 泻 尧 促 生 长 的 效 果 最 好 遥 参 考 文 献 丁 酸 钠 是 短 链 脂 肪 酸 盐 袁 其 有 效 成 分 是 短 链 挥 发 性 脂 肪 酸 要 丁 酸 遥 丁 酸 作 为 一 种 生 物 调 节 剂 对 所 有 1 康 永 松, 赖 州 文, 周 斌 华. 丁 壮 素 及 其 应 用 [C]. 第 八 届 全 国 饲 料 添 加 剂 学 术 暨 新 技 术 新 产 品 交 流 会 论 文 集,2004,6:214 耀 217 动 物 胃 肠 道 的 健 康 具 有 广 泛 的 作 用 遥 Galfi D 等 (1990) [2] 试 验 发 现 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0.17% 丁 酸 钠 可 以 2 Galfi D, Bokori J. Feeding trial in pigs with adiet containing sodium butyrate [J]. Acta Veterinaria Hungarica, 1990, 38 (2): 3 耀 18 3 Martin Enderink,Qi Zhang. Sodium butyrate:micro-supplement with 显 著 改 善 仔 猪 肠 道 中 微 生 物 环 境 袁 促 进 乳 酸 杆 菌 等 有 macro-benefits [J].Asian Pork,2004,9:40 耀 41 益 菌 的 生 长 袁 显 著 降 低 肠 道 大 肠 杆 菌 的 数 量 遥 Martin 4 王 继 凤, 陈 耀 星, 王 子 旭, 等. 丁 酸 钠 对 断 奶 仔 猪 小 肠 粘 膜 形 态 结 构 Enderink 等 (2004) [3] 认 为 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0.1% 的 影 响 [J]. 中 国 兽 医 科 技,2005,35(4):298 耀 301 丁 酸 钠 可 以 提 高 仔 猪 健 康 水 平 袁 提 高 断 奶 仔 猪 日 增 重 袁 减 少 腹 泻 发 生 率 袁 降 低 仔 猪 的 药 物 治 疗 费 用 遥 王 继 5 罗 海 祥. 丁 酸 钠 对 断 奶 仔 猪 生 长 性 能 和 小 肠 形 态 的 影 响 [J]. 畜 禽 业,2006,201:14 耀 16 [4] 凤 等 渊 2005 冤 报 道 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 1g/kg 丁 6 王 继 凤. 丁 酸 钠 对 断 奶 仔 猪 肠 粘 膜 结 构 及 粘 膜 免 疫 相 关 细 胞 影 响 的 研 究 [D]. 北 京 : 中 国 农 业 大 学 硕 士 学 位 论 文,2005 酸 钠 袁 可 促 进 仔 猪 空 肠 和 回 肠 粘 膜 结 构 完 整 且 层 次 清 7 李 芙 燕, 陈 耀 星, 王 子 旭, 等. 三 种 饲 料 添 加 剂 对 肉 鸡 小 肠 肥 大 细 胞 晰 尧 肠 绒 毛 排 列 整 齐 以 及 柱 状 细 胞 结 构 清 晰 尧 绒 毛 粗 数 量 分 布 的 影 响 [J]. 动 物 医 学 进 展,2006,27(2):65 耀 68 壮 遥 因 而 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 丁 酸 钠 有 益 于 断 奶 仔 猪 的 健 康 遥 本 试 验 结 果 表 明 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0.1% 和 0.2% 丁 酸 钠 都 有 改 善 仔 猪 生 长 性 能 的 趋 [5] 势 袁 降 低 断 奶 仔 猪 的 腹 泻 发 生 率 袁 这 与 罗 海 祥 渊 2006 冤 报 道 结 果 相 似 遥 因 此 袁 笔 者 认 为 丁 酸 钠 有 望 成 为 取 代 抗 生 素 的 新 型 饲 料 添 加 剂 遥 有 关 丁 酸 钠 与 抗 生 素 的 比 较 和 相 互 作 用 的 研 究 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected]) 7

8 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 饲 料 添 加 剂 胆 碱 的 研 究 进 展 李 慧 王 宏 任 泽 林 1 胆 碱 的 理 化 特 性 胆 碱 是 一 种 季 胺 碱, 化 学 名 称 为 氢 氧 化 茁 - 羟 乙 基 一 般 认 为 袁 为 了 研 究 胆 碱 对 蛋 氨 酸 的 节 约 作 用 袁 日 粮 中 应 有 充 足 的 硫 袁 因 为 硫 的 缺 乏 将 增 加 蛋 氨 酸 需 三 甲 胺, 分 子 量 为 , 分 子 中 的 甲 基 团 占 37.14% 遥 纯 净 胆 碱 为 无 色 尧 粘 滞 尧 微 带 鱼 腥 味 尧 吸 湿 性 很 强 的 碱 性 液 体, 其 无 水 物 为 白 色 易 潮 解 的 针 状 结 晶 遥 胆 碱 有 极 要 量 遥 同 样 袁 为 研 究 硫 酸 盐 对 日 粮 含 硫 氨 基 酸 的 节 约 作 用 袁 日 粮 中 应 有 充 足 的 胆 碱 袁 否 则 更 多 的 蛋 氨 酸 将 被 用 于 满 足 动 物 对 甲 基 的 需 要 遥 强 的 亲 水 性 袁 与 疏 水 离 子 ( 六 硝 基 二 苯 胺 ) 形 成 离 子 对, 含 离 子 对 的 复 合 物 可 被 有 机 溶 剂 ( 如 二 氯 甲 烷 ) 浸 提 出 2.2 胆 碱 与 甜 菜 碱 尧 肉 碱 的 关 系 作 为 甲 基 供 体 袁 胆 碱 和 甜 菜 碱 可 在 等 分 子 基 础 上 来, 这 一 过 程 常 被 用 于 选 择 分 离 生 物 组 织 中 微 量 胆 碱 遥 相 互 代 替 袁 虽 然 甜 菜 碱 的 分 子 结 构 中 有 3 个 甲 基 袁 但 2 胆 碱 与 其 它 营 养 素 的 关 系 尽 管 生 物 体 内 的 胆 碱 可 由 乙 醇 胺 甲 基 化 合 成, 但 在 甲 基 反 应 过 程 中 它 只 能 提 供 1 个 甲 基 袁 其 它 部 分 则 经 过 氧 化, 最 终 转 化 为 甘 氨 酸 遥 在 一 项 研 究 不 同 胆 碱 胆 碱 的 去 甲 基 产 物 为 二 甲 基 甘 氨 酸, 并 不 是 二 甲 基 乙 醇 胺 遥 胆 碱 在 肝 脏 线 粒 体 中 被 氧 化 成 甜 菜 醛, 然 后 进 一 步 被 氧 化 成 甜 菜 碱, 甜 菜 碱 和 高 半 胱 氨 酸 在 甜 菜 碱 高 半 胱 氨 酸 甲 基 转 移 酶 的 作 用 下, 生 成 蛋 氨 酸 和 二 甲 基 甘 氨 酸 遥 因 此 袁 在 生 物 体 内 胆 碱 以 甜 菜 碱 的 形 式 提 供 不 稳 态 甲 基 遥 所 谓 不 稳 态 甲 基, 是 指 在 体 内 从 一 种 化 合 物 转 移 到 另 一 种 化 合 物 的 甲 基, 也 称 活 性 甲 基 遥 除 胆 碱 之 外, 蛋 氨 酸 尧 叶 酸 和 维 生 素 B 12 均 可 提 供 活 性 甲 基 遥 水 平 日 粮 添 加 甜 菜 碱 效 果 的 试 验 中 发 现 袁 在 缺 乏 胆 碱 的 基 础 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 氯 化 胆 碱 袁 肉 仔 鸡 增 重 和 饲 料 转 化 率 几 乎 与 氯 化 胆 碱 的 添 加 量 呈 线 性 关 系 曰 但 在 基 础 日 粮 和 不 同 胆 碱 水 平 的 试 验 日 粮 中 添 加 甜 菜 碱 袁 对 鸡 的 生 产 性 能 不 产 生 影 响 遥 一 般 认 为 袁 用 于 最 大 生 长 所 需 要 的 胆 碱 袁 其 三 分 之 二 必 需 以 胆 碱 形 式 提 供 袁 其 余 三 分 之 一 可 由 甜 菜 碱 来 满 足 袁 即 在 满 足 机 体 对 胆 碱 的 基 本 需 要 之 上 袁 甜 菜 碱 可 以 节 约 用 作 甲 基 供 2.1 胆 碱 与 蛋 氨 酸 尧 硫 酸 盐 的 关 系 机 体 对 蛋 氨 酸 和 胆 碱 本 身 的 需 要 一 旦 被 满 足 袁 对 体 的 胆 碱 遥 肉 碱 即 L- 茁 - 羟 基 - 酌 三 甲 基 氨 基 丁 酸 袁 是 由 赖 氨 不 稳 态 甲 基 的 需 要 可 通 过 蛋 氨 酸 或 胆 碱 来 提 供 袁 即 胆 碱 能 节 省 正 常 用 于 甲 基 转 移 的 蛋 氨 酸 袁 但 不 能 节 省 用 于 蛋 白 质 合 成 的 蛋 氨 酸 遥 由 于 基 础 日 粮 蛋 氨 酸 水 平 不 同 袁 添 加 不 同 水 平 胆 碱 的 试 验 研 究 结 果 也 不 尽 相 同 遥 总 的 说 来 袁 当 日 粮 胆 碱 水 平 低 时 袁 添 加 蛋 氨 酸 可 产 生 显 著 应 答 曰 与 之 相 似 袁 当 日 粮 蛋 氨 酸 在 临 界 需 要 量 水 平 时 袁 添 加 胆 碱 也 可 使 生 产 性 能 得 到 一 定 程 度 改 善 遥 有 关 胆 碱 和 硫 酸 盐 的 研 究 袁 多 以 胆 碱 和 硫 酸 盐 能 否 节 约 蛋 氨 酸 以 及 日 粮 不 同 蛋 氨 酸 和 硫 水 平 对 胆 碱 添 加 效 果 的 影 响 为 主 要 内 容 遥 禽 可 利 用 无 机 硫 来 满 足 其 对 总 硫 需 要 量 的 一 部 分 袁 在 纯 合 日 粮 中 袁 鸡 对 添 加 酸 衍 生 而 成 的 兼 性 化 合 物 袁 分 布 于 机 体 的 各 个 组 织 袁 线 粒 体 内 含 量 最 多 遥 脂 肪 酸 的 茁 - 氧 化 作 用 是 在 肝 脏 及 其 它 组 织 的 线 粒 体 中 进 行 的 遥 脂 肪 酸 氧 化 在 动 物 脂 肪 酸 分 解 代 谢 中 起 至 关 重 要 的 作 用 袁 而 肉 碱 是 长 链 脂 肪 酸 进 入 细 胞 线 粒 体 内 进 行 脂 肪 酸 氧 化 的 重 要 跨 膜 转 运 载 体 遥 胆 碱 可 能 通 过 以 S- 腺 苷 甲 硫 氨 酸 为 活 性 甲 基 供 体 的 甲 基 代 谢 间 接 参 与 肉 碱 合 成 遥 Daily 芋 等 研 究 发 现 袁 鼠 组 织 中 肉 碱 水 平 随 日 粮 胆 碱 水 平 升 高 而 升 高 的 同 时 袁 鼠 组 织 中 脂 肪 含 量 显 著 降 低 遥 许 多 研 究 还 显 示 袁 在 缺 乏 胆 碱 的 饲 料 中 添 加 胆 碱 可 显 著 提 高 鼠 肝 脏 尧 心 脏 和 骨 骼 肌 中 肉 碱 水 平 遥 无 机 硫 的 反 应 取 决 于 日 粮 含 硫 氨 基 酸 水 平 袁 日 粮 蛋 氨 酸 水 平 越 高 袁 鸡 对 添 加 硫 酸 盐 的 反 应 越 小 遥 在 玉 米 要 2.3 胆 碱 与 叶 酸 尧 维 生 素 B 12 的 关 系 维 生 素 B 12 和 叶 酸 参 与 胆 碱 合 成 尧 代 谢 和 甲 基 转 豆 粕 型 日 粮 中 袁 即 使 含 硫 氨 基 酸 缺 乏 袁 鸡 对 硫 酸 盐 的 添 加 也 不 产 生 应 答 遥 移 袁 因 此 袁 在 叶 酸 和 维 生 素 B 12 缺 乏 条 件 下 袁 胆 碱 需 要 量 增 加 遥 胆 碱 缺 乏 可 造 成 肝 脏 叶 酸 衍 生 物 含 量 显 著 减 少 及 其 比 例 的 变 化 遥 当 蛋 氨 酸 缺 乏 时, 这 种 减 少 就 更 为 李 慧, 北 京 英 惠 尔 生 物 技 术 有 限 公 司,100081, 中 关 村 南 大 街 12 号 科 海 福 林 大 厦 二 层 王 宏 任 泽 林, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 突 出 遥 同 样, 缺 乏 叶 酸 也 会 引 起 肝 组 织 中 胆 碱 含 量 下 降 遥 当 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 含 750 mg/kg 胆 碱 时 ( 经 甲 醇 洗 涤 袁 去 除 豆 粕 中 的 大 部 分 胆 碱 ) 袁 肉 仔 鸡 在 每 千 克 日 粮 中 添 加 1.3 mg 叶 酸 时 呈 最 大 生 长 量 曰 当 日 粮 含 8

9 饲 料 添 加 剂 李 慧 等 : 胆 碱 的 研 究 进 展 有 1300mg/kg 胆 碱 时, 叶 酸 需 要 量 则 为 1.2mg/kg 遥 维 生 素 B 12 除 作 为 蛋 氨 酸 合 成 酶 的 辅 酶 外, 还 参 与 胆 碱 合 成 遥 30 日 龄 以 上 大 鼠 采 食 无 蛋 氨 酸 和 所 有 已 知 甲 基 供 体 袁 但 含 有 高 半 胱 氨 酸 和 维 生 素 B 12 的 日 粮, 可 继 续 生 长 曰 而 30 日 龄 以 下 大 鼠 在 这 种 情 况 下 则 不 能 存 活 袁 其 症 状 为 肾 出 血 遥 试 验 表 明 袁 维 生 素 B 12 存 在 下 袁 大 鼠 能 够 合 成 甲 基 并 经 高 半 胱 氨 酸 转 甲 基 反 应 合 成 蛋 氨 酸 遥 Bennett 报 道 袁 大 鼠 采 食 含 叶 酸 和 高 半 胱 氨 酸 但 不 含 其 它 不 稳 态 甲 基 的 日 粮 一 段 时 间 后 袁 生 长 趋 于 停 止 遥 3 胆 碱 缺 乏 症 日 粮 中 动 物 性 饲 料 不 足, 特 别 是 具 有 生 物 活 性 的 全 价 蛋 白 尧 叶 酸 及 VB 12 缺 乏, 将 会 导 致 胆 碱 自 身 合 成 不 足 遥 若 日 粮 中 烟 酸 含 量 过 多, 使 其 以 甲 基 烟 酰 胺 形 式 自 体 内 排 出, 这 样 体 内 缺 少 合 成 胆 碱 和 其 它 化 合 物 必 需 的 甲 基 族, 导 致 胆 碱 缺 乏 遥 微 量 元 素 锰 参 与 胆 碱 代 谢 过 程, 起 类 似 胆 碱 的 生 物 学 作 用, 参 与 胆 碱 运 送 脂 肪 的 过 程, 因 此 袁 缺 锰 也 能 导 致 胆 碱 的 缺 乏 遥 生 长 畜 禽 一 般 在 不 同 时 期 对 胆 碱 的 需 求 量 也 不 尽 相 同, 如 幼 禽 对 胆 碱 的 需 求 量 最 大 (Seifier 等,1972;Pesti 等,1980); 产 蛋 鸡 高 峰 期 因 为 产 蛋 排 出 大 量 的 磷 脂 酰 胆 碱 ( 蛋 黄 的 主 要 成 分 ) 而 需 求 量 增 加 曰 犊 牛 刚 出 生 时 袁 合 成 胆 碱 的 能 力 低 下, 在 这 些 特 别 时 期, 如 果 不 在 日 粮 中 添 加 一 定 量 的 胆 碱 更 易 发 生 缺 乏 症 遥 总 之, 畜 禽 虽 可 合 成 一 定 数 量 的 胆 碱, 但 一 般 不 能 满 足 其 生 长 及 生 产 的 需 要 遥 饲 料 中 缺 乏 胆 碱 引 起 水 产 动 物 脂 肪 代 谢 障 碍 和 诱 发 脂 肪 肝 病 变 的 生 化 机 制 已 被 证 实 遥 胆 碱 缺 乏 使 合 成 脂 蛋 白 的 重 要 原 料 磷 脂 酰 胆 碱 合 成 量 不 足, 进 而 引 起 肝 脏 脂 蛋 白 合 成 减 少, 影 响 脂 肪 向 血 液 中 转 运, 导 致 肝 脏 中 脂 肪 积 累 和 向 血 液 运 输 的 脂 肪 减 少 遥 因 此, 应 根 据 生 长 畜 禽 在 不 同 时 期 对 胆 碱 的 需 要 量, 在 日 粮 中 额 外 添 加 一 定 量 胆 碱 遥 3.1 猪 的 胆 碱 缺 乏 症 猪 缺 乏 胆 碱 主 要 表 现 为 衰 弱 无 力 尧 共 济 失 调 尧 跗 关 节 肿 胀 并 有 压 痛 袁 肩 部 轮 廓 异 常 遥 因 肝 脂 肪 变 性 引 起 消 化 不 良 而 使 死 亡 率 升 高 遥 仔 猪 生 长 发 育 缓 慢 袁 衰 弱 袁 被 毛 粗 乱 袁 腿 关 节 屈 曲 不 全 袁 运 动 不 协 调 袁 有 的 呈 现 先 天 性 八 字 形 腿 遥 3.2 禽 的 胆 碱 缺 乏 症 雏 鸡 和 雏 火 鸡 最 初 的 胆 碱 缺 乏 症 状 是 骨 质 疏 松 症, 继 而 发 生 骨 短 粗 症 曰 而 鹌 鹑 则 表 现 为 跗 关 节 肿 大 和 腿 弯 曲 袁 严 重 时 可 与 胫 骨 脱 离 袁 从 而 导 致 双 腿 不 能 支 撑 体 重 遥 禽 发 病 还 表 现 为 关 节 软 骨 移 位 袁 跟 腱 滑 脱 遥 病 情 发 展 呈 现 渐 进 性 袁 个 体 较 大 的 发 病 较 多 袁 容 易 发 生 肝 脂 肪 变 性 和 卵 黄 性 腹 膜 炎 遥 青 年 鸡 极 易 发 生 脂 肪 9 肝 袁 因 肝 破 裂 导 致 急 性 死 亡 遥 母 鸡 产 蛋 量 减 少 袁 蛋 的 孵 化 率 下 降 遥 雏 鸭 的 胆 碱 缺 乏 症 表 现 为 共 济 失 调 尧 肌 伸 张 无 力 尧 瘫 痪 尧 附 关 节 着 地 尧 关 节 肿 胀 尧 骨 短 粗 尧 关 节 周 围 有 点 状 出 血 袁 肿 胀 肝 有 油 腻 感 袁 往 往 以 生 长 迅 速 尧 个 体 肥 大 者 较 为 多 见 遥 3.3 反 刍 动 物 的 胆 碱 缺 乏 症 如 用 缺 乏 胆 碱 的 饲 料 喂 养 2 日 龄 犊 牛 袁 至 第 7d 时 则 出 现 食 欲 不 振 尧 衰 弱 无 力 尧 不 能 站 立 尧 呼 吸 急 促 尧 消 化 不 良 等 症 状 袁 饲 喂 胆 碱 可 迅 速 恢 复 遥 3.4 水 产 动 物 的 胆 碱 缺 乏 症 相 对 于 畜 禽 动 物 而 言 袁 水 产 动 物 缺 乏 胆 碱 的 症 状 不 是 十 分 明 显 遥 研 究 表 明 袁 饲 料 中 缺 乏 胆 碱 时 袁 虹 鳟 表 现 为 肝 脏 颜 色 变 黄 尧 眼 球 突 出 尧 贫 血 等 症 状 ; 日 本 鳗 则 表 现 出 生 长 缓 慢 尧 食 欲 减 退 尧 肠 道 灰 白 色 症 状 ; 鲤 鱼 尧 斑 点 叉 尾 尧 湖 鳟 肝 脏 脂 肪 含 量 增 加 袁 鲤 鱼 肝 细 胞 空 泡 化 ; 此 外 袁 鲟 鱼 还 表 现 出 肠 道 肌 肉 层 变 薄 袁 胰 腺 退 化 变 性 等 胆 碱 缺 乏 症 遥 国 内 学 者 主 要 对 鲫 鱼 尧 草 鱼 等 进 行 了 研 究 袁 饲 料 中 缺 乏 胆 碱 时 袁 异 育 银 鲫 的 增 重 率 和 饲 料 效 率 均 显 著 下 降 袁 血 浆 甘 油 三 酯 袁 胆 固 醇 含 量 降 低 袁 肝 脏 颜 色 变 浅 尧 变 黄 袁 胆 囊 颜 色 变 红 ; 在 草 鱼 方 面 也 有 类 似 报 道 遥 4 饲 料 原 料 中 胆 碱 含 量 及 评 定 根 据 NRC 渊 1994 冤 推 荐 量 袁 蛋 鸡 日 粮 胆 碱 添 加 量 约 为 1100 mg/kg 遥 由 于 这 一 水 平 比 组 成 典 型 商 品 日 粮 的 饲 料 原 料 所 提 供 的 胆 碱 稍 高 袁 因 此 袁 对 日 粮 中 是 否 添 加 胆 碱 仍 有 争 议 遥 胆 碱 的 添 加 被 看 作 是 饲 料 中 天 然 胆 碱 含 量 和 生 物 利 用 率 差 异 的 一 个 补 充 遥 饲 料 中 的 胆 碱 多 以 结 合 形 式 存 在, 其 主 要 形 式 是 卵 磷 脂, 占 总 胆 碱 含 量 的 90% 以 上, 另 外 还 有 以 神 经 鞘 磷 脂 磷 酸 胆 碱 尧 甘 油 磷 脂 酰 胆 碱 等 胆 碱 衍 生 物 形 式 存 在 的 胆 碱 遥 由 于 作 物 的 生 长 环 境 袁 如 气 候 尧 土 壤 尧 地 域 尧 肥 料 的 差 异 和 加 工 方 法 不 同, 饲 料 中 胆 碱 的 含 量 变 化 很 大 遥 一 般 说 来, 动 物 性 饲 料 胆 碱 含 量 最 高, 其 次 是 饼 粕 类, 再 次 是 糠 麸 类 和 谷 实 类 遥 饲 料 中 胆 碱 含 量 是 影 响 胆 碱 添 加 量 的 重 要 因 素, 但 化 学 分 析 值 并 不 能 完 全 代 表 饲 料 中 天 然 胆 碱 生 物 利 用 率 的 高 低 遥 在 进 行 胆 碱 生 物 学 效 价 评 定 时, 由 于 所 用 试 验 动 物 年 龄 尧 生 理 状 态 尧 基 础 日 粮 和 判 断 指 标 的 不 同, 所 得 的 饲 料 原 料 胆 碱 生 物 学 效 价 也 存 在 很 大 差 异 遥 Emmert 渊 1997 冤 测 定 菜 籽 粕 尧 豆 粕 和 花 生 粕 中 胆 碱 的 生 物 利 用 率 分 别 为 24% 尧 83% 和 76% 袁 说 明 饲 料 中 天 然 胆 碱 的 生 物 利 用 率 存 在 着 明 显 的 差 异 袁 也 表 明 配 合 日 粮 时 利 用 饲 料 营 养 成 分 表 提 供 的 化 学 测 定 参 考 值 所 存 在 的 问 题 遥 菜 籽 粕 尧 豆 粕 和 花 生 粕 胆 碱 含 量 分 别 为 尧 尧 1685 mg/kg 袁 菜 籽 粕 比 其 它 2 种 饼 粕 相 比 胆 碱 含 量 更

10 李 慧 等 : 胆 碱 的 研 究 进 展 饲 料 添 加 剂 高 袁 但 其 利 用 率 却 不 到 其 它 2 种 饼 粕 的 三 分 之 一 遥 Hennig 渊 1985 冤 所 做 的 试 验 表 明 袁 用 含 20% 菜 籽 粕 的 日 粮 饲 喂 肉 仔 鸡 袁 引 起 胫 骨 粗 短 症 袁 而 添 加 胆 碱 可 减 少 此 病 发 生 遥 Workel 等 渊 1998 冤 报 道 袁 给 鸡 饲 喂 经 化 学 分 析 含 有 充 足 胆 碱 的 日 粮 袁 但 添 加 氯 化 胆 碱 仍 对 鸡 的 生 长 具 有 明 显 的 影 响 袁 证 明 了 饲 料 中 天 然 胆 碱 生 物 利 用 率 的 变 化 遥 因 此 袁 即 使 饲 料 中 天 然 胆 碱 含 量 足 够 时 袁 日 粮 中 也 应 该 添 加 氯 化 胆 碱 遥 5 胆 碱 的 应 用 现 状 5.1 胆 碱 在 鸡 营 养 中 的 研 究 Illinois 大 学 (1997) 研 究 表 明, 在 缺 乏 胆 碱 的 10 耀 20 日 龄 肉 鸡 的 基 础 日 粮 中 添 加 氯 化 胆 碱 (0~1 115 mg/kg), 鸡 的 体 增 重 与 氯 化 胆 碱 的 添 加 量 呈 线 性 增 加 曰 增 加 至 2000 mg/kg 时, 体 增 重 进 一 步 提 高, 但 增 加 量 较 低 遥 INRA(1997) 在 典 型 的 肉 鸡 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 分 别 添 加 400 尧 800 和 1600 mg/kg 氯 化 胆 碱 后 发 现,800 mg/kg 组 的 料 重 比 最 低, 从 1.71 降 低 到 1.66 遥 用 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 饲 喂 雏 鸡 渊 添 加 胆 碱 和 L- 蛋 氨 酸 冤 袁 3 周 龄 时 增 重 和 饲 料 转 化 效 率 没 有 显 著 差 异 曰 育 雏 期 由 于 基 础 日 粮 中 甲 基 缺 少 不 严 重 袁 胆 碱 对 蛋 氨 酸 的 替 代 作 用 效 果 微 弱 曰 但 肥 育 期 在 含 硫 氨 基 酸 不 足 的 日 粮 中 添 加 胆 碱 对 蛋 氨 酸 有 明 显 的 替 代 作 用 遥 在 含 足 量 蛋 氨 酸 的 肉 仔 鸡 饲 料 中 添 加 1500 mg/kg 氯 化 胆 碱 仍 能 明 显 提 高 肉 用 仔 鸡 的 生 产 性 能 遥 胆 碱 和 蛋 氨 酸 的 替 代 效 应 不 仅 取 决 于 日 粮 中 蛋 氨 酸 的 数 量, 而 且 与 基 础 日 粮 类 型 尧 试 禽 日 龄 尧 日 粮 中 各 种 养 分 的 水 平, 尤 其 是 含 硫 氨 基 酸 和 无 机 硫 水 平 都 有 重 要 的 影 响 作 用 遥 在 日 粮 中 添 加 胆 碱 袁 可 以 提 高 产 蛋 鸡 的 生 产 性 能 袁 每 枚 蛋 可 含 胆 碱 170 mg 遥 为 达 到 最 高 产 蛋 量 袁 保 证 肝 脏 脂 肪 含 量 较 少 袁 一 定 要 在 产 蛋 期 补 充 胆 碱 遥 在 基 础 日 粮 中 添 加 800 mg/kg 胆 碱 袁 能 显 著 提 高 平 均 蛋 重 和 产 蛋 量 遥 另 外 袁 是 否 额 外 添 加 胆 碱 也 要 视 自 然 胆 碱 的 生 物 利 用 率 而 定 遥 通 过 分 析 近 30 年 16 次 试 验 结 果 差 异 发 现 袁 试 验 期 的 长 短 尧 产 蛋 鸡 日 龄 尧 品 种 尧 饲 粮 蛋 白 质 含 量 尧 饲 粮 蛋 氨 酸 水 平 尧 饲 料 中 胆 碱 水 平 和 效 价 对 添 加 胆 碱 的 效 果 有 很 大 关 系 遥 5.2 胆 碱 在 猪 营 养 中 的 研 究 NRC 对 断 奶 仔 猪 尧 生 长 猪 尧 肥 育 猪 尧 母 猪 日 粮 中 添 加 不 同 剂 量 胆 碱 的 效 果 进 行 了 综 合 研 究 发 现, 以 玉 米 要 大 豆 要 赖 氨 酸 为 基 础 的 日 粮 中 添 加 不 同 剂 量 胆 碱, 各 个 阶 段 的 猪 日 增 重 并 没 有 随 添 加 量 增 大 而 产 生 正 效 应, 饲 料 转 化 效 率 虽 有 增 高 趋 势, 但 差 异 不 显 著, 并 得 出 了 在 玉 米 要 大 豆 要 赖 氨 酸 日 粮 中 不 需 要 添 加 胆 碱 的 结 论 遥 NRC(1998) 对 10~20 kg 仔 猪 的 胆 碱 推 荐 量 为 400 mg/kg 曰 30~70 kg 猪 胆 碱 推 荐 量 为 300 mg/kg 遥 10 采 用 NRC(1998) 对 维 生 素 需 要 量 推 荐 的 指 数 方 程 模 型, 推 算 得 出 9~20 kg 仔 猪 的 胆 碱 需 要 量 为 390 mg/kg 曰 22~51 kg 生 长 猪 胆 碱 的 需 要 量 为 320 mg/kg 遥 林 映 才 等 渊 2001 冤 研 究 表 明 袁 提 高 试 验 饲 粮 胆 碱 水 平 袁 可 提 高 9~20 kg 仔 猪 的 生 产 性 能 袁 当 胆 碱 添 加 量 为 650 mg/kg 时 袁 生 产 性 能 最 佳 袁 基 础 饲 粮 添 加 胆 碱 也 可 改 善 仔 猪 的 被 毛 状 况 遥 在 生 长 猪 的 试 验 中 发 现 袁 从 满 足 生 长 角 度 考 虑 袁 采 用 玉 米 要 豆 粕 型 饲 粮 无 需 另 外 添 加 胆 碱 袁 但 适 当 添 加 胆 碱 渊 450~750 mg/kg 冤 有 利 于 脂 肪 分 解 和 造 血 袁 改 善 胴 体 品 质 尧 被 毛 和 肤 色 遥 Stock land 和 Hays 等 在 玉 米 要 豆 饼 型 饲 粮 中 添 加 胆 碱 可 使 母 猪 产 仔 数 明 显 提 高 渊 0.6~0.8 头 / 窝 冤 遥 还 有 许 多 研 究 报 道, 以 玉 米 尧 豆 饼 为 基 础 的 母 猪 日 粮 中 添 加 800 mg/kg 胆 碱 袁 能 提 高 母 猪 每 窝 产 仔 数 尧 每 窝 活 仔 数 尧 2 周 龄 断 奶 活 仔 数 袁 并 且 肢 体 外 张 母 猪 的 数 量 也 明 显 减 少 遥 5.3 胆 碱 在 水 产 动 物 营 养 中 的 研 究 在 水 产 方 面 袁 胆 碱 的 营 养 研 究 刚 刚 起 步, 大 多 局 限 于 水 生 动 物 的 营 养 需 要 量 上 遥 据 研 究 表 明, 不 同 鱼 类 对 胆 碱 的 需 要 量 明 显 不 同 遥 鲤 鱼 对 胆 碱 的 推 荐 添 加 量 为 4000 mg/kg(ogino,1970) 遥 为 防 止 脂 肪 肝,3.5 g 鲤 鱼 稚 鱼 每 天 对 胆 碱 的 需 求 量 为 每 千 克 体 重 60~120 mg, 而 湖 鳟 对 胆 碱 的 需 求 量 为 1000 mg/kg(ketola 袁 1976) 曰 斑 点 叉 尾 为 400 mg/kg(wilson 和 Poe,1988) 曰 草 鱼 为 300 mg/kg( 王 道 尊 等,1995) 遥 Yone 等 (1987) 研 究 认 为 袁 真 鲷 饲 料 中 胆 碱 添 加 量 为 500mg/kg 遥 对 黑 鲷 幼 鱼 的 研 究 表 明, 饲 料 中 胆 碱 的 添 加 量 在 594~794 mg/kg 时 效 果 较 好, 中 国 对 虾 对 胆 碱 的 需 求 量 为 4000 mg/kg 遥 Halver 渊 1972 冤 等 认 为 袁 大 鳞 大 马 哈 鱼 对 胆 碱 的 需 求 量 为 600~800 mg/kg 遥 Deshimaru 等 认 为 胆 碱 对 斑 节 对 虾 而 言 袁 并 非 绝 对 必 要 袁 但 金 泽 (Kanazawa) 建 议 每 千 克 饲 料 中 添 加 600 mg 胆 碱 遥 不 过 胆 碱 对 斑 节 对 虾 稚 虾 的 成 活 率 有 很 大 影 响 袁 且 需 求 量 很 高 遥 陈 芳 等 渊 2003 冤 研 究 表 明, 饲 料 中 胆 碱 的 添 加 量 低 于 0.8% 时 袁 会 显 著 影 响 黄 鳝 的 生 长 和 对 饲 料 的 利 用 效 率 曰 低 于 1.0% 时, 则 其 肝 脏 脂 肪 含 量 和 肝 体 指 数 明 显 升 高 遥 因 此 袁 黄 鳝 饲 料 中 胆 碱 的 适 宜 添 加 量 应 不 少 于 0.8% 袁 以 0.8 豫 ~ 1.2% 添 加 量 较 适 宜 袁 比 其 它 几 种 鱼 类 对 胆 碱 的 需 要 量 要 高 遥 5.4 胆 碱 在 反 刍 动 物 营 养 中 的 研 究 在 反 刍 动 物 体 内 袁 胆 碱 可 以 由 蛋 氨 酸 尧 维 生 素 B 12 为 原 料 进 行 生 物 合 成 袁 因 此 胆 碱 与 蛋 氨 酸 之 间 的 关 系 就 显 得 尤 为 重 要 遥 Emmanue 等 (1984) 在 成 年 奶 山 羊 上 的 研 究 发 现 袁 约 有 28% 的 蛋 氨 酸 在 体 内 被 用 于 合 成 胆 碱 遥 对 于 一 般 成 年 反 刍 动 物 袁 体 内 合 成 的 胆 碱 可 满 足 和 维 持 低 生 产 需 要, 但 对 于 高 生 产 性 能 的 奶 牛 和 育 肥

11 饲 料 添 加 剂 李 慧 等 : 胆 碱 的 研 究 进 展 牛 添 加 胆 碱 可 以 提 高 其 生 产 性 能 遥 不 论 是 对 于 奶 牛 还 是 育 肥 牛, 其 添 加 量 要 根 据 动 物 的 生 理 阶 段 尧 生 产 性 能 尧 日 粮 营 养 水 平 和 动 物 自 身 健 康 状 况 来 确 定, 同 时 也 需 大 量 的 试 验 进 一 步 证 明, 但 在 反 刍 动 物 日 粮 中 添 加 胆 碱 是 必 要 的, 最 佳 的 添 加 形 式 是 过 瘤 胃 保 护 性 胆 碱 遥 5.5 NRC 对 胆 碱 的 推 荐 用 量 表 1 遥 6 小 结 参 照 NRC 标 准 袁 几 种 常 见 动 物 的 胆 碱 需 要 量 见 表 1 动 物 猪 渊 kg 冤 1 耀 5 5 耀 耀 耀 耀 100 种 猪 青 年 和 成 年 公 猪 初 产 和 经 产 哺 乳 母 猪 鹅 育 雏 期 0 耀 6 周 生 长 期 6 周 以 上 兔 生 长 兔 尧 母 兔 和 公 兔 白 壳 蛋 鸡 0 耀 6 周 6 耀 12 周 12 耀 18 周 18 周 耀 产 蛋 褐 壳 蛋 鸡 0 耀 6 周 6 耀 12 周 12 耀 18 周 18 周 耀 产 蛋 肉 鸡 0 耀 3 周 3 耀 6 周 6 耀 8 周 鱼 鲶 鱼 虹 鳟 鱼 大 麻 哈 鱼 鲤 鱼 不 同 动 物 的 胆 碱 需 要 量 胆 碱 渊 mg/kg 冤 作 为 饲 料 添 加 剂, 氯 化 胆 碱 在 维 生 素 类 添 加 量 中 占 居 首 位, 其 在 配 合 饲 料 中 的 添 加 量 是 其 它 多 种 维 生 素 的 几 十 倍 到 几 百 倍, 在 饲 料 工 业 中 的 应 用 十 分 广 泛 遥 我 国 饲 料 工 业 发 展 迅 猛 袁 2005 耀 2006 年 全 国 各 种 饲 料 产 量 已 逾 亿 吨 袁 其 中 配 合 饲 料 产 量 达 7000 多 万 吨 袁 相 应 地 氯 化 胆 碱 的 需 要 量 为 16 万 吨 遥 因 此 袁 有 必 要 就 氯 化 胆 碱 在 畜 禽 水 产 动 物 饲 料 上 的 应 用 尧 氯 化 胆 碱 的 防 潮 尧 抗 结 块 研 究 以 及 其 降 低 脂 肪 沉 积 的 作 用 机 理 等 进 行 进 一 步 的 研 究 和 探 讨 遥 11 参 考 文 献 1 王 宏. 胆 碱 与 其 它 甲 基 供 体 对 褐 壳 蛋 鸡 脂 肪 代 谢 的 调 控 作 用 及 其 对 生 产 性 能 的 影 响 [D]. 中 国 农 业 科 学 院 研 究 生 院 博 士 论 文, 王 彦 新, 程 伟. 肉 仔 鸡 饲 粮 中 添 加 胆 碱 及 无 机 硫 酸 盐 对 蛋 氨 酸 的 替 代 作 用 [J]. 饲 料 工 业,1991,12(7):43 3 吕 克 洲. 含 足 量 蛋 氨 酸 的 肉 仔 鸡 饲 料 中 添 加 氯 化 胆 碱 的 效 果 [J]. 饲 料 研 究,1988(9):15~16 4 王 放 银. 家 禽 日 粮 需 要 补 充 胆 碱 [J]. 国 外 畜 牧 学 - 饲 料,1992,3:44 5 陆 文 清. 饲 料 中 添 加 胆 碱 对 蛋 种 鸡 的 生 产 性 能 及 种 蛋 的 受 精 率 的 影 响 [J]. 黑 龙 江 畜 牧 兽 医,1994(9):17 6 王 道 尊, 赵 亮, 谭 玉 钧. 草 鱼 鱼 种 对 胆 碱 需 要 量 的 研 究 [J]. 水 产 学 报,1995,19(2):133~139 7 吴 善, 蔡 清 海. 对 虾 对 维 生 素 B 1 B 6 和 氯 化 胆 碱 的 需 求 [J]. 饲 料 研 究, 1994(5):2~4 8 尹 国 平, 马 新 华, 刘 亚 强, 等. 防 止 氯 化 胆 碱 吸 潮 结 块 的 新 方 法 [J]. 中 国 饲 料,1995(12):35 9 徐 晓 峰, 张 力 莉. 胆 碱 及 其 在 反 刍 动 物 中 的 应 用 [J]. 草 食 家 畜,2006, (130):38~39 10 陈 芳, 杨 代 勤, 方 长 琰, 等 援 饲 料 添 加 胆 碱 对 黄 鳝 生 长 及 肌 肉 和 肝 脏 脂 肪 含 量 的 影 响 [J]. 湖 北 农 学 院 学 报,2002,22(4):327~ 许 朝 芳. 胆 碱 对 瘤 胃 微 生 物 代 谢 的 影 响 [J]. 广 西 畜 牧 兽 医,2001, 17(6):4 耀 7 12 沈 红, 霍 齐 光. 日 粮 胆 碱 及 其 存 在 形 式 对 肉 仔 鸡 的 影 响 [J] 援 中 国 畜 牧 杂 志,1999,35(6):24~26 13 王 敏 奇. 胆 碱 在 饲 料 工 业 中 的 研 究 应 用 进 展 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业, 2001(11):25 耀 陈 清 华 译, 贺 建 华 校. 奶 牛 的 胆 碱 营 养 [J]. 湖 南 饲 料,2001(6):22 耀 吴 跃 明. 胆 碱 的 瘤 胃 代 谢 及 其 在 奶 牛 营 养 上 的 作 用 [J]. 中 国 畜 牧 杂 志,1996,32(1):57 耀 杨 敏. 饲 料 添 加 剂 预 混 料 中 维 生 素 破 坏 因 子 的 研 究 [D]. 东 北 农 业 大 学 硕 士 学 位 论 文, 孙 海 霞. 复 合 预 混 料 在 贮 存 过 程 中 有 效 成 分 稳 定 性 的 研 究 维 生 素 [D]. 东 北 农 业 大 学 硕 士 学 位 论 文, 杨 月 祥 摘 译. 影 响 饲 料 添 加 剂 中 维 生 素 稳 定 性 的 因 素 [J]. 饲 料 工 业,1991,12(11):45 19 Tillman,et al. The Response of Male Broiler Chickstoa Corn-Soy Diet Supplemented with L -Methionine,L -Cystine,Choline, Sulfate,andVitaminVB 12[J]. Poultry Sci.,1986,65:1 741~ Harms,etal.ResearchNote:ConditionsNecessaryForaResponsebythe Commercial Laying Hento SupplementalCholineandSulfate.Poultry Sci.,1990,69:1 226~ Tsiagbe,et al. AFeather-Sexed Strain of Laying Hens was more Responsive to Dietary Supplementsof Choline and Methionine thanaven-sexed Strain[J]. Poultry Sci.,1992,71:1 271~ Dye,et al. Choline Versus Betaineand Expeller Versus Solvent Soybean Mea lfor Weanling Pigs[J].J. Anim. Sci.,1950,9: Emmanue BK, et al. J.Dariy Sci.[J],1984,67(9):1 912 耀 Sharma BK, et al. J. Dariy Sci.[J],1988, 71(9):2 406 耀 Sharma BK, et al. J. Nutr.[J],1989, 119:249 耀 Erdman RA, et al. J. Dariy Sci.[J],1991,74:1 641 耀 Bindel DJJ. Journal of Animal Science,2000,78(10):2 497 耀 2503 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

12 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 酶 制 剂 本 栏 目 由 北 京 挑 战 生 物 技 术 有 限 公 司 协 办 外 源 酶 制 剂 在 反 刍 动 物 上 的 应 用 研 究 王 书 然 张 铁 鹰 陈 志 伟 敖 长 金 多 年 的 试 验 研 究 表 明 袁 添 加 外 源 酶 有 助 于 提 高 单 胃 动 物 对 日 粮 养 分 的 利 用 率 渊 特 别 对 肉 鸡 日 粮 冤 和 改 善 其 生 产 性 能 曰 但 是 在 反 刍 动 物 日 粮 中 的 应 用 很 少 遥 反 刍 动 物 瘤 胃 内 的 微 生 物 能 分 泌 一 系 列 的 纤 维 素 降 解 酶 袁 能 将 纤 维 素 逐 步 降 解 成 供 宿 主 动 物 利 用 的 单 糖 袁 所 以 人 们 认 为 简 单 地 添 加 外 源 酶 制 剂 不 会 提 高 纤 维 分 解 率 曰 并 认 为 袁 外 源 酶 在 瘤 胃 中 能 被 蛋 白 酶 或 被 小 肠 蛋 白 酶 水 解 而 失 活 遥 但 是 袁 随 着 生 物 技 术 的 发 展 和 发 酵 工 艺 的 进 步 袁 许 多 优 良 菌 种 的 发 现 和 应 用 袁 使 得 饲 用 酶 种 类 尧 活 力 和 稳 定 性 均 有 所 提 高 袁 为 提 高 反 糖 酶 制 剂 可 以 破 坏 细 胞 壁 的 特 殊 结 构 袁 使 细 胞 内 容 物 裸 露 出 来 与 动 物 内 源 消 化 酶 接 触 消 化 袁 改 善 反 刍 动 物 消 化 道 及 瘤 胃 有 益 菌 的 环 境 袁 改 善 反 刍 动 物 肠 道 菌 群 袁 改 善 微 生 物 发 酵 袁 对 细 胞 免 疫 尧 体 液 免 疫 尧 补 体 功 能 和 白 细 胞 吞 噬 作 用 等 有 重 要 影 响 袁 因 而 提 高 了 反 刍 动 物 的 抗 病 性 尧 免 疫 力 尧 养 分 利 用 率 尧 饲 料 转 化 率 袁 并 改 善 了 动 物 的 生 产 性 能 遥 反 刍 动 物 的 粗 饲 料 含 纤 维 较 多 袁 所 以 目 前 在 反 刍 动 物 上 常 用 的 外 源 酶 制 剂 主 要 有 纤 维 素 酶 尧 木 聚 糖 酶 尧 茁 - 葡 聚 糖 酶 和 果 胶 酶 遥 刍 动 物 粗 饲 料 的 利 用 率 和 改 善 其 生 产 性 能 创 造 了 条 2 外 源 酶 对 反 刍 动 物 养 分 消 化 和 生 产 性 能 的 影 响 件 遥 但 纤 维 复 合 酶 在 反 刍 动 物 上 的 应 用 还 存 在 着 若 干 问 题 袁 主 要 有 以 下 几 方 面 院 日 粮 的 成 分 尧 酶 的 种 类 尧 酶 2.1 外 源 酶 对 奶 牛 的 影 响 越 来 越 多 的 试 验 表 明 袁 使 用 酶 制 剂 可 以 增 加 奶 牛 的 活 性 尧 酶 的 添 加 量 尧 酶 的 稳 定 性 尧 应 用 方 法 遥 本 文 就 酶 在 反 刍 动 物 瘤 胃 液 中 的 稳 定 性 尧 添 加 方 式 和 添 加 量 等 方 面 进 行 综 述 遥 的 产 奶 量 和 干 物 质 的 采 食 量 袁 Yang 等 渊 1999 冤 报 道 袁 奶 牛 日 粮 中 添 加 纤 维 素 复 合 酶 渊 由 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 组 成 冤 可 提 高 产 奶 量 和 消 化 道 有 机 物 和 NDF 的 消 化 1 反 刍 动 物 应 用 外 源 酶 的 必 要 性 反 刍 动 物 的 主 体 饲 料 是 含 粗 纤 维 较 多 的 作 物 秸 率 袁 但 对 奶 成 分 无 影 响 曰 加 酶 使 瘤 胃 中 蛋 白 质 的 消 化 率 增 加 袁 但 是 有 机 物 和 NDF 的 消 化 率 没 有 显 著 的 变 秆 和 青 干 草 类 饲 料 袁 植 物 细 胞 壁 结 构 复 杂 袁 主 要 由 非 淀 粉 多 糖 ( 包 括 纤 维 素 尧 茁 - 葡 聚 糖 尧 木 聚 糖 尧 甘 露 聚 糖 和 果 胶 ) 和 木 质 素 等 组 成 袁 它 们 的 特 殊 结 构 使 它 们 具 有 一 定 的 抗 营 养 性 袁 许 多 饲 料 经 加 工 处 理 后 袁 仍 不 能 破 坏 其 细 胞 壁 的 完 整 性 袁 包 埋 在 细 胞 壁 内 的 许 多 可 消 化 营 养 物 质 ( 如 蛋 白 质 尧 淀 粉 等 ) 由 于 不 能 与 消 化 酶 接 触 而 不 能 被 消 化 利 用 遥 幼 龄 反 刍 动 物 瘤 胃 发 育 不 全 袁 微 生 物 体 系 不 完 善 袁 远 不 能 适 应 分 解 大 分 子 营 养 物 质 的 需 要 袁 不 能 充 分 利 用 饲 料 中 营 养 物 质 袁 而 成 年 反 刍 动 物 自 身 所 具 有 的 内 源 酶 数 量 及 种 类 有 限 袁 不 能 完 全 降 解 饲 料 中 的 非 淀 粉 多 糖 遥 使 用 相 应 的 外 源 非 淀 粉 多 化 袁 可 能 的 原 因 是 高 浓 度 的 酶 可 能 增 加 瘤 胃 微 生 物 蛋 白 的 合 成 袁 进 而 增 加 了 瘤 胃 养 分 的 消 化 率 遥 Rode 渊 1999 冤 将 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 所 组 成 的 复 合 酶 添 加 到 精 料 中 袁 添 加 量 为 1.3 g/kg 渊 干 物 质 的 基 础 上 冤 袁 日 粮 由 24% 的 青 贮 玉 米 尧 15% 的 苜 蓿 干 草 尧 61% 的 大 麦 组 成 袁 用 Cr 2 O 3 指 示 剂 法 测 定 营 养 物 质 的 消 化 率 袁 发 现 试 验 组 DM 尧 NDF 尧 ADF 尧 CP 的 降 解 率 分 别 高 于 对 照 组 袁 产 奶 量 也 有 增 加 的 趋 势 袁 乳 脂 肪 和 乳 蛋 白 的 含 量 有 所 下 降 袁 能 量 的 缺 乏 量 略 低 于 对 照 组 遥 结 果 表 明 袁 日 粮 中 添 加 纤 维 素 酶 袁 能 增 加 泌 乳 早 期 奶 牛 的 产 奶 量 和 营 养 物 质 的 消 化 率 袁 但 不 改 变 采 食 量 遥 在 精 料 中 添 加 纤 维 素 复 合 酶 袁 可 提 高 奶 牛 在 泌 乳 早 期 的 产 奶 量 袁 但 是 采 食 量 没 有 变 化 渊 Yang 袁 1998 冤 遥 王 书 然, 内 蒙 古 农 业 大 学 动 物 科 学 与 医 学 学 院, 张 铁 鹰, 中 国 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所 动 物 营 养 学 国 家 重 点 实 验 室 陈 志 伟, 山 东 理 工 大 学 生 命 科 学 学 院 敖 长 金, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : Schingoethe 等 渊 1999 冤 研 究 表 明 袁 当 给 奶 牛 饲 喂 经 过 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 处 理 后 的 玉 米 与 苜 蓿 混 合 青 贮 料 时 袁 2 耀 4 周 后 奶 牛 产 奶 量 提 高 了 10.8 豫 袁 并 持 续 整 个 试 验 期 袁 但 对 泌 乳 中 期 奶 牛 的 产 奶 量 影 响 较 小 曰 乳 蛋 白 和 乳 脂 肪 的 含 量 分 别 提 高 了 20% 和 13% 遥 Beauchemin(1999) 研 究 指 出, 使 用 外 源 酶 制 剂 可 以 12

13 酶 制 剂 王 书 然 等 : 外 源 酶 制 剂 在 反 刍 动 物 上 的 应 用 研 究 增 加 OM 尧 ADF 尧 NDF 总 的 消 化 道 消 化 率, 但 对 OM 在 瘤 胃 内 的 消 化 率 没 有 显 著 的 影 响 遥 Nowak(2003) 研 究 指 出 袁 奶 牛 全 混 日 粮 (TMR) 中 添 加 纤 维 素 复 合 酶 ( 含 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 ) 对 DM 尧 NDF 和 ADF 的 消 化 率 影 响 仅 在 发 酵 4 耀 6h 之 间 有 提 高 趋 势, 在 12 h 和 24 h 基 本 (2000) 报 道 指 出 袁 酶 制 剂 对 饲 喂 高 谷 实 类 日 粮 的 肉 牛 的 生 产 性 能 没 有 显 著 的 影 响 遥 尽 管 外 源 酶 制 剂 有 很 大 的 潜 在 利 益 袁 但 与 离 子 载 体 尧 抗 生 素 等 相 比 成 本 较 高 袁 故 在 肉 牛 工 业 中 发 展 较 慢 遥 近 年 来 有 少 数 几 种 酶 制 剂 应 用 在 肉 牛 生 产 上 袁 但 并 未 广 泛 的 应 用 遥 上 没 有 变 化, 但 可 以 略 微 增 加 TMR 在 小 肠 的 消 化 率 遥 3 影 响 酶 作 用 效 果 的 因 素 Kung(2000) 在 两 年 的 时 间 里 研 究 外 源 酶 对 奶 牛 生 产 性 能 的 影 响, 第 一 年, 试 验 1 组 酶 的 添 加 量 为 每 千 克 3.1 酶 本 身 性 质 不 同 微 生 物 发 酵 来 源 的 酶 制 剂 产 品 性 质 是 不 同 草 料 ( 干 物 质 基 础 )3 500 IU 纤 维 素 酶 和 IU 木 聚 糖 酶, 试 验 2 组 酶 添 加 8800 IU 纤 维 素 酶 和 IU 的 木 聚 糖 酶 遥 第 二 年, 试 验 1 组 的 酶 添 加 量 为 3700 IU 的 纤 维 素 酶 和 IU 的 木 聚 糖 酶 袁 试 验 2 组 的 添 加 量 为 3600 IU CMCase 和 IU 的 木 聚 糖 酶 袁 试 验 结 果 表 明, 第 一 年 袁 试 验 2 组 的 产 奶 量 渊 39.5 kg/d 冤 高 于 对 照 组 (37.0 kg/d) 和 试 验 1 组 渊 36.2 kg/d 冤 袁 牛 奶 中 乳 蛋 白 和 乳 脂 肪 含 量 随 着 酶 添 加 量 的 增 加 而 降 低 遥 在 第 二 年 袁 试 验 2 组 的 产 奶 量 渊 35.4 kg/d 冤 高 于 对 照 组 渊 32.0 kg/d 冤 和 试 验 1 组 渊 33.6 kg/d 冤 袁 乳 脂 率 和 乳 蛋 白 的 含 量 各 处 理 之 间 没 有 显 著 的 差 异 袁 但 是 试 验 组 偏 低 袁 两 年 中 袁 干 物 质 的 采 食 量 各 处 理 之 间 没 有 显 著 的 差 异 遥 使 用 外 源 酶 可 以 促 进 犊 牛 断 奶 后 的 生 长 和 改 善 饲 料 的 利 用 率 ( 朱 元 招 袁 2001) 遥 金 宏 渊 2004 冤 研 究 表 明 袁 日 粮 中 添 加 饲 用 纤 维 素 酶 可 以 提 高 奶 牛 的 产 奶 量 尧 乳 脂 率 袁 但 Dhiman 渊 2002 冤 等 研 究 发 现 袁 在 日 粮 中 添 加 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 不 会 改 变 泌 乳 早 期 奶 牛 的 采 食 量 尧 产 奶 量 尧 乳 成 分 和 代 谢 体 重 遥 的, 即 使 是 同 一 种 来 源 的 微 生 物, 不 同 的 加 工 工 艺, 其 酶 的 性 质 也 不 同 遥 Wallace 等 (2001) 用 6 种 酶 制 剂 检 测 酶 活 与 体 外 产 气 量 的 相 互 关 系 ( 用 干 草 和 玉 米 青 贮 做 底 物 ), 结 果 表 明, 纤 维 素 酶 活 性 和 干 草 产 气 量 有 极 强 的 相 关 关 系, 酶 活 高 的 纤 维 素 酶 可 以 增 加 玉 米 青 贮 的 产 气 量 遥 基 于 这 些 研 究, 一 些 人 猜 想, 提 高 纤 维 素 酶 的 活 性 是 最 关 键 的, 但 这 些 研 究 所 用 的 酶 制 剂 添 加 量 是 正 常 水 平 ( 每 克 奶 牛 全 混 合 日 粮 干 物 质 中 添 加 0.5 耀 2mg) 的 20 耀 40 倍 遥 Colombatto 等 (2002a) 用 23 种 商 业 酶 制 剂 去 检 测 酶 活 与 饲 料 体 外 降 解 的 相 互 关 系 袁 测 定 条 件 的 温 度 和 ph 值 与 瘤 胃 内 环 境 相 近 (39 益 尧 ph 值 6.0) 袁 酶 的 添 加 量 为 每 克 干 物 质 1.5 mg, 结 果 表 明 袁 苜 蓿 干 草 和 青 贮 产 生 的 还 原 糖 量 与 酶 活 之 间 有 极 强 的 相 关 关 系 遥 Colombatto 等 (2002b) 用 体 外 法 评 定 酶 制 剂 对 饲 草 干 物 质 降 解 率 的 影 响, 结 果 表 明, 发 酵 18 h 后 袁 23 种 产 品 中 只 有 5 种 酶 能 提 高 苜 蓿 的 降 解 率, 有 9 种 酶 可 以 提 高 青 贮 玉 米 的 降 解 率 袁 木 聚 糖 酶 活 性 与 苜 蓿 降 解 率 之 间 存 在 着 极 强 的 相 关 关 系, 但 对 青 贮 玉 米 则 无 效 遥 Eun 等 2.2 外 源 酶 对 肉 牛 的 影 响 近 年 来, 对 外 源 酶 制 剂 在 肉 牛 上 的 应 用 做 了 大 量 (2006) 用 体 外 法 评 定 了 13 种 纤 维 素 酶 和 10 种 木 聚 糖 酶 对 苜 蓿 的 发 酵 效 果, 分 别 测 定 了 各 种 酶 的 酶 活 袁 之 的 试 验 渊 Beauchemin,1995;Michal,1996;Pritchard,1996 曰 McAllister 袁 1999 曰 Wang 袁 1999 曰 ZoBell 袁 2000 冤 袁 结 果 表 明, 使 用 外 源 复 合 纤 维 素 酶 可 提 高 纤 维 素 的 降 解 率 袁 但 是 否 能 提 高 肉 牛 日 粮 的 消 化 率 进 而 提 高 其 生 产 性 能 与 肉 牛 的 品 种 特 征 和 试 验 的 条 件 密 切 相 关 遥 将 酶 制 剂 添 加 在 以 谷 类 为 主 的 饲 料 中 的 效 果 要 好 于 添 加 在 以 干 草 为 主 的 饲 料 中 的 效 果 遥 Iwaasa 等 (1997) 将 饲 用 木 聚 糖 酶 添 加 到 含 95% 的 大 麦 基 础 日 粮 中 袁 饲 料 利 用 率 可 提 高 6 豫 耀 12% 遥 Similarly 等 (1998) 报 道 指 出 袁 将 单 一 酶 制 剂 加 入 到 高 精 料 日 粮 中 袁 ADF 降 解 率 可 增 加 28% 遥 后 进 行 体 外 试 验, 结 果 只 有 2 种 纤 维 素 酶 和 2 种 木 聚 糖 酶 能 显 著 提 高 苜 蓿 的 产 气 量 和 有 机 物 质 的 消 化 率, 而 这 4 种 酶 的 酶 活 并 不 是 最 高 的 遥 这 些 研 究 结 果 指 出, 虽 然 酶 活 是 衡 量 酶 品 质 的 重 要 因 素 之 一, 但 仅 仅 依 靠 酶 活 来 预 测 在 瘤 胃 内 对 纤 维 素 的 降 解 力 是 不 够 准 确 的 遥 因 为 酶 活 是 在 规 定 的 温 度 和 ph 值 范 围 内 尧 选 用 特 定 的 底 物 来 测 定 的, 而 这 些 底 物 与 植 物 细 胞 壁 的 复 杂 结 构 相 差 甚 远, 不 能 保 证 酶 活 较 高 的 酶 在 瘤 胃 内 同 样 能 表 现 相 同 的 酶 活 遥 所 以, 当 酶 作 为 一 种 饲 料 添 加 剂 时, 酶 活 和 其 作 用 的 功 效 没 有 必 然 的 联 系 遥 McAllister 等 (1999) 报 道 指 出 袁 将 酶 制 剂 加 入 到 干 草 渊 含 30% 的 青 贮 黑 麦 草 冤 和 谷 实 类 渊 含 70% 大 麦 冤 为 主 3.2 酶 在 瘤 胃 液 中 的 稳 定 性 酶 的 本 质 是 一 种 蛋 白 质, 传 统 的 理 论 认 为 酶 在 瘤 的 日 粮 中 袁 添 加 量 为 每 吨 干 物 质 3.5 L 袁 ADG 可 提 高 10%( 干 物 质 基 础 上 ) 遥 祁 宏 伟 等 渊 2000 冤 研 究 表 明 袁 饲 喂 含 复 合 纤 维 素 酶 日 粮 的 肉 牛 袁 其 平 均 日 增 重 有 随 复 合 纤 维 素 酶 添 加 量 增 加 而 增 加 的 趋 势 袁 但 However 等 胃 内 被 蛋 白 酶 降 解, 日 粮 中 的 蛋 白 质 尤 其 是 可 溶 性 蛋 白 质 在 瘤 胃 内 会 被 快 速 的 降 解 (Broderick 等,1991) 遥 因 此, 外 源 酶 制 剂 能 在 瘤 胃 中 稳 定 存 活 是 其 发 挥 功 效 的 首 要 条 件 遥 Hristov 等 (1996) 证 明, 大 量 的 外 源 纤 维 复 合 13

