FastDigest, 让酶切如此简单 176 种限制性内切酶 5-15 分钟内完全酶切 通用缓冲液, 与下游实验 100% 兼容 使用绿色缓冲液, 酶切后直接上样进行电泳
酶切, 原来如此简单 特点 所有 FastDigest 限制性内切酶在通用缓冲液中均为 100% 的活性 5-15 分钟内完全酶切 酶切后直接进行凝胶电泳 提供 176 种限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 限制性内切酶是为快速 DNA 酶切专门研发的高级限制性内切酶 在 30 多年内切酶的研究中, 我们积累的限制性内切酶生产菌株库是业内最大的菌株库之一 大量可供选择的同裂酶和卓越的生产能力促使这个包含 176 种 FastDigest 限制性内切酶的独特系统的诞生 应用 克隆分析 制备用于克隆的 DNA 片段 PCR 产物酶切 快速 RFLP 基因分型 难切割 DNA 片段的酶切 所有 FastDigest 限制性内切酶在通用的 FastDigest 缓冲液和 FastDigest Green 绿色缓冲液中都具有 100% 活性, 并可在 5-15 分钟内迅速完成酶切 这就使得任意内切酶组合都能够在同一反应管中同时反应, 避免了分步酶切 此外,FastDigest Green 绿色缓冲液兼具上样缓冲液的功能, 可直接将反应物上样凝胶电泳, 操作更为便利 FastDigest 限制性内切酶可用于酶切质粒 基因组 DNA 病毒 DNA 以及 PCR 产物 酶切时间和实验方案已经过实验验证, 每种限制性内切酶及其作用的模板都有相应的酶切时间和实验方案推荐 通用缓冲液与下游实验 100% 兼容 DNA/RNA 修饰酶 在 FastDigest 绿色缓冲液 FastDigest 缓冲液 ( 无色 ) 中的活性 DNA Polymerase I, E.coli 100% Klenow Fragment 100% Klenow Fragment, exo - 100% DNA 修饰酶在 FastDigest 和 FastDigest Green 绿色缓冲液中都具有 100% 活性, 用于下游应用的酶可直接加入酶切反应混合物中, 省去了 DNA 纯化的步骤 T7 DNA Polymerase 100% T4 DNA Ligase* 75 100% Thermo Scientific FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase 100% T4 Polynucleotide Kinase 100% * T4 DNA 连接酶活性需要 0.5mM ATP
通用缓冲液和直接凝胶上样 特点 在通用缓冲液中可使用任意内切酶组合进行双酶切或多酶切 无需连续酶切或更换缓冲液 反应混合物可直接上样凝胶电泳, 节省了上样试剂和加样时间 FastDigest 系列限制性内切酶可完美应用于需要高纯度反应组分 需要稳定性能表现的实验应用, 或应用于简单的反应建立 为了更加方便, 我们研发出了 FastDigest 绿色缓冲液, 其与 FastDigest 无色缓冲液一样, 在 DNA 酶切和下游实验应用中具有相同的高效率 该绿色缓冲液包含一种密度试剂和两种示踪染料, 从而可以将反应混 合物直接上样进行凝胶电泳 蓝色染液在 1% 琼脂糖凝胶中的迁移速度 与 3-5 kb DNA 片段接近, 并在 424 nm 处出现激发峰 ; 黄色染液在 1% 琼脂糖凝胶中的迁移速度稍快于 10 bp 的 DNA 片段, 在 615 nm 处出现 激发峰 所有 FastDigest 限制性内切酶在 FastDigest 绿色缓冲液中均具 有 100% 的活性 对于需要用荧光激发进行酶切产物分析的实验应用 ( 如在紫外光下测 量浓度 ), 我们建议使用无色的 FastDigest 缓冲液 当进行双酶切时, 可节约 2 小时以上的时间 常规限制性内切酶按顺序酶切 FastDigest 限制性内切酶一种反应混合物 1 配制 ApaI 酶切反应体系 ~ 2 分钟 1 2 37 C 孵育酶切 60 分钟 2 3 配制 Xhol 酶切反应体系 > 2 分钟 4 37 C 孵育酶切 60 分钟 只需配制一种反应体系, 包含 FastDigest ApaI 和 FastDigest XhoI ~2 分钟 37 C 孵育酶切 5 分钟 总时间 ~7 分钟 总时间 > 2 小时 高质量, 高性能 和其它 Thermo Scientific 分子生物学酶和试剂盒一样,FastDigest 内切酶的高质量和高性能得益于高要求的生产过程 产品生产于 D 级洁净车间, 其按照欧盟要求及 ISPE 标准经过认证 我们采用严格的质量控制, 确保批间的一致性, 符合 ISO 9001 和 ISO 14001 的标准
