前言

人体显微形态学实验 Ⅰ ( 供影像 影技 预防 生工 医实 检验 卫检 护 理 康复 中医 临药等专业用 ) 教学大纲 实验教学管理中心基础医学院组织学与胚胎学教研室细胞生物学及遗传学教研室 2017 年 9 月 1

前 言 1. 随着学校实验教学改革的深入, 将 细胞生物学 和 组织学与胚胎学 实验课合并形成独立实验教学, 称之为 人体显微形态学实验 Ⅰ, 它是基础医学形态学科之一, 其实践性非常强, 主要观察学习正常人体的微细结构, 了解其与功能的相互关系, 同时学习人体发生 发育基本过程, 变化规律以及常见先天性畸形 该门实验课是医学教学中不可缺少的环节 实验课内容结合教材分为绪论 细胞 基本组织观察 器官系统观察以及人体胚胎学等五大部分 该课程为五年制相关医学类专业学生开设 通过观看教学录像 光镜下观察组织切片 多媒体示教讲解, 以及通过电镜图片 胚胎标本和模型观察等直观教学手段, 帮助学生对 细胞生物学 组织学与胚胎学 的基本理论 基本知识加以验证 便于掌握和记忆, 培养学生观察标本 独立思考以及分析问题的能力 先进的多媒体形态学互动教学系统, 可促进学生与教师间的更多交流, 学生可通过完成实验报告, 提高对相关知识的掌握程度以及实验效率和水平, 为后续相关学科打下良好的基础 2. 通过教学, 要求学生达到 :1 能正确识别各种细胞 组织和器官的光镜结构以及主要细胞 组织 器官的超微结构特点, 了解结构与功能的关系 2 掌握人胚早期发育的基本过程以及胚胎附属结构的构造 3 能较熟练地观察 分析显微镜下的细胞 组织 器官的形态结构, 并能用语言 文字和绘图的方式对所观察的结构或者胚胎发生的形态变化进行正确的叙述 4 了解研究组织学与胚胎学常用的技术, 石蜡切片 超薄切片制作的基本原理及过程 3. 本大纲制订依据的教材 使用方法 : 使用汪维伟 王娅兰主编 2

的高等医药院校基础医学实验教学系列教材 人体显微形态学实验, 科学出版社,2008 年第 1 版 在实验课中根据我校形态实验中心提供的组织切片等标本, 合理使用教材中相关部分指导实验 4. 考核办法 : 为充分反映学生平时的学习状况以及学生提出问题 分析问题 解决问题的能力, 考核学生学习的主观能动性, 我们将逐步推行形成性评价考核模式 3

目 录 实验一绪论与上皮组织和固有结缔组织的观察 () 实验二血细胞 软骨与骨组织及骨发生的观察 () 实验三 实验四 实验五 肌肉 神经组织的观察 () 循环系统器官和内分泌腺的观察 () 消化管和消化腺的观察 () 实验六呼吸 泌尿系统器官的观察 () 实验七男 女性生殖系统器官的观察 () 实验八 人胚早期发生实验 () 实验九细胞内 DNA RNAS 显示及细胞膜通透性观察 () 实验十线粒体活体染色及细胞器观察 () 4

实验教学学时数分配表 周次 教学内容 40 学时学时教学方法 1 绪论实习上皮组织 4 实习 固有结缔组织 实习 2 血液 4 实习软骨 骨与骨发生实习 3 肌肉组织 4 实习神经组织实习 4 循环系统 4 实习内分泌系统实习 5 消化管 4 实习消化腺实习 6 呼吸系统 4 实习泌尿系统实习 7 男性生殖系统 4 实习女性生殖系统实习 8 人胚早期发生 4 实习 4 综合实验 9 10 细胞内 DNA RNAS 显示及细胞膜通透性观察 线粒体活体染色及细胞器观察 4 综合实验 5

