GC-QqQ-MS使用手册

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鼻董
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1 GC-QqQ/MS 使用手册一仪器基本构成和主要参数 : 自动进样器顶空进样器气相色谱 (GC) 三重四级杆质谱 (QqQ/MS) 图 1:GC-QqQ/MS 整体结构表 1:GC-QqQ 基本参数参数内容指标 GC 型号 Agilent 7890 MS 型号质量精度 Agilent 7000 QqQ 0.1Da 质量范围质量分辨率灵敏度采集方式仪器优势应用方向低分辨 1pg Scan SIM MRM 可选择离子检测目标物定性定量二质谱开关机步骤开机步骤 :

2 1 打开载气及碰撞气钢瓶 (He) 控制阀, 设置分压阀压力至 0.5Mpa 打开另一碰撞气钢瓶 (N2) 控制阀, 设置分压阀压力至 0.15Mpa ( 载气和碰撞气纯度最低为 %) 分压阀设置 Mpa 之间总压阀低于 1Mpa 指示更换氦气图 2: 氦气压力阀设置分压阀设置 0.15Mpa 总压阀低于 1Mpa 指示更换氮气图 3: 氮气压力阀设置 2 打开计算机, 登录进入 Windows 系统

3 3 确认毛细色谱柱已经装好打开 7890GC 7000 质谱仪电源 ( 若 MSD 真空腔内已无负压则应在打开 MSD 电源的同时用手向右侧推前段真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢 ), 涡轮泵开始工作, 等待大约 2min, 仪器自检完毕在桌面双击 7000 图标 ( 数据采集软件图标 ), 进入 Masshunter 数据采集化学工作站界面开机后要注意观察真空泵运行状态观察分子涡轮泵运行状态分子涡轮泵转速 Turbo1 Speed 在 5 分钟内应该达到 95% 以上

4 关机步骤 : 1 在调谐窗口的手动调谐菜单 (Manual tune-vacuum control) 中选择放空 (Vent) 将 GC/MS 接口温度和 GC 柱箱温度设置为环境温度 ( 室温 ) 2 等待大概 15min 左右, 分子涡轮泵转速完全降下来再等待 GC/MS 接口和 GC 柱箱温度小于出现 ready 提示后, 关闭 GC 和 QQQ 电源 4 关闭载气及 QQQ 碰撞气 ( 高纯氮气 ) 三常用消耗品更换步骤 1. 进样针清洗步骤步骤 1: 打开自动进样塔的前盖步骤 2: 卸下自动进样针逆时针旋转后, 上提固定阀卸下进样针安装进样针逆时针手动扳开固定扣步骤 3: 进样针推杆拉出后用蘸水无纺布擦洗表面附着物

5 步骤 4: 进样针反复吸取放出色谱甲醇, 正己烷数次感觉推拉无任何阻力后, 认为清洗完成步骤 5: 按上图逆顺序将自动进样针装回原位置 2. 隔垫更换步骤步骤 1: 取下隔垫固定螺母逆时针旋开绿色隔垫固定螺母步骤 2: 用镊子取下桔色隔垫步骤 3: 换上新桔色隔垫, 顺时针手动拧上绿色隔垫固定螺母切勿将隔垫螺母拧得过紧将造成污染 3. 衬管更换步骤步骤 1: 向前 ( 逆时针 ) 滑动锁定卡口竖直提起隔垫组件并将其提离进样口, 以避免切破或割裂衬管

6 逆时针旋开黄色滑动锁定卡口步骤 2: 用镊子松开密封表面上的 O 形圈用镊子夹住衬管, 将其拉出步骤 3: 用镊子夹住衬管, 将其拉出

7 步骤 4: 将新 O 形圈滑到备用衬管上将衬管放回进样口, 将其推入步骤 5: 将隔垫组件底部的卡口对准插件组件上的插槽, 将卡口按入插槽向后滑动锁定卡口步骤 6: 启动进样口在加热进样口或色谱柱箱前, 先用载气将进样口和色谱柱吹扫 15 分钟步骤 7: 烘烤去除污染物检查是否有漏气 4. 氦气更换步骤当表 1 的压力小于 1Mpa 时, 联系供气商进行更换氦气步骤如下 : 步骤 1: 把减压阀的旋钮逆时针旋松 ( 关闭减压阀 ) 表 2 表 1 总阀减压阀接口减压阀旋钮步骤 2: 顺时针旋动总阀 ( 关闭总阀 )