在 FastDigest 绿色缓冲液中,5 分钟完成单酶切 双酶切和三重酶切 5 分钟内使用以下酶进行质粒酶切 1: FastDigest EcoRI 2: FastDigest EcoRI 和 FastDigest KpnI 3: FastDigest EcoRI, FastDigest KpnI 和 FastDigest SmaI M: Thermo Scientific GeneRuler Express Ladder C: 未酶切质粒对照 M C 1 2 3 M FastDigest 绿色缓冲液 3 5 kb 含有 FastDigest 绿色缓冲液的反应混合物 : 1: 电泳前, 加入凝胶孔 2: 电泳分离 10 bp 1 2 在 5 15 分钟完成 DNA 酶切 在通用缓冲液中 5-15 分钟内完成单酶切 双酶切或三重酶切 为所有种类的 DNA 模板提供相应的酶切时间 ( 如质粒 DNA,PCR 产物 基因组 DNA) 对任何模板都无需过夜酶切 由于孵育时间缩短, 所以无星号活性 高通量应用的理想选择 FastDigest 快速限制性内切酶和常规限制性内切酶的比较 M C 1 2 3 M C 4 5 6 M 使用 FastDigest 内切酶进行快速酶切, 其结果与使用常规内切酶长时间酶切结果一致 酶切 5 分钟, 使用以下内切酶进行质粒酶切 : 1: FastDigest XhoI, 2: FastDigest ApaI, 3: FastDigest XhoI 和 FastDigest ApaI 酶切 1 小时, 使用以下内切酶进行质粒酶切 : 4: ApaI, 5: XhoI, 6: ApaI (1X Tango buffer, 4-fold excess of ApaI, 1 小时 ) 和 XhoI (2X Tango buffer, 1 小时 ) 按顺序酶切 M: Thermo Scientific GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder ( 货号 : SM1334) C: 未酶切质粒对照
建立 DNA 酶切新标准 旧标准常规限制性内切酶 新标准 FastDigest 限制性内切酶 缓冲液系统多达 20 种 1 种通用缓冲液 双酶切或多酶切反应 受限于缓冲液是否兼容 不受限 所有 176 种酶在通用缓冲液中都具有 100% 活性 酶切时间 1 小时至过夜 5 至 15 分钟 反应产物是否能直接凝胶上样 否 是 与下游应用的兼容性 部分兼容 100% 兼容 星号活性 取决于酶的性质和反应条件 孵育时间短, 不产生星号活性 活性定义 在合适的缓冲液中,1 单位酶 60 分钟切割 1μg Lambda DNA 在 FastDigest 缓冲液中,1μl FastDigest 酶 5 至 15 分钟内切割 1μg 底物 DNA 超过 35 年的限制性内切酶研发经验 Fermentas 成立 发现第一个独特的限制性内切酶,CfrI 克隆第一个限制性内切酶 Eco47II 世界上首次人工合成酶 Eco57MI 和 Nb.Bpu10I 推出 FastDigest 产品线 推出 FastDigest 绿色缓冲液 被 Thermo Fisher Scientific 收购 1975 1977 1985 2001 2006 2009 2010 我们的研发经验 176 种 FastDigest 快速内切酶 >3000 种限制性内切酶生产菌株 拥有 18 种独特的限制性内切酶 >40% 已知限制性内切酶的克隆 >30% 已知限制性内切酶的发现
订购信息 FastDigest AanI 20 FD2064 FastDigest AasI 25 FD1724 FastDigest AatII 50 FD0994 FastDigest Acc65I 100 FD0904 FastDigest AdeI 50 FD1234 FastDigest AjuI 20 FD1954 FastDigest AluI 100 FD0014 FastDigest Alw21I 100 FD0024 FastDigest Alw26I 100 FD0034 FastDigest Alw44I 200 FD0044 FastDigest ApaI 300 FD1414 FastDigest BamHI 800/2,500 FD0054/5 FastDigest BclI 300 FD0724 FastDigest BcnI 200 FD0064 FastDigest BcuI 20/50 FD1253/4 FastDigest BfmI 20 FD1164 FastDigest BfoI 200 FD2184 FastDigest BglI 200 FD0074 FastDigest BglII 100/200 FD0083/4 FastDigest Bme1390I 100 FD1424 FastDigest BmsI 20 FD2124 FastDigest BoxI 100 FD1434 FastDigest BpiI 20 FD1014 FastDigest BplI 20 FD1314 FastDigest Bpu10I 20 FD1184 FastDigest Bpu1102I 50 FD0094 FastDigest BseDI 20 FD1084 FastDigest BseGI 100 FD0874 FastDigest BseJI 200 FD1714 FastDigest BseLI 100 FD1204 FastDigest BseMI 20 FD1264 FastDigest BseMII 