实验一 绪论与上皮组织和结缔组织的观察 一 目的要求 l. 掌握光学显微镜的结构与使用 2. 了解 H.E 染色石蜡切片的制作 3. 理解切面与立体的关系, 形态结构与功能的关系 4. 理解被覆上皮的共性和分类原则 5. 掌握几种常见被覆上皮的形态特点及分布 6. 熟悉纤毛 微绒毛 各种细胞连接的超微结构 7. 掌握疏松结缔组织的几种细胞的光 电镜形态特点 8. 比较疏松结缔组织 致密结缔组织 脂肪组织和网状组织的结构和形态异同 二 教学内容 1. 录像 1)H.E 染色石蜡切片制作 2) 切面与立体的关系 3) 上皮组织 4) 固有结缔组织 2. 小课讲解 1) 人体显微形态学实验 特点与学习方法 2) 实验室规则和要求 3) 光学显微镜的结构与使用 4) 形态学多媒体互动系统的组成与使用 3. 学生操作 : 1) 光学显微镜的结构与使用 6

2) 形态学多媒体互动系统的使用 4. 光镜观察 : 1) 单层柱状上皮 : 小肠黏膜单层柱状上皮的形态特点, 理解被覆上皮的共性, 以及切面与立体的关系 2) 假复层纤毛柱状上皮 : 气管的假复层纤毛柱状上皮的形态特点, 理解形态结构与功能的关系 3) 复层扁平上皮 : 不角化的复层扁平上皮的形态特点, 理解上皮的的更新 形态结构与功能的关系 4) 疏松结缔组织 : 小肠切片中粘膜下层的疏松结缔组织的结构及镜下形态特点 5) 致密结缔组织 : 人皮肤真皮的致密结缔组织, 组织结构及镜下形态特点 6) 脂肪组织 : 人皮下组织的脂肪组织, 组织结构及镜下形态特点 7) 浆细胞 : 人静止期乳腺中的浆细胞的光镜形态 8) 巨噬细胞 : 肠系膜铺片或切片 ( 活体腹腔注射墨汁或卡红 ), 观察细胞的吞噬功能 9) 肥大细胞 : 皮下结缔组织铺片, 特殊染色显示细胞内颗粒 5. 电镜图片观察 : 1) 纤毛 : 观察纤毛的超微结构, 侧重横断面上 9 组双联微管和中央的一对微管的特点 2) 微绒毛 : 观察微绒毛的超微结构, 侧重横断面上中央有微丝的特点 3) 细胞连接 : 侧面重紧密连接 桥粒 缝隙连接的超微结构特点 4) 浆细胞 : 浆细胞超微结构, 理解分泌蛋白质细胞的光镜形态与其 7

超微结构的关系 5) 胶原原纤维 : 胶原原纤维的周期性横纹三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 光学显微镜的结构与使用 2. 多媒体形态学互动系统的使用 3. 组织与细胞在 H.E 染色石蜡切片中的光学显微镜下着色特点 4. 单层柱状上皮 复层扁平上皮 假复层纤毛柱状上皮的形态特点 5. 纤毛 微绒毛的超微结构特点 实验二血细胞 软骨与骨组织及骨发生的观察 一 目的要求 1. 掌握周围血中各种有形成分的形态特点 2. 了解血涂片的制作方法和血细胞分类计数方法 3. 掌握油镜的使用 4. 掌握透明软骨的组织结构 5. 比较弹性软骨和纤维软骨的组织结构 6. 掌握骨组织的结构特点 7. 掌握骨细胞 成骨细胞和破骨细胞的光镜形态特点 二 教学内容 l. 录像 : 血液 软骨组织 骨组织 8

2. 讲解 : 1) 油镜的使用 2) 血涂片的制作和使用 3. 光镜观察 : 1) 血涂片 : 观察红细胞 血小板 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜硷性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞的形态特点 2) 透明软骨 : 软骨基质 软骨细胞 软骨陷窝 软骨囊 同源细胞群 软骨膜 3) 弹性软骨 : 弹性纤维 软骨细胞 软骨陷窝 软骨囊 同源细胞群 4) 骨切片 : 内环骨板 外环骨板 骨单位 ( 哈氏系统 ) 间骨板 骨陷窝 骨小管 中央管 穿通管 4. 电镜图片观察 : 几种有粒白细胞的超微结构特点 : 中性粒细胞, 嗜酸性粒细胞, 嗜碱性粒细胞 三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 能在光镜下初步识别各种血细胞, 特别是五种白细胞 2. 区分透明软骨和弹性软骨 3. 骨组织的结构 4. 成骨细胞 破骨细胞 9