8 步骤 3: 逆时针旋动, 松开减压阀接口, 将新的一罐氦气以较快速度换上步骤 4: 顺时针旋动, 扳手拧紧减压阀接口步骤 5: 逆时针旋动总阀 ( 打开总阀 ), 检漏液检查总阀和减压阀接口是否漏气步骤 6: 顺时针旋动减压阀旋钮 ( 打开减压阀 ), 至表 2 指针在之间四数据采集软件操作 1. 质谱仪自动调谐操作在仪器控制面板中, 点击调谐图标, 进入调谐窗口在 Autotune 的子窗口内, 选择所安装的离子源类型 ( 标准 EI 源, 高灵敏度 EI 源,CI 源 ) 及保存选项, 点击 Autotune 按钮完成调谐后, 自动打出调谐报告调谐文件存为 atunes.tune.xml 调谐过程完成按此 autune 开始自动调谐

9 2. 检查系统是否存在泄漏空气和水的检查对于仪器常规维护很重要, 要求每隔 2-3 天或者更换仪器上的任何备件后都要首先做的一件事情 Manue control 一栏中点击 AirWaterCheck 执行空气和水检查观察是否存在泄漏 3. 数据采集方法编辑和运行步骤 1: 设置进样口 / 进样类型步骤 2: 设置碰撞池 EPC 流量 (He:2.25ml/min,N2:1.5ml/min)

10 步骤 3:GC 参数设置 A: 注射器参数设定 PreInj 进样前,PostInj- 进样后 ;Volume(ul) 清洗的体积 ;Sample Wash 用样品洗针次数 ; Solvent A Wash 溶剂 A 洗针的次数 ;Solvent B Wash 溶剂 B 洗针的次数 ;Pumps 赶气泡针抽吸次数 B: 分流不分流进样口参数设置

11 点击图标, 进入进样口设定画面点击 Mode 右方的下拉式箭头, 选择进样方式 : 不分流方式 Splitless 或分流方式 Split 在 Heater 框内输入进样口的温度 ( 如 250 ), 然后选中左边的所有方框 ; 选择 Septum Purge Flow Mode 为 Standard, 并输入隔垫吹扫流量 : 如 : 3ml/min 在 PurgeFlowto SplitVent 下边的空白框内输入吹扫流量 ( 如 0.75min 后 60ml/min); 如图所示, 选择分流方式, 则要输入分流比或分流流量 C: 柱温箱温度参数设置进入柱温参数设定在温度框内输入温度, 选中 Oven Temp On 左边的方框 ;Ramp--- 升温阶次 ; /min 升温速率 ;Hold min 保持的时间 ; Equilibration Time 柱子的平衡时间 ( 如 0.5min) 步骤 4: 设置 MS 采集参数 (MRM) A: 在 Instrument control 中, 选择 Instrument 菜单下的 MS parameters 选项, 出现 QQQ 质谱参数设定窗口

12 B: 点击按钮可查看所选调谐文件的详细质谱参数点击按钮选择所需调谐文件, 一般使用自动调谐文件 atunes.tune.xml C: 设定质谱参数设定离子源温度 Source temp 为 230ºC, 电子能 Electron energy 自动设为 -70 ev Run time 前的选择框一般不选 Solvent delay: 溶剂延迟时间 ;Peak width: 峰宽 ;Detector setting: 检测器设定 ; 选 Gain 则使用 Gain factor 调谐参数, 选 Delta EMV, 检测器电压 =autotune 电压 +Delta EMV 步骤 5: 保存方法点击 OK 退出在 Method 下选择 Save method as. 给方法取名然后保存

13 步骤 6: 运行样品, 采集数据 A: 从 Method 菜单下点击 Load Method 调用一个方法 QQQAcqMethod-CE15.m 点击 OK, 确认方法无错误信息 B: 在 Method 菜单中选择 Run Method, 填入 : 操作者姓名文件路径文件名瓶号等样品信息, 点击 OK and Run Method, 运行单个样品