14 王 书 然 等 : 外 源 酶 制 剂 在 反 刍 动 物 上 的 应 用 研 究 酶 制 剂 酶 可 以 过 瘤 胃, 进 而 在 小 肠 中 发 挥 作 用, 改 善 小 肠 养 分 的 消 化 和 吸 收 遥 杨 永 明 (2003) 试 验 表 明, 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 在 瘤 胃 液 中 能 稳 定 存 在 遥 Diego 等 (2000) 研 究 发 现, 茁 -1,4- 内 切 葡 萄 糖 酶 和 木 聚 糖 酶 ( 来 自 Aspergillus niger) 在 瘤 胃 液 中 能 稳 定 存 在 6h 以 上, 但 茁 - 糖 苷 酶 和 茁 - 木 糖 苷 酶 在 瘤 胃 液 中 活 性 损 失 的 很 快 遥 Morgavi 等 (2001) 研 究 报 道, 外 源 酶 在 饲 喂 前 尧 后 的 奶 牛 瘤 胃 液 中 都 能 稳 定 存 在, 但 在 饲 喂 后 的 奶 牛 瘤 胃 液 中 表 现 出 更 强 的 稳 定 性 ; 外 源 酶 在 胃 蛋 白 酶 中 能 稳 定 存 在, 但 是 在 胰 液 素 中 活 性 随 时 间 损 失 的 很 快 ; 同 样, 外 源 酶 在 小 肠 中 可 以 存 活 数 小 时 并 保 持 很 高 的 活 性 遥 Vyver(2005) 报 道, 经 过 糖 基 化 的 木 聚 糖 酶 的 稳 定 性 更 强 遥 Hristov 等 (1998) 报 道, 多 糖 降 解 酶 在 体 外 条 件 下 能 抵 抗 蛋 白 酶 的 水 解, 将 酶 制 剂 直 接 添 加 到 饲 料 里 饲 喂 奶 牛 不 会 提 高 瘤 胃 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 的 活 性, 但 是 将 酶 制 剂 直 接 注 入 到 瘤 胃 里 可 以 提 高 酶 的 活 性, 羧 甲 基 纤 维 素 酶 尧 木 聚 糖 酶 等 可 以 通 过 反 刍 动 物 瘤 胃 并 在 小 肠 中 影 响 营 养 物 质 的 消 化 利 用 ; 在 十 二 指 肠 肠 液 中 木 聚 糖 酶 酶 活 比 对 照 组 提 高 近 60 倍 遥 Morgavi 等 (2000) 用 体 外 法 研 究 瘤 胃 内 源 酶 和 外 源 酶 ( 来 自 Trichoderma longibrachiatum 袁 由 不 同 比 例 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 组 成 ) 对 底 物 降 解 的 协 同 关 系, 结 果 表 明, 在 ph 值 5.0 耀 6.0 尧 39 益 的 条 件 下, 与 单 独 外 源 酶 处 理 相 比 袁 瘤 胃 内 源 酶 与 外 源 酶 组 成 的 混 合 物 对 可 溶 性 纤 维 素 尧 木 聚 糖 尧 青 贮 玉 米 的 降 解 率 分 别 增 加 了 35% 尧 100% 和 40% 遥 由 此 推 断 袁 瘤 胃 内 源 干 物 质 的 降 解 率 袁 试 验 说 明 酶 制 剂 与 饲 料 正 确 匹 配 是 影 响 酶 作 用 功 效 的 重 要 因 素 之 一, 酶 制 剂 是 否 能 提 高 纤 维 的 降 解 率 要 依 靠 饲 料 的 组 成 遥 反 刍 动 物 商 品 日 粮 是 由 不 同 类 型 的 粗 饲 料 和 精 饲 料 组 合 而 成, 所 以 酶 与 饲 料 的 特 异 性 就 显 得 很 重 要 了 遥 因 此, 为 了 达 到 最 大 的 利 益, 在 传 统 日 粮 中 应 添 加 许 多 不 同 来 源 的 酶 制 剂, 最 理 想 的 方 法 是 添 加 对 大 多 数 饲 草 都 有 效 果 的 酶 制 剂 遥 目 前 在 反 刍 动 物 上 应 用 最 广 泛 的 两 种 非 淀 粉 多 糖 酶 为 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 遥 Pritchard 等 (1996) 研 究 发 现 袁 木 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 混 合 酶 的 饲 用 效 果 要 好 于 单 一 纤 维 素 酶 遥 Fontes 等 (1995) 指 出 袁 许 多 真 菌 和 细 菌 产 的 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 均 能 在 瘤 胃 中 有 协 同 作 用 遥 Eun(2006) 筛 选 了 2 种 纤 维 素 酶 和 2 种 木 聚 糖 酶 袁 4 种 单 酶 均 能 提 高 苜 蓿 有 机 物 质 的 消 化 率 袁 但 是 袁 将 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 混 合 使 用 时 袁 效 果 没 有 明 显 的 提 高 遥 外 源 酶 制 剂 的 稳 定 性 会 随 着 酶 的 类 型 尧 作 用 的 底 物 和 是 否 混 有 蛋 白 酶 而 发 生 改 变 渊 Hristov 等,1998 冤 遥 Beauchemin 渊 1997 冤 用 酶 1 渊 含 有 木 聚 糖 酶 和 内 切 葡 聚 糖 酶 冤 尧 酶 2 渊 含 有 纤 维 素 酶 和 木 聚 糖 酶 冤 分 别 以 低 尧 中 尧 高 水 平 处 理 的 苜 蓿 干 草 饲 喂 犊 牛 袁 酶 1 低 水 平 添 加 组 比 未 处 理 组 渊 对 照 组 冤 的 日 增 重 提 高 13% 袁 干 物 质 采 食 量 明 显 提 高 曰 酶 2 中 等 水 平 添 加 组 提 高 了 饲 料 转 化 率 袁 高 水 平 添 加 组 同 时 提 高 了 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 遥 这 就 说 明 酶 产 品 间 存 在 不 同 的 适 宜 添 加 量 袁 因 为 每 种 酶 产 品 都 有 自 己 独 特 的 酶 系 及 酶 活 遥 酶 和 外 源 酶 的 协 同 作 用 可 能 是 添 加 外 源 纤 维 素 复 合 酶 能 提 高 饲 料 利 用 率 的 机 制, 绝 大 多 数 真 菌 纤 维 素 酶 3.4 添 加 方 式 在 饲 喂 前 袁 将 酶 制 剂 溶 于 水 喷 洒 在 饲 料 上 能 提 高 和 木 聚 糖 酶 在 瘤 胃 液 中 是 稳 定 存 在 的 遥 反 刍 动 物 的 生 产 性 能 渊 Rode 等 袁 1999 曰 Schingoethe 等 袁 3.3 酶 和 日 粮 的 组 成 酶 和 底 物 有 特 异 性, 酶 对 一 种 底 物 有 效, 而 对 其 它 1999 曰 Kung 等 袁 2000 曰 Yang 等 袁 2000 冤 袁 将 酶 制 剂 直 接 投 入 到 瘤 胃 中 则 效 果 不 明 显 (Lewis 等,1996;McAllister 等, 底 物 未 必 有 效 遥 Bezuchemin 等 (1995) 用 一 种 含 有 木 聚 糖 酶 和 内 切 葡 聚 糖 酶 的 复 合 酶 制 剂 处 理 苜 蓿 干 草 和 青 贮 大 麦 袁 对 酶 作 用 的 特 异 性 作 了 研 究, 将 不 同 浓 度 水 平 的 酶 喷 洒 于 干 草 上, 结 果 发 现, 此 复 合 酶 处 理 苜 蓿 干 草 有 一 定 效 果, 而 对 青 贮 大 麦 的 作 用 效 果 不 明 显 遥 Wang 等 (2004) 将 复 合 酶 加 入 到 经 5% NaOH 溶 液 处 理 的 小 麦 秸 秆 上, 能 显 著 提 高 酶 制 剂 的 利 用 效 果 袁 作 用 机 理 可 能 是 碱 处 理 破 坏 了 秸 秆 表 面 的 纤 维 素 结 构 袁 增 加 了 酶 渗 透 到 细 胞 壁 内 部 与 包 埋 营 养 物 质 接 触 的 机 会 遥 Beauchemin 等 (2000) 用 体 外 人 工 瘤 胃 法 评 定 26 种 酶 制 剂 对 苜 蓿 干 草 和 青 贮 玉 米 干 物 质 降 解 率 的 影 响, 26 种 酶 制 剂 的 生 物 学 特 征 相 似 袁 在 体 外 发 酵 18 h 后, 所 有 酶 制 剂 均 能 不 同 程 度 的 提 高 苜 蓿 干 草 的 降 解 率, 但 只 有 1 种 酶 制 剂 能 同 时 提 高 苜 蓿 干 草 和 青 贮 玉 米 1999 曰 Sutton 等 袁 2001) 遥 Treacher 等 渊 1996 冤 比 较 了 将 酶 喷 洒 于 饲 草 与 通 过 瘘 管 直 接 加 入 瘤 胃 的 效 果, 当 用 酶 制 剂 体 外 法 处 理 干 草 时, 干 物 质 和 纤 维 的 消 化 率 更 高 遥 Beauchemin 等 渊 2003 冤 认 为 袁 外 源 酶 制 剂 与 饲 料 的 紧 密 结 合 组 成 特 殊 结 构 袁 从 而 增 强 了 抵 抗 瘤 胃 蛋 白 酶 水 解 的 能 力 遥 Lewis 渊 1996 冤 在 饲 喂 前 将 酶 溶 于 水 后 喷 洒 在 干 燥 的 草 上 袁 结 果 增 加 了 NDF 在 消 化 道 的 消 化 率 袁 但 处 理 后 立 即 饲 喂 和 处 理 后 放 置 24 h 后 再 饲 喂 袁 其 效 果 相 差 不 大 袁 体 外 试 验 也 证 实 了 类 似 的 结 果 (Colombatto, 2000) 遥 近 年 来, 酶 制 剂 被 广 泛 地 应 用 在 各 种 类 型 的 饲 料 上, 如 奶 牛 全 混 合 日 粮 (Higginbotham 等,1996;Beauchemin 等,1999;Phipps 等,2000;Yang 等,2000) 尧 干 草 (Beauchemin 等,1995;Lewis 等,1996;Yang 等,1999) 尧 青 贮 料 (Beauchemin 14

15 酶 制 剂 王 书 然 等 : 外 源 酶 制 剂 在 反 刍 动 物 上 的 应 用 研 究 等 袁 1995 曰 Phipps 等 袁 2000a) 尧 精 料 渊 Rode 等,1999;Phipps 等,2000b;Yang 等,2000) 尧 添 加 剂 (Bowman,2001) 尧 预 混 料 (Bowman,2001) 遥 外 源 酶 制 剂 应 用 在 水 分 含 量 高 的 饲 料 渊 青 贮 饲 料 冤 上 效 果 优 于 干 燥 饲 料 袁 因 为 复 杂 的 多 糖 水 解 生 成 单 糖 的 这 个 过 程 需 要 水 的 参 与 袁 此 外 袁 青 贮 饲 料 的 ph 值 与 大 多 数 真 菌 类 酶 的 理 想 ph 值 相 接 近 遥 但 是 袁 在 实 际 中 袁 一 些 外 源 酶 处 理 干 燥 饲 草 的 效 果 要 好 于 湿 草 的 效 果 遥 Feng 等 (1996) 将 酶 制 剂 溶 于 水 后 喷 洒 在 新 鲜 和 枯 萎 的 饲 草 上 没 有 任 何 效 果 曰 但 同 样 处 理 干 燥 的 草 袁 则 增 加 了 DM 和 纤 维 的 消 化 率 遥 Yang (2000) 等 报 道 袁 将 酶 制 剂 添 加 到 精 料 中 能 增 加 奶 牛 的 产 奶 量 和 饲 料 消 化 率 袁 但 直 接 加 入 到 全 混 合 日 粮 中 则 没 有 效 果 遥 相 反 袁 Phipps (2000) 等 报 道 袁 将 酶 制 剂 加 入 到 精 料 和 全 混 合 日 粮 中 没 有 差 异 遥 Yang(1999) 认 为 袁 酶 的 饲 用 效 果 在 于 总 的 添 加 量 袁 在 粗 料 和 精 料 中 加 酶 影 响 不 大 遥 将 酶 制 剂 加 入 到 精 料 中 是 有 效 的 (Beauchemin 等, 1997;Iwaasa 等,1997;Rode,1999;Yang 等,2000) 遥 Bowman (2001) 将 酶 制 剂 分 别 添 加 到 精 料 ( 占 全 混 合 日 粮 45%) 尧 补 充 料 ( 占 全 混 合 日 粮 4%) 和 预 混 料 ( 占 全 混 合 日 粮 0.2%) 中 袁 精 料 组 消 化 道 内 总 的 DNF 消 化 率 增 加 了 44.3% 耀 55.6%, 但 对 其 它 处 理 组 没 有 效 果 遥 同 样 的 日 粮 用 体 外 法 评 定, 将 酶 加 入 到 精 料 中, 全 混 合 日 粮 的 干 物 质 消 化 率 在 发 酵 12 h 后 增 加 了 15%, 加 入 到 预 混 料 中 增 加 了 17% 曰 发 酵 48 h 后, 只 有 预 混 料 组 较 之 对 照 组 有 很 高 的 DM 消 化 率 遥 将 低 剂 量 的 酶 加 入 到 日 粮 中 则 没 有 效 果 袁 其 作 用 机 理 尚 不 清 楚 遥 Beauchemin 等 (1999) 建 议 袁 将 高 水 平 的 酶 制 剂 添 加 到 日 粮 中 袁 增 加 酶 制 剂 在 瘤 胃 的 滞 留 时 间 袁 低 水 平 的 酶 制 剂 可 能 快 速 的 通 过 瘤 胃 袁 但 此 情 况 在 体 外 不 会 发 生, 故 用 体 外 法 评 定 酶 的 生 物 学 效 果 很 难 精 确 地 反 映 在 体 内 的 真 实 情 况 遥 3.5 添 加 量 关 于 酶 的 添 加 量 方 面 的 研 究 结 果 不 尽 一 致 袁 酶 活 不 足 或 酶 活 过 剩 可 能 是 造 成 许 多 研 究 结 果 不 一 致 性 的 原 因 袁 在 体 内 酶 的 量 与 生 长 性 能 的 表 现 是 非 线 性 的 袁 但 应 尽 可 能 的 提 供 高 水 平 酶 (Beauchemin 等,1995 曰 Kung 等,2000) 遥 Kung(2000) 用 不 同 梯 度 水 平 的 酶 制 剂 处 理 干 草 渊 60% 的 青 贮 玉 米 和 40% 的 紫 花 苜 蓿 冤 袁 在 每 千 克 全 混 合 日 粮 中 的 添 加 量 分 别 为 0 尧 1 尧 2.5 ml, 结 果 表 明 袁 低 水 平 酶 组 的 奶 牛 产 奶 量 渊 39.5 kg/d 冤 高 于 对 照 组 (37.0 kg/d) 和 高 水 平 酶 组 (36.2 kg/d)(p<0.01) 遥 同 样 袁 Beauchemin 等 (1995) 用 肉 牛 做 的 试 验 也 得 到 相 同 的 结 论 袁 低 水 平 酶 组 渊 每 千 克 干 物 质 添 加 0.25 耀 1ml 冤 能 使 ADG 增 加 24 豫 耀 30% 袁 说 明 增 加 了 可 消 化 DM 的 采 食 量 袁 但 高 水 平 酶 组 渊 每 千 克 干 物 质 中 添 加 2 和 4ml 冤 则 15 没 有 效 果 遥 试 验 结 果 说 明 酶 的 添 加 量 并 不 是 越 多 越 好 袁 理 想 的 添 加 水 平 要 依 靠 日 粮 的 类 型 决 定 袁 具 体 的 机 理 尚 不 清 楚 遥 Nsereko 等 (2002) 对 奶 牛 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 酶 制 剂 对 瘤 胃 液 中 总 的 微 生 物 的 影 响 的 研 究 推 断 袁 添 加 适 当 水 平 的 酶 制 剂 可 以 在 吸 收 前 或 后 使 饲 料 的 表 层 结 构 发 生 适 当 的 断 裂 袁 从 而 更 有 利 于 吸 收 遥 高 水 平 的 酶 制 剂 吸 附 在 饲 料 的 表 面 上 袁 限 制 了 微 生 物 与 饲 料 表 面 的 接 触 袁 降 低 了 饲 料 表 层 结 构 的 适 当 断 裂 袁 使 吸 收 受 阻 遥 在 实 际 应 用 中 袁 适 宜 的 添 加 量 不 仅 可 以 提 高 反 刍 动 物 的 生 产 性 能 袁 而 且 避 免 了 过 量 使 用 酶 带 来 的 浪 费 遥 3.6 动 物 种 类 当 日 粮 中 能 量 水 平 很 低 的 时 候 袁 使 用 外 源 酶 制 剂 能 最 大 限 度 的 消 化 纤 维 素 袁 以 满 足 高 产 奶 牛 产 奶 和 生 长 期 肉 牛 生 长 的 需 要 遥 对 于 高 产 奶 牛 来 说 袁 采 食 量 往 往 高 于 满 足 维 持 需 要 量 的 要 求 遥 由 于 瘤 胃 内 ph 值 偏 低 袁 故 纤 维 素 被 降 解 之 后 能 快 速 的 通 过 瘤 胃 遥 NRC (2001) 认 为 袁 奶 牛 采 食 量 过 高 会 影 响 饲 料 消 化 率 袁 对 于 高 品 质 的 日 粮 袁 消 化 率 降 低 的 程 度 更 大 遥 酶 制 剂 是 连 接 日 粮 潜 在 消 化 率 和 实 际 消 化 率 之 间 的 桥 梁 袁 Yang 等 渊 2000 冤 将 酶 加 入 到 相 同 全 混 合 日 粮 中 分 别 饲 喂 奶 牛 和 绵 羊 袁 对 于 奶 牛 来 说 袁 对 照 组 的 总 消 化 道 DM 和 ADF 的 消 化 率 分 别 为 63.9% 和 31.8% 曰 对 于 采 食 量 较 低 的 绵 羊 来 说,DM 和 ADF 分 别 为 77.1% 和 49.8% 遥 试 验 结 果 表 明, 使 用 酶 制 剂 可 以 提 高 奶 牛 的 消 化 率, 但 是 对 绵 羊 则 没 有 效 果 遥 这 个 结 果 指 出 袁 当 日 粮 在 动 物 体 内 消 化 受 限 制 而 没 有 达 到 本 身 潜 在 的 消 化 率 时 袁 加 入 酶 制 剂 会 提 高 消 化 率 遥 现 有 的 酶 制 剂 生 产 技 术 很 难 满 足 犊 牛 的 需 要 袁 同 样 的 袁 使 用 外 源 酶 制 剂 对 处 在 泌 乳 早 期 的 奶 牛 效 果 要 好 于 泌 乳 后 期 的 奶 牛 (Nussio 等, 1997;Schingoethe 等,1999) 遥 4 小 结 由 上 述 论 述 可 知 袁 由 于 各 试 验 使 用 的 试 验 动 物 尧 酶 的 种 类 及 添 加 量 尧 日 粮 的 组 成 不 同 袁 使 得 试 验 结 果 也 不 尽 一 致 袁 但 大 多 数 试 验 结 果 表 明 袁 在 反 刍 动 物 的 饲 料 中 无 论 是 以 何 种 形 式 添 加 纤 维 素 酶 等 非 淀 粉 多 糖 酶 袁 均 可 起 到 促 进 反 刍 动 物 对 日 粮 营 养 物 质 的 利 用 和 改 善 其 生 产 性 能 的 作 用 遥 对 于 在 反 刍 动 物 中 应 用 的 酶 制 剂 袁 目 前 的 研 究 方 向 应 该 是 寻 找 更 优 良 尧 酶 活 稳 定 的 菌 株 袁 并 研 究 能 显 著 改 善 反 刍 动 物 营 养 价 值 的 酶 制 剂 袁 加 强 反 刍 动 物 消 化 机 理 和 消 化 过 程 的 应 用 理 论 研 究 袁 生 产 针 对 性 强 的 酶 制 剂 遥 ( 参 考 文 献 15 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

16 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 酶 制 剂 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 应 用 研 究 范 一 文 吴 晓 英 葡 萄 糖 氧 化 酶 渊 Glucose oxidase, 简 称 GOD 冤 袁 其 系 统 命 名 为 茁 原 D 原 葡 萄 糖 氧 化 还 原 酶 渊 EC 冤 袁 它 能 高 度 专 一 性 地 催 化 茁 原 D 原 葡 萄 糖 与 空 气 中 的 氧 反 应 袁 存 在 下 消 耗 1g 原 子 氧 袁 没 有 过 氧 化 氢 酶 存 在 下 消 耗 1g 分 子 氧, 在 有 乙 醇 和 过 氧 化 氢 酶 存 在 下, 也 消 耗 1g 分 子 氧 遥 使 葡 萄 糖 氧 化 成 为 葡 萄 糖 酸 和 过 氧 化 氢 遥 该 酶 广 泛 分 布 于 动 物 尧 植 物 及 微 生 物 体 内 袁 工 业 上 主 要 利 用 黑 曲 2 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 动 物 体 内 的 作 用 葡 萄 糖 氧 化 酶 与 生 命 的 重 要 物 质 要 葡 萄 糖 和 霉 和 青 霉 属 菌 株 进 行 发 酵 生 产 遥 作 为 一 种 新 型 酶 制 剂 袁 由 于 GOD 具 有 去 葡 萄 糖 尧 脱 氧 尧 杀 菌 等 特 性 袁 而 且 安 全 无 毒 副 作 用 袁 因 此 在 食 品 的 加 工 保 鲜 尧 医 学 等 上 都 有 广 泛 的 应 用 遥 1999 年 袁 农 业 部 将 它 定 为 12 种 允 许 使 用 的 饲 料 酶 制 剂 添 加 剂 之 一 遥 氧 有 密 切 关 系, 在 动 物 体 内 发 挥 着 重 要 作 用 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 能 催 化 肠 道 内 的 葡 萄 糖 产 生 葡 萄 糖 酸 和 过 氧 化 氢 遥 当 过 氧 化 氢 积 累 到 一 定 浓 度 时, 直 接 抑 制 大 肠 杆 菌 尧 沙 门 氏 菌 尧 巴 氏 杆 菌 尧 葡 萄 球 菌 等 有 害 菌 的 生 长 繁 殖 遥 它 还 能 催 化 葡 萄 糖 去 除 肠 道 内 氧 气, 为 厌 氧 有 1 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 性 质 及 其 作 用 机 理 益 菌 的 增 殖 创 造 厌 氧 环 境 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 作 用 于 葡 萄 1 援 1 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 酶 学 性 质 高 纯 度 的 葡 萄 糖 氧 化 酶 为 淡 黄 色 晶 体 袁 易 溶 于 糖 生 成 的 葡 萄 糖 酸 可 降 低 胃 肠 内 ph 值, 为 有 益 菌 生 长 创 造 酸 性 环 境 袁 而 有 益 菌 大 量 增 殖 形 成 微 生 态 竞 争 水 袁 不 溶 于 乙 醚 尧 氯 仿 尧 甘 油 等 遥 一 般 制 品 中 含 有 过 氧 化 氢 酶 (Hydrogen peroxidase 袁 简 写 HPD) 袁 分 子 量 为 15 万 单 位 左 右 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 最 大 光 吸 收 波 长 渊 姿 max 冤 优 势, 抑 制 了 大 肠 杆 菌 尧 沙 门 氏 菌 等 有 害 菌 存 活, 控 制 感 染, 排 除 腐 败 物 质, 提 高 巨 噬 细 胞 活 性, 从 而 提 高 机 体 免 疫 力 遥 为 377 nm 和 455 nm 遥 在 紫 外 光 下 无 荧 光 袁 但 是 在 热 尧 3 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 畜 禽 养 殖 业 中 的 应 用 酸 或 碱 处 理 后 具 有 特 殊 的 绿 色 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 稳 定 的 ph 值 范 围 为 3.5 耀 6.5 袁 最 适 ph 值 为 5 袁 如 果 在 没 有 葡 3.1 抗 生 素 饲 料 添 加 剂 的 替 代 品 由 于 含 抗 生 素 饲 料 添 加 剂 的 药 物 残 留 及 抗 药 性 萄 糖 等 保 护 剂 的 存 在 下 袁 ph 值 大 于 8 或 小 于 3 时 袁 葡 萄 糖 氧 化 酶 会 迅 速 失 活 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 作 用 温 度 一 般 为 30 耀 60 益 遥 固 体 酶 制 剂 在 0 益 下 可 至 少 稳 定 保 存 2 年 袁 在 -15 益 下 可 稳 定 保 存 8 年 遥 等 问 题 袁 抗 生 素 替 代 品 的 开 发 已 成 为 近 年 研 究 的 热 点 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 作 为 饲 料 添 加 剂 可 催 化 肠 道 内 葡 萄 糖 产 生 葡 萄 糖 酸 和 过 氧 化 氢 袁 直 接 抑 制 大 肠 杆 菌 尧 沙 门 氏 菌 尧 葡 萄 球 菌 尧 弧 菌 袁 保 护 肠 道 上 皮 细 胞 的 完 整 1 援 2 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 作 用 机 理 葡 萄 糖 氧 化 酶 通 常 与 过 氧 化 氢 酶 组 成 一 个 氧 化 性 ; 改 善 肠 道 酸 性 消 化 环 境 尧 保 持 肠 道 菌 群 生 态 平 衡 袁 解 除 霉 菌 毒 素 等 作 用 袁 从 而 起 到 抗 菌 的 功 效 遥 在 父 母 还 原 酶 系 统 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 分 子 氧 存 在 下 能 氧 化 葡 萄 糖 生 成 D- 葡 萄 糖 酸 内 酯 袁 同 时 消 耗 氧 生 成 过 氧 化 氢 遥 过 氧 化 氢 酶 能 够 将 过 氧 化 氢 分 解 生 成 水 和 1/2 氧 袁 而 后 水 又 与 葡 萄 糖 酸 内 酯 结 合 产 生 葡 萄 糖 酸 遥 在 代 蛋 种 鸡 育 成 料 中 添 加 一 定 量 的 葡 萄 糖 氧 化 酶 袁 对 由 大 肠 杆 菌 等 引 起 的 肠 道 腹 泻 有 明 显 的 预 防 及 治 疗 作 用 遥 另 外 袁 临 床 观 察 也 表 明 袁 葡 萄 糖 氧 化 酶 可 以 解 除 饲 料 中 真 菌 毒 素 的 危 害 袁 提 高 动 物 免 疫 能 力 遥 此 过 程 中 袁 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 特 点 是 能 够 消 耗 氧 气 催 化 葡 萄 糖 氧 化 曰 每 克 分 子 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 有 过 氧 化 氢 酶 3.2 饲 用 抗 球 虫 药 物 的 替 代 品 球 虫 病 是 一 种 普 遍 多 发 尧 严 重 危 害 家 禽 的 寄 生 虫 病 遥 目 前 国 内 仍 以 药 物 预 防 为 主 袁 但 球 虫 极 易 产 生 耐 药 性 袁 现 有 的 球 虫 药 物 已 很 难 控 制 球 虫 病 袁 寻 求 安 全 尧 范 一 文, 华 南 理 工 大 学 生 物 科 学 与 工 程 学 院,510640, 广 州 市 天 河 区 华 观 路 1401 号 A 室 吴 晓 英, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 有 效 尧 经 济 的 球 虫 病 防 治 方 法 是 促 进 家 禽 生 产 的 当 务 之 急 遥 葡 萄 糖 氧 化 酶 因 其 具 有 抗 氧 化 作 用 袁 能 有 效 清 除 自 由 基 袁 保 护 肠 道 上 皮 细 胞 的 完 整 性 袁 使 球 虫 侵 入 肠 道 上 皮 寄 生 部 位 的 机 会 大 大 降 低 袁 从 而 达 到 防 御 球 16

17 酶 制 剂 范 一 文 等 : 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 应 用 研 究 虫 的 目 的 遥 将 葡 萄 糖 氧 化 酶 拌 料 饲 养 乌 鸡 袁 与 对 照 组 相 比 袁 球 虫 病 发 病 时 间 推 迟 袁 症 状 减 轻 袁 病 程 缩 短 袁 死 亡 率 大 大 降 低 遥 3.3 促 生 长 作 用 当 将 葡 萄 糖 氧 化 酶 加 入 青 贮 饲 料 中 袁 因 其 消 耗 了 氧 而 利 于 厌 氧 性 乳 酸 菌 的 增 殖 袁 加 快 了 乳 酸 菌 的 发 酵 过 程 袁 可 迅 速 产 生 大 量 乳 酸 袁 使 青 贮 的 ph 值 很 快 下 降 袁 抑 制 了 有 害 细 菌 的 繁 殖 袁 避 免 了 异 常 发 酵 袁 最 终 保 证 青 贮 饲 料 的 质 量 袁 有 利 于 牛 的 育 肥 遥 李 焰 的 研 究 发 现 袁 在 AA 肉 鸡 的 基 础 日 粮 中 添 加 饲 用 葡 萄 糖 氧 化 酶 制 剂 袁 能 显 著 提 高 AA 肉 鸡 的 生 产 性 能 尧 饲 料 转 化 率 尧 抗 病 能 力 和 成 活 率 遥 4 结 语 开 发 新 型 酶 制 剂 替 代 化 学 添 加 剂 以 及 对 传 统 酶 制 剂 的 应 用 方 式 尧 方 法 加 以 改 进 的 研 究 已 成 为 近 年 来 国 内 外 的 研 究 热 点 遥 不 过 袁 葡 萄 糖 氧 化 酶 催 化 反 应 要 消 耗 能 源 物 质 要 要 葡 萄 糖 袁 是 否 对 动 物 的 生 长 有 负 面 作 用 还 有 待 研 究 遥 如 何 更 经 济 尧 更 有 效 地 制 备 和 提 高 纯 葡 萄 糖 氧 化 酶 也 是 将 来 的 一 个 研 究 方 面 遥 参 考 文 献 1 马 清 河, 胡 常 英, 刘 丽 娜, 等. 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 果 汁 保 鲜 中 的 应 用 [J]. 中 国 食 品 添 加 剂,2005(3):83 耀 85 2 范 孝 用, 戴 平, 王 洁, 等. 高 效 天 然 去 氧 保 鲜 剂 GOD 在 啤 酒 生 产 中 的 应 用 [J]. 中 国 食 品 工 业,1998(8):14 耀 15 3 靳 烨. 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 食 品 工 业 中 的 应 用 [J]. 食 品 与 机 械,1995(3): 17 耀 19 4 Vemulapalli V, Miller K A, Hosenney R C. Glucose oxidace in breaking systes[j].cereal Chemistry,1998, 75(4):439 耀 夏 萍, 梁 新 宇. 葡 萄 糖 氧 化 酶 在 面 包 中 作 用 机 理 的 初 探 [J]. 中 国 食 品 用 化 学 品,1999(4): 30 耀 32 6 Devail, Felfody L, Wittnerl, et al.detection of phosphine:new aspects of phosphorus cycle in the hydrosphere [J].Nature, 1988,333:343 耀 李 彤, 姚 子 华, 丁 良, 等. 新 型 葡 萄 糖 氧 化 酶 电 极 用 于 临 床 血 糖 的 测 定 [J]. 分 析 测 试 学 报,2004,23(3):67 耀 69 8 卞 瑞 玲, 刘 安 保. 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 测 定 尿 糖 的 初 步 探 讨 [J]. 社 会 医 学 杂 志,2005(3):81 9 Kim EJ,Yanagida Y,Haruyama T, et al.immunosensing system for efetoprotein coupled with adisposable amperometric glucose oxidase sensor[j]. Sensors &Actuators B, 2001,79:87 耀 刁 其 玉, 屠 焰, 齐 广 海, 等. 益 生 菌 ( 素 ) 的 研 究 及 其 在 饲 料 中 的 应 用 [J]. 饲 料 工 业,2002(10):1 耀 4 11 李 焰. 鲜 尔 康 在 肉 鸡 饲 养 中 替 代 抗 生 素 的 效 果 试 验 [J]. 中 国 牧 业 通 讯,2005(10): 70 耀 梁 振 华. 鲜 尔 康 控 制 鸡 育 雏 期 球 虫 病 的 疗 效 观 察 [J]. 湖 北 畜 牧 兽 医,2004(1):31 耀 吕 进 宏, 黄 涛, 马 立 保. 新 型 饲 料 添 加 剂 葡 萄 糖 氧 化 酶 [J]. 中 国 饲 料,2004(3): 15 耀 李 焰. 葡 萄 糖 氧 化 酶 饲 养 肉 鸡 效 果 试 验 [J]. 龙 岩 师 专 学 报,2004, 22 (6): 77 耀 窦 道 龙, 王 冰 山, 唐 益 雄, 等. 植 物 广 谱 抗 病 基 因 工 程 策 略 与 研 究 进 展 [J]. 生 物 技 术 通 报,2002(1):5 耀 9 16 Wu G, Shortt BJ, Lawrence EB, et al. Disease resistance conferred by expression of agene encoding H 2O 2-generating glucose oxidase in transgenic potato plants[j]. Plant Cell,1995(9): 1357 耀 甄 伟, 陈 溪, 梁 浩 博, 等. 转 基 因 马 铃 薯 中 病 原 诱 导 GOD 基 因 的 表 达 及 其 对 晚 疫 病 的 抗 性 [J]. 科 学 通 报,2000,45(10):1 071 耀 Peng H, Wang Z-X, Dou D-L,et al.introducing glucose oxidase gene into rice mediated by Agrobacterium tumefaciens[j]. Journal of Agricultural Biotechnology,2003,11(1) :16 耀 康 乐, 叶 兴 国, 徐 惠 君. 葡 萄 糖 氧 化 酶 基 因 转 化 小 麦 的 研 究 [J]. 作 物 学 报,2005,31(6):686 耀 Orozco-Cardenas ML, Narvaez-Vasquez J,Ryan CA. Hydrogen peroxide acts as asecond messenger for the induction of defense genes in tomato plants in response to wounding systemin and methyl jasmonate[j]. Plant Cell,2001,13 (1) :179 耀 李 庆 芝, 尚 志 华, 房 玉 洁, 等. 姜 基 因 转 化 系 统 的 建 立 及 优 化 [J]. 山 东 农 业 科 学,2006(3):11 耀 14 征 订 启 事 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 本 刊 为 半 月 刊, 大 16 开 本, 每 期 正 文 64 页, 公 开 发 行, 各 地 邮 局 均 可 订 阅, 也 可 直 接 向 本 刊 发 行 部 订 购 国 际 标 准 连 续 出 版 物 号 ISSN X, 国 内 统 一 连 续 出 版 物 号 CN /S, 邮 发 代 号 :8-163 每 期 定 价 6 元, 全 年 24 期 共 144 元 地 址 : 沈 阳 市 金 沙 江 街 16 号 6 门 邮 编 : 发 行 部 电 话 :

18 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 酶 制 剂 不 同 底 物 对 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 赵 剑 李 光 智 郭 宝 林 马 玲 摘 要 试 验 采 用 2 伊 5 完 全 随 机 试 验 设 计, 考 察 不 同 底 物 (P3168 和 P8810) 对 不 同 酶 活 水 平 ( 和 U/g) 的 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 结 果 表 明, 以 P8810 为 底 物 检 测 的 植 酸 酶 酶 活 显 著 高 于 使 用 P3168 为 底 物 的 检 测 结 果, 但 底 物 类 型 与 酶 活 水 平 之 间 没 有 显 著 的 互 作 效 应 使 用 P8810 与 使 用 P3168 的 检 测 结 果 之 间 存 在 显 著 的 线 性 关 系 (P=0.00), 线 性 方 程 为 :(P3168)= (P8810) ,R 2 =0.987 通 过 对 曲 线 预 测 值 验 证 的 结 果 表 明, 可 以 使 用 P8810 替 代 P3168 作 为 底 物 进 行 植 酸 酶 酶 活 检 测 关 键 词 植 酸 酶 ; 酶 活 检 测 ; 底 物 中 图 分 类 号 S 植 酸 酶 是 一 种 生 物 活 性 物 质 袁 对 其 酶 活 的 检 测 是 控 制 植 酸 酶 产 品 质 量 的 关 键 环 节 袁 也 是 使 用 效 果 [1] 的 基 本 保 障 遥 我 国 检 测 植 酸 酶 酶 活 的 方 法 参 照 GB/T 要 2002 袁 酶 活 单 位 的 定 义 为 院 在 温 度 37 益 和 ph 值 5.5 的 条 件 下 袁 每 分 钟 从 浓 度 为 mol/l 的 植 酸 钠 溶 液 中 释 放 出 1 滋 mol 无 机 磷 所 需 要 的 植 酸 酶 量 为 1 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 检 测 方 法 中 规 定 了 植 酸 钠 的 分 子 式 为 C 6 H 6 O 24 P 6 Na 12 袁 即 Sigma 试 剂 公 司 的 产 品 P3168 遥 Sigma 试 剂 公 司 的 P8810 与 P3168 在 结 构 上 极 其 相 似 袁 其 分 子 式 为 C 6 H 18 O 24 P 6 遥 本 试 验 在 GB/T 要 和 U/g) 的 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 遥 植 酸 酶 酶 活 检 测 方 法 按 GB/T 要 2002 执 行 操 作 步 骤 院 首 先 准 确 称 取 基 准 物 质 磷 酸 二 氢 钾 并 稀 释 成 不 同 浓 度 的 溶 液 袁 之 后 将 植 酸 酶 标 准 样 品 制 备 成 试 样 溶 液 袁 然 后 所 有 与 测 定 酶 活 反 应 有 关 的 试 剂 都 预 先 在 37 益 下 预 热 5min, 接 下 来 标 准 尧 空 白 和 样 品 均 在 37 益 下 精 确 反 应 30 min 后 停 止 反 应 ( 空 白 样 品 先 加 入 终 止 液 ), 经 4000 r/min 离 心 10 min 后 取 上 清 液, 在 415 nm 处 测 定 其 吸 光 度 袁 制 作 吸 光 度 - 磷 含 量 标 准 曲 线 袁 计 算 样 品 中 的 植 酸 酶 酶 活 遥 2002 检 测 方 法 下 比 较 袁 P3168 与 P8810 两 种 物 质 对 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 遥 1.3 数 据 分 析 试 验 结 果 以 平 均 数 依 标 准 差 表 示 遥 使 用 SPSS 材 料 和 方 法 软 件 中 GLM-Univariate 对 因 子 进 行 主 效 应 和 交 互 作 1.1 试 剂 和 仪 器 植 酸 酶 标 准 品 由 北 京 昕 大 洋 科 技 发 展 有 限 公 司 用 分 析 袁 使 用 Regression-Linear 对 两 因 子 进 行 线 性 回 归 分 析 遥 提 供 袁 标 示 酶 活 分 别 为 6000 尧 8000 尧 尧 和 2 结 果 和 分 析 U/g 遥 检 测 底 物 分 别 为 购 自 Sigma 试 剂 公 司 的 2.1 不 同 底 物 对 不 同 酶 活 的 植 酸 酶 标 准 品 的 检 测 结 P3168( 分 子 量 ) 和 P8810( 分 子 量 ) 遥 P3168 和 P8810 分 别 精 确 称 取 g 和 g 袁 并 用 乙 酸 缓 冲 液 在 100 ml 容 量 瓶 中 溶 解 定 容 制 备 成 底 物 溶 液, 其 它 试 剂 配 制 和 仪 器 要 求 均 参 照 GB/T 要 2002 遥 果 渊 见 表 1 冤 由 表 1 可 见 袁 分 别 以 P3168 和 P8810 作 为 植 酸 酶 的 检 测 底 物 袁 对 同 一 植 酸 酶 酶 活 的 检 测 结 果 有 着 显 著 的 差 异 袁 使 用 P8810 作 为 底 物 检 测 的 结 果 显 著 地 高 于 使 用 P3168 作 为 底 物 的 遥 但 底 物 类 型 和 酶 活 水 平 对 酶 1.2 试 验 设 计 和 检 测 方 法 活 的 检 测 不 存 在 交 互 作 用 遥 试 验 采 用 2 伊 5 完 全 随 机 试 验 设 计 袁 考 察 不 同 底 物 2.2 不 同 底 物 测 定 植 酸 酶 酶 活 检 测 结 果 间 的 线 性 关 (P3168 和 P8810) 对 不 同 酶 活 水 平 (6 000 尧 8000 尧 尧 系 渊 见 图 1 冤 图 1 显 示 了 分 别 使 用 两 种 底 物 检 测 的 酶 活 之 间 的 线 性 关 系 遥 以 P8810 的 酶 活 检 测 结 果 为 横 坐 标 ( ) 袁 赵 剑, 北 京 昕 大 洋 科 技 发 展 有 限 公 司, 博 士,100081, 北 京 市 海 淀 区 中 关 村 南 大 街 12 号 中 国 农 业 科 学 院 百 欣 科 技 楼 502 甲 李 光 智 郭 宝 林 马 玲, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 以 P3168 的 酶 活 检 测 结 果 为 纵 坐 标 ( ) 拟 合 曲 线 袁 结 果 表 明 袁 两 者 的 检 测 酶 活 之 间 存 在 明 显 的 线 性 关 系 袁 其 拟 合 曲 线 的 方 程 为 院 收 稿 日 期 : = 渊 P=0.00 袁 R 2 =0.987 冤 18

19 酶 制 剂 赵 剑 等 : 同 底 物 对 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 表 1 两 种 底 物 对 不 同 酶 活 水 平 的 植 酸 酶 标 准 品 的 检 测 结 果 项 目 P3168 渊 U/g 冤 P8810 渊 U/g 冤 主 效 应 底 物 酶 活 水 平 交 互 作 用 底 物 伊 酶 活 水 平 6000 渊 U/g 冤 依 依 渊 U/g 冤 依 依 渊 U/g 冤 依 依 P 值 P=0.00 P=0.00 P= 渊 U/g 冤 依 依 渊 U/g 冤 依 依 图 1 观 察 值 拟 合 曲 线 值 以 P8810 为 底 物 的 检 测 酶 活 渊 U/g 冤 P3168 和 P8810 对 检 测 酶 活 的 线 性 关 系 2.3 拟 合 曲 线 预 测 值 的 检 验 为 检 验 拟 合 曲 线 的 准 确 度 袁 试 验 随 机 选 取 了 3 个 该 产 品 袁 按 1.2 所 述 方 法 对 其 植 酸 酶 酶 活 进 行 检 测 袁 并 根 据 P8810 的 检 测 结 果 由 拟 合 曲 线 进 行 预 测 袁 预 测 结 果 与 实 际 检 测 结 果 的 数 据 采 用 T 检 验 分 析 遥 结 果 表 明 袁 拟 合 曲 线 预 测 结 果 与 实 际 检 测 结 果 之 间 没 有 显 著 差 异 袁 说 明 可 以 使 用 P8810 替 代 P3168 作 为 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 底 物 渊 见 表 2 冤 遥 表 2 项 目 P8810 渊 U/g 冤 P3168 渊 U/g 冤 预 测 结 果 渊 P3168 冤 渊 U/g 冤 SEM T 检 测 P 值 3 讨 论 拟 合 曲 线 预 测 值 与 实 际 检 测 结 果 的 比 较 试 样 试 样 试 样 P8810 的 化 学 名 称 为 植 酸 袁 即 六 磷 酸 肌 醇 遥 其 分 子 中 具 有 12 个 可 替 换 的 质 子 袁 其 中 6 个 显 强 酸 性 渊 ph 值 1.5 耀 2.0 冤,2 个 呈 弱 酸 性 渊 ph 值 接 近 6.0 冤,4 个 显 极 弱 酸 性 渊 ph 值 9.0 耀 11.0 冤 遥 而 P3168 的 化 学 名 称 为 植 酸 钠 袁 是 植 酸 分 子 中 12 个 质 子 被 Na + 取 代 后 的 产 物 遥 植 酸 钠 溶 于 水 时 袁 Na + 会 游 离 到 溶 液 中 袁 而 溶 液 中 的 H + 则 结 合 到 显 极 弱 酸 性 的 磷 酸 根 基 团 上 形 成 稳 定 的 复 合 19 物 袁 从 而 造 成 其 水 溶 液 呈 碱 性 遥 在 GB/T 要 2002 的 检 测 方 法 中 袁 底 物 溶 液 是 用 ph 值 5.5 的 乙 酸 缓 冲 液 配 制 的 遥 配 成 的 P8810 底 物 溶 液 的 ph 值 为 5.4 耀 5.5, 而 P3168 的 底 物 溶 液 的 ph 值 为 6.4 耀 6.5, 高 于 酶 活 检 测 定 义 中 的 ph 值 5.5 遥 有 研 究 发 现, 将 P3168 底 物 溶 液 的 ph 值 由 6.5 调 至 5.5 袁 极 显 著 地 影 响 植 酸 酶 活 性 的 检 测 结 果 袁 未 调 节 组 的 检 测 结 果 比 调 节 组 低 34% 遥 在 本 试 验 中 袁 使 用 P8810 作 为 底 物 的 植 酸 酶 酶 活 检 测 结 果 显 著 高 于 使 用 P3168 组 袁 可 能 与 两 者 底 物 溶 液 之 间 ph 值 的 差 异 有 关 遥 本 试 验 所 检 测 的 植 酸 酶 的 基 因 片 段 来 源 于 大 肠 杆 菌, 而 一 些 商 品 植 酸 酶 则 来 源 于 曲 霉 遥 大 量 的 植 酸 酶 分 离 纯 化 后 性 质 鉴 定 表 明, 不 同 来 源 的 植 酸 酶 在 分 子 量 尧 等 电 点 尧 最 适 温 度 和 ph 值 上 都 有 着 明 显 的 不 同, 并 且 在 对 底 物 的 选 择 性 上 也 有 区 别 遥 温 度 和 ph 值 对 不 同 来 源 的 植 酸 酶 酶 活 检 测 的 影 响 已 被 广 泛 研 究, 但 底 物 的 影 响 则 未 见 报 道 遥 不 同 来 源 的 植 酸 酶 对 P8810 和 P3168 是 否 存 在 选 择 性, 还 需 要 进 一 步 地 研 究 遥 参 考 文 献 1 张 若 寒. 植 酸 酶 含 量 测 定 的 必 要 性 与 两 步 测 定 方 法 的 评 价 [J]. 饲 料 工 业,2001, 22(9):1 耀 5 2 Costelo A J, Glonek T, Myers T C. 31P-nuclear magnetic reso 原 nance-ph titrations of myo-inositol hexaphosphate[j]. Carbohydrate Research,1976, 46(2):159 耀 刘 志 伟, 黄 玉 亭, 张 铁 鹰, 等. 国 标 法 测 定 植 酸 酶 活 性 存 在 问 题 的 探 讨 [J]. 中 国 饲 料,2006(18):29 耀 31 4 Greiner R, Konietzny U, Jany KD. Purification and characterization of two phytases from Escherichia coli [J]. Archives of Biochemistry and Biophysics,1993, 303:107 耀 Ullah AHJ, Gibson DM. Extracellular phytase (E.C ) from Aspergillus ficuum NRRL 3135: purification and characterization[j]. Preparative Biochemistry,1987, 17:63 耀 91 6 阮 静, 刘 晓 玥. 植 酸 酶 的 相 关 介 绍 和 活 性 检 测 方 法 的 探 讨 [J]. 饲 料 工 业,2006, 27(10):54 耀 55 7 Vats P, Banerjee UC. Production studies and catalytic properties of phytases(myo-inositolhexakisphosphate phosphohydrolases):an overview [J]. Enzyme and Microbial Technology, 2004, 35:3 耀 14 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

20 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 水 产 养 殖 草 鱼 对 四 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 的 离 体 消 化 分 析 李 高 锋 叶 元 土 代 晓 芳 诸 葛 燕 高 艳 玲 李 婧 张 伟 涛 摘 要 试 验 采 用 离 体 消 化 法 研 究 草 鱼 (Ctenopharyngodon idella) 对 糖 蜜 酵 母 血 球 蛋 白 粉 鱼 粉 和 肉 骨 粉 的 消 化 能 力 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 干 物 质 的 离 体 消 化 率 为 血 球 蛋 白 粉 (36.80%)> 糖 蜜 酵 母 (31.14%)> 鱼 粉 (26.10%)> 肉 骨 粉 (9.40%); 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 蛋 白 质 的 离 体 消 化 率 为 糖 蜜 酵 母 (56.12%)> 血 球 蛋 白 粉 (43.63%)> 肉 骨 粉 (30.38%)> 鱼 粉 (26.62%); 氨 基 酸 生 成 量 为 糖 蜜 酵 母 的 水 溶 氨 基 酸 生 成 率 明 显 高 于 其 它 3 种, 差 异 极 显 著, 鱼 粉 的 水 溶 氨 基 酸 生 成 量 略 高 于 血 球 蛋 白 粉 和 肉 骨 粉, 但 差 异 不 显 著 试 验 结 果 表 明, 在 水 产 饲 料 中 这 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 部 分 替 代 鱼 粉 是 可 行 的 关 键 词 草 鱼 ; 高 蛋 白 饲 料 原 料 ; 离 体 消 化 中 图 分 类 号 S 试 验 通 过 离 体 消 化 和 酶 解 反 应 袁 定 量 地 比 较 分 析 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 样 品 的 干 物 质 消 化 率 尧 蛋 白 消 化 率 和 氨 基 酸 生 成 效 率 的 差 异 袁 验 证 了 其 作 为 优 质 蛋 白 源 的 可 行 性 袁 为 其 在 水 产 饲 料 配 方 中 的 应 用 提 [1] [2] 王 子 淑 等 尧 叶 元 土 等 方 法 加 入 双 抗 ( 青 霉 素 150 IU/ml 尧 硫 酸 链 霉 素 150 IU/ml 冤 袁 分 别 于 第 0h 尧 第 4h 加 入 酶 液 中 遥 在 28 益 水 浴 锅 中 保 温 酶 解 6h, 每 20 min 振 荡 1 次 遥 每 个 样 品 分 别 做 个 3 平 行 遥 供 参 考 遥 离 体 消 化 率 的 计 算 1 试 验 材 料 与 方 法 按 照 的 酶 水 解 方 法 分 别 对 饲 料 原 料 样 品 水 1.1 试 验 材 料 4 种 蛋 白 源 院 鱼 粉 渊 产 自 厄 尔 多 瓦 冤 尧 肉 骨 粉 渊 张 家 解 6h 后 用 定 量 滤 纸 过 滤, 滤 渣 用 28 益 蒸 馏 水 洗 涤 3 次 遥 将 消 化 前 的 原 料 样 品 和 滤 渣 在 70 益 烘 干 至 恒 重, 港 市 场 购 买 冤 尧 血 球 蛋 白 粉 渊 江 苏 某 公 司 生 产 冤 尧 糖 蜜 酵 母 渊 浙 江 某 公 司 生 产 冤 遥 草 鱼 院 为 池 塘 养 殖 草 鱼 袁 3 尾 袁 平 均 体 重 在 渊 3500 依 25 冤 g 左 右 袁 经 实 验 室 循 环 水 水 族 箱 饲 养 2 周 备 用 遥 [3] 精 确 称 量 原 料 样 品 滤 渣 的 重 量 遥 采 用 凯 氏 定 氮 方 法 对 烘 干 的 原 料 样 品 和 滤 渣 进 行 粗 蛋 白 含 量 测 定 遥 按 照 下 列 公 式 计 算 原 料 样 品 干 物 质 的 离 体 消 化 率 尧 蛋 白 质 离 体 消 化 率 院 1.2 试 验 方 法 样 品 干 物 质 离 体 消 化 率 渊 % 冤 = 渊 样 品 重 量 - 样 品 滤 消 化 酶 制 备 常 规 解 剖 取 出 草 鱼 的 肠 道 袁 去 除 脂 肪 和 肠 道 内 渣 重 量 冤 / 样 品 重 量 曰 样 品 蛋 白 质 离 体 消 化 率 渊 % 冤 =[ 渊 样 品 重 量 伊 样 品 粗 容 物 后 称 重 袁 按 照 肠 道 重 量 的 10 倍 量 取 ph 值 7.4 尧 0.2 mol/l 的 磷 酸 缓 冲 液 袁 用 玻 璃 匀 浆 器 进 行 匀 浆 遥 匀 蛋 白 含 量 冤 - 渊 样 品 滤 渣 重 量 伊 滤 渣 粗 蛋 白 含 量 冤 ]/ 渊 样 品 重 量 伊 样 品 粗 蛋 白 含 量 冤 遥 浆 液 在 3500 r/min 下 冷 冻 离 心 20 min 袁 取 上 清 液 在 冰 箱 中 冷 冻 保 存 袁 备 用 遥 酶 解 液 中 的 氨 基 酸 含 量 测 定 及 计 算 方 法 按 照 的 酶 水 解 方 法 分 别 对 饲 料 原 料 样 品 进 饲 料 原 料 样 品 的 酶 水 解 精 确 称 取 饲 料 原 料 样 品 g 于 20 ml 带 塞 行 酶 水 解, 水 溶 氨 基 酸 含 量 则 分 别 于 0 尧 1 尧 2 尧 4 尧 6h 进 行 测 定, 取 样 品 0.2 ml 上 清 液, 加 入 等 体 积 的 10 % 的 三 试 管 中, 加 入 ph 值 7.4 尧 0.2 mol/l 的 磷 酸 缓 冲 液 15 ml 尧 肠 道 酶 提 取 液 5ml 遥 为 了 防 止 外 界 微 生 物 的 干 扰 袁 参 照 氯 醋 酸 进 行 蛋 白 质 沉 淀, 在 4000 r/min 下 离 心 20 min, [4] 定 量 取 上 清 液 0.2 ml, 采 用 茚 三 酮 方 法 测 定 OD 570 值 遥 用 亮 氨 酸 标 准 曲 线 计 算 水 溶 液 中 氨 基 酸 的 含 量 遥 按 照 水 解 液 氨 基 酸 总 量 占 饲 料 量 的 百 分 比 计 算 氨 基 酸 的 李 高 锋, 苏 州 大 学 生 命 科 学 学 院,215123, 江 苏 省 苏 州 市 消 化 生 成 效 率 遥 工 业 园 区 横 一 路 苏 州 大 学 生 命 科 学 学 院 702 栋 2222 室 叶 元 土 ( 通 讯 作 者 ) 代 晓 芳 诸 葛 燕 高 艳 玲 李 婧 张 伟 数 据 的 处 理 和 分 析 结 果 以 平 均 值 渊 X 冤 依 标 准 差 渊 SD 冤 表 示 袁 统 计 分 析 涛, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 采 用 两 样 本 均 值 差 异 显 著 性 检 验 方 法 (paired-sample t-test) 对 数 据 进 行 分 析 遥 20