20 FD1404 FastDigest BseNI 100 FD0884 FastDigest BseSI 50 FD1444 FastDigest BseXI 20 FD1454 FastDigest Bsh1236I 100 FD0924 FastDigest Bsh1285I 100 FD0894 FastDigest BshNI 300 FD1004 FastDigest BshTI 20 FD1464 FastDigest Bsp119I 200 FD0124 FastDigest Bsp120I 200 FD0134 FastDigest Bsp1407I 50/100 FD0933/4 FastDigest Bsp143I 40 FD0784 FastDigest BspLI 20 FD1154 FastDigest BspOI 20 FD2044 FastDigest BspTI 150 FD0834 FastDigest Bst1107I 100 FD0704 FastDigest BstXI 100 FD1024 FastDigest Bsu15I 50/100 FD0143/4 FastDigest BsuRI 400 FD0154 FastDigest BveI 50 FD1744 FastDigest CaiI 50 FD1394 FastDigest Cfr10I 50 FD0184 FastDigest Cfr13I 100 FD0194 FastDigest CpoI 20 FD0744 FastDigest CseI 20 FD1904 FastDigest CsiI 50 FD2114 FastDigest Csp6I 100 FD0214 FastDigest DpnI 50/100 FD1703/4 FastDigest DraI 200 FD0224 FastDigest Eam1104I 50 FD0234 FastDigest Eam1105I 100 FD0244 FastDigest Ecl136II 100 FD0254 FastDigest Eco105I 50 FD0404 FastDigest Eco130I 200 FD0414 FastDigest Eco147I 100 FD0424 FastDigest Eco31I 50/100 FD0293/4 FastDigest Eco32I 200/400 FD0303/4 FastDigest Eco47I 200 FD0314 FastDigest Eco47III 20 FD0324 FastDigest Eco52I 50 FD0334 FastDigest Eco57I 20 FD0344 FastDigest Eco72I 200 FD0364 FastDigest Eco81I 50 FD0374 FastDigest Eco88I 200 FD0384 FastDigest Eco91I 200 FD0394 FastDigest EcoO109I 200 FD0264 FastDigest EcoRI 800/2,500 FD0274/5 FastDigest EheI 20/50 FD0443/4 FastDigest Esp3I 20 FD0454 FastDigest FaqI 20 FD1814 FastDigest FokI 100 FD2144 FastDigest FspAI 20 FD1664 FastDigest FspBI 50 FD1764 FastDigest GsuI 20 FD0464 FastDigest HhaI 200 FD1854 FastDigest Hin1I 100 FD0474 FastDigest Hin1II 100 FD1834 FastDigest Hin6I 200 FD0484 FastDigest HincII 100 FD0494 FastDigest HindIII 800/2,500 FD0504/5 FastDigest HinfI 400 FD0804 FastDigest HpaII 200 FD0514 FastDigest Hpy8I 20 FD1574 FastDigest HpyF10VI 20 FD1734 FastDigest HpyF3I 50 FD1884 FastDigest KflI 20 FD2164 FastDigest Kpn2I 100 FD0534 FastDigest KpnI 300 FD0524 FastDigest KspAI 50 FD1034 FastDigest LguI 20 FD1934 FastDigest Lsp1109I 100 FD2074 FastDigest MauBI 20 FD2084 FastDigest MbiI 100 FD1274 FastDigest MboI 50 FD0814 FastDigest MboII 50 FD0824 FastDigest MlsI 50 FD1214 FastDigest MluI 100 FD0564 FastDigest MnlI 50 FD1074 FastDigest Mph1103I 