实验三肌肉 神经组织的观察 一 目的要求 l. 掌握骨骼肌纤维光镜下纵 横断面的形态结构特点 2. 掌握心肌纤维光镜下纵 横断面的形态结构特点 3. 掌握平滑肌纤维光镜下纵 横断面的形态结构特点 4. 掌握骨骼肌肌原纤维以及心肌的电镜结构特点 5. 掌握神经元的形态结构 6. 掌握突触的形态结构 7. 掌握有髓神经纤维的形态结构 8. 掌握神经末梢的形态结构 9. 了解神经胶质细胞和神经的结构特点 二 教学内容 l. 录像 : 肌肉组织, 神经组织 2. 小课讲授 : 1) 骨骼肌的肌肉结构 2) 神经的结构 3. 光镜观察 : 1) 骨骼肌 : 纵 横断面的形态特点, 横纹 2) 心肌 : 纵 横断面的形态特点, 闰盘 3) 平滑肌 : 纵 横断面的形态特点 4) 神经元 : 主要观察胞体 ( 细胞核 尼氏体 ) 突起( 轴丘 ) 5) 周围有髓神经纤维 : 主要观察郎氏结 髓鞘 轴索 神经膜细胞 ( 施万细胞 ) 神经纤维束纵 横切面的结构 6) 触觉小体 : 主要观察其形态结构和分布特点 7) 环层小体 : 主要观察其形态结构和分布特点 10

8) 运动终板 : 主要观察其形态结构和分布特点 4. 电镜图片观察 : 1) 骨骼肌的肌原纤维, 肌节的组成和结构特点 2) 闰盘 : 观察闰盘的细胞连接 3) 化学性突触 : 主要观察突触前成份, 突触间隙和突触后成份以及突触小泡 4) 有髓神经纤维 : 髓鞘三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 能根据肌纤维的形态, 核的位置和数量, 横纹的有无等形态特征来区别三种肌纤维 2. 肌原纤维上肌节的组成 3. 能够在光镜下识别神经元 有髓神经纤维 触觉小体 环层小体 运动终板的光镜形态结构 4. 掌握突触的电镜形态结构 实验四 循环系统器官和内分泌腺的观察 一 目的要求 l. 掌握大 中 小动脉的结构特点 2. 熟悉中静脉 小静脉的结构特点 3. 掌握毛细血管的光 电镜结构 4. 掌握心脏的组织结构 5. 通过与动脉比较了解静脉和淋巴管的结构特点 11

6. 掌握内分泌腺的结构共性 7. 掌握甲状腺的结构特点 8. 掌握肾上腺的结构特点 9. 掌握脑垂体的结构特点 二 教学内容 l. 录像 : 循环系统, 内分泌系统 2. 光镜观察 : 1) 中动脉与中静脉 : 主要观察中动脉内膜 ( 内皮 内皮下层 内弹性膜 ) 中动脉中膜 ( 数十层环行平滑肌纤维 ) 中动脉外膜 ( 不连续的外弹性膜 ) 主要观察中静脉与中动脉三层膜的结构差异 2) 大动脉 : 主要观察大动脉内皮 内皮下层 中膜 ( 弹性窗膜 ) 外膜 ( 营养小血管与神经 ) 3) 小动脉与小静脉 : 主要观察小动脉腔小壁厚 形态规则 三层膜分界较清楚的特点, 中膜由数层环行平滑肌纤维构成 主要观察小静脉腔大壁薄 形态不规则 管壁三层结构不易分辨的特点 4) 毛细血管 : 主要观察管径 管壁 (1-2 个内皮细胞核凸向管腔 ) 5) 心脏 : 主要观察心内膜 ( 内皮 内皮下层 心内膜下层 ), 主要观察蒲肯野纤维的结构特点 观察心肌膜 心外膜的结构特点 6) 甲状腺 : 主要观察滤泡 滤泡旁细胞 7) 肾上腺 : 主要观察皮质 ( 球状带 束状带 网状带 ), 髓质 ( 嗜铬细胞 ), 中央静脉 交感神经节细胞 3. 示教 : 脑垂体 : 主要观察远侧部 ( 嗜酸性细胞 嗜碱性细胞 嫌色细胞 ), 神经部 ( 无髓神经纤维 赫令氏体 ) 4. 电镜图片观察 : 1) 连续毛细血管 : 内皮细胞连续, 细胞间可见细胞连接, 胞质内可 12