21 水 产 养 殖 李 高 锋 等 : 草 鱼 对 四 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 的 离 体 消 化 分 析 2 试 验 结 果 种 优 质 蛋 白 源 的 粗 蛋 白 含 量 所 有 试 验 原 料 经 过 中 草 药 粉 碎 机 粉 碎 后 全 部 通 过 80 目 标 准 筛 袁 采 用 凯 氏 定 氮 法 测 得 这 4 种 饲 料 原 料 的 粗 蛋 白 含 量 渊 见 表 1 冤 遥 项 目 粗 蛋 白 含 量 表 1 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 的 粗 蛋 白 含 量 (%) 血 球 蛋 白 粉 依 1.22 糖 蜜 酵 母 依 1.31 鱼 粉 依 1.05 肉 骨 粉 依 1.23 注 院 样 品 为 70 益 烘 干 样 袁 表 中 数 值 为 野 平 均 值 + 标 准 误 差 冶 遥 下 表 同 遥 图 1 鱼 粉 肉 骨 粉 血 球 蛋 白 粉 糖 蜜 酵 母 时 间 渊 h 冤 4 种 原 料 的 氨 基 酸 生 成 量 随 时 间 变 化 的 趋 势 从 表 1 可 以 看 出 袁 血 球 蛋 白 粉 和 糖 蜜 酵 母 的 粗 蛋 白 含 量 明 显 高 于 鱼 粉 袁 而 此 次 试 验 所 用 的 肉 骨 粉 的 粗 蛋 白 含 量 虽 然 低 于 鱼 粉 袁 但 含 量 也 较 高 遥 2.2 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 的 离 体 消 化 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 干 物 质 尧 粗 蛋 白 的 离 体 消 化 结 果 见 表 2 遥 表 2 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 的 干 物 质 项 目 血 球 蛋 白 粉 糖 蜜 酵 母 鱼 粉 肉 骨 粉 粗 蛋 白 的 离 体 消 化 率 (%) 干 物 质 消 化 率 依 1.23 a 依 0.89 b 依 0.79 c 9.40 依 0.99 A 粗 蛋 白 消 化 率 依 1.89 A 依 1.79 B 依 1.03 CD 依 1.22 C 注 院 同 列 数 据 肩 标 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 袁 大 写 字 母 不 同 表 示 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 遥 从 表 2 可 以 看 出, 在 同 等 条 件 下, 草 鱼 对 4 种 高 蛋 白 饲 料 原 料 干 物 质 的 离 体 消 化 率 差 异 显 著 (P<0.05), 血 球 蛋 白 粉 (36.80%)> 糖 蜜 酵 母 (31.14%)> 鱼 粉 (26.10%)> 肉 骨 粉 (9.40%), 而 肉 骨 粉 样 品 干 物 质 消 化 率 则 明 显 低 于 其 它 3 种 蛋 白 饲 料 原 料 袁 其 原 因 可 能 是 该 试 验 中 所 用 的 肉 骨 粉 中 骨 头 类 物 质 或 其 它 不 溶 物 较 多 造 成 的 遥 在 粗 蛋 白 消 化 率 方 面 袁 糖 蜜 酵 母 (56.12%)> 血 球 蛋 白 粉 (43.63%)> 肉 骨 粉 (30.38%)> 鱼 粉 (26.62%), 草 鱼 对 糖 蜜 酵 母 尧 血 球 蛋 白 粉 的 蛋 白 质 消 化 率 均 远 高 于 鱼 粉 和 肉 骨 粉 袁 差 异 极 显 著 (P<0.01) 袁 进 一 步 验 证 了 糖 蜜 酵 母 尧 血 球 蛋 白 粉 作 为 优 质 蛋 白 原 料 的 可 行 性 遥 2.3 酶 解 氨 基 酸 生 成 量 在 0 尧 1 尧 2 尧 4 尧 6h 取 各 样 品 水 解 液 测 定 生 成 氨 基 酸 的 含 量 袁 以 0h 时 的 氨 基 酸 生 成 量 为 零 计 算 袁 结 果 如 图 1 所 示 遥 从 图 1 中 可 以 看 出 袁 在 0~6 h 之 间 袁 随 着 时 间 的 增 长 袁 其 氨 基 酸 生 成 量 呈 明 显 的 上 升 趋 势 袁 且 差 异 较 明 显 遥 糖 蜜 酵 母 的 氨 基 酸 生 成 量 明 显 高 于 其 它 3 种 袁 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 袁 而 鱼 粉 略 高 于 其 它 两 种 袁 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 21 3 讨 论 饲 料 及 其 蛋 白 质 在 鱼 体 消 化 道 中 被 消 化 的 程 度 取 决 于 消 化 酶 ( 蛋 白 质 主 要 是 蛋 白 酶 ) 的 作 用 时 间 袁 消 化 速 度 受 消 化 酶 的 浓 度 尧 温 度 尧 底 物 和 作 用 时 间 的 影 响 (Frukawa A 等 袁 1966) [5] 遥 离 体 消 化 法 是 利 用 酶 制 剂 或 研 究 对 象 消 化 器 官 的 酶 提 取 液 在 试 管 内 进 行 的 消 化 试 验 袁 其 测 定 值 近 似 反 映 鱼 对 饲 料 的 消 化 率 [5] 袁 这 种 方 法 具 有 快 速 尧 简 便 的 特 点 遥 在 饲 料 原 料 真 假 和 营 养 价 值 鉴 定 时 袁 如 果 原 料 中 掺 入 了 不 易 消 化 的 物 质 则 可 以 采 用 离 体 消 化 率 测 定 方 法 进 行 鉴 别 和 鉴 定 遥 但 是 袁 由 于 此 方 法 存 在 一 定 局 限 性 袁 无 法 真 实 反 应 鱼 体 的 消 化 情 况 遥 因 此 袁 得 到 的 消 化 率 只 能 作 为 近 似 值 袁 作 为 同 等 情 况 下 比 较 各 饲 料 原 料 的 相 对 利 用 情 况 遥 4 结 论 结 合 以 上 分 析 袁 本 试 验 表 明 院 糖 蜜 酵 母 尧 血 球 蛋 白 粉 在 草 鱼 肠 道 酶 液 中 的 干 物 质 消 化 率 尧 蛋 白 消 化 率 和 氨 基 酸 生 成 量 各 方 面 均 高 于 鱼 粉 袁 作 为 优 质 的 高 蛋 白 饲 料 原 料 代 替 鱼 粉 加 入 水 产 饲 料 配 方 中 是 可 行 的 曰 而 含 骨 类 等 不 溶 物 质 较 少 的 高 蛋 白 肉 骨 粉 代 替 鱼 粉 也 是 可 行 的 遥 参 考 文 献 1 王 子 淑 编 著. 人 体 及 动 物 细 胞 遗 传 学 实 验 技 术 [M]. 成 都 : 四 川 大 学 出 版 社, ~40 2 叶 元 土, 薛 敏, 林 仕 梅, 等. 草 鱼 肠 道 肝 胰 脏 对 饲 料 蛋 白 质 酶 解 速 度 的 比 较 [J]. 中 国 水 产 科 学,2003,2(10):174~176 3 杨 胜 编 著. 饲 料 分 析 及 饲 料 质 量 检 测 技 术 [M]. 北 京 : 北 京 农 业 大 学 出 版 社, ~23 4 叶 元 土, 林 仕 梅, 罗 莉. 茚 三 酮 法 测 定 蛋 白 质 饲 料 中 水 溶 蛋 白 质 成 分 [J]. 饲 料 工 业,1993,14(9):18~20 5 Frukawa A, Tsukabatra H. On the acid digestion method for the de 原 termination of chromic oxide as an iondex substance in the study of digestibility in fish food [J].Bull.Jap.sci.fish.,1966,35:502~506 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

22 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 水 产 养 殖 龚 全 许 国 焕 付 天 玺 吴 月 嫦 消 化 酶 是 决 定 饵 料 在 鱼 类 消 化 道 分 解 的 关 键 因 素 和 生 理 基 础 袁 不 同 种 类 消 化 酶 具 有 各 自 的 酶 学 特 性 袁 在 某 种 程 度 上 决 定 着 鱼 类 对 饵 料 的 消 化 特 性 遥 国 内 外 研 究 者 针 对 多 糖 对 生 长 及 免 疫 机 能 的 影 响 作 了 很 多 相 关 研 究 袁 但 未 见 云 芝 多 糖 对 鱼 类 消 化 功 能 影 响 的 研 究 遥 本 试 验 就 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 酶 活 性 和 消 化 率 的 影 响 进 行 研 究 袁 旨 在 探 讨 云 芝 多 糖 促 生 长 的 营 养 生 理 学 机 制 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 饲 料 在 基 础 饲 料 ( 见 表 1) 中 分 别 添 加 0.5 尧 1.0 尧 1.5 尧 2.0 尧 2.5 g/kg 的 云 芝 多 糖 ( 云 芝 多 糖 由 广 东 省 微 生 物 研 究 所 功 能 新 产 品 研 发 中 心 提 供, 多 糖 含 量 60% 以 上 ) 组 成 试 验 饲 料 分 别 饲 喂 各 试 验 组 (P 0.5 耀 P 2.5 组 ) 袁 对 照 组 (P 0 组 ) 饲 喂 基 础 饲 料 遥 各 组 饲 料 加 工 成 直 径 为 1.5 mm 的 硬 颗 粒 饲 料 袁 晾 干 后 置 冰 箱 内 保 存 遥 表 1 原 料 成 分 豆 粕 菜 粕 面 粉 鱼 粉 鱼 油 磷 酸 二 氢 钙 无 机 盐 预 混 料 淤 氯 化 胆 碱 维 生 素 预 混 料 于 维 生 素 C 食 盐 合 计 基 础 日 粮 组 成 含 量 渊 % 冤 注 院 淤 无 机 盐 预 混 料 配 方 (%) 为 NaCl1.0 尧 MgSO 尧 NaH 2PO 4 窑 2H 2O 32.0 尧 MgO 2.5 尧 ZnSO 4 窑 7H 2O 尧 FeSO 尧 MnSO 4 窑 4H 2O 尧 CuSO 4 窑 5H 2O 尧 CoCl 2 窑 6H 2O 尧 KIO 4 窑 6H 2O 曰 于 每 千 克 维 生 素 预 混 料 中 的 含 有 VB g 尧 VB g 尧 VB g 尧 VC 2.5 g 尧 VB g 尧 VH 1.0 g 尧 VB g 尧 VB g 尧 VA 6.67 g 尧 VE g 尧 VK g 遥 1.2 试 验 鱼 及 分 组 将 体 重 (9.0 依 1.0) g 尧 健 康 的 奥 尼 罗 非 鱼 渊 Hybrid Tilapia, Oreochromis Niloticus 伊 O.Aureus 冤 随 机 分 为 6 组 袁 每 组 设 3 个 重 复 袁 每 重 复 20 尾 袁 依 次 记 为 P 0 尧 P 0.5 尧 P 1.0 尧 P 1.5 尧 P 2.0 尧 P 2.5 组 遥 将 试 验 鱼 饲 养 在 圆 柱 形 玻 璃 钢 水 簇 箱 ( 直 径 1.0 m 尧 高 0.7 m) 内 袁 日 夜 充 氧 袁 每 天 排 污 1 次 遥 试 验 期 间 水 温 渊 28.5 依 1.0 冤 益 袁 ph 值 7.0 依 0.2 袁 DO 浓 度 逸 5mg/l 袁 NH 4+ -N 浓 度 臆 0.6 mg/l 遥 饲 喂 56 d 后 袁 从 每 组 中 挑 选 大 小 均 匀 的 10 尾 鱼 用 于 消 化 酶 的 测 定 尧 10 尾 用 于 消 化 率 测 定 遥 测 定 消 化 率 时 袁 将 各 组 用 试 验 饲 料 投 喂 7d 后 开 始 测 定 遥 1.3 消 化 酶 活 性 的 测 定 酶 液 的 制 备 取 鱼 体 肠 道 尧 肝 胰 脏 和 胃 进 行 消 化 酶 活 性 测 定 遥 肠 道 分 前 肠 ( 第 1 个 转 折 前 部 分 ) 尧 中 肠 和 后 肠 ( 最 后 1 个 转 折 后 部 分 ), 剪 开 肠 道, 用 冷 冻 去 离 子 水 冲 去 肠 内 容 物, 用 脱 脂 棉 球 轻 轻 擦 干 并 称 重 遥 按 样 品 重 的 10 倍 加 入 冷 冻 去 离 子 水 (4 益 ), 在 冰 浴 下 匀 浆,4 益 尧 r/min 离 心 30 min 袁 取 上 清 液 置 于 4 益 冰 箱 中 待 用 袁 24 h 内 测 定 完 毕 遥 酶 活 的 测 定 参 考 叶 临 床 生 化 检 验 曳 渊 上 海 市 医 学 化 验 所 主 编 袁 1979 冤 尧 叶 生 化 技 术 导 论 曳 渊 中 山 大 学 生 物 系 生 化 微 生 物 学 教 研 室 主 编 袁 1978 冤 和 叶 现 代 临 床 检 验 学 曳 渊 王 庸 晋 主 编 袁 2000 冤 袁 用 722S 型 分 光 光 度 计 测 定 蛋 白 酶 渊 福 林 - 酚 试 剂 法 冤 尧 淀 粉 酶 渊 淀 粉 - 碘 显 色 法 冤 的 活 性 袁 用 聚 乙 烯 醇 橄 榄 油 乳 化 液 水 解 法 测 定 脂 肪 酶 活 性 遥 1.4 消 化 率 测 定 粪 便 的 采 集 每 次 喂 食 完 毕 后 袁 清 除 残 饵 遥 1 耀 2h 后 袁 开 始 收 集 粪 便 袁 选 择 成 形 粪 便 袁 连 续 收 集 2h 遥 用 镊 子 将 包 膜 完 整 的 粪 便 置 于 称 量 瓶 中 袁 65 益 烘 干 袁 保 存 于 4 益 冰 箱 以 待 分 析 遥 消 化 率 的 测 定 用 722S 型 分 光 光 度 计 测 定 饲 料 及 粪 便 中 Cr 2 O 3 龚 全, 广 东 省 微 生 物 研 究 所,510070, 广 州 的 含 量 遥 按 下 式 计 算 相 关 指 标 院 许 国 焕 ( 通 讯 作 者 ) 付 天 玺 吴 月 嫦, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 饲 料 总 消 化 率 渊 % 冤 =1- 曰 ' 收 稿 日 期 : 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 渊 % 冤 = 渊 1- 伊 ' 冤 遥 ' 22

23 水 产 养 殖 龚 全 等 : 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 机 能 的 影 响 式 中 院 要 饲 料 的 某 营 养 成 分 含 量 渊 豫 冤 曰 ' 要 粪 便 中 的 某 营 养 成 分 含 量 渊 豫 冤 曰 要 饲 料 的 Cr 2 O 3 含 量 渊 豫 冤 曰 ' 要 粪 便 中 的 Cr 2 O 3 含 量 渊 豫 冤 遥 1 援 5 数 据 处 理 试 验 结 果 用 平 均 值 依 标 准 差 表 示 袁 用 STATISTI 鄄 CA6.0 在 琢 =0.05 水 平 下 进 行 统 计 分 析 袁 所 有 试 验 数 据 经 方 差 分 析 后 进 行 组 间 多 重 渊 Duncan's 冤 比 较 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 云 芝 多 糖 对 蛋 白 酶 活 性 的 影 响 渊 见 表 2 冤 项 目 P 0 P 0.5 P 1.0 P 1.5 P 2.0 P 2.5 表 2 前 肠 依 c 依 ab 依 a 依 bc 依 c 依 c 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 道 蛋 白 酶 活 性 的 影 响 (U/g) 中 肠 依 c 依 bc 依 a 依 abc 依 abc 依 c 后 肠 依 依 依 依 依 依 胃 依 b 依 ab 依 a 依 ab 依 ab 依 b 注 院 表 中 同 列 数 据 肩 标 不 同 字 母 表 示 差 异 显 著 (P 约 0.05), 相 同 字 母 或 无 字 母 表 示 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 下 表 同 遥 肝 胰 脏 依 a 依 a 依 a 依 a 依 b 依 a 由 表 2 可 知, 各 浓 度 组 后 肠 蛋 白 酶 活 性 差 异 不 显 著 (P 跃 0.05) 袁 其 余 各 组 织 蛋 白 酶 活 性 与 对 照 组 有 不 同 程 度 差 异 遥 P 0.5 组 和 P 1.0 组 前 肠 蛋 白 酶 活 性 显 著 高 于 对 照 组 (P 约 0.05) 袁 其 余 各 组 与 对 照 组 相 比 差 异 不 显 著 袁 其 中 P 1.0 组 蛋 白 酶 活 性 最 高 曰 P 1.0 组 中 肠 尧 胃 的 蛋 白 酶 活 性 最 高 袁 与 对 照 组 相 比 差 异 显 著 袁 其 余 各 组 与 对 照 组 相 比 差 异 不 显 著 (P>0.05) 曰 P 2.0 组 肝 胰 脏 蛋 白 酶 活 性 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05) 袁 其 余 各 组 与 对 照 组 相 比 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 2.2 云 芝 多 糖 对 脂 肪 酶 活 性 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 道 脂 肪 酶 活 性 的 影 响 (U/g) 项 目 P 0 P 0.5 P 1.0 P 1.5 P 2.0 P 2.5 前 肠 依 依 依 依 依 依 中 肠 依 7.89 a 依 ab 依 ab 依 7.78 ab 依 ab 依 6.98 b 后 肠 依 依 依 依 依 依 9.84 胃 依 a 依 bc 依 6.20 ab 依 8.31 bc 依 0.99 bc 依 4.44 c 肝 胰 脏 依 5.25 a 依 a 依 7.06 ab 依 ab 依 ab 依 4.04 b 由 表 3 可 知, 各 浓 度 组 前 肠 和 后 肠 脂 肪 酶 活 性 差 异 不 显 著 (P 跃 0.05), 其 余 各 组 织 脂 肪 酶 活 性 与 对 照 组 相 比 有 一 定 差 异 遥 P 2.5 组 中 肠 脂 肪 酶 活 性 显 著 低 于 对 照 组 (P 约 0.05), 其 余 各 组 与 对 照 组 相 比 差 异 不 显 著 (P<0.05); P 1.0 组 胃 的 脂 肪 酶 活 性 与 对 照 组 相 比 差 异 不 显 著 (P>0.05), 其 余 各 组 脂 肪 酶 活 性 均 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05) 遥 其 中 P 2.5 组 显 著 低 于 P 1.0 组 (P<0.05),P 0.5 组 尧 P 1.5 组 尧 P 2.0 组 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05) 遥 P 2.5 组 肝 胰 脏 脂 肪 酶 活 性 显 著 低 于 对 照 组, 其 余 各 组 与 对 照 组 差 异 不 显 著 遥 2.3 云 芝 多 糖 对 淀 粉 酶 活 性 的 影 响 渊 见 表 4 冤 表 4 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 道 淀 粉 酶 活 性 的 影 响 (U/g) 项 目 P 0 P 0.5 P 1.0 P 1.5 P 2.0 P 2.5 前 肠 依 依 依 依 依 依 中 肠 依 依 依 依 依 依 后 肠 依 依 依 依 依 依 胃 依 依 依 依 依 依 肝 胰 脏 依 依 依 依 依 依 由 表 4 可 知 袁 各 浓 度 组 淀 粉 酶 活 性 与 对 照 组 相 比 没 有 显 著 差 异 渊 P 跃 0.05 冤 遥 P 1.0 组 显 著 提 高 了 奥 尼 罗 非 鱼 对 蛋 白 质 表 观 消 化 率 (P 约 0.05), 其 余 各 组 间 无 显 著 性 差 异 渊 P 跃 0.05 冤 曰 在 奥 尼 2.4 云 芝 多 糖 对 表 观 消 化 率 的 影 响 渊 见 表 5 冤 由 表 5 可 知 袁 各 浓 度 组 干 物 质 表 观 消 化 率 略 高 于 罗 非 鱼 日 粮 中 添 加 云 芝 多 糖 后 袁 能 显 著 地 降 低 脂 肪 表 观 消 化 率 渊 P 约 0.05 冤 袁 随 着 添 加 浓 度 的 增 加 袁 脂 肪 表 观 对 照 组 袁 但 与 对 照 组 相 比 无 显 著 差 异 (P 跃 0.05) 曰 P 0.5 和 消 化 率 逐 渐 降 低 遥 23

24 龚 全 等 : 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 机 能 的 影 响 水 产 养 殖 表 5 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 表 观 消 化 率 的 影 响 ( 豫 ) 项 目 P 0 P 0.5 P 1.0 P 1.5 P 2.0 P 讨 论 干 物 质 依 依 依 依 依 依 2.21 蛋 白 质 依 2.27 c 依 2.05 ab 依 1.56 a 依 0.93 bc 依 2.75 c 依 2.02 c 脂 肪 依 1.13 a 依 2.48 b 依 0.66 b 依 2.60 bc 依 3.27 c 依 1.90 c 3.1 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 酶 活 性 的 影 响 与 畜 禽 相 比, 鱼 类 的 机 械 消 化 能 力 很 差, 消 化 功 能 的 强 弱 很 大 程 度 上 取 决 于 消 化 酶 的 活 性 遥 提 高 鱼 体 的 消 化 酶 活 性 就 能 提 高 鱼 体 的 消 化 功 能, 鱼 体 对 营 养 物 质 的 吸 收 也 就 会 增 加 遥 有 研 究 表 明, 饲 料 成 分 的 改 变 能 影 响 鱼 的 消 化 酶 活 性 遥 本 试 验 表 明 袁 在 饲 料 中 添 加 不 同 浓 度 的 云 芝 多 糖 后, 能 提 高 蛋 白 酶 活 性, 降 低 奥 尼 罗 非 鱼 脂 肪 酶 活 性, 而 对 淀 粉 酶 活 性 影 响 不 显 著 遥 对 鱼 类 而 言 袁 蛋 白 质 作 为 主 要 营 养 物 质 利 用 的 主 体 而 参 与 机 体 的 物 质 和 能 量 代 谢 遥 蛋 白 酶 活 性 的 升 高 袁 可 以 促 进 蛋 白 质 的 消 化 吸 收 袁 从 而 促 进 鱼 体 的 生 长 遥 丁 贤 等 研 究 认 为 袁 芽 孢 杆 菌 能 提 高 南 美 白 对 虾 的 消 化 酶 活 性 和 成 活 率 袁 利 于 养 分 消 化 吸 收 袁 促 进 生 长 遥 肖 明 松 等 研 究 发 现 袁 果 寡 糖 对 鲤 消 化 酶 活 性 具 有 正 向 促 进 作 用 袁 能 够 显 著 提 高 2 龄 鲤 的 相 对 增 重 率 袁 促 进 鲤 的 生 长 遥 另 外 袁 糖 萜 素 能 显 著 提 高 动 物 蛋 白 酶 活 性 和 促 进 其 生 长 遥 本 试 验 发 现 袁 P 1.0 组 能 显 著 提 高 前 肠 尧 中 肠 和 胃 蛋 白 酶 活 性 袁 而 P 2.0 组 的 肝 胰 脏 蛋 白 酶 活 性 显 著 高 于 对 照 组 袁 因 此 推 测 云 芝 多 糖 对 奥 尼 罗 非 鱼 蛋 白 酶 活 性 可 能 有 一 定 的 诱 导 作 用 遥 与 哺 乳 类 不 同, 鱼 类 消 化 脂 类 物 质 的 能 力 很 强, 同 时 机 体 内 缺 乏 像 哺 乳 类 所 具 有 的 脂 类 摄 食 调 节 因 子, 鱼 类 很 可 能 会 因 过 量 食 用 脂 肪, 导 致 过 度 肥 胖, 成 为 病 态 ; 同 时, 过 多 的 脂 肪 会 造 成 对 肝 脏 的 浸 润, 从 而 妨 碍 肝 脏 行 使 正 常 的 功 能, 导 致 其 代 谢 功 能 紊 乱 遥 冯 健 等 研 究 发 现, 红 姑 鱼 (Sciaencps ocellatus) 各 期 生 长 率 和 存 活 率 随 着 日 粮 脂 肪 含 量 增 加 而 显 著 下 降, 肝 胰 脏 脂 肪 含 量 与 日 粮 脂 肪 水 平 成 正 比, 各 组 均 发 生 程 度 不 同 的 营 养 性 脂 肪 肝 病, 其 病 变 程 度 与 日 粮 脂 肪 水 平 成 正 相 关, 认 为 日 粮 中 脂 肪 是 红 姑 鱼 发 病 与 死 亡 的 直 接 原 因 遥 本 试 验 发 现, 在 饲 料 中 添 加 云 芝 多 糖 渊 0.5 耀 2.5 g/kg 冤 能 抑 制 供 试 鱼 中 肠 尧 胃 和 肝 胰 脏 的 脂 肪 酶 活 性 袁 推 测 云 芝 多 糖 可 能 对 奥 尼 罗 非 鱼 脂 肪 酶 活 性 具 有 一 定 抑 制 作 用 遥 因 此, 添 加 一 定 浓 度 的 云 芝 多 糖 可 能 会 减 弱 鱼 24 类 对 脂 肪 的 消 化 能 力 袁 从 而 减 少 脂 肪 在 鱼 体 内 的 蓄 积 袁 有 效 防 止 鱼 类 因 摄 取 过 多 脂 肪 而 导 致 的 疾 病 遥 糖 类 是 廉 价 的 能 量 物 质 袁 鱼 类 和 高 等 动 物 都 能 利 用 糖 作 为 能 量 遥 但 是 袁 鱼 类 对 糖 类 的 利 用 能 力 很 低 袁 需 在 饲 料 中 添 加 外 源 物 质 才 能 促 进 鱼 类 对 糖 类 的 消 化 吸 收 遥 有 研 究 发 现 袁 壳 聚 糖 被 试 验 鱼 摄 取 后 袁 经 口 腔 尧 胃 袁 再 进 入 肠 道 袁 能 够 调 节 肠 道 微 生 态 平 衡, 因 此 有 学 者 认 为 袁 肠 内 的 有 益 菌 群 在 良 好 的 微 环 境 中 有 发 挥 分 泌 淀 粉 酶 的 作 用 袁 使 暗 纹 东 方 鲀 幼 鱼 对 碳 水 化 合 物 的 利 用 率 提 高 袁 从 而 使 壳 聚 糖 起 到 间 接 提 高 消 化 酶 活 性 尧 节 约 蛋 白 质 的 作 用 遥 陈 勇 等 研 究 发 现 袁 壳 聚 糖 进 入 鱼 体 后 袁 能 提 高 消 化 酶 的 活 性 袁 并 且 消 化 酶 活 性 的 变 化 趋 势 与 生 长 的 趋 势 相 吻 合 遥 本 试 验 发 现 袁 添 加 了 云 芝 多 糖 的 试 验 鱼 淀 粉 酶 活 性 与 对 照 组 淀 粉 酶 活 性 差 异 不 显 著 袁 本 试 验 结 果 与 上 述 研 究 并 不 一 致 袁 笔 者 推 测 多 糖 的 结 构 和 构 成 是 产 生 这 一 差 异 的 主 要 原 因 遥 影 响 鱼 类 消 化 酶 的 因 素 很 多 袁 云 芝 多 糖 影 响 奥 尼 罗 非 鱼 消 化 道 蛋 白 酶 和 脂 肪 酶 活 性 的 机 理 还 需 要 进 一 步 的 研 究 遥 3.2 云 芝 多 糖 对 消 化 率 的 影 响 鱼 类 个 体 生 长 过 程 其 实 就 是 物 质 在 体 内 的 贮 留 过 程 袁 鱼 体 对 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 与 鱼 体 的 生 长 速 度 直 接 相 关, 营 养 物 质 消 化 率 高, 生 长 速 度 必 然 就 快 遥 目 前 袁 饲 料 添 加 剂 有 良 好 的 促 生 长 效 果 袁 因 此 得 到 了 广 泛 应 用 袁 不 少 学 者 为 了 探 讨 其 促 生 长 机 理 袁 研 究 了 饲 料 添 加 剂 对 鱼 类 消 化 率 的 影 响 遥 邱 小 琮 等 研 究 发 现 袁 中 草 药 添 加 剂 可 以 提 高 异 育 银 鲫 对 饲 料 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 率 袁 促 进 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 袁 从 而 促 进 异 育 银 鲫 的 生 长 遥 王 爱 民 等 试 验 表 明 袁 在 异 育 银 鲫 饲 料 中 添 加 500 耀 750 mg/kg 外 源 酶 能 有 效 地 改 善 异 育 银 鲫 对 干 物 质 尧 蛋 白 质 及 磷 的 消 化 吸 收 袁 并 显 著 促 进 异 育 银 鲫 的 生 长 遥 本 试 验 发 现 袁 P 0.5 组 和 P 1.0 组 的 粗 蛋 白 表 观 消 化 率 明 显 高 于 其 它 各 组 袁 且 与 对 照 组 相 比 差 异 显 著 袁 与 生 长 结 果 相 吻 合 遥 另 外 袁 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 需 要 消 化 酶 的 参 与 袁 消 化 酶 活 性 的 升 高 有 利 于 营 养 物 质 在 体 内 的 消 化 吸 收 袁 反 之 则 会 降 低 营 养 物 质 的 利 用 率 遥 表 观 消 化 率 试 验 表 明 袁 P 0.5 组 和 P 1.0 组 蛋 白 质 表 观 消 化 率 高 于 对 照 组 袁 而 云 芝 多 糖 能 降 低 奥 尼 罗 非 鱼 脂 肪 表 观 消 化 率 袁 这 结 果 与 消 化 酶 结 果 基 本 吻 合 遥 ( 参 考 文 献 24 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

25 水 产 养 殖 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 刘 鼎 云 冷 向 军 卢 永 红 李 小 勤 刘 鼎 云, 上 海 水 产 大 学 生 命 科 学 与 技 术 学 院,200090, 上 海 市 军 工 路 334 号 绎 鱼 粉 供 求 的 日 益 紧 张 和 价 格 上 涨 袁 使 得 植 物 蛋 白 源 替 代 鱼 粉 的 研 究 成 为 现 阶 段 的 一 个 热 点 遥 但 植 物 蛋 白 存 在 较 多 的 抗 营 养 因 子 使 其 难 以 被 消 化 利 用 袁 通 过 酶 制 剂 降 解 这 些 抗 营 养 因 子 袁 消 除 其 抗 营 养 特 性 袁 是 提 高 植 物 蛋 白 消 化 吸 收 率 的 重 要 途 径 遥 目 前 酶 制 剂 在 畜 禽 饲 料 中 已 有 较 多 的 应 用 袁 但 在 水 产 饲 料 上 的 研 究 应 用 较 少 遥 本 试 验 以 凡 纳 滨 对 虾 为 研 究 对 象 袁 考 察 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 生 长 和 肌 肉 基 本 成 分 的 影 响 袁 为 酶 制 剂 在 生 产 中 的 合 理 应 用 提 供 依 据 遥 1 材 料 和 方 法 1.1 试 验 设 计 和 试 验 饲 料 项 目 鱼 粉 鱿 鱼 内 脏 粉 豆 粕 花 生 粕 面 粉 啤 酒 酵 母 磷 酸 二 氢 钙 鱼 油 大 豆 磷 酯 其 它 总 计 冷 向 军 ( 通 讯 作 者 ) 李 小 勤, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 卢 永 红, 上 海 市 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所 收 稿 日 期 : 表 1 饲 料 组 成 及 配 方 ( 豫 ) 33% 鱼 粉 组 上 海 市 重 点 学 科 建 设 项 目 资 助 (Y1101) 26.4% 鱼 粉 组 注 院 其 它 成 分 包 括 虾 用 多 维 0.3% 尧 虾 用 多 矿 1% 尧 氯 化 胆 碱 0.2% 尧 虾 壳 素 0.1% 遥 本 试 验 共 分 为 4 个 处 理 组 院 33% 鱼 粉 组 尧 33% 鱼 粉 + 蛋 白 酶 AG 渊 175 mg/kg 冤 组 尧 26.4% 鱼 粉 组 尧 26.4% 鱼 粉 + 蛋 白 酶 AG 渊 175 mg/kg 冤 组 袁 每 个 处 理 组 4 个 平 行 袁 每 个 平 行 渊 每 缸 冤 50 尾 虾 遥 饲 料 配 方 组 成 见 表 1 袁 其 中 25 33% 鱼 粉 饲 料 粗 蛋 白 为 43.08%, 26.4% 鱼 粉 饲 料 粗 蛋 白 为 43.27%( 均 为 实 测 值 ) 遥 蛋 白 酶 AG 由 加 拿 大 JEFO 公 司 提 供 袁 为 细 菌 代 谢 所 产 生 的 多 种 蛋 白 酶 复 合 物 袁 添 加 量 为 175 mg/kg 袁 所 有 饲 料 原 料 均 粉 碎 过 60 目 筛 袁 用 制 粒 机 制 成 直 径 1mm 的 颗 粒 袁 风 干 后 破 碎 袁 置 4 益 冰 箱 备 用 遥 1.2 试 验 动 物 与 饲 养 管 理 凡 纳 滨 对 虾 幼 苗 取 自 上 海 申 漕 特 种 水 产 养 殖 场, 经 过 淡 化 和 饲 养 条 件 适 应 后, 取 平 均 体 重 为 0.10 g 的 体 质 健 壮 对 虾 800 尾, 饲 养 于 16 口 玻 璃 钢 水 箱 (1 援 2m 伊 0 援 7m 伊 0 援 7m) 中 遥 试 验 期 间 24 h 不 间 断 充 气 增 氧 袁 水 温 为 (26 依 1) 益, 盐 度 为 3 译, 每 天 分 4 次 (6 院 00 尧 12 院 00 尧 18 院 00 尧 23 院 00) 等 量 投 喂 袁 投 饲 率 为 体 重 的 10% 袁 并 根 据 摄 食 情 况 进 行 调 整 遥 养 殖 试 验 在 中 国 水 产 科 学 院 渔 业 机 械 研 究 所 渔 业 水 体 净 化 技 术 和 系 统 研 究 重 点 开 放 实 验 室 进 行 袁 时 间 为 7 月 22 日 耀 8 月 22 日 袁 共 30 d 遥 1.3 测 定 指 标 与 方 法 养 殖 试 验 结 束 后 称 终 末 体 重 并 记 终 末 个 体 数 袁 取 肌 肉 做 常 规 成 分 分 析 用 遥 测 定 指 标 包 括 增 重 率 尧 成 活 率 尧 饲 料 系 数 及 虾 肉 水 分 尧 灰 分 和 粗 蛋 白 含 量 遥 数 曰 增 重 率 渊 豫 冤 = 渊 末 均 重 原 初 均 重 冤 / 初 重 曰 成 活 率 渊 豫 冤 = 试 验 结 束 时 虾 尾 数 / 试 验 开 始 时 虾 尾 饲 料 系 数 = 总 投 饵 量 / 总 净 增 重 遥 肌 肉 水 分 含 量 测 定 采 用 105 益 常 压 干 燥 法 曰 肌 肉 灰 分 含 量 测 定 采 用 550 益 高 温 灼 烧 法 曰 肌 肉 粗 蛋 白 含 量 测 定 采 用 凯 氏 定 氮 法 遥 1.4 数 据 统 计 及 分 析 采 用 SPSS 统 计 软 件 处 理 数 据 并 进 行 方 差 分 析 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 蛋 白 酶 制 剂 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 生 长 和 饲 料 利 用 率 的 影 响 渊 见 表 2 冤 从 表 2 可 见 袁 在 33% 鱼 粉 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 制 剂 AG 袁 对 虾 增 重 率 尧 饲 料 系 数 尧 成 活 率 均 无 显 著 影 响 (P> 0.05) 曰 在 26.4% 鱼 粉 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 制 剂 AG 袁 对 虾 增 重 率 比 26.4 豫 鱼 粉 组 提 高 10.8%(P>0.05) 袁 饲 料 系 数 也 有 下 降 趋 势 遥 33% 鱼 粉 组 的 对 虾 增 重 率 显 著 高 于

26 刘 鼎 云 等 : 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 生 长 和 肌 肉 成 分 的 影 响 水 产 养 殖 26.4% 鱼 粉 组 (P<0.05) 袁 但 26.4% 鱼 粉 +AG 组 的 虾 体 增 重 率 和 33% 鱼 粉 组 相 比 差 异 不 显 著 袁 表 明 在 26.4% 鱼 粉 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 制 剂 AG 袁 可 使 凡 纳 滨 对 虾 达 到 与 33% 鱼 粉 组 基 本 一 致 的 生 长 性 能 遥 项 目 33% 鱼 粉 组 33% 鱼 粉 +AG 组 26.4% 鱼 粉 组 26.4% 鱼 粉 +AG 组 表 2 蛋 白 酶 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 生 长 和 饲 料 利 用 率 的 影 响 初 均 重 (g) 注 院 同 列 数 据 不 同 肩 标 字 母 者 表 示 差 异 显 著 (P<0.05) 遥 末 均 重 (g) 增 重 率 (%) 1321 依 28 a 1359 依 27 a 1158 依 119 b 1283 依 40 ab 饲 料 系 数 1.11 依 0.05 a 1.09 依 0.06 b 1.26 依 0.08 a 1.14 依 0.07 ab 成 活 率 (%) 81.3 依 依 依 依 蛋 白 酶 制 剂 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 肌 肉 组 成 成 分 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 蛋 白 酶 AG 对 凡 纳 滨 对 虾 肌 肉 成 分 的 影 响 ( 豫 ) 项 目 33% 鱼 粉 组 33% 鱼 粉 +AG 组 26.4% 鱼 粉 组 26.4% 鱼 粉 +AG 组 水 分 依 依 依 依 0.28 粗 灰 分 5.70 依 依 依 依 0.15 粗 蛋 白 依 依 依 依 0.50 由 表 3 可 知 袁 在 鱼 粉 含 量 分 别 为 33 豫 尧 26.4 豫 的 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 制 剂 AG 后 袁 各 组 间 蛋 白 质 含 量 尧 灰 分 含 量 和 水 分 含 量 均 无 显 著 影 响 遥 3 讨 论 酶 制 剂 在 鱼 类 饲 料 中 的 应 用 已 有 一 些 研 究 报 道 遥 在 鲤 鱼 饲 料 中 添 加 植 酸 酶 可 提 高 饲 料 总 磷 尧 植 酸 磷 尧 蛋 白 质 和 脂 肪 的 利 用 率 [2 袁 3] 曰 添 加 复 合 酶 制 剂 可 改 善 草 鱼 尧 鲤 鱼 尧 彭 泽 鲫 尧 鲫 鱼 的 生 产 性 能 [4-7] 袁 但 在 虾 饲 料 中 的 应 用 研 究 很 少 遥 朱 宏 友 等 [8] 在 饲 料 中 添 加 0.03 豫 高 温 酶 渊 含 蛋 白 酶 尧 淀 粉 酶 和 纤 维 素 酶 等 冤 饲 养 凡 纳 滨 对 虾 2 个 月 袁 增 重 率 提 高 了 46.5 豫 袁 成 活 率 提 高 13.5 豫 袁 饲 料 系 数 则 下 降 30.9 豫 遥 仲 军 等 [9] 在 饲 料 中 添 加 1 译 复 合 酶 制 剂 渊 蛋 白 酶 尧 淀 粉 酶 和 脂 肪 酶 冤 袁 在 养 殖 生 产 条 件 下 提 高 虾 体 增 重 率 豫 袁 降 低 饲 料 系 数 豫 曰 添 加 500 耀 1000 U/kg 的 植 酸 酶 袁 对 凡 纳 滨 对 虾 的 生 长 虽 无 显 著 影 响, 但 显 著 提 高 了 虾 壳 中 灰 分 和 钙 含 量 [10] 遥 本 试 验 所 用 蛋 白 酶 制 剂 AG 为 细 菌 代 谢 所 产 生 的 多 种 蛋 白 酶 复 合 物 袁 在 鱼 粉 含 量 分 别 为 33 豫 和 26.4 豫 的 饲 料 中 添 加 175 mg/kg 后 袁 增 重 率 分 别 提 高 了 2.88 豫 和 10.8 豫 遥 上 述 研 究 表 明 袁 在 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 后 袁 可 在 一 定 程 度 上 改 善 虾 的 生 产 性 能 遥 不 同 种 类 的 酶 具 有 不 同 的 作 用 机 理 遥 蛋 白 酶 AG 加 入 饲 料 中 后 袁 一 方 面 直 接 参 与 大 分 子 蛋 白 袁 包 括 抗 营 养 因 子 的 降 解 曰 另 一 方 面 可 补 充 内 源 酶 消 化 分 泌 的 不 足 袁 因 而 改 善 了 凡 纳 滨 对 26 虾 的 生 长 性 能 遥 但 是 在 不 同 鱼 粉 含 量 和 不 同 植 物 蛋 白 ( 豆 粕 ) 含 量 的 基 础 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 AG 的 作 用 效 果 不 同 遥 在 鱼 粉 33% 尧 豆 粕 16.5% 的 基 础 饲 料 中 添 加 AG 袁 仅 在 数 值 上 提 高 增 重 率 2.88% 曰 在 鱼 粉 26.4% 尧 豆 粕 25.25% 的 基 础 饲 料 中 添 加 AG 袁 则 提 高 增 重 率 10.8% 袁 达 到 与 33% 鱼 粉 组 基 本 一 致 的 生 长 性 能 遥 对 这 种 现 象 我 们 推 测 袁 蛋 白 酶 AG 对 植 物 蛋 白 具 有 较 好 的 降 解 作 用 袁 而 鱼 粉 因 其 可 消 化 性 高 袁 加 入 AG 后 对 其 消 化 利 用 率 改 善 不 大 袁 因 此 袁 在 鱼 粉 含 量 较 低 而 植 物 蛋 白 含 量 较 高 的 饲 料 中 添 加 蛋 白 酶 AG 对 虾 体 的 生 长 性 能 改 善 较 为 明 显 遥 参 考 文 献 1 Yu B, Wu ST, Liu CC. Effects of enzyme inclusion in amaizesoybean diet on broiler performance [J]. Animal Feed Science and Technology,2007,134:283 耀 白 东 清, 乔 秀 亭. 植 酸 酶 对 鲤 鱼 磷 钙 等 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 [J]. 天 津 农 学 院 学 报,2003,10(1):6 耀 10 3 白 东 清, 郭 立, 乔 秀 亭, 等. 植 酸 酶 对 鲤 鱼 主 要 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 [J]. 中 国 饲 料,2002(16):16 耀 17 4 张 满 隆, 邓 理. 草 鱼 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 的 效 果 试 验 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业,2002(5):36 耀 37 5 韩 如 政, 解 涵. 鲤 鱼 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 试 验 [J]. 饲 料 研 究,1999(6): 30 6 陈 应 华. 复 合 酶 制 剂 对 彭 泽 鲫 生 长 性 能 的 影 响 实 验 [J]. 饲 料 工 业, 2001(3):27 耀 28 7 张 满 隆, 邓 理. 鲫 鱼 饲 料 中 应 用 酶 制 剂 的 实 验 [J]. 饲 料 博 览,2001 (3):43 8 朱 宏 友, 邓 岳 松, 陈 学 铭, 等. 高 温 酶 和 鱼 虾 壮 对 南 美 白 对 虾 生 长 的 影 响 [J]. 内 陆 水 产,2004(9):12 耀 13 9 仲 军, 王 健 鹏, 马 梦 瑞. 饲 用 酶 制 剂 在 对 虾 饵 料 中 的 应 用 研 究 [J]. 齐 鲁 渔 业,1994,11(3) :30 耀 陈 新 宇, 潘 庆, 毕 英 佐, 等. 植 酸 酶 对 凡 纳 滨 对 虾 生 长 性 能 和 体 成 分 的 影 响 [J]. 湛 江 海 洋 大 学 学 报,2005,25(5):14 耀 17 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

27 试 验 研 究 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 佛 州 侧 耳 对 玉 米 秸 秆 干 物 质 体 外 降 解 率 的 影 响 仲 崇 刚 刘 坦 闫 坤 伦 粮 食 短 缺 尧 环 境 污 染 以 及 能 源 浪 费 是 我 国 现 代 农 方 法 业 发 展 亟 待 解 决 的 问 题 袁 采 用 微 生 物 处 理 农 作 物 秸 秆 一 级 菌 种 的 培 养 提 高 木 质 纤 维 素 的 降 解 率 袁 开 发 饲 料 资 源 袁 是 解 决 人 畜 争 粮 矛 盾 尧 改 善 生 态 环 境 尧 节 约 能 源 的 重 要 环 节 遥 在 实 际 生 产 中 袁 白 腐 真 菌 在 以 木 质 素 为 唯 一 碳 源 的 培 养 基 上 一 般 不 能 生 长 袁 这 是 因 为 这 些 木 质 素 降 解 菌 必 须 首 先 降 解 多 糖 类 以 取 得 能 量 袁 在 此 基 础 上 才 能 对 木 质 素 进 一 步 降 解 曰 再 者 多 糖 类 物 质 比 木 质 素 更 容 易 被 降 解, 而 木 质 素 较 难 被 降 解 遥 因 此 在 木 质 素 被 降 解 的 同 时 袁 一 般 都 先 伴 随 有 对 纤 维 素 和 半 纤 维 素 的 分 解, 这 对 生 物 处 理 发 酵 秸 秆 不 利 袁 降 低 了 秸 秆 的 营 养 价 值 曰 其 次 袁 由 于 秸 秆 存 在 着 大 量 霉 菌 和 其 它 杂 菌 袁 在 氧 气 尧 温 度 和 湿 度 等 适 宜 条 件 下 袁 杂 菌 会 迅 速 繁 殖 袁 竞 争 性 抑 制 白 腐 真 菌 的 正 常 生 长 袁 使 秸 秆 发 霉 变 质 曰 由 于 白 腐 真 菌 发 酵 秸 秆 时 受 到 菌 种 的 选 择 尧 温 度 尧 水 分 含 量 尧 通 风 状 况 尧 酸 碱 度 尧 秸 秆 碳 氮 比 及 发 酵 时 间 等 因 淤 培 养 基 制 备 固 体 培 养 基 院 马 铃 薯 200 g 尧 葡 萄 糖 20 g 尧 琼 脂 20 g 尧 水 1000 ml 袁 ph 值 6.2 耀 6.5 遥 液 体 培 养 基 院 马 铃 薯 200g 尧 葡 萄 糖 20g 尧 水 1000ml 袁 ph 值 6.2 耀 6.5 遥 将 制 备 好 的 培 养 基 装 入 试 管 袁 在 高 温 渊 120 益 冤 尧 高 压 渊 0.11 MPa 冤 下 灭 菌 30 min, 静 止 冷 却 遥 将 固 体 培 养 基 制 成 斜 面 遥 于 接 种 与 培 养 要 求 在 无 菌 操 作 台 上 进 行 无 菌 操 作 遥 取 0.5 cm 2 大 小 的 菌 块 袁 对 于 固 体 培 养 基 放 于 中 部 偏 下 要 带 有 部 分 原 来 的 培 养 基 以 利 于 真 菌 定 植 尧 生 长 遥 接 种 在 斜 面 或 液 体 培 养 基 后 标 号 并 记 录 遥 在 恒 温 28 益 下 培 养 袁 坚 持 每 日 观 察 菌 种 的 生 长 情 况 遥 素 的 影 响 袁 实 际 操 作 中 底 物 营 养 调 控 及 培 养 条 件 很 难 二 级 菌 种 的 培 养 把 握 遥 本 试 验 从 秸 秆 培 养 基 的 营 养 水 平 和 发 酵 时 间 两 方 面 来 研 究 佛 州 侧 耳 对 秸 秆 发 酵 的 影 响 遥 第 一 个 试 验 是 针 对 目 前 秸 秆 培 养 料 多 以 生 产 食 用 菌 为 目 的 袁 且 营 养 水 平 偏 高 袁 发 酵 秸 秆 饲 料 的 成 本 较 高 遥 试 验 中 用 麦 麸 的 不 同 比 例 来 调 节 培 养 基 碳 氮 比 袁 要 寻 求 一 个 既 可 以 满 足 佛 州 侧 耳 对 秸 秆 的 正 常 发 酵 处 理 袁 又 可 以 提 高 经 济 效 益 的 理 想 配 比 遥 第 二 个 试 验 袁 研 究 发 酵 时 间 对 处 理 秸 秆 的 影 响 袁 目 的 是 确 定 适 宜 的 发 酵 时 间 袁 为 开 发 真 菌 处 理 秸 秆 袁 提 高 其 营 养 价 值 提 供 参 考 依 据 遥 淤 培 养 基 制 备 玉 米 培 养 基 院 将 玉 米 粒 粉 碎 ( 过 6 耀 20 目 筛 ) 袁 麦 麸 10 豫 尧 石 膏 1 豫 尧 石 灰 0.5 豫 袁 ph 值 自 然 遥 将 培 养 基 加 水 煮 沸 成 豆 渣 样 袁 要 求 水 分 含 量 在 60 豫 袁 搅 拌 均 匀 袁 分 装 在 16 个 培 养 皿 中 袁 冷 却 至 室 温 袁 准 备 接 种 遥 此 过 程 仅 对 培 养 基 进 行 煮 沸 灭 菌 袁 而 不 进 行 严 格 的 高 温 尧 高 压 灭 菌 袁 目 的 是 在 有 一 定 量 杂 菌 条 件 下 人 工 提 高 佛 州 侧 耳 的 抗 逆 性 遥 于 接 种 与 培 养 为 了 更 能 适 应 实 践 生 产 中 的 需 要 袁 对 无 菌 条 件 要 求 不 严 袁 仅 采 用 酒 精 灯 创 造 无 菌 环 境 袁 进 行 无 菌 操 作 遥 1 材 料 与 方 法 在 接 种 前 要 选 取 生 长 速 度 快 尧 菌 体 浓 密 高 的 一 级 培 养 1.1 白 腐 真 菌 的 培 养 菌 袁 接 种 到 二 级 培 养 基 中 遥 接 种 菌 块 大 小 在 0.5 cm 2 左 材 料 试 验 采 用 的 佛 州 侧 耳 选 自 东 北 农 业 大 学 食 用 菌 右 袁 每 个 平 皿 中 放 置 2 耀 3 块 袁 将 菌 块 均 匀 分 布 于 平 皿 中 袁 菌 块 上 带 有 部 分 的 原 培 养 基 袁 这 样 利 于 真 菌 的 定 实 验 室 培 育 的 野 平 菇 10 号 冶 为 菌 种 袁 采 用 PDA 培 养 基 作 为 一 级 培 养 基 袁 煮 熟 的 玉 米 粉 作 为 二 级 培 养 基 遥 植 遥 在 培 养 中 要 严 格 控 制 环 境 条 件 袁 即 温 度 28 益 袁 不 可 过 高 曰 平 菇 是 好 氧 菌 袁 要 保 证 通 风 曰 湿 度 一 般 在 75 豫 遥 每 日 观 察 生 长 情 况 遥 1.2 佛 州 侧 耳 对 秸 秆 的 发 酵 仲 崇 刚, 五 大 连 池 市 畜 牧 局,164100, 五 大 连 池 市 试 验 设 计 刘 坦 闫 坤 伦, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 不 同 配 比 的 培 养 料 对 佛 州 侧 耳 处 理 玉 米 秸 秆 收 稿 日 期 : 干 物 质 体 外 降 解 率 的 影 响 27