14 C: 在 Sequence 菜单下点击 Edit sequence 编辑一个运行序列, 依次输入样品名称, 瓶号, 方法名, 文件名, 样品类型等相关信息, 点击 OK 确认 D: 从 Sequence 菜单下点击 Run sequence, 在序列运行窗口中依次选中 Full Method, Inject Anyway, Overwrite Existing Data Files 点击 Run Sequence 运行样品序列五数据分析软件操作 1. 打开 MassHunter 定性分析软件并熟悉各项功能打开数据分析软件时, 会自动跳出数据选择窗口, 选择需要打开的数据, 支持同时按住 ctrl 或者 Shift 键一次选择多个或一组数据 :

15 以下为主要功能区简介, 详细使用方法会陆续在后面讲到 : 上图中工具栏的放大后如下图 :

16 A: 色谱图窗口显示按住鼠标右键拉动一段范围, 可以放大谱图点击工具栏图标可恢复满量程调节至满量程调整 x 或 y 轴至满量程放大缩小色谱图 y 轴相关联设定同时显示的色谱图数目选择范围选择峰手动积分 B: 浏览数据点激活 walk chromatogram 按键, 点击色谱图即会在 spectrum preview 窗口显示这个点的质谱图但是这个窗口的质谱图并不会保存如果需要保存, 对谱图右击, 选择 copy to User Spectra( 如下图 ), 则这张复制到 spectrum results 窗口, 并在左侧的数据浏览界面 (Data Navigator )user spectrum 条目下有显示也可以利用键盘的左右键来查看各个数据点的质谱图

17 C: 获得平均质谱图激活 Range Select 按键, 选择一个峰, 从半峰宽选取一个范围, 然后在所选择的范围点击右键, 点击提取质谱图 (extract spectrum) 或者双击左键即可生成某一时间段的平均质谱图

18 D: 质谱图扣背景生成当前背景质谱图 : 先选择合适的基线范围, 然后点击右键选择 Extract Spectrum to Background 即将这段时间的质谱图设为当前背景质谱图生成了质谱图及背景质谱图后, 在要分析的质谱图上点击右键, 选择 Subtract Background Spectrum 即可得到手动扣除背景后的质谱图

19 E: 方法编辑窗口对谱图点击右键, 可进行积分, 生成质谱图, 计算信噪比等各项操作, 但具体参数的编辑是在方法浏览窗口进行的方法浏览栏中的参数可以保存在定性分析方法中 (DA Method) 方法浏览窗口罗列了所有色谱图和质谱图编辑的相关项目 : Chromatogram: 积分 Integrate 平滑 Smooth 过滤质量数 Excluded Mass 计算信噪比 Calculate Signal-to-Noise 生成色谱图 Define Chromatogram Spectrum: 生成质谱图 Extract (MS) 生成二级质谱图 Extract(MS/MS) General: 分析报告 Analysis Report 化合物报告 Compound Report 通用报告选项 Common Report Options 文件打开任务 File Open Actions 提取数据格式 Extraction Data Format Find Compound: 通过解卷积寻找化合物 Find by Chromatogram Deconvolution Identify Compound:

20 2. 全扫描数据的定性分析 A: 积分打开和选择数据文件 Pest200-Scan.D 选择方法浏览中的色谱图菜单中, 根据数据类型选择积分项目进行积分 ( 绿色箭头 ) 如果有必要可是图对色谱图进行平滑根据谱图情况, 进行适度平滑消掉毛刺注意不要过度平滑积分后的色谱峰有填充颜色, 并标示了保留时间在数据浏览栏选择 TIC Scan, 然后点击图标显示积分列表, 并且可以通过在积分表点击右键来添加 / 删除积分列表的列或将积分列表导出为 Excel 格式

21 3. 输出报告选择 General 下面的 Analysis Report, 选择报告要包含的选项, 然后点击绿箭头, 在弹出的窗口中选择要出报告的数据, 指定打印机等选项, 点击 OK 得到报告是否只打印选中的图打印机的规定是否同时打印电子版报告, 设

Ⅰ.7000 型质谱仪概述及工作原理一三重四级杆质谱仪的优点 ( 与单四级杆质谱相比 ) 在高化学背景样品中可以对目标化合物选择性定量在复杂的基体中可以获得更好的信噪比可以达到飞克水平的检测限和定量对某些样品分析的应用能够满足严格的法规限制二仪器结构概述

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