见许多吞饮小泡 2) 有孔毛细血管 : 内皮较薄 窗孔, 基膜完整 三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 能够掌握中动脉与中静脉, 小动脉与小静脉的结构特征 2. 连续毛细血管与有孔毛细血管的区别, 3. 掌握心脏的结构特点, 掌握蒲肯野纤维的结构特点 4. 能够掌握甲状腺 肾上腺 脑垂体的组织结构特征 5. 识别滤泡旁细胞 嗜酸性细胞 嗜碱性细胞和嫌色细胞的形态特点 实验五 消化管和消化腺的观察 一 目的要求 1. 掌握消化管壁的一般结构 2. 掌握食道 胃 小肠 大肠尾的结构特点 3. 了解阑尾的结构特点 4. 掌握浆液性腺胞 粘液性腺泡和混合性腺泡的结构特点. 5. 掌握胰 肝的结构 二 教学内容 1. 录像 : 消化系统 2. 光镜观察 : 1) 食道 : 主要观察粘膜层复层扁平上皮 固有层 粘膜肌的结构特点 粘膜下层及粘液性食道腺, 内环 外纵肌层间的肌间神经丛 13

2) 胃 : 主要观察粘膜层的分泌型单层柱状上皮 胃小凹 胃底腺 ( 主细胞 壁细胞 ), 粘膜与部分粘膜下层一起突出形成的皱襞 3) 小肠 : 主要观察粘膜层的吸收型单层柱状上皮 肠绒毛和肠腺, 中央乳糜管 十二指肠粘膜下层的十二指肠腺 理解皱襞 肠绒毛和微绒毛构成小肠的三级放大 4) 大肠 : 在与小肠比较的基础上掌握大肠的结构特点 肠腺发达, 上皮中杯状细胞特别多 5) 胰 : 纯浆液性胰腺腺泡的外分泌部, 泡心细胞, 闰管和胰岛 ( 内分泌部 ) 外分泌部的导管 6) 肝 : 肝小叶的四个部分 : 中央静脉 肝细胞索 肝血窦 胆小管的形态结构和比邻关系 肝细胞 小叶下静脉的形态特点 门管区的小叶间动脉, 小叶间静脉, 小叶间胆管 门管区与肝小叶比邻关系 3. 示教 : 1) 阑尾 : 固有膜及粘膜下层充满弥散淋巴组织和淋巴小结的结构特点 2) 舌下腺 : 观察浆液性腺胞 粘液性腺泡和混合性腺泡的结构特点 4. 电镜图片观察 : 1) 主细胞 : 主要观察核周胞质内有大量的粗面内质网, 核上方有发达的高尔基复合体及许多圆形的酶原颗粒 2) 壁细胞 : 主要观察细胞内分泌小管 3) 肝血窦 : 血窦壁的组成特点和窦周隙 三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 14

1. 鉴别食道 胃 小肠 大肠 阑尾的结构特征 2. 胃壁细胞 主细胞的光电镜形态 3. 胃小凹 小肠绒毛的结构特征 4. 掌握肝 胰 舌下腺的组织结构特点 5. 辨认胰岛 胰腺腺泡 ( 泡心细胞 ) 6. 肝小叶和门管区的结构特点 实验六 呼吸 泌尿系统器官的观察 一 目的要求 1. 掌握气管的结构特点 2. 掌握肺的结构, 包括导气部 呼吸部各段的结构特点 3. 掌握肾单位各部分和集合管分布位置及结构特点 4. 了解输尿管的基本结构 二 教学内容 1. 录像 : 呼吸系统, 泌尿系统 2. 小课讲解 : 输尿管的结构 3. 光镜观察 : 1) 气管 : 主要观察粘膜 粘膜下层及外膜的结构特点, 以及气管腺的特点 2) 肺 : 分清导气部和呼吸部 观察细支气管 终末细支气管 呼吸性细支气管 肺泡管 肺泡囊和肺泡的结构特点, 以及肺泡隔, 尘细胞 3) 肾 : 主要观察肾的皮质 髓质和髓放线 皮质内的肾小体 血管球 肾小囊 血管极 近曲小管 远曲小管 致密斑和球外系膜细胞 髓质内的集合管 细段 15