28 仲 崇 刚 等 : 佛 州 侧 耳 对 玉 米 秸 秆 干 物 质 体 外 降 解 率 的 影 响 试 验 研 究 将 玉 米 秸 秆 和 麦 麸 分 别 按 10 1 尧 尧 10 2 的 比 例 制 成 培 养 料 遥 选 择 生 长 旺 盛 的 佛 州 侧 耳 二 级 菌 种 分 别 接 种 到 3 个 不 同 麦 麸 水 平 的 玉 米 秸 秆 培 养 料 中 袁 与 对 照 组 渊 不 接 种 佛 州 侧 耳 的 玉 米 秸 秆 冤 共 同 置 于 培 养 箱 中 袁 于 28 益 下 恒 温 培 养 袁 每 个 比 例 都 设 置 两 个 重 复 遥 对 于 处 理 好 的 真 菌 发 酵 秸 秆 放 于 65 益 烘 箱 中 烘 干 至 恒 重 袁 混 合 均 匀 取 样 袁 采 用 体 外 法 测 定 被 处 理 秸 秆 的 干 物 质 降 解 率 遥 不 同 发 酵 时 间 对 秸 秆 降 解 的 影 响 将 接 种 真 菌 的 培 养 料 及 对 照 组 分 别 在 28 益 下 恒 温 培 养 10 尧 20 尧 30 d 袁 每 个 天 数 都 设 置 两 个 重 复 遥 对 于 处 理 好 的 真 菌 发 酵 秸 秆 放 于 65 益 烘 箱 中 烘 干 至 恒 重 袁 混 合 均 匀 取 样 袁 采 用 体 外 法 测 定 被 处 理 秸 秆 的 干 物 质 消 失 率 遥 秸 秆 发 酵 方 法 不 同 配 比 秸 秆 的 制 备 按 玉 米 秸 秆 与 麦 麸 10 1 渊 A 处 理 组 冤 尧 玉 米 秸 秆 与 麦 麸 渊 B 处 理 组 冤 尧 玉 米 秸 秆 与 麦 麸 10 2 渊 C 处 理 组 冤 配 比 遥 将 石 膏 1 豫 尧 石 灰 0.5 豫 尧 水 分 67 豫 构 成 不 同 麦 麸 水 平 的 培 养 料, 分 别 混 合 均 匀 袁 分 装 于 不 同 的 广 口 瓶 中 遥 要 求 秸 秆 长 度 在 1cm 左 右 遥 接 种 与 发 酵 在 秸 秆 培 养 基 中 心 打 孔 袁 深 度 约 为 秸 秆 培 养 料 厚 度 的 1/2 袁 将 真 菌 置 于 孔 中 袁 接 种 量 3 豫 遥 接 种 好 的 秸 秆 与 对 照 组 分 别 封 口 后 放 于 28 益 恒 温 下 培 养 袁 秸 秆 要 更 为 严 格 的 控 制 温 度 尧 湿 度 尧 通 风 等 环 境 条 件 遥 样 品 的 制 备 将 发 酵 秸 秆 分 别 在 10 尧 20 尧 30 d 停 止 发 酵 遥 把 发 酵 过 的 生 物 秸 秆 在 65 益 条 件 下 烘 干 至 恒 重 袁 粉 碎 尧 混 合 均 匀 袁 装 瓶 备 用 遥 测 定 指 标 和 方 法 应 用 体 外 法 测 定 被 处 理 秸 秆 的 干 物 质 消 失 率 : 将 处 理 的 秸 秆 装 入 尼 龙 袋 渊 尼 龙 袋 为 300 目 冤 袁 分 装 样 品 约 2g, 投 入 250 ml 三 角 瓶 中, 加 入 瘤 胃 液 200 ml 袁 厌 氧 袁 置 于 37 益 水 浴 中 进 行 振 荡 培 养 48 h 袁 取 出 后 用 清 水 漂 洗 3 遍 袁 放 于 65 益 烘 箱 中 烘 干 至 恒 重 袁 称 重 遥 瘤 胃 液 来 自 装 有 永 久 瘘 管 的 成 年 东 北 半 细 毛 羊 遥 数 据 处 理 性 检 验 遥 采 用 统 计 软 件 SAS6.12 中 的 t 检 验 程 序 进 行 显 著 2 结 果 与 讨 论 2.1 试 验 结 果 培 养 观 察 在 一 级 培 养 过 程 中 袁 5d 菌 丝 长 度 就 可 达 3cm 左 右 袁 分 出 3 耀 5 层 曰 二 级 培 养 过 程 中 袁 4d 菌 株 高 度 可 达 4mm 曰 在 处 理 秸 秆 时 3d 就 可 见 秸 秆 上 出 现 白 雾 样 的 菌 丝,20 尧 30 d 处 理 的 秸 秆 中 可 见 有 黄 色 尧 青 绿 色 杂 菌 袁 秸 秆 颜 色 发 暗 遥 不 同 配 比 的 培 养 料 对 玉 米 秸 秆 干 物 质 的 体 外 降 解 率 渊 见 图 1 冤 由 图 1 可 知 袁 处 理 后 的 玉 米 秸 秆 干 物 质 降 解 率 明 显 提 高 遥 处 理 后 的 玉 米 秸 秆 干 物 质 降 解 率 分 别 为 A 处 理 组 24.30% 尧 B 处 理 组 22.92% 尧 C 处 理 组 22.87% 袁 分 别 比 对 照 组 高 35.23% 尧 27.55% 尧 27.27% 袁 其 中 A 处 理 与 对 照 组 相 比 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 对 A 尧 B 尧 C3 个 处 理 相 互 之 间 作 显 著 性 检 验 袁 结 果 发 现 不 同 的 秸 秆 配 比 对 于 干 物 质 降 解 率 的 影 响 差 异 不 显 著 遥 对 照 A B C 图 1 不 同 配 比 的 秸 秆 不 同 配 比 秸 秆 的 干 物 质 降 解 率 不 同 发 酵 时 间 对 秸 秆 体 外 降 解 率 的 影 响 ( 见 图 2) 不 同 处 理 时 间 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率 分 别 为 豫 渊 10 d 冤 尧 豫 渊 20 d 冤 尧 豫 渊 30 d 冤 尧 对 照 组 17.97% 遥 从 图 2 可 以 看 出 袁 处 理 10 d 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率 最 高 曰 处 理 20 d 秸 秆 干 物 质 降 解 率 下 降 曰 处 理 30 d 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率 低 于 对 照 组 遥 通 过 t 检 验 分 析 袁 结 果 显 示 院 处 理 10 d 的 秸 秆 比 处 理 30 d 的 秸 秆 在 干 物 质 降 解 率 上 极 显 著 提 高 渊 P<0.01 冤 袁 且 比 对 照 组 提 高 72.89% 遥 图 对 照 d 处 理 天 数 渊 d 冤 d 30 d 不 同 处 理 时 间 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率

29 试 验 研 究 仲 崇 刚 等 : 佛 州 侧 耳 对 玉 米 秸 秆 干 物 质 体 外 降 解 率 的 影 响 2.2 讨 论 不 同 培 养 料 配 比 对 佛 州 侧 耳 处 理 玉 米 秸 秆 干 物 质 体 外 降 解 率 的 影 响 白 腐 菌 在 以 木 质 素 为 唯 一 碳 源 的 培 养 基 上 一 般 不 能 生 长 袁 这 是 因 为 这 些 木 质 素 降 解 菌 必 须 首 先 降 解 多 糖 类 以 取 得 能 量 袁 在 此 基 础 上 才 能 对 木 质 素 进 一 步 降 解 遥 麦 麸 中 含 有 丰 富 的 营 养 成 分 袁 其 中 含 粗 蛋 白 15% 左 右 尧 粗 脂 肪 4% 左 右 遥 在 秸 秆 中 加 入 一 定 量 的 麦 麸 就 提 供 了 白 腐 真 菌 生 长 所 需 的 营 养 成 分 遥 本 试 验 随 着 麦 麸 的 水 平 上 升 袁 处 理 秸 秆 的 干 物 质 降 解 率 A 处 理 组 24.30% 尧 B 处 理 组 22.92% 尧 C 处 理 组 22.87%, 分 别 比 对 照 组 高 35.23% 尧 27.55% 尧 27.27% 遥 试 验 结 果 与 英 国 Aston 大 学 的 试 验 结 果 基 本 一 致 遥 应 用 体 外 法 测 定 干 物 质 降 解 率 受 到 羊 的 营 养 水 平 尧 瘤 胃 液 品 质 尧 降 解 的 厌 氧 环 境 等 诸 多 因 素 影 响 袁 因 此 会 导 致 测 定 的 干 物 质 降 解 率 整 体 偏 低 遥 本 试 验 为 了 使 发 酵 条 件 更 接 近 生 产 实 践 袁 从 二 级 培 养 开 始 不 进 行 严 格 的 高 温 尧 高 压 灭 菌 遥 选 择 长 势 旺 盛 的 二 级 菌 种 进 行 下 一 步 接 种 袁 意 在 提 高 菌 种 的 抗 逆 性 袁 接 近 实 际 生 产 条 件 袁 为 生 产 实 践 积 累 切 实 可 用 的 参 数 遥 这 不 仅 可 以 提 高 秸 秆 的 一 次 性 发 酵 量 袁 而 且 降 低 生 产 成 本 遥 不 同 发 酵 时 间 对 秸 秆 体 外 降 解 率 的 影 响 佛 州 侧 耳 具 有 耐 低 温 尧 生 长 速 度 快 等 特 点 遥 Kishan 等 在 麦 秸 上 接 种 黄 孢 原 毛 平 革 菌 袁 结 果 表 明 袁 发 酵 过 程 中 干 物 质 的 降 解 率 与 真 菌 接 种 量 成 正 比 袁 与 CP 的 含 量 尧 IVDMD 渊 干 物 质 的 体 外 消 化 率 冤 成 正 相 关 袁 与 CF 尧 NDF 尧 ADF 尧 HC 和 木 质 素 的 含 量 成 负 相 关, 随 发 酵 时 间 的 延 长 袁 干 物 质 的 降 解 量 不 断 提 高 遥 因 此 袁 发 酵 时 间 越 长 干 物 质 的 体 外 降 解 率 越 高 遥 本 试 验 结 果 显 示 袁 处 理 10 d 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 曰 处 理 20 d 的 秸 秆 干 物 质 降 解 率 低 于 处 理 10 d 的 结 果 曰 处 理 30 d 秸 秆 干 物 质 降 解 率 比 对 照 组 低 遥 20 d 和 30 d 的 秸 秆 发 酵 瓶 中 发 现 黄 色 尧 青 绿 色 杂 菌 袁 抑 制 了 佛 州 侧 耳 的 生 长 袁 因 此 对 提 高 玉 米 秸 秆 干 物 质 体 外 降 解 率 没 有 效 果 遥 试 验 结 果 说 明 佛 州 侧 耳 处 理 秸 秆 10 d 左 右 袁 可 明 显 提 高 秸 秆 干 物 质 的 降 解 率 遥 3 结 论 由 本 试 验 结 果 可 知 袁 经 过 佛 州 侧 耳 处 理 的 秸 秆 其 干 物 质 体 外 降 解 率 明 显 提 高 袁 秸 秆 与 小 麦 麸 比 为 尧 和 10 2 时 处 理 的 干 物 质 体 外 降 解 率 分 别 比 对 照 组 高 35.23% 尧 27.55% 尧 27.27% 遥 佛 州 侧 耳 发 酵 秸 秆 10 d 袁 其 干 物 质 体 外 降 解 率 达 到 31.07% 袁 比 对 照 提 高 72.89% 遥 参 考 文 献 1 冯 仰 廉. 反 刍 动 物 营 养 学 [M]. 科 学 出 版 社, 张 丽 英. 饲 料 分 析 及 饲 料 质 量 检 测 技 术 [M]. 中 国 农 业 大 学 出 版 社, 王 忠 艳. 动 物 营 养 与 饲 料 科 学 [M]. 东 北 林 业 大 学 出 版 社, 邓 耀 杰, 林 鹿, 詹 怀 宇. 白 腐 菌 对 芳 香 化 合 物 的 降 解 及 其 机 制 [J]. 环 境 科 学 与 技 术,1999,86(3):8 耀 12 5 席 冬 梅, 邓 卫 东, 毛 华 明. 白 腐 真 菌 降 解 木 质 素 的 机 理 及 培 养 的 营 养 调 控 [J]. 中 国 饲 料,2002(9):8 耀 10 6 赵 华, 齐 刚, 代 彦, 等. 白 腐 真 菌 对 稻 草 秸 秆 生 物 降 解 的 研 究 [J]. 饲 料 工 业,2003,24(11):37 耀 40 7 杭 怡 琼, 薛 惠 琴, 郁 怀 丹, 等. 白 腐 真 菌 对 稻 草 中 木 质 素 纤 维 素 降 解 的 影 响 [J]. 上 海 畜 牧 兽 医 通 讯,2001(1):17 8 陈 翠 微, 刘 长 江. 利 用 白 腐 真 菌 提 高 秸 秆 利 用 率 [J]. 中 国 农 业 科 技 导 报,2001,3(3):53 耀 56 9 余 伯. 白 腐 真 菌 发 酵 粗 饲 料 [J]. 江 西 饲 料,2000(6):20 耀 陈 谊, 杭 怡 琼, 薛 惠 琴, 等. 白 腐 真 菌 降 解 稻 草 转 化 饲 料 的 研 究 [J]. 上 海 交 通 大 学 学 报,2001,19(2):151 耀 Lang E, Gonser A, Zadrazil F. Influence of incubation temperature on activity of ligninolytic enzymes insterile soil by Pleurotus sp. and Dichomitus squalens[j]. Journal of Basic Microbiology,2000,40 (1):33 耀 Fazaeli H, Mahmodzadeh H, Jelan ZA, et al. Azizi A. Utilization of fungal treated wheat straw in the diet of late lactating cow[j]. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 2004, 7(4):467 耀 Steffen KT,Hatakka A,Hofrichter M. Mineralisation of C-14- labelled synthetic lignin and ligninolytic enzymeactivities of litterdecomposing basidiomycetous fungi [J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2000,54(6):819 耀 Mukherjee R, Nandi B. Improvement of in vitro digestibility through biological treatment of waterhyacinth biomass by two Pleurotus species[j].international biodeterioration &biodegradation, 2004, 53(1): 7 耀 Scheel T,Ludwig S,Holker U,et al. Differential expression of manganese peroxidase and laccase in white-rotfungi in the presence of manganese or aromatic compounds [J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2000,54(5):686 耀 691 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

30 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 试 验 研 究 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 酸 酶 降 解 饲 料 中 植 酸 磷 的 体 外 研 究 李 成 良, 广 东 肇 庆 华 芬 饲 料 酶 有 限 公 司,526020, 广 东 省 肇 庆 市 端 州 六 路 22 号 之 三 张 海 燕, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 刘 献 英 周 安 国 ( 通 讯 作 者 ) 王 之 盛, 四 川 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所 收 稿 日 期 : 李 成 良 张 海 燕 刘 献 英 周 安 国 王 之 盛 摘 要 通 过 模 拟 生 长 猪 消 化 道 环 境, 以 玉 米 豆 粕 和 菜 粕 为 植 酸 磷 的 载 体, 考 察 了 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 酸 酶 体 外 释 放 植 酸 磷 的 影 响 结 果 显 示, 在 体 外 近 似 体 内 条 件 下 (37 益 2.5 h ph 值 3 耀 6), 酸 梅 粉 和 植 酸 酶 ( 500 U/kg) 联 用 释 放 不 同 饲 料 中 的 植 酸 磷 比 例 最 大, 其 次 是 柠 檬 酸, 盐 酸 最 低 关 键 词 酸 源 ; 微 生 物 植 酸 酶 ; 植 酸 磷 ; 释 放 比 例 中 图 分 类 号 S816.7 谷 物 和 油 料 作 物 及 其 饼 粕 等 植 物 性 饲 料 中 绝 大 部 分 的 磷 是 以 植 酸 磷 (60% 耀 70%) 的 形 式 存 在 遥 单 胃 动 物 很 难 消 化 利 用 植 酸 磷 [1] 遥 随 着 酶 制 剂 应 用 技 术 的 发 展, 已 经 证 明 添 加 微 生 物 植 酸 酶 对 提 高 日 粮 中 植 酸 盐 的 利 用 率 是 一 种 有 效 而 切 实 可 行 的 技 术 手 段 遥 如 何 进 一 步 提 高 微 生 物 植 酸 酶 的 作 用 效 果 和 植 酸 磷 的 降 解 程 度 是 目 前 研 究 的 热 点 和 难 点 遥 微 生 物 植 酸 酶 的 作 用 效 果 具 有 ph 值 依 赖 性, 其 最 适 ph 值 为 5 耀 5.5 和 2.5, 日 粮 酸 化 能 降 低 饲 粮 的 ph 值 而 提 高 微 生 物 植 酸 酶 的 作 用 效 果 遥 酸 梅 粉 是 由 脱 水 野 酸 梅 干 冶 粉 碎 而 成 袁 是 一 种 天 然 的 组 分 袁 含 有 大 量 的 有 机 酸 袁 有 人 曾 在 酸 梅 中 分 离 出 10 种 有 机 酸 院 苹 果 酸 尧 柠 檬 酸 尧 草 酸 尧 乙 醇 酸 尧 乳 酸 尧 琥 珀 酸 尧 焦 精 谷 氨 酸 尧 甲 酸 尧 乙 酸 尧 丙 酸 袁 其 中 柠 檬 酸 含 量 达 到 24.96%, 总 酸 度 以 柠 檬 酸 表 示 为 27.82% 遥 研 究 酸 梅 粉 作 为 一 种 天 然 来 源 的 复 合 有 机 酸 对 微 生 物 植 酸 酶 作 用 效 果 的 影 响 袁 同 时 以 常 用 的 有 机 酸 化 剂 柠 檬 酸 和 无 机 酸 盐 酸 作 对 照 袁 比 较 不 同 种 类 酸 对 植 酸 酶 作 用 效 果 的 影 响 遥 1 材 料 和 方 法 1 援 1 材 料 植 酸 酶 和 酸 梅 粉 由 福 建 某 公 司 提 供 袁 微 生 物 植 酸 酶 酶 活 为 2000 U/g 袁 酶 活 单 位 的 定 义 院 在 37 益 尧 ph 值 5.50 的 条 件 下 袁 每 分 钟 从 mol/l 的 植 酸 钠 溶 液 中 释 放 出 1 滋 mol 无 机 磷 所 需 要 的 植 酸 酶 的 量 为 一 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 柠 檬 酸 为 分 析 纯 试 剂 遥 30 1 援 2 试 验 操 作 分 别 准 确 称 取 过 60 目 筛 的 玉 米 尧 豆 粕 和 菜 粕 各 0.1 g( 精 确 到 g) 袁 植 酸 酶 的 添 加 量 为 500 U/kg 渊 取 适 量 植 酸 酶 溶 入 水 中 袁 溶 解 尧 离 心 袁 配 成 0.5 U/ml 工 作 液 冤 袁 反 应 温 度 固 定 37 益 袁 然 后 分 别 加 入 ph 值 为 2 尧 3 尧 4 尧 5 尧 6 尧 8 的 不 同 酸 源 的 酸 溶 液 10 ml, 反 应 2.5 h 后 加 入 终 止 液 中 止 反 应, 混 匀 静 置 10 min 袁 4000 r/min 条 件 下 离 心 10 min 袁 取 上 清 液 测 定 无 机 磷 的 含 量 遥 对 照 管 中 只 加 0.1 g 饲 料 渊 总 反 应 体 积 都 为 10 ml 冤 袁 不 加 植 酸 酶 袁 其 它 操 作 同 测 定 管 遥 将 酸 梅 粉 溶 入 一 定 量 水 中 [ 酸 梅 粉 渊 g 冤 水 渊 ml 冤 = 1 2] 袁 充 分 溶 解 袁 离 心 取 上 清 液 袁 配 成 ph 值 分 别 为 2 尧 3 尧 4 尧 5 尧 6 尧 8 的 溶 液 袁 ph 值 为 8 的 溶 液 是 在 ph 值 为 6 的 溶 液 中 添 加 适 量 的 ph 值 为 9.6 的 碳 酸 缓 冲 液 渊 1.59 g 碳 酸 钠 和 2.93 g 碳 酸 氢 钠 共 同 溶 入 1000 ml 水 中 冤 配 制 而 成 遥 盐 酸 和 柠 檬 酸 溶 液 的 配 制 方 法 与 之 相 同 遥 1 援 3 测 定 指 标 与 方 法 本 试 验 中 以 不 同 底 物 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 反 映 植 酸 酶 在 不 同 条 件 下 水 解 植 酸 磷 的 能 力 遥 植 酸 磷 的 释 放 比 例 渊 % 冤 = 反 应 体 系 中 无 机 磷 的 释 放 量 渊 g/kg 冤 / 饲 料 中 植 酸 磷 量 渊 g/kg 冤 遥 测 定 管 含 磷 量 与 对 照 管 之 差 为 所 释 放 的 无 机 磷 量 遥 无 机 磷 和 植 酸 磷 的 测 定 参 考 杨 胜 叶 饲 料 分 析 及 饲 料 质 量 检 测 技 术 曳 渊 1993 冤 中 的 方 法 遥 1 援 4 数 据 处 理 用 Excel 2003 对 数 据 进 行 初 步 处 理 袁 结 果 用 平 均 数 表 示 袁 采 用 SPSS 11.5 进 行 单 因 素 方 差 分 析 和 Dun 鄄 can's 法 多 重 比 较 遥 2 结 果 与 分 析 在 模 拟 动 物 胃 肠 道 条 件 下 渊 ph 值 2 耀 8 冤 袁 3 种 酸 调 节 的 反 应 体 系 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 都 是 在 ph 值 3 耀 6 之 间 相 对 较 高 渊 见 表 1 尧 图 1 冤 袁 ph 值 和 植 酸 磷 的 释 放 率 间 存 在 极 显 著 的 二 次 曲 线 关 系 袁 求 二 阶 导 数 得 到 ph 值 4.5 左 右 时 植 酸 磷 的 释 放 率 达 到 最 大 值 ( 见 表 2) 遥

31 试 验 研 究 李 成 良 等 : 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 酸 酶 降 解 饲 料 中 植 酸 磷 的 体 外 研 究 ph 值 为 2 和 8 时, 不 同 反 应 体 系 中 植 酸 磷 的 释 放 率 明 显 降 低 遥 表 1 在 不 同 ph 值 条 件 下, 不 同 酸 源 和 植 酸 酶 对 玉 米 原 料 玉 米 豆 粕 菜 粕 豆 粕 和 菜 粕 中 植 酸 磷 释 放 比 例 的 影 响 ( 豫 ) 酸 源 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 a c bc a c e a c e a c e a c d a c e ph 值 a c d a c d a c e a c c a c b a c c 注 院 同 列 数 据 肩 标 字 母 相 邻 者 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 袁 相 间 者 表 示 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 ; 没 有 标 注 或 标 注 字 母 相 同 表 示 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 下 表 同 遥 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 ph 值 渊 b 冤 豆 粕 盐 酸 20 酸 梅 粉 柠 檬 酸 ph 值 渊 a 冤 玉 米 图 1 20 盐 酸 酸 梅 粉 10 柠 檬 酸 ph 值 渊 c 冤 菜 粕 以 玉 米 豆 粕 和 菜 粕 为 植 酸 磷 的 载 体, 不 同 ph 值 条 件 下, 不 同 来 源 酸 对 微 生 物 植 酸 酶 释 放 植 酸 磷 的 影 响 原 料 玉 米 豆 粕 菜 粕 酸 源 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 盐 酸 酸 梅 粉 柠 檬 酸 表 2 不 同 酸 源 条 件 下,pH 值 与 微 生 物 植 酸 酶 释 放 植 酸 磷 比 例 的 回 归 关 系 回 归 方 程 = = = = = = = = = 注 院 为 植 酸 磷 释 放 比 例 渊 % 冤 袁 为 ph 值 遥 R P <0.001 <0.002 <0.002 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 植 酸 磷 释 放 率 最 大 时 的 ph 值 及 最 大 值 (%) ph 值 4.39 袁 y max=53.11 ph 值 4.47 袁 y max=66.61 ph 值 4.50 袁 y max=61.85 ph 值 4.29 袁 y max=23.45 ph 值 4.41 袁 y max=34.33 ph 值 4.40 袁 y max=29.56 ph 值 4.76 袁 y max=36.02 ph 值 4.82 袁 y max=51.55 ph 值 4.83 袁 y max=46.44 在 模 拟 消 化 道 ph 值 条 件 下, 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 显, 总 体 上 有 机 酸 与 微 生 物 植 酸 酶 联 用 的 效 果 比 盐 酸 酸 酶 在 不 同 饲 料 中 释 放 植 酸 磷 的 影 响 如 图 1 和 表 1 与 微 生 物 植 酸 酶 联 用 的 效 果 好 渊 P<0.05 冤 遥 而 在 ph 值 所 示 遥 在 近 似 体 内 条 件 下, 体 系 中 3 种 饲 料 原 料 中 植 为 2 和 8 时,3 种 酸 对 植 酸 酶 的 作 用 效 果 基 本 没 有 变 酸 磷 的 释 放 比 例 按 酸 梅 粉 组 尧 柠 檬 酸 组 和 盐 酸 组 顺 序 化 (P>0.05) 遥 不 同 酸 源 条 件 下 对 ph 值 和 植 酸 酶 的 二 次 逐 渐 降 低, 且 在 ph 值 3 耀 6 时, 这 种 关 系 表 现 得 更 加 明 曲 线 回 归 方 程 求 导 可 得 不 同 酸 源 对 反 应 体 系 中 植 酸 31

32 李 成 良 等 : 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 酸 酶 降 解 饲 料 中 植 酸 磷 的 体 外 研 究 试 验 研 究 磷 的 最 大 释 放 率 的 影 响, 酸 梅 粉 的 影 响 最 大, 其 次 是 柠 檬 酸, 盐 酸 最 小 渊 见 表 2 冤 遥 对 于 玉 米, 在 ph 值 为 4 和 5 时, 酸 梅 粉 组 植 酸 磷 的 释 放 率 极 显 著 渊 P<0.01 冤 和 显 著 地 渊 P<0.05 冤 高 于 柠 檬 酸 组 曰 ph 值 为 5 时 袁 酸 梅 粉 组 植 酸 磷 的 释 放 率 比 柠 檬 酸 组 提 高 了 9.56% 渊 P<0.05 冤 袁 这 两 组 与 盐 酸 组 相 比 分 别 提 高 了 35.26% 和 23.46% 袁 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 遥 对 于 植 酸 磷 含 量 比 较 高 的 豆 粕 和 菜 粕 袁 在 ph 值 为 3 耀 6 时 袁 酸 梅 粉 组 和 柠 檬 酸 组 植 酸 磷 的 释 放 率 都 显 著 渊 P<0.05 冤 或 极 显 著 渊 P<0.01 冤 地 高 于 盐 酸 组 曰 除 ph 值 为 6 时 的 菜 粕 组 外 袁 其 它 处 理 中 植 酸 磷 的 释 放 率 酸 梅 粉 组 显 著 渊 P<0.05 冤 或 极 显 著 渊 P<0.01 冤 高 于 柠 檬 酸 组 曰 ph 值 为 5 时 袁 酸 梅 粉 组 豆 粕 和 菜 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 率 分 别 比 柠 檬 酸 组 提 高 了 11.26% 渊 P<0.05 冤 和 4h 袁 植 酸 磷 的 消 化 率 分 别 达 到 50% 和 80% 遥 宋 金 彩 (2000) 在 ph 值 为 5.5 和 温 度 为 37 益 条 件 下 袁 300 U/kg 微 生 物 植 酸 酶 作 用 60 min 袁 分 别 从 玉 米 和 豆 粕 中 释 放 37.4% 和 20.7% 的 植 酸 磷 遥 杨 晓 玲 等 (2006) 报 道 袁 在 ph 值 为 5.5 尧 温 度 为 37 益 条 件 下 向 米 糠 中 添 加 500 U/kg 微 生 物 植 酸 酶 并 培 养 6h 袁 米 糠 中 植 酸 磷 的 释 放 率 达 到 60.3% 袁 进 一 步 发 现 袁 在 37 益 条 件 下 向 米 糠 中 添 加 250 U/kg 植 酸 酶 并 培 养 6h 袁 当 ph 值 为 3 时 袁 米 糠 中 植 酸 磷 的 释 放 率 达 到 最 大 值 渊 68.3% 冤 遥 本 次 研 究 得 到 袁 在 ph 值 为 3 耀 6 渊 接 近 不 同 状 态 胃 内 ph 值 冤 的 不 同 酸 介 质 存 在 下 袁 37 益 培 养 2.5 h 袁 玉 米 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 为 豫 耀 70.39% 曰 豆 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 为 豫 耀 33.68% 曰 菜 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 为 豫 耀 55.20% 遥 16.46% 渊 P<0.01 冤 曰 柠 檬 酸 组 分 别 比 盐 酸 组 提 高 了 28.59% 和 22.45% 袁 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 遥 3 援 2 不 同 酸 源 对 饲 料 中 植 酸 酶 释 放 植 酸 磷 的 影 响 本 次 研 究 显 示 袁 在 ph 值 为 3 耀 6 时 袁 分 别 以 玉 米 尧 3 讨 论 豆 粕 和 菜 粕 作 为 底 物 袁 酸 梅 粉 组 和 柠 檬 酸 组 植 酸 磷 的 3 援 1 ph 值 对 不 同 饲 料 原 料 植 酸 磷 释 放 比 例 的 影 响 Simon 等 (1990) 的 研 究 表 明 袁 无 花 果 曲 霉 植 酸 酶 最 释 放 率 都 显 著 或 极 显 著 地 高 于 盐 酸 组 袁 由 二 次 曲 线 回 归 得 到 的 不 同 酸 源 对 植 酸 磷 的 释 放 率 的 影 响 也 呈 相 佳 ph 值 为 2.5 和 5.5 遥 而 在 本 研 究 中 只 发 现 一 个 最 佳 ph 值 遥 有 关 植 酸 酶 的 基 础 研 究 表 明 袁 不 同 来 源 的 微 生 物 植 酸 酶 在 分 子 大 小 尧 结 构 和 特 性 等 方 面 存 在 差 异 ( 姚 斌 袁 1998) 遥 事 实 上 袁 微 生 物 植 酸 酶 并 不 是 单 一 的 一 种 酶 袁 而 是 由 植 酸 酶 和 酸 性 磷 酸 酶 组 成 的 一 个 酶 系 遥 植 酸 酶 只 能 将 植 酸 分 解 成 肌 醇 磷 酸 袁 必 须 在 酸 性 磷 酸 酶 的 协 助 下 才 能 将 植 酸 彻 底 分 解 遥 无 花 果 曲 霉 植 酸 酶 包 括 PhyA 和 PhyB 两 种 袁 在 不 同 ph 值 下 表 现 的 酶 活 性 与 两 种 酶 的 含 量 有 关 (Simons 等,1990) 遥 Ullah(1987) 的 研 究 证 明 袁 无 花 果 曲 霉 能 够 同 时 产 生 PhyA 和 PhyB 袁 不 同 微 生 物 所 产 植 酸 酶 系 不 同 遥 本 研 究 所 用 植 酸 酶 在 不 同 酸 体 系 中 最 佳 ph 值 为 4.5 左 右 袁 在 ph 值 为 2 时 没 有 活 性 高 峰 袁 说 明 此 酶 不 含 或 仅 含 极 少 量 PhyA 袁 有 可 能 来 自 黑 曲 霉 或 无 花 果 曲 霉 的 变 种 袁 或 在 酶 的 后 处 理 过 程 或 贮 存 过 程 中 PhyA 己 部 分 失 活 遥 Simons 等 渊 1990 冤 在 ph 值 为 5.5 尧 温 度 为 40 益 的 条 件 下 测 定 了 1000 U/kg 的 微 生 物 植 酸 酶 对 玉 米 和 豆 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 效 果 袁 结 果 表 明 袁 反 应 60 min 时, 玉 米 和 豆 粕 中 分 别 释 放 出 100% 和 84.5% 的 植 酸 磷 遥 石 宝 明 等 渊 1999 冤 报 道 袁 在 玉 米 尧 豆 饼 和 麦 麸 混 合 物 渊 冤 中 添 加 500 U/kg 微 生 物 植 酸 酶 袁 在 温 度 为 40 益 尧 ph 值 为 5.5 的 乙 酸 缓 冲 液 中 分 别 培 养 2.5 h 和 似 的 趋 势 遥 结 果 显 示 袁 有 机 酸 渊 酸 梅 粉 和 柠 檬 酸 冤 对 植 酸 酶 的 增 效 作 用 好 于 无 机 酸 渊 盐 酸 冤 遥 Zhu 等 (1990) 对 玉 米 要 豆 粕 要 小 麦 麸 型 日 粮 采 用 了 两 步 法 脱 植 酸 袁 首 先 在 ph 值 为 3.1 的 条 件 下 用 柠 檬 酸 处 理 玉 米 和 豆 粕 2h, 然 后 在 ph 值 为 5.1 的 条 件 下 处 理 小 麦 麸 2h, 植 酸 的 水 解 率 达 到 81% 袁 认 为 柠 檬 酸 是 一 种 竞 争 性 的 螯 合 剂 袁 可 以 提 高 第 二 阶 段 植 酸 水 解 的 敏 感 性 遥 Zyla 等 (1995a 尧 b) 研 制 了 一 种 由 商 品 真 菌 植 酸 酶 尧 酸 性 磷 酸 酶 尧 柠 檬 酸 酶 和 果 胶 酶 组 成 的 复 合 酶, 这 种 复 合 酶 在 模 拟 火 鸡 肠 道 条 件 下, 可 以 完 全 水 解 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 的 植 酸 遥 柠 檬 酸 和 辅 酶 的 作 用 可 能 是 提 高 消 化 过 程 中 底 物 对 复 合 酶 中 植 酸 酶 和 非 特 异 性 磷 酸 酶 的 敏 感 性 渊 破 坏 矿 物 质 - 植 酸 盐 复 合 物 冤 而 进 行 水 解 遥 理 论 上 讲, 日 粮 中 添 加 螯 合 剂 能 够 提 高 植 酸 酶 的 效 果, 增 加 磷 及 其 它 矿 物 质 的 沉 积 袁 理 想 的 螯 合 剂 应 该 是 比 矿 物 质 具 有 更 高 的 与 植 酸 结 合 的 能 力, 并 且 无 毒 袁 形 成 的 复 合 物 能 被 动 物 解 离 或 利 用 遥 氨 基 酸 和 羧 基 酸 ( 柠 檬 酸 ) 比 矿 物 质 具 有 更 高 的 与 植 酸 结 合 的 能 力 (Cheryan 袁 1980) 遥 Maenz 等 (1999) 在 菜 粕 上 进 行 了 系 统 的 研 究, 在 植 酸 酶 存 在 的 情 况 下, 随 着 邻 苯 二 甲 酸 和 柠 檬 酸 水 平 的 进 一 步 提 高 袁 无 机 磷 的 释 放 量 进 一 步 增 加 遥 当 邻 苯 二 甲 酸 的 水 平 达 到 100 mmol/l 时, 无 32

33 试 验 研 究 李 成 良 等 : 不 同 酸 源 对 微 生 物 植 酸 酶 降 解 饲 料 中 植 酸 磷 的 体 外 研 究 机 磷 的 释 放 量 是 不 加 植 酸 酶 组 的 4 倍 袁 是 植 酸 酶 添 加 组 的 2 倍 遥 在 植 酸 酶 存 在 的 情 况 下 袁 随 着 时 间 的 增 加 袁 无 机 磷 的 释 放 量 在 1h 达 到 平 台 期 袁 此 时 无 机 磷 的 释 放 量 约 等 于 总 磷 的 50% 袁 进 一 步 添 加 EDTA 或 邻 苯 二 甲 酸 并 不 影 响 这 种 反 应 的 趋 势 袁 但 能 使 其 达 到 平 台 期 时 无 机 磷 的 量 增 加 袁 添 加 100 mmol/l 邻 苯 二 甲 酸 时 的 无 机 磷 的 释 放 量 几 乎 是 总 磷 的 100% 遥 Tang 等 (2006) 报 道 袁 随 着 有 机 酸 浓 度 的 增 加 渊 耀 1mmol/l 冤 袁 组 氨 酸 磷 酸 酶 渊 HAP 冤 和 紫 色 酸 性 磷 酸 酶 渊 PAP 冤 对 无 机 磷 的 释 放 效 果 按 柠 檬 酸 渊 盐 冤 尧 草 酸 渊 盐 冤 和 苹 果 酸 渊 盐 冤 的 顺 序 逐 渐 减 小 袁 这 种 作 用 效 果 与 Jones 渊 1998) 的 报 道 一 致 遥 但 Jones 等 渊 1998) 报 道 袁 在 ph 值 为 4 耀 6 时 袁 其 效 果 以 草 酸 渊 盐 冤 尧 柠 檬 酸 渊 盐 冤 和 苹 果 酸 渊 盐 冤 的 顺 序 逐 渐 减 小 遥 因 此 袁 可 能 草 酸 盐 吸 附 自 由 植 酸 的 主 要 机 制 是 配 基 交 换 袁 而 柠 檬 酸 盐 作 用 的 重 要 机 制 是 形 成 金 属 复 合 物 遥 苹 果 酸 盐 和 草 酸 盐 含 有 2 个 羧 基 袁 而 柠 檬 酸 盐 含 有 3 个 羧 基 袁 因 此 具 有 更 强 的 与 阳 离 子 结 合 的 能 力 遥 如 在 ph 值 为 6 的 条 件 下 苹 果 酸 盐 和 草 酸 盐 含 有 2 个 负 电 荷 袁 而 柠 檬 酸 盐 中 -2 价 和 -3 价 的 比 例 是 1 1 遥 柠 檬 酸 作 为 一 种 弱 酸 性 螯 合 剂 袁 而 盐 酸 仅 能 为 反 应 体 系 提 供 质 子 袁 二 者 作 用 模 式 的 不 同 导 致 了 植 酸 磷 释 放 比 例 的 差 异 袁 这 与 前 人 报 道 的 结 果 是 一 致 的 袁 但 数 值 存 在 差 异 袁 可 能 与 植 酸 酶 或 底 物 不 同 有 关 遥 本 次 研 究 表 明 袁 在 相 同 条 件 下 袁 酸 梅 粉 组 对 不 同 饲 料 原 料 中 植 酸 磷 的 释 放 比 例 都 显 著 地 高 于 柠 檬 酸 组 遥 酸 梅 粉 虽 然 其 绝 大 部 分 有 机 酸 是 柠 檬 酸 (24.96%) 袁 占 总 酸 度 的 89.72%, 还 含 有 苹 果 酸 (1.22%) 尧 甲 酸 尧 乙 酸 等 10 多 种 有 机 酸 袁 是 一 种 天 然 来 源 的 有 机 酸 复 合 酸 遥 另 外 袁 酸 梅 粉 中 还 含 有 其 它 不 同 形 式 的 有 机 盐 尧 抗 坏 血 酸 螯 合 剂 和 其 它 未 知 物 质 袁 但 其 具 体 的 作 用 机 制 还 需 要 进 一 步 研 究 遥 4 结 论 以 饲 料 中 植 酸 磷 的 释 放 率 为 标 示 来 评 价 不 同 来 源 的 酸 对 微 生 物 植 酸 酶 的 增 效 作 用 遥 在 体 外 近 似 生 长 猪 消 化 道 条 件 下 渊 37 益 尧 2.5 h 尧 ph 值 为 3 耀 6 冤 袁 有 机 酸 相 对 于 无 机 酸 有 更 好 的 提 高 植 酸 酶 释 放 植 酸 磷 的 能 力 袁 有 机 酸 中 天 然 复 合 酸 要 酸 梅 粉 增 效 作 用 比 柠 檬 酸 好 遥 不 同 酸 源 条 件 下 对 ph 值 和 植 酸 磷 的 释 放 率 的 二 次 曲 线 回 归 方 程 求 导 可 得 袁 不 同 酸 源 的 反 应 体 系 在 ph 值 为 4.5 左 右 时 对 饲 料 中 植 酸 磷 的 释 放 率 最 大 袁 此 33 时 酸 梅 粉 尧 柠 檬 酸 和 盐 酸 分 别 使 玉 米 中 植 酸 磷 的 释 放 率 为 66.61% 尧 61.85% 和 53.11% 曰 豆 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 率 为 34.33% 尧 29.56% 和 23.45% 曰 菜 粕 中 植 酸 磷 的 释 放 率 为 51.55% 尧 46.44% 和 36.02% 遥 参 考 文 献 1 石 宝 明, 单 安 山. 微 生 物 植 酸 酶 在 体 外 条 件 下 活 性 的 测 定 [J]. 黑 龙 江 畜 牧 兽 医,2000(2):15 耀 16 2 宋 金 彩. 微 生 物 植 酸 酶 特 性 的 研 究 及 其 在 蛋 鸡 饲 粮 中 的 应 用 [D]. 东 北 农 业 大 学 博 士 学 位 论 文, 姚 斌, 张 春 义, 王 建 华, 等. 产 植 酸 酶 的 黑 曲 霉 菌 株 的 筛 选 及 其 植 酸 酶 基 因 的 克 隆 [J]. 农 业 生 物 技 术 学 报,1998,6(1):1 耀 6 4 杨 晓 玲, 周 明. 米 糠 中 植 酸 磷 的 体 外 消 化 试 验 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业, 2006(7):37 耀 39 5 Cheryan M. Phytic acid interactions in food systems [J]. CRC Crticul Reviews in Food Science and Nutrition, 1980,13:297 耀 Cromwell GL. The biological availability of phosphorus in feedstuffs for pigs[j]. Pig News and information, 1992,13(2):75 7 Jones D L. Organic acids in the rhizosphere-a critical review[j]. Plant and Soil,1998, 205:25 耀 44 8 Jones DL, Brassington DS. Sorption of organic acids in acid soils and its implications in the rhizosphere [J]. European Journal of Soil Science, 1998, 49:447 耀 Maenz DD, C. M., Engele-Schaan, et al. The effect of minerals and mineral chelators on the formation of phytase-resistant and phytasesusceptible forms of phytic acid in solution and in aslurry of canola meal[j]. Animal Feed Science and Technology, 1999, 81:177 耀 Simons PC, H.A.J. Versteegh, A.W. JongbLoed, et al. Improvement of phosphorus availability by microbial phytase in broilers and pigs [J]. Br. J. Nutr., 1990, 64:525 耀 Ullah AH, D. M. Gibson. Extracellular phytase from Aspergillum ficuum NR RL3135:purificiation and characterization[j]. Prepara 原 tive Biochemistry, 1987, 17:63 耀 Tang J, A. Leung, C. Leung, et al. Hydrolysis of precipitated phy 原 tate by three distinct families of phytases [J]. Soil Biology &Bio 原 chemistry, 2006, 38 :1 316 耀 Zhu XS, P. A. Seib, G. L. Allee, et al. Prepatation of alow-phtate feed mixture and bioavailability of its phosphorus to chicks[j]. An 原 imal Feed Science and Technology, 1990, 27:341 耀 Zyla K, D.R Ledoux, A. Garcia, et al.an in vitro procedure for studying enzymic dephosphorylation of phytate in maize-soyabean feeds for turkey poults[j]. British J.Nutri.,1995a, 74:3 耀 Zyla K, Ledoux DR, Veum TL. Complete enzymic dephosphoryla 原 tion of corn-soybean meal feed under simulated intestinal condi 原 tions of the turkey[j]. J. Agric. Food Chem., 1995b, 43:288 耀 294 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

34 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 试 验 研 究 桔 梗 水 提 取 物 的 急 性 和 蓄 积 毒 性 试 验 桔 梗 含 桔 梗 皂 苷 尧 桔 梗 酸 尧 桔 梗 糖 尧 菊 糖 等, 中 医 临 床 上 主 要 用 于 寒 热 虚 实 引 起 的 咳 嗽 尧 痰 喘 遥 近 年 来, 作 为 药 食 同 源 的 传 统 中 药 袁 也 用 于 免 疫 调 节 尧 抗 炎 尧 抗 溃 疡 尧 抗 肿 瘤 尧 降 血 压 尧 降 血 脂 尧 扩 张 血 管 尧 镇 痛 尧 镇 静 尧 解 热 尧 降 血 糖 尧 抗 过 敏 等 遥 药 理 试 验 表 明, 桔 梗 有 较 多 的 生 理 活 性, 具 有 较 大 的 研 发 价 值 遥 因 此, 为 了 研 究 桔 梗 水 提 取 物 作 为 饲 料 添 加 剂 并 长 期 应 用 于 畜 禽 产 业 中 是 否 会 引 起 毒 害 反 应, 特 就 桔 梗 水 提 取 物 进 行 本 项 毒 理 试 验, 以 便 了 解 桔 梗 水 提 取 物 的 安 全 性 以 及 对 家 畜 的 限 量 标 准, 为 合 理 的 利 用 该 添 加 剂 提 供 参 考 依 据 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 材 料 试 验 动 物 院 昆 明 种 小 白 鼠 由 延 边 大 学 医 学 院 实 验 动 物 科 提 供 遥 受 试 物 : 桔 梗 水 提 取 物 由 延 边 大 学 农 学 院 动 物 营 养 实 验 室 提 供 遥 桔 梗 系 3 年 生 袁 清 洗 干 净 后 袁 切 片 尧 低 温 烘 干 遥 1.2 试 验 动 物 的 饲 养 标 准 饲 料 为 全 价 饲 料, 试 验 组 的 饲 料 成 分 是 在 标 准 日 粮 的 基 础 上 添 加 不 同 比 例 的 桔 梗 水 提 取 物 遥 饲 养 温 度 22 耀 25 益, 湿 度 40% 耀 60%, 自 然 采 光 遥 基 础 饲 料 成 分 见 表 1 遥 1.3 试 验 方 法 桔 梗 提 取 物 水 提 取 方 法 将 桔 梗 用 清 水 洗 净, 剪 碎, 放 入 蒸 馏 水 中 浸 泡 20 h 后 袁 将 桔 梗 捞 出 放 入 烧 杯 中 渊 水 没 过 桔 梗 2cm 冤 袁 再 将 烧 杯 放 在 电 炉 子 上 进 行 加 热 袁 加 热 时 水 温 应 保 持 在 60~80 益 袁 如 此 反 复 3 次 袁 将 每 次 的 剩 余 溶 液 滤 出 袁 滤 出 的 液 体 再 进 行 水 浴 蒸 干 袁 剩 下 的 粘 稠 溶 液 取 出 后 称 重 袁 然 后 放 入 冰 箱 保 存 备 用 遥 急 性 毒 性 试 验 渊 LD 50 的 测 定 冤 取 18 耀 20 g 小 白 鼠 60 只 袁 共 设 6 组 袁 1 个 对 照 组 袁 5 个 试 验 组 遥 每 组 10 只 袁 雌 雄 各 半 袁 一 周 内 每 只 试 验 金 锡 九, 延 边 大 学 农 学 院 动 物 科 学 系,133400, 吉 林 省 龙 井 市 龙 门 街 张 敏 聂 兵, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 金 锡 九 张 敏 聂 兵 34 组 小 鼠 按 每 千 克 体 重 尧 尧 尧 尧 mg 灌 服 桔 梗 水 提 取 物 袁 对 照 组 灌 服 蒸 馏 水 遥 小 鼠 禁 食 8h( 不 禁 水 ) 后 进 行 灌 服 袁 给 药 后 3 耀 4h 复 食 袁 给 药 停 止 后 连 续 观 察 7d 袁 并 观 察 小 鼠 精 神 尧 食 欲 尧 饮 水 尧 活 动 情 况 袁 并 记 录 小 白 鼠 的 中 毒 情 况 尧 死 亡 时 间 和 死 亡 数 量 遥 表 1 成 分 玉 米 豆 粕 芝 麻 粕 面 粉 大 米 高 粱 麦 麸 草 粉 鱼 粉 花 生 奶 粉 鸡 蛋 骨 粉 食 盐 矿 物 质 维 生 素 蓄 积 毒 性 试 验 小 白 鼠 基 础 饲 料 配 方 含 量 渊 % 冤 取 18 耀 20 g 小 白 鼠 50 只 袁 共 设 5 组 袁 1 个 对 照 组 袁 4 个 试 验 组 遥 每 组 10 只 袁 雌 雄 各 半 袁 每 天 每 只 试 验 组 小 鼠 按 每 千 克 体 重 200 尧 400 尧 800 尧 1600 mg 服 用 桔 梗 水 提 取 物 袁 提 取 物 添 加 到 饲 料 中 饲 喂 袁 对 照 组 饲 喂 正 常 的 无 桔 梗 水 提 取 物 的 饲 料 袁 连 续 饲 喂 20 d 袁 在 给 药 期 间 观 察 小 白 鼠 的 精 神 尧 食 欲 尧 饮 水 及 死 亡 情 况 和 有 无 异 常 反 应 袁 给 药 停 止 后 观 察 7d 内 小 白 鼠 的 死 亡 情 况 尧 体 重 变 化 和 有 无 异 常 反 应 遥 同 时 测 量 如 下 指 标 院 淤 一 般 性 指 标 院 记 录 小 白 鼠 采 食 量 袁 每 周 称 量 小 鼠 体 重 遥 计 算 整 个 试 验 期 各 组 平 均 体 增 重 尧 小 鼠 平 均 耗 料 量 遥 数 曰 平 均 体 增 重 = 渊 试 验 末 重 - 试 验 始 重 冤 / 试 验 小 白 鼠 平 均 耗 料 量 越 渊 试 验 初 的 饲 料 量 - 试 验 末 的 剩 料 量 冤 / 试 验 小 白 鼠 数 遥 于 脏 器 系 数 院 取 心 尧 肝 尧 脾 尧 肺 尧 肾 称 重 袁 计 算 脏 器 与 体 重 的 比 值 遥 1.4 数 据 统 计

35 试 验 研 究 金 锡 九 等 : 桔 梗 水 提 取 物 的 急 性 和 蓄 积 毒 性 试 验 用 SPSS 11.5 进 行 单 因 素 方 差 分 析 袁 采 用 多 个 试 验 组 和 1 个 对 照 组 间 的 两 两 比 较 方 法 统 计 遥 试 验 结 果 用 平 均 值 依 标 准 差 表 示 遥 2 结 果 与 分 析 2 援 1 急 性 毒 性 试 验 小 白 鼠 按 每 千 克 体 重 尧 尧 尧 尧 mg 剂 量 的 桔 梗 水 提 取 物 灌 胃 给 药,7 d 后 观 察 各 剂 量 组 小 白 鼠 的 精 神 尧 食 欲 尧 饮 水 等 情 况 和 对 照 组 比 较 均 无 异 常 袁 未 出 现 死 亡 及 其 它 异 常 行 为 袁 按 照 毒 理 学 评 价 标 准 袁 当 LD 50 > mg 时 属 于 实 际 无 毒 性 物 质 袁 可 不 必 测 定 半 致 死 量 渊 LD 50 冤 遥 本 试 验 结 果 LD 50 > mg 表 明 袁 桔 梗 水 提 取 物 作 为 中 草 药 添 加 剂 属 于 实 际 无 毒 类 物 质 遥 2.2 蓄 积 性 毒 性 试 验 桔 梗 水 提 取 物 按 每 千 克 体 重 200 尧 400 尧 800 尧 1600mg 的 剂 量 添 加 到 饲 料 中 饲 喂 小 白 鼠, 在 给 药 期 间 及 停 药 7d 观 察 期 内, 各 试 验 组 小 白 鼠 未 出 现 死 亡 情 况, 精 神 尧 饮 食 和 饮 水 无 异 常, 同 时 也 未 出 现 其 它 异 常 行 为, 结 果 表 明, 桔 梗 水 提 取 物 无 蓄 积 毒 性 作 用 遥 一 般 性 指 标 测 定 平 均 体 增 重 尧 平 均 耗 料 情 况 见 表 2 遥 由 表 2 可 知 袁 经 20 d 给 药 饲 喂 试 验 袁 各 试 验 组 小 白 鼠 的 平 均 体 增 重 及 平 均 耗 料 量 与 对 照 组 相 比 差 异 均 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 项 目 1 组 2 组 3 组 4 组 5 组 剂 量 渊 mg/kg 冤 表 2 不 同 剂 量 的 桔 梗 水 提 取 物 对 小 白 鼠 生 长 的 影 响 ( 平 均 值 依 标 准 差 ) 只 数 平 均 始 重 渊 g/ 只 冤 依 依 依 依 依 1.81 平 均 末 重 渊 g/ 只 冤 依 依 依 依 依 2.18 平 均 体 增 重 渊 g/ 只 冤 依 依 依 依 依 0.37 平 均 耗 料 量 渊 g/ 只 冤 依 依 依 依 依 脏 器 系 数 的 测 定 将 桔 梗 水 提 取 物 按 每 千 克 体 重 200 尧 400 尧 800 尧 mg 剂 量 添 加 到 饲 料 中, 连 续 饲 喂 小 白 鼠 20 d 后, 扑 杀 受 试 鼠, 取 主 要 脏 器 称 重, 测 定 脏 器 系 数, 结 果 见 表 3 遥 由 表 3 可 知 袁 给 予 受 试 小 白 鼠 桔 梗 水 提 取 物 20 d 后 袁 各 试 验 组 与 对 照 组 之 间 脏 器 系 数 差 异 不 显 著 (P> 0.05) 袁 各 试 验 组 间 差 异 也 不 显 著 (P>0.05) 遥 表 3 桔 梗 提 取 物 对 小 鼠 脏 体 比 的 影 响 ( 豫 ) 项 目 1 组 2 组 3 组 4 组 5 组 剂 量 (mg/kg) 心 脏 / 体 重 0.44 依 依 依 依 依 0.04 肝 脏 / 体 重 4.24 依 依 依 依 依 0.28 脾 脏 / 体 重 0.36 依 依 依 依 依 0.10 肺 脏 / 体 重 0.54 依 依 依 依 依 0.06 肾 脏 / 体 重 1.12 依 依 依 依 依 结 论 3.1 急 性 毒 性 试 验 当 LD 50 > mg/kg 时 小 白 鼠 仍 未 出 现 死 亡 及 其 它 异 常 行 为 袁 表 明 桔 梗 水 提 取 物 属 于 实 际 无 毒 类 物 质 遥 3.2 蓄 积 试 验 20 d 给 药 后 袁 各 试 验 组 和 对 照 组 的 小 白 鼠 均 无 异 常 表 现 和 死 亡 袁 同 时 试 验 组 小 白 鼠 平 均 体 增 重 尧 平 均 耗 料 量 及 脏 器 系 数 的 测 定 与 对 照 组 相 比 均 无 明 显 差 异 袁 表 明 桔 梗 水 提 取 物 无 蓄 积 作 用 遥 综 上 所 述 袁 桔 梗 水 提 取 物 属 于 无 毒 性 物 质 袁 可 以 取 代 抗 生 素 袁 作 为 饲 料 添 加 剂 应 用 于 畜 牧 业 生 产 中 袁 35 有 着 广 泛 的 应 用 前 景 遥 参 考 文 献 1 巩 丽 丽, 石 俊 英. 桔 梗 近 年 来 的 研 究 进 展 [J]. 时 珍 国 医 国 药,2006, 17(3): 封 3 耀 封 4 2 付 文 卫, 窦 德 强, 裴 月 湖. 桔 梗 的 化 学 成 分 和 生 物 活 性 研 究 进 展 [J]. 沈 阳 药 科 大 学 学 报,2006, 23(3):184 耀 余 椿 生. 桔 梗 [J]. 食 品 与 药 品,2006(5):75 4 庞 立 杰, 王 彦, 许 永 华, 等. 桔 梗 的 药 用 价 值 及 其 栽 培 [J]. 人 参 研 究, 2003(4):38 5 宋 杨, 齐 云. 桔 梗 的 药 理 研 究 进 展 [J]. 中 国 药 房,2006,17(2):140 6 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部. 新 兽 药 一 般 毒 性 试 验 技 术 要 求 [S] 袁 伯 佼, 治 乔. 药 临 床 前 安 全 性 评 价 与 实 践 [M]. 医 学 科 学 出 版 社, ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