100 FD0734 FastDigest MreI 20 FD2024 FastDigest MspI 400 FD0544 FastDigest MssI 100 FD1344 FastDigest MunI 20/50 FD0753/4 FastDigest Mva1269I 50 FD0964 FastDigest MvaI 200 FD0554 FastDigest NcoI 20/100/300 FD0573/4/5 FastDigest NdeI 100/300/1,000 FD0583/4/5 FastDigest NheI 50/100 FD0973/4 FastDigest NmuCI 20 FD1514 FastDigest NotI 20/50/250 FD0593/4/6 FastDigest NsbI 50 FD1224 FastDigest OliI 20 FD1634 FastDigest PacI 25 FD2204 FastDigest PaeI 20 FD0604 FastDigest PagI 50 FD1284 FastDigest PdiI 50 FD1524 FastDigest PdmI 100 FD1534 FastDigest PfeI 50 FD1784 FastDigest Pfl23II 50 FD0854 FastDigest PfoI 20 FD1754 FastDigest Ppu21I 50 FD1974 FastDigest Psp1406I 20 FD0944 FastDigest Psp5II 50 FD0764 FastDigest PspFI 20 FD2224 FastDigest PstI 800/2,500 FD0614/5 FastDigest PsuI 150 FD1554 FastDigest PsyI 100 FD1334 FastDigest PteI 20 FD2134 FastDigest PvuI 20 FD0624 FastDigest PvuII 400 FD0634 FastDigest RruI 100 FD2154 FastDigest RsaI 100 FD1124 FastDigest RseI 20 FD2004 FastDigest SacI 100/200 FD1133/4 FastDigest SalI 200 FD0644 FastDigest SaqAI 50 FD2174 FastDigest SatI 20 FD1644 FastDigest ScaI 100 FD0434 FastDigest SchI 100 FD1374 FastDigest SdaI 20 FD1194 FastDigest SduI 50 FD0654 FastDigest SfaAI 100 FD2094 FastDigest SfiI 150 FD1824 FastDigest SgsI 100 FD1894 FastDigest SmaI 100/200 FD0663/4 FastDigest SmiI 200 FD1244 FastDigest SsiI 20 FD1794 FastDigest SspI 100 FD0774 FastDigest TaaI 20 FD1364 FastDigest TaiI 50 FD1144 FastDigest TaqI 400 FD0674 FastDigest TasI 100 FD1354 FastDigest TatI 20 FD1294 FastDigest TauI 20 FD1654 FastDigest Tru1I 50 FD0984 FastDigest TscAI 100 FD2104 FastDigest Van91I 100 FD0714 FastDigest VspI 200 FD0914 FastDigest XagI 100 FD1304 FastDigest XapI 50/100 FD1383/4 FastDigest XbaI 300/750 FD0684/5 FastDigest XceI 50 FD1474 FastDigest XhoI 400/1,200 FD0694/5 FastDigest XmaJI 20 FD1564 FastDigest XmiI 50 FD1484 更多信息, 欢迎访问 thermofisher.com/fastdigest 免费服务电话 :800 820 8982/400 820 8982 销售服务信箱 :sales.china@thermofisher.com 技术咨询信箱 :LifeScience-CNTS@thermofisher.com 上海办事处电话 :021-61452000 北京办事处电话 :010-84461800 广州办事处电话 :020-38975100 成都办事处电话 :028-65545388 thermofisher.com For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 2016 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.