4) 输尿管 : 粘膜层 肌层和外膜的结构特点, 变移上皮的结构特点 3. 电镜图片观察 : 1) 气血屏障 : 组成及层次 2) 滤过屏障 : 组成和超微结构 三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 掌握气管和肺的组织结构特征 2. 辨认导气部和呼吸部的要点 3. 识别呼吸部各段的结构特征 4. 掌握肾和输尿管的特征性结构 5. 辨认肾小体 近曲小管 远曲小管 集合管 致密斑等重要结构 实验七 男 女性生殖系统器官的观察 一 目的要求 1. 掌握睾丸生精小管的组织结构以及间质细胞的形态特征 2. 了解附睾 输精管的组织结构特点 3. 认识卵巢 增生期子宫 分泌期子宫和输卵管等器官 4. 掌握卵巢中各种卵泡和黄体的形态结构 5. 掌握和比较增生期与分泌期子宫内膜结构特点 6. 了解输卵管的结构 二 教学内容 1. 录像 : 男性生殖系统, 女性生殖系统 2. 小课讲解 : 16

1) 输精管的结构 2) 输卵管的结构 : 管壁分粘膜层 肌层和外膜层, 粘膜特征 3. 光镜观察切片 : 1) 睾丸 : 主要观察生精小管的支持细胞和各级生精细胞 ( 精原细胞 初级精母细胞 次级精母细胞 精子细胞和精子 ), 以及睾丸间质细胞的形态特点 2) 输精管 : 粘膜 肌层和外膜及假复层柱状上皮的形态特点 3) 卵巢 : 主要观察卵巢的表面上皮和白膜, 实质的皮质和髓质 皮质内处于不同发育阶段的卵泡与黄体 重点识别原始卵泡 初级卵泡 次级卵泡 闭锁卵泡 间质腺以及黄体的结构 4) 子宫 ( 增生期 ): 主要观察子宫的 3 层组织结构, 重点观察子宫内膜的子宫内膜的厚度 单层柱状上皮 子宫腺 螺旋动脉和基质细胞 5) 子宫 ( 分泌期 ): 与增生期比较, 重点观察子宫内膜的厚度 子宫腺 螺旋动脉的结构和数量以及基质水肿 6) 输卵管 : 输卵管壶腹部管壁的 3 层, 粘膜形成许多高度分支皱襞的重要特征 三 教学方法结合光学显微镜 组织切片 电镜照片 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 掌握睾丸和输精管的特征性结构 2. 辨认生精小管 支持细胞核 睾丸间质细胞 3. 认识卵巢 增生期子宫 分泌期子宫和输卵管等器官的组织结构特征 17

4. 识别卵巢中各种卵泡和黄体的形态结构 5. 认识子宫内膜的子宫腺 螺旋动脉等结构 实验八 人胚早期发生实验 一 目的要求 1. 熟悉胚胎学的学习方法 2. 掌握从受精卵到胚泡形成的过程和变化 3. 掌握胚泡植入过程 4. 掌握内细胞群的变化及胚层的形成 5. 掌握滋养层的变化 6. 掌握胎膜的组成与功能 7. 掌握胎盘的结构与功能 8. 掌握胎儿与母体的关系 二 教学内容 1. 录像 : 优生与畸胎 2. 小课讲解 : 胚胎学的学习方法 : 胚胎学的动态形态演变特征, 随时间发生的空间形态变化的概念, 立体的胚胎模型结合教材上模式图来理解演变过程等 3. 胚胎模型的观察和示教 : 1) 早期人胚模型 1 9: 显示从受精卵到胚泡形成, 内细胞群分化及胚盘形成, 滋养层的变化等过程 2) 植入模型 : 显示胚泡逐渐埋入子宫内膜的过程以及植入后的变化 3) 胚盘模型 : 显示三胚层胚盘的结构, 包括原条 原结 脊索 神经沟 体节等结构 18

4) 胚盘的卷褶和圆柱状胚体的形成 5) 胎儿与子宫关系模型 : 显示子宫外形, 子宫壁分层 : 内膜 肌层和外膜, 蜕膜的三部分 : 底蜕膜 包蜕膜和壁蜕膜, 五种胎膜以及胎盘的结构 6) 早期人胚模型 13-15: 显示人胚从受精后 16 天到 22 天左右的变化, 包括三胚层的分化, 胚盘卷折和胚体形成, 尿囊的形成, 体蒂的变化以及鳃弓等结构 4. 标本示教 : 1) 胎盘 : 显示胎儿面和母体面的结构 5. 多媒体教学互动系统胚胎学图片库示教 : 1) 受精的过程 2) 卵裂和胚泡形成 3) 植入的过程 4) 二胚层胚盘的形成 5) 三胚层胚盘的形成 6) 胚盘的卷折 7) 胚层的分化 8)5 种胎膜的形成与演变 9) 胎盘的结构 6. 复习组织切片并进行切片考试三 教学方法结合录像 胚胎模型 标本 多媒体形态学互动系统进行教学, 以学生自己观看 观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 四 重点与难点 1. 人胚早期发生重要事件的时间 过程 结果及意义 19