36 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 饲 养 试 验 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 临 武 鸭 生 产 性 能 的 影 响 陈 清 华 程 天 德 周 海 摘 要 试 验 拟 研 究 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 鸭 生 产 性 能 的 影 响, 选 用 21 日 龄 临 武 鸭 555 只, 随 机 分 成 5 个 组, 每 组 111 只, 分 别 喂 养 于 3 个 重 复 栏, 每 个 重 复 栏 37 只 在 保 持 含 有 相 同 的 粗 蛋 白 含 量 的 前 提 下,5 种 日 粮 代 谢 能 (ME) 分 别 为 MJ/kg( 每 吨 饲 料 添 加 0.10 kg 复 合 酶 制 剂 ) 和 9.97 MJ/kg( 每 吨 饲 料 添 加 0.15 kg 复 合 酶 制 剂 ) 试 验 结 果 表 明, 通 过 建 立 日 粮 ME 水 平 与 鸭 采 食 量 之 间 的 线 性 回 归 函 数 = (R 2 = ), 可 以 推 算 出, 当 ME 值 每 下 降 0.1 MJ/kg 时, 鸭 平 均 日 采 食 量 上 升 0.95 g; 在 低 日 粮 ME 水 平 条 件 下, 随 着 酶 制 剂 添 加 量 的 增 加, 平 均 个 体 总 增 重 有 增 加 的 趋 势, 但 试 验 郁 吁 两 组 之 间 没 有 显 著 的 差 异 (P>0.05) 不 加 酶 制 剂 组 与 加 酶 制 剂 组 比 较, 相 同 的 ME 值 水 平 下, 加 入 酶 制 剂 的 试 验 郁 吁 组 与 不 加 酶 试 验 芋 组 的 体 增 重 相 比 较 有 所 上 升, 并 达 到 高 ME 组 的 平 均 个 体 总 增 重 水 平, 通 过 建 立 日 粮 ME 与 FCR 之 间 的 相 关 线 性 关 系, 得 到 本 试 验 用 的 复 合 酶 制 剂 潜 在 的 表 观 ME 为 4.73 MJ/kg 以 上 ; 经 济 效 益 分 析 结 果 表 明, 试 验 郁 吁 组 与 试 验 玉 组 相 比, 养 鸭 毛 利 分 别 提 高 0.32 和 1.08 个 百 分 点, 与 相 同 能 量 水 平 的 试 验 芋 组 比 较, 添 加 酶 制 剂 的 试 验 组 的 毛 利 分 别 提 高 了 5.37 和 6.13 个 百 分 点 关 键 词 临 武 鸭 ; 酶 制 剂 ; 表 观 代 谢 能 中 图 分 类 号 S834 酶 制 剂 能 有 效 分 解 饲 料 中 的 纤 维 素 尧 半 纤 维 素 等 1 材 料 与 方 法 抗 营 养 成 分, 显 著 提 高 和 改 善 营 养 物 质 的 消 化 吸 收, [1] 提 高 动 物 免 疫 机 能, 进 而 提 高 动 物 的 生 产 性 能 遥 目 前 1.1 试 验 动 物 及 日 粮 组 成 本 试 验 选 取 555 只 21 日 龄 临 武 鸭 渊 临 武 鸭 产 于 酶 制 剂 在 鸭 日 粮 中 应 用 越 来 越 广 泛, 但 研 究 多 局 限 在 生 产 性 能 方 面, 而 对 量 化 酶 制 剂 提 高 能 量 利 用 率 方 面 研 究 较 少 遥 Dean(1992) 提 出 为 酶 制 剂 赋 予 一 定 的 表 观 代 谢 能 (ME) 值, 以 便 把 酶 制 剂 作 为 一 种 饲 料 原 料 进 入 [2] 电 脑 最 低 成 本 配 方 筛 选 使 用 遥 后 来 一 些 报 道 表 明, 可 通 过 家 禽 代 谢 试 验 测 定 日 粮 加 酶 前 后 的 ME 差 值 作 [3-5] 为 外 源 酶 制 剂 的 表 观 ME 值, 外 源 酶 制 剂 的 表 观 ME [6] 值 评 价 已 成 为 评 价 其 质 量 优 劣 及 正 确 使 用 的 前 提 遥 本 试 验 采 取 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 选 用 含 木 聚 糖 酶 尧 茁 - 葡 聚 糖 酶 尧 甘 露 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 尧 果 胶 酶 和 蛋 白 酶 等 复 合 酶 制 剂 进 行 研 究, 探 讨 不 同 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 21 耀 35 日 龄 阶 段 临 武 鸭 生 产 性 能 的 影 响, 为 临 湖 南 省 临 武 县, 属 肉 蛋 兼 用 型 鸭 种 冤 袁 随 机 分 成 5 个 组, 每 组 111 只 鸭, 分 别 喂 养 于 3 个 重 复 栏 袁 每 个 重 复 栏 37 只 遥 5 个 试 验 组 分 别 饲 喂 5 种 不 同 的 日 粮 渊 试 验 中 无 鸭 只 死 亡 冤 袁 5 种 日 粮 在 保 持 日 粮 蛋 白 质 和 可 消 化 氨 基 酸 水 平 不 变 的 条 件 下 袁 ME 水 平 分 别 为 尧 尧 9.97 尧 9.97 尧 9.97 MJ/kg( 试 验 玉 耀 吁 组 ), 试 验 郁 组 和 试 验 吁 组 在 每 吨 饲 料 中 分 别 添 加 0.1 kg 和 0.15 kg 鸭 用 复 合 酶 制 剂 ( 由 夏 盛 实 业 集 团 有 限 公 司 生 产 ), 复 合 酶 制 剂 的 成 分 为 院 淀 粉 酶 120 U/g 尧 蛋 白 酶 2000 U/g 尧 木 聚 糖 酶 50 万 U/g 尧 茁 - 葡 聚 糖 酶 60 万 U/g 尧 甘 露 聚 糖 酶 5000 U/g 尧 纤 维 素 酶 1 万 U/g 和 果 胶 酶 8000 U/g 遥 试 验 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 武 鸭 生 产 中 正 确 设 定 能 量 水 平 和 科 学 使 用 鸭 专 用 复 合 酶 制 剂 提 供 参 考 依 据 袁 以 便 获 取 更 高 的 经 济 效 益 遥 1.2 饲 养 管 理 做 好 鸭 舍 及 其 用 具 的 消 毒 工 作 袁 按 规 定 的 免 疫 程 序 进 行 预 防 接 种 遥 试 验 14 d 袁 网 上 平 养 袁 饲 养 密 度 为 6 耀 8 只 /m 2 遥 自 由 采 食 和 饮 水, 饲 养 管 理 按 常 规 进 行 遥 陈 清 华, 湖 南 农 业 大 学 动 物 科 学 技 术 学 院, 博 士,410128, 长 沙 市 芙 蓉 区 1.3 试 验 测 定 的 指 标 分 别 于 21 尧 28 日 龄 和 35 日 龄 早 晨 8 院 00, 按 重 复 组 程 天 德, 夏 盛 实 业 集 团 有 限 公 司 周 海, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 为 单 位 统 计 总 采 食 量 并 称 空 腹 体 重, 计 算 各 阶 段 的 平 均 日 增 重 (ADG) 尧 平 均 日 采 食 量 (ADFI) 和 料 肉 比 (F/G), 并 按 照 目 前 市 场 价 格 进 行 效 益 分 析 遥 料 重 比 = 平 均 日 36

37 饲 养 试 验 陈 清 华 等 : 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 临 武 鸭 生 产 性 能 的 影 响 项 目 日 粮 组 成 (%) 玉 米 次 粉 豆 粕 米 糠 菜 粕 统 糠 棉 籽 粕 石 粉 磷 酸 氢 钙 预 混 料 * 鸭 专 用 酶 营 养 水 平 代 谢 能 (MJ/kg) 粗 蛋 白 质 (%) 粗 脂 肪 (%) 粗 纤 维 (%) 钙 (%) 有 效 磷 (%) 可 消 化 赖 氨 酸 (%) 可 消 化 蛋 氨 酸 + 胱 氨 酸 (%) 可 消 化 苏 氨 酸 (%) 可 消 化 色 氨 酸 (%) 表 1 试 验 玉 组 试 验 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 试 验 域 组 试 验 芋 组 试 验 郁 组 试 验 吁 组 注 院 * 预 混 料 含 食 盐 0.4% 袁 为 每 千 克 饲 料 提 供 铜 8mg 尧 铁 80 mg 尧 锰 0.3 mg 尧 锌 150 mg 尧 维 生 素 A9600 IU 尧 维 生 素 D IU 尧 维 生 素 E16 mg 尧 维 生 素 K mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B mg 尧 烟 酸 40 mg 尧 泛 酸 钙 8.8 mg 尧 叶 酸 1.6 mg 尧 生 物 素 0.08 mg 遥 采 食 量 (g)/ 平 均 日 增 重 (g) 曰 增 重 成 本 = 单 位 饲 料 成 本 伊 料 重 比 伊 总 增 重 遥 1.4 结 果 统 计 分 析 用 SPSS 11.0 软 件 进 行 单 因 素 方 差 分 析 尧 多 重 比 较 渊 LSD 冤 及 回 归 分 析, 结 果 用 平 均 数 依 标 准 差 表 示 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 不 同 ME 水 平 与 酶 制 剂 对 肉 鸭 平 均 个 体 总 增 重 的 影 响 渊 见 表 2 冤 项 目 21 日 龄 体 重 28 日 龄 体 重 35 日 龄 体 重 21 耀 27 日 龄 阶 段 增 重 28 耀 35 日 龄 阶 段 增 重 21 耀 35 日 龄 阶 段 增 重 表 2 试 验 玉 组 依 a 依 8.69 a 依 a 依 14.3 a 依 a 依 a 各 试 验 组 平 均 个 体 总 增 重 结 果 (g) 试 验 域 组 依 a 依 a 依 6.24 ab 依 2.70 a 依 0.81 a 依 9.74 ab 试 验 芋 组 依 9.34 a 依 a 依 b 依 a 依 5.26 a 依 b 试 验 郁 组 依 a 依 a 依 a 依 a 依 a 依 ab 试 验 吁 组 依 a 依 a 依 8.83 a 依 a 依 a 依 ab 注 院 同 行 数 据 肩 标 小 写 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤, 大 写 字 母 不 同 表 示 差 异 极 显 著 (P<0.01), 相 同 字 母 表 示 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 下 表 同 遥 表 2 结 果 表 明 袁 在 21 耀 35 日 龄 各 阶 段 和 整 个 试 验 过 程 中 袁 肉 鸭 平 均 个 体 总 增 重 随 着 日 粮 ME 水 平 的 降 低 而 降 低 袁 在 21 耀 27 日 龄 阶 段 以 及 28 耀 35 日 龄 阶 段 各 试 验 组 平 均 个 体 总 增 重 无 显 著 性 差 异 (P>0.05) 袁 但 在 21 耀 35 日 龄 阶 段, 试 验 芋 组 的 平 均 个 体 总 增 重 显 著 低 于 试 验 玉 组 (P<0.05), 与 试 验 域 尧 郁 尧 吁 组 相 比 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 在 低 日 粮 ME 水 平 条 件 下 袁 随 着 酶 制 剂 添 加 量 的 增 加 袁 平 均 个 体 总 增 重 有 增 加 的 趋 势 袁 但 试 验 郁 尧 吁 组 之 间 没 有 显 著 的 差 异 (P>0.05) 遥 试 验 结 果 显 示 袁 本 试 验 条 件 下 袁 在 低 ME 水 平 中 添 加 不 同 水 平 酶 37 制 剂 有 改 善 鸭 增 重 的 效 果 袁 并 达 到 高 ME 组 的 平 均 个 体 总 增 重 水 平 遥 2.2 不 同 ME 水 平 与 酶 制 剂 对 鸭 采 食 量 和 料 肉 比 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 结 果 表 明 袁 在 21 耀 27 日 龄 阶 段 期 间, 不 加 酶 制 剂 的 试 验 玉 尧 域 尧 芋 组 随 着 日 粮 能 量 水 平 的 降 低, 鸭 的 采 食 量 逐 渐 增 加, 且 试 验 玉 尧 域 尧 芋 组 之 间 差 异 极 显 著 (P< 0.01) 曰 加 酶 制 剂 的 试 验 郁 和 吁 组 之 间 有 降 低 的 趋 势, 且 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 在 28 耀 35 日 龄 期 间 袁 试 验 芋 尧 郁 尧 吁 组 之 间 的 总 采 食 量 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 袁 但 试 验 玉 尧 域

38 陈 清 华 等 : 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 临 武 鸭 生 产 性 能 的 影 响 饲 养 试 验 组 与 其 它 3 组 相 比 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 曰 在 整 个 试 验 渊 21 耀 35 日 龄 冤 过 程 中, 随 着 ME 的 降 低, 鸭 的 采 食 量 逐 渐 增 加 袁 其 中 袁 试 验 玉 尧 域 尧 芋 组 平 均 个 体 总 采 食 量 之 间 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 袁 试 验 郁 组 尧 吁 组 与 域 组 的 采 食 量 之 间 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 袁 但 与 试 验 玉 组 尧 芋 组 差 异 极 显 著 (P<0.01) 曰 试 验 郁 尧 吁 组 之 间 采 食 量 差 异 显 著 (P<0.05) 遥 表 3 各 试 验 组 平 均 采 食 量 与 料 肉 比 项 目 采 食 量 (g) 21 耀 27 日 龄 阶 段 28 耀 35 日 龄 阶 段 21 耀 35 日 龄 阶 段 料 肉 比 21 耀 27 日 龄 阶 段 28 耀 35 日 龄 阶 段 21 耀 35 日 龄 阶 段 试 验 玉 组 依 Cd 依 Cc 依 Cd 试 验 域 组 依 Bbc 依 Bb 依 Bbc 试 验 芋 组 依 Aa 依 Aa 依 Aa 试 验 郁 组 依 Bb 依 Aa 依 9.74 Bb 试 验 吁 组 依 Bc 依 Aa 依 9.78 Bc 耀 27 日 龄 和 28 耀 35 日 龄 两 个 生 长 阶 段 中 不 添 加 酶 制 剂 试 验 组 的 料 肉 比 随 着 ME 水 平 的 降 低 而 增 大, 添 加 不 同 水 平 酶 制 剂 后 袁 料 肉 比 有 明 显 的 改 善 袁 但 两 个 添 加 酶 制 剂 组 之 间 差 异 不 显 著 遥 整 个 试 验 期 的 料 肉 比 结 果 显 示, 酶 制 剂 能 改 善 料 肉 比, 与 试 验 芋 组 相 比, 添 加 酶 制 剂 的 郁 尧 吁 组 料 肉 比 分 别 降 低 了 6.50% 和 7.43% 遥 2.3 经 济 效 益 分 析 按 照 目 前 饲 料 原 料 市 场 价 格 和 肉 鸭 的 销 售 价 格 进 行 计 算 每 组 效 益 袁 酶 按 60 元 /kg 计 算 遥 经 济 效 益 分 析 见 表 4 遥 表 4 经 济 效 益 分 析 项 目 活 重 单 价 渊 元 /kg 冤 增 重 渊 kg/ 只 冤 收 入 渊 元 / 只 冤 饲 料 单 价 渊 元 /kg 冤 平 均 毛 利 渊 元 / 只 冤 比 较 渊 % 冤 试 验 玉 组 6 援 试 验 域 组 6 援 试 验 芋 组 6 援 试 验 郁 组 6 援 试 验 吁 组 6 援 表 4 结 果 表 明 袁 在 平 均 毛 利 比 较 中 袁 没 有 添 加 酶 制 剂 的 试 验 组 随 着 ME 水 平 的 降 低 袁 饲 料 单 价 下 降 袁 养 鸭 的 平 均 毛 利 也 下 降 遥 在 添 加 了 酶 制 剂 的 试 验 郁 尧 吁 组 中 袁 随 着 酶 制 剂 添 加 量 的 增 加 袁 尽 管 饲 料 单 价 有 增 加 袁 但 给 养 鸭 带 来 的 毛 利 有 增 加 的 趋 势 袁 与 试 验 玉 组 相 比 袁 分 别 提 高 0.32 和 1.08 个 百 分 点 曰 与 相 同 能 量 水 平 的 试 验 芋 组 比 较, 添 加 酶 制 剂 的 试 验 组 的 毛 利 分 别 提 高 了 5.37 和 6.13 个 百 分 点 遥 由 此 可 见 袁 在 低 ME 水 平 的 饲 粮 中 添 加 酶 制 剂 后 能 带 来 较 好 的 经 济 效 益 遥 种 独 立 的 饲 料 原 料 进 入 计 算 机 最 低 成 本 配 方 筛 选 遥 杨 [5] 加 豹 等 研 究 报 道, 在 保 持 日 粮 蛋 白 质 和 可 消 化 氨 基 酸 水 平 不 变 的 条 件 下, 日 粮 ME 在 耀 MJ/kg 范 围 内 递 减 袁 并 不 显 著 影 响 肉 鸭 增 重 袁 但 引 起 采 食 量 和 料 肉 比 线 性 上 升 袁 日 粮 代 谢 能 每 下 降 MJ/kg 袁 肉 鸭 采 食 量 和 料 肉 比 分 别 上 升 3.16% 尧 4.88% 遥 本 试 验 结 果 表 明 袁 随 着 日 粮 ME 的 下 降 袁 鸭 的 采 食 量 逐 渐 增 加 遥 经 线 性 回 归 分 析 表 明 袁 ME 在 耀 9.97 MJ/kg 范 围 内 日 粮 能 量 水 平 与 鸭 采 食 量 为 线 性 负 相 关 袁 3 讨 论 = 渊 R 2 = 冤, 其 中 为 日 粮 能 量 含 3.1 不 同 ME 水 平 与 酶 制 剂 对 鸭 采 食 量 和 生 产 性 能 量, 为 21 耀 35 日 龄 阶 段 总 的 采 食 量 遥 结 果 显 示, 日 粮 的 影 响 日 粮 能 量 水 平 是 决 定 动 物 生 产 性 能 和 饲 料 成 本 的 最 重 要 营 养 指 标, 有 研 究 表 明, 日 粮 能 量 水 平 决 定 鸭 [7] 的 采 食 量 遥 据 报 道, 在 低 能 量 水 平 的 饲 粮 中 添 加 酶 制 剂 后, 家 禽 的 采 食 量 会 降 低, 因 此 许 多 研 究 者 建 议 在 家 禽 日 粮 中 赋 予 外 源 酶 表 观 ME [8], 这 样 可 以 把 酶 作 为 一 ME 每 下 降 1MJ/kg, 鸭 21 耀 35 日 龄 总 采 食 量 上 升 g, 平 均 日 采 食 量 增 加 0.95 g 遥 在 本 试 验 条 件 下 袁 鸭 的 平 均 个 体 总 增 重 随 日 粮 ME 水 平 的 降 低 而 降 低, 尽 管 添 加 酶 制 剂 后 的 试 验 郁 尧 吁 组 的 总 增 重 与 其 它 试 验 组 没 有 显 著 差 异 袁 但 是 相 对 于 低 ME 试 验 芋 组 来 说 袁 试 验 郁 尧 吁 组 的 平 均 个 体 总 38

39 饲 养 试 验 陈 清 华 等 : 不 同 日 粮 能 量 水 平 和 酶 制 剂 对 临 武 鸭 生 产 性 能 的 影 响 增 重 明 显 上 升 遥 结 果 显 示 袁 在 低 ME 水 平 中 添 加 不 同 水 平 酶 制 剂 有 改 善 鸭 增 重 的 效 果 袁 并 达 到 高 ME 组 的 平 均 个 体 总 增 重 水 平 遥 与 试 验 芋 组 相 比 袁 试 验 郁 尧 吁 组 [9] 料 肉 比 分 别 降 低 了 6.50% 和 7.43% 袁 这 与 何 健 等 尧 吕 [10] 敏 芝 等 报 道 的 酶 制 剂 能 提 高 鸭 的 生 长 速 度 和 饲 料 转 化 率 结 果 相 一 致 遥 3.2 复 合 酶 制 剂 在 鸭 日 粮 中 应 用 研 究 酶 制 剂 作 为 一 种 新 型 的 饲 料 添 加 剂 在 畜 禽 生 产 中 的 应 用 愈 来 愈 受 到 生 产 者 的 关 注 袁 其 作 用 不 仅 在 于 提 高 和 发 挥 畜 禽 生 产 潜 力 袁 更 重 要 的 作 用 可 降 低 成 本 袁 为 充 分 利 用 众 多 的 饲 料 资 源 进 行 饲 粮 配 合 提 供 可 能 和 保 证 遥 越 来 越 多 的 研 究 表 明 袁 使 用 酶 制 剂 能 够 显 [11-14] 著 提 高 鸭 的 生 产 性 能 和 降 低 饲 料 成 本 遥 本 试 验 选 用 含 淀 粉 酶 尧 蛋 白 酶 尧 木 聚 糖 酶 尧 茁 - 葡 聚 糖 酶 尧 甘 露 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 和 果 胶 酶 的 鸭 用 复 合 酶 袁 能 有 效 地 降 解 日 粮 中 次 粉 尧 米 糠 尧 统 糠 尧 菜 粕 尧 棉 粕 中 的 抗 营 养 因 子 渊 如 果 胶 质 尧 纤 维 素 尧 半 纤 维 素 冤 袁 降 低 食 糜 粘 度 袁 改 善 营 养 物 质 的 消 化 率 和 吸 收 率 袁 进 而 改 善 日 粮 的 代 谢 能 值 袁 提 高 日 增 重 和 饲 料 利 用 率 遥 [5] 杨 加 豹 等 研 究 报 道 袁 在 肉 鸭 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 能 明 显 改 善 肉 鸭 的 生 长 性 能 和 饲 料 转 化 率 袁 并 通 过 日 粮 ME 和 料 肉 比 函 数 关 系 的 标 准 曲 线 推 算 出 肉 鸭 用 商 品 复 合 酶 制 剂 的 表 观 ME 值 为 MJ/kg 酶 遥 本 试 验 若 以 日 粮 ME 和 料 肉 比 建 立 相 关 函 数 关 系 的 标 准 曲 线 袁 得 到 院 = (R 2 = ), 其 中 为 料 肉 比, 为 ME 值, 试 验 郁 尧 吁 组 料 肉 比 分 别 为 3.02 和 2.99 遥 这 样 会 得 到 试 验 郁 尧 吁 组 表 观 ME 值 分 别 为 院 MJ/kg 和 MJ/kg, 分 别 比 其 配 方 计 算 值 大 0.62 MJ/kg 和 0.71 MJ/kg, 由 此 可 推 算 袁 本 试 验 所 使 用 的 酶 制 剂 在 肉 鸭 日 粮 中 潜 在 的 表 观 ME 在 4.73 MJ/kg 以 上 遥 本 试 验 结 果 表 明 袁 临 武 鸭 日 粮 中 添 加 0.01 豫 尧 豫 的 复 合 酶 制 剂 袁 可 以 提 高 鸭 的 生 长 速 度 尧 饲 料 利 用 率 和 经 济 效 益 遥 由 试 验 可 得 袁 营 养 水 平 越 低 袁 加 酶 的 经 济 效 益 越 明 显 袁 加 酶 制 剂 组 比 对 照 组 经 济 效 益 提 高 5.37 个 百 分 点 以 上 遥 酶 的 价 格 及 其 使 用 酶 制 剂 带 来 的 经 济 效 益 是 用 户 最 关 心 的 问 题 袁 本 试 验 的 结 果 表 明 袁 在 鸭 ME 低 水 平 渊 9.97 MJ/kg 冤 基 础 上 添 加 复 合 酶 制 剂 的 经 济 效 益 是 显 著 的 袁 但 是 在 某 一 低 能 量 水 平 日 粮 中 添 加 多 少 酶 制 剂 才 能 达 到 理 想 效 果 还 有 待 于 进 一 步 研 究 遥 39 4 结 论 4 援 1 本 试 验 中, 日 粮 ME 在 耀 9.97 MJ/kg 范 围 内 递 减, 鸭 采 食 量 上 升 遥 日 粮 每 下 降 1MJ/kg 袁 鸭 在 21 耀 35 日 龄 阶 段 总 采 食 量 上 升 g 袁 即 平 均 日 采 食 量 增 加 0.95 g 遥 4 援 2 在 保 持 蛋 白 质 含 量 不 变 的 低 ME 水 平 日 粮 中 添 加 一 定 量 的 酶 制 剂 能 提 高 经 济 效 益, 本 试 验 条 件 下, 经 济 效 益 提 高 了 5.37 个 百 分 点 以 上 遥 4 援 3 在 低 能 量 的 水 平 的 饲 料 日 粮 中 添 加 酶 制 剂 能 提 高 日 粮 的 ME 值 袁 本 试 验 条 件 下 袁 酶 制 剂 在 临 武 鸭 日 粮 中 潜 在 的 表 观 ME 在 4.73 MJ/kg 以 上 遥 参 考 文 献 1 文 杰 援 小 麦 日 粮 粘 滞 性 及 小 麦 粘 度 的 研 究 [J] 援 动 物 营 养 学 报, 1999,11(4):44 耀 50 2 Dean WF. An Update On Applied Dunk Nutrition [J]. presented On Behalf Of the American Soybean Association in China, 2003(4): 11 耀 27 3 刘 永 刚. 通 用 酶 在 畜 禽 生 产 中 的 应 用 效 果 [J] 援 饲 料 广 角,2004(4): 13 耀 14 4 倪 志 勇. 不 同 营 养 水 平 饲 粮 中 添 加 饲 用 复 合 酶 对 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 [J] 援 饲 料 工 业,2001(12):38 耀 39 5 杨 加 豹, 张 亚 平, 李 定 发, 等. 日 粮 能 量 水 平 对 肉 鸭 生 产 性 能 影 响 及 标 准 曲 线 法 测 定 饲 用 酶 制 剂 的 表 观 代 谢 能 值 [J]. 中 国 饲 料, 2004(19):12 耀 14 6 王 晔. 复 合 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 产 性 能 的 影 响 [J] 援 中 国 饲 料,2004(13): 23 耀 25 7 胡 志 军, 许 梓 荣, 邹 晓 庭. 酶 制 剂 在 商 品 肉 鸭 生 产 中 应 用 效 果 的 研 究 [J] 援 上 海 畜 牧 兽 医 通 讯,2004(2):25 耀 26 8 刘 一 伟 译. 配 制 最 低 成 本 的 加 酶 家 禽 日 粮 : 酶 的 表 观 代 谢 能 [J] 援 国 外 畜 牧 学,1993(2):14 9 何 健, 冯 光 德, 豆 松 方, 等. 在 低 营 养 水 平 的 肉 鸭 日 粮 中 添 加 酶 制 剂 的 效 果 研 究 [J]. 中 国 家 禽,2001(23):14 耀 吕 敏 芝, 陈 建 权, 黄 得 纯, 等. 肉 鸭 日 粮 中 添 加 酶 制 剂 的 效 果 试 验 [J]. 黑 龙 江 畜 牧 兽 医,2002(2):12 耀 余 有 贵, 贺 建 华 援 NSP 酶 在 单 胃 动 物 日 粮 中 的 应 用 [J] 援 中 国 畜 牧 兽 医,2004(1):9 耀 廖 细 古, 冯 定 远, 于 旭 华, 等. 木 聚 糖 酶 对 生 长 肉 鸭 生 产 性 能 影 响 的 研 究 [J]. 饲 料 工 业,2006,27(18):44 耀 章 德 育, 李 昂, 李 鑫, 等. 番 鸭 日 粮 添 加 溢 多 酶 P 8306 的 饲 养 效 果 试 验 [J]. 福 建 畜 牧 兽 医,2006, 28(5):1 耀 3 14 王 晔. 日 粮 中 添 加 酶 制 剂 对 樱 桃 肉 鸭 生 产 性 能 的 影 响 [J] 援 山 东 饲 料,2004(3):20 耀 22 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

40 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 饲 养 试 验 日 粮 中 添 加 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响 常 新 耀 王 翠 摘 要 为 研 究 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响, 本 试 验 选 用 健 康 初 生 重 相 近 的 1 日 龄 商 品 代 爱 拔 益 加 (AA) 肉 仔 鸡 3000 只, 并 随 机 分 为 5 组, 每 组 3 个 重 复, 每 个 重 复 200 只 鸡 在 玉 米 豆 粕 型 基 础 日 粮 ( 含 铜 量 5.7 mg/kg) 的 基 础 上, 分 别 添 加 mg/kg 的 硫 酸 铜 (CuSO 4 5H 2 O), 进 行 为 期 6 周 的 饲 养 试 验 整 个 试 验 期 分 为 3 个 阶 段 :0 耀 2 周 龄 3 耀 5 周 龄 6 周 龄 设 玉 组 为 对 照 组, 其 它 4 组 为 试 验 组 在 较 合 理 的 饲 养 管 理 条 件 下, 记 录 各 试 验 组 鸡 的 增 重 采 食 量, 计 算 料 肉 比 试 验 结 果 表 明, 试 验 组 鸡 各 阶 段 及 整 个 试 验 期 的 增 重 采 食 量 料 肉 比 与 对 照 组 相 比 受 饲 料 铜 水 平 的 影 响 差 异 不 显 著 (P>0.05) 根 据 试 验 结 果, 考 虑 到 生 产 效 益, 建 议 肉 鸡 日 粮 中 的 铜 供 给 量 按 NRC(1994) 标 准, 即 8mg/kg 进 行 添 加 关 键 词 中 图 分 类 号 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 动 物 与 分 组 铜 ; 肉 仔 鸡 ; 生 产 性 能 ; 增 重 ; 采 食 量 ; 料 肉 比 S831 选 用 健 康 尧 体 重 相 近 的 1 日 龄 商 品 代 爱 拔 益 加 (AA) 肉 仔 鸡 3000 只 袁 随 机 分 为 5 组 袁 每 组 3 个 重 复 袁 每 个 重 复 200 只 鸡 遥 1.2 试 验 设 计 本 试 验 以 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 为 外 加 铜 源 袁 以 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 渊 含 铜 量 5.7 mg/kg 冤 为 基 础 日 粮 遥 试 验 玉 耀 吁 组 分 别 添 加 2.3 尧 42.3 尧 82.3 尧 尧 mg/kg 的 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 遥 设 玉 组 为 对 照 组 袁 其 它 4 组 为 试 验 组 遥 试 验 设 计 见 表 1 遥 项 目 硫 酸 铜 添 加 量 渊 mg/kg 冤 常 新 耀, 河 南 科 技 学 院 动 物 科 学 系, 副 教 授,453003, 新 乡 市 五 一 路 东 端 表 1 王 翠, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 玉 组 2.3 试 验 设 计 域 组 基 础 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 试 验 组 芋 组 郁 组 吁 组 参 照 NRC 渊 1994 冤 肉 仔 鸡 营 养 需 要 配 制 基 础 日 粮 袁 基 础 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 见 表 2 遥 1.4 饲 养 管 理 40 试 验 在 新 乡 市 获 嘉 县 冯 庄 鸡 场 进 行, 试 验 从 2007 年 4 月 2 日 至 2007 年 5 月 14 日, 试 验 期 为 42 d 遥 试 验 分 为 3 个 阶 段 院 0 耀 2 周 龄 尧 3 耀 5 周 龄 尧 6 周 龄 遥 整 个 试 验 期 内 由 专 人 负 责 袁 试 验 开 始 前 对 鸡 舍 尧 鸡 笼 及 其 它 饲 养 管 理 用 具 用 甲 醛 - 高 锰 酸 钾 全 面 熏 蒸 消 毒 遥 整 个 试 验 期 用 厚 垫 料 平 养, 控 制 好 鸡 舍 内 的 温 湿 度, 昼 夜 24 h 光 照, 定 期 进 行 疫 苗 接 种 尧 驱 虫 工 作 遥 每 天 清 理 尧 消 毒 鸡 舍 袁 冲 洗 饮 水 器 袁 让 鸡 自 由 采 食 干 粉 料, 自 由 饮 水, 其 它 均 按 照 肉 仔 鸡 常 规 饲 养 操 作 规 程 进 行 遥 表 2 项 目 玉 米 渊 % 冤 豆 粕 渊 % 冤 鱼 粉 渊 % 冤 动 物 油 渊 % 冤 石 粉 渊 % 冤 磷 酸 氢 钙 渊 % 冤 赖 氨 酸 渊 % 冤 蛋 氨 酸 渊 % 冤 食 盐 渊 % 冤 预 混 料 渊 % 冤 营 养 水 平 代 谢 能 渊 MJ/kg 冤 粗 蛋 白 渊 % 冤 钙 渊 % 冤 有 效 磷 渊 % 冤 基 础 日 粮 组 成 和 营 养 水 平 0 耀 2 周 龄 耀 5 周 龄 周 龄 注 院 每 千 克 基 础 日 粮 中 添 加 维 生 素 A IU 尧 维 生 素 E20 mg 尧 维 生 素 K1.5 mg 尧 维 生 素 B mg 尧 维 生 素 B 2 9mg 尧 泛 酸 钙 15mg 尧 烟 酸 30 mg 尧 维 生 素 B 6 3.0mg 尧 维 生 素 B mg 尧 叶 酸 0.75 mg 尧 氯 化 胆 碱 1000 mg 尧 Mn 80 mg 尧 Zn 60 mg 尧 Fe 40 mg 渊 Mn 尧 Zn 尧 Fe 均 以 硫 酸 盐 形 式 添 加 冤 尧 Se( 亚 硒 酸 钠 )0.15 mg 尧 I( 碘 化 钾 )0.3 mg 遥

41 饲 养 试 验 1.5 测 定 指 标 及 方 法 分 别 在 肉 仔 鸡 1 尧 14 尧 35 尧 42 日 龄 时 对 每 个 处 理 组 分 别 随 机 抽 取 50 只 鸡 进 行 空 腹 称 重 袁 记 录 饲 料 采 食 量 袁 并 计 算 整 个 试 验 期 不 同 阶 段 尧 不 同 处 理 组 肉 仔 鸡 的 增 重 尧 采 食 量 和 料 肉 比 遥 平 均 日 增 重 =( 试 验 末 重 原 试 验 初 重 )/ 渊 参 试 鸡 只 数 伊 试 验 天 数 冤 曰 平 均 日 采 食 量 = 总 采 食 量 / 渊 参 试 鸡 只 数 伊 试 验 天 常 新 耀 等 : 日 粮 中 添 加 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响 数 冤 曰 料 肉 比 = 总 采 食 量 /( 末 重 原 初 重 ) 遥 试 验 数 据 用 Excel 进 行 处 理 袁 并 进 行 方 差 分 析 袁 试 验 结 果 用 平 均 数 依 标 准 差 表 示 遥 2 试 验 结 果 2.1 肉 仔 鸡 各 阶 段 增 重 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 袁 试 验 鸡 各 阶 段 的 增 重 情 况 见 表 3 遥 表 3 各 阶 段 增 重 情 况 (g) 项 目 初 重 2 周 龄 体 重 5 周 龄 体 重 6 周 龄 体 重 0 耀 2 周 龄 增 重 3 耀 5 周 龄 增 重 6 周 龄 增 重 玉 组 44.3 依 依 依 依 依 依 依 12.0 域 组 45.1 依 依 依 依 依 依 依 15.4 芋 组 45.0 依 依 依 依 依 依 依 19.0 郁 组 46.8 依 依 依 依 依 依 依 13.9 吁 组 45.4 依 依 依 依 依 依 依 18.5 由 表 3 可 以 看 出 袁 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 对 AA 肉 鸡 在 0 耀 2 周 龄 尧 3 耀 5 周 龄 尧 6 周 龄 增 重 的 影 响 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 2.2 肉 仔 鸡 各 阶 段 采 食 量 和 料 肉 比 渊 见 表 4 冤 项 目 玉 组 域 组 芋 组 郁 组 吁 组 表 4 各 阶 段 肉 仔 鸡 采 食 量 及 料 肉 比 0 耀 2 周 龄 3 耀 5 周 龄 6 周 龄 采 食 量 渊 g 冤 依 依 依 依 依 16.7 料 肉 比 1.42 依 依 依 依 依 0.07 采 食 量 渊 g 冤 依 依 依 依 依 31.7 料 肉 比 1.83 依 依 依 依 依 0.08 采 食 量 渊 g 冤 依 依 依 依 依 59.6 料 肉 比 2.13 依 依 依 依 依 0.03 由 表 4 可 以 看 出, 试 验 组 与 对 照 组 相 比, 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 硫 酸 铜 (CuSO 4 窑 5H 2 O) 对 AA 肉 仔 鸡 各 阶 段 的 采 食 量 及 料 肉 比 的 影 响 差 异 不 显 著 (P>0.05) 遥 在 3 耀 5 周 龄 肉 仔 鸡 日 粮 中 添 加 82.3 尧 122.3mg/kg 的 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 时 袁 即 芋 尧 郁 组 肉 仔 鸡 的 采 食 量 较 对 照 组 分 别 增 加 1.09% 尧 0.49% 袁 6 周 龄 时 芋 尧 郁 组 肉 仔 鸡 的 采 食 量 较 对 照 组 分 别 增 加 了 2.71% 尧 0.53% 袁 料 肉 比 也 略 有 增 加 袁 统 计 结 果 显 示 差 异 均 不 显 著 遥 2.3 整 个 试 验 期 肉 仔 鸡 的 生 产 性 能 渊 见 表 5 冤 项 目 玉 组 域 组 芋 组 郁 组 吁 组 表 5 增 重 渊 g 冤 依 依 依 依 依 36.7 肉 仔 鸡 的 生 产 性 能 采 食 量 渊 g 冤 依 依 依 依 依 66.8 料 肉 比 1.83 依 依 依 依 依 由 表 5 可 以 看 出 袁 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 硫 酸 铜 (CuSO 4 窑 5H 2 O) 对 AA 肉 仔 鸡 整 个 试 验 期 的 增 重 尧 采 食 量 尧 料 肉 比 的 影 响 与 对 照 组 相 比 差 异 均 不 显 著 (P>0.05) 遥 试 验 过 程 中 当 日 粮 中 添 加 82.3 尧 mg/kg 的 硫 酸 铜 时 袁 即 芋 尧 郁 组 肉 仔 鸡 的 采 食 量 较 对 照 组 分 别 增 加 了 1.42% 尧 0.50%, 料 肉 比 分 别 提 高 了 1.64% 尧 0.55%, 统 计 结 果 显 示 差 异 仍 不 显 著 遥 3 讨 论 铜 作 为 多 种 酶 的 辅 助 因 子 袁 它 与 动 物 营 养 的 关 系 早 已 引 起 人 们 的 重 视 袁 Barder 等 渊 1955 冤 首 先 提 出 对 于 生 长 肥 育 猪 添 加 高 于 正 常 生 理 需 要 数 10 倍 的 铜 袁 可 以 改 进 猪 的 生 长 速 度 和 饲 料 利 用 率, 在 不 同 生 长 阶 段 的 饲 粮 中 添 加 高 水 平 的 铜 (>200 mg/kg) 均 可 改 善 生 长 猪 的 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 遥 此 后,Gipp(1973) 尧 Crone (1989) 尧 许 梓 荣 (2000) 尧 王 希 春 (2004) 等 对 此 进 行 了 大 量

42 常 新 耀 等 : 日 粮 中 添 加 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响 饲 养 试 验 的 研 究 袁 进 一 步 证 实 了 高 铜 的 促 生 长 作 用 袁 而 且 袁 研 究 者 普 遍 认 为 补 铜 剂 量 为 250 mg/kg 时 效 果 最 好 遥 从 此, 铜 作 为 一 种 高 效 尧 廉 价 尧 方 便 的 促 生 长 剂 在 养 猪 业 中 被 广 泛 应 用 遥 日 粮 中 添 加 高 剂 量 铜 能 否 促 进 家 禽 的 生 长 和 改 善 饲 料 利 用 率, 专 家 和 学 者 做 了 很 多 的 试 验, 有 关 高 剂 量 铜 对 禽 类 ( 尤 其 是 肉 鸡 ) 生 长 的 影 响 也 有 报 道, 但 结 果 不 尽 一 致 遥 Fisher(1973) 认 为, 改 善 肉 鸡 体 增 重 和 饲 料 效 率 的 最 佳 饲 粮 铜 水 平 分 别 为 169 mg/kg 和 140 mg/kg 遥 何 霆 渊 2001 冤 在 肉 鸡 日 粮 渊 铜 水 平 为 9.4 mg/kg 冤 分 别 添 加 10 尧 50 尧 100 尧 200 mg/kg 袁 结 果 表 明 袁 高 铜 对 肉 仔 鸡 生 长 尧 增 重 无 影 响 遥 胡 坚 渊 2000 冤 尧 周 桂 莲 渊 2004 冤 等 指 出 袁 高 铜 对 试 验 鸡 的 生 产 性 能 无 影 响 遥 然 而 也 有 研 究 者 得 出 相 反 的 结 论 袁 如 周 文 卿 渊 1994 冤 总 结 大 量 试 验 研 究 成 果 袁 提 出 高 铜 渊 25 耀 150 mg/kg 冤 对 肉 仔 鸡 具 有 显 著 的 增 重 效 果 袁 平 均 增 重 可 提 高 39.3% 遥 龚 月 生 渊 2002 冤 研 究 表 明 袁 高 剂 量 铜 渊 250 mg/kg 冤 对 笼 养 海 布 罗 混 合 雏 前 期 (1 耀 28 日 龄 ) 生 长 有 一 定 的 促 进 作 用 遥 夏 中 生 (2000) 等 研 究 表 明 袁 在 肉 用 三 黄 鸡 饲 粮 中 添 加 125 耀 250 mg/kg 铜 可 以 促 进 生 长 袁 提 高 饲 料 效 率 遥 本 试 验 结 果 表 明 袁 在 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 添 加 不 同 水 平 的 硫 酸 铜 渊 CuSO 4 窑 5H 2 O 冤 袁 试 验 鸡 各 阶 段 及 整 个 试 验 期 的 增 重 尧 采 食 量 尧 料 肉 比 没 有 随 日 粮 铜 水 平 的 增 加 而 改 善 袁 其 增 重 尧 采 食 量 尧 料 肉 比 与 对 照 组 相 比 差 异 均 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 由 此 可 见 袁 本 试 验 结 果 与 胡 坚 尧 周 桂 莲 等 研 究 者 的 报 道 相 一 致 遥 高 铜 的 增 重 效 应 研 究 得 出 的 结 论 不 一 致 袁 有 些 研 究 者 认 为 袁 试 验 动 物 尧 日 粮 类 型 尧 饲 料 中 营 养 素 等 显 著 影 响 铜 的 吸 收 利 用 遥 也 有 研 究 者 认 为 袁 高 铜 的 促 生 长 作 用 主 要 因 为 高 铜 有 类 似 抗 生 素 的 作 用 袁 当 雏 禽 的 生 活 环 境 较 差 时 袁 高 铜 可 抑 制 胃 肠 道 有 害 菌 的 繁 殖 袁 间 接 表 现 出 高 铜 的 促 生 长 作 用 遥 而 本 试 验 饲 养 管 理 条 件 较 好 袁 故 表 现 不 明 显 遥 因 此 生 产 过 程 中 在 肉 仔 鸡 饲 料 中 添 加 铜 制 剂 时 应 充 分 考 虑 各 种 因 素 袁 才 能 使 铜 在 促 进 肉 仔 鸡 生 产 性 能 方 面 达 到 最 佳 的 应 用 效 果 遥 高 铜 在 饲 料 中 的 应 用 有 其 自 身 的 优 点 袁 虽 然 对 其 生 理 作 用 的 报 道 很 多 袁 但 是 不 够 全 面 袁 尤 其 是 生 长 机 理 方 面 的 研 究 袁 观 点 很 不 一 致 遥 随 着 养 殖 业 集 约 化 与 畜 禽 生 产 水 平 的 提 高 袁 生 产 上 出 现 一 种 盲 目 超 量 添 加 铜 的 倾 向 袁 由 此 产 生 各 种 潜 在 的 生 物 学 负 效 应 和 动 物 产 品 品 质 的 改 变 及 生 态 环 境 的 破 坏 日 益 备 受 人 们 关 42 注 遥 总 之 袁 高 铜 的 促 生 长 机 理 有 待 进 一 步 研 究 遥 4 结 论 试 验 结 果 表 明 袁 试 验 鸡 在 各 阶 段 及 整 个 试 验 期 的 增 重 尧 采 食 量 尧 料 肉 比 受 饲 料 中 铜 水 平 的 影 响 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 根 据 试 验 结 果 袁 考 虑 到 生 产 效 益 袁 建 议 肉 鸡 日 粮 中 的 铜 供 给 量 按 NRC(1994) 标 准 渊 8mg/kg 冤 进 行 添 加 遥 参 考 文 献 1 陈 喜 斌 援 饲 料 学 [M] 援 北 京 : 科 学 出 版 社, 耀 王 忠 艳 援 饲 料 学 [M] 援 哈 尔 滨 : 东 北 林 业 大 学 出 版 社, 耀 98 3 NRC. Nutrient requirements of swine (9 th Rev Ed)[M]. Washington: national Academy Press,1988(1):64 耀 72 4 NRC. Nutrient requirements of poultry (9 th Rev Ed)[M]. Washing 原 ton: national Academy Press,1994(1):67 耀 68 5 刘 小 波, 罗 绪 刚. 高 剂 量 铜 对 猪 促 生 长 作 用 机 理 的 研 究 进 展 [J] 援 动 物 营 养,2001,6(9):13 耀 15 6 周 桂 莲, 韩 友 文 援 饲 喂 高 铜 日 粮 对 肉 仔 鸡 影 响 的 研 究 [J] 援 饲 料 博 览, 1993,6(3):3 耀 6 7 杜 娟, 高 荣 琨 援 高 铜 的 生 理 功 能 及 影 响 [J] 援 当 代 畜 禽 养 殖 业,2006 (1):32 耀 34 8 Fisher C. Use of copper sulfate as agrowth-promoter for broiler [J] 援 Feedstuff, 1973,16:24 耀 25 9 胡 吉 耘 援 微 量 元 素 在 猪 生 长 中 的 作 用 与 影 响 [J]. 贵 州 畜 牧 兽 医, 2005,29(4):28 耀 何 霆, 刘 汉 林, 梁 琳, 等 援 肉 用 仔 鸡 的 饲 粮 铜 水 平 [J]. 广 东 畜 牧 兽 医 科 技,2001,19(2):1 耀 3 11 谭 芳, 胡 坚 援 日 粮 铜 水 平 对 肉 仔 鸡 组 织 中 矿 物 质 含 量 的 影 响 [J]. 兽 医 大 学 学 报,2000(1):67 耀 夏 中 生, 覃 小 荣, 王 振 权, 等 援 饲 粮 高 剂 量 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响 [J]. 广 西 农 业 生 物 科 学,2000,19(1):39 耀 龚 月 生, 薛 桥, 曹 雨 莉 援 高 剂 量 铜 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 的 影 响 [J] 援 黄 牛 杂 志,2002,20(1):64 耀 杨 凤. 动 物 营 养 学 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 出 版 社, 耀 骆 先 虎, 吴 晋 强 援 锰 锌 铜 对 肉 用 仔 鸡 营 养 效 应 的 研 究 [J]. 安 徽 农 业 大 学 学 报,2001,24(1):62 耀 刘 玉 兰, 李 德 发, 龚 利 敏, 等 援 日 粮 锌 铜 水 平 对 肉 仔 鸡 生 产 性 能 和 免 疫 器 官 发 育 的 影 响 [J] 援 饲 料 工 业,2003,24(2):16 耀 田 允 波, 曾 书 琴 援 高 铜 改 善 猪 生 产 性 能 和 促 生 长 机 理 的 研 究 进 展 [J]. 黑 龙 江 畜 牧 兽 医,2002,11(2):36 耀 王 希 春, 吴 金 节 援 高 剂 量 铜 对 仔 猪 的 促 生 长 作 用 及 其 机 理 [J]. 动 物 医 学 进 展,2004,25(6):62 耀 程 忠 刚, 林 映 才, 许 梓 荣. 高 铜 促 生 长 机 理 综 述 [J] 援 兽 药 与 饲 料 添 加 剂,2001,6(3):33 耀 35 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

43 饲 养 试 验 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 王 允 超 茁 - 葡 聚 糖 酶 是 一 类 能 降 解 谷 物 中 茁 - 葡 聚 糖 的 水 解 酶 类 的 总 称, 茁 - 葡 聚 糖 酶 属 于 半 纤 维 素 酶 类, 是 采 用 枯 草 杆 菌 经 过 液 体 深 层 发 酵 制 得 遥 茁 - 葡 聚 糖 酶 包 括 内 切 和 外 切 茁 -1,3- 葡 聚 糖 酶 尧 内 切 和 外 切 茁 -1,4- 葡 聚 糖 酶 遥 内 切 茁 -1,4- 葡 聚 糖 酶 是 饲 用 茁 - 葡 聚 糖 酶 的 有 效 成 分 遥 茁 - 葡 聚 糖 酶 能 降 解 茁 - 葡 聚 糖 分 子 中 的 茁 -1,3 和 茁 -1,4 糖 苷 键 袁 使 之 降 解 为 小 分 子, 失 去 亲 水 性 和 粘 性, 改 变 单 胃 动 物 肠 道 内 容 物 的 特 性 尧 消 化 酶 的 活 性 尧 肠 道 微 生 物 的 作 用 环 境 等, 从 而 有 利 于 动 物 对 营 养 物 质 的 消 化 和 吸 收, 提 高 生 长 性 能 和 饲 料 的 转 化 率 遥 本 试 验 旨 在 研 究 肉 鸡 日 粮 中 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响, 以 探 讨 茁 - 葡 聚 糖 酶 在 肉 鸡 日 粮 中 的 使 用 价 值, 为 茁 - 葡 聚 糖 酶 的 应 用 推 广 提 供 参 考 遥 1 材 料 与 方 法 茁 - 葡 聚 糖 酶 由 青 岛 康 地 恩 生 物 集 团 山 东 六 和 农 牧 科 技 园 有 限 公 司 提 供 遥 本 试 验 采 用 单 因 子 随 机 试 验 设 计, 将 144 只 1 日 龄 AA 肉 鸡, 按 照 公 母 各 半 尧 体 重 一 致 的 原 则 随 机 分 为 2 个 处 理 组, 对 照 组 和 试 验 组 袁 每 个 处 理 组 9 个 重 复, 每 个 重 复 8 只 鸡 遥 试 验 日 粮 采 用 市 场 上 常 用 的 商 品 颗 粒 饲 料, 按 正 常 给 料 程 序 进 行 饲 喂 遥 试 验 组 在 对 照 组 日 粮 基 础 上 添 加 1000 g/t 的 茁 - 葡 聚 糖 酶 遥 各 处 理 组 基 础 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 试 验 鸡 只 采 用 立 体 重 叠 式 笼 养 袁 人 工 控 制 光 照 尧 温 度 和 湿 度 遥 自 由 采 食 和 饮 水 袁 自 然 通 风 遥 其 它 饲 养 管 理 和 免 疫 按 常 规 肉 鸡 饲 养 办 法 和 免 疫 程 序 进 行 遥 试 验 期 间 分 别 记 录 1 耀 21 日 龄 尧 22 耀 41 日 龄 及 1 耀 41 日 龄 的 各 阶 段 试 鸡 增 重 尧 耗 料 量 袁 并 在 每 周 末 按 照 5% 的 比 例 随 机 抽 样 进 行 称 重 袁 试 验 期 共 41 d 遥 范 志 恒 项 目 原 料 渊 豫 冤 玉 米 玉 米 酒 精 糟 豆 粕 棉 粕 菜 籽 粕 玉 米 蛋 白 粉 麸 皮 食 盐 石 粉 磷 酸 氢 钙 预 混 料 合 计 营 养 水 平 AME 渊 MJ/kg 冤 CP 渊 % 冤 钙 渊 % 冤 有 效 磷 渊 % 冤 总 赖 氨 酸 渊 % 冤 总 蛋 氨 酸 渊 % 冤 总 苏 氨 酸 渊 % 冤 表 1 基 础 日 粮 组 成 及 营 养 水 平 510 日 粮 渊 1 耀 21 日 龄 冤 日 粮 渊 22 耀 42 日 龄 冤 原 注 院 预 混 料 为 六 和 生 产 肉 鸡 预 混 料 袁 试 验 日 粮 均 经 85 益 制 粒 遥 以 鸡 只 个 体 或 重 复 为 单 位 袁 计 算 两 个 处 理 组 日 粮 试 验 前 后 的 表 观 代 谢 能 和 蛋 白 质 的 利 用 率 袁 数 据 用 SPSS 11.5 软 件 进 行 单 因 素 方 差 分 析 和 Duncan's 法 多 重 比 较 袁 结 果 均 以 野 平 均 值 依 标 准 差 冶 表 示 遥 试 验 在 青 岛 康 地 恩 生 物 集 团 生 物 代 谢 试 验 室 渊 城 阳 区 青 大 工 业 园 冤 进 行 遥 2 试 验 结 果 与 分 析 2.1 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 1 耀 21 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 渊 见 表 2 冤 表 2 试 验 结 果 表 明 袁 肉 鸡 1 耀 21 日 龄 期 间 日 粮 中 添 加 1000 g/t 的 茁 - 葡 聚 糖 酶 与 对 照 组 相 比 袁 平 均 个 体 重 提 高 2.5% 袁 日 耗 料 量 提 高 3.6% 袁 个 体 日 增 重 提 高 3.6% 袁 料 肉 比 降 低 1.1 豫 遥 表 2 日 粮 中 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 1 耀 21 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 组 别 对 照 组 试 验 组 21 日 龄 平 均 个 体 重 (g) 依 依 11.7 日 耗 料 量 (g/ 只 ) 43.9 依 依 0.6 日 增 重 (g/ 只 ) 24.9 依 依 0.5 料 肉 比 1.79 依 依 0.02 注 院 同 列 数 据 肩 标 小 写 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 (P 约 0.05) 曰 肩 标 无 字 母 者 或 字 母 相 同 者 表 示 差 异 不 显 著 (P 跃 0.05) 遥 下 表 同 遥 王 允 超, 康 地 恩 生 物 集 团 生 物 代 谢 实 验 室,266061, 青 岛 2.2 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 22 耀 41 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 市 高 科 园 苗 岭 路 29 号 澳 柯 玛 大 厦 0607 室 范 志 恒, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 影 响 渊 见 表 3 冤 由 表 3 结 果 表 明, 添 加 1000 g/t 茁 - 葡 聚 糖 酶 的 试 验 组 与 对 照 组 相 比, 平 均 个 体 重 提 高 3.8%(P 约 0.05), 个 43

44 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 营 养 研 究 瘦 素 对 机 体 代 谢 调 控 研 究 进 展 及 其 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 摘 要 瘦 素 (leptin) 是 由 肥 胖 基 因 (Obese gene) 编 码 脂 肪 组 织 合 成 并 分 泌 的 一 种 激 素, 具 有 调 节 动 物 摄 食 行 为 减 少 能 量 消 耗 和 降 低 动 物 采 食 量 的 作 用, 从 而 提 高 动 物 的 生 产 效 益 文 中 阐 述 了 瘦 素 的 结 构 特 点 作 用 机 理 能 量 代 谢 调 控 并 对 瘦 素 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 进 行 了 展 望 关 键 词 瘦 素 ; 调 控 ; 作 用 机 理 中 图 分 类 号 S 邹 增 丁 陈 立 祥 苏 建 明 在 畜 牧 业 生 产 中 袁 生 产 者 需 要 控 制 畜 禽 的 脂 肪 沉 积 袁 以 追 求 最 大 的 经 济 效 益 遥 由 于 过 去 在 育 种 中 过 分 注 重 了 生 长 速 度 的 选 择 袁 导 致 出 现 畜 禽 生 长 速 度 增 快 的 同 时 伴 随 着 体 脂 的 增 多 袁 风 味 下 降 等 负 面 效 应 遥 因 此 袁 了 解 家 畜 控 制 肥 胖 尧 摄 食 与 能 量 代 谢 的 基 本 机 制 有 助 于 提 高 动 物 的 生 产 性 能 和 改 善 产 品 的 品 质 遥 瘦 素 邹 增 丁, 湖 南 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所,410128, 长 沙 陈 立 祥 ( 通 讯 作 者 ), 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 苏 建 明, 湖 南 农 业 大 学 动 物 医 学 院 收 稿 日 期 : 绎 湖 南 省 重 大 科 技 专 项 子 课 题 资 助 ( 湘 :03-NKY-1001) [1] (leptin) 是 由 肥 胖 基 因 编 码 尧 脂 肪 细 胞 分 泌 的 一 种 激 素, 具 有 调 节 摄 食 行 为, 减 少 能 量 消 耗 和 降 低 动 物 采 食 量 [2] 的 作 用 遥 长 期 以 来, 研 究 者 一 直 试 图 找 到 一 种 有 效 控 制 脂 肪 沉 积 的 方 法 遥 Kennedy 提 出 了 控 制 体 重 的 野 脂 肪 自 稳 理 论 冶 (Lipostatic theory) 遥 Hervey 的 小 鼠 试 验 结 果 证 实 了 这 一 点, 并 解 释 为 小 鼠 脂 肪 组 织 能 够 产 生 一 种 野 循 环 饱 感 因 子 冶, 这 种 因 子 可 作 用 于 下 丘 脑 而 减 少 摄 食 遥 Zhang 等 (1994) 首 次 克 隆 到 肥 胖 基 因 (Obesegene) [3], 并 发 现 其 编 码 产 物 为 leptin 袁 这 一 发 现 为 人 们 解 决 这 一 问 题 带 来 了 新 的 希 望 遥 本 文 就 近 年 来 国 内 外 有 关 瘦 素 对 机 体 代 谢 调 控 研 究 作 一 综 述 遥 1 leptin 及 其 受 体 的 生 化 结 构 特 点 1.1 leptin 生 物 学 组 成 组 别 对 照 组 试 验 组 表 3 日 粮 中 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 22 耀 41 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 41 日 龄 平 均 个 体 重 (g) 依 31.4 b 依 29.0 a 日 耗 料 量 (g/ 只 ) 依 依 2.1 日 增 重 (g/ 只 ) 61.1 依 1.4 b 64.1 依 1.0 a 料 肉 比 2.17 依 0.02 a 2.10 依 0.01 b 体 日 耗 料 量 提 高 1.8%, 日 增 重 提 高 4.9%(P 约 0.05), 料 肉 比 降 低 3.2 豫 (P 约 0.05) 遥 2.3 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 1 耀 41 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 渊 见 表 4 冤 表 4 组 别 对 照 组 试 验 组 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 1 耀 41 日 龄 肉 鸡 生 产 性 能 的 影 响 日 耗 料 量 (g/ 只 ) 87.9 依 依 1.2 日 增 重 (g/ 只 ) 42.7 依 0.8 b 45.1 依 0.6 a 料 肉 比 2.08 依 0.01 a 2.00 依 0.01 b 1 耀 41 日 龄 试 验 结 果 表 明 袁 添 加 1000 g/t 的 茁 - 葡 聚 糖 酶 的 试 验 组 与 对 照 组 相 比 袁 全 期 日 耗 料 量 提 高 2.4% 袁 日 增 重 提 高 5.6% 渊 P 约 0.05 冤 袁 料 肉 比 降 低 3.8 豫 渊 P 约 0.05 冤 遥 44 3 小 结 本 试 验 结 果 表 明 袁 基 础 日 粮 中 添 加 1000 g/t 的 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 肉 鸡 生 产 性 能 有 显 著 的 改 善 作 用 遥 这 与 Rotter 等 在 大 麦 尧 燕 麦 和 小 麦 为 主 的 饲 粮 中 添 加 茁 - 葡 聚 糖 酶 可 提 高 小 鸡 的 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 的 研 究 报 道 一 致 遥 因 此 袁 在 玉 米 要 豆 粕 要 杂 粕 型 肉 鸡 日 粮 中 添 加 的 茁 - 葡 聚 糖 酶 对 提 高 肉 鸡 生 产 有 显 著 作 用 袁 可 以 明 显 提 高 肉 鸡 个 体 重 袁 降 低 料 肉 比 遥 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

45 营 养 研 究 邹 增 丁 等 : 瘦 素 对 机 体 代 谢 调 控 研 究 进 展 及 其 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 leptin 的 前 体 物 是 由 167 个 氨 基 酸 组 成 的 Ob 基 因 编 码 产 物 袁 在 分 泌 入 血 的 过 程 中 N 端 由 21 个 亲 水 氨 基 酸 残 基 组 成 的 信 号 肽 被 水 解 后 形 成 由 146 个 氨 基 酸 组 成 的 分 子 量 约 为 16 kd 单 链 分 泌 型 非 糖 基 化 多 肽 袁 链 内 的 两 个 半 胱 氨 酸 残 基 构 成 一 个 二 硫 桥 袁 具 [4] 有 强 亲 水 性 遥 根 据 氨 基 酸 序 列 推 测 袁 leptin 是 球 形 分 子 袁 无 明 显 的 结 构 域 或 跨 膜 结 构 袁 以 单 体 形 式 存 在 于 血 浆 中 遥 瘦 蛋 白 的 mrna 及 蛋 白 质 仅 在 脂 肪 细 胞 表 达 袁 且 氨 基 酸 的 编 码 区 具 有 高 度 的 保 守 性 袁 人 与 小 鼠 [5] 有 84 豫 的 碱 基 序 列 相 同 遥 目 前 研 究 表 明 袁 leptin 主 要 是 由 脂 肪 组 织 ( 主 要 是 白 色 脂 肪 袁 也 有 棕 色 脂 肪 ) 分 泌 的 蛋 白 质 类 激 素 袁 其 它 组 织 也 能 产 生 袁 包 括 胎 盘 袁 胎 儿 的 心 脏 尧 骨 尧 软 骨 袁 大 鼠 的 骨 胳 肌 和 胃 袁 人 的 乳 腺 上 皮 [6] 细 胞 袁 人 和 鼠 的 腺 垂 体 遥 leptin 在 血 液 中 以 游 离 和 结 状 态 下 能 有 效 地 延 长 动 物 的 存 活 时 间 遥 饥 饿 会 引 起 一 系 列 异 常 反 应 袁 如 产 热 量 下 降 尧 体 温 过 低 尧 拒 食 症 尧 免 疫 力 下 降 以 及 神 经 内 分 泌 功 能 紊 乱 尧 体 脂 消 耗 等 遥 作 为 饥 饿 反 应 的 调 节 者 袁 leptin 浓 度 也 随 着 下 降 袁 若 用 leptin 处 理 这 些 饥 饿 动 物 则 能 明 显 改 善 上 述 饥 饿 反 应 遥 此 外 袁 巨 大 的 能 量 消 耗 也 伴 随 有 leptin 水 平 的 下 降 袁 以 诱 导 摄 食 和 降 低 产 热 量 遥 据 报 道 袁 在 维 持 状 态 渊 Steady-State 袁 Zero energy balance 冤 下 袁 leptin 的 表 达 和 [16 袁 17] 分 泌 反 映 了 人 和 动 物 的 体 脂 含 量 遥 综 上 所 述 遥 leptin 具 有 双 重 调 节 性 院 在 能 量 消 耗 和 能 量 摄 入 相 平 衡 尧 体 质 量 恒 定 时 袁 leptin 是 反 映 体 脂 贮 存 的 指 标 曰 而 一 旦 能 量 平 衡 被 破 坏 袁 如 呈 现 能 量 正 平 衡 ( 过 量 饮 食 ) 或 负 平 衡 ( 禁 食 尧 运 动 等 ) 袁 leptin 则 代 表 一 种 能 量 感 受 器 袁 通 过 能 量 代 谢 的 负 反 馈 调 节 以 维 持 体 重 遥 合 两 种 形 式 存 在 袁 游 离 状 态 可 能 是 其 生 物 活 性 状 态 遥 正 常 人 血 清 中 leptin 大 部 分 以 游 离 状 态 存 在 遥 2.2 leptin 对 体 重 的 调 节 作 用 通 过 腹 膜 注 射 用 大 肠 杆 菌 渊 E.Coli 冤 表 达 的 小 鼠 1.2 leptin 受 体 (Ob-R) [7] leptin 受 体 有 5~6 种 剪 接 体 袁 其 中 Ob-Rc 尧 d 尧 e 尧 f leptin [18], 证 实 leptin 参 与 了 脂 肪 沉 积 的 调 节, 当 体 内 脂 肪 含 量 增 高 时, 脂 肪 细 胞 产 生 的 leptin 作 用 于 大 脑, 使 为 短 形 受 体 袁 Ob-Rb 为 长 形 受 体 遥 只 有 Ob-Rb 具 有 信 号 传 导 功 能 袁 为 功 能 性 受 体 袁 主 要 分 布 于 下 丘 脑 表 达 神 经 肽 Y 的 细 胞 表 面 遥 在 人 和 多 种 动 物 的 下 丘 脑 尧 垂 体 以 及 胰 岛 素 B 细 胞 尧 脉 络 丛 尧 肝 尧 肺 尧 心 尧 肾 尧 睾 丸 尧 淋 [8-10] 巴 细 胞 和 脂 肪 等 组 织 中 都 发 现 有 leptin 受 体 分 布, 在 下 丘 脑 发 现 有 长 形 受 体 mrna 特 异 表 达 袁 而 在 中 枢 以 外 的 组 织 中 则 有 短 形 受 体 mrna 表 达 遥 早 期 的 大 多 数 研 究 表 明 袁 长 形 leptin 受 体 主 要 分 布 在 大 脑 袁 特 别 是 在 下 丘 脑 的 弓 状 核 和 室 旁 核 这 两 个 调 节 摄 食 和 之 产 生 负 反 馈 调 节 作 用, 停 止 摄 食 和 提 高 代 谢 水 平 曰 反 之, 脂 肪 含 量 下 降 时,leptin 浓 度 下 降 袁 给 大 脑 信 号 以 增 强 摄 食 和 降 低 代 谢 水 平, 并 以 此 来 调 节 体 重 遥 用 leptin 处 理 动 物 的 试 验 结 果 表 明, 低 剂 量 leptin 即 可 降 [19] 低 采 食 量, 减 轻 体 重, 减 少 脂 肪 沉 积, 加 快 能 量 代 谢, [20] leptin 处 理 也 可 用 于 减 少 啮 齿 动 物 的 脂 肪 含 量 遥 在 leptin 处 理 结 束 后 的 几 个 星 期 袁 由 于 leptin 不 能 继 续 发 挥 作 用 袁 所 以 与 leptin 处 理 过 程 中 体 重 和 脂 肪 损 失 不 同 遥 [11] 代 谢 的 活 跃 区 域 袁 leptin 受 体 mrna 呈 浓 集 分 布 袁 因 2.3 leptin 对 体 脂 肪 代 谢 的 调 节 作 用 而 认 为 leptin 主 要 通 过 中 枢 神 经 系 统 影 响 动 物 的 摄 食 和 代 谢 遥 有 研 究 发 现 袁 猪 的 长 形 leptin 受 体 mrna leptin 介 导 的 脂 肪 代 谢 神 经 调 节 作 用 早 期 研 究 认 为 袁 肥 胖 是 由 于 体 内 能 量 吸 收 与 热 量 除 在 大 脑 和 垂 体 组 织 中 大 量 表 达 以 外, 在 其 它 组 织 中 也 广 泛 分 布 遥 长 形 leptin 受 体 mrna 在 大 鼠 胃 和 十 二 [12] 指 肠 粘 膜 和 粘 膜 下 层 广 泛 表 达, 这 进 一 步 证 明 了 长 形 leptin 受 体 在 中 枢 神 经 以 外 组 织 中 广 泛 存 在 遥 消 化 系 统 中 leptin 可 与 存 在 于 胃 肠 组 织 的 leptin 受 体 相 互 作 [13-15] 用 参 与 胃 肠 功 能 的 调 节 遥 [21-24] 消 耗 不 平 衡 而 引 起 的 体 内 脂 肪 过 量 沉 积 所 致 遥 而 调 节 能 量 吸 收 与 热 量 消 耗 的 中 枢 是 下 丘 脑 的 腹 侧 正 中 核 (VMH) 袁 VMH 损 害 会 引 起 食 物 摄 入 增 加 和 能 量 消 耗 降 低 袁 从 而 导 致 肥 胖 遥 后 来 发 现 袁 室 旁 核 (PVN) 损 害 也 可 导 致 肥 胖 袁 人 类 下 丘 脑 损 害 时 也 可 引 起 下 丘 脑 性 肥 胖 遥 所 以 袁 认 为 下 丘 脑 可 能 是 调 节 机 体 能 量 平 衡 的 2 leptin 对 能 量 代 谢 的 调 控 作 用 神 经 中 枢 遥 研 究 发 现 袁 leptin 在 下 丘 脑 和 脂 肪 细 胞 的 联 2.1 leptin 在 能 量 平 衡 中 的 调 节 作 用 leptin 作 为 神 经 内 分 泌 激 素 袁 能 够 提 供 调 节 信 号 袁 系 中 扮 演 重 要 角 色 遥 脂 肪 细 胞 产 生 leptin 后 袁 分 泌 的 leptin 进 入 血 液 遥 在 大 脑 袁 通 过 与 脉 络 膜 上 的 leptin 受 通 过 抑 制 食 物 摄 取 并 提 高 代 谢 率 来 限 制 脂 肪 的 储 存 袁 在 能 量 平 衡 中 起 着 重 要 作 用 袁 尤 其 在 食 物 缺 乏 或 饥 饿 体 结 合 而 被 转 运 至 脑 脊 液 中 袁 在 脑 脊 液 中 的 leptin 与 下 丘 脑 leptin 受 体 结 合 袁 通 过 下 丘 脑 leptin 受 体 的 信 45

46 邹 增 丁 等 : 瘦 素 对 机 体 代 谢 调 控 研 究 进 展 及 其 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 营 养 研 究 号 传 导 作 用 袁 引 起 下 丘 脑 与 能 量 代 谢 有 关 的 一 系 列 变 化 遥 如 神 经 肽 Y(NPY) 的 变 化 袁 导 致 食 物 摄 入 减 少 袁 能 氧 化 氮 (NO) 的 合 成 实 现 对 脂 肪 袁 如 皮 下 和 网 膜 脂 肪 组 织 的 溶 解 作 用 袁 从 而 减 轻 体 重 遥 量 消 耗 增 加 遥 NPY 由 下 丘 脑 弓 状 核 神 经 元 产 生 袁 是 目 前 所 知 的 最 强 的 食 物 摄 入 诱 导 剂 之 一 遥 leptin 可 减 少 3 leptin 的 作 用 机 理 leptin 作 为 神 经 内 分 泌 激 素, 主 要 通 过 靶 细 胞 膜 NPY 的 表 达 袁 并 使 其 分 泌 减 少 遥 除 NPY 外 袁 研 究 者 在 刺 鼠 的 变 异 小 鼠 中 发 现 MC 受 体 激 动 剂 与 肥 胖 存 在 一 定 的 关 系 遥 Agouti 蛋 白 可 拮 抗 某 些 促 黑 素 皮 质 素 (MC) 的 受 体 家 族 袁 包 括 毛 囊 中 的 MC 遥 若 将 MC 剔 除 袁 则 可 导 致 小 鼠 摄 食 增 加 袁 若 用 MC 受 体 激 动 剂 ( 如 MSH) 则 会 出 现 摄 食 减 少 的 表 现 遥 由 此 推 测 黑 色 素 尧 皮 质 素 也 是 调 节 体 重 的 重 要 因 子 遥 leptin 调 节 能 量 代 谢 与 体 重 的 神 经 机 制 主 要 由 两 部 分 构 成 袁 一 是 促 黑 皮 质 素 ( 主 要 是 MC) 受 体 系 统 袁 在 高 leptin 水 平 时 MC 受 体 [25] 系 统 发 挥 作 用 袁 通 过 MC 受 体 系 统 抑 制 摄 食 曰 二 是 NPY 递 质 系 统 袁 主 要 在 低 leptin 水 平 时 发 挥 作 用 袁 通 过 NPY 促 进 摄 食 遥 这 两 个 信 号 系 统 在 中 枢 神 经 系 统 协 调 控 制 摄 食 过 程 遥 上 的 受 体 及 相 应 的 信 号 传 导 系 统 实 现 其 生 物 学 功 能 遥 目 前 的 研 究 表 明,leptin 既 可 通 过 中 枢 神 经, 又 可 通 过 外 周 神 经 作 用 来 降 低 食 欲, 减 少 能 量 的 摄 取 或 提 高 代 谢 率, 增 加 能 量 的 消 耗, 抑 制 脂 肪 的 合 成, 从 而 减 少 脂 肪 的 沉 积 遥 在 饥 饿 状 况 下,NPY 神 经 元 被 激 发, 大 部 分 是 由 于 NPY 的 激 发 降 低 了 用 来 抑 制 NPY 激 发 的 leptin 水 平 ; 反 之,leptin 则 抑 制 NPY 的 激 发 遥 因 此, 在 脑 和 神 经 下 行 作 用 时,NPY 是 leptin 作 用 的 主 要 目 标 遥 当 用 leptin 处 理 Ob/Ob 渊 含 Ob 纯 合 子 基 因 冤 鼠 时, 降 低 Ob/Ob 鼠 的 NPY 水 平 袁 引 起 采 食 量 迅 速 降 低, 产 热 增 加 以 及 在 体 重 降 低 之 前 的 糖 血 症 及 胰 岛 素 血 症 将 得 以 改 善 遥 当 leptin 不 起 中 枢 作 用 时 袁 NPY 水 平 不 断 提 [30] 高 袁 采 食 量 增 加, 脂 肪 细 胞 合 成 加 快 袁 因 此 出 现 肥 胖 曰 leptin 介 导 的 激 素 调 节 作 用 随 着 研 究 进 一 步 深 入 袁 发 现 leptin 对 脂 肪 代 谢 调 当 下 丘 脑 NPY 和 leptin 共 同 作 用 时 袁 体 重 表 现 出 自 身 的 稳 定 性 遥 另 外 袁 有 研 究 发 现 袁 NPY 遗 传 缺 失 的 小 鼠 仍 节 还 存 在 另 外 一 条 通 路 袁 即 通 过 体 内 调 节 能 量 代 谢 的 神 经 内 分 泌 通 道 发 挥 其 作 用 遥 leptin 作 为 调 节 因 子 在 下 丘 脑 - 垂 体 - 肾 上 腺 (HPA) 轴 上 对 具 有 同 化 作 用 的 糖 [26 袁 27] 皮 质 激 素 发 挥 双 向 调 节 作 用 袁 协 调 作 用 于 体 内 的 脂 肪 代 谢 遥 胰 腺 的 B 细 胞 也 是 leptin 的 靶 器 官 之 一 袁 将 肝 细 胞 暴 露 于 leptin 中 袁 发 现 几 种 胰 岛 素 诱 导 物 活 性 下 降 袁 leptin 通 过 激 活 磷 酸 二 脂 酶 抑 制 胰 岛 素 的 分 泌 袁 而 血 中 胰 岛 素 水 平 升 高 袁 促 进 leptin 分 泌 袁 增 加 交 感 神 经 系 统 的 活 性 袁 使 外 周 去 甲 肾 上 腺 素 的 释 放 增 加 袁 后 者 激 活 脂 肪 细 胞 膜 上 Nad( 去 甲 肾 上 腺 素 ) 受 体 袁 使 脂 肪 细 胞 内 解 偶 联 蛋 白 (UCP) 增 加 袁 于 是 大 量 储 存 的 能 量 转 变 为 热 能 释 出 遥 由 此 可 见 袁 leptin 与 胰 岛 素 之 间 存 在 相 互 调 节 的 关 系 遥 leptin 也 可 通 过 抑 制 乙 酰 [28] CoA 羧 酶 的 合 成 袁 干 扰 脂 肪 合 成 代 谢 袁 即 在 无 中 枢 能 维 持 正 常 体 重 袁 这 就 暗 示 了 leptin 还 有 可 能 通 过 其 它 一 些 因 子 和 途 径 来 调 节 体 重 遥 最 近 发 现 黑 色 素 -4 受 体 渊 MC-4 冤 和 它 的 配 体 促 黑 激 素 渊 MSH 院 Melanocytestimulating Hormone 冤 在 黄 色 Agouti 小 鼠 的 肥 胖 发 生 机 理 中 具 有 重 要 作 用 遥 Agouti 小 鼠 虽 然 不 象 Ob/Ob 小 [31] 鼠 那 样 肥 胖 袁 但 它 的 体 重 仍 是 正 常 鼠 的 2 倍 遥 Agouti 基 因 的 克 隆 研 究 表 明, 其 基 因 产 物 在 含 有 该 基 因 的 小 鼠 中 过 度 表 达 遥 当 Agouti 产 物 在 皮 肤 中 过 度 表 达 时 袁 它 抑 制 MSH 对 MC-1 受 体 的 效 应, 使 黑 色 素 不 能 生 [32] 成 而 产 生 黄 色 皮 肤 遥 因 此 推 测 Agouti 蛋 白 还 有 可 能 [33] 抑 制 MSH 对 在 下 丘 脑 表 达 的 MC-4 受 体 的 效 应 遥 这 些 研 究 结 果 表 明 袁 虽 然 NPY 和 MSH 在 调 控 系 统 中 起 不 同 作 用 袁 而 且 NPY 和 MSH 在 大 脑 不 同 区 域 表 达 袁 但 它 们 之 间 存 在 着 广 泛 的 联 系 和 相 互 作 用 遥 神 经 系 统 参 与 下 袁 leptin 可 直 接 参 与 脂 肪 代 谢 的 调 节 遥 leptin 可 促 进 脂 肪 细 胞 的 成 熟 袁 其 作 用 是 促 进 脂 肪 前 4 leptin 在 畜 牧 业 上 的 应 用 前 景 目 前 袁 国 内 外 对 leptin 的 生 物 学 功 能 尧 基 因 表 达 体 细 胞 向 脂 肪 细 胞 的 转 变 袁 即 促 进 脂 肪 细 胞 的 成 熟 袁 从 而 导 致 肥 胖 遥 leptin 也 可 选 择 性 地 增 加 棕 色 和 白 色 [29] 脂 肪 的 产 热 酶 和 脂 解 酶 袁 如 非 偶 联 蛋 白 1 和 2 尧 脂 蛋 白 脂 酶 尧 激 素 敏 感 脂 酶 袁 而 脂 肪 酸 合 成 酶 尧 内 源 性 leptin 和 细 胞 色 素 c 氧 化 酶 的 mrna 表 达 减 少 袁 导 致 脂 肪 迅 速 分 解 遥 机 体 静 脉 内 注 入 leptin 可 通 过 促 进 一 调 控 研 究 已 经 较 为 详 尽 遥 从 目 前 国 内 外 有 关 报 道 来 看 袁 主 要 集 中 在 leptin 对 母 畜 繁 殖 性 能 以 及 控 制 人 的 肥 胖 方 面 的 研 究 遥 而 leptin 对 繁 殖 性 能 的 影 响 也 是 通 过 调 节 母 畜 体 脂 肪 沉 积 来 实 现 的 遥 因 此 可 知 袁 leptin 的 主 要 生 理 功 能 就 是 调 节 能 量 代 谢 遥 leptin 对 家 畜 脂 肪 组 织 和 神 经 内 分 泌 有 显 著 的 调 控 作 用 袁 通 过 采 食 量 和 46

47 营 养 研 究 邹 增 丁 等 : 瘦 素 对 机 体 代 谢 调 控 研 究 进 展 及 其 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 家 畜 能 量 平 衡 的 调 节 可 促 进 家 畜 的 生 长 尧 繁 殖 尧 泌 乳 和 体 况 遥 因 此 袁 leptin 可 被 称 为 动 物 真 正 的 野 代 谢 修 饰 因 子 冶 遥 了 解 leptin 调 节 脂 肪 尧 采 食 量 尧 能 量 代 谢 的 内 在 机 制 对 研 究 新 的 营 养 重 新 分 配 袁 提 高 畜 禽 胴 体 品 质 袁 改 善 动 物 生 长 性 能 及 保 护 动 物 健 康 方 面 极 具 应 用 价 值 和 经 济 价 值 遥 另 外 袁 在 家 畜 的 遗 传 育 种 中 袁 可 针 对 leptin 基 因 进 行 mrna 限 制 性 片 段 长 度 多 态 性 (RFLP) 的 选 择 袁 从 而 提 高 畜 牧 业 生 产 水 平 遥 参 考 文 献 1 茹 娟, 李 宁, 吴 常 信 援 猪 肥 胖 基 因 cdna 的 克 隆 与 分 析 [J] 援 遗 传 学 报,2000,27(4):290~293 2 戴 茹 娟, 李 宁, 吴 常 信 援 猪 肥 胖 基 因 (Ob) 部 分 序 列 的 克 隆 与 多 态 性 分 析 [J] 援 遗 传,1997,19:29~33 3 Zhang Y, Proenca R, Maffei M, et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue [J]. Nature, 1994,372:425~432 4 Tartaglia LA, Dembski M,Weng X,et al. Identification and expression cloning of aleptin receptor, OB 原 R[J]. Cell, 1995,83:1 263~ Banks WA, Kastin AJ, Huang W, et al. leptin enters the brain by a saturable system independent of insulin [J]. Peptides, 1996,17:305~ Masuzaki H, Ogawa Y, Isse N, et al. Human obese gene expression. Adipocyt -e specificexpression and regional differences in the adipose tissue[j]. Diabetes,1995,44:855~858 7 Senaris R, Garcia 原 Caballero T, Casabiell X, et al. Synthesis of leptin in hum-an placenta[j]. Endocrinology,1997,138:4 501~ 单 安 山, 徐 奇 友 援 动 物 脂 肪 代 谢 与 调 控 [J] 援 东 北 农 业 大 学 学 报, 2004,35(6):216 耀 何 静, 王 平 芳 援 脂 肪 细 胞 分 化 的 分 子 机 制 研 究 进 展 [J] 援 国 外 医 学 生 理 病 理 科 学 与 临 床 分 册,2004,24(5):442 耀 吴 玲, 王 敏, 占 秀 安. 脂 肪 沉 积 的 分 子 调 控 机 制 [J]. 中 国 饲 料,2006 (12):15~17 11 Satoh N,Ogawa Y,Katsuura G,et al.the arcuate nucleus as a primary site of satiety effect of leptin in rats[j].neurosci.lett.,1997, 224:149~ Pelleymounter MA, Cullen MJ, Baker MB, et al. Effects of the obese gene product on body weight regulation in ob/ob mice[j]. Science,1995,269:540~ Halaas JL,Gajiwala KS,Maffei M,et al.weight 原 reducing effects of the plasma protein encoded by the obese gene[j].science,1995,269: 543~ 王 舒 然, 麻 微 微, 牛 玉 存, 等. 铬 鱼 油 对 肥 胖 模 型 大 鼠 瘦 素 和 胰 岛 素 的 影 响 [J]. 卫 生 研 究,2006,35(1):43~45 15 Niki T, Mori H, Taori Y, et al. Human obese gene. Molecular screening in Japanese and Asian Indian NIDDM patients associated with obesity[j]. Diabetes,1996,45:657~ Considine RV,Considine EL,Williams CJ, et al. Mutation screening and identificatio of asequence variation in the human OB gene 47 coding region[j]. Biochem. Biophy. Res. Commun., 1996, 220:735~ 牛 淑 玲, 张 才, 王 哲, 等. 外 源 性 牛 重 组 瘦 蛋 白 (leptin) 对 初 生 小 牛 脂 肪 细 胞 形 态 及 甘 油 三 酯 含 量 的 影 响 [J]. 中 国 兽 医 学 报, 2005,25(3):295~ Lee GH, Proenca R, Montez JM, et al.abnormal splicing of the leptin receptor on diabetic mice[j]. Nature,1996,379:632~ Iida M,Murakami T,Ishida K,et al. Phenotype 原 linked amino acid alteration in leptin receptor cdna from Zucker fatty (fa/fa) rat [J]. Biochim. Biophys. Res. Commun.,1996,222:19~26 20 Considine RV,Sinha Mk,Heiman ML,et al.serum immunoreactive leptin concentrations in normal 原 weight and obese humans. N. Engl. J. Med.,1996,334:292~ Maffei M,Halaas J,Rayussin E,et al.leptin levels in human and rodent:measurement of plasms leptin and ob RNA in obese and weight 原 reduced subjects[j]. N-ature Med.,1995(1):1 155~ Clement K,Vaisse C,Lahlou N,et al.a mutation in the human leptin receptorgene cause obesity and pituitary dysfunction [J]. Nature, 1998,392:398~ Hirose H, Saito I, Tsujioka M, et al. The obese gene product,leptin: possible role in obesity 原 related hypertension in adolescents [J]. J Hypertens,1998,16:2 007~ William GH,Donald AM, Morgan SA,et al.receptor 原 mediated regional sympat-hetic nerve activation by leptin [J]. JClin Invest, 1997,100:270~ Jackson EK,Li P.Human leptin may function as adiuretic/natriuretic hormone[j]. Hypertension, 1996, 28:517~ Sierra 原 Honigmann MR,Nath AK,Murakami C,et al.biological action of leptin as an angiogenic factor[j]. Science,1998,281:1 683~ Gema Friihbeck.Pivotal role of nitric oxide in the control of blood pressure af-ter leptin administration[j]. Diabetes,1999,48:903~ Lembo G,Vecchione C,Fratta L,et al.leptin induce nitric oxide 原 mediated Vasor elaxation in aortic rings of WKY rats (Abstract)[J]. Hypertension,1998,32:599~ Eugene WS, Michael WB, John EH.Chronic leptin infusion increase arterial pr-essure[j]. Hypertension, 1998, 31:409~ Wellens D,Wouters L,Nijkamp FP,et al.distribution of the blood flow supplied by the vertebral arteral in rats:anatomical,functional and harmacological aspects[j]. Experimentia,1976,32:85~87 31 Dunber JG, Hu Y, Lu H, et al. Intracerebroventricuar leptin increase lumbar an-d renal sympathetic nerve activity and blood pressure in normal rats[j]. Diabetes, 1997, 46:2 040~ Zhang Y, Proenca R, Maffei M, et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue[j].nature,1994,372: 425~ Saladan R, de vos p, Guerremillo M 援 Transient increase in obese gene expression after food intake or insulin administration [J] 援 Nature,1995,377:527~529 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

48 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 营 养 研 究 芽 孢 杆 菌 的 作 用 机 理 及 其 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 的 应 用 研 究 张 秀 文 齐 遵 利 刘 艳 琴 随 着 生 物 技 术 的 发 展 袁 益 生 素 在 生 活 和 生 产 中 的 作 用 越 来 越 重 要 遥 从 应 用 范 围 讲 袁 在 药 品 尧 食 品 尧 饲 料 尧 饮 料 尧 肥 料 尧 生 物 尧 纺 织 以 及 环 境 处 理 等 方 面 无 处 不 用 袁 而 且 都 具 有 良 好 的 经 济 效 益 遥 1999 年 袁 我 国 农 业 部 公 布 了 可 以 直 接 饲 喂 动 物 的 12 种 饲 料 级 微 生 物 添 加 剂 菌 种 院 干 酪 乳 杆 菌 尧 植 物 乳 杆 菌 尧 嗜 酸 性 乳 杆 菌 尧 粪 链 球 菌 尧 乳 链 球 菌 尧 枯 草 芽 孢 杆 菌 尧 纳 豆 芽 孢 杆 菌 尧 乳 酸 片 球 菌 尧 啤 酒 酵 母 尧 产 朊 假 丝 酵 母 尧 沼 泽 红 假 单 胞 菌 尧 曲 霉 遥 目 前 袁 国 内 外 市 场 上 的 益 生 素 主 要 以 芽 孢 杆 菌 尧 乳 酸 菌 及 酵 母 菌 为 主 遥 生 产 上 益 生 素 的 使 用 形 式 有 两 种 院 一 种 为 单 一 菌 属 组 成 的 单 一 型 制 剂 曰 另 一 种 为 多 种 不 同 菌 属 组 成 的 复 合 菌 制 剂 遥 乳 酸 杆 菌 和 链 球 菌 对 维 持 肠 道 微 生 物 菌 群 的 平 衡 具 有 重 要 作 用 袁 早 期 人 们 主 要 使 用 乳 酸 杆 菌 和 链 球 在 一 定 条 件 下 袁 芽 孢 能 够 长 时 间 保 存 袁 可 以 保 证 益 生 菌 制 品 的 有 效 期 遥 所 有 菌 属 中 芽 孢 杆 菌 是 最 理 想 的 微 生 物 添 加 剂 遥 大 量 试 验 证 明 袁 芽 孢 杆 菌 添 加 剂 具 有 类 似 于 泰 乐 菌 素 的 效 果 袁 可 明 显 改 善 机 体 内 菌 群 组 成 和 具 有 促 生 长 的 功 效 袁 并 且 芽 孢 杆 菌 在 颗 粒 料 尧 粉 料 的 加 工 过 程 中 以 及 酸 性 环 境 中 具 有 较 高 稳 定 性 袁 在 肠 道 内 环 境 中 能 发 挥 作 用 而 增 殖 袁 符 合 微 生 物 添 加 剂 的 条 件 遥 芽 孢 杆 菌 在 肠 道 酸 性 环 境 中 具 有 高 度 的 稳 定 性 袁 能 分 泌 较 强 活 性 的 蛋 白 酶 及 淀 粉 酶 袁 促 进 饲 料 营 养 物 质 的 消 化 遥 芽 孢 杆 菌 可 以 减 少 粪 和 消 化 道 中 的 大 肠 埃 希 氏 菌 数 量 遥 目 前 使 用 的 菌 株 有 枯 草 芽 孢 杆 菌 (Bacil 鄄 lussbtilis) 尧 地 衣 芽 孢 杆 菌 (Bacilluslicheniformis) 尧 蜡 样 芽 孢 杆 菌 (Bacilluscereus) 尧 东 洋 芽 孢 杆 菌 (Bacillustoyoi) 等 遥 菌 属 作 为 调 节 和 维 持 肠 道 平 衡 的 益 生 素 遥 然 而 这 些 微 2 芽 孢 杆 菌 的 作 用 机 理 生 物 较 不 稳 定 袁 不 能 耐 受 饲 料 加 工 袁 也 不 宜 长 期 存 放 遥 而 芽 孢 杆 菌 属 以 孢 子 形 式 存 在 袁 芽 孢 的 耐 受 性 较 强 袁 2.1 拮 抗 病 原 微 生 物 袁 维 持 和 调 节 微 生 态 平 衡 有 研 究 表 明 袁 动 物 肠 道 内 寄 居 的 微 生 物 主 要 为 厌 可 以 耐 受 饲 料 加 工 尧 储 藏 和 胃 的 酸 性 环 境 袁 可 以 在 肠 道 萌 发 成 为 具 有 新 陈 代 谢 作 用 的 营 养 细 胞 遥 因 而 针 对 芽 孢 杆 菌 的 研 究 逐 渐 增 多 遥 氧 菌 遥 通 常 情 况 下 袁 肠 道 内 有 益 菌 和 致 病 菌 保 持 一 定 比 例 袁 当 条 件 发 生 改 变 时 袁 这 种 平 衡 失 调 袁 致 病 菌 大 量 繁 殖 袁 从 而 导 致 动 物 体 患 病 遥 当 需 氧 型 益 生 菌 进 入 消 1 芽 孢 杆 菌 的 概 况 芽 孢 杆 菌 属 于 芽 孢 杆 菌 科 尧 芽 孢 杆 菌 属 袁 模 式 种 化 道 后 袁 生 长 繁 殖 消 耗 肠 道 内 的 大 量 氧 气 袁 通 过 野 生 物 夺 氧 冶 使 需 氧 型 致 病 菌 数 量 大 幅 度 下 降 袁 因 而 起 到 防 为 枯 草 芽 孢 杆 菌 袁 是 可 形 成 内 生 孢 子 要 芽 孢 的 革 兰 氏 阳 性 杆 菌 袁 需 氧 或 兼 性 需 氧 袁 具 有 鞭 毛 遥 芽 孢 杆 菌 广 泛 分 布 于 土 壤 尧 空 气 尧 水 和 动 物 肠 道 中, 其 稳 定 性 强, 芽 孢 一 旦 形 成, 便 能 耐 受 各 种 不 利 条 件, 如 干 热 渊 150 益 干 热 1h 仍 有 芽 孢 存 活 冤 尧 湿 热 尧 紫 外 线 尧 强 酸 尧 强 碱 尧 有 机 溶 剂 尧 极 度 干 燥 尧 真 空 干 燥 尧 氧 化 剂 的 氧 化 作 用 等 遥 止 动 物 患 病 的 作 用 遥 田 允 波 等 渊 1999 冤 指 出 袁 一 般 情 况 下 袁 猪 尧 鸡 肠 道 内 优 势 种 群 为 厌 氧 菌 袁 占 99% 以 上 袁 而 需 氧 菌 和 兼 性 厌 氧 菌 只 占 1% 遥 以 益 生 菌 形 式 添 加 好 氧 菌 特 别 是 芽 孢 杆 菌 能 特 异 性 地 增 殖 某 些 好 氧 菌 袁 它 们 在 繁 殖 过 程 中 消 耗 肠 道 内 的 氧 气 袁 造 成 局 部 厌 氧 环 境 袁 促 进 有 益 厌 氧 菌 的 生 长 袁 同 时 抑 制 需 氧 和 兼 性 厌 氧 病 原 菌 的 生 长 袁 从 而 把 失 调 菌 群 恢 复 到 正 常 状 态 遥 研 究 还 发 现 袁 益 生 菌 能 够 有 秩 序 地 定 植 于 粘 膜 尧 张 秀 文, 河 北 农 业 大 学 海 洋 学 院,066003, 秦 皇 岛 市 海 港 区 河 北 大 街 东 段 52 号 齐 遵 利, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 刘 艳 琴, 河 北 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 收 稿 日 期 : 皮 肤 等 表 面 或 细 胞 之 间 形 成 生 物 屏 障 袁 这 些 屏 障 可 以 阻 止 病 原 微 生 物 的 定 植 袁 起 着 占 位 尧 争 夺 营 养 尧 互 利 共 生 或 拮 抗 作 用 袁 形 成 保 护 屏 障 袁 阻 止 病 原 菌 的 侵 入 袁 从 而 对 致 病 菌 的 定 植 产 生 抑 制 作 用 遥 淳 泽 等 渊 1994 冤 通 过 体 外 生 物 试 验 表 明 袁 芽 孢 杆 菌 对 致 病 性 猪 大 肠 杆 菌 尧 48

49 营 养 研 究 张 秀 文 等 : 芽 孢 杆 菌 的 作 用 机 理 及 其 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 的 应 用 研 究 猪 霍 乱 沙 门 氏 菌 尧 鸡 大 肠 杆 菌 尧 鸡 白 痢 沙 门 氏 菌 有 拮 抗 作 用 遥 抗 病 能 力 遥 Fuller(1989) 指 出 袁 直 接 饲 喂 活 的 微 生 物 可 刺 激 动 物 免 疫 器 官 发 育 袁 提 高 动 物 抗 体 水 平 或 巨 噬 细 2.2 产 生 有 益 代 谢 产 物 益 生 素 在 动 物 消 化 道 内 可 产 生 水 解 酶 尧 发 酵 酶 和 胞 活 性 袁 增 强 机 体 免 疫 功 能 遥 潘 康 成 等 渊 1996 冤 研 究 认 为 袁 地 衣 芽 孢 杆 菌 的 免 疫 呼 吸 酶 等 多 种 消 化 酶 袁 有 利 于 降 解 饲 料 中 蛋 白 质 尧 脂 肪 和 复 杂 的 碳 水 化 合 物 袁 促 进 动 物 的 消 化 吸 收 袁 从 而 提 高 饲 料 转 化 率 遥 Sogarrd 渊 1990 冤 报 道 袁 枯 草 芽 孢 杆 菌 和 地 衣 芽 孢 杆 菌 具 有 较 强 的 蛋 白 酶 尧 淀 粉 酶 活 性 袁 同 时 还 能 降 解 木 聚 糖 尧 地 衣 聚 糖 尧 果 胶 尧 羧 甲 基 纤 维 素 尧 促 进 作 用 是 机 体 经 口 服 芽 孢 杆 菌 后 袁 在 肠 道 淋 巴 组 织 集 合 的 抗 原 结 合 位 点 上 直 接 作 为 免 疫 佐 剂 袁 或 者 通 过 调 整 宿 主 体 内 的 微 生 物 群 袁 尤 其 是 双 歧 杆 菌 群 起 主 导 袁 间 接 地 发 挥 免 疫 佐 剂 的 作 用 袁 提 高 机 体 局 部 或 全 身 防 御 功 能 遥 多 聚 半 乳 糖 醛 酸 以 及 其 它 一 些 复 杂 的 植 物 性 碳 水 化 合 物 遥 邝 哲 师 等 渊 2005 冤 报 道 袁 在 断 奶 仔 猪 基 础 日 粮 中 3 芽 孢 杆 菌 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 的 应 用 益 生 素 制 剂 应 用 于 动 物 生 产 上 已 有 几 十 年 历 史 遥 添 加 0.1% 芽 孢 杆 菌 制 剂 饲 养 2 周 后 袁 添 加 芽 孢 杆 菌 制 剂 的 试 验 组 比 对 照 组 胃 蛋 白 酶 活 性 提 高 58.68% 袁 胰 淀 粉 酶 活 性 提 高 24.05%, 回 肠 内 蛋 白 酶 和 淀 粉 酶 活 性 分 别 提 高 61.0% 和 20.30%, 差 异 均 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 芽 孢 杆 菌 在 肠 道 内 生 长 繁 殖 过 程 中 袁 能 产 生 乳 酸 或 蛋 白 多 肽 类 拮 抗 物 质 袁 一 方 面 可 降 低 肠 道 ph 值 袁 抑 制 有 害 微 生 物 繁 殖 曰 另 一 方 面 袁 有 助 于 动 物 渊 特 别 是 幼 小 动 物 冤 对 营 养 物 质 的 消 化 袁 尤 其 是 对 蛋 白 质 的 消 化 吸 收 遥 人 们 最 早 研 究 和 使 用 益 生 素 的 历 史 可 以 追 溯 到 1947 年 袁 Mollgaard 首 次 使 用 乳 酸 杆 菌 饲 喂 仔 猪 袁 结 果 显 示 袁 乳 酸 杆 菌 可 有 效 增 加 仔 猪 体 重 和 提 高 健 康 状 况 遥 我 国 益 生 素 的 应 用 研 究 开 始 于 20 世 纪 80 年 代 袁 何 明 清 教 授 用 由 大 肠 杆 菌 SY-30 菌 株 制 成 的 制 剂 防 治 仔 猪 腹 泻 遥 总 体 来 说 袁 在 饲 料 日 粮 中 加 入 益 生 素 可 提 高 动 物 生 长 速 度 尧 改 善 饲 料 利 用 率 尧 减 少 疾 病 尧 改 善 产 品 品 质 尧 提 高 动 物 免 疫 力 遥 林 小 伟 等 渊 1994 冤 用 芽 孢 杆 菌 复 合 菌 剂 饲 喂 哺 乳 2.3 增 强 动 物 免 疫 能 力 仔 猪 肠 道 感 染 时 袁 肠 道 的 正 常 微 生 物 调 动 肠 壁 固 仔 猪 发 现 袁 芽 孢 杆 菌 有 助 于 仔 猪 建 立 正 常 的 微 生 物 菌 群 袁 排 除 或 控 制 潜 在 的 病 原 体 袁 促 进 仔 猪 消 化 功 能 和 有 层 的 免 疫 细 胞 通 过 免 疫 反 应 形 成 机 体 的 第 二 道 防 线 遥 肠 道 细 菌 和 其 它 抗 原 进 入 机 体 的 主 要 通 道 是 通 过 M 细 胞 的 传 递 袁 酝 细 胞 将 抗 原 传 递 给 抗 原 递 呈 细 胞 渊 位 于 肠 上 皮 细 胞 内 的 巨 噬 细 胞 和 月 细 胞 冤 袁 抗 原 递 呈 细 胞 将 抗 原 递 呈 给 邻 近 的 栽 细 胞 袁 引 起 反 应 性 栽 细 胞 的 增 殖 遥 栽 细 胞 被 激 活 的 同 时 袁 月 细 胞 也 被 激 活 袁 通 过 外 周 游 离 肠 道 固 有 层 袁 开 始 分 泌 特 异 性 的 抗 体 遥 分 泌 型 IgA 由 固 有 层 的 B 细 胞 分 泌 到 肠 腔 袁 将 病 原 菌 包 裹 起 来 袁 防 止 其 粘 附 和 促 进 肠 道 将 病 原 菌 排 出 体 外 遥 在 仔 猪 出 生 后 的 第 员 周 主 要 依 靠 母 乳 的 抗 体 和 非 免 疫 因 子 来 保 护 遥 益 生 素 可 以 成 为 非 特 异 性 免 疫 调 节 因 子 袁 通 过 细 菌 本 身 或 细 胞 壁 成 分 刺 激 动 物 的 免 疫 细 胞 袁 使 其 激 活 袁 增 强 吞 噬 细 胞 的 吞 噬 能 力 和 B 淋 巴 细 胞 产 生 抗 体 的 能 力 袁 刺 激 动 物 产 生 干 扰 素 袁 从 而 增 强 抗 病 能 力 遥 芽 免 疫 功 能 的 加 强 与 完 善 袁 从 而 促 进 生 长 袁 提 高 饲 料 利 用 率 袁 但 对 仔 猪 抗 病 力 无 明 显 的 增 强 作 用 遥 陈 旭 东 等 渊 2003 冤 研 究 发 现 袁 蜡 样 芽 孢 杆 菌 能 产 生 细 菌 素 并 可 以 拮 抗 致 病 菌 曰 用 0.2% 的 芽 孢 杆 菌 饲 喂 35 日 龄 仔 猪 袁 日 增 重 显 著 提 高 渊 P<0.01 冤 袁 料 重 比 和 腹 泻 率 显 著 降 低 (P<0.05) 遥 霍 军 等 渊 2004 冤 通 过 在 生 长 肥 育 猪 饲 料 中 添 加 凝 结 芽 孢 杆 菌 制 剂 与 抗 生 素 对 比 研 究 表 明 袁 饲 料 中 添 加 100 mg/kg 凝 结 芽 孢 杆 菌 制 剂 可 显 著 提 高 平 均 日 增 重 袁 降 低 饲 料 成 本 和 沙 门 氏 菌 阳 性 率, 饲 养 效 果 与 添 加 100 mg/kg 抗 生 素 没 有 显 著 差 异 遥 但 也 有 一 些 其 它 报 道 表 明 袁 芽 孢 杆 菌 没 有 明 显 作 用 遥 虞 泽 鹏 渊 2002 冤 试 验 研 究 表 明 袁 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0.4 豫 益 生 素 对 仔 猪 体 重 无 显 著 影 响 袁 日 增 重 和 料 重 比 无 明 显 改 善 袁 但 有 降 低 仔 猪 腹 泻 尧 改 善 胃 肠 功 能 的 趋 势 遥 孢 杆 菌 能 促 进 肠 道 相 关 淋 巴 组 织 的 免 疫 功 能 袁 使 之 处 于 高 度 反 应 的 野 准 备 状 态 冶 袁 同 时 使 免 疫 器 官 的 发 育 增 4 影 响 芽 孢 杆 菌 制 剂 使 用 效 果 的 因 素 在 饲 料 中 添 加 芽 孢 杆 菌 等 益 生 素 制 剂 的 目 的 是 快 袁 免 疫 系 统 的 成 熟 度 快 而 早 袁 T 尧 B 淋 巴 细 胞 的 数 量 增 多 袁 使 动 物 的 体 液 和 细 胞 免 疫 水 平 提 高 袁 增 强 机 体 提 高 畜 禽 生 产 性 能 袁 增 加 畜 产 品 产 出 量 袁 降 低 饲 养 成 本 袁 提 高 产 品 品 质 袁 主 要 表 现 在 提 高 仔 猪 成 活 率 尧 降 低 49

50 张 秀 文 等 : 芽 孢 杆 菌 的 作 用 机 理 及 其 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 的 应 用 研 究 营 养 研 究 死 亡 率 尧 减 少 下 痢 尧 提 高 采 食 量 和 日 增 重 尧 提 高 饲 料 转 化 率 尧 减 少 发 病 率 尧 改 善 环 境 质 量 等 方 面 遥 但 也 正 如 其 它 饲 料 添 加 剂 渊 如 抗 生 素 尧 饲 用 酶 制 剂 尧 酸 化 剂 冤 一 样 袁 芽 孢 杆 菌 制 剂 的 使 用 效 果 也 受 到 诸 多 因 素 的 影 响 遥 4.1 使 用 时 段 当 仔 猪 微 生 物 菌 群 状 况 良 好 时 袁 益 生 素 对 肠 道 变 化 和 生 产 性 能 的 影 响 可 能 较 小 袁 有 试 验 结 果 表 明 袁 在 出 生 前 期 尧 食 物 改 变 尧 应 激 时 使 用 微 生 态 制 剂 会 取 得 理 想 效 果 遥 乔 宏 宇 等 渊 1994 冤 在 研 究 复 合 活 菌 制 剂 对 仔 猪 生 产 性 能 影 响 的 研 究 中 发 现 袁 动 物 处 于 应 激 期 是 使 用 复 合 活 菌 制 剂 发 挥 作 用 最 好 的 前 提 条 件 遥 一 般 在 动 物 出 生 尧 断 奶 尧 转 群 3 个 关 键 时 期 袁 在 仔 猪 日 粮 中 添 加 微 生 态 制 剂 效 果 较 好 遥 断 奶 仔 猪 从 吃 奶 到 采 食 植 物 性 饲 料 的 改 变 过 程 中 袁 常 会 发 生 严 重 的 消 化 问 题 袁 此 时 适 时 地 添 加 益 生 素 对 防 止 腹 泻 尧 提 高 日 增 重 能 起 到 理 想 的 效 果 遥 4.2 添 加 量 为 了 保 证 有 益 菌 能 够 发 挥 作 用 袁 适 宜 的 添 加 量 是 重 要 的 遥 添 加 量 不 足 不 能 达 到 预 期 效 果 袁 但 添 加 过 量 反 而 会 使 增 重 和 饲 料 转 化 率 变 差 袁 造 成 饲 料 成 本 上 升 遥 因 为 微 生 物 本 身 的 繁 殖 也 需 要 消 耗 能 量 袁 过 多 的 微 生 物 会 同 动 物 本 身 微 生 物 争 夺 营 养 物 质 遥 4.3 日 粮 营 养 水 平 日 粮 蛋 白 质 和 限 制 性 氨 基 酸 的 平 衡 程 度 影 响 着 益 生 素 的 使 用 效 果 袁 在 低 蛋 白 质 或 氨 基 酸 不 平 衡 的 日 粮 中 添 加 更 为 有 效 遥 Newman(1988) 报 道 袁 在 低 蛋 白 质 且 未 添 加 赖 氨 酸 的 日 粮 中 添 加 益 生 素 袁 生 长 猪 的 平 均 日 增 重 和 饲 料 效 率 分 别 提 高 14 豫 和 7 豫 袁 但 在 蛋 白 质 和 赖 氨 酸 都 满 足 的 平 衡 日 粮 中 添 加 袁 上 述 两 项 指 标 反 而 不 如 对 照 组 遥 4.4 抗 生 素 各 种 抗 生 素 对 各 类 益 生 素 的 抑 制 作 用 不 一 袁 若 是 益 生 素 与 有 强 烈 抑 制 作 用 的 抗 生 素 同 时 使 用 袁 可 能 会 影 响 其 效 果 遥 因 此 袁 在 使 用 前 需 了 解 各 种 抗 生 素 与 所 用 益 生 素 之 间 的 关 系 遥 有 时 两 者 同 时 使 用 也 会 产 生 协 同 作 用 袁 现 在 大 多 数 研 究 认 为 两 者 可 以 在 一 定 程 度 上 联 合 使 用 袁 即 先 用 抗 生 素 处 理 肠 道 袁 杀 灭 有 害 微 生 物 袁 再 添 加 益 生 素 补 充 肠 道 有 益 微 生 物 的 数 量 遥 4.5 环 境 卫 生 若 供 试 畜 禽 饲 养 环 境 卫 生 条 件 极 差 致 使 动 物 肠 道 中 栖 居 有 高 浓 度 的 微 生 物 袁 有 益 菌 不 能 轻 易 竞 争 取 50 代 这 些 微 生 物 袁 则 作 用 效 果 可 能 较 差 或 需 加 大 提 高 有 益 菌 的 添 加 量 遥 卫 生 状 况 好 的 动 物 使 用 效 果 会 好 些 遥 但 在 卫 生 条 件 差 的 动 物 肠 道 中 袁 一 旦 有 益 菌 竞 争 定 居 并 繁 殖 袁 其 效 果 会 更 显 著 遥 5 芽 孢 杆 菌 的 应 用 前 景 为 了 保 证 食 品 卫 生 安 全 袁 发 展 绿 色 畜 牧 业 袁 将 会 禁 止 使 用 抗 生 素 作 为 饲 料 添 加 剂 袁 抗 生 素 替 代 物 的 研 究 应 用 已 是 必 然 趋 势 遥 因 此 必 需 开 发 无 毒 副 作 用 尧 无 残 留 尧 无 耐 药 性 尧 不 污 染 环 境 的 抗 生 素 添 加 剂 替 代 用 品 袁 由 于 芽 孢 杆 菌 制 剂 全 面 具 备 这 些 性 能 袁 而 且 在 使 用 过 程 中 具 有 很 高 的 稳 定 性 袁 可 在 饲 料 中 直 接 添 加 袁 方 便 实 用 遥 因 此 越 来 越 受 到 专 家 学 者 和 生 产 经 营 者 的 重 视 袁 应 用 前 景 十 分 广 阔 遥 参 考 文 献 1 Fuller RJ. Probiotics in man and animals[j]. Appl. Bacteriol., 1989, 66:365~378 2 何 明 清. 我 国 动 物 微 生 态 制 剂 的 起 源 发 展 战 略 及 应 用 前 景 [J]. 中 国 微 生 态 学 杂 志,2001(3):166~167 3 田 允 波, 葛 长 荣, 张 曦, 等. 益 生 菌 的 研 究 和 应 用 现 状 [J]. 兽 药 与 饲 料 添 加 剂,1999,4(3):36~39 4 淳 泽, 何 明 清. 芽 孢 杆 菌 对 肠 道 致 病 菌 体 外 生 物 拮 抗 作 用 的 研 究 [J]. 四 川 农 业 大 学 学 报,1994,12:627~634 5 Sogarrd H. Microbials for feed: Beyond lactic acid bacteria. Feed[J]. International. Nov., 1990,4:22~37 6 邝 哲 师, 田 兴 山, 张 玲 华, 等. 芽 孢 杆 菌 制 剂 对 断 奶 仔 猪 体 内 消 化 酶 活 性 的 影 响 [J]. 中 国 畜 牧 兽 医,2005,32(6):17~18 7 李 桂 杰, 张 钧 利, 徐 海 燕. 益 生 素 对 肉 用 仔 鸡 生 产 性 能 和 肠 道 微 生 物 的 影 响 [J]. 饲 料 博 览,2000(1):43~44 8 潘 康 成, 吕 道 俊, 何 明 清. 正 常 菌 群 对 动 物 免 疫 功 能 的 影 响 研 究 进 展 [J]. 饲 料 工 业,1996,20(9):24~26 9 林 小 伟, 何 志 刚. 不 同 芽 孢 杆 菌 复 合 菌 剂 饲 喂 哺 乳 仔 猪 效 果 比 较 [J]. 四 川 农 业 大 学 学 报,1994,12( 增 刊 ):27~28 10 陈 旭 东, 马 秋 刚, 计 成. 芽 孢 杆 菌 和 果 寡 糖 对 断 奶 仔 猪 肠 道 菌 群 的 影 响 [J]. 中 国 饲 料,2003(18):11~13 11 霍 军, 程 会 昌, 宋 予 震. 抗 生 素 与 芽 孢 杆 菌 制 剂 对 猪 生 产 性 能 影 响 的 比 较 研 究 [J]. 现 代 畜 牧 兽 医,2004(11):19~20 12 陈 旭 东, 马 秋 刚, 胥 传 来, 等. 芽 孢 杆 菌 和 寡 糖 在 仔 猪 营 养 中 的 应 用 [J]. 农 产 品 市 场 周 刊,2004(2):36~39 13 虞 泽 鹏, 谢 启 轮, 唐 举, 等. 益 生 素 对 断 奶 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 [J]. 河 北 畜 牧 兽 医,2002,18(5):17~18 14 乔 宏 宇, 郎 仲 武, 董 克 苏, 等. 接 续 产 酸 型 活 菌 制 剂 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 及 机 理 初 探 [J]. 吉 林 农 业 大 学 学 报,1994,16(2):74~80 15 梁 明 振, 梁 贤 成, 林 空 东, 等. 动 物 微 生 态 制 剂 的 研 究 进 展 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业,2003(1):28~30 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