2. 胎膜的组成 形成及意义 3. 胎盘的结构与功能 实验九 细胞内 DNA RNA 原位显示及 细胞膜通透性观察 一 目的要求 1. 掌握原位显示细胞内 DNA RNA 的方法 2. 掌握细胞膜通透性观察方法 3. 分析并掌握细胞膜选择性通透的原理 二 教学内容 l. 讲解 : 1)DNA RNA 原位显示的原理 2) 蟾蜍处死 血液涂片及染色方法 3) 兔血在等渗溶液中溶血现象观察方法 2. 蟾蜍血涂片的制作和染色 3. 蟾蜍血涂片光镜观察 : 1) 蟾蜍红细胞核 : 被甲基绿染成蓝绿色 2) 蟾蜍红细胞质 : 被哌洛宁染成兰红色 4. 兔血在等渗溶液中溶血现象观察 : 提供 9 种等渗溶液, 分别是等渗的乙醇 甘油 葡萄糖 等渗钠盐和铵盐, 每试管中加入 0.5ml 兔红细胞悬液, 再分别加入 8ml 各种等渗溶液, 观察溶血现象 ( 红细胞悬液变为血红蛋白溶液 ) 并记录溶血时间 5. 实验结果展示及课堂讨论 : 1) 交流 DNA RNA 原位显示的实验效果 2) 列表显示兔血在等渗溶液中溶血时间 20

3) 兔血在等渗溶液中溶血时间顺序及原因分析 三 教学方法 l. 阐述实验原理 :DNA 和 RNA 因聚合程度的不同, 可被甲基绿 哌洛宁混合染液染成不同的颜色,DNA 聚合程度高, 被甲基绿染成蓝绿色 ;RNA 聚合程度低, 被哌洛宁染成红色 2. 低倍镜 高倍镜及油镜下观察, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 3. 兔血在等渗溶液中溶血时间顺序及原因分析, 由教师组织全班各组同学讨论 四 重点与难点 1. 蟾蜍血液涂片及染色 2. 兔血在等渗溶液中溶血现象观察 3. 兔血在等渗溶液中差异溶血时间原因分析 实验十 线粒体活体染色及细胞器的观察 一 目的要求 1. 掌握线粒体活体染色的方法 2. 掌握线粒体 高尔基体 中心体在光学显微镜下的形态结构特征 3. 进一步学习油镜的正确使用 二 教学内容 l. 讲解 : 1) 线粒体活体染色的原理 2) 家兔处死 肝脏组织制片及染色方法 3) 脊神经节切片观察高尔基体 小肠横切片观察线粒体 马蛔虫子宫切片观察中心体的观察方法 21

2. 空气栓塞处死家兔, 打开腹腔, 取兔肝边缘较薄的肝组织一小块, Ringer 氏液的平皿内洗去血液,1/300 詹纳斯绿 B 染液染色 使细胞或细胞群从组织块脱离, 显微镜下观察 3. 小肠横切片低倍镜 高倍镜及油镜下镜观察线粒体 4. 脊神经节切片观察高尔基体 5. 马蛔虫子宫切片低倍镜 高倍镜观察中心体 三 教学方法 l. 阐述实验原理 : 活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法 詹纳斯绿 B 是线垃体的专一性活体染色剂 线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色, 而在周围的细胞质中染料被还原, 成为无色状态 2. 低倍镜 高倍镜及油镜下观察, 以学生自己观察为主, 学生提问, 教师辅导 总结为辅 3. 活体染色与组织切片 H.E 染色比较, 由教师组织全班各组同学讨论 四 重点与难点 1. 家兔肝脏边缘小块组织制片及染色 2. 线粒体形态学观察 3. 细胞分裂与中心体观察 22