51 检 测 技 术 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 动 物 尿 液 中 莱 克 多 巴 胺 检 测 方 法 的 研 究 探 讨 丁 美 方 邓 程 君 王 有 月 摘 要 DB33/T 方 法 是 目 前 检 测 动 物 尿 液 中 莱 克 多 巴 胺 的 有 效 方 法, 但 也 存 在 一 些 不 足 之 处, 对 此 方 法 的 前 处 理 过 程 和 色 谱 条 件 等 方 面 进 行 改 进 后, 用 气 相 色 谱 - 质 谱 法 (GC-MS) 对 猪 尿 液 中 莱 克 多 巴 胺 进 行 检 测, 回 收 率 可 大 大 提 高, 重 复 性 也 很 稳 定 且 改 进 后 的 方 法 操 作 简 便, 灵 敏 度 高 关 键 词 莱 克 多 巴 胺 ; 气 相 色 谱 - 质 谱 法 ; 方 法 改 进 ; 回 收 率 ; 重 复 性 中 图 分 类 号 S 莱 克 多 巴 胺 是 苯 乙 醇 胺 类 茁 2 原 肾 上 腺 素 兴 奋 剂 袁 如 果 给 动 物 饲 用 含 莱 克 多 巴 胺 的 饲 料 袁 会 造 成 肌 肉 及 组 织 中 不 同 程 度 的 残 留 袁 通 过 食 物 链 进 入 人 体 袁 使 消 费 者 出 现 不 同 程 度 的 中 毒 现 象 遥 为 保 障 人 民 的 身 体 健 康 和 生 命 安 全 袁 保 障 畜 牧 业 的 健 康 持 续 发 展 袁 我 国 已 经 明 确 将 其 列 入 禁 用 药 品 目 录 遥 对 于 动 物 尿 样 中 的 莱 克 多 巴 胺 的 检 测 袁 目 前 国 内 采 用 DB33/T539 要 2005 方 法 遥 但 此 方 法 存 在 一 些 不 足 之 处 袁 本 试 验 按 照 改 进 后 的 DB33/T539 要 2005 方 法 对 尿 样 进 行 前 处 理 袁 气 质 联 用 测 定 袁 发 现 效 果 良 好 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 主 要 仪 器 TRACEDSQ-GC 气 相 色 谱 - 质 谱 仪, 配 有 自 动 进 样 尧 ChemStation 工 作 站, 由 美 国 菲 尼 根 (Finnigan) 公 司 提 供 曰 ALC pk121r 高 速 冷 冻 离 心 机 曰 MS2 minishaker 漩 涡 混 合 器 曰 德 国 沙 多 利 斯 BT224 电 子 天 平 曰 Organ 鄄 matic 氮 吹 仪 曰 Waters 20 孔 固 相 萃 取 装 置 遥 1.2 主 要 材 料 与 试 剂 莱 克 多 巴 胺, 含 量 96.0%, 由 Dr.Ehrenstorfer GmbH Germany 公 司 生 产 ;BSTFA( 双 三 甲 基 硅 基 三 氟 乙 酰 胺 )+ TMCS 渊 三 甲 基 氯 硅 烷 冤 袁 由 美 国 SUPELCO 公 司 提 供 曰 甲 苯 袁 色 谱 纯, 由 美 国 TED IA 公 司 提 供 曰 试 验 用 水 为 milli2q 超 纯 水 ; 其 它 试 剂 均 为 分 析 纯 遥 固 相 萃 取 柱 由 硅 藻 土 和 硅 胶 柱 (SLH) 组 成, 规 格 为 500 mg/5 ml, 由 杭 州 富 裕 科 技 服 务 有 限 公 司 提 供 遥 1.3 标 准 溶 液 的 配 制 准 确 称 取 50 mg 莱 克 多 巴 胺 对 照 品 置 于 10 ml 容 量 瓶 中 袁 用 甲 醇 溶 解 后 定 容, 摇 匀, 为 对 照 品 储 备 液 渊 5mg/ml 冤, 置 于 -20 益 冰 箱 中 保 存 遥 使 用 时 用 甲 醇 溶 液 丁 美 方, 北 京 市 饲 料 监 察 所,100107, 北 京 市 朝 阳 区 安 外 北 苑 路 甲 15 号 邓 程 君 王 有 月, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 稀 释 至 所 需 浓 度 即 可 遥 1.4 仪 器 条 件 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 HP25 MS 5 豫 苯 基 甲 基 聚 硅 氧 烷 石 英 毛 细 管 柱 (30 m 伊 0.25 mm 伊 0.25 滋 m) 遥 升 温 程 序 院 150 益 保 持 3min, 以 25 益 /min 升 温 至 230 益 保 持 5min, 再 以 25 益 /min 上 升 到 280 益 保 持 5min 遥 进 样 口 温 度 300 益 ; 载 气 ( 高 纯 氦 ) 流 速 1.0 ml/min; 不 分 流 进 样, 进 样 量 1 滋 l 遥 质 谱 条 件 电 子 轰 击 (EI) 离 子 源 尧 电 子 倍 增 器 电 压 为 1506 V 尧 质 量 扫 描 范 围 为 30 耀 550 U 尧 离 子 源 温 度 230 益 尧 接 口 温 度 280 益 尧 溶 剂 延 迟 时 间 5min, 采 用 选 择 离 子 监 测 (SIM) 模 式 进 行 检 测, 选 择 离 子 为 m/z 179 尧 250 尧 267 尧 502 遥 1.5 样 品 处 理 提 取 量 取 尿 液 试 样 10.0 ml 至 50 ml 离 心 管 中, 用 1mol/l NaOH 溶 液 调 节 ph 值 为 10, 加 1g 氯 化 钠, 振 荡 数 秒, 加 10 ml 叔 丁 基 甲 醚 提 取, 中 速 振 荡 10 min,7 000 r/min 离 心 5min 袁 取 上 清 液 曰 重 复 提 取 1 次 袁 氮 气 吹 干 遥 净 化 用 2ml 乙 酸 乙 酯 溶 解 试 管 中 的 残 余 物, 过 固 相 萃 取 柱 ( 先 经 5ml 甲 醇 和 5ml 乙 酸 乙 酯 润 洗 ) 曰 另 取 3ml 30 豫 的 甲 醇 - 乙 酸 乙 酯 洗 涤 试 管 中 的 残 余 物 1 次 袁 过 柱 曰 再 用 5ml 50 豫 甲 醇 - 乙 酸 乙 酯 洗 脱 袁 氮 气 吹 干 遥 衍 生 和 测 定 蒸 发 剩 余 物 加 0.1 ml BSTFA+TMCS 袁 加 瓶 盖 于 漩 涡 混 合 器 上 涡 旋 1min 袁 在 80 益 的 烘 箱 中 加 热 1h 袁 氮 气 吹 干 袁 加 0.2 ml 甲 苯 溶 解 袁 上 机 遥 取 适 量 的 莱 克 多 巴 胺 标 准 工 作 溶 液 袁 氮 气 吹 干 袁 与 试 样 同 法 进 行 衍 生 化 遥 计 算 (ng/ml)= 伊 s 伊 伊 式 中 院 要 样 品 中 莱 克 多 巴 胺 含 量 渊 ng/ml 冤 曰 要 要 试 液 溶 液 的 峰 面 积 相 应 值 曰

52 丁 美 方 等 : 动 物 尿 液 中 莱 克 多 巴 胺 检 测 方 法 的 研 究 探 讨 检 测 技 术 要 要 标 液 的 峰 面 积 相 应 值 曰 2 结 果 与 讨 论 要 要 质 谱 测 定 对 应 莱 克 多 巴 胺 浓 度 渊 ng/ml 冤 曰 要 要 样 品 体 积 渊 ml 冤 曰 要 要 定 容 体 积 渊 ml 冤 遥 2.1 质 谱 定 性 尧 定 量 分 析 由 于 莱 克 多 巴 胺 是 沸 点 较 高 的 极 性 物 质, 且 含 有 羟 基 结 构, 直 接 采 用 气 相 色 谱 法 进 行 分 离 较 为 困 难 遥 为 了 改 善 其 气 相 色 谱 性 质, 在 进 行 仪 器 检 测 前 必 须 对 样 品 进 行 衍 生 化 遥 莱 克 多 巴 胺 经 BSTFA+TMCS 衍 生 化 后, 所 含 3 个 羟 基 上 的 氢 均 被 三 甲 基 硅 烷 所 取 代, 此 时 的 色 谱 形 状 良 好 袁 其 质 谱 图 见 图 1 遥 由 图 1 可 知, 莱 克 多 巴 胺 的 衍 生 物 在 m/z 250 尧 267 尧 179 尧 502 有 特 征 离 子, 这 些 碎 片 离 子 的 比 例 关 系 可 用 于 莱 克 多 巴 胺 的 定 性 分 析 遥 定 量 离 子 采 用 m/z 250, 因 为 此 特 征 离 子 既 有 一 定 的 丰 度, 并 且 受 杂 质 干 扰 较 少 遥 图 1 m/z 莱 克 多 巴 胺 的 质 谱 图 2.2 前 处 理 过 程 改 进 后 的 评 价 原 方 法 前 处 理 过 程 中 用 无 水 硫 酸 钠 过 滤 后 收 集 到 鸡 心 瓶 中 袁 然 后 旋 转 蒸 干, 这 两 步 都 极 容 易 造 成 损 失, 影 响 检 测 结 果 遥 我 们 经 过 多 次 试 验 得 出 : 提 取 过 程 不 经 无 水 硫 酸 钠 过 滤, 加 叔 丁 基 甲 醚 后 直 接 收 集 到 5ml 试 管 中 ; 也 不 用 旋 转 蒸 发 仪 蒸 干, 而 改 用 氮 气 吹 干, 但 要 控 制 其 流 速, 避 免 将 样 品 吹 飞 遥 这 样 避 免 了 原 方 法 中 由 于 鸡 心 瓶 的 面 积 过 大, 用 2ml 乙 酸 乙 酯 溶 解, 不 能 全 部 溶 解 而 造 成 的 损 失, 以 及 经 过 无 水 硫 酸 钠 过 滤 造 成 的 损 失 遥 2.3 方 法 改 进 后 的 回 收 率 尧 重 复 性 分 析 在 2.2 提 到 的 对 前 处 理 的 改 进 大 大 提 高 了 回 收 率 袁 同 一 份 猪 尿 每 个 浓 度 取 4 份 平 行 样 品, 在 1.4 中 的 条 件 下 对 添 加 了 20 ng/ml 和 40 ng/ml 莱 克 多 巴 胺 的 猪 尿 进 行 回 收 率 测 定 试 验 遥 运 用 原 方 法 测 定 的 结 果 计 算 回 收 率 和 相 对 标 准 偏 差 见 表 1 遥 由 表 1 可 以 看 出 袁 原 方 法 重 复 性 尧 回 收 率 都 偏 低 遥 52 项 目 20 ng/ml 40 ng/ml 表 原 方 法 测 定 猪 尿 中 莱 克 多 巴 胺 不 同 添 加 量 的 重 复 性 和 回 收 率 回 收 率 渊 豫 冤 平 均 回 收 率 渊 豫 冤 RSD 渊 豫 冤 运 用 改 进 后 的 方 法 测 定 的 结 果 计 算 回 收 率 和 相 对 标 准 偏 差 见 表 2 遥 由 表 2 可 以 看 出 袁 改 进 后 的 方 法 重 复 性 稳 定 袁 回 收 率 也 大 大 提 高 遥 项 目 20 ng/ml 40 ng/ml 表 方 法 改 进 后 测 定 猪 尿 中 莱 克 多 巴 胺 不 同 添 加 量 的 重 复 性 和 回 收 率 回 收 率 渊 豫 冤 平 均 回 收 率 渊 豫 冤 RSD 渊 豫 冤 色 谱 条 件 的 改 变 以 及 条 件 改 变 后 峰 形 对 称 性 的 比 较 分 析 原 方 法 色 谱 柱 的 升 温 程 序, 第 一 阶 升 温 速 率 慢, 用 时 长 ; 反 之, 第 二 阶 升 温 速 率 快, 导 致 基 线 整 体 向 上 漂 移, 使 柱 相 出 峰 过 于 集 中 而 且 靠 后, 峰 间 彼 此 分 离 效 果 变 差, 而 待 测 物 的 峰 相 恰 巧 就 出 现 在 基 线 上 移 的 地 方, 本 底 过 高, 峰 左 右 不 对 称, 造 成 积 分 不 准 遥 我 们 经 过 反 复 试 验 得 出 院 将 气 相 的 升 温 程 序 由 原 来 的 150 益 保 持 3min, 以 10 益 /min 升 温 至 230 益 保 持 10 min, 再 以 20 益 /min 上 升 到 280 益 保 持 10 min 遥 改 为 :150 益 保 持 3min, 以 25 益 /min 升 温 至 230 益 保 持 5min, 再 以 25 益 /min 上 升 到 280 益 保 持 5min 遥 图 2 RT 院 时 间 渊 min 冤 原 方 法 特 征 离 子 扫 描 图 谱 图 2 为 采 用 原 方 法 对 20 ng/ml 添 加 量 的 样 品, 用 4 个 特 征 离 子 扫 描 后 的 离 子 流 图, 可 以 看 见 基 线 放 大 后, 本 底 高 度 为 ( 绝 对 丰 度 ), 样 品 在 min 出 峰, 而 恰 巧 出 在 基 线 缓 慢 上 移 的 地 方 遥 图 3 为 同 样 20 ng/ml 添 加 量 的 样 品 采 用 改 进 后 方 法 的 特 征 离 子 扫 描 图 谱 遥 从 图 3 可 以 看 出, 本 底 高

53 检 测 技 术 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 免 疫 亲 和 柱 净 化 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 姜 兆 兴 刘 振 伟 曹 旭 王 智 亮 李 智 瑾 摘 要 试 验 建 立 了 测 定 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 B 1 B 2 G 1 G 2 的 高 效 液 相 色 谱 法 该 方 法 以 甲 醇 - 水 (8+2) 提 取, 免 疫 亲 和 层 析 柱 净 化, 碘 液 柱 后 衍 生, 荧 光 检 测 器 进 行 检 测 检 测 限 最 低 达 到 0.5 滋 g/kg, 线 性 在 2 耀 50 滋 g/kg 良 好, 平 均 回 收 率 较 高 该 方 法 具 有 准 确 度 高 精 密 度 好 检 测 限 低 检 测 快 速 的 特 点 关 键 词 高 效 液 相 色 谱 ; 黄 曲 霉 毒 素 ; 荧 光 检 测 器 中 图 分 类 号 S 饲 料 在 运 输 尧 贮 藏 过 程 中 若 管 理 不 当, 如 淋 雨 尧 受 潮 尧 通 气 不 当 尧 堆 压 时 间 过 长 都 容 易 产 生 黄 曲 霉 毒 素 袁 动 物 食 用 后 会 对 其 肝 脏 产 生 伤 害 袁 可 导 致 肝 功 能 姜 兆 兴, 赤 峰 出 入 境 检 验 检 疫 局,024000, 内 蒙 古 赤 峰 市 新 城 区 大 明 街 南 支 八 路 东 刘 振 伟 曹 旭 王 智 亮 李 智 瑾, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 下 降 袁 并 使 动 物 的 免 疫 力 降 低 遥 此 外 袁 长 期 食 用 含 低 浓 度 黄 曲 霉 毒 素 的 饲 料 也 可 导 致 胚 胎 中 毒 袁 因 此 袁 在 大 多 数 国 家 对 黄 曲 霉 毒 素 无 论 在 食 品 尧 农 产 品 以 及 饲 料 中 被 检 测 出 的 限 量 要 求 普 遍 较 低 遥 按 照 GB13078 要 2001 叶 饲 料 卫 生 标 准 曳 规 定 袁 玉 米 及 杂 粕 类 原 料 中 黄 曲 霉 毒 素 的 含 量 不 能 超 过 50 滋 g/kg 袁 豆 粕 中 不 能 超 过 30 滋 g/kg 袁 成 年 家 畜 及 肉 牛 尧 鹌 鹑 等 饲 料 中 不 能 超 过 20 滋 g/kg 袁 年 幼 的 动 物 对 黄 曲 霉 毒 素 敏 感 袁 其 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 的 含 量 不 能 超 过 10 滋 g/kg 遥 度 为 ( 绝 对 丰 度 ), 出 峰 时 间 提 前 到 min, 峰 的 锐 度 增 加, 灵 敏 度 提 高, 杂 峰 出 现 很 少, 干 扰 小, 这 样 积 分 更 为 准 确 遥 图 3 RT 院 时 间 渊 min 冤 改 进 后 方 法 特 征 离 子 扫 描 图 谱 2.5 影 响 回 收 率 的 其 它 因 素 的 分 析 前 处 理 过 程 中 氮 气 吹 干 法 可 操 作 性 差, 氮 气 流 速 稍 控 制 不 当, 就 会 把 溶 液 吹 到 试 管 外 面, 造 成 损 失, 影 响 检 测 结 果 袁 所 以 一 定 要 控 制 流 速 袁 小 心 吹 干 遥 另 外 袁 净 化 处 理 将 试 样 进 行 洗 脱 时 袁 将 5ml 洗 脱 液 改 为 7ml 袁 洗 脱 会 更 完 全 袁 回 收 率 会 更 高 遥 3 结 论 53 本 试 验 将 改 进 前 后 的 两 种 方 法 进 行 反 复 试 验 和 分 析, 并 对 图 谱 的 对 称 性 尧 重 复 性 以 及 回 收 率 大 小 进 行 了 详 细 比 较 遥 结 果 表 明 : 改 进 后 的 动 物 尿 液 中 莱 克 多 巴 胺 残 留 的 检 测 方 法 不 论 是 在 峰 形 的 对 称 性 上, 还 是 在 稳 定 性 与 回 收 率 上, 都 较 原 方 法 有 了 一 定 提 高 遥 该 方 法 分 析 猪 尿 液 中 的 莱 克 多 巴 胺 含 量, 具 有 操 作 简 单, 前 处 理 净 化 效 果 好, 灵 敏 度 高 等 优 点 遥 为 进 一 步 加 强 饲 料 安 全 监 控 和 畜 产 品 安 全 监 控 提 供 了 较 为 可 靠 的 检 测 依 据 遥 参 考 文 献 1 TurbergMP,Rodewald JM,ColemanMR.Determination of Racto2pamine inmonkey Plasma and Swine Serum by High2 performance Liquid Chromatography with Electrochemical Detection [J].J. Chromatogr B., 1996, 675: 279 耀 魏 蔚, 祝 伟 霞, 杨 冀 州. 气 相 色 谱 - 质 谱 (GC-MS) 测 定 猪 尿 中 莱 克 多 巴 胺 残 留 [J]. 监 督 与 选 择,2006(12):61 3 谢 孟 峡, 刘 媛, 蒋 敏. 固 相 萃 取 - 气 相 色 谱 - 质 谱 分 析 肉 样 中 盐 酸 克 伦 特 罗 的 残 留 量 [J]. 分 析 化 学,2002(11): 1308 耀 于 洪 侠. 莱 克 多 巴 胺 检 测 问 题 探 讨 [J]. 饲 料 广 角,2006(15):27 耀 28 5 应 永 飞, 陆 春 波, 任 玉 琴, 等. 气 相 色 谱 - 质 谱 法 测 定 猪 肉 中 的 莱 克 多 巴 胺 [J]. 中 国 兽 药 杂 志,2006,40(5):23 耀 26 6 张 素 霞, 沈 建 忠, 丁 苏 阳, 等. 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 饲 料 中 莱 克 多 巴 胺 [J]. 中 国 饲 料,2005(10) :28 耀 31 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

54 姜 兆 兴 等 : 免 疫 亲 和 柱 净 化 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 检 测 技 术 当 前 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 的 检 测 方 法 主 要 采 用 薄 层 色 谱 法 尧 微 柱 法 尧 酶 联 免 疫 法 尧 免 疫 亲 和 柱 法 以 及 荧 光 光 度 法 等 [1-3] 遥 随 着 高 效 液 相 色 谱 应 用 在 我 国 的 日 益 普 及 袁 我 们 尝 试 选 用 免 疫 亲 和 层 析 柱 净 化 尧 高 效 液 相 色 谱 碘 液 柱 后 衍 生 尧 荧 光 检 测 器 进 行 检 测 的 方 法 对 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 B 1 尧 B 2 尧 G 1 尧 G 2 进 行 检 测 研 究 遥 1 测 定 原 理 用 甲 醇 - 水 提 取 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 B 1 尧 B 2 尧 G 1 尧 G 2 袁 经 免 疫 亲 和 层 析 柱 净 化 袁 洗 脱 液 通 过 带 有 荧 光 检 测 器 的 高 效 液 相 色 谱 仪 柱 后 碘 液 衍 生 进 行 测 定 袁 外 标 法 峰 高 定 量 遥 2 试 剂 和 材 料 甲 醇 渊 色 谱 纯 冤 尧 乙 腈 渊 色 谱 纯 冤 尧 氯 化 钠 渊 分 析 纯 冤 袁 色 谱 用 水 为 符 合 GB/T6682 规 定 的 一 级 水 遥 0.05% 碘 液 院 称 取 0.1 g 碘 袁 溶 于 20 ml 甲 醇 后 袁 加 纯 水 定 容 至 200 ml 袁 以 0.45 滋 m 的 尼 龙 滤 膜 过 滤 袁 4 益 避 光 保 存 遥 准 确 称 取 适 量 的 黄 曲 霉 毒 素 标 准 品 ( 纯 度 >99%) 袁 以 苯 - 乙 腈 渊 98+2 冤 溶 解 于 棕 色 容 量 瓶 中 袁 配 成 浓 度 为 10 滋 g/ml 标 准 储 备 液 袁 置 4 益 冰 箱 中 避 光 保 存 遥 根 据 需 要 袁 用 苯 - 乙 腈 渊 98+2 冤 稀 释 袁 再 配 成 适 当 浓 度 的 标 准 工 作 液 遥 3 仪 器 和 设 备 液 相 色 谱 ( 配 荧 光 检 测 器 ) 渊 Agilent 1100 冤 尧 柱 后 衍 生 化 系 统 渊 Pickering 冤 尧 小 型 粉 碎 机 尧 样 筛 尧 均 质 器 尧 分 析 天 平 渊 感 量 为 g 和 0.01 g 冤 尧 15 ml 注 射 器 尧 针 头 过 滤 器 渊 配 孔 径 为 0.45 滋 m 尼 龙 滤 膜 冤 尧 Beacon 黄 曲 霉 毒 素 免 疫 亲 和 柱 尧 直 径 为 11 cm 玻 璃 纤 维 滤 纸 遥 4 试 验 方 法 4.1 提 取 准 确 称 取 50 g 经 过 粉 碎 且 过 20 目 筛 的 饲 料 试 样 袁 并 转 移 到 干 净 的 均 质 器 中, 准 确 加 入 100 ml 甲 醇 - 水 渊 8+2 冤 至 均 质 器 中 高 速 均 质 1min 袁 用 定 量 滤 纸 过 滤 袁 准 确 移 取 5ml 滤 液 并 准 确 加 入 20 ml 水 混 匀 袁 用 玻 璃 纤 维 滤 纸 过 滤 2 次 袁 备 用 [4] 遥 4.2 净 化 将 2 次 用 10 ml 水 淋 洗 过 的 免 疫 亲 和 柱 连 接 于 15 ml 注 射 器 下 袁 准 确 移 取 10 ml 样 品 滤 液 注 入 注 射 器 中 袁 使 样 品 以 1 耀 2 滴 / 秒 的 速 度 通 过 亲 合 柱 袁 再 以 10 ml 水 洗 柱 2 次 袁 并 使 约 2ml 空 气 通 过 柱 体 遥 准 确 加 入 1.0 ml 色 谱 级 甲 醇 洗 脱 并 过 0.45 滋 m 尼 龙 滤 54 膜 袁 流 速 为 1 耀 2 滴 / 秒 袁 收 集 全 部 洗 脱 液 于 玻 璃 试 管 中 袁 供 检 测 用 [5] 遥 4.3 测 定 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 MYCOTOX TM 黄 曲 霉 毒 素 分 析 柱,4.6 mm ID 伊 250 mm(5 滋 m); 柱 温 42 益 ; 流 动 相 为 甲 醇 乙 腈 水 = ; 流 速 1.0 ml/min; 激 发 波 长 365 nm, 发 射 波 长 430 nm; 进 样 量 10 滋 l; 衍 生 液 为 0.05% 碘 液 ; 衍 生 液 流 速 0.3 ml/min; 反 应 管 温 度 为 90 益 [6] 遥 色 谱 测 定 分 别 向 液 相 色 谱 仪 中 注 入 10 滋 l 标 准 工 作 液 和 样 液 袁 记 录 色 谱 峰 高 袁 并 与 相 应 的 标 准 峰 高 进 行 比 较 袁 外 标 法 峰 高 定 量 袁 见 图 1 遥 G 2 G 1 B 图 1 时 间 渊 min 冤 标 准 品 色 谱 图 在 上 述 条 件 下, 保 留 时 间 (min) 为 :G 尧 G 尧 B 尧 B 遥 4.4 结 果 计 算 和 表 述 按 下 列 公 式 计 算 院 = 窑 窑 窑 式 中 院 要 要 黄 曲 霉 毒 素 残 留 量 ( 滋 g/kg) 曰 要 要 样 液 中 黄 曲 霉 毒 素 的 峰 高 曰 要 要 标 准 工 作 溶 液 中 黄 曲 霉 毒 素 的 峰 高 曰 要 要 标 准 工 作 溶 液 中 黄 曲 霉 毒 素 的 浓 度 (ng/ml); 要 要 样 液 最 终 定 容 体 积 (ml) 曰 要 要 分 取 过 柱 净 化 的 试 液 中 所 含 试 样 的 量 (g) 遥 5 结 果 与 讨 论 5.1 净 化 条 件 的 选 择 B 1

55 检 测 技 术 姜 兆 兴 等 : 免 疫 亲 和 柱 净 化 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 试 验 中 比 较 了 Oasis (R) HLB 柱 尧 Supelclean TM 硅 胶 小 柱 以 及 Beacon 黄 曲 霉 毒 素 免 疫 亲 和 柱 3 种 净 化 方 式, 均 能 够 对 黄 曲 霉 毒 素 进 行 富 集 和 净 化, 相 对 而 言 免 疫 亲 和 柱 不 但 可 以 对 黄 曲 霉 毒 素 有 很 强 的 选 择 性, 避 免 其 它 非 目 标 检 测 物 质 的 影 响, 而 且 还 可 以 特 异 性 地 将 黄 曲 霉 毒 素 和 其 它 真 菌 毒 素 分 离 出 来, 分 离 效 率 和 回 收 率 高, 正 确 性 和 可 靠 性 强 遥 因 此, 本 文 采 用 Beacon 黄 曲 霉 毒 素 免 疫 亲 和 柱 来 对 饲 料 样 品 进 行 净 化 遥 5.2 色 谱 条 件 的 选 择 经 过 反 复 试 验 袁 黄 曲 霉 毒 素 在 本 实 验 室 仪 器 条 件 下 荧 光 检 测 器 激 发 波 长 365 nm 袁 发 射 波 长 430 nm 处 检 测 灵 敏 度 相 对 较 高 遥 对 于 流 动 相 袁 比 较 了 乙 腈 - 水 尧 甲 醇 - 水 尧 甲 醇 - 乙 腈 - 水 等 体 系 袁 最 终 采 用 甲 醇 - 乙 腈 - 水 ( 体 积 比 为 ) 体 系 袁 是 因 为 黄 曲 霉 毒 素 在 此 体 系 下 峰 形 好 尧 分 离 度 高 尧 检 测 范 围 内 线 性 良 好 遥 对 于 色 谱 柱 的 选 择 本 文 比 较 了 Zorbax SB-C18 柱 及 MYCOTOX TM 黄 曲 霉 毒 素 分 析 专 用 柱 袁 发 现 均 能 达 到 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 的 检 测 要 求 袁 后 者 由 于 是 专 用 柱 袁 其 选 择 性 和 分 离 度 均 好 于 前 者 袁 更 利 于 做 低 限 量 的 黄 曲 霉 毒 素 检 测 遥 5.3 方 法 的 线 性 及 回 收 率 向 已 知 不 含 黄 曲 霉 毒 素 的 饲 料 试 样 中 分 别 添 加 相 当 于 浓 度 为 2 尧 8 尧 20 尧 50 滋 g/kg 的 黄 曲 霉 毒 素 标 准 品 袁 按 照 试 验 方 法 中 所 述 测 定 步 骤 进 行 测 定 渊 取 8 次 测 定 结 果 的 平 均 值 冤 遥 试 验 结 果 见 表 1 袁 由 表 1 所 述 结 果 可 以 看 出 本 方 法 回 收 率 较 高 袁 线 性 良 好 遥 表 1 方 法 的 线 性 回 收 率 项 目 黄 曲 霉 毒 素 B 1 黄 曲 霉 毒 素 B 2 黄 曲 霉 毒 素 G 1 黄 曲 霉 毒 素 G 2 添 加 量 ( 滋 g/kg) 实 测 峰 高 标 准 峰 高 回 收 率 (%) 线 性 方 程 及 相 关 系 数 = R= = E-02 R= = E-02 R= = E E-02 R= 检 测 限 的 确 定 参 考 文 献 向 空 白 样 品 中 添 加 不 同 浓 度 的 黄 曲 霉 毒 素 标 准 1 Epply RM, et al. J. Assoc. Of Anal. Chem.[J], 1968, 51:104 溶 液, 按 照 试 验 方 法 中 的 测 定 步 骤 处 理 后 进 行 液 相 色 2 Natural poisons Chap,26.Official Method of Analysis Association of 谱 测 定 遥 通 过 多 次 添 加 试 验, 反 复 降 低 添 加 浓 度, 当 荧 光 检 测 器 的 检 测 信 号 是 噪 音 信 号 3 倍 时, 相 对 应 的 添 [7] 加 浓 度 即 为 检 测 限 遥 经 过 测 定, 本 方 法 检 测 限 能 够 达 到 0.5 滋 g/kg 遥 Official Analytical Chemists. 1980(26):26 耀 36 3 Andri,Papadopoulou-Bouraoui,et al.comparisonoftwopost-column Derivatization Systems, Ultraviaolet Irradiation and Electrochemical Determination, for the liquid chromatographic Determination of Aflatoxin in food[j]. Journal of AOAC International,2002, 85(2):411 6 结 论 4 GB/T 食 品 中 黄 曲 霉 毒 素 B 1 B 2 G 1 G 2 的 测 定 通 过 上 述 试 验 方 法 进 行 反 复 测 试 袁 认 为 本 方 法 5 GB/T 食 品 中 黄 曲 霉 毒 素 的 测 定. 免 疫 亲 和 层 析 净 化 高 效 液 相 色 谱 法 和 荧 光 光 度 法 提 取 操 作 简 单 袁 净 化 效 果 好 袁 在 上 述 色 谱 条 件 下 袁 分 离 6 张 丽, 朱 姝, 张 文 海. 高 效 液 相 柱 后 衍 生 法 测 定 食 品 中 的 黄 曲 霉 毒 度 高 袁 干 扰 极 少 袁 适 用 于 各 种 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 的 测 素 B 1[J]. 中 国 卫 生 检 验 杂 志,2006(1):70 耀 71 定 遥 本 方 法 最 小 检 出 浓 度 满 足 了 对 饲 料 中 黄 曲 霉 毒 素 B 1 尧 B 2 尧 G 1 尧 G 2 日 常 检 测 的 需 要 袁 具 有 良 好 的 准 确 度 及 精 密 度 遥 7 张 晓 彤. 液 相 色 谱 检 测 方 法 [M]. 北 京 : 化 学 工 业 出 版 社, 耀 13 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected]) 55

56 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 专 题 论 述 伏 马 菌 素 的 毒 性 作 用 研 究 金 海 涛 陈 道 付 李 绍 钰 伏 马 菌 素 渊 fumonisins 冤 是 一 组 主 要 由 串 珠 镰 刀 菌 (Fusarium moniliforme) 产 生 的 真 菌 毒 素 遥 经 研 究 表 明 袁 伏 马 菌 素 能 够 污 染 多 种 粮 食 及 其 制 品 袁 并 对 某 些 家 畜 产 生 急 性 毒 性 及 潜 在 的 致 癌 性 袁 因 此 袁 它 在 食 品 与 饲 料 安 全 中 的 意 义 越 来 越 受 到 人 们 的 广 泛 关 注 袁 已 成 为 继 黄 曲 霉 毒 素 之 后 的 又 一 研 究 热 点 遥 本 文 主 要 就 伏 马 菌 素 毒 性 及 作 用 机 理 等 方 面 进 行 综 述 遥 14 浓 度 袁 在 体 内 半 衰 期 为 18 min 遥 用 C 标 记 的 FB 1 进 行 腹 腔 注 射 袁 24 h 后 袁 经 腹 腔 注 射 的 标 记 物 有 66% 进 入 粪 便 内 袁 尿 中 32% 袁 肝 中 1% 袁 在 肾 脏 和 血 红 细 胞 内 仅 14 有 微 量 (<1%) 遥 而 用 管 饲 法 饲 喂 C 标 记 的 FB 1 发 现 袁 标 记 物 几 乎 全 部 出 现 在 粪 便 内 袁 在 尿 尧 肝 尧 肾 和 血 红 细 胞 内 仅 有 微 量 袁 绝 大 多 数 是 未 经 代 谢 的 FB 1 原 形 渊 Shephard 等 袁 1992 冤 遥 1 伏 马 菌 素 的 化 学 结 构 及 主 要 产 毒 菌 种 3 伏 马 菌 素 的 毒 性 作 用 20 世 纪 80 年 代 末 袁 Gelderblom 等 渊 1988 冤 首 次 从 3.1 神 经 毒 性 串 珠 镰 刀 菌 培 养 液 中 分 离 出 伏 马 菌 素 遥 随 后 袁 Laureut 等 渊 1989 冤 又 从 伏 马 菌 素 中 分 离 出 伏 马 菌 素 B 1 渊 FB 1 冤 和 伏 马 菌 素 B 2 渊 FB 2 冤 遥 到 目 前 为 止 袁 已 经 鉴 定 到 的 伏 马 菌 素 类 似 物 有 28 种 袁 它 们 被 分 为 4 组 袁 即 A 尧 B 尧 C 和 P 组 遥 B 组 伏 马 菌 素 是 野 生 型 菌 株 产 量 最 丰 富 的, 其 中 伏 马 菌 素 B 1 渊 FB 1 冤 是 其 主 要 成 分 袁 占 总 量 的 70%, 同 时 也 是 导 致 伏 马 菌 素 毒 性 作 用 的 主 要 成 分 遥 伏 马 菌 素 是 一 类 由 不 同 的 多 氢 醇 和 丙 三 羧 酸 组 成 的 结 构 类 似 的 双 酯 化 合 物, 包 括 一 个 由 20 个 碳 组 成 的 脂 肪 链 及 通 过 二 个 酯 键 连 接 的 亲 水 性 侧 链 遥 在 自 然 界 中 产 生 伏 马 菌 素 的 真 菌 主 要 是 串 珠 镰 刀 菌, 其 次 是 再 育 镰 刀 菌 (Fusarium proliferatum), 两 者 广 泛 存 在 于 各 种 粮 食 及 其 制 品 中 袁 尤 其 是 对 玉 米 的 污 染, 在 干 燥 温 暖 的 环 境 下, 串 珠 镰 刀 菌 是 玉 米 中 出 现 最 大 量 研 究 表 明 袁 伏 马 菌 素 可 引 起 马 脑 白 质 软 化 症 (equine leucoencephalomalacia. ELEM) 袁 本 病 是 一 种 对 马 属 动 物 具 有 高 度 致 死 性 的 中 毒 症 袁 病 畜 中 毒 的 临 床 表 现 为 院 初 期 病 畜 嗜 睡 拒 食, 共 济 失 调, 抽 搐 等 症 状, 最 后 死 亡 遥 病 理 学 检 查 发 现 明 显 的 肝 病 样 改 变 和 延 髓 质 水 肿 遥 Marasas 等 (1988b) 研 究 伏 马 菌 素 对 马 的 毒 性 发 现, 给 马 静 脉 注 射 FB 1, 剂 量 为 每 日 mg/kg, 观 察 到 马 在 第 8d 出 现 明 显 的 神 经 中 毒 症 状 袁 表 现 为 精 神 紧 张 尧 淡 漠 尧 偏 向 一 侧 的 蹒 跚 尧 震 颤 尧 共 济 失 调 尧 行 动 迟 缓 尧 下 唇 和 舌 轻 度 瘫 痪 袁 不 能 饮 食 等 症 状 袁 第 10 d 出 现 强 直 性 痉 挛 遥 病 理 解 剖 发 现 脑 部 重 度 水 肿 袁 延 髓 质 有 早 发 的 尧 两 侧 对 称 的 斑 点 样 坏 死 袁 脑 白 质 软 化 改 变 袁 证 明 伏 马 菌 素 是 诱 发 马 脑 白 质 软 化 症 渊 ELEM 冤 的 致 病 因 子 遥 频 繁 的 菌 种 之 一 遥 除 串 珠 镰 刀 菌 和 再 育 镰 刀 菌 之 外, Fusarium nygamai 尧 花 腐 镰 刀 菌 渊 Fusarium anthophilum 冤 尧 3.2 肺 毒 性 伏 马 菌 素 具 有 肺 毒 性 袁 可 引 起 猪 肺 水 肿 综 合 症 Fusarium dlamini 尧 Fusarium napiforme 以 及 交 链 胞 属 Alternaria alternatafs plycopersici 也 能 够 产 生 伏 马 菌 素 渊 Moss 袁 1998 冤 遥 但 是 这 些 产 毒 菌 对 粮 食 及 其 制 品 的 污 染 程 度 较 小 遥 渊 pig pulmonary edema, PPE 冤 渊 Harrison 等 袁 1990 冤 遥 猪 摄 入 含 有 伏 马 菌 素 的 饲 料 后 袁 最 典 型 的 病 变 为 胸 膜 腔 积 水 和 肺 水 肿 袁 并 伴 有 胰 脏 和 肝 脏 损 伤 遥 Zomborszky- Kovacs 等 (2002) 报 道 袁 日 粮 中 添 加 40 mg/kg 伏 马 菌 素 2 伏 马 菌 素 在 动 物 体 内 的 代 谢 动 物 代 谢 试 验 发 现, 给 大 鼠 腹 腔 注 射 FB 1 (7.5 mg/kg), 就 可 引 起 仔 猪 肺 部 重 量 显 著 增 加 袁 出 现 明 显 的 肺 水 肿 症 状 遥 在 亚 急 性 毒 性 试 验 中 袁 FB 1 对 猪 亚 急 性 毒 性 表 现 FB 1 被 迅 速 吸 收 袁 20 min 后 在 血 浆 中 的 含 量 达 到 最 大 为 肝 结 节 性 增 生 和 远 侧 食 道 粘 膜 增 生 斑 袁 同 时 还 可 观 察 到 胰 腺 的 病 理 改 变 袁 腺 细 胞 中 分 泌 粒 减 少 袁 细 胞 核 变 形 袁 核 仁 变 大 袁 染 色 质 不 规 则 浓 缩 遥 FB 1 为 5 滋 g/kg 金 海 涛, 河 南 工 业 大 学,450008, 河 南 郑 州 市 农 业 路 1 号 陈 道 付, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 李 绍 钰 ( 通 讯 作 者 ), 河 南 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所 收 稿 日 期 : 时 袁 血 液 中 SA 与 SO 比 率 在 血 液 中 其 它 生 化 指 标 和 组 织 损 伤 之 前 即 有 明 显 上 升 趋 势 遥 短 期 喂 养 试 验 中 袁 在 引 起 肝 脏 和 肺 部 严 重 损 伤 的 剂 量 下 袁 未 观 察 到 肾 脏 组 织 学 及 有 关 临 床 化 学 的 改 变 遥 绎 河 南 省 科 技 攻 关 计 划 项 目 ( 编 号 为 ) 3.3 对 免 疫 系 统 的 毒 性 56

57 专 题 论 述 金 海 涛 等 : 伏 马 菌 素 的 毒 性 作 用 研 究 大 量 试 验 结 果 表 明 袁 伏 马 菌 素 能 够 对 动 物 免 疫 系 统 造 成 损 害 袁 引 起 免 疫 功 能 降 低 袁 造 成 免 疫 抑 制 袁 从 而 影 响 疫 苗 的 免 疫 效 果 袁 使 免 疫 后 抗 体 水 平 不 整 齐 或 不 高 遥 Qureshi 等 (1992) 在 研 究 FB 1 对 仔 鸡 腹 膜 巨 噬 细 胞 的 影 响 时 发 现 袁 FB 1 渊 10 耀 100 滋 g/kg 冤 可 引 起 巨 噬 细 胞 在 形 态 学 上 发 生 改 变 袁 产 生 萎 缩 曰 同 时 还 显 著 降 低 了 细 胞 活 性 以 及 产 生 功 能 损 伤 袁 导 致 免 疫 应 答 降 低 袁 从 而 增 加 了 传 染 易 感 性 遥 用 FB 1 提 取 物 观 察 其 对 小 鸡 巨 噬 细 胞 的 影 响, 也 得 出 同 样 的 结 果 袁 引 起 了 小 鸡 巨 噬 细 胞 数 量 减 少 (Chatterjee 和 Mukherjee,1994) 遥 Li 等 (1999) 给 肉 鸡 饲 喂 含 FB 1 的 日 粮 袁 分 别 在 第 2 周 和 第 3 周 注 射 0.5 ml 的 新 城 疫 疫 苗 袁 注 射 7d 后 发 现 FB 1 能 够 对 鸡 新 城 疫 疫 苗 抗 体 产 生 抑 制 作 用 袁 显 著 降 低 鸡 新 城 疫 疫 苗 的 抗 体 滴 度 遥 3.4 致 癌 性 经 研 究 表 明 袁 伏 马 菌 素 对 肝 脏 尧 肾 脏 均 具 有 毒 性 作 用 袁 在 高 剂 量 或 长 期 饲 喂 条 件 下 袁 可 诱 发 啮 齿 类 动 物 癌 症 袁 是 一 种 慢 性 癌 症 促 进 剂 和 诱 导 剂 遥 Gelderblom 等 渊 1991 冤 对 雄 性 BDIX 大 鼠 的 长 期 慢 性 毒 性 试 验 表 明, 饲 喂 浓 度 为 50 mg/kg 的 FB 1 渊 纯 度 >90% 冤 26 个 月 后 袁 诱 发 了 大 鼠 肝 癌 遥 而 用 含 FB 1 渊 纯 度 >92% 冤 的 饲 料 对 Fischer344/N/Netr 大 鼠 进 行 2 年 的 饲 喂 试 验 袁 结 果 发 现 袁 长 期 摄 入 高 水 平 伏 马 菌 素 (50 mg/kg 以 上 ) 可 引 起 Fischer344/N/Netr 大 鼠 肾 脏 损 伤 袁 包 括 肾 小 管 腺 肿 尧 细 胞 增 生 和 细 胞 程 序 性 死 亡 袁 并 诱 发 肾 癌 (National Toxicology Program 袁 1999) 遥 此 外 袁 伏 马 菌 素 还 被 怀 疑 与 诱 发 人 类 食 道 癌 有 密 切 关 系 遥 Marasas 等 (1988a) 在 对 南 非 Transkei 食 管 癌 高 发 地 区 进 行 流 行 病 调 查 时 发 现 袁 在 食 管 癌 高 发 区 伏 马 菌 素 的 污 染 水 平 与 低 发 区 的 污 染 水 平 有 显 著 的 不 同 袁 高 发 区 的 伏 马 菌 素 污 染 水 平 是 低 发 区 的 2 倍 多 遥 Yoshizawa 等 (1994) 的 调 查 显 示 袁 伏 马 菌 素 在 食 道 癌 高 发 区 玉 米 中 的 污 染 率 为 48% 袁 而 在 食 道 癌 低 发 区 玉 米 中 的 污 染 率 为 25% 袁 污 染 率 前 者 大 约 为 后 者 的 两 倍 遥 但 目 前 还 没 有 充 足 的 证 据 证 明 伏 马 菌 素 可 以 诱 发 食 道 癌 遥 1993 年 袁 在 法 国 里 昂 袁 国 际 癌 症 研 究 中 心 渊 IARC 冤 将 伏 马 菌 素 列 为 2B 类 致 癌 物 质 渊 即 人 类 可 能 致 癌 物 冤 遥 3.5 其 它 毒 性 作 用 伏 马 菌 素 除 具 有 上 述 毒 性 外 袁 还 具 有 胚 胎 毒 性 和 植 物 毒 性 遥 Zacharius 等 渊 1996 冤 给 鸡 胚 注 射 72 滋 g/kg 的 FB 1 袁 结 果 发 现 袁 鸡 胚 重 量 显 著 下 降 和 皮 下 出 血 袁 表 明 FB 1 对 鸡 胚 有 致 病 或 致 死 作 用 遥 伏 马 菌 素 对 植 物 也 57 有 很 强 的 毒 性 遥 Desjardins 等 渊 1995 冤 研 究 发 现 袁 在 生 物 体 外 袁 串 珠 镰 刀 菌 菌 株 产 生 伏 马 菌 素 与 引 起 玉 米 苗 枯 萎 具 有 相 关 性 遥 在 玉 米 苗 枯 萎 过 程 中 袁 它 可 能 作 为 一 个 毒 害 因 子 而 起 着 作 用 遥 另 有 研 究 表 明 袁 对 曼 佗 罗 渊 Datura stramonium L. 冤 尧 黑 茄 渊 Solanum nigrum L. 冤 和 易 感 品 种 番 茄 的 叶 表 面 喷 施 FB 1 液 滴 能 导 致 枯 斑 的 形 成 尧 生 长 抑 制 和 死 亡 渊 Ahhas 等 袁 1998 冤 遥 4 伏 马 菌 素 毒 性 作 用 的 机 理 目 前 为 止 袁 人 们 对 伏 马 菌 素 的 毒 性 作 用 机 理 仍 不 十 分 清 楚 袁 但 怀 疑 可 能 是 与 伏 马 菌 素 对 神 经 鞘 脂 类 生 物 合 成 的 破 坏 作 用 有 关 遥 神 经 鞘 脂 类 是 真 核 细 胞 细 胞 膜 的 重 要 构 成 成 分 袁 在 细 胞 的 附 着 尧 分 化 尧 生 长 和 程 序 化 死 亡 中 发 生 关 键 性 作 用 遥 由 于 伏 马 菌 素 在 结 构 上 与 神 经 鞘 氨 醇 渊 Sphingosine 袁 SO 冤 和 二 氢 神 经 鞘 氨 醇 渊 Sh 鄄 pinganine 袁 SA 冤 极 为 相 似 渊 如 图 2 冤 袁 故 Wang 等 (1991) 认 为 袁 伏 马 菌 素 主 要 通 过 竞 争 的 方 式 对 神 经 鞘 氨 醇 N-2 酰 基 转 移 酶 产 生 抑 制 作 用 袁 破 坏 了 鞘 脂 类 代 谢 袁 造 成 神 经 鞘 氨 醇 生 物 合 成 被 抑 制 袁 导 致 复 合 鞘 脂 减 少 和 游 离 二 氢 神 经 鞘 氨 醇 增 加 袁 从 而 阻 碍 了 复 合 鞘 脂 作 为 第 二 信 使 介 导 的 信 号 传 递 途 径 遥 图 1 二 氢 神 经 鞘 氨 醇 神 经 鞘 氨 醇 4- 羟 二 氢 神 经 鞘 氨 醇 NH 2 OH NH 2 OH OH OH NH 2 3 种 主 要 的 类 神 经 鞘 氨 醇 的 化 学 结 构 OH OH OH 猪 尧 马 尧 大 鼠 和 小 鼠 的 肝 尧 肾 对 伏 马 菌 素 引 起 的 神 经 鞘 氨 醇 合 成 的 抑 制 非 常 敏 感 袁 导 致 了 神 经 鞘 氨 醇 (Sphingosine 袁 SO) 和 二 氢 神 经 鞘 氨 醇 渊 Shpinganine 袁 SA 冤 的 比 例 发 生 变 化 (Riley 等 袁 1993 曰 Riley 等 袁 1994) 遥 伏 马 菌 素 诱 导 的 鞘 脂 类 代 谢 发 生 紊 乱 还 能 对 细 胞 造 成 损 伤 袁 破 坏 细 胞 膜 结 构 袁 影 响 复 合 鞘 脂 类 作 为 第 二 信 使 介 导 在 细 胞 间 的 联 系 和 细 胞 基 质 的 相 互 作 用 袁 蛋 白 的 运 输 尧 分 类 和 定 位 袁 以 及 其 它 与 细 胞 的 正 常 生 长 尧 分 化 和 程 序 化 死 亡 有 关 的 调 控 功 能 遥 Schroeder 等 渊 1994 冤 研 究 认 为 袁 伏 马 菌 素 破 坏 了 大 鼠 肝 脏 的 鞘 脂 类 代 谢 导 致 DNA 合 成 发 生 紊 乱 袁 刺 激 了 细 胞 增 殖 袁 导 致 细 胞 失 控 遥 可 能 一 些 细 胞 死 亡 袁 一 些 细 胞 停 止 生 长 袁 而 一 些 细 胞 生 长 加 快 遥 若 一 些 细 胞 逃 脱 细 胞 生 长 周 期 的 控 制 就

58 金 海 涛 等 : 伏 马 菌 素 的 毒 性 作 用 研 究 专 题 论 述 会 增 加 基 因 的 不 稳 定 性 袁 从 而 诱 发 癌 症 遥 5 结 语 综 上 所 述 袁 伏 马 菌 素 是 普 遍 存 在 于 粮 食 作 物 中 的 一 种 真 菌 毒 素 袁 对 动 物 和 人 的 健 康 有 很 大 的 潜 在 危 害 遥 随 着 对 伏 马 菌 素 毒 性 研 究 的 深 入 袁 人 们 越 来 越 重 视 它 在 饲 料 和 食 品 安 全 中 的 影 响 遥 欧 美 等 国 已 投 入 大 量 的 人 力 尧 物 力 对 其 毒 性 及 作 用 机 理 袁 与 人 畜 疾 病 的 关 系 等 进 行 了 较 全 面 的 研 究 遥 2001 年 袁 美 国 食 品 与 药 物 管 理 局 渊 FDA 冤 发 布 了 食 品 渊 2mg/kg 冤 和 动 物 饲 料 渊 1 耀 50 mg/kg 冤 中 伏 马 菌 素 最 高 限 量 的 指 导 性 公 告 遥 我 国 在 伏 马 菌 素 毒 性 方 面 的 研 究 极 少 袁 尚 无 食 品 与 饲 料 中 伏 马 菌 素 的 限 量 标 准 袁 因 此 袁 对 伏 马 菌 素 的 生 物 学 作 用 及 作 用 机 理 做 更 加 深 入 的 研 究 袁 并 尽 快 制 订 我 国 的 伏 马 菌 素 限 量 标 准 将 是 今 后 此 项 工 作 的 重 点 遥 参 考 文 献 1 Gelderblom WCA, Jaskiewicz K, Marasas WFO, et al. Fumon 原 isins-novel mycotoxins with cancer-promoting activity produced by Fusarium moniliforme[ 允 ]. Appl. Environ. Microbiol., 1988,54:1 808 耀 Laurent D, Platzer N, Kohler F, et al. Macrofusin and micromonilin: two new mycotoxin isolated from Iron infested by Fusarium monili 原 forme[ 允 ]. Microbiol Aliment Nutr., 1989, 7:9 耀 16 3 Moss M O. Recent studies of mycotoxins [ 允 ]. J. Appl. Microbiol. Symp. Suppl., 1998, 84:62 耀 76 4 Shephard GS, Thiet PG, Sydenham EW, et al. Determination of fumonisin B1 in plasma and urine by high performance liquid chro 原 matography[ 允 ]. J. Chromatogr, 1992, 574:299 耀 Marasas WF, T. S. Kellerman, W. C. Gelderblom, et al. Leukoen 原 cephalomalacia in ahorse induced by fumonisin B1 isolated from Fusarium moniliforme[ 允 ]. Onderstepoort J. Vet. Res., 1988b, 55:197 耀 Harrison LR, B. M. Colvin, J. T. Greene, et al. Pulmonary edema and hydrothorax in swine produced by fumonisin B1, a toxic metabolite of Fusarium moniliforme [ 允 ]. J. Vet. Diagn. Invest., 1990, 2:217 耀 Zomborszky-Kovacs M, F. Kovacs, P. Horn, et al. Investigations into the time- and dose-dependent effect of fumonisin B1 in order to de 原 termine tolerable limit values in pigs. Livest[ 允 ]. Prod. Sci., 2002, 76: 251 耀 Qureshi MA, W. M. Hagler, Jr. Effects of fumonisin B1 exposure on chicks macrophage functions in vitro[ 允 ]. Poultry Sci., 1992, 71:104 耀 Chatterjee D, Mukherjee SK. Contamination of India maize with fu 原 monisin B1 and its effects on chicken macrophage[ 允 ]. Lett Appl Mi 原 crobiol., 1994, 18:251 耀 Li YC, Ledoux DR, Bermudez AJ, et al. Effects of Fumonisin B1 on Selected Immune Responses in Broiler Chicks [ 允 ]. Poult. Sci., 1999, 78 :1 275 耀 Gelderblom WCA, N.P.J. Kriek, W.F.O. Marasas, et al. Toxicity and carcinogenicity of the Fusarium moniliforme metabolite, fu 原 monisin B1 in rats[ 允 ]. Carcinogenesis,1991, 7:1 247~ National Toxicology Program. Toxicology and carcinogenesis Studies of Fumonisin B1 (CAS NO ) in F344/N Rats and B6C3F1 Mice.NTP Technical Report 496 [C]. Research Triangle Park, North Carolina National Institutes of Health Publication, 1999(99): Marasas W F O, K. Jaskeiwicz, F. S. Venner, et al. Fusarium moniliforme contamination of maize in oesophageal cancer areas in Transkei[ 允 ]. S. Afr. Med. J., 1988a, 74:110~ Yoshizawa T, A. Yamashita, Y. Luo. Fumonisin occurrence in corn from high- and low-risk areas for human esophageal cancer in China[ 允 ]. Appl. Environ. Microbiol., 1994,60:1 626~ Zacharius C, Van Echten, DG, et al. The effect of fumonisin B1 on developing chickembryos:correlation between de novo sphingolipid biosynthesis and gross morphological changes [ 允 ]. Glycownj J., 1996, 13(2):167~ Desjrdins AE, Plattner RD, Leslie J. F. Genetic analysis of fu 原 monisin production and virulence of Gibberella fujikuroi mating population A (Fusarium moniliforme) on maize (Zea mays) seedlings[ 允 ]. Appl. Environ. Microbiol., 1995, 54: 1806~ Ahhas HK, Shier WT, Seo A, et al. Phytotoxicity and cytotoxicity of the fumonisin Cand PSeries of mycotoxins from Fusanum spp. fungi[ 允 ]. Toxicon, 1998, 36: 2033~ Wang E, Norred WP, Bacon CW, et al. Inhibition of sphingolipid biosynthesis by fumonisins. Implications for diseases associated with Fusarium moniliforme [ 允 ]. J. Biol. Chem., 1991, 266: 14486~ Riley RT, An NH, Showker JL, et al. Alteration of tissue and serum sphinganine to sphingosine ratio; An early biomarker of ex 原 posure to fumonisin-containing feeds in pigs [ 允 ]. Toxicol. Appl. Pharmacol., 1993, 118: 105~ Riley RT, Hinton DM, Chamberlain WJ, et a1. Dietary fumonisin B1 induces disruption of sphingolipid metabolism in Sprague-Daw 原 ley rats: Anew mechanism of nephrotoxicity [ 允 ]. J. Nutr., 1994, 124: 594~ Shephard GS, Thiel PG, Sydenham EW, et al. Determination of the mycotoxin fumonisinb1 and identification of its partially hy 原 drolysed metabolites in the faeces of non-human primates[ 允 ]. Food Chem. Toxicol., 1994, 32:23~29 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

59 专 题 论 述 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 氯 的 研 究 进 展 及 其 在 家 禽 营 养 中 的 作 用 鲍 庆 晗 王 安 王 洋 氯 是 动 物 体 中 重 要 的 电 解 质 之 一, 同 钠 尧 钾 一 起 在 维 持 体 液 渗 透 压, 调 节 酸 碱 平 衡, 控 制 水 代 谢, 保 证 营 养 素 的 适 宜 代 谢 环 境 方 面 发 挥 着 重 要 的 作 用 遥 由 于 氯 在 动 物 体 内 是 产 酸 的, 当 动 物 摄 入 氯 不 足 或 过 量 时, 就 会 导 致 动 物 体 内 的 酸 碱 平 衡 发 生 异 常, 进 而 引 起 代 谢 性 酸 中 毒 或 代 谢 性 碱 中 毒 遥 同 时, 由 于 动 物 体 内 的 各 种 酶 只 有 在 所 处 体 液 微 环 境 中 特 定 的 ph 值 下 才 能 发 挥 催 化 作 用 袁 当 酸 碱 平 衡 被 破 坏 时 会 使 体 内 的 许 多 酶 系 的 催 化 效 率 降 低, 从 而 引 起 代 谢 异 常 遥 本 文 主 要 对 氯 在 动 物 体 内 的 分 布 尧 代 谢 尧 功 能 尧 参 与 调 节 酸 碱 平 衡 的 形 式 及 在 家 禽 生 产 中 的 作 用 作 一 简 要 综 述 遥 垣 原 垣 - 运 袁 使 Na 和 Cl 以 1 1 的 比 例 被 吸 收 袁 而 H 和 HCO 3 以 1 1 的 比 例 被 分 泌 到 肠 腔 袁 形 成 H 2 O 和 CO 2 遥 进 入 体 内 的 钠 尧 氯 经 肾 小 球 滤 过 后 袁 在 流 经 远 曲 原 垣 小 管 时 大 部 分 被 重 吸 收 遥 Cl 的 重 吸 收 与 Na 的 重 吸 收 原 垣 垣 是 相 伴 的 遥 在 髓 袢 升 支 粗 段,Cl 的 重 吸 收 与 Na 尧 K 的 转 垣 原 垣 运 有 关 袁 Na Cl K 以 的 比 例 协 同 转 运 遥 其 垣 原 垣 特 点 是 Na 尧 Cl 与 K 3 种 离 子 中 缺 少 任 何 一 种 离 子 袁 都 将 影 响 其 它 两 种 离 子 的 转 运 遥 3 种 离 子 进 入 细 胞 后 垣 原 的 去 向 不 同 院 Na 被 管 周 膜 上 的 泵 驱 入 组 织 间 隙 袁 Cl 则 垣 顺 着 浓 度 差 相 继 扩 散 进 入 组 织 间 隙 袁 K 则 由 于 浓 度 差 经 管 腔 膜 返 回 小 管 液 袁 多 余 部 分 经 肾 脏 排 出 体 外 遥 1 氯 在 动 物 体 内 的 分 布 及 在 饲 料 中 的 添 加 量 动 物 体 内 氯 离 子 均 存 在 于 细 胞 内 外 液 中 袁 约 占 体 从 肾 脏 排 出 的 钠 和 氯 大 部 分 以 氯 化 钠 的 形 式 存 在 遥 当 体 内 缺 钠 时 袁 从 尿 中 排 出 的 氯 化 钠 减 少 袁 当 体 内 重 的 0.11 豫 袁 但 主 要 存 在 于 细 胞 外 液 中 袁 是 细 胞 外 液 中 主 要 的 阴 离 子 曰 少 部 分 可 存 在 于 红 细 胞 尧 肾 小 管 细 钠 含 量 显 著 增 加 时 袁 肾 脏 排 出 的 氯 化 钠 也 随 之 增 多 遥 由 此 可 以 看 出 袁 肾 脏 对 钠 尧 氯 的 调 节 有 很 强 的 作 用 遥 胞 尧 胃 肠 粘 膜 细 胞 尧 性 腺 尧 皮 肤 等 细 胞 内 液 中 遥 目 前 在 实 际 生 产 中, 人 们 往 往 忽 视 氯 的 作 用, 只 单 2 援 2 氯 的 功 能 及 调 节 钠 离 子 和 氯 离 子 是 构 成 细 胞 外 液 的 主 要 电 解 质 袁 纯 地 利 用 添 加 食 盐 来 满 足 动 物 对 钠 和 氯 的 需 要 遥 NRC 渊 1999 冤 对 家 禽 饲 料 中 氯 的 最 小 推 荐 添 加 量 为 0.11%~ 0.20% 遥 其 中 氯 离 子 是 细 胞 外 液 中 含 量 最 多 的 阴 离 子 袁 主 要 功 能 体 现 在 调 节 和 维 持 酸 碱 平 衡 方 面 袁 如 低 氯 性 代 谢 性 碱 中 毒 和 高 氯 性 代 谢 性 酸 中 毒 袁 原 因 在 于 机 体 体 液 的 2 氯 在 家 禽 体 内 的 代 谢 及 功 能 原 - 电 中 性 原 理 袁 即 细 胞 外 液 的 阴 离 子 主 要 为 Cl 与 HCO 3 2 援 1 氯 的 吸 收 与 排 泄 原 氯 主 要 以 离 子 的 形 式 被 吸 收 遥 Cl 的 吸 收 部 位 在 小 两 者 互 为 消 长 遥 当 其 中 某 一 个 离 子 减 少 时 袁 必 然 引 起 - 另 一 个 离 子 的 增 加 遥 高 氯 时 袁 HCO 3 减 少 而 引 起 代 谢 性 肠 前 段 袁 主 要 通 过 扩 散 途 径 经 细 胞 旁 路 被 吸 收 袁 而 且 原 垣 速 度 很 快 遥 Cl 的 吸 收 与 Na 吸 收 密 切 相 关 袁 主 要 有 非 耦 联 吸 收 尧 耦 联 吸 收 和 中 性 NaCl 的 吸 收 3 种 途 径 遥 其 原 中, 中 性 NaCl 的 吸 收 是 Cl 被 吸 收 的 主 要 形 式 袁 主 要 机 垣 原 制 为 Na 和 Cl 以 1 1 的 比 例 从 肠 道 转 运 到 组 织 液 或 垣 垣 血 液 中 袁 包 括 Na 原 H 交 换 和 Cl - - -HCO 3 交 换 遥 细 胞 内 的 垣 - H 和 HCO 3 是 通 过 内 源 性 或 外 源 性 CO 2 的 水 合 作 用 - 原 垣 垣 产 生 的 遥 然 后 HCO 3 与 Cl 袁 H 与 Na 分 别 进 行 反 向 转 - 酸 中 毒 曰 低 氯 时 袁 HCO 3 增 加 而 引 起 代 谢 性 碱 中 毒 遥 同 - 样 袁 发 生 代 谢 性 酸 中 毒 时 袁 HCO 3 减 少 而 引 起 高 氯 曰 发 - 原 生 代 谢 性 碱 中 毒 时 袁 HCO 3 增 加 而 引 起 低 氯 遥 血 清 Cl - 和 HCO 3 一 样 是 维 持 机 体 酸 碱 平 衡 尧 水 分 交 换 和 细 胞 原 内 外 渗 透 压 的 主 要 阴 离 子 遥 但 是 袁 血 Cl 变 化 往 往 与 血 垣 - 垣 Na 尧 HCO 3 尧 K 等 其 它 主 要 细 胞 外 液 离 子 变 化 尧 酸 碱 平 衡 密 切 相 关 遥 主 要 表 现 在 院 原 垣 淤 血 Cl 水 平 往 往 受 Na 水 平 影 响 遥 根 据 电 中 性 垣 - 原 原 理 袁 正 常 情 况 下 袁 细 胞 外 液 中 Na 尧 HCO 3 尧 Cl 之 间 有 垣 - 原 一 较 恒 定 常 数 袁 即 Na 越 HCO 3 垣 Cl 垣 AG 渊 Anion Gap 冤 袁 鲍 庆 晗, 东 北 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所,150030, 哈 尔 滨 市 香 坊 区 木 材 街 59 号 王 安 ( 通 讯 作 者 ), 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 王 洋, 东 北 农 业 大 学 农 学 院 收 稿 日 期 : 垣 原 - AG 约 为 8 耀 16 mmol/l 遥 当 血 Na 下 降 时 袁 血 Cl 或 HCO 3 相 应 减 少 或 同 时 减 少 袁 以 求 阴 阳 离 子 总 和 相 等 曰 反 之 袁 正 好 相 反 遥 原 - 于 血 Cl 与 HCO 3 呈 相 反 方 向 变 化 遥 同 样 袁 根 据 电 中 性 原 理 袁 为 了 维 持 血 液 阴 离 子 总 数 为 一 相 对 常 数 袁 绎 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 ( ) - 原 当 血 HCO 3 下 降 时 袁 必 有 血 Cl 升 高 曰 反 之 袁 正 好 相 反 袁 59

60 鲍 庆 晗 等 : 氯 的 研 究 进 展 及 其 在 家 禽 营 养 中 的 作 用 专 题 论 述 即 低 氯 性 代 谢 性 碱 中 毒 袁 高 氯 性 代 谢 性 酸 中 毒 遥 原 垣 盂 血 Cl 变 化 与 血 K 变 化 密 切 相 关 遥 高 氯 性 代 谢 垣 性 酸 中 毒 时 伴 有 高 K 血 症 曰 低 氯 性 代 谢 性 碱 中 毒 时 伴 垣 有 低 K 血 症 遥 原 同 时 Cl 通 过 调 节 机 体 的 酸 碱 平 衡 袁 从 而 保 证 细 胞 内 正 负 电 荷 数 相 等 袁 维 持 稳 定 的 渗 透 压 袁 影 响 水 在 细 胞 内 外 之 间 的 流 动 方 向 袁 维 持 正 常 的 血 溶 量 遥 在 体 液 各 部 分 中 袁 离 子 组 成 存 在 很 大 的 差 别 袁 这 说 明 机 体 对 其 实 行 主 动 调 节 与 控 制 遥 分 子 通 过 半 渗 透 的 细 胞 膜 的 简 单 扩 散 袁 维 持 着 细 胞 内 液 和 细 胞 外 液 的 离 子 平 衡 遥 在 细 胞 膜 上 袁 主 要 的 主 动 运 输 复 合 物 之 一 垣 垣 是 Na -K - 三 磷 酸 腺 苷 酶 渊 即 Na-K 泵 冤 袁 这 种 蛋 白 质 垣 垣 复 合 物 将 Na 从 细 胞 内 转 运 至 细 胞 外 以 交 换 K 袁 调 整 日 粮 中 阴 阳 离 子 至 平 衡 曰 肾 脏 通 过 改 变 肾 小 球 滤 过 速 垣 垣 原 度 和 部 分 离 子 的 重 吸 收 作 用 来 调 节 机 体 Na 尧 K 尧 Cl 的 含 量 遥 3 氯 离 子 与 日 粮 阴 阳 离 子 平 衡 尧 酸 碱 平 衡 的 关 系 日 粮 阴 阳 离 子 平 衡 渊 DCAB 冤 是 指 日 粮 中 每 千 克 干 垣 垣 物 质 所 含 主 要 阳 离 子 渊 Na 垣 K 垣 Ca 2 垣 垣 Mg 2 垣 冤 毫 摩 尔 与 主 原 要 阴 离 子 渊 Cl 垣 S 2-3 原 垣 PO 4 冤 毫 摩 尔 之 差 遥 许 多 学 者 对 离 子 原 平 衡 的 表 示 方 法 存 在 分 歧 袁 Cl 在 各 种 表 示 方 法 中 的 作 用 也 发 生 了 相 应 的 变 化 ( 见 表 1) 遥 表 1 日 粮 电 解 质 平 衡 的 表 示 方 法 项 目 日 粮 电 解 质 平 衡 未 测 定 阴 离 子 阳 离 子 与 阴 离 子 的 当 量 比 酸 碱 毫 当 量 阳 阴 离 子 差 其 它 方 法 计 算 公 式 DEB=Na + +K + -Cl - DUA=Na + +K + +Ca 2+ +Mg 2+ -Cl SO 4 -H 2PO HPO 4 C/A=(Na + +K + +Ca 2+ +Mg 2+ )/(Cl SO 4 -H 2PO HPO 4 ) Meq=(Na + +K + +Ca 2+ )-(Cl SO 4 ) CAD=(Na + +K + )-(Cl - +S 2- ) Na/Cl 袁 Cl/(Na + K) 或 (K + Cl)/Na 适 用 动 物 各 种 动 物 各 种 动 物 鸡 鸡 奶 牛 鸡 资 料 来 源 Mongin 袁 1981 Patience 等 袁 1987 Mellieret 等 袁 1966 Summers 袁 1996 Harris 等 袁 1996 呙 于 明 等 袁 1997 Mongin 渊 1981 冤 认 为 袁 Ca 尧 P 尧 Mg 尧 S 的 主 要 作 用 不 是 参 与 酸 碱 平 衡 的 调 节 袁 将 日 粮 阴 阳 离 子 平 衡 简 化 成 垣 垣 原 渊 Na 垣 K 原 Cl 冤 meq/kg 袁 又 称 日 粮 电 解 质 平 衡 袁 目 前 这 种 表 达 式 最 为 简 洁 和 常 用 遥 在 电 解 质 的 平 衡 表 达 式 垣 垣 中 袁 氯 离 子 作 为 唯 一 的 阴 离 子 中 和 Na 尧 K 的 碱 性 作 用 袁 从 而 保 持 细 胞 的 电 中 性 和 维 持 机 体 的 酸 碱 平 衡 遥 生 理 体 液 中 的 酸 碱 平 衡 对 于 维 持 动 物 的 正 常 生 理 活 渊 Na + +K + -Cl - 冤 在 155 耀 300 meq/kg 范 围 内 袁 肉 鸡 体 重 和 饲 料 转 化 率 均 无 大 的 差 异 袁 并 发 现 获 得 最 大 体 增 重 所 需 要 的 渊 Na + +K + -Cl - 冤 量 为 215 meq/kg 袁 而 当 日 粮 含 钙 1.38 豫 时 袁 174 meq/kg 的 渊 Na + +K + -Cl - 冤 就 可 使 体 重 达 到 最 大 遥 Murakami 等 渊 2001 冤 经 研 究 发 现 袁 42 耀 56 日 龄 肉 鸡 的 钠 离 子 需 要 量 为 0.15% 袁 而 氯 离 子 的 需 要 量 则 不 高 动 和 最 佳 的 生 产 性 能 十 分 重 要 袁 因 此 袁 氯 离 子 可 以 通 于 0.2% 遥 Pesti 等 (1999) 研 究 发 现 袁 为 得 到 最 大 的 增 过 影 响 动 物 机 体 的 酸 碱 平 衡 状 态 对 动 物 的 生 产 活 动 重 和 最 佳 的 饲 料 转 化 率 袁 日 粮 中 氯 化 钠 的 添 加 量 为 产 生 影 响 遥 0.4%( 钠 :0.16% 曰 氯 :0.24%) 遥 Rondon 等 (2000) 研 究 表 4 氯 在 家 禽 生 产 中 的 作 用 明 袁 1 耀 7 日 龄 肉 鸡 达 到 最 大 体 增 重 所 需 的 钠 离 子 和 氯 4 援 1 氯 对 家 禽 生 产 性 能 的 影 响 作 为 影 响 动 物 生 产 性 能 的 主 要 因 素 之 一 袁 日 粮 电 离 子 分 别 为 0.26% 和 0.29% 袁 最 佳 饲 料 转 化 率 所 需 的 钠 离 子 和 氯 离 子 分 别 为 0.29% 和 0.28% 遥 Murakami 等 解 质 平 衡 状 况 与 动 物 的 生 产 性 能 密 切 相 关 遥 NRC 渊 1994 冤 给 出 生 长 肉 鸡 的 钠 和 氯 需 要 量 的 推 荐 值 均 为 0.15 豫 遥 Mongin 渊 1981 冤 报 道 袁 当 鸡 日 粮 (Na + +K + -Cl - ) 为 250 meq/kg 时 袁 动 物 生 长 性 能 最 佳 遥 霍 启 光 等 渊 1992 冤 (2001) 对 21 耀 42 日 龄 肉 鸡 的 钠 离 子 和 氯 离 子 的 需 要 量 进 行 了 研 究 袁 结 果 表 明 袁 钠 离 子 的 需 要 量 为 0.15% 袁 而 氯 离 子 的 需 要 量 为 0.23% 袁 肉 鸡 最 佳 生 长 性 能 的 日 粮 DEB 值 为 249 耀 261 meq/kg 遥 通 过 调 整 氯 离 子 水 平 的 试 验 发 现 袁 当 饲 粮 中 钠 离 子 水 平 为 0.15% 时, 氯 离 子 水 平 分 别 为 0.15% 尧 0.30% 尧 4 援 2 氯 对 家 禽 氨 基 酸 代 谢 的 影 响 日 粮 中 氯 的 含 量 会 影 响 动 物 对 氨 基 酸 的 吸 收 和 0.45% 尧 0.60% 袁 产 蛋 鸡 的 各 项 生 产 指 标 和 蛋 壳 品 质 指 标 均 无 显 著 差 异 渊 P 跃 0.05 冤 遥 Karunajeewa 等 渊 1986 尧 1988 冤 试 验 表 明 袁 在 日 粮 中 的 Na + 尧 K + 尧 Cl - 满 足 动 物 最 低 需 要 的 情 况 下 袁 (Na + +K + - Cl - ) 在 150 耀 300 meq/kg 范 围 内 不 显 著 影 响 1 耀 21 日 龄 肉 鸡 的 生 长 遥 Hulan 等 渊 1987 冤 的 试 验 也 表 明 袁 肉 鸡 日 粮 代 谢 袁 研 究 主 要 集 中 在 家 禽 体 内 赖 氨 酸 与 精 氨 酸 的 拮 抗 作 用 遥 二 者 的 拮 抗 表 现 为 日 粮 中 赖 氨 酸 水 平 过 高 会 提 高 肉 仔 鸡 对 精 氨 酸 的 需 要 量 ( 见 表 2) 遥 其 机 制 为 院 一 方 面 赖 氨 酸 原 精 氨 酸 有 共 同 的 吸 收 与 转 运 部 位 曰 另 一 方 面 过 高 的 赖 氨 酸 水 平 会 增 强 肾 脏 中 精 氨 酸 酶 的 活 性 袁 导 致 精 氨 酸 分 解 增 强 遥 60

61 专 题 论 述 鲍 庆 晗 等 : 氯 的 研 究 进 展 及 其 在 家 禽 营 养 中 的 作 用 表 2 日 粮 中 氯 离 子 对 肉 仔 鸡 日 粮 中 赖 氨 酸 - 精 氨 酸 拮 抗 作 用 的 影 响 赖 氨 酸 渊 豫 冤 精 氨 酸 渊 豫 冤 豫 Cl 日 增 重 1.0 豫 Cl 豫 Cl 豫 Cl 料 重 比 1.0 豫 Cl 豫 Cl 注 院 资 料 来 自 J.Anin,Sci. 渊 1990 冤 遥 Riley Jr. 等 (1989) 报 道 袁 赖 氨 酸 尧 精 氨 酸 在 小 肠 被 吸 收 的 最 适 ph 值 为 6.0 曰 日 粮 高 氯 (0.89 豫 ) 比 高 钾 (1.81 豫 ) 更 能 提 高 小 肠 对 赖 氨 酸 的 吸 收 ( 对 照 日 粮 含 Na 豫 尧 K0.389 豫 尧 Cl 豫 ) 袁 日 粮 单 价 离 子 的 平 衡 对 精 氨 酸 吸 收 氯 影 响 不 明 显 遥 高 氯 提 高 小 肠 对 赖 氨 酸 的 吸 收 可 能 就 是 高 水 平 氯 会 加 剧 赖 氨 酸 尧 精 氨 酸 拮 抗 的 原 因 遥 总 而 言 之 袁 过 量 赖 氨 酸 增 加 了 组 织 中 赖 氨 酸 的 浓 度 袁 降 低 了 组 织 中 精 氨 酸 浓 度 袁 从 而 引 起 鸡 增 重 速 度 明 显 下 降 遥 虽 然 目 前 氯 离 子 与 碱 性 氨 基 酸 之 间 的 互 作 关 系 还 不 清 楚 袁 但 可 从 钠 尧 钾 和 氯 对 酸 碱 平 衡 的 影 响 方 面 得 到 解 释 遥 4 援 3 氯 对 家 禽 产 蛋 率 和 蛋 壳 质 量 的 影 响 蛋 壳 形 成 是 一 个 产 酸 的 过 程 袁 蛋 鸡 血 液 碱 贮 增 高 则 蛋 壳 质 量 提 高 遥 日 粮 中 含 有 过 量 的 氯 会 严 重 降 低 蛋 鸡 进 食 量 尧 产 蛋 性 能 和 蛋 壳 品 质 袁 使 蛋 壳 的 强 度 和 厚 度 均 显 著 降 低 遥 食 入 高 Na 渊 0.52% 冤 尧 低 Cl 渊 0.12% 冤 的 日 粮 时 袁 鸡 采 食 量 减 少 袁 产 蛋 率 降 低 袁 但 蛋 的 比 重 和 壳 厚 增 大 遥 日 粮 含 Cl 过 高 袁 不 利 于 蛋 壳 钙 化 遥 许 多 学 者 就 能 否 通 过 调 整 日 粮 (Na + +K + -Cl - ) 来 改 善 蛋 鸡 的 产 蛋 能 力 和 蛋 壳 质 量 方 面 作 了 大 量 研 究 遥 Hughes(1988) 观 察 到 DEB 过 低 (8 和 33 meq/kg) 或 过 高 渊 319 和 418 meq/kg 冤 都 会 降 低 蛋 鸡 的 进 食 量 和 产 蛋 水 平 曰 当 DEB 在 150 meq/kg 以 上 时 袁 随 DEB 上 升 袁 血 原 液 的 ph 值 和 HCO 3 浓 度 上 升 袁 蛋 壳 厚 度 也 上 升 遥 在 养 鸭 方 面 袁 朴 香 淑 等 渊 1994 冤 用 DEB 分 别 为 165 尧 200 尧 225 和 250 meq/kg 的 日 粮 饲 喂 50 周 龄 伊 莎 蛋 鸭 袁 发 现 夏 季 日 粮 中 DEB 在 200 耀 225 meq/kg 为 宜 遥 王 安 等 渊 2005 冤 研 究 了 在 高 温 条 件 下 渊 32 依 2 冤 益 袁 笼 养 产 蛋 鸭 日 粮 DEB 对 其 相 关 指 标 的 影 响 袁 根 据 产 蛋 率 尧 破 蛋 率 尧 原 蛋 壳 厚 度 尧 血 液 ph 值 和 HCO 3 浓 度 等 各 项 指 标 可 以 认 为 院 高 温 条 件 下 袁 笼 养 产 蛋 鸭 日 粮 适 宜 DEB 应 该 为 250 耀 300 meq/kg 遥 4 援 4 氯 对 家 禽 腿 病 的 影 响 肉 鸡 和 火 鸡 的 腿 疾 与 日 粮 中 氯 离 子 浓 度 过 高 有 关 遥 日 粮 中 以 氨 基 酸 盐 酸 盐 和 氯 化 钙 形 式 存 在 的 氯 化 物 含 量 过 高 会 降 低 鸡 骨 中 灰 分 含 量 遥 Hulan 等 渊 1987 冤 表 明 袁 日 粮 中 Na 尧 K 含 量 影 响 肉 鸡 胫 骨 发 育 不 良 渊 TD 冤 的 发 生 率 袁 但 这 还 与 日 粮 中 Ca 尧 Cl 水 平 相 关 遥 日 粮 Ca 尧 Na 或 K 含 量 升 高 袁 TD 发 生 率 下 降 曰 在 日 粮 Na 水 平 较 低 时 袁 只 有 日 粮 K 和 Cl 含 量 均 高 时 才 有 降 低 TD 的 作 用 遥 当 日 粮 Cl 的 含 量 较 高 (0.36 豫 ) 时 袁 日 粮 中 高 水 平 可 利 用 磷 (0.65 豫 ) 会 导 致 肉 仔 鸡 TD 发 生 率 显 著 提 高 (Lilburn 等 袁 1989) 遥 Halley 等 (1987) 研 究 表 明 袁 日 粮 阴 离 子 含 量 升 高 袁 肉 仔 鸡 血 液 ph 值 趋 于 下 降 曰 磷 添 加 水 原 平 过 高 会 降 低 血 液 HCO 3 和 碱 超 值 曰 血 液 碱 超 值 与 TD 发 生 率 呈 现 显 著 负 相 关 袁 日 粮 中 氯 离 子 浓 度 过 高 直 接 导 致 了 肉 鸡 胫 骨 软 骨 发 育 不 良 遥 另 外 一 些 研 究 者 也 报 道 袁 日 粮 中 氯 离 子 浓 度 过 高 时 袁 胫 骨 软 骨 发 育 不 良 导 致 的 腿 疾 就 增 多 渊 Suveur 等 袁 1974 曰 Veltmann 等 袁 1981 曰 Edwards 袁 1984 冤 遥 氯 离 子 浓 度 过 高 会 使 饲 料 效 率 变 差 袁 使 胫 骨 软 骨 发 育 不 良 的 发 生 率 增 高 遥 佟 建 明 等 渊 1993 冤 研 究 了 日 粮 中 氯 尧 镁 水 平 对 肉 仔 鸡 胫 骨 软 骨 发 育 异 常 和 生 产 性 能 的 影 响 遥 研 究 结 果 表 明 袁 肉 仔 鸡 饲 用 高 水 平 的 氯 离 子 时 袁 血 液 中 的 氯 离 子 浓 度 和 腿 病 发 生 率 都 显 著 升 高 袁 而 血 液 和 胫 骨 中 钠 和 钾 的 含 量 降 低 遥 饲 粮 中 氯 离 子 浓 度 影 响 肉 仔 鸡 胫 骨 软 骨 症 的 作 用 机 制 可 能 是 多 方 面 的 袁 尚 无 定 论 袁 但 是 有 几 点 值 得 考 虑 院 淤 酸 碱 平 衡 影 响 钙 的 代 谢 途 径 袁 如 血 浆 钙 和 游 离 钙 的 结 合 曰 于 在 长 期 代 谢 性 酸 中 毒 条 件 下 袁 哺 乳 动 物 血 液 ph 值 较 低, 骨 组 织 重 吸 收 增 加, 导 致 了 骨 密 度 降 低 (Whiting 等,1981), 血 浆 Ca 2+ 水 平 上 升 (Ching,1989), 尿 Ca 排 泄 增 加 袁 Ca 平 衡 降 低 (Patience 等 袁 1997) 遥 进 一 步 的 研 究 表 明 袁 由 Cl - 过 量 添 加 渊 NH 4 Cl 冤 引 起 的 代 谢 性 酸 中 毒, 损 伤 了 鼠 渊 Lee 等 袁 1977 冤 尧 鸡 渊 uvenr 等 袁 1977 冤 尧 猫 渊 Ching 等 袁 1989 冤 肾 脏 形 成 1,25-(OH) 2 -VD 3 的 能 力 袁 从 而 降 低 了 Ca 的 吸 收 和 利 用 袁 影 响 骨 的 形 成 遥 4 援 5 氯 对 家 禽 粪 便 含 水 量 的 影 响 家 禽 的 饮 水 量 依 赖 于 盐 的 摄 入 量 遥 日 粮 Ca 尧 K 含 量 升 高 会 增 大 家 禽 的 饮 水 量 和 粪 便 的 含 水 量 遥 Hulan HW(1987) 报 道 袁 Cl 供 给 量 高 也 会 使 鸡 粪 便 中 含 水 量 增 大 袁 不 过 依 赖 于 日 粮 钙 的 含 量 袁 高 Cl 可 缓 和 高 钙 导 61

62 鲍 庆 晗 等 : 氯 的 研 究 进 展 及 其 在 家 禽 营 养 中 的 作 用 专 题 论 述 致 的 湿 便 或 拉 稀 遥 5 小 结 氯 与 家 禽 生 产 间 存 在 密 切 关 系 袁 它 对 酸 碱 平 衡 的 影 响 已 基 本 取 得 共 识 袁 但 对 营 养 物 质 消 化 率 尧 氨 基 酸 代 谢 的 作 用 还 存 在 异 议 袁 其 作 用 机 制 也 不 十 分 清 楚 遥 氯 对 家 禽 体 内 酸 碱 平 衡 影 响 到 什 么 程 度 尚 需 进 一 步 研 究 遥 尤 其 值 得 一 提 的 是 袁 目 前 的 研 究 过 分 注 重 电 解 质 平 衡 的 整 体 效 果 袁 缺 乏 对 单 一 元 素 的 深 入 研 究 遥 彻 底 揭 示 Na 尧 K 尧 Cl 等 元 素 在 动 物 体 内 的 作 用 机 制 将 更 有 利 于 日 粮 电 解 质 平 衡 理 论 的 进 一 步 发 展 袁 同 时 也 将 为 科 学 的 畜 禽 饲 养 提 供 参 考 遥 参 考 文 献 1 唐 湘 芳, 张 宏 福, 夏 中 生. 我 国 常 见 典 型 仔 猪 日 粮 系 酸 力 和 电 解 质 平 衡 水 平 的 调 查 研 究 [J]. 动 物 营 养 学 报,2007,19(2):163 耀 李 德 发. 猪 的 营 养 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 科 学 技 术 出 版 社, 冷 向 军, 王 康 宁. 猪 营 养 中 的 离 子 平 衡 与 酸 碱 平 衡 [J]. 养 猪,1999 (1):2 耀 4 4 林 映 才, 蒋 宗 勇. 仔 猪 饲 粮 中 电 解 质 平 衡 的 研 究 [J]. 中 国 畜 牧 杂 志, 1996,32(2):37 耀 39 5 呙 于 明. 家 禽 营 养 与 饲 料 [M]. 中 国 农 业 大 学 出 版 社, 陈 海 燕. 饲 粮 离 子 平 衡 对 动 物 生 产 性 能 的 影 响 [J]. 中 国 畜 牧 杂 志, 1999,35(4):53 耀 54 7 何 建, 周 安 国. 电 解 质 平 衡 与 猪 的 营 养 [J]. 饲 料 博 览,1999,11(6):6 耀 8 8 胡 明, 卢 德 勋, 牛 文 艺, 等. 动 物 日 粮 阴 阳 离 子 平 衡 技 术 及 研 究 现 状 [J]. 动 物 营 养 学 报,2000,12(4):8 耀 12 9 霍 启 光, 林 理 真, 孙 万 岭. 日 粮 氯 离 子 水 平 对 产 蛋 鸡 的 影 响 [C]// 张 子 仪. 中 国 动 物 营 养 研 究 进 展. 天 津 : 天 津 科 技 翻 译 出 版 公 司, 黄 瑞 林, 谭 支 良, 陈 福 华. 日 粮 阴 阳 离 子 平 衡 对 生 长 猪 营 养 物 质 消 化 代 谢 的 影 响 [J]. 中 国 饲 料,2000(3):11 耀 伍 喜 林, 杨 凤. 离 子 平 衡 的 营 养 学 原 理 及 其 在 畜 禽 生 产 中 的 应 用 [J]. 贵 州 大 学 学 报,2002,21(3):208 耀 伍 喜 林, 杨 凤. 离 子 平 衡 的 营 养 学 原 理 及 其 在 畜 禽 生 产 中 的 应 用 ( 续 )[J]. 贵 州 大 学 学 报,2002,21(4):291 耀 陈 杰. 家 畜 生 理 学 [M]. 中 国 农 业 大 学 出 版 社, 郑 世 峰. 笼 养 蛋 鸭 夏 季 开 产 日 粮 电 解 质 平 衡 调 节 的 研 究 [C]. 东 北 农 业 大 学 学 位 论 文, 冷 向 军, 王 康 宁, 杨 凤, 等. 盐 酸 对 早 期 断 奶 仔 猪 生 长 性 能 和 体 内 酸 碱 平 衡 的 影 响 [J]. 饲 料 博 览,2000(9):10 耀 李 鉴 轩. 家 畜 生 理 学 [M]. 西 宁 : 青 海 人 民 出 版 社, 韩 志 钧, 胡 成 进, 黄 志 锋, 等. 血 气 酸 碱 分 析 [M]. 沈 阳 : 辽 宁 科 学 出 版 社, 耀 杨 秀 平. 动 物 生 理 学 [M]. 北 京 : 高 等 教 育 出 版 社, 耀 汪 尧 春, 周 毓 平, 呙 于 明, 等. 日 粮 不 同 阴 阳 离 子 对 21 日 龄 肉 仔 鸡 血 液 酸 碱 平 衡 和 胫 骨 软 骨 发 育 不 良 的 影 响 [J]. 畜 牧 兽 医 学 报, 1999,30(3):211 耀 Britton WM. 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Sodium and chloride requirements of growing broiler chickens (twenty-one to fouty-two days of age) fed corn-soybean diets [J]. Poult. Sci., 2001,80:289 耀 Mushtaq M, Sarwar H, Nawaz M, et al. Effect and interactions of dietary sodium and chloride on broiler starter perfprmance (hatch 原 ing to twenty-eight days of age) under subtropical summer condi 原 tions[j]. Poultry Science, 2005, 84:1 716 耀 National Research Council. Nutrient requirements of Poultry. 8th rev. ed. National Academy Press, Washington, DC., Oviedor-Rondon E O,Murakami AE,Martins E N. Sodium and chloride requirements of young broiler chickens fed corn-soybean diets (one to twenty-one days of age) [J]. Poultry Science,2001,80 (5):529 耀 Patience RE, et al. Effect of dietary electrolyte balance on growth and acid-base status and performance in pigs[j].j.nutr., 1987,120: 579 耀 Rondon EOO,Murakami AE,Furlan AC. 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63 问 题 探 讨 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 圆 8 卷 第 20 期 摄 食 调 控 的 神 经 内 分 泌 机 制 研 究 进 展 曹 德 瑞 邹 晓 庭 摄 食 调 控 是 一 个 极 其 复 杂 的 过 程, 总 的 来 说, 主 要 取 决 于 机 体 能 量 的 需 要 遥 动 物 的 能 量 储 存 是 相 对 稳 定 的 遥 动 物 体 首 先 感 觉 并 整 合 关 于 营 养 状 况 的 复 杂 而 矛 盾 的 信 号 袁 然 后 发 出 信 号 调 节 能 量 平 衡 遥 参 与 摄 食 调 控 的 因 素 有 许 多 袁 多 种 神 经 递 质 和 激 素 能 影 响 摄 食 行 为 袁 这 些 递 质 和 激 素 间 又 有 相 互 作 用 遥 多 个 中 枢 部 位 包 括 经 典 的 下 丘 脑 尧 大 脑 皮 层 和 边 缘 前 脑 袁 以 及 最 近 提 出 的 在 机 体 的 躯 体 原 内 脏 整 合 中 发 挥 重 要 作 用 的 小 脑 均 参 与 摄 食 信 息 的 整 合 遥 在 将 外 周 摄 食 信 号 传 入 脑 袁 以 及 将 中 枢 摄 食 整 合 信 号 传 出 外 周 的 过 程 中 袁 迷 走 神 经 起 重 要 作 用 ( 张 月 萍 等 袁 2001) 遥 另 外 袁 外 界 因 素 袁 如 食 物 的 味 道 袁 甚 至 环 境 中 的 大 气 状 况 都 会 影 响 摄 食 活 动 遥 这 些 因 素 构 成 了 摄 食 调 控 的 神 经 内 分 泌 网 络 遥 号 遥 血 液 中 瘦 素 的 浓 度 与 体 脂 之 间 存 在 一 定 的 关 系 袁 瘦 素 有 很 长 的 半 衰 期 袁 这 些 特 点 都 与 脂 衡 理 论 相 符 合 遥 外 周 或 中 枢 给 予 瘦 素 能 降 低 啮 齿 动 物 采 食 和 体 重 袁 同 时 提 高 能 量 消 耗 遥 徐 淑 静 等 渊 1999 冤 研 究 显 示 袁 在 脑 室 内 给 予 瘦 素 可 剂 量 依 赖 性 的 减 少 大 鼠 摄 食 量 遥 低 剂 量 瘦 素 (1 耀 10 pg) 即 可 抑 制 对 葡 萄 糖 敏 感 的 肝 迷 走 神 经 传 入 纤 维 放 电 袁 刺 激 支 配 脂 肪 组 织 的 交 感 神 经 元 放 电 遥 将 瘦 素 微 电 泳 注 射 到 麻 醉 大 鼠 下 丘 脑 LHA 和 VMH 中 袁 使 LHA 的 糖 敏 和 非 糖 敏 神 经 元 显 著 抑 制 袁 VMH 中 的 大 多 数 糖 敏 神 经 元 显 著 兴 奋 遥 膜 片 钳 试 验 垣 垣 进 一 步 证 实, 瘦 素 可 以 激 活 Na 和 K 通 道 袁 使 这 些 神 经 元 去 极 化 遥 瘦 素 能 抑 制 摄 食 亢 进 性 神 经 元, 而 促 进 摄 食 抑 制 性 神 经 元 遥 1 下 丘 脑 摄 食 中 枢 早 期 的 损 伤 和 刺 激 试 验 产 生 了 野 双 中 枢 冶 学 说 院 下 2.2 胆 囊 收 缩 素 (CCK) CCK 广 泛 分 布 于 胃 肠 道 和 脑 组 织 中, 是 抑 制 摄 食 丘 脑 腹 内 侧 核 (VMH) 为 饱 中 枢 袁 下 丘 脑 外 侧 区 (LHA) 为 摄 食 中 枢 (Vettor 等 袁 2002) 遥 双 中 枢 实 际 上 是 由 一 些 分 散 的 神 经 通 路 组 成 袁 在 这 些 神 经 通 路 中 特 异 性 的 下 丘 脑 核 团 形 成 一 个 更 为 复 杂 尧 系 统 性 的 神 经 网 络 遥 这 些 神 经 核 产 生 和 分 泌 多 种 神 经 递 质 和 神 经 调 节 因 子 袁 参 与 下 丘 脑 的 食 欲 调 控 遥 下 丘 脑 接 收 和 整 合 一 些 神 经 和 体 液 输 入 信 号 袁 从 而 能 够 在 不 同 的 能 量 平 衡 情 况 下 协 调 摄 食 和 能 量 消 耗 遥 近 年 来 袁 越 来 越 多 的 证 据 表 明 野 双 中 枢 冶 学 说 是 一 个 过 于 简 单 的 概 念 袁 事 实 上 袁 中 枢 多 个 部 位 袁 如 大 脑 皮 层 尧 边 缘 前 脑 尧 纹 状 体 等 均 参 与 了 摄 食 调 控 遥 作 用 最 强 的 肽 类 激 素 遥 外 周 和 中 枢 给 予 CCK 能 产 生 相 似 的 饱 感 作 用, 说 明 CCK 可 能 通 过 中 枢 和 外 周 两 种 途 径 发 挥 抑 制 摄 食 的 生 物 学 效 应 遥 CCK 的 抑 制 摄 食 效 应 被 认 为 主 要 由 CCK-A 受 体 介 导 渊 Wang L 等,2000 冤 遥 CCK-A 受 体 主 要 存 在 于 外 周 部 位 袁 但 最 近 的 免 疫 组 化 研 究 表 明 袁 CCK-A 受 体 在 脑 组 织 中 也 广 泛 存 在 渊 Fink H 等 袁 1998 冤 遥 CCK 不 能 透 过 血 脑 屏 障 袁 胃 肠 道 中 分 泌 的 CCK 影 响 脑 内 神 经 元 活 动 的 机 制 还 不 十 分 清 楚 遥 有 研 究 表 明 袁 CCK 在 脑 内 和 血 清 中 的 浓 度 显 著 相 关, 在 膈 下 切 断 迷 走 神 经 胃 支 可 减 弱 外 周 给 予 CCK 产 生 的 抑 制 效 应, 外 周 给 予 CCK 可 激 活 多 个 脑 区 的 C- 2 与 摄 食 调 节 有 关 的 神 经 递 质 和 激 素 fos 表 达 渊 Mnnikes H 等,1997 冤, 因 此, 估 测 外 周 CCK 信 2.1 瘦 素 (leptin) 瘦 素 是 脂 肪 细 胞 分 泌 的 一 种 激 素, 通 过 血 脑 屏 号 是 经 迷 走 神 经 传 递 到 较 高 级 中 枢 渊 包 括 LHA 尧 杏 仁 核 等 处 冤 而 发 挥 抑 食 效 应 的 遥 障 袁 发 出 脂 肪 储 存 饱 和 信 号 袁 随 之 触 发 摄 食 减 少 和 能 量 消 耗 增 加 的 生 理 过 程 袁 是 重 要 的 摄 食 调 节 外 周 信 2.3 去 甲 肾 上 腺 素 (NE) NE 是 参 与 摄 食 调 控 的 经 典 神 经 递 质 渊 Wellmam P J 袁 2000 冤 袁 将 NE 晶 粒 通 过 导 管 置 于 大 鼠 的 LHA 袁 可 引 起 大 鼠 剂 量 依 赖 性 的 摄 食 增 加 遥 将 NE 放 置 到 LHA 前 曹 德 瑞, 浙 江 大 学 饲 料 科 学 研 究 所,310029, 杭 州 市 秋 涛 北 路 164 号 邹 晓 庭, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 预 先 静 注 肾 上 腺 素 能 阻 断 剂 可 完 全 阻 断 NE 引 起 的 摄 食 效 应 遥 药 理 性 阻 断 突 触 小 泡 对 NE 的 重 摄 取 或 促 进 突 触 小 泡 释 放 NE 袁 都 发 现 饱 食 的 大 鼠 能 进 一 步 摄 食 袁 从 而 证 明 内 源 性 NE 也 具 有 外 源 性 NE 的 作 用 遥 63

64 曹 德 瑞 等 : 摄 食 调 控 的 神 经 内 分 泌 机 制 研 究 进 展 问 题 探 讨 Harrison JK 等 渊 1991 冤 研 究 认 为 袁 NE 增 加 动 物 摄 食 袁 是 通 过 葬 受 体 起 作 用 的 袁 如 NE 与 H 受 体 结 合 袁 则 动 物 摄 食 减 少 遥 因 此 袁 NE 作 用 于 下 丘 脑 的 不 同 部 位 或 与 不 同 的 受 体 结 合 对 动 物 摄 食 的 影 响 是 不 同 的 遥 丘 脑 后 区 遥 何 天 培 渊 2000 冤 在 大 鼠 脑 室 注 射 食 素 尧 神 经 肽 Y 后 发 现,orexin-A 可 持 续 刺 激 摄 食 袁 orexin-b 对 摄 食 的 促 进 作 用 具 有 偶 然 性 遥 这 两 种 肽 的 增 食 作 用 都 显 著 小 于 神 经 肽 Y 袁 禁 食 48 h 后 袁 LHA 中 的 orexin-a 2.4 神 经 肽 Y 尧 糖 皮 质 激 素 和 胰 岛 素 神 经 肽 是 联 系 机 体 感 受 器 和 效 应 器 的 一 个 重 要 和 orexin-b 的 浓 度 都 表 现 出 增 加 的 趋 势 遥 但 其 它 脑 区 中 的 orexins 含 量 则 显 著 下 降 袁 表 明 它 们 作 为 一 种 神 信 号 渊 傅 茂 等 袁 1999 冤 遥 它 产 生 于 下 丘 脑 弓 状 核 袁 并 通 过 轴 突 转 运 到 室 旁 核 遥 脑 室 注 射 神 经 肽 Y 可 显 著 增 加 动 物 的 摄 食 量 袁 并 抑 制 交 感 神 经 活 性 和 热 量 产 生 袁 增 加 体 重 遥 中 枢 持 续 注 入 神 经 肽 Y 可 使 啮 齿 类 动 物 产 生 特 征 性 的 夜 间 阵 发 性 进 食 行 为, 这 种 行 为 与 正 常 大 鼠 的 进 食 行 为 非 常 相 似, 提 示 正 常 大 鼠 的 夜 间 阵 发 性 进 食 经 递 质 或 调 质 通 过 与 神 经 网 络 的 相 互 作 用 参 与 摄 食 调 控 渊 Nambu T 等 袁 1999 冤 遥 原 位 杂 交 组 织 化 学 研 究 表 明 袁 orexin 前 体 的 基 因 表 达 在 ob/ob 和 db/db 小 鼠 中 显 著 减 少 袁 而 神 经 肽 Y 基 因 的 表 达 在 ob/ob 和 db/db 小 鼠 的 弓 状 核 中 则 显 著 增 加 袁 表 明 orexin 和 神 经 肽 Y 对 基 因 型 肥 胖 小 鼠 的 调 控 机 制 是 不 同 的 遥 行 为 是 神 经 肽 Y 释 放 所 引 起 的 遥 将 ODNs( 磷 酸 二 酯 寡 聚 脱 氧 核 苷 酸 ) 显 微 注 入 下 丘 脑 弓 状 核 中, 发 现 能 减 弱 2.7 黑 素 皮 质 素 (MC 曰 ACTH/MSH) 黑 素 皮 质 素 类 肽 参 与 摄 食 和 能 量 的 调 节 袁 在 能 量 与 神 经 肽 Y 相 关 的 动 物 进 食 活 动 遥 但 要 想 完 全 阻 碍 神 经 肽 Y 在 进 食 活 动 中 的 作 用, 则 必 须 长 期 抑 制 神 经 肽 Y 的 基 因 表 达 渊 Kalra PS 袁 2000 冤 袁 然 而 神 经 肽 Y 基 因 缺 失 的 动 物 仍 可 表 现 正 常 的 摄 食 行 为 及 储 脂 能 力 遥 许 多 研 究 表 明 袁 糖 皮 质 激 素 尧 胰 岛 素 和 神 经 肽 Y 在 促 进 动 物 摄 食 方 面 有 显 著 的 相 关 性 遥 Wisialowski T 等 渊 2000 冤 研 究 显 示 袁 脑 室 注 射 神 经 肽 Y 可 显 著 增 加 大 鼠 血 浆 胰 岛 素 水 平 袁 而 肾 上 腺 切 除 的 大 鼠 则 无 此 效 应 遥 同 时 发 现 神 经 肽 Y 受 体 在 肾 上 腺 切 除 的 大 鼠 VMH 中 的 表 达 显 著 下 降 袁 而 在 室 旁 核 和 弓 状 核 的 表 达 不 受 内 环 境 稳 定 中 起 中 心 通 道 的 作 用 遥 它 们 主 要 由 leptin 激 活 袁 包 括 agouti 相 关 肽 (AGRP) 曰 a- 促 黑 激 素 (a-msh) 及 MC-3 尧 MC-4 两 种 受 体 遥 兴 奋 性 配 基 a-msh 和 抑 制 性 配 基 AGRP 的 比 率 与 黑 素 皮 质 素 神 经 元 在 调 节 摄 食 和 能 量 平 衡 中 的 作 用 密 切 相 关 遥 AGRP 可 抑 制 MC 原 4 活 性 袁 拮 抗 a-msh 对 MC 原 4 的 激 动 效 应 袁 使 动 物 表 现 肥 胖 遥 瘦 素 水 平 升 高 袁 诱 导 弓 状 核 中 a-msh 前 体 POMC 表 达 袁 使 a-msh 轴 突 分 泌 增 加 袁 激 活 MC 原 4 受 体 袁 抑 制 动 物 摄 食 袁 脂 肪 组 织 减 少 袁 继 而 瘦 素 水 平 下 降 袁 构 成 一 个 反 馈 调 节 遥 影 响 遥 这 一 结 果 说 明 了 这 三 者 之 间 的 关 系 袁 提 示 中 枢 给 予 神 经 肽 Y 导 致 胰 岛 素 释 放 增 多 袁 糖 皮 质 激 素 的 作 2.8 ghrelin ghrelin 是 目 前 研 究 发 现 的 唯 一 一 个 外 周 分 泌 的 用 在 神 经 肽 Y 引 起 的 胰 岛 素 释 放 机 制 中 是 必 需 的 袁 该 机 制 尤 其 与 VMN 神 经 元 关 系 密 切 遥 能 促 进 动 物 食 欲 的 激 素 遥 ghrelin 是 由 胃 尧 肠 尧 胰 腺 合 成 的 一 种 肽, 是 促 生 长 激 素 受 体 (GSH 原 R) 的 内 源 性 配 体, 羟 色 胺 (5-HT) 许 多 试 验 表 明 袁 5-HT 能 够 抑 制 摄 食 遥 外 周 或 下 丘 具 有 促 进 生 长 激 素 释 放, 增 加 食 欲 尧 脂 肪 积 聚 和 体 重, 调 节 能 量 代 谢 平 衡 等 功 能 遥 在 禁 食 期 间, 血 液 中 ghre 鄄 脑 注 入 5-HT 可 使 动 物 摄 食 量 和 摄 食 次 数 显 著 减 少 遥 中 枢 神 经 系 统 5-HT 受 一 些 外 周 饱 食 因 子 ( 如 CCK 尧 肠 抑 素 ) 血 浓 度 的 影 响 遥 5-HT 与 瘦 素 抑 制 摄 食 的 作 用 机 制 是 院 5-HT 是 短 期 作 用 饱 信 号 整 合 网 络 的 一 部 分, 而 瘦 素 是 长 期 能 量 保 存 的 一 个 激 素 信 使, 两 者 都 调 节 神 经 肽 Y 的 活 动, 后 者 或 许 是 前 两 者 影 响 食 欲 表 达 的 一 个 共 同 输 出 通 路 渊 Halford JC 和 Blundell JE 袁 2000 冤 遥 lin 浓 度 上 升, 采 食 后 其 浓 度 迅 速 下 降 遥 虽 然 最 近 的 研 究 结 果 表 明, 循 环 中 的 ghrelin 浓 度 不 能 预 测 采 食 的 间 隔 时 间 (Callahan 等 袁 2004), 但 ghrelin 可 能 涉 及 到 采 食 的 开 始 (Cummings 等 袁 2001), 血 液 中 ghrelin 浓 度 可 能 主 要 受 食 入 能 量 多 少 的 影 响, 但 ghrelin 准 确 的 分 泌 调 节 机 制 还 不 清 楚 遥 脑 室 内 投 予 ghrelin, 弓 状 核 神 经 肽 Y/AgRP mrna 表 达 上 升, 它 还 可 以 活 化 单 独 分 离 出 2.6 食 素 (orexin) 食 素 是 一 组 新 发 现 的 神 经 肽 袁 主 要 功 能 是 刺 激 摄 来 的 弓 状 核 神 经 肽 Y 神 经 元, 因 此 认 为 神 经 肽 Y 神 经 元 介 导 了 ghrelin 的 作 用 遥 ghrelin 活 化 神 经 肽 Y 神 经 食 渊 Mondal MS 等 袁 2000 冤 遥 食 素 神 经 元 主 要 分 布 于 下 丘 脑 内 袁 包 括 下 丘 脑 外 侧 区 尧 背 内 侧 核 尧 弯 隆 周 区 和 下 元, 而 瘦 素 则 抑 制 神 经 肽 Y 神 经 元, 两 者 通 过 神 经 肽 Y 神 经 元 这 一 共 同 标 靶 进 行 相 反 地 调 节 作 用 遥 关 于 两 者 64

65 问 题 探 讨 曹 德 瑞 等 : 摄 食 调 控 的 神 经 内 分 泌 机 制 研 究 进 展 的 反 向 关 系, 也 可 以 从 肥 胖 者 血 中 瘦 素 浓 度 增 加 而 ghrelin 浓 度 降 低 这 种 激 素 水 平 的 负 相 关 性 看 出 遥 2.9 乙 酰 胆 碱 (ACh) 放 置 碳 酰 胆 碱 (CARB) 于 LHA 后 袁 鼠 摄 食 增 加 遥 注 射 CARB 到 鼠 尧 猫 尧 羊 和 兔 的 乳 头 体 尧 视 前 区 尧 膈 和 海 马 等 结 构 中 袁 都 可 引 起 摄 食 活 动 袁 向 膈 区 内 注 射 阿 托 品 则 抑 制 摄 食 渊 金 国 章 袁 1999 冤 袁 这 些 研 究 结 果 表 明 袁 ACh 可 以 通 过 边 缘 系 统 的 许 多 结 构 袁 促 进 动 物 摄 食 遥 3 迷 走 神 经 在 摄 食 调 控 中 的 作 用 迷 走 神 经 是 将 由 食 物 成 分 接 触 胃 肠 道 所 引 起 的 进 食 相 关 信 号 传 递 到 中 枢 神 经 系 统 中 介 导 摄 食 与 消 化 行 为 的 部 位 袁 对 摄 食 行 为 进 行 调 节 (Schwartz GJ 袁 2000) 遥 目 前 认 为 袁 胃 肠 激 素 是 提 供 信 息 给 中 枢 神 经 网 络 以 终 止 摄 食 的 主 要 外 周 机 制 袁 迷 走 神 经 在 这 一 过 程 中 起 重 要 的 调 节 作 用 遥 切 断 迷 走 神 经 抵 消 某 些 胃 肠 激 素 的 饱 效 应 袁 刺 激 迷 走 神 经 则 能 引 起 某 些 胃 肠 激 素 的 释 放 渊 Bray GA 袁 2000 冤 遥 这 一 现 象 说 明 迷 走 神 经 不 仅 介 导 胃 肠 激 素 的 生 物 学 效 应 袁 也 控 制 胃 肠 激 素 的 释 放 遥 电 生 理 学 研 究 提 供 了 许 多 迷 走 神 经 与 下 丘 脑 之 间 相 互 联 系 的 直 接 证 据 遥 刺 激 迷 走 神 经 胃 支 能 诱 发 LHA 尧 VMH 和 PVN 神 经 元 放 电, 胃 迷 走 神 经 前 干 和 后 干 的 传 入 在 下 丘 脑 神 经 元 上 存 在 会 聚 (Yuan CS 等,1992) 遥 另 一 方 面 袁 刺 激 LHA 和 VMH 能 引 起 大 鼠 胃 迷 走 神 经 传 出 性 活 动 增 加, 其 中 LHA 使 胃 运 动 增 强 袁 VMH 使 胃 运 动 减 弱 渊 李 在 琉 等 袁 1983 冤 遥 这 些 研 究 证 实 袁 迷 走 神 经 向 食 欲 中 枢 传 递 来 自 胃 肠 道 和 外 周 血 的 相 关 信 息 袁 而 食 欲 中 枢 也 通 过 迷 走 神 经 传 出 性 活 动 影 响 摄 食 行 为 遥 4 结 语 影 响 摄 食 的 多 种 神 经 递 质 和 激 素 在 摄 食 控 制 中 存 在 复 杂 的 相 互 联 系, 共 同 发 挥 作 用, 调 节 摄 食 行 为 遥 但 摄 食 调 控 的 机 制 是 一 个 复 杂 的 生 理 生 化 过 程, 有 许 多 问 题 还 需 要 进 一 步 研 究 遥 虽 然 现 在 通 过 外 源 添 加 一 些 活 性 因 子 调 节 激 素 或 相 关 神 经 递 质 来 调 节 动 物 采 食 量 成 为 动 物 营 养 学 上 的 研 究 热 点, 但 目 前 能 产 生 显 著 促 食 欲 效 果 的 产 品 还 不 多, 今 后 应 加 强 这 方 面 的 研 究 遥 参 考 文 献 1 傅 茂, 李 秀 均. 神 经 肽 Y 在 物 质 代 谢 和 神 经 内 分 泌 调 节 中 的 作 用 [J]. 中 华 内 分 泌 代 谢 杂 志,1999,4 (15):169~17 2 何 天 培. 肥 胖 研 究 的 新 发 现 增 食 因 子 [J]. 生 理 科 学 进 展,2000, 31(1):74~75 3 金 国 章. 胆 碱 能 神 经 系 统 [M]. 基 础 神 经 药 理 学 ( 第 二 版 ) 科 学 出 版 社, ~ 李 在 琉, 中 山 沃. 刺 激 饱 中 枢 和 摄 食 中 枢 对 迷 走 神 经 胃 支 传 出 性 活 动 和 胃 运 动 的 影 响 [J]. 中 华 消 化 杂 志,1983(3):247~249 5 徐 淑 静, 徐 明 彤, 傅 祖 植. 肥 胖 基 因 和 瘦 素 [J]. 中 华 内 分 泌 代 谢 杂 志,1999,15(2):155~157 6 张 月 萍, 王 建 军. 摄 食 控 制 的 神 经 体 液 机 制 研 究 进 展 [J]. 中 国 神 经 科 学 杂 志,2001(4):350~353 7 Bray GA. Afferent signals regulating food intake[j]. Proc. Nutr. Soc., 2000,59(3):373~384 8 Callahan HS,Cummings DE,Pepe MS,et a1 援 Postprandial suppres 原 sion of plasma ghrelin level isproportional to ingested caloric load but does not predict intermeal interval in humans [J] 援 J. Clin.Endocrinol Metab.,2004,89:1 319 耀 Cummings DE,Purnell JQ,et a1 援 Plasma ghrelin levels after diet induced weight loss or gastric bypass surgery [J]. N. Engl. J. Med., 2002,346:1 623 耀 Fink H,Res A,Voits M,et al.major biobogical actions of CCK:a crit 原 ical evaluation of research findings[j]. Exp. Brain Res., 1998, 123: 77 耀 Harrison JK, Parson WR. Molecular characterization of adrencep 原 tors[j].trends in Pharmacol. Sci.,1991,12:62 耀 Halford JC,Blundell JE.Separate systems for serotonin and leptin in appetite control[j]. Ann. Med., 2000,32(3):222 耀 Kalra P S. Use of Antisense Oligodeoxynucleotides to Study the Physiological Functions of Neuropeptide Y [J].Methods,2000,22(3): 239 耀 Mnnikes H, Lauer G, Arnold R. Peripheral administration of chole 原 cystokinin activates c-fos expression in the locus coeruleus/subco 原 erleus nucleus vagal complex and paraventriular nucleus via cap 原 saicin-sensitive vagal afferents and CCK-receptors in the rat[j]. Brain Res., 1997,770(1/2):277 耀 Mondal MS, Nakazato M,Mizukami K, et al. Orexins(hypocretins): novel hypothalamic peptides with divergent functions [J]. Biochem. Cell Biol., 2000,78:299 耀 Nambu T,Sakurai T,Mizukami K,et al.distribution of orexin neurons in the adult rat brain[j].brain Res.,1999,827(1/2):243 耀 Schwartz GJ.The role of gastrointestinal vagal afferents in the con 原 trol of food intake:current prospects[j].nutrition,2000,16:866 耀 Vettor R,Fabris R,Pagano C 援 Neuroendocrine regulation of eating behavior[j]. Endocrinol Invest,2002,25:836 耀 Wang L, Barachina MD, Martinez V, et al. Synergistic interaction between CCK and leptin to regulate food intake [J]. Regul. Pept., 2000, 2(1/3):79 耀 Wellmam PJ. Norepinephrine and the control of food intake[j].nu 原 trition, 2000, 16(10): 837 耀 Wisialowski T,Parker R,Preston E,et al.adrenalectomy reduces neuropeptide Y-induced insulin release and NPY receptor expres 原 sor in the rat ventromedial hypothalamus [J]. JChin Invest, 2000, 105:1 253 耀 Yuan CS, Barber WD. Hypothalamic unitary response to gastric vagal input from the proximal stomach[j]. AM J. Physiol.,1992,262: 74 耀